RU2596405C1 - METHOD FOR CULTURING Pseudomonas BACTERIA - Google Patents
METHOD FOR CULTURING Pseudomonas BACTERIA Download PDFInfo
- Publication number
- RU2596405C1 RU2596405C1 RU2015114832/10A RU2015114832A RU2596405C1 RU 2596405 C1 RU2596405 C1 RU 2596405C1 RU 2015114832/10 A RU2015114832/10 A RU 2015114832/10A RU 2015114832 A RU2015114832 A RU 2015114832A RU 2596405 C1 RU2596405 C1 RU 2596405C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- titanium dioxide
- bacteria
- nutrient medium
- cultivation
- genus pseudomonas
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области сельского хозяйства и химии и может быть использовано при производстве биотехнологических продуктов в экологической и сельскохозяйственной биотехнологии (производство биоудобрений, биопрепаратов для защиты растений, производство биополимеров, белка одноклеточных, очистка сточных вод, производство биопрепаратов для рекультивации загрязненных территорий и т.д.).The invention relates to the field of agriculture and chemistry and can be used in the production of biotechnological products in environmental and agricultural biotechnology (production of biofertilizers, biological products for plant protection, production of biopolymers, unicellular protein, wastewater treatment, production of biological products for the restoration of contaminated areas, etc. .).
В настоящее время наибольшая стоимость питательных сред при производстве различных биотехнологических продуктов приходится на источники углерода и энергии (энергетический субстрат), при этом, среди перечня критериев эффективности биотехнологического производства, наибольшая роль уделяется экономическому коэффициенту. Экономический коэффициент показывает, какая часть субстрата перешла в биомассу, чем он выше, тем эффективнее микроорганизмы утилизируют субстрат, тем выше выход их биомассы и численности с 1 г потребленного субстрата, тем меньше себестоимость готовой продукции. Поэтому разработка способов и методов уменьшения затрат субстрата при увеличении выхода продукции является одной из основных задач биотехнологии на протяжении всего существования данной науки. Особенно остро этот вопрос возник на современном этапе развития человечества и связан с исчерпанием традиционных субстратов.Currently, the highest cost of nutrient media in the production of various biotechnological products falls on sources of carbon and energy (energy substrate), while, among the list of criteria for the effectiveness of biotechnological production, the largest role is given to the economic coefficient. The economic coefficient shows how much of the substrate converted to biomass, the higher it is, the more efficiently the microorganisms utilize the substrate, the higher the yield of their biomass and abundance from 1 g of consumed substrate, the lower the cost of finished products. Therefore, the development of methods and methods for reducing substrate costs while increasing output is one of the main tasks of biotechnology throughout the existence of this science. This issue was especially acute at the present stage of human development and is associated with the exhaustion of traditional substrates.
Известен способ выращивания бактерий рода Pseudomonas (патент US 4555487, опубл. 26 ноября 1985, МПК C12N 1/38), в котором в питательную среду добавляют по меньшей мере одно амидное соединение, выбранное из группы, состоящей из акриламида, метакриламида, кротонамида и н-бутирамида. Способ позволяет обеспечить производство клеток бактерий рода Pseudomonas, имеющих высокую активность нитрилгидратазы, с высоким выходом.A known method of growing bacteria of the genus Pseudomonas (patent US 4555487, publ. November 26, 1985, IPC
Известен способ культивирования бактерий рода Pseudomonas (патент US 4880739, опубл. 14.11.1989, МПК C12N 9/78), в котором клетки бактерий рода Pseudomonas получают путем непрерывного или с приращением, но не в одной партии за один раз, добавления к питательной среде в течение воспроизводства и пролиферации клеток бактерий Pseudomonas, по меньшей мере, одного соединения, выбранного из группы, состоящей из пропионитрил, изобутиронитрил, пропионовой кислоты и изобутирамид в количестве, эффективном для повышения активности нитрилгидратазы на единицу культуральной жидкости культуральной среды. Способ позволяет обеспечить производство клеток бактерий рода Pseudomonas, имеющих высокую активность нитрилгидратазы, с высоким выходом.A known method of cultivating bacteria of the genus Pseudomonas (patent US 4880739, publ. 14.11.1989, IPC C12N 9/78), in which cells of bacteria of the genus Pseudomonas are obtained by continuous or incremented, but not in one batch at a time, adding to the nutrient medium during the reproduction and proliferation of Pseudomonas bacteria cells, at least one compound selected from the group consisting of propionitrile, isobutyronitrile, propionic acid and isobutyramide in an amount effective to increase nitrile hydratase activity per unit culture fluid and the culture medium. The method allows for the production of bacterial cells of the genus Pseudomonas having a high nitrile hydratase activity in high yield.
