RU2599577C2 - Amides of n-(2-aminopurin-6-yl)-6-aminocaproic acid, having anti-tumour activity and synthesis method thereof - Google Patents

Amides of n-(2-aminopurin-6-yl)-6-aminocaproic acid, having anti-tumour activity and synthesis method thereof Download PDF

Info

Publication number
RU2599577C2
RU2599577C2 RU2015101582/04A RU2015101582A RU2599577C2 RU 2599577 C2 RU2599577 C2 RU 2599577C2 RU 2015101582/04 A RU2015101582/04 A RU 2015101582/04A RU 2015101582 A RU2015101582 A RU 2015101582A RU 2599577 C2 RU2599577 C2 RU 2599577C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
hexanoyl
general formula
compounds
aminocaproic acid
aminopurin
Prior art date
Application number
RU2015101582/04A
Other languages
Russian (ru)
Other versions
RU2015101582A (en
Inventor
Виктор Павлович Краснов
Дмитрий Андреевич Груздев
Галина Львовна Левит
Евгений Николаевич Чулаков
Алексей Юрьевич Вигоров
Валерий Николаевич Даниленко
Вера Васильевна Мусияк
Сергей Анатольевич Вакаров
Мария Григорьевна Алексеева
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт органического синтеза им. И.Я. Постовского Уральского отделения Российской академии наук
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт органического синтеза им. И.Я. Постовского Уральского отделения Российской академии наук filed Critical Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт органического синтеза им. И.Я. Постовского Уральского отделения Российской академии наук
Priority to RU2015101582/04A priority Critical patent/RU2599577C2/en
Publication of RU2015101582A publication Critical patent/RU2015101582A/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2599577C2 publication Critical patent/RU2599577C2/en

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D473/00—Heterocyclic compounds containing purine ring systems
    • C07D473/02—Heterocyclic compounds containing purine ring systems with oxygen, sulphur, or nitrogen atoms directly attached in positions 2 and 6
    • C07D473/16—Heterocyclic compounds containing purine ring systems with oxygen, sulphur, or nitrogen atoms directly attached in positions 2 and 6 two nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
    • C07B2200/07—Optical isomers
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

FIELD: pharmaceutics.
SUBSTANCE: in general formula 1
Figure 00000009
(1a) R=Me, R'=H, X=O, Y=Z=F; (1b) R=H, R'=Me, X=O, Y=Z=F; (1c) R=Me, R'=H, X=CH2, Y=Z=H; (1d) R=H, R'=Me, X=CH2, Y=Z=H; (1e) R=Me, R'=H, X=CH2, Y=Z=F; (1f) R=H, R'=Me, X=CH2, Y=Z=F. Invention also relates to method of producing of N-(2-aminopurine-6-yl)-6-aminocaproic acid amides of general formula (1). Method involves acylation of corresponding enantiomerically pure chiral heterocyclic amines of general formula
Figure 00000007
, where X, Y, Z, R, and R′ have values given above, with acyl chloride of 6-phthalimidecapronic acid, removal of phthaloyl protective group under action of hydrazine hydrate, nucleophilic substitution of obtained compounds with chlorine atoms in 2-acetamido-6-chloropurine followed by acetyl group alkaline hydrolysis in obtained product.
EFFECT: invention relates to N-(2-aminopurine-6-yl)-6-aminocaproic acid of general formula 1, which have high anticancer activity and low toxicity.
3 cl, 1 tbl, 6 ex

Description

Изобретение относится к области органической химии, а именно к новым производным пурина, которые обладают противоопухолевой активностью и могут найти применение в медицине.The invention relates to the field of organic chemistry, namely to new derivatives of purine, which have antitumor activity and can find application in medicine.

В 2008 году на всей планете рак унес 7,6 миллиона жизней - такие данные приводит в своем информационном бюллетене за февраль 2012 года ВОЗ. Эта цифра колоссальна: она составляет около 13% всех умерших. По типам рака случаи смерти распределяются неравномерно: рак легких - 18,0%; желудка - 9,7%; печени - 9,1%; толстой кишки - 8,0% [http://www.knigamedika.ru/novoobrazovaniya-onkologiya/statistika-zabolevaemosti-rakom.html#ixzz3KkVMzLeZ].In 2008, cancer killed 7.6 million people all over the world — as reported by WHO in its February 2012 newsletter. This figure is colossal: it makes up about 13% of all dead. By type of cancer, deaths are distributed unevenly: lung cancer - 18.0%; stomach - 9.7%; liver - 9.1%; colon - 8.0% [http://www.knigamedika.ru/novoobrazovaniya-onkologiya/statistika-zabolevaemosti-rakom.html#ixzz3KkVMzLeZ].

В связи с этим существует острая необходимость в создании новых средств лечения онкологических заболеваний, в первую очередь наиболее летальных нозологий.In this regard, there is an urgent need to create new treatments for cancer, especially the most lethal nosologies.

Среди производных пурина найдены соединения, обладающие значительной противоопухолевой активностью. В качестве примера можно назвать вошедшие в клиническую практику 6-меркаптопурин, неларабин и др. Однако в связи с важной ролью пурина и его производных в метаболизме опухолевых клеток, особенно биосинтезе ДНК, поиск новых препаратов на основе пурина, избирательно подавляющих рост опухолевых клеток, активно продолжается в настоящее время.Among purine derivatives, compounds have been found to have significant antitumor activity. As an example, 6-mercaptopurine, nelarabin, etc., which have come into clinical practice, can be mentioned. However, in connection with the important role of purine and its derivatives in the metabolism of tumor cells, especially DNA biosynthesis, the search for new drugs based on purine that selectively inhibit the growth of tumor cells is ongoing now.

Figure 00000001
Figure 00000001

Задача предлагаемого изобретения - получение новой группы соединений, обладающих противоопухолевой активностью и низкой токсичностью, расширяющей арсенал известных противоопухолевых средств, и разработка способа их получения.The objective of the invention is to obtain a new group of compounds with antitumor activity and low toxicity, expanding the arsenal of known antitumor agents, and the development of a method for their preparation.

Техническим результатом данного изобретения является создание новой группы химических соединений - амидов N-(2-аминопурин-6-ил)-6-аминокапроновой кислоты общей формулы 1 и разработка способа их получения.The technical result of this invention is the creation of a new group of chemical compounds - amides of N- (2-aminopurin-6-yl) -6-aminocaproic acid of general formula 1 and the development of a method for their preparation.

Figure 00000002
Figure 00000002

Соединения формулы 1, их физико-химические характеристики, а также способ получения в литературе не описаны.The compounds of formula 1, their physico-chemical characteristics, as well as the preparation method are not described in the literature.

Наиболее близки по строению к соединениям 1 производные пурина, например, формулы 2,Purine derivatives, for example, of formula 2, are closest in structure to compounds 1

Figure 00000003
Figure 00000003

обладающие способностью ингибировать киназу Aurora A [Bioorg. Med. Chem. Lett. 2008, 18, 3978-3981]. Однако сведения об их противоопухолевой активности в литературе отсутствуют. В литературных источниках не имеется сведений о способах получения соединения 2.possessing the ability to inhibit Aurora A kinase [Bioorg. Med. Chem. Lett. 2008, 18, 3978-3981]. However, information on their antitumor activity is not available in the literature. In the literature there is no information about the methods for producing compound 2.

Соединения формулы 1 могут быть получены исходя из индивидуальных (S)- и (R)-энантиомеров аминов формулы 3а-f. В результате ацилирования аминов 3а-f хлорангидридом 6-фталимидокапроновой кислоты синтезированы (S)- и (R)-энантиомеры N-(6-фталимидогексаноил) производных гетероциклических аминов 4a-f. В результате удаления фталоильной защиты гидразинолизом и последующей конденсации с 2-ацетамидо-6-хлорпурином получены конъюгаты 2-ацетамидопурина (R)-конфигурации (5а,с,е) и (S-конфигурации (5b,d,f) (с выходом 62-85%). Щелочной гидролиз ацетамидо-группы в соединениях 5a-f приводит к производным пурина 1a-f.Compounds of formula 1 can be prepared from the individual (S) and (R) enantiomers of amines of formula 3a-f. As a result of the acylation of amines 3a-f with 6-phthalimidocaproic acid chloride, the (S) - and (R) -enantiomers of N- (6-phthalimidohexanoyl) derivatives of heterocyclic amines 4a-f were synthesized. As a result of the removal of phthaloyl protection by hydrazinolysis and subsequent condensation with 2-acetamido-6-chloropurine, conjugates of the 2-acetamidopurine (R) configuration (5a, c, e) and (S-configuration (5b, d, f) (with yield 62) were obtained -85%) Alkaline hydrolysis of the acetamido group in compounds 5a-f leads to purine derivatives 1a-f.

Figure 00000004
Figure 00000004

Общая методика осуществления способаGeneral methodology for implementing the method

К раствору соответствующего амина 3а-f (7,0 ммоль) и N,N-диэтиланилина (1,04 г, 7,0 ммоль) в дихлорметане (35 мл) добавляют раствор хлорангидрида 6-фталимидокапроновой кислоты (1,96 г, 7,0 ммоль) в дихлорметане (35 мл). Реакционную массу перемешивают при комнатной температуре в течение 6-48 ч, затем промывают водным раствором HCl (2×50 мл), насыщенным водным раствором NaCl (4×30 мл), водным раствором NaHCO3 (2×30 мл) и водой (2×30 мл). Органический слой сушат MgSO4 и упаривают. Остаток очищают флеш-хроматографией на силикагеле (элюент бензол-этилацетат), получая амиды 4a-f (выход 68-90%).To a solution of the corresponding amine 3a-f (7.0 mmol) and N, N-diethylaniline (1.04 g, 7.0 mmol) in dichloromethane (35 ml) was added a solution of 6-phthalimidocaproic acid chloride (1.96 g, 7 , 0 mmol) in dichloromethane (35 ml). The reaction mass is stirred at room temperature for 6-48 hours, then washed with an aqueous solution of HCl (2 × 50 ml), saturated aqueous NaCl (4 × 30 ml), aqueous NaHCO 3 (2 × 30 ml) and water (2 × 30 ml). The organic layer was dried with MgSO 4 and evaporated. The residue was purified by flash chromatography on silica gel (eluent benzene-ethyl acetate) to give amides 4a-f (yield 68-90%).

