RU2596487C1 - Способ оценки снижения количества эстрадиола в связи со снижением содержания андростендиона в синцитиотрофобласте плаценты на фоне обострения цитомегаловирусной инфекции на третьем триместре беременности - Google Patents
Способ оценки снижения количества эстрадиола в связи со снижением содержания андростендиона в синцитиотрофобласте плаценты на фоне обострения цитомегаловирусной инфекции на третьем триместре беременности Download PDFInfo
- Publication number
- RU2596487C1 RU2596487C1 RU2015129877/15A RU2015129877A RU2596487C1 RU 2596487 C1 RU2596487 C1 RU 2596487C1 RU 2015129877/15 A RU2015129877/15 A RU 2015129877/15A RU 2015129877 A RU2015129877 A RU 2015129877A RU 2596487 C1 RU2596487 C1 RU 2596487C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- androstenedione
- reduction
- placental
- content
- placenta
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для оценки угрозы нарушения формирования фетоплацентарной системы и развития плода в период гестации при снижении количества эстрадиола в связи со снижением содержания андростендиона в синцитиотрофобласте плаценты на фоне обострения цитомегаловирусной инфекции на третьем триместре беременности. Для этого в периферической крови определяют титр антител к цитомегаловирусу, выполняют гистохимическую реакцию на андростендиондегидрогеназу в синцитиотрофобласте ворсинок плаценты роженицы, измеряют количество эстрадиола в гомогенате плаценты, и при титре антител класса G к цитомегаловирусу 1:1600, снижении активности реакции на андростендиондегидрогеназу до 32,1±2,88 усл. ед., уменьшении содержания эстрадиола в плаценте до 18443,2±117,53 пмоль/л определяют угрозу нарушения формирования фетоплацентарной системы и развития плода в период гестации. Способ позволяет оценить угрозу нарушения формирования фетоплацентарной системы и развития плода при простоте его исполнения. 2 ил.
Description
1. Цель изобретения - оценить характер влияния цитомегаловирусной инфекции на третьем триместре гестации на содержание андростендиона в синцитиотрофобласте ворсинок плаценты, влияющего на количество эстрадиола в гомогенате плаценты роженицы, приводящей к нарушению формирования фетоплацентарной системы и развития плода в период гестации.
2. Изобретение относится к медицине, а именно к разработке способа определения снижения содержания андростендиона в синцитиотрофобласте ворсинок плаценты, влияющего на снижение количества эстрадиола в гомогенате плаценты роженицы при обострении цитомегаловирусной инфекции в третьем триместре беременности.
3. Раскрытие изобретения
Во время беременности образуется большое количество эстрогенов, необходимых для функционального созревания плаценты и плода. Эстрадиол влияет на эндотелий сосудов плаценты через увеличение продукции вазодилататоров, параллельно препятствуя действию традиционных вазоконстрикторов [5]. Он также регулируют развитие надпочечников, легких, почек, печени, костной ткани и яичника плода в конце беременности [2, 6]. Снижение количества эстрадиола окажет влияние на развитие плода.
Биосинтез эстрадиола проходит в фетоплацентарном комплексе через образование ряда промежуточных веществ, включая андрогены - одним из которых является андростендион. В плаценте основное количество андростендиона превращается в эстрон и далее в эстрадиол [8]. Поэтому уменьшение количества андростендиона приведет к нарушению формирования эстрадиола в фетоплацентарной системе, оказывающее влияние на развитие плода.
4. Новая техническая задача
Определить количество эстрадиола в зависимости от уровня содержания андростендиона в синцитиотрофобласте ворсинок при обострении цитомегаловирусной инфекции на третьем триместре гестации с целью оценки характера состояния фетоплацентарного барьера во время беременности, от чего зависит нормальное развитие плода.