Недостатками аналогов является увеличение стоимости питательной среды при добавлении органических соединений при активизации нитрилгидратазы бактерий рода Pseudomonas и отсутствие увеличения выхода самих микробов-агентов биотехнологии при увеличении стоимости питательной среды.The disadvantages of the analogues are the increase in the cost of the nutrient medium with the addition of organic compounds during the activation of nitrile hydratase of bacteria of the genus Pseudomonas and the absence of an increase in the yield of microbial agents of biotechnology themselves with an increase in the cost of the nutrient medium.
Известен способ получения культивирования бактерий Pseudomonas fluorescens АР-33 и Pseudomonas aureofaciens BS 1393 на среде, содержащей глюкозу в качестве единственного источника энергетического субстрата, с добавлением наночастиц диоксида титана (Сухушина О.А., Минаева О.М. Влияние наночастиц диоксида титана на рост культуры клеток бактерий Pseudomonas aureifaciens BS 1393. // Наука XXI века: Новый подход: Материалы VIII молодежной международной научно-практической конференции студентов, аспирантов и молодых ученых (29-29 января 2014 г.). - СПб: Изд-во «Айсинг», 2014. - С. 55-59), выбранный в качестве прототипа.A known method for producing cultivation of bacteria Pseudomonas fluorescens AP-33 and Pseudomonas aureofaciens BS 1393 on a medium containing glucose as the sole source of energy substrate, with the addition of titanium dioxide nanoparticles (Sukhushina O.A., Minaeva O.M. Effect of titanium dioxide nanoparticles on growth bacterial cell cultures of Pseudomonas aureifaciens BS 1393. // 21st Century Science: A New Approach: Proceedings of the VIII International Youth Scientific and Practical Conference of Students, Graduate Students and Young Scientists (January 29-29, 2014). - St. Petersburg: Aising Publishing House , 2014. - S. 55-59), selected as prototype.
Способ заключается в засеве культуры на предварительно стерилизованную и обработанную ультразвуком жидкую питательную среду, содержащую глюкозу в качестве единственного источника энергетического субстрата и диоксид титана.The method consists in seeding the culture onto a previously sterilized and sonicated liquid nutrient medium containing glucose as the sole source of energy substrate and titanium dioxide.
Недостатками прототипа является:The disadvantages of the prototype is:
1. невозможность увеличения численности бактериальной популяции и выхода продукции при добавлении наночастиц диоксида титана,1. the impossibility of increasing the number of bacterial populations and yield when adding titanium dioxide nanoparticles,
2. культивирование ограниченного круга бактерий, а также увеличенное время культивирования.2. cultivation of a limited circle of bacteria, as well as increased cultivation time.
3. отсутствие возможности регулирования биотехнологических процессов и прогнозирования получаемых результатов.3. lack of ability to regulate biotechnological processes and predict the results.