К раствору соответствующего амида 4a-f (5,0 ммоль) в этаноле (30 мл) добавляют гидразин гидрат (0,44 мл, 9,0 ммоль) и кипятят в течение 40-120 мин. Реакционную массу упаривают досуха, к остатку добавляют 2 М HCl (32 мл). Осадок отфильтровывают, фильтрат подщелачивают NaOH до рН 12-13, затем экстрагируют подходящим органическим растворителем (3×30 мл). Органический слой сушат и упаривают. Остаток растворяют в диметилацетамиде (4,8 мл) и добавляют к полученному раствору 2-ацетамидо-6-хлорпурин (0,40 г, 1,9 ммоль) и триэтиламин (0,53 мл, 3,8 ммоль). Реакционную массу нагревают при 90-120°С в течение 12-20 ч, затем выливают в воду и выдерживают при 5-10°С в течение 10-48 ч. Осадок отделяют центрифугированием (8000-15000 об/мин), сушат и перекристаллизовывают из водного этанола, получая конъюгаты 5a-f (выход 62-86%).Hydrazine hydrate (0.44 ml, 9.0 mmol) is added to a solution of the corresponding amide 4a-f (5.0 mmol) in ethanol (30 ml) and boiled for 40-120 minutes. The reaction was evaporated to dryness, 2 M HCl (32 ml) was added to the residue. The precipitate was filtered off, the filtrate was basified with NaOH to pH 12-13, then extracted with a suitable organic solvent (3 × 30 ml). The organic layer was dried and evaporated. The residue was dissolved in dimethylacetamide (4.8 ml) and 2-acetamido-6-chloropurine (0.40 g, 1.9 mmol) and triethylamine (0.53 ml, 3.8 mmol) were added to the resulting solution. The reaction mass is heated at 90-120 ° C for 12-20 hours, then poured into water and kept at 5-10 ° C for 10-48 hours. The precipitate is separated by centrifugation (8000-15000 rpm), dried and recrystallized. from aqueous ethanol, obtaining conjugates 5a-f (yield 62-86%).

К N-[6-(2-ацетамидопурин-6-ил)аминогексаноил]аминам 5a-f (0,90 ммоль) добавляют 1 М NaOH (5,6 мл) и перемешивают при комнатной температуре в течение 36-72 ч. Раствор нейтрализуют 1 М HCl до рН 5-6 и упаривают досуха. Остаток очищают флеш-хроматографией (элюент CHCl3-МеОН), получая соответствующие N-[6-(2-аминопурин-6-ил)аминогексаноил]амины 1a-f (выход 55-98%).To N- [6- (2-acetamidopurin-6-yl) aminohexanoyl] amines 5a-f (0.90 mmol), 1 M NaOH (5.6 ml) was added and stirred at room temperature for 36-72 hours. Solution neutralize with 1 M HCl to pH 5-6 and evaporated to dryness. The residue was purified by flash chromatography (eluent CHCl 3 -MeOH) to give the corresponding N- [6- (2-aminopurin-6-yl) aminohexanoyl] amines 1a-f (yield 55-98%).

Полученные соединения анализируют следующими методами.The resulting compounds are analyzed by the following methods.

Разработан метод анализа энантиомерного состава конъюгатов 2-аминопурина 1a-f с помощью ВЭЖХ на хиральной неподвижной фазе. Производные 2-аминопурина (R)-ряда (1а,с,е) и (5)-ряда (1b,d,f) получены в оптически чистом виде (ее >99%).A method has been developed for analyzing the enantiomeric composition of 2-aminopurine 1a-f conjugates using HPLC on a chiral stationary phase. Derivatives of the 2-aminopurine of the (R) -series (1a, c, e) and (5) -series (1b, d, f) were obtained in optically pure form (its> 99%).

Температуры плавления определяют на приборе SMP3 (Barloworld Scientific, UK). Удельное вращение определяют на поляриметре Perkin Elmer 341. Элементный анализ проводят на анализаторе Perkin Elmer 2400 серии II. Спектры ЯМР 1Н, 19F и 13С регистрируют на приборе Bruker Avance 500 (рабочая частота 500, 470 и 125 МГц, соответственно) в (CD3)2SO с использованием тетраметилсилана и гексафторбензола в качестве внутренних стандартов. Спектры ЯМР регистрируют при температуре 100°С (соединения 1a-f, 4а и 5a-f) или 25°С (соединения 4b-g). Химические сдвиги приведены в миллионных долях (м.д.).Melting points are determined on an SMP3 instrument (Barloworld Scientific, UK). The specific rotation is determined on a Perkin Elmer 341 polarimeter. Elemental analysis is performed on a Perkin Elmer 2400 Series II analyzer. 1 H, 19 F and 13 C NMR spectra were recorded on a Bruker Avance 500 instrument (operating frequencies 500, 470 and 125 MHz, respectively) in (CD 3 ) 2 SO using tetramethylsilane and hexafluorobenzene as internal standards. NMR spectra are recorded at a temperature of 100 ° C (compounds 1a-f, 4a and 5a-f) or 25 ° C (compounds 4b-g). Chemical shifts are given in parts per million (ppm).

ВЭЖХ анализ соединений 1а и 1b проводят на приборе Agilent 1200 с использованием колонки Kromasil Cellucoat (150×4,6 мм, 5 мкм); скорость потока элюента 0,8 мл/мин, детектирование при 215 нм. ВЭЖХ анализ соединений 1c-f и 5a-f проводят на приборе Agilent 1100 с использованием колонки (S,S)-WHELK-01 (250×4,6 мм, 5 мкм); скорость потока элюента 0,8 мл/мин, детектирование при 215 нм. ВЭЖХ анализ соединений 4a-f проводят на приборе Knauer Smartline-1100 с использованием колонки Chiralcel OD-H (250×4,6 мм, 5 мкм); скорость потока элюента 1,0 мл/мин, детектирование при 220 нм.An HPLC analysis of compounds 1a and 1b was performed on an Agilent 1200 instrument using a Kromasil Cellucoat column (150 × 4.6 mm, 5 μm); eluent flow rate 0.8 ml / min, detection at 215 nm. HPLC analysis of compounds 1c-f and 5a-f was carried out on an Agilent 1100 instrument using a (S, S) -WHELK-01 column (250 × 4.6 mm, 5 μm); eluent flow rate 0.8 ml / min, detection at 215 nm. HPLC analysis of compounds 4a-f was performed on a Knauer Smartline-1100 instrument using a Chiralcel OD-H column (250 × 4.6 mm, 5 μm); eluent flow rate 1.0 ml / min; detection at 220 nm.

Масс-спектры высокого разрешения получают на приборах Bruker maXis Impact HD (соединения 1a, 1b и 5f) и 1200 Infinity с детектором 6540 Accurate-Mass Q-TOF (Agilent Technologies) (соединения 1c-f) (ионизация электрораспылением, режим детектирования положительно заряженных ионов).High-resolution mass spectra were obtained on Bruker maXis Impact HD instruments (compounds 1a, 1b, and 5f) and 1200 Infinity with a 6540 Accurate-Mass Q-TOF detector (Agilent Technologies) (compounds 1c-f) (electrospray ionization, positive charge detection mode ions).

Характеристики новых соединений 1a-f, 4a-f, 5a-f приведены в примерах конкретного выполнения.The characteristics of the new compounds 1a-f, 4a-f, 5a-f are given in examples of specific performance.

Примеры конкретного выполненияCase Studies

Пример 1. Синтез соединения 1а из амина 3аExample 1. The synthesis of compound 1A from amine 3a

(3R)-3,4-Дигидро-3-метил-4-(6-фталимидогексаноил)-7,8-дифтор-2H-[1,4]бензоксазин (4а) (стадия 1)(3R) -3,4-dihydro-3-methyl-4- (6-phthalimidohexanoyl) -7,8-difluoro-2H- [1,4] benzoxazine (4a) (step 1)

К раствору амина 3а (7,0 ммоль) и N,N-диэтиланилина (1,04 г, 7,0 ммоль) в дихлорметане (35 мл) добавляют раствор хлорангидрида 6-фталимидокапроновой кислоты (1,96 г, 7,0 ммоль) в дихлорметане (35 мл). Реакционную массу перемешивают при комнатной температуре в течение 24 ч, затем промывают 4 М HCl (2×50 мл), насыщенным раствором NaCl (4×30 мл), 5% раствором NaHCO3 (2×30 мл) и водой (2×30 мл). Органический слой сушат MgSO4 и упаривают. Остаток очищают флеш-хроматографией на силикагеле (элюент бензол-этилацетат 90:10). Выход 2,31 г (77%). Бесцветное густое масло. [α]D 20=-68,2 (с 1,0, CHCl3). Ее >99%. ВЭЖХ (Chiralcel OD-H, н-гексан-iPrOH 5: 1): τ 22,0 мин. Спектр ЯМР 1Н: δ=1,11 (д, J=6,8 Гц, 3 Н, Me); 1,30-1,38 (м, 2 Н, 2×Н-4 гексаноил); 1,59-1,68 (м, 4 Н, 2×Н-3 и 2×Н-5 гексаноил); 2,42-2,50 (м, 1 Н, Н-2 В гексаноил, перекрывание с сигналом ДМСО); 2,55-2,63 (м, 1 Н, Н-2А гексаноил); 3,58 (т, J=7,0 Гц, 2 Н, 2×Н-6 гексаноил); 4,12 (д. д, J=11,0,2,8 Гц, 1 Н, Н-2 В); 4,31 (д. д, J=11,0, 1,5 Гц, 1 Н, Н-2А); 4,72 (к. д. д, J=6,8, 2,8, 1,5 Гц, 1 Н, Н-3); 6,78-6,85 (м, 1 Н, Н-6); 7,53 (д. д. д, J=9,3, 5,4, 2,5 Гц, 1 Н, Н-5); 7,78-7,83 (м, 4 Н, Phth). Спектр ЯМР 19F: δ=1,99 (д. д. д, J=20,9, 8,2, 2,5 Гц, 1 F, F-8); 20,08 (д. д. д, J=20,9, 10,1, 5,4 Гц, 1 F, F-7). Спектр ЯМР 13С: δ=15,07; 24,20; 25,74; 27,68; 33,23; 37,22; 44,80; 69,80; 106,72 (д, J=17,8 Гц); 119,20 (м); 121,74; 122,89; 131,52; 134,27; 135,65 (д. д, J=9,8, 2,7 Гц); 138,88 (д. д, J=243,3, 15,4 Гц); 146,44 (д. м, J=241,8 Гц); 167,85, 170,82. Найдено: С 64,54; Н 4,99; F 8,82; N 6,28. Вычислено для C23H22F2N2O4 (М 428,43): С 64,48; Н 5,18; F 8,87; N 6,54.To a solution of amine 3a (7.0 mmol) and N, N-diethylaniline (1.04 g, 7.0 mmol) in dichloromethane (35 ml) was added a solution of 6-phthalimidocaproic acid chloride (1.96 g, 7.0 mmol) ) in dichloromethane (35 ml). The reaction mass is stirred at room temperature for 24 hours, then washed with 4 M HCl (2 × 50 ml), saturated NaCl solution (4 × 30 ml), 5% NaHCO 3 solution (2 × 30 ml) and water (2 × 30 ml). The organic layer was dried with MgSO 4 and evaporated. The residue was purified by flash chromatography on silica gel (90:10 benzene-ethyl acetate eluent). Yield 2.31 g (77%). Colorless thick oil. [α] D 20 = -68.2 (s 1.0, CHCl 3 ). Her> 99%. HPLC (Chiralcel OD-H, n-hexane-iPrOH 5: 1): τ 22.0 min. 1 H NMR spectrum: δ = 1.11 (d, J = 6.8 Hz, 3 N, Me); 1.30-1.38 (m, 2 H, 2 × H-4 hexanoyl); 1.59-1.68 (m, 4 H, 2 × H-3 and 2 × H-5 hexanoyl); 2.42-2.50 (m, 1 H, N-2 V hexanoyl, overlapping with DMSO signal); 2.55-2.63 (m, 1 H, H-2A hexanoyl); 3.58 (t, J = 7.0 Hz, 2 H, 2 × H-6 hexanoyl); 4.12 (dd, J = 11.0.2.8 Hz, 1 H, H-2 V); 4.31 (dd, J = 11.0, 1.5 Hz, 1 H, H-2A); 4.72 (qd, J = 6.8, 2.8, 1.5 Hz, 1 H, H-3); 6.78-6.85 (m, 1 H, H-6); 7.53 (dd, J = 9.3, 5.4, 2.5 Hz, 1 H, H-5); 7.78-7.83 (m, 4H, Phth). 19 F NMR spectrum: δ = 1.99 (dd, J = 20.9, 8.2, 2.5 Hz, 1 F, F-8); 20.08 (dd, J = 20.9, 10.1, 5.4 Hz, 1 F, F-7). 13 C NMR spectrum: δ = 15.07; 24.20; 25.74; 27.68; 33.23; 37.22; 44.80; 69.80; 106.72 (d, J = 17.8 Hz); 119.20 (m); 121.74; 122.89; 131.52; 134.27; 135.65 (dd, J = 9.8, 2.7 Hz); 138.88 (dd, J = 243.3, 15.4 Hz); 146.44 (dm, J = 241.8 Hz); 167.85, 170.82. Found: C, 64.54; H 4.99; F 8.82; N, 6.28. Calculated for C 23 H 22 F 2 N 2 O 4 (M 428.43): C 64.48; H 5.18; F 8.87; N, 6.54.