5. В доступной литературе имеются упоминания об изучении содержания в плаценте либо эстрадиола [4], либо андростендиона [3, 7] с использованием радиоактивных веществ. Существуют совместные исследования андростендиона и эстрадиола при физиологической беременности, выполняемые биохимическими методами в плазме периферической крови [9]. Недостатком вышеупомянутых методов является необходимость дорогостоящей регистрирующей аппаратуры и реактивов: радиоактивных веществ, имеющих короткий срок хранения; соблюдение усиленных мер по технике безопасности, связанных с радиационным риском для персонала и окружающей среды. Биохимические методы не дают представления о месте локализации вещества.
В отличие от вышеприведенных прототипов в данной работе имеются существенные отличия: 1. Изменения содержания эстрадиола и андростендиона происходят под влиянием обострения цитомегаловирусной инфекции во время беременности. 2. Анализ содержания андростендиона проводится с помощью гистохимической реакции в синцитиотрофобласте плаценты роженицы, в качестве субстрата используется андростендион.
6. Осуществление изобретения
6.1. Обследованы 38 беременных женщин 18-25 лет с обострением хронической цитомегаловирусной инфекции в третьем триместре гестации, контрольную группу составили 30 беременных женщин с хронической цитомегаловирусной инфекцией в латентной стадии. У беременных женщин симптоматически цитомегаловирусная инфекция проявлялась в виде острого респираторного заболевания, сопровождающегося ринофарингитом. Клинический диагноз (обострение хронической цитомегаловирусной инфекции) устанавливается по результатам комплексного исследования периферической крови на наличие ДНК цитомегаловируса (ЦМВ), JgM или увеличение титра антител JgG в парных сыворотках (в 4 раза и более) в динамике через 10 суток, а также индекса авидности (более 65%). Исследования проводят с учетом требований Хельсинской декларации Всемирной медицинской ассоциации «Этические принципы проведения научных исследований с участием человека» с поправками 2008 г. и правилами клинической практики в РФ, утвержденными приказом Министерства РФ №266 от 19.06.2003 г.
6.2. Верификацию ЦМВ, определение типоспецифических антител, индекса авидности осуществляют методами ИФА на спектрофотометре «Stat Fax-2100» с использованием тест-систем ЗАО «Вектор-Бест» (Новосибирск), ДНК ЦМВ выявляют методами ПЦР на аппарате ДТ-96 с использованием наборов НПО «ДНК-технология» (Москва).
6.3. Активность андростендиондегидрогеназы гистохимически определяют на криостатных срезах свежезамороженной нефиксированной ткани плаценты следующим методом. Метод основан на восстановлении соли тетразолия в формазан электронами, акцептируемыми от субстрата через кофермент НАДФ [1]. Субстратом служит 2 мМ раствор андростендиона «Sigma» (США). Для его приготовления 6 мг 4-андростен-3,17-диона растворяют в 10 мл N,N-диметилформамида. Инкубационный раствор готовится на основе 0,1 М фосфатного буфера рН 7,2-7,4 с добавлением нитросинего тетразолия фирмы «ICN Biomedicals)) (США) в конечной концентрации 5 мМоль, НАДФ+ фирмы «Applichem» (Германия) - 1 мМоль.
Состав инкубационной среды:
0,1 М фосфатный буфер рН 7,2-7,4 - 1 мл;
нитросиний тетразолий - 1 мг;
НАДФ+ - 1 мг;
2 мМ раствор андростендиона - 0,1 мл.
6.4. В 1 мл инкубационного раствора помещают свежеприготовленные срезы ткани. Инкубацию проводят при 37°С в течение 30 минут. По окончании инкубации срезы промывают дистиллированной водой, фиксируют в 10%-м нейтральном формалине при комнатной температуре, вновь промывают дистиллированной водой, подсушивают и заключают в глицерин-желатин. Контрольные срезы инкубировали в среде, содержащей вместо раствора андростендиона адекватное количество фосфатного буфера. Полученные гистологические препараты изучают цитофотометрическим компьютерным методом с помощью программы Scion (США) на цифровом микроскопе MEIJI (Япония).