Задачей заявленного изобретения является разработка способа культивирования широкого круга бактерий рода Pseudomonas с увеличением численности бактерий на 1 г потребленного питательного субстрата и уменьшением сроков культивирования до достижения необходимой бактериальной численности путем добавления в богатую питательную среду, оптимизированную по содержанию основных органических и минеральных компонентов, наночастиц диоксида титана размером 5-6 нм в расчетной концентрации.The objective of the claimed invention is to develop a method for culturing a wide range of bacteria of the genus Pseudomonas with an increase in the number of bacteria per 1 g of the consumed nutrient substrate and a decrease in the cultivation time to achieve the necessary bacterial population by adding titanium dioxide nanoparticles to a rich nutrient medium optimized for the content of basic organic and mineral components 5-6 nm in the calculated concentration.
Поставленная задача решается тем, что бактерии рода Pseudomonas засевают на предварительно стерилизованную и обработанную ультразвуком в течение 20-25 мин при частоте 35 кГц жидкую питательную среду с диоксидом титана, при этом диоксид титана добавляют в виде водной суспензии, предварительно обработанной ультразвуком в течение 20-25 мин при частоте 35 кГц, а засев маточной культуры бактерий с концентрацией 1-8*109 клеток/мл в объеме 10% от общего проводится в обработанную и стерилизованную питательную среду, бактерии выращивают при температуре +28-30°С, с аэрацией при минимальной концентрации растворенного кислорода pO2=5,0-6,0 мг/л в течение 24-32 ч до достижения фазы замедления бактериального роста, при следующем соотношении компонентов, масс. %:The problem is solved in that bacteria of the genus Pseudomonas are seeded on pre-sterilized and sonicated for 20-25 minutes at a frequency of 35 kHz liquid medium with titanium dioxide, while titanium dioxide is added in the form of an aqueous suspension pre-treated with ultrasound for 20 25 min at a frequency of 35 kHz, and inoculation of the uterine culture of bacteria with a concentration of 1-8 * 10 9 cells / ml in a volume of 10% of the total is carried out in a treated and sterilized nutrient medium, bacteria are grown at a temperature of + 28-30 ° C, s aeration with a minimum concentration of dissolved oxygen pO 2 = 5.0-6.0 mg / l for 24-32 hours until the phase of bacterial growth retardation is reached, in the following ratio of components, mass. %:
пептон - 2,0%;peptone - 2.0%;
глицерин - 1,0%;glycerin - 1.0%;
MgSO4 - 0,15%;MgSO 4 - 0.15%;
K2HPO4 - 0,15%;K 2 HPO 4 - 0.15%;
диоксид титана - 0,002-0,0025%;titanium dioxide - 0.002-0.0025%;
остальное - вода.the rest is water.
В водной суспензии диоксид титана находится в виде наночастиц, которые получают методом электровзрыва. Они имеют размер 5-6 нм. Их верификацию проводят как с помощью электронной микроскопии в проходящем свете, так и методом динамического светорассеяния с помощью анализатора размеров диспергированных частиц.In an aqueous suspension, titanium dioxide is in the form of nanoparticles, which are obtained by electric explosion. They have a size of 5-6 nm. Their verification is carried out using electron microscopy in transmitted light, as well as dynamic light scattering using a dispersed particle size analyzer.
Таким образом, одной из наиболее основных операций при культивировании бактерий рода Pseudomonas с диоксидом титана является не только его наличие в среде и концентрация, но и введение в питательную среду обязательно суспензии наночастиц диоксида титана во взвешенном состоянии.Thus, one of the most basic operations during the cultivation of bacteria of the genus Pseudomonas with titanium dioxide is not only its presence in the medium and its concentration, but also the introduction into the nutrient medium of a suspension of titanium dioxide nanoparticles in suspension.