(3R)-4-[6-(2-Ацетамидопурин-6-ил)аминогексаноил]-3,4-дигидро-3-метил-7,8-дифтор-2H-[1,4]бензоксазин (5а) (стадия 2).(3R) -4- [6- (2-Acetamidopurin-6-yl) aminohexanoyl] -3,4-dihydro-3-methyl-7,8-difluoro-2H- [1,4] benzoxazine (5a) (step 2).

К раствору амида 4а (2,14 г, 5,0 ммоль) в этаноле (30 мл) добавляют гидразин гидрат (0,44 мл, 9,0 ммоль) и кипятят в течение 80 мин. Реакционную массу упаривают досуха, к остатку добавляют 2 М HCl (32 мл). Осадок отфильтровывают, фильтрат нейтрализуют Na2CO3 и подщелачивают NaOH до рН 12-13, затем экстрагируют диэтиловым эфиром (3×30 мл). Органический слой сушат NaOH и упаривают. Остаток растворяют в диметилацетамиде (4,8 мл) и добавляют к полученному раствору 2-ацетамидо-6-хлорпурин (0,40 г, 1,9 ммоль) и триэтиламин (0,53 мл, 3,8 ммоль). Реакционную массу нагревают при 100°С в течение 20 ч, затем выливают в воду (50 мл) и выдерживают при 5°С 16 ч. Осадок отделяют центрифугированием (15000 об/мин), сушат и перекристаллизовывают из 95% этанола. Дополнительное количество соединения 5а получают из маточного раствора с помощью флеш-хроматографии на силикагеле (элюент CHCl3-МеОН от 100:0 до 95:5). Выход 0,61 г (68%). Бесцветный порошок, т.пл. 195-196°С. [α]D 20=-41,7 (с 1,0, ДМФА). Ее>99%. ВЭЖХ (S,S)-WHELK-01, МеОН-H2O 80:20): τ 21,8 мин. Спектр ЯМР 1H: δ=1,10 (д, J=6,9 Гц, 3 Н, Me); 1,35-1,45 (м, 2 Н, 2×Н-4 гексаноил); 1,59-1,72 (м, 4 Н, 2×Н-3 и 2×Н-5 гексаноил); 2,26 (с, 3 Н, Ас); 2,46 (м, 1 Н, Н-2В гексаноил, перекрывание с сигналом ДМСО); 2,60 (д. т, J=15,3, 7,5 Гц, 1 Н, Н-2А гексаноил); 3,55 (м, 2 Н, 2×Н-6 гексаноил); 4,12 (д. д, J=10,9, 2,8 Гц, 1 Н, Н-2 В); 4,32 (д. д, J=10,9, 1,3 Гц, 1 Н, Н-2А); 4,71 (к. д. д, J=6,8, 2,8, 1,5 Гц, 1 Н, Н-3); 6,82 (д. д, J=9,7, 9,7, 8,4 Гц, 1 Н, Н-6); 7,04 (с, 1 Н, NH-6 пурина); 7,56 (д. д. д, J=9,5, 5,4, 2,5 Гц, 1 Н, Н-5); 7,83 (с, 1 Н, Н-8 пурина); 9,05 (с, 1 Н, NH-Ac); 12,37 (уш. с, 1Н, NH-9 пурина). Спектр ЯМР 19F: δ=1,99 (д. д. д, J=21,0, 8,2, 2,4 Гц, 1 F, F-8); 20,09 (д. д. д, J=20,7, 10,3, 5,4 Гц, 1 F, F-7). Спектр ЯМР 13С: δ=14,61; 23,74; 23,97; 25,50; 28,54; 33,03; 39,5 (перекрывание с сигналом ДМСО); 44,43; 69,64; 106,20 (д, J=18,0 Гц); 115,34; 118,73 (м); 121,67; 135,57 (д, J=8,9 Гц); 137,18; 138,64 (д. д, J=244,2, 15,2 Гц); 146,26 (д. д, J=241,9, 9,7 Гц); 150,28; 152,30; 154,28; 168,84; 170,58. Найдено: С 56,06; Н 5,28; F 8,14; N 20,43. Вычислено для C22H25F2N7O3 (473,49): С 55,81; Н 5,32; F 8,02; N 20,71.Hydrazine hydrate (0.44 ml, 9.0 mmol) was added to a solution of amide 4a (2.14 g, 5.0 mmol) in ethanol (30 ml) and boiled for 80 minutes. The reaction was evaporated to dryness, 2 M HCl (32 ml) was added to the residue. The precipitate is filtered off, the filtrate is neutralized with Na 2 CO 3 and alkalinized with NaOH to pH 12-13, then extracted with diethyl ether (3 × 30 ml). The organic layer was dried with NaOH and evaporated. The residue was dissolved in dimethylacetamide (4.8 ml) and 2-acetamido-6-chloropurine (0.40 g, 1.9 mmol) and triethylamine (0.53 ml, 3.8 mmol) were added to the resulting solution. The reaction mass is heated at 100 ° C for 20 hours, then poured into water (50 ml) and maintained at 5 ° C for 16 hours. The precipitate is separated by centrifugation (15,000 rpm), dried and recrystallized from 95% ethanol. An additional amount of compound 5a was obtained from the mother liquor by flash chromatography on silica gel (eluent CHCl 3 -MeOH from 100: 0 to 95: 5). Yield 0.61 g (68%). Colorless powder, mp 195-196 ° C. [α] D 20 = -41.7 (s 1.0, DMF). Her> 99%. HPLC (S, S) -WHELK-01, MeOH-H 2 O 80:20): τ 21.8 min. 1 H NMR spectrum: δ = 1.10 (d, J = 6.9 Hz, 3 N, Me); 1.35-1.45 (m, 2 H, 2 × H-4 hexanoyl); 1.59-1.72 (m, 4 H, 2 × H-3 and 2 × H-5 hexanoyl); 2.26 (s, 3 H, Ac); 2.46 (m, 1 H, H-2B hexanoyl, overlapping with DMSO signal); 2.60 (dt, J = 15.3, 7.5 Hz, 1 H, H-2A hexanoyl); 3.55 (m, 2 H, 2 × H-6 hexanoyl); 4.12 (dd, J = 10.9, 2.8 Hz, 1 H, H-2 V); 4.32 (dd, J = 10.9, 1.3 Hz, 1 H, H-2A); 4.71 (qd, J = 6.8, 2.8, 1.5 Hz, 1 H, H-3); 6.82 (dd, J = 9.7, 9.7, 8.4 Hz, 1 H, H-6); 7.04 (s, 1H, NH-6 purine); 7.56 (dd, J = 9.5, 5.4, 2.5 Hz, 1 H, H-5); 7.83 (s, 1 H, H-8 purine); 9.05 (s, 1H, NH-Ac); 12.37 (br s, 1H, NH-9 purine). 19 F NMR spectrum: δ = 1.99 (dd, J = 21.0, 8.2, 2.4 Hz, 1 F, F-8); 20.09 (dd, J = 20.7, 10.3, 5.4 Hz, 1 F, F-7). 13 C NMR spectrum: δ = 14.61; 23.74; 23.97; 25.50; 28.54; 33.03; 39.5 (overlapping with DMSO signal); 44.43; 69.64; 106.20 (d, J = 18.0 Hz); 115.34; 118.73 (m); 121.67; 135.57 (d, J = 8.9 Hz); 137.18; 138.64 (dd, J = 244.2, 15.2 Hz); 146.26 (dd, J = 241.9, 9.7 Hz); 150.28; 152.30; 154.28; 168.84; 170.58. Found: C 56.06; H 5.28; F, 8.14; N, 20.43. Calculated for C 22 H 25 F 2 N 7 O 3 (473.49): C 55.81; H 5.32; F 8.02; N, 20.71.