6.5. Содержание эстрадиола в плацентарном гомогенате исследовали методом иммуноферментного анализа, используя наборы фирмы «DRG» (США) на спектрофотометре «StatFax 2100» (США).
6.6. Статистический анализ и обработка данных проводится с использованием пакета прикладных программ «Statistica 6.0». Характеристика вариационных рядов: средняя арифметическая (М), стандартная ошибка (m), коэффициент вариации 95%, доверительный интервал для средних значений М±m, где t определялось по таблице граничных значений критерия Стьюдента при доверительном уровне 95% и числе степеней свободы F=n1+n2-2. Для определения достоверности различий используется непарный параметрический критерий Стьюдента. Принимаются во внимание р<0,05; 0,01; 0,001. Для определения достоверности различий в случае негауссовых распределений - непараметрические критерии Колмогорова-Смирнова и Манна-Уитни.
7. Полученные данные
В процессе исследования получены следующие результаты. На гистохимических препаратах плаценты беременных, перенесших обострение хронической цитомегаловирусной инфекции в третьем триместре гестации, при регистрации роста титра антител класса G к цитомегаловирусу до 1:1600 отмечается снижение активности реакции, отражающей содержание андростендиона до 32,1±2,88 усл. ед. (контроль - 54,2±4,31 усл. ед.) (фигура 1, 2). Одновременно, в гомогенате плаценты роженицы содержание эстрадиола составляет 18443,2±117,53 пмоль/л (контроль - 28977,7±158,13 пмоль/л). Таким образом, снижение содержания андростендиона в синцитиотрофобласте ворсинок плаценты при нарастании титра антител класса G к цитомегаловирусу 1:1600 приводит к (указывает на) уменьшению содержания эстрадиола в гомогенате плаценты, что создает угрозу нарушения формирования фетоплацентарной системы и развития плода в период гестации.
На фигуре 1 изображена гистохимическая реакция на андростендиондегидрогеназу в плаценте роженицы, перенесшей на третьем триместре гестации обострение цитомегаловирусной инфекции с титром антител класса G 1:1600. Отмечается снижение активности гистохимической реакции до 32,1±2,88 усл. ед. Увеличение - 10×40.
На фигуре 2 изображена гистохимическая реакция на андростендиондегидрогеназу в плаценте роженицы, не болевшей на всем протяжении гестации. Интенсивность гистохимической реакции - 54,2±4,31 усл. ед. Увеличение - 10×40.
8. Литература
1. Лойда З., Госсрау Р., Шиблер Т. Гистохимия ферментов. Лабораторные методы: пер. с англ. М.: Мир, 1982. 272 с.
2. Albrecht E.D., Рере G.J. Central integrative role of oestrogen in modulating the communication between the placenta and fetus that results in primate fetal-placental development // Placenta. 1999. Vol. 20, Is. 2. P. 129-139.
3. Hähnel M.E., Martin J.D., Michael C.A., Hähnel R. Metabolism of androstenedione by placental microsomes in pregnancy hypertension // Clin. Chim. Acta. 1989. Vol. 81, №1. P. 103-108.
4. Lenz Т., Sealey J.E., August P., James G.D., Laragh J.H. Tissue levels of active and total renin, angiotensinogen, human chorionic gonadotropin, estradiol, and progesterone in human placentas from different methods of delivery // J. Clin. Endocrinol. Metab. 1989. Vol. 69, №1. p. 31-37.
5. Miller V.M., Duckles S.P. Vascular Actions of Estrogens: Functional Implications // Pharmacol. Rev. 2008. Vol. 60, №2. P. 210-241.
6. Pepe G.J., Albrecht E.D. Central integrative role of oestrogen in the regulation of placental steroidogenic maturation and the development of the fetal pituitary-adrenocortical axis in the baboon // Hum. Reprod. Update. 1998. Vol. 4, №4. P. 406-419.