Пептон, входящий в состав предложенной среды для культивирования бактерий, является наиболее широко используемым энергетическим субстратом, пригодным для роста и развития практически всех известных почвенных, ризосферных и других видов бактерий рода Pseudomonas, относящихся к аммонификаторам. Пептон является субстратом, содержащим целый набор аминокислот и полипептидов, которые легко усваиваются бактериями различного систематического положения. Глицерин, входящий в состав в среды, является более трудно усваиваемым субстратом, однако способствует росту микроорганизмов на более поздних фазах культивирования и продляет сроки хранения микробных препаратов. В целом, предложенная среда является универсальной и обеспечивает рост и развитие практически всех бактерий рода Pseudomonas.Peptone, which is part of the proposed medium for the cultivation of bacteria, is the most widely used energy substrate suitable for the growth and development of almost all known soil, rhizosphere, and other species of bacteria of the genus Pseudomonas related to ammonifiers. Peptone is a substrate containing a whole set of amino acids and polypeptides that are easily absorbed by bacteria of various systematic positions. Glycerin, which is part of the medium, is a more difficult to assimilate substrate, but it promotes the growth of microorganisms in the later phases of cultivation and prolongs the shelf life of microbial preparations. In general, the proposed environment is universal and provides the growth and development of almost all bacteria of the genus Pseudomonas.
Техническая сущность изобретения поясняется примером. Для культивирования бактерий рода Pseudomonas готовят в ферментере или других емкостях питательную среду для выращивания бактерий следующего состава (масс. %):The technical essence of the invention is illustrated by example. For the cultivation of bacteria of the genus Pseudomonas, a nutrient medium is prepared in a fermenter or other containers for growing bacteria of the following composition (wt.%):
пептон - 2,0%;peptone - 2.0%;
глицерин - 1,0%;glycerin - 1.0%;
MgSO4 - 0,15%;MgSO 4 - 0.15%;
K2HPO4 - 0,15%;K 2 HPO 4 - 0.15%;
остальное - вода.the rest is water.
Стерилизуют рабочий объем ферментера с питательной средой при температуре +116°С 20-25 мин или емкости с питательной средой в паровом стерилизаторе при режиме 1 атм 20-25 мин. В колбах в концентрации 1 г/л готовят водную суспензию наночастиц диоксида титана и также стерилизуют. Остывшую водную суспензию наночастиц диоксида титана в колбах обрабатывают ультразвуком в течение 20-25 мин при частоте 35 кГц в ультразвуковой ванной для перевода наночастиц во взвешенное состояние. Немедленно вводят взвешенную суспензию диспергированных наночастиц диоксида титана в питательную среду до достижения концентрации наночастиц в среде (масс. %) 0,002-0,0025%. Осуществляют засев питательной среды предварительно выращенной маточной культурой бактерий с концентрацией 1-8*109 клеток/мл в объеме 10% от общего. Выращивают бактерии при температуре +28-30°С, аэрации на уровне рО2=4,0-5,0 мг/л в течение 18-24 ч в зависимости от планируемой бактериальной численности.Sterilize the working volume of the fermenter with a nutrient medium at a temperature of + 116 ° C for 20-25 minutes or containers with a nutrient medium in a steam sterilizer at a regime of 1 atm for 20-25 minutes. In flasks at a concentration of 1 g / l, an aqueous suspension of titanium dioxide nanoparticles is prepared and also sterilized. The cooled aqueous suspension of titanium dioxide nanoparticles in the flasks is sonicated for 20-25 minutes at a frequency of 35 kHz in an ultrasonic bath to transfer the nanoparticles to a suspended state. Immediately introduce a suspended suspension of dispersed titanium dioxide nanoparticles into the nutrient medium until the nanoparticle concentration in the medium (wt.%) Of 0.002-0.0025% is reached. The culture medium is inoculated with a pre-grown uterine bacterial culture with a concentration of 1-8 * 10 9 cells / ml in a volume of 10% of the total. Bacteria are grown at a temperature of + 28-30 ° C, aeration at the level of pO 2 = 4.0-5.0 mg / l for 18-24 hours, depending on the planned bacterial population.
Контроль численности осуществляют стандартными методами учета (подсчет клеток в камере Горяева, метод Коха, учет численности по оптической плотности культуры и др.).The abundance control is carried out by standard methods of accounting (cell counting in the Goryaev’s chamber, the Koch method, abundance counting by the optical density of the culture, etc.).