(3R)-4-[6-(2-Аминопурин-6-ил)аминогексаноил]-3,4-дигидро-3-метил-7,8-дифтор-2H-[1,4]бензоксазин (1а) (стадия 3)(3R) -4- [6- (2-aminopurin-6-yl) aminohexanoyl] -3,4-dihydro-3-methyl-7,8-difluoro-2H- [1,4] benzoxazine (1a) (stage 3)

Смесь ацетамида 5а (0,43 г, 0,90 ммоль) и 1 М NaOH (5,6 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 48 ч, затем нейтрализуют 1 М HCl до рН 5-6 и упаривают досуха. Остаток очищают с помощью флеш-хроматографии на силикагеле (элюент CHCl3-МеОН от 100: 0 до 90: 10). Выход 0,214 г (55%). Бесцветный порошок, т. пл. 110-114°С. [α]D 20=-42,6 (с 0,7, ДМФА). Ее 99,2%. ВЭЖХ (Kromasil Cellucoat, MeCN-H2O 25: 75): τ 23,8 мин. Спектр ЯМР 1Н: δ=1,12 (д, J=6,9 Гц, 3 Н, Me); 1,37-1,42 (м, 2 Н, 2×Н-4 гексаноил); 1,58-1,68 (м, 4 Н, 2×Н-3 и 2×Н-5 гексаноил); 2,45-2,51 (м, 1 Н, Н-2 В гексаноил, перекрывается с сигналом ДМСО); 2,58-2,64 (м, 1 Н, Н-2А гексаноил); 3,48-3,52 (м, 2 Н, 2×Н-6 гексаноил); 4,13 (д. д, J=11,0, 2,8 Гц, 1 Н, Н-2 В); 4,32 (д. д, J=11,0, 1,4 Hz, 1 Н, Н-2А); 4,70-4,76 (м, 1 Н, Н-3); 5,25 (уш. с, 2 Н, NH2); 6,50 (уш. с, 1 Н, NH-6 гексаноил); 6,84 (д. д. д, J=9,8, 9,8, 8,3 Гц, 1 Н, Н-6); 7,54-7,58 (м, 2 Н, Н-5 и Н-8 пурина); 11,62 (уш. с, 1 Н, Н-9 пурина). Спектр ЯМР 19F: δ=1,98 (д. д. д, J=21,0, 8,2, 2,2 Гц, 1 F, F-8), 20,05-20,12 (м, 1 F, F-7). Спектр ЯМР 13С: δ=14,63; 23,99; 25,51; 28,73; 33,06; 39,5 (перекрывается с сигналом ДМСО); 44,45; 69,52; 106,22 (д, J=18,1 Гц); 112,30; 118,75 (д. д, J=7,8,4,2 Гц); 121,67; 134,79 (м); 135,57 (д. д, J=10,1,3,1 Гц); 138,64 (д. д,7=243,9, 15,4 Гц); 146,26 (д. д, J=242,1, 10,1 Гц); 152,08; 154,34; 159,49; 170,61. Масс-спектр высокого разрешения: вычислено для C20H24F2N7O2 [М+Н]+ 432,1954; найдено 432,1953.A mixture of acetamide 5a (0.43 g, 0.90 mmol) and 1 M NaOH (5.6 ml) was stirred at room temperature for 48 hours, then neutralized with 1 M HCl to pH 5-6 and evaporated to dryness. The residue was purified by flash chromatography on silica gel (eluent CHCl 3 -MeOH from 100: 0 to 90: 10). Yield 0.214 g (55%). Colorless powder, mp 110-114 ° C. [α] D 20 = -42.6 (c 0.7, DMF). Its 99.2%. HPLC (Kromasil Cellucoat, MeCN-H 2 O 25: 75): τ 23.8 min. 1 H NMR spectrum: δ = 1.12 (d, J = 6.9 Hz, 3 N, Me); 1.37-1.42 (m, 2 H, 2 × H-4 hexanoyl); 1.58-1.68 (m, 4 H, 2 × H-3 and 2 × H-5 hexanoyl); 2.45-2.51 (m, 1 N, N-2 V hexanoyl, overlaps with the DMSO signal); 2.58-2.64 (m, 1 H, H-2A hexanoyl); 3.48-3.52 (m, 2 H, 2 × H-6 hexanoyl); 4.13 (dd, J = 11.0, 2.8 Hz, 1 H, H-2 V); 4.32 (dd, J = 11.0, 1.4 Hz, 1 H, H-2A); 4.70-4.76 (m, 1 H, H-3); 5.25 (br s, 2 N, NH 2 ); 6.50 (br s, 1 H, NH-6 hexanoyl); 6.84 (dd, J = 9.8, 9.8, 8.3 Hz, 1 H, H-6); 7.54-7.58 (m, 2 H, H-5 and H-8 purine); 11.62 (broad s, 1 H, H-9 purine). 19 F NMR spectrum: δ = 1.98 (dd, J = 21.0, 8.2, 2.2 Hz, 1 F, F-8), 20.05-20.12 (m, 1 F, F-7). 13 C NMR spectrum: δ = 14.63; 23.99; 25.51; 28.73; 33.06; 39.5 (overlaps with the DMSO signal); 44.45; 69.52; 106.22 (d, J = 18.1 Hz); 112.30; 118.75 (dd, J = 7.8.4.2 Hz); 121.67; 134.79 (m); 135.57 (dd, J = 10.1.3.1 Hz); 138.64 (dd, 7 = 243.9, 15.4 Hz); 146.26 (dd, J = 242.1, 10.1 Hz); 152.08; 154.34; 159.49; 170.61. High-resolution mass spectrum: calculated for C 20 H 24 F 2 N 7 O 2 [M + H] + 432.1954; found 432.1953.

Пример 2. Аналогично примеру 1 из соединения 3b получают соединение 1b через промежуточные соединения 4b и 5b.Example 2. Analogously to example 1, from compound 3b receive compound 1b through intermediate compounds 4b and 5b.

(3S)-3,4-Дигидро-3-метил-4-(6-фталимидогексаноил)-7,8-дифтор-2H-[1,4]бензоксазин (4b)(3S) -3,4-dihydro-3-methyl-4- (6-phthalimidohexanoyl) -7,8-difluoro-2H- [1,4] benzoxazine (4b)

Выход 68%. Бесцветное густое масло. [α]D 20=+67,7 (с 0,9, CHCl3). Ее >99%. ВЭЖХ (Chiralcel OD-H, н-гексан-iPrOH 5:1): τ 28,5 мин. Спектры ЯМР 1Н, 19F и 13С идентичны спектрам соединения 4а (Пример 1). Найдено: С 64,34; Н 5,44; F 8,52; N 6,43. Вычислено для C23H22F2N2O4 (М 428,43): С 64,48; Н 5,18; F 8,87; N 6,54.Yield 68%. Colorless thick oil. [α] D 20 = + 67.7 (s 0.9, CHCl 3 ). Her> 99%. HPLC (Chiralcel OD-H, n-hexane-iPrOH 5: 1): τ 28.5 min. 1 H, 19 F and 13 C NMR spectra are identical to the spectra of compound 4a (Example 1). Found: C, 64.34; H 5.44; F 8.52; N, 6.43. Calculated for C 23 H 22 F 2 N 2 O 4 (M 428.43): C 64.48; H 5.18; F 8.87; N, 6.54.

(3S)-4-[6-(2-Ацетамидопурин-6-ил)аминогексаноил]-3,4-дигидро-3-метил-7,8-дифтор-2H-[1,4]бензоксазин (5b)(3S) -4- [6- (2-Acetamidopurin-6-yl) aminohexanoyl] -3,4-dihydro-3-methyl-7,8-difluoro-2H- [1,4] benzoxazine (5b)

Выход 62%. Бесцветный порошок, т.пл. 186-188°С. [α]D 20 =+42,8 (с 1,0, ДМФА). Ее>99%. ВЭЖХ ((S,S)-WHELK-01, МеОН-Н2O 80:20): τ 16,2 мин. Спектры ЯМР 1Н, 19F и 13С идентичны спектрам соединения 5а (Пример 1). Найдено: С 55,62; Н 5,37; F 7,86; N 20,67. Вычислено для C22H25F2N7O3 (473,49): С 55,81; Н 5,32; F 8,02; N 20,71.Yield 62%. Colorless powder, mp 186-188 ° C. [α] D 20 = + 42.8 (s 1.0, DMF). Her> 99%. HPLC ((S, S) -WHELK-01, MeOH-H 2 O 80:20): τ 16.2 min. 1 H, 19 F and 13 C NMR spectra are identical to the spectra of compound 5a (Example 1). Found: C 55.62; H 5.37; F 7.86; N, 20.67. Calculated for C 22 H 25 F 2 N 7 O 3 (473.49): C 55.81; H 5.32; F 8.02; N, 20.71.

(3S)-4-[6-(2-Аминопурин-6-ил)аминогексаноил]-3,4-дигидро-3-метил-7,8-дифтор-2H-[1,4]бензоксазин (1b)(3S) -4- [6- (2-Aminopurin-6-yl) aminohexanoyl] -3,4-dihydro-3-methyl-7,8-difluoro-2H- [1,4] benzoxazine (1b)

Выход 75%. Бесцветный порошок, т. пл. 109-113°С. [α]D 20=+43,8 (с 0,3, ДМФА). Ее>99,5%. ВЭЖХ (Kromasil Cellucoat, MeCN-H2O 25:75): τ 26,9 мин. Спектры ЯМР идентичны спектрам соединения 1а (Пример 1). Масс-спектр высокого разрешения: вычислено для C20H24F2N7O2 [М+Н]+ 432,1954; найдено 432,1956.Yield 75%. Colorless powder, mp 109-113 ° C. [α] D 20 = + 43.8 (s 0.3, DMF). Her> 99.5%. HPLC (Kromasil Cellucoat, MeCN-H 2 O 25:75): τ 26.9 min. The NMR spectra are identical to the spectra of compound 1a (Example 1). High-resolution mass spectrum: calculated for C 20 H 24 F 2 N 7 O 2 [M + H] + 432.1954; found 432.1956.

Пример 3. Аналогично примеру 1 из соединения 3с получают соединение 1 с через промежуточные соединения 4с и 5с.Example 3. Analogously to example 1, from compound 3c, compound 1s is obtained through intermediates 4c and 5c.

(2R)-2-Метил-1-(6-фталимидогексаноил)-1,2,3,4-тетрагвдрохинолин (4с)(2R) -2-Methyl-1- (6-phthalimidohexanoyl) -1,2,3,4-tetrahydroquinoline (4c)

Выход 90%. Бесцветное масло. [α]D 20=-192 (с 1,1, CHCl3). Ее 97%. ВЭЖХ (Chiralcel OD-H, н-гексан-iPrOH-МеОН 20: 0,6: 0,4): τ 30,6 мин. Спектр ЯМР 1Н: 8=0,99 (д, J=6,5 Гц, 3 Н, Me); 1,13-1,26 (м, 3 Н, 2×Н-4 гексаноил и Н-3В); 1,46-1,55 (м, 4 Н, 2×Н-3 и 2×Н-5 гексаноил); 2,19-2,27 (м, 2 Н, Н-2 В гексаноил и Н-3 А); 2,35-2,50 (м, 2 Н, Н-2А гексаноил и Н-4 В); 2,58 (д. д. д, J=14,8, 5,0, 5,0 Гц, 1 Н, Н-4А); 3,51 (т, J=7,0 Гц, 2 Н, 2×Н-6 гексаноил); 4,62 (м, 1 Н, Н-2); 7,09-7,12 (м, 1 Н, Н-6); 7,17-7,20 (м, 2 Н, Н-5 и Н-7); 7,22-7,27 (м, 1 Н, Н-8); 7,82-7,87 (м, 4 Н, Phth). Спектр ЯМР 13С: δ=20,02; 24,66; 25,20; 25,73; 27,61; 32,01; 33,43; 37,18; 47,54; 122,88; 125,09; 125,82; 126,02; 127,30; 128,22; 131,51; 134,27; 134,72 (уш. с); 137,05; 167,81; 171,04. Найдено: С 73,82; Н 6,84; N 7,04. Вычислено для C24H26N2O3 (М 390,47): С 73,82; Н 6,71; N 7,17.Yield 90%. Colorless oil. [α] D 20 = -192 (c 1.1, CHCl 3 ). Its 97%. HPLC (Chiralcel OD-H, n-hexane-iPrOH-MeOH 20: 0.6: 0.4): τ 30.6 min. 1 H NMR spectrum: 8 = 0.99 (d, J = 6.5 Hz, 3 N, Me); 1.13-1.26 (m, 3 H, 2 × H-4 hexanoyl and H-3B); 1.46-1.55 (m, 4 H, 2 × H-3 and 2 × H-5 hexanoyl); 2.19-2.27 (m, 2H, H-2B hexanoyl and H-3A); 2.35-2.50 (m, 2 H, H-2A hexanoyl and H-4 B); 2.58 (dd, J = 14.8, 5.0, 5.0 Hz, 1 H, H-4A); 3.51 (t, J = 7.0 Hz, 2 H, 2 × H-6 hexanoyl); 4.62 (m, 1 H, H-2); 7.09-7.12 (m, 1 H, H-6); 7.17-7.20 (m, 2 H, H-5 and H-7); 7.22-7.27 (m, 1 H, H-8); 7.82-7.87 (m, 4H, Phth). 13 C NMR: δ = 20,02; 24.66; 25.20; 25.73; 27.61; 32.01; 33.43; 37.18; 47.54; 122.88; 125.09; 125.82; 126.02; 127.30; 128.22; 131.51; 134.27; 134.72 (broad s); 137.05; 167.81; 171.04. Found: C, 73.82; H 6.84; N, 7.04. Calculated for C 24 H 26 N 2 O 3 (M 390.47): C 73.82; H 6.71; N, 7.17.