7. Rahman S.A., Hingorani V., Laumas K.R. Biosynthesis of oestrogens and their inter-conversion in human placentae from normal and toxaemic pregnancies // Clin. Endocrinol. (Oxf). 1975. Vol. 4, №4. P. 333-341.
8. Strauss J.F., Martinez F., Kiriakidou M. Placental steroid hormone synthesis: unique features and unanswered questions // Biol. Reprod. 1996 Vol. 54, №2. P. 303-311.
9. Yu H.K., Cabalum Т., Jansen C.A., Buster J.E., Nathanielsz P.W. Androstenedione, testosterone, and estradiol concentrations in fetal and maternal plasma in late pregnancy in the sheep // Endocrinology. 1983. Vol. 113, №6. P. 2216-2220.
Claims (1)
- Способ оценки угрозы нарушения формирования фетоплацентарной системы и развития плода в период гестации при снижении количества эстрадиола в связи со снижением содержания андростендиона в синцитиотрофобласте плаценты на фоне обострения цитомегаловирусной инфекции на третьем триместре беременности, включающий определение в периферической крови титра антител к цитомегаловирусу, выполнение гистохимической реакции на андростендиондегидрогеназу в синцитиотрофобласте ворсинок плаценты роженицы, измерение количества эстрадиола в гомогенате плаценты, и при титре антител класса G к цитомегаловирусу 1:1600, снижении активности реакции на андростендиондегидрогеназу до 32,1±2,88 усл. ед., уменьшении содержания эстрадиола в плаценте до 18443,2±117,53 пмоль/л определяют угрозу нарушения формирования фетоплацентарной системы и развития плода в период гестации.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015129877/15A RU2596487C1 (ru) | 2015-07-20 | 2015-07-20 | Способ оценки снижения количества эстрадиола в связи со снижением содержания андростендиона в синцитиотрофобласте плаценты на фоне обострения цитомегаловирусной инфекции на третьем триместре беременности |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015129877/15A RU2596487C1 (ru) | 2015-07-20 | 2015-07-20 | Способ оценки снижения количества эстрадиола в связи со снижением содержания андростендиона в синцитиотрофобласте плаценты на фоне обострения цитомегаловирусной инфекции на третьем триместре беременности |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2596487C1 true RU2596487C1 (ru) | 2016-09-10 |
Family
ID=56892625
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2015129877/15A RU2596487C1 (ru) | 2015-07-20 | 2015-07-20 | Способ оценки снижения количества эстрадиола в связи со снижением содержания андростендиона в синцитиотрофобласте плаценты на фоне обострения цитомегаловирусной инфекции на третьем триместре беременности |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2596487C1 (ru) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2306564C1 (ru) * | 2006-05-10 | 2007-09-20 | ГОУ ВПО "Красноярская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" | Способ диагностики хронической фетоплацентарной недостаточности |
| US20080096795A1 (en) * | 1997-05-13 | 2008-04-24 | The Regents Of The University Of California | Novel Antiangiogenic Peptide Agents and Their Therapeutic and Diagnostic Use |
-
2015
- 2015-07-20 RU RU2015129877/15A patent/RU2596487C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20080096795A1 (en) * | 1997-05-13 | 2008-04-24 | The Regents Of The University Of California | Novel Antiangiogenic Peptide Agents and Their Therapeutic and Diagnostic Use |
| RU2306564C1 (ru) * | 2006-05-10 | 2007-09-20 | ГОУ ВПО "Красноярская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" | Способ диагностики хронической фетоплацентарной недостаточности |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| ЛУЦЕНКО М.Т. и др. "Морфофункциональная характеристика фетоплацентарного комплекса у беременных, перенесших обострение герпес-вирусной инфекции, и патоморфологические изменения в органах плода"// Архив патологии, 2010, том 72, n.4,с.47-49. * |