На фиг. 1 показано изменение концентрации бактерий рода Pseudomonas при их культивировании (средние показатели для пяти изученных штаммов видов P. fluorescence, P. aureofaciens, Pseudomonas sp.). Цифрами обозначено следующее: 1 - контроль (культивирование бактерий в оптимальных условиях без добавления наночастиц диоксида титана), 2 - минимальная среда с глюкозой и наночастицами диоксида титана (25 мг/л), 3 - богатая среда, оптимизированная по составу компонентов для бактерий рода Pseudomonas и наночастицами диоксида титана (25 мг/л).In FIG. Figure 1 shows the change in the concentration of bacteria of the genus Pseudomonas during their cultivation (average values for the five studied strains of the species P. fluorescence, P. aureofaciens, Pseudomonas sp.). The numbers denote the following: 1 - control (cultivation of bacteria under optimal conditions without the addition of titanium dioxide nanoparticles), 2 - minimal medium with glucose and titanium dioxide nanoparticles (25 mg / l), 3 - rich medium optimized in the composition of components for bacteria of the genus Pseudomonas and titanium dioxide nanoparticles (25 mg / L).
На фиг. 2 приведено изменение концентрации бактерий рода Pseudomonas при их культивировании (средние показатели с доверительным интервалом (р<0,05) для пяти изученных штаммов видов P. fluorescence, P. aureofaciens, Pseudomonas sp.), где 1 - контроль (культивирование бактерий в оптимальных условиях без добавления наночастиц диоксида титана), 2 - минимальная среда с глюкозой и наночастицами диоксида титана (25 мг/л), 3 - богатая среда, оптимизированная по составу компонентов для бактерий рода Pseudomonas и наночастицами диоксида титана (25 мг/л), 4 - богатая среда, оптимизированная по составу компонентов для бактерий рода Pseudomonas и диоксидом титана в обычной форме (25 мг/л).In FIG. Figure 2 shows the change in the concentration of bacteria of the genus Pseudomonas during their cultivation (average indicators with a confidence interval (p <0.05) for the five studied strains of the species P. fluorescence, P. aureofaciens, Pseudomonas sp.), Where 1 is the control (bacterial cultivation in optimal conditions without the addition of titanium dioxide nanoparticles), 2 - a minimal medium with glucose and titanium dioxide nanoparticles (25 mg / l), 3 - a rich medium optimized in composition for Pseudomonas bacteria and titanium dioxide nanoparticles (25 mg / l), 4 - rich environment optimized in composition components for bacteria of the genus Pseudomonas and titanium dioxide in the usual form (25 mg / l).
Согласно фиг. 1 добавление в состав питательной среды наночастиц диоксида титана способствует более быстрому достижению бактериальной культурой заданных значений численности. Так, если культивирование в оптимальном режиме направлено до достижения бактериальной численности, находящейся на уровне 1*109 клеток/мл, то в контроле (линия 1, среда без наночастиц) достижение данной численности наблюдается через 24-25 ч, добавление в минимальную по составу среду, содержащую глюкозу в качестве единственного источника энергетического субстрата (линия 2), наночастиц диоксида титана в концентрации 25 мг/л приводит к ускорению достижения заданного значения на 4-5 часов. Добавление наночастиц в той же концентрации к питательной среде, оптимизированной по составу (линия 3), дополнительно ускоряет процесс на 1,5-2 часа по сравнению с бедной средой.According to FIG. 1 the addition of titanium dioxide nanoparticles to the nutrient medium contributes to a more rapid achievement by the bacterial culture of predetermined numbers. So, if the cultivation in the optimal mode is directed until a bacterial population of 1 * 10 9 cells / ml is reached, then in the control (
Рассчитанные, исходя из полученных кривых, описывающих рост микробной культуры, удельные скорости роста также показывают значительное увеличение в присутствии наночастиц диоксида титана (фиг. 2).The specific growth rates calculated from the obtained curves describing the growth of the microbial culture also show a significant increase in the presence of titanium dioxide nanoparticles (Fig. 2).