(2R)-1-[6-(2-Ацетамидопурин-6-ил)аминогексаноил]-2-метил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин (5с)(2R) -1- [6- (2-Acetamidopurin-6-yl) aminohexanoyl] -2-methyl-1,2,3,4-tetrahydroquinoline (5c)

Выход 71%. Бесцветный порошок, т. пл. 216-217°С. [α]D 20=-167 (с 1,0, ДМФА). Ее>99%. ВЭЖХ ((S,S)-WHELK-01, МеОН-H2O 80:20): τ 20,9 мин. Спектр ЯМР 1Н: δ=1,00 (д, J=6,5 Гц, 3 Н, Me); 1,26-1,33 (m, 3 Н, 2×Н-4 гексаноил и Н-3В); 1,49-1,62 (м, 4 Н, 2×Н-3 и 2×Н-5 гексаноил); 2,22 (д. т, J=7,5, 5,7 Гц, 1 Н, Н-2В гексаноил / Н-3А); 2,27 (с, 3 H, Ас); 2,30 (д. т, J=15,1, 7,5 Гц, 1 Н, Н-2 В гексаноил / Н-3А); 2,39-2,46 (м, 2 Н, Н-2А гексаноил и Н-4 В); 2,58 (д. т, J=15,1, 5,5 Гц, 1 Н, Н-4А); 3,49 (м, 2 Н, 2×Н-6 гексаноил); 4,68 (т. д, J=6,7, 6,7 Hz, 1 Н, Н-2); 7,03 (уш. с, 1 Н, NH-6 гексаноил); 7,08 (м, 1 Н, Н-6); 7,15 (м, 2 Н, Н-5 и Н-7); 7,22 (м, 1 Н, Н-8); 7,84 (с, 1 Н, Н-8 пурина); 9,08 (с, 1Н, NH-Ac); 12,38 (уш. с, 1 Н, Н-9 пурина). Спектр ЯМР 13С: δ=19,35; 23,77; 24,39; 24,57; 25,53; 28,53; 31,36; 33,25; 39,5 (перекрывается с сигналом ДМСО); 46,97; 115,36; 124,49; 125,33; 125,40; 126,85; 133,99; 136,90; 137,23; 137,34; 152,29; 154,20; 168,86; 170,80. Найдено: С 63,30; Н 6,64; N 22,44. Вычислено для C23H29N7O2 (435,53): С 63,43; Н 6,71; N 22,51.Yield 71%. Colorless powder, mp 216-217 ° C. [α] D 20 = -167 (s 1.0, DMF). Her> 99%. HPLC ((S, S) -WHELK-01, MeOH-H 2 O 80:20): τ 20.9 min. 1 H NMR spectrum: δ = 1.00 (d, J = 6.5 Hz, 3 N, Me); 1.26-1.33 (m, 3 H, 2 × H-4 hexanoyl and H-3B); 1.49-1.62 (m, 4 H, 2 × H-3 and 2 × H-5 hexanoyl); 2.22 (dt, J = 7.5, 5.7 Hz, 1 H, H-2B hexanoyl / H-3A); 2.27 (s, 3 H, Ac); 2.30 (dt, J = 15.1, 7.5 Hz, 1 H, H-2 V hexanoyl / H-3A); 2.39-2.46 (m, 2H, H-2A hexanoyl and H-4B); 2.58 (dt, J = 15.1, 5.5 Hz, 1 H, H-4A); 3.49 (m, 2 H, 2 × H-6 hexanoyl); 4.68 (i.e., J = 6.7, 6.7 Hz, 1 H, H-2); 7.03 (br s, 1 H, NH-6 hexanoyl); 7.08 (m, 1 H, H-6); 7.15 (m, 2 H, H-5 and H-7); 7.22 (m, 1 H, H-8); 7.84 (s, 1 H, H-8 purine); 9.08 (s, 1H, NH-Ac); 12.38 (broad s, 1 H, H-9 purine). 13 C NMR spectrum: δ = 19.35; 23.77; 24.39; 24.57; 25.53; 28.53; 31.36; 33.25; 39.5 (overlaps with the DMSO signal); 46.97; 115.36; 124.49; 125.33; 125.40; 126.85; 133.99; 136.90; 137.23; 137.34; 152.29; 154.20; 168.86; 170.80. Found: C, 63.30; H, 6.64; N, 22.44. Calculated for C 23 H 29 N 7 O 2 (435.53): C 63.43; H 6.71; N, 22.51.

(2R)-1-[6-(2-Аминопурин-6-ил)аминогексаноил]-2-метил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин (1 с)(2R) -1- [6- (2-Aminopurin-6-yl) aminohexanoyl] -2-methyl-1,2,3,4-tetrahydroquinoline (1 s)

Выход 69%. Бесцветный порошок, т.пл. 100-102°С. [α]D 20=-170 (с 0,7, ДМФА). Ее>99%. ВЭЖХ ((S,S)-WHELK-01, МеОН-H2O 75:25): τ 25,5 мин. Спектр ЯМР 1Н: δ=1,00 (д, J=6,5 Гц, 3 Н, Me); 1,25-1,34 (м, 3 Н, Н-3В, 2×Н-4 гексаноил); 1,48-1,60 (м, 4 Н, 2×Н-3 и 2×Н-5 гексаноил); 2,22-2,33 (м, 2 Н, Н-2 В гексаноил и Н-3А); 2,40-2,47 (м, 2 Н, Н-2А гексаноил и Н-4 В); 2,60 (д. д. д, J=15,1, 5,5, 5,5 Гц, 1 Н, Н-4А); 3,42-3,47 (м, 2 Н, 2×Н-6 гексаноил); 4,69 (д. д. к, J=6,8, 6,7, 6,5 Гц, 1 Н, Н-2); 5,31 (уш. с, 2 Н, NH2); 6,45 (уш. с, 1 Н, NH-6 гексаноил); 7,09 (д. д. д, J=7,8, 7,3, 1,3 Hz, 1 Н, Н-6); 7,14-7,17 (м, 2 Н, Н-5 и Н-7); 7,22 (д. д, J=8,1, 1,3 Hz, 1 Н, Н-8); 7,57 (с, 1 Н, Н-8 пурина); 11,72 (уш. с, 1 Н, Н-9 пурина). Спектр ЯМР 13С: δ=19,15; 24,26; 24,39; 25,42; 28,55; 31,17; 33,16; 39,5 (перекрывается с сигналом ДМСО); 46,84; 111,98; 124,32; 125,20; 125,24; 126,73; 133,79; 135,02; 136,88; 151,89; 154,13; 159,07; 170,73. Масс-спектр высокого разрешения: вычислено для C21H28N7O [М+Н]+ 394,2350; найдено 394,2354.Yield 69%. Colorless powder, mp 100-102 ° C. [α] D 20 = -170 (c 0.7, DMF). Her> 99%. HPLC ((S, S) -WHELK-01, MeOH-H 2 O 75:25): τ 25.5 min. 1 H NMR spectrum: δ = 1.00 (d, J = 6.5 Hz, 3 N, Me); 1.25-1.34 (m, 3 H, H-3B, 2 × H-4 hexanoyl); 1.48-1.60 (m, 4 H, 2 × H-3 and 2 × H-5 hexanoyl); 2.22-2.33 (m, 2H, H-2B hexanoyl and H-3A); 2.40-2.47 (m, 2H, H-2A hexanoyl and H-4B); 2.60 (dd, J = 15.1, 5.5, 5.5 Hz, 1 H, H-4A); 3.42-3.47 (m, 2 H, 2 × H-6 hexanoyl); 4.69 (dd, J = 6.8, 6.7, 6.5 Hz, 1 H, H-2); 5.31 (br s, 2 H, NH 2 ); 6.45 (br s, 1 H, NH-6 hexanoyl); 7.09 (dd, J = 7.8, 7.3, 1.3 Hz, 1 H, H-6); 7.14-7.17 (m, 2 H, H-5 and H-7); 7.22 (dd, J = 8.1, 1.3 Hz, 1 H, H-8); 7.57 (s, 1 H, H-8 purine); 11.72 (broad s, 1 H, H-9 purine). 13 C NMR spectrum: δ = 19.15; 24.26; 24.39; 25.42; 28.55; 31.17; 33.16; 39.5 (overlaps with the DMSO signal); 46.84; 111.98; 124.32; 125.20; 125.24; 126.73; 133.79; 135.02; 136.88; 151.89; 154.13; 159.07; 170.73. High-resolution mass spectrum: calculated for C 21 H 28 N 7 O [M + H] + 394.2350; found 394.2354.

Пример 4. Аналогично примеру 1 из соединения 3d получают соединение 1d через промежуточные соединения 4d и 5d.Example 4. Analogously to example 1, from compound 3d, compound 1d is obtained via intermediates 4d and 5d.

(2S)-2-Метил-1-(6-фталимидогексаноил)-1,2,3,4-тетрагидрохинолин (4d)(2S) -2-Methyl-1- (6-phthalimidohexanoyl) -1,2,3,4-tetrahydroquinoline (4d)

Выход 80%. Бесцветное масло. [α]D 20=+201 (с 1,3, CHCl3). Ее>99%. ВЭЖХ (Chiralcel OD-H, н-гексан-iPrOH-МеОН 20:0,6:0,4): τ 28,2 мин. Спектры ЯМР 1Н и 13С идентичны спектрам соединения 4с (Пример 3). Найдено: С 73,73; Н 6,58; N 6,81. Вычислено для C24H26N2O3 (М 390,47): С 73,82; Н 6,71; N 7,17.Yield 80%. Colorless oil. [α] D 20 = + 201 (c 1.3, CHCl 3 ). Her> 99%. HPLC (Chiralcel OD-H, n-hexane-iPrOH-MeOH 20: 0.6: 0.4): τ 28.2 min. 1 H and 13 C NMR spectra are identical to the spectra of compound 4c (Example 3). Found: C, 73.73; H 6.58; N, 6.81. Calculated for C 24 H 26 N 2 O 3 (M 390.47): C 73.82; H 6.71; N, 7.17.