| ЛУЦЕНКО М.Т. и др. "Морфофункциональная характеристика фетоплацентарного комплекса у беременных, перенесших обострение герпес-вирусной инфекции, и патоморфологические изменения в органах плода"// Архив патологии, 2010, том 72, n.4,с.47-49. KAMILOVA N et al. Diagnostic indices of fetoplacental complex in pregnancy assessment of women with genital infections// Georgian Med News. 2008 Nov;(164):23-7. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Sathyanarayana et al. | Phthalate exposure and reproductive hormone concentrations in pregnancy | |
| Zong et al. | Increased risk of maternal and neonatal complications in hormone replacement therapy cycles in frozen embryo transfer | |
| Fanchin et al. | Per-follicle measurements indicate that anti-müllerian hormone secretion is modulated by the extent of follicular development and luteinization and may reflect qualitatively the ovarian follicular status | |
| Canisso et al. | Changes in maternal androgens and oestrogens in mares with experimentally‐induced ascending placentitis | |
| Hart et al. | The possible impact of antenatal exposure to ubiquitous phthalates upon male reproductive function at 20 years of age | |
| Feng et al. | Impacts of different methods of conception on the perinatal outcome of intrahepatic cholestasis of pregnancy in twin pregnancies | |
| Daan et al. | Endocrine and cardiometabolic cord blood characteristics of offspring born to mothers with and without polycystic ovary syndrome | |
| Conley et al. | Steroids in the establishment and maintenance of pregnancy and at parturition in the mare | |
| Koh et al. | Proteome profiling of exosomes derived from plasma of heifers with divergent genetic merit for fertility | |
| Lutterodt et al. | Anti-Müllerian hormone in pregnant women in relation to other hormones, fetal sex and in circulation of second trimester fetuses | |
| Canisso et al. | Biomarkers for placental disease in mares | |
| Ayakannu et al. | Expression and function of the endocannabinoid modulating enzymes fatty acid amide hydrolase and N-acylphosphatidylethanolamine-specific phospholipase D in endometrial carcinoma | |
| Eilertsen et al. | Increased prevalence of diabetes and polycystic ovary syndrome in women with a history of preterm birth: a case–control study | |
| Rahim et al. | Safety and efficacy of in vitro fertilisation in patients with chronic liver disease and liver transplantation recipients | |
| Ayakannu et al. | New insights of uterine leiomyoma pathogenesis: endocannabinoid system | |
| Seol et al. | 2-methoxyoestradiol levels and placental catechol-O-methyltransferase expression in patients with late-onset preeclampsia | |
| Oztekin et al. | The impact of body mass index on reproductive hormones, testosterone/estradiol ratio and semen parameters | |
| Evans et al. | In vitro oestrogen synthesis by bovine placenta during pregnancy and induced parturition | |
| Wang et al. | Predictive values of various serum biomarkers in women with suspected preeclampsia: A prospective study | |
| Tokmak et al. | The value of prostate-specific antigen in diagnosis of polycystic ovarian syndrome in adolescent girls | |
| Slayden et al. | Hormonal regulation of oviductal glycoprotein 1 (OVGP 1; MUC 9) in the rhesus macaque cervix | |
| Petraitiene et al. | Sex hormones, gonad size, and metabolic profile in adolescent girls born small for gestational age with catch-up growth | |
| Kasahara et al. | Very low levels of serum anti-Müllerian hormone as a possible marker for follicle growth in patients with primary ovarian insufficiency under hormone replacement therapy | |
| RU2596487C1 (ru) | Способ оценки снижения количества эстрадиола в связи со снижением содержания андростендиона в синцитиотрофобласте плаценты на фоне обострения цитомегаловирусной инфекции на третьем триместре беременности | |
| Kim et al. | Gene expression and localization of 20α-hydroxysteroid dehydrogenase (HSD) in reproductive tissues during early pregnancy of cattle |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20170721 |