Сходные зависимости были отмечены для целого ряда штаммов бактерий рода Pseudomonas, что свидетельствует об универсальности отмеченного эффекта на данную систематическую группу бактерий.Similar dependences were noted for a number of strains of bacteria of the genus Pseudomonas, which indicates the universality of the noted effect on this systematic group of bacteria.
Экспериментально показано, что использование наночастиц диоксида титана (TiO2) в концентрации 20-25 мг/л в составе питательных сред увеличивает численность бактерий рода Pseudomonas и их биомассу с одного грамма энергетического субстрата (например, глюкозы или глицерина) в 5-7 раз в зависимости от концентрации, увеличивает удельную скорость роста бактериальной культуры на 12-23% (фиг. 2), а значит, сокращают сроки производства биотехнологического продукта. При использовании богатой по составу питательной среды с включением перечня органических соединений в неопределенном составе (например, пептон основной) выход бактериальных клеток может увеличиваться в 10-20 раз (Таблица 1).It has been experimentally shown that the use of titanium dioxide (TiO 2 ) nanoparticles in a concentration of 20-25 mg / l as a nutrient medium increases the number of bacteria of the genus Pseudomonas and their biomass from one gram of energy substrate (e.g., glucose or glycerol) by 5-7 times depending on the concentration, increases the specific growth rate of the bacterial culture by 12-23% (Fig. 2), which means that they reduce the production time of the biotechnological product. When using a rich nutrient medium with the inclusion of a list of organic compounds in an unspecified composition (for example, the main peptone), the yield of bacterial cells can increase 10-20 times (Table 1).
Также показано, что в присутствии наночастиц диоксида титана уменьшается скорость потребления энергетического субстрата в 1,6-6 раз в зависимости от вида бактерии и увеличивается его остаточная концентрация в культуре бактерий на 20-30% по сравнению с контролем (р<0,05).It was also shown that in the presence of titanium dioxide nanoparticles, the energy substrate consumption rate decreases by 1.6–6 times depending on the type of bacterium and its residual concentration in the bacterial culture increases by 20–30% compared to the control (p <0.05) .
Технический результат - повышение производительности процесса культивирования, увеличение выхода бактерий в процессе культивирования или производства биопрепарата, снижение энергозатрат на процесс и расход субстратов.The technical result is an increase in the productivity of the cultivation process, an increase in the yield of bacteria during the cultivation or production of a biological product, a reduction in energy consumption for the process and consumption of substrates.
Claims (2)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015114832/10A RU2596405C1 (en) | 2015-04-21 | 2015-04-21 | METHOD FOR CULTURING Pseudomonas BACTERIA |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015114832/10A RU2596405C1 (en) | 2015-04-21 | 2015-04-21 | METHOD FOR CULTURING Pseudomonas BACTERIA |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2596405C1 true RU2596405C1 (en) | 2016-09-10 |
Family
ID=56892819
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2015114832/10A RU2596405C1 (en) | 2015-04-21 | 2015-04-21 | METHOD FOR CULTURING Pseudomonas BACTERIA |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2596405C1 (en) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2303061C2 (en) * | 2005-09-06 | 2007-07-20 | Закрытое акционерное общество научно-производственное предприятие "Биомедхим" (ЗАО НПП "Биомедхим") | Nutrient medium for culturing microorganisms of genus pseudomonas |
| RU2529958C1 (en) * | 2013-08-20 | 2014-10-10 | Закрытое акционерное общество научно-производственное предприятие "Биомедхим" (ЗАО НПП "Биомедхим") | Strain of nitrogen-fixing bacteria pseudomonas sp for obtaining biological product against diseases of wheat caused by phytopathogenic fungi