(2S)-1-[6-(2-Ацетамидопурин-6-ил)аминогексаноил]-2-метил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин (5d)(2S) -1- [6- (2-Acetamidopurin-6-yl) aminohexanoyl] -2-methyl-1,2,3,4-tetrahydroquinoline (5d)

Выход 85%. Бесцветный порошок, т.пл. 216-217°С. [α]D 20=+167 (с 1,0, ДМФА). Ее>99%. ВЭЖХ ((S,S)-WHELK-01, МеОН-H2O 80:20): τ 15,9 мин. Спектры ЯМР 1Н и 13С идентичны спектрам соединения 5с (Пример 3). Найдено: С 63,28; Н 6,85; N 22,48. Вычислено для C23H29N7O2 (435,53): С 63,43; Н 6,71; N 22,51.Yield 85%. Colorless powder, mp 216-217 ° C. [α] D 20 = + 167 (s 1.0, DMF). Her> 99%. HPLC ((S, S) -WHELK-01, MeOH-H 2 O 80:20): τ 15.9 min. 1 H and 13 C NMR spectra are identical to the spectra of compound 5c (Example 3). Found: C, 63.28; H 6.85; N, 22.48. Calculated for C 23 H 29 N 7 O 2 (435.53): C 63.43; H 6.71; N, 22.51.

(2S)-1-[6-(2-Аминопурин-6-ил)аминогексаноил]-2-метил-1,2,3,4-тетрагидрохинолин (1d)(2S) -1- [6- (2-Aminopurin-6-yl) aminohexanoyl] -2-methyl-1,2,3,4-tetrahydroquinoline (1d)

Бесцветный порошок, т.пл. 101-103°С. [α]D 20=+165 (с 0,7, ДМФА). Ее>99%. ВЭЖХ ((S,S)-WHELK-01, МеОН-H2O 75:25): τ 19,0 мин. Спектры ЯМР идентичны спектрам соединения 1с (Пример 3). Масс-спектр высокого разрешения: вычислено для C21H28N7O [М+Н]+ 394,2350; найдено 394,2351.Colorless powder, mp 101-103 ° C. [α] D 20 = + 165 (c 0.7, DMF). Her> 99%. HPLC ((S, S) -WHELK-01, MeOH-H 2 O 75:25): τ 19.0 min. The NMR spectra are identical to the spectra of compound 1c (Example 3). MS High resolution calcd for C 21 H 28 N 7 O [M + H] + 394.2350; found 394.2351.

Пример 5. Аналогично примеру 1 из соединения 3е получают соединение 1е через промежуточные соединения 4е и 5е.Example 5. Analogously to example 1, from compound 3e, compound 1e is obtained through intermediates 4e and 5e.

(2R)-2-Метил-1-(6-фталимидогексаноил)-6-фтор-1,2,3,4-тетрагидрохинолин (4е)(2R) -2-Methyl-1- (6-phthalimidohexanoyl) -6-fluoro-1,2,3,4-tetrahydroquinoline (4e)

Выход 89%. Бесцветное масло. [α]D 20=-172 (с 0,8, CHCl3). Ее 99%. ВЭЖХ (Chiralcel OD-H, н-гексан-iPrOH-МеОН 10:0,8:0,2): τ 21,8 мин. Спектр ЯМР lH: δ=0,98 (д, J=6,5 Гц, 3 Н, Me); 1,13-1,22 (м, 3 Н, 2×Н-4 гексаноил и Н-3В); 1,45-1,54 (м, 4 Н, 2×Н-3 и 2×Н-5 гексаноил); 2,15-2,27 (м, 2 Н, Н-2 В гексаноил и Н-3А); 2,35-2,50 (м, 2 Н, Н-2а гексаноил и Н-4 В); 2,56-2,63 (м, 1 Н, Н-4А); 3,51 (т, J=7,0 Гц, 2 Н, 2×Н-6 гексаноил); 4,61 (м, 1 Н, Н-2); 7,00 (м, 1 Н, Н-7); 7,07 (м, 1 Н, Н-5); 7,30 (уш. с, 1 Н, Н-8); 7,85 (м, 4 Н, Phth). Спектр ЯМР 19F: δ=45,43 (уш. с, F-6). Спектр ЯМР 13С: δ=19,88; 24,56; 25,23; 25,72; 27,62; 31,52; 33,31; 37,17; 47,48; 95,34; 112,60 (д, J=22,2 Гц); 113,88 (д, J=22,4 Гц); 122,88; 127,56 (д, J=8,5 Гц); 131,51; 133,23; 134,26; 159,18 (д, J=243,0 Гц); 167,80; 170,99. Найдено: С 70,40; Н 6,13; F 4,28; N 6,61. Вычислено для C24H25FN2O3 (М 408,47): С 70,57; Н 6,17; F 4,65; N6,86.Yield 89%. Colorless oil. [α] D 20 = -172 (c 0.8, CHCl 3 ). Its 99%. HPLC (Chiralcel OD-H, n-hexane-iPrOH-MeOH 10: 0.8: 0.2): τ 21.8 min. Nuclear Magnetic Resonance Spectrum l H: δ = 0.98 (d, J = 6.5 Hz, 3 N, Me); 1.13-1.22 (m, 3 H, 2 × H-4 hexanoyl and H-3B); 1.45-1.54 (m, 4 H, 2 × H-3 and 2 × H-5 hexanoyl); 2.15-2.27 (m, 2H, H-2B hexanoyl and H-3A); 2.35-2.50 (m, 2 H, H-2 a hexanoyl and H-4 B); 2.56-2.63 (m, 1 H, H-4A); 3.51 (t, J = 7.0 Hz, 2 H, 2 × H-6 hexanoyl); 4.61 (m, 1 H, H-2); 7.00 (m, 1 H, H-7); 7.07 (m, 1 H, H-5); 7.30 (broad s, 1 H, H-8); 7.85 (m, 4H, Phth). 19 F NMR spectrum: δ = 45.43 (br s, F-6). 13 C NMR: δ = 19,88; 24.56; 25.23; 25.72; 27.62; 31.52; 33.31; 37.17; 47.48; 95.34; 112.60 (d, J = 22.2 Hz); 113.88 (d, J = 22.4 Hz); 122.88; 127.56 (d, J = 8.5 Hz); 131.51; 133.23; 134.26; 159.18 (d, J = 243.0 Hz); 167.80; 170.99. Found: C, 70.40; H, 6.13; F 4.28; N, 6.61. Calculated for C 24 H 25 FN 2 O 3 (M 408.47): C 70.57; H 6.17; F 4.65; N6.86.

(2R)-1-[6-(2-Ацетамидопурин-6-ил)аминогексаноил]-2-метил-6-фтор-1,2,3,4-тетрагидрохинолин (5е)(2R) -1- [6- (2-Acetamidopurin-6-yl) aminohexanoyl] -2-methyl-6-fluoro-1,2,3,4-tetrahydroquinoline (5e)

Выход 74%. Бесцветный порошок, т. пл. 200-202°С. [α]D 20=-137 (с 1,0, ДМФА). Ее>99%. ВЭЖХ ((S,S)-WHELK-01, МеОН-H2O 80:20): τ 20,4 мин. Спектр ЯМР 1H: δ=0,99 (д, J=6,5 Гц, 3 Н, Me); 1,27-1,34 (м, 3 Н, 2×Н-4 гексаноил и Н-3В); 1,51-1,60 (м, 4 Н, 2×Н-3 и 2×Н-5 гексаноил); 2,26 (с, 3 Н, Ас); 2,19-2,31 (м, 2 Н, Н-2 В гексаноил и Н-3А); 2,39-2,49 (м, 2 Н, Н-2А гексаноил и Н-4 В); 2,61 (д. д. д, J=15,3, 5,6, 5,6 Гц, 1 Н, Н-4А); 3,50 (м, 2 Н, 2×Н-6 гексаноил); 4,67 (д. т, J=6,6, 6,6 Гц, 1 Н, Н-2); 6,92-7,05 (м, 3 Н, NH-6 гексаноил, Н-5 и Н-8); 7,26 (д. д, J=8,7, 5,2 Гц, 1 Н, Н-7); 7,82 (с, 1 Н, Н-8 пурина); 9,05 (с, 1 Н, NH-Ac); 12,32 (уш. с, 1 Н, Н-9 пурина). Спектр ЯМР 19F: δ=45,06 (д. д. д, J=8,2, 5,9, 5,9, F-6). Спектр ЯМР 13С: δ=19,19; 23,75; 24,30; 24,59; 25,52; 28,52; 30,88; 33,12; 39,5 (перекрывается с сигналом ДМСО); 46,95; 111,89; 111,98 (д, J=22,6 Гц); 113,35 (д, J=22,4 Гц); 127,01 (д, J=8,4 Гц); 133,05; 136,29 (д, J=7,2 Гц); 137,13; 137,37; 152,28; 154,09; 158,84 (д, J=242,4 Гц); 168,83; 170,75. Найдено С 60,93; Н 6,32; F 3,97; N 21,79. Вычислено для C23H28FN7O2 (453,52): С 60,91; Н 6,22; F 4,19; N 21,62.Yield 74%. Colorless powder, mp 200-202 ° C. [α] D 20 = -137 (s 1.0, DMF). Her> 99%. HPLC ((S, S) -WHELK-01, MeOH-H 2 O 80:20): τ 20.4 min. NMR 1 H: δ = 0,99 (d, J = 6,5 Hz, 3 H, Me); 1.27-1.34 (m, 3 H, 2 × H-4 hexanoyl and H-3B); 1.51-1.60 (m, 4 H, 2 × H-3 and 2 × H-5 hexanoyl); 2.26 (s, 3 H, Ac); 2.19-2.31 (m, 2H, H-2B hexanoyl and H-3A); 2.39-2.49 (m, 2H, H-2A hexanoyl and H-4B); 2.61 (dd, J = 15.3, 5.6, 5.6 Hz, 1 H, H-4A); 3.50 (m, 2 H, 2 × H-6 hexanoyl); 4.67 (dt, J = 6.6, 6.6 Hz, 1 H, H-2); 6.92-7.05 (m, 3H, NH-6 hexanoyl, H-5 and H-8); 7.26 (dd, J = 8.7, 5.2 Hz, 1 H, H-7); 7.82 (s, 1 H, H-8 purine); 9.05 (s, 1H, NH-Ac); 12.32 (broad s, 1 H, H-9 purine). 19 F NMR spectrum: δ = 45.06 (dd, J = 8.2, 5.9, 5.9, F-6). 13 C NMR spectrum: δ = 19.19; 23.75; 24.30; 24.59; 25.52; 28.52; 30.88; 33.12; 39.5 (overlaps with the DMSO signal); 46.95; 111.89; 111.98 (d, J = 22.6 Hz); 113.35 (d, J = 22.4 Hz); 127.01 (d, J = 8.4 Hz); 133.05; 136.29 (d, J = 7.2 Hz); 137.13; 137.37; 152.28; 154.09; 158.84 (d, J = 242.4 Hz); 168.83; 170.75. Found C, 60.93; H, 6.32; F 3.97; N, 21.79. Calculated for C 23 H 28 FN 7 O 2 (453.52): C 60.91; H, 6.22; F 4.19; N, 21.62.

(2R)-1-[6-(2-Аминопурин-6-ил)аминогексаноил]-2-метил-6-фтор-1,2,3,4-тетрагидрохинолин (1е)(2R) -1- [6- (2-Aminopurin-6-yl) aminohexanoyl] -2-methyl-6-fluoro-1,2,3,4-tetrahydroquinoline (1e)

Выход 98%. Бесцветный порошок, т.пл. 95-100°С. [α]D 20=-132 (с 0,8, ДМФА). Ее>99%. ВЭЖХ ((S,S)-WHELK-01, МеОН-H2O 75:25): τ 27,2 мин. Спектр ЯМР 1Н: δ=1,00 (д, J=6,5 Гц, 3 Н, Me); 1,27-1,36 (м, 3 Н, Н-3В и 2×Н-4 гексаноил); 1,51-1,60 (м, 4 Н, 2×Н-3 и 2×Н-5 гексаноил); 2,20-2,32 (м, 2 Н, Н-2В гексаноил и Н-3А); 2,40-2,47 (м, 2 Н, Н-2 А гексаноил и Н-4 В); 2,62 (д. д. д, J=15,4, 5,6, 5,6 Гц, 1 Н, Н-4А); 3,47 (м, 2 Н, 2×Н-6 гексаноил); 4,68 (д. д. к, J=6,7, 6,6, 6,5 Гц, 1 Н, Н-2); 5,44 (уш. с, 2 Н, NH2); 6,69 (уш. с, 1 Н, NH-6 гексаноил); 6,92-7,00 (м, 2 Н, Н-5 и Н-7); 7,28 (д. д, J=8,7, 5,2 Гц, 1 Н, Н-8); 7,61 (с, 1 Н, Н-8 пурина); 11,3-12,0 (уш. с, 1 Н, Н-9 пурина). Спектр ЯМР 19F: δ=45,02-45,08 (м, F-6). Спектр ЯМР 13С: δ=19,21; 24,33; 24,62; 25,54; 28,65; 30,90; 33,15; 39,5 (перекрывается с сигналом ДМСО); 46,98; 111,77; 112,01 (д, J=22,6 Гц); 113,37 (д, J=22,6 Гц); 127,04 (д, J=8,8 Гц); 133,08 (д, J=2,5 Гц); 135,33; 136,31 (д, J=7,5 Гц); 151,77; 154,12; 158,86 (д, J=242,7 Гц); 159,04; 170,81. Масс-спектр высокого разрешения: вычислено для C21H27FN7O [М+Н]+ 412,2256; найдено 412,2261.Yield 98%. Colorless powder, mp 95-100 ° C. [α] D 20 = -132 (s 0.8, DMF). Her> 99%. HPLC ((S, S) -WHELK-01, MeOH-H 2 O 75:25): τ 27.2 min. 1 H NMR spectrum: δ = 1.00 (d, J = 6.5 Hz, 3 N, Me); 1.27-1.36 (m, 3 H, H-3B and 2 × H-4 hexanoyl); 1.51-1.60 (m, 4 H, 2 × H-3 and 2 × H-5 hexanoyl); 2.20-2.32 (m, 2H, H-2B hexanoyl and H-3A); 2.40-2.47 (m, 2 H, H-2 A hexanoyl and H-4 B); 2.62 (dd, J = 15.4, 5.6, 5.6 Hz, 1 H, H-4A); 3.47 (m, 2 H, 2 × H-6 hexanoyl); 4.68 (dd, J = 6.7, 6.6, 6.5 Hz, 1 H, H-2); 5.44 (br s, 2 H, NH 2 ); 6.69 (br s, 1 H, NH-6 hexanoyl); 6.92-7.00 (m, 2 H, H-5 and H-7); 7.28 (dd, J = 8.7, 5.2 Hz, 1 H, H-8); 7.61 (s, 1 H, H-8 purine); 11.3-12.0 (br.s, 1 H, H-9 purine). 19 F NMR spectrum: δ = 45.02-45.08 (m, F-6). 13 C NMR spectrum: δ = 19.21; 24.33; 24.62; 25.54; 28.65; 30.90; 33.15; 39.5 (overlaps with the DMSO signal); 46.98; 111.77; 112.01 (d, J = 22.6 Hz); 113.37 (d, J = 22.6 Hz); 127.04 (d, J = 8.8 Hz); 133.08 (d, J = 2.5 Hz); 135.33; 136.31 (d, J = 7.5 Hz); 151.77; 154.12; 158.86 (d, J = 242.7 Hz); 159.04; 170.81. High-resolution mass spectrum: calculated for C 21 H 27 FN 7 O [M + H] + 412.2256; found 412.2261.

Пример 6. Аналогично примеру 1 из соединения 3f получают соединение 1f через промежуточные соединения 4f и 5f.Example 6. Analogously to example 1 from compound 3f receive compound 1f through intermediate compounds 4f and 5f.

(2S)-2-Метил-1-(6-фталимидогексаноил)-6-фтор-1,2,3,4-тетрагидрохинолин (4f)(2S) -2-Methyl-1- (6-phthalimidohexanoyl) -6-fluoro-1,2,3,4-tetrahydroquinoline (4f)

Выход 77%. Бесцветное масло. [α]D 20=+171 (с 1,0, CHCl3). Ее>99%. ВЭЖХ (Chiralcel OD-H, н-гексан-iPrOH-МеОН 10: 0,8: 0,2): τ 19,6 мин. Спектры ЯМР 1Н, 19F и 13С идентичны спектрам соединения 4е (Пример 5). Найдено: С 70,45; Н 6,25; F 4,55; N 6,84. Вычислено для C24H25FN2O3 (М 408,47): С 70,57; Н 6,17; F 4,65; N 6,86.Yield 77%. Colorless oil. [α] D 20 = + 171 (c 1.0, CHCl 3 ). Her> 99%. HPLC (Chiralcel OD-H, n-hexane-iPrOH-MeOH 10: 0.8: 0.2): τ 19.6 min. 1 H, 19 F and 13 C NMR spectra are identical to the spectra of compound 4e (Example 5). Found: C, 70.45; H, 6.25; F 4.55; N, 6.84. Calculated for C 24 H 25 FN 2 O 3 (M 408.47): C 70.57; H 6.17; F 4.65; N, 6.86.

(2S)-1-[6-(2-Ацетамидопурин-6-ил)аминогексаноил]-2-метил-6-фтор-1,2,3,4-тетрагидрохинолин (5f)(2S) -1- [6- (2-Acetamidopurin-6-yl) aminohexanoyl] -2-methyl-6-fluoro-1,2,3,4-tetrahydroquinoline (5f)

Выход 86%. Бесцветный порошок, т.пл. 198-201°С. [α]D 20=+137 (с 1,0, ДМФА). Ее>99%. ВЭЖХ ((S,S)-WHELK-01, МеОН-H2O 80: 20): τ 16,0 мин. Спектры ЯМР 1Н, 19F и 13С идентичны спектрам соединения 5е (Пример 5). Масс-спектр высокого разрешения: вычислено для C23H28FN7O2 [М+Н]+ 454,2361; найдено 454,2363.Yield 86%. Colorless powder, mp 198-201 ° C. [α] D 20 = + 137 (c 1.0, DMF). Her> 99%. HPLC ((S, S) -WHELK-01, MeOH-H 2 O 80: 20): τ 16.0 min. 1 H, 19 F and 13 C NMR spectra are identical to the spectra of compound 5e (Example 5). High-resolution mass spectrum: calculated for C 23 H 28 FN 7 O 2 [M + H] + 454.2361; found 454.2363.

(2S)-1-[6-(2-Аминопурин-6-ил)аминогексаноил]-2-метил-6-фтор-1,2,3,4-тетрагидрохинолин (1f)(2S) -1- [6- (2-Aminopurin-6-yl) aminohexanoyl] -2-methyl-6-fluoro-1,2,3,4-tetrahydroquinoline (1f)

Выход 70%. Бесцветный порошок, т.пл. 94-98°С. [α]D 20=+140 (с 0,7, ДМФА). Ее>99%. ВЭЖХ ((S,S-WHELK-01, МеОН-H2O 75:25): τ 21,7 мин. Спектры ЯМР идентичны спектрам соединения 1е (Пример 5). Масс-спектр высокого разрешения: вычислено для C21H27FN7O [М+Н]+ 412,2256; найдено 412,2258.Yield 70%. Colorless powder, mp 94-98 ° C. [α] D 20 = + 140 (c 0.7, DMF). Her> 99%. HPLC ((S, S-WHELK-01, MeOH-H 2 O 75:25): τ 21.7 min. NMR spectra are identical to those of compound 1e (Example 5). High resolution mass spectrum: calculated for C 21 H 27 FN 7 O [M + H] + 412.2256; found 412.2258.

Биологическая активностьBiological activity

Новые соединения исследованы в лаборатории Института общей генетики им. Н.И. Вавилова РАН (ИОГен РАН), г. Москва.New compounds were investigated in the laboratory of the Institute of General Genetics. N.I. Vavilova RAS (IOGEN RAS), Moscow.

Изучение противоопухолевой активности в опытах in vitro соединений проводились с использованием МТТ-теста на модели линии клеток НТ-29 (карцинома толстой кишки). МТТ-тест основан на способности дегидрогеназ живых клеток восстанавливать неокрашенные формы 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразола (МТТ-реагента) до голубого кристаллического формазана, растворимого в диметилсульфоксиде, с последующей спектрофотометрией. Восстановление клетками нитросинего тетразолия показывает метаболическую активность дегидрогеназ и является адекватным показателем жизнеспособности клеток в культуре, что позволяет оценить специфическую гибель клеток, вызванную тем или иным цитотоксическим агентом.The study of antitumor activity in in vitro experiments of compounds was carried out using the MTT test on the model of the cell line HT-29 (colon carcinoma). The MTT test is based on the ability of living cell dehydrogenases to restore unpainted forms of 3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyltetrazole (MTT reagent) to a blue crystalline formazan soluble in dimethyl sulfoxide, followed by spectrophotometry. The restoration of nitrosine tetrazolium by cells shows the metabolic activity of dehydrogenases and is an adequate indicator of cell viability in culture, which allows one to evaluate the specific cell death caused by one or another cytotoxic agent.

Все соединения растворяли в ДМСО до концентрации 500 мг/мл. Каждое соединение исследовали в концентрациях от 0,005 до 5 мг/мл в 3 повторностях. Культуру инкубировали при 37°С и 5% СО2 в течение 72 часов, после чего среду удаляли, в лунки вносили 200 мкл ростовой среды без сыворотки, добавляли 20 мкл готового раствора МТТ (исходная концентрация 5 мг/мл в фосфатном буфере). О жизнеспособности клеток судили по цветной реакции, развивающейся при восстановлении тетразолия в формазан дегидрогеназами митохондрий. Окраску регистрировали на ридере DTX 880 (Multimode Detector) при длине волны возбуждения 595 нм. Оптическую плотность в лунках, где клетки инкубировались только со средой (контроль), принимали за 100%. Индекс цитотоксичности (IC) рассчитывали по формуле:All compounds were dissolved in DMSO to a concentration of 500 mg / ml. Each compound was tested in concentrations from 0.005 to 5 mg / ml in 3 replicates. The culture was incubated at 37 ° C and 5% CO 2 for 72 hours after which the medium was removed, the wells were added 200 ul of growth medium without serum, was added 20 .mu.l of the finished MTT solution (initial concentration 5 mg / ml in phosphate buffer). Cell viability was judged by the color reaction that develops when tetrazolium is reduced to formazan by mitochondrial dehydrogenases. The color was recorded on a DTX 880 reader (Multimode Detector) at an excitation wavelength of 595 nm. The optical density in the wells, where the cells were incubated only with the medium (control), was taken as 100%. The cytotoxicity index (IC) was calculated by the formula:

IC=(K-О)+100%/K,IC = (K-O) + 100% / K,

где К - контроль; О - опыт.where K is the control; Oh - experience.

Полученные данные представлены в таблице 1.The data obtained are presented in table 1.

В результате экспериментов определены ингибирующие концентрации (IC-50, мкг/мл) конъюгатов 2-аминопурина с энантиомерно чистыми гетероциклическими аминами 1a,c-f (табл. 1). Установлено, что изученные соединения проявили высокую цитотоксическую активность на модели линии клеток НТ-29, для наиболее активного соединения IC-50 менее 1 мкг/мл и отсутствие токсичности в отношении фибробластов эмбриона человека (ФЭЧ) IC-50 более 50 мкг/мл. Как видно из данных, представленных в табл. 1, противоопухолевая активность существенным образом зависит от стереоконфигурации фрагмента гетероциклического амина.As a result of the experiments, inhibitory concentrations (IC-50, μg / ml) of 2-aminopurine conjugates with enantiomerically pure heterocyclic amines 1a, c-f were determined (Table 1). It was established that the studied compounds showed high cytotoxic activity in the model of the NT-29 cell line, for the most active compound IC-50 less than 1 μg / ml and the absence of toxicity to fibroblasts of human embryo (ECF) IC-50 more than 50 μg / ml. As can be seen from the data presented in table. 1, the antitumor activity substantially depends on the stereo configuration of the heterocyclic amine fragment.

Figure 00000005
Figure 00000005

Производные 2-аминопурина общей формулы 1, включающие остатки энантиомерно чистых хиральных гетероциклических аминов и остаток 6-аминокапроновой кислоты в качестве линкера, отличаются высокой противоопухолевой активностью и низкой токсичностью. При этом биологическая активность зависит как от структуры фрагмента гетероциклического амина, так и от стереоконфигурации. Предложен удобный способ получения соединений общей формулы 1 в оптически чистом виде, предусматривающий использование легкодоступных реагентов, отличающийся простотой проведения синтетических операций и высоким выходом на каждой стадии.Derivatives of 2-aminopurine of the general formula 1, including residues of enantiomerically pure chiral heterocyclic amines and the residue of 6-aminocaproic acid as a linker, are characterized by high antitumor activity and low toxicity. In this case, the biological activity depends both on the structure of the heterocyclic amine fragment and on the stereo configuration. A convenient method is proposed for the preparation of compounds of general formula 1 in optically pure form, involving the use of readily available reagents, characterized by the simplicity of synthetic operations and a high yield at each stage.

Claims (3)

1. Амиды N-(2-аминопурин-6-ил)-6-аминокапроновой кислоты общей формулы 1
Figure 00000006
(1)
где (1a) R=Me, R'=H, X=O, Y=Z=F;
(1b) R=H, R'=Me, X=O, Y=Z=F;
(1c) R=Me, R'=H, X=CH2, Y=Z=H;
(1d) R=H, R'=Me, X=CH2, Y=Z=H;
(1e) R=Me, R'=H, X=CH2, Y=Z=F;
(1f) R=H, R'=Me, X=CH2, Y=Z=F.1. Amides of N- (2-aminopurin-6-yl) -6-aminocaproic acid of the general formula 1
Figure 00000006
(one)
where (1a) R = Me, R '= H, X = O, Y = Z = F;
(1b) R = H, R '= Me, X = O, Y = Z = F;
(1c) R = Me, R '= H, X = CH 2 , Y = Z = H;
(1d) R = H, R '= Me, X = CH 2 , Y = Z = H;
(1e) R = Me, R '= H, X = CH 2 , Y = Z = F;
(1f) R = H, R '= Me, X = CH 2 , Y = Z = F. 2. Соединения формулы 1 по п. 1, обладающие противоопухолевой активностью.2. The compounds of formula 1 according to claim 1, having antitumor activity. 3. Способ получения амидов N-(2-аминопурин-6-ил)-6-аминокапроновой кислоты по п. 1 путем ацилирования соответствующих энантиомерно чистых хиральных гетероциклических аминов общей формулы
Figure 00000007

где X, Y, Z, R и R′ имеют вышеуказанные значения, хлорангидридом 6-фталимидокапроновой кислоты, удаления фталоильной защитной группы под действием гидразин гидрата, нуклеофильного замещения полученными соединениями атома хлора в 2-ацетамидо-6-хлорпурине и последующего щелочного гидролиза ацетильной группы в полученном продукте. 3. The method of producing amides of N- (2-aminopurin-6-yl) -6-aminocaproic acid according to claim 1 by acylation of the corresponding enantiomerically pure chiral heterocyclic amines of the general formula
Figure 00000007

where X, Y, Z, R and R ′ have the above meanings, 6-phthalimidocaproic acid chloride, removal of the phthaloyl protecting group by hydrazine hydrate, nucleophilic substitution of the resulting chlorine atom compounds in 2-acetamido-6-chloropurine, and subsequent alkaline hydrolysis of the acetyl group in the resulting product.
RU2015101582/04A 2015-01-21 2015-01-21 Amides of n-(2-aminopurin-6-yl)-6-aminocaproic acid, having anti-tumour activity and synthesis method thereof RU2599577C2 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2015101582/04A RU2599577C2 (en) 2015-01-21 2015-01-21 Amides of n-(2-aminopurin-6-yl)-6-aminocaproic acid, having anti-tumour activity and synthesis method thereof

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2015101582/04A RU2599577C2 (en) 2015-01-21 2015-01-21 Amides of n-(2-aminopurin-6-yl)-6-aminocaproic acid, having anti-tumour activity and synthesis method thereof

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2015101582A RU2015101582A (en) 2016-08-10
RU2599577C2 true RU2599577C2 (en) 2016-10-10

Family

ID=56612655

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2015101582/04A RU2599577C2 (en) 2015-01-21 2015-01-21 Amides of n-(2-aminopurin-6-yl)-6-aminocaproic acid, having anti-tumour activity and synthesis method thereof

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2599577C2 (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2760305C1 (en) * 2021-04-26 2021-11-23 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт органического синтеза им. И.Я. Постовского Уральского отделения Российской академии наук (ИОС УрО РАН) 4-[(purin-6-yl)aminopolymethylenecarbonyl]-derivatives of 3,4-dihydro-3-methyl-7,8-difluoro-2h-[1,4]benzoxazine with antitumor activity

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2447891C2 (en) * 2006-04-05 2012-04-20 Новартис Аг Combinations of therapeutic agents applicable for treating cancer

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2447891C2 (en) * 2006-04-05 2012-04-20 Новартис Аг Combinations of therapeutic agents applicable for treating cancer

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
& RU 2570113 C1. *
MARC T CACILLA et al., Discovery of an Aurora Kinase Inhibitor Through Site- Specific Dinamic Combinatorial Chemistry, Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, 2008, 18, no.14, pp.3978-3981. *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2760305C1 (en) * 2021-04-26 2021-11-23 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт органического синтеза им. И.Я. Постовского Уральского отделения Российской академии наук (ИОС УрО РАН) 4-[(purin-6-yl)aminopolymethylenecarbonyl]-derivatives of 3,4-dihydro-3-methyl-7,8-difluoro-2h-[1,4]benzoxazine with antitumor activity

Also Published As

Publication number Publication date
RU2015101582A (en) 2016-08-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US9329191B2 (en) Reaction-based fluorescent probe for selective detection of carbon monoxide using metal-mediated carbonylation
CN107200706A (en) Cyclopropylamine class compound of one class fluorine substitution and preparation method thereof, pharmaceutical composition and purposes
Ajay et al. Synthesis and bio-evaluation of alkylaminoaryl phenyl cyclopropyl methanones as antitubercular and antimalarial agents
WO2010042489A2 (en) Aminoquinoline derived heat shock protein 90 inhibitors, methods of preparing same, and methods for their use
KR20140106750A (en) Benzyl sulfonamide derivatives useful as mogat-2 inhibitors
Lopes et al. Design, synthesis, cholinesterase inhibition and molecular modelling study of novel tacrine hybrids with carbohydrate derivatives
Zhao et al. Synthesis, biological evaluation, and molecular docking studies of 2, 6-dinitro-4-(trifluoromethyl) phenoxysalicylaldoxime derivatives as novel antitubulin agents
WO2015179366A1 (en) Serotonin receptor-targeting compounds and methods
RU2599577C2 (en) Amides of n-(2-aminopurin-6-yl)-6-aminocaproic acid, having anti-tumour activity and synthesis method thereof
Maguene et al. Synthesis and in vitro antiplasmodial activity of ferrocenyl aminoquinoline derivatives
US6693091B2 (en) Analogs of terpene trilactones from Ginkgo biloba for bioorganic and imaging studies
WO2008103367A9 (en) Method for assembling high-purity chemical libraries, proapoptotic compounds discovered by same
Kaushik et al. Synthesis of quinoline based molecular probes for detection of nitric oxide
US20240342317A1 (en) Heterocyclic compounds and imaging agents for imaging huntingtin protein
JP2000247971A (en) Febrifugine and isofebrifugine and their production
McLoughlin et al. Synthesis by diastereomeric resolution, biochemical evaluation and molecular modelling of chiral 3-hydroxyl b-lactam microtubule-targeting agents for the treatment of triple negative breast and chemoresistant colorectal cancers
JP6685546B2 (en) Fluorescent substance for dopamine detection
EP3831888B1 (en) Drug that reacts with acrolein, use thereof and novel compound
EP2228363A1 (en) Kit for use in production of molecular probe for pet drug screening
CN110563701B (en) N-2-pyrimidine-2-azido-3- (2,2,6, 6-tetramethylpiperidinyloxy) indoline and preparation and application thereof
JP6831496B2 (en) Crystals of benzoxazole derivatives
JPH02115166A (en) Pyridylketoxime ether derivative and medicine composition containing the same
JP3624214B2 (en) Fluorescent probe for magnesium ion measurement
AU2020388974A1 (en) Macrocyclic sulfonyl derivatives as MCL-1 inhibitors
JP2016193897A (en) Ph dependent fluorescence compound

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20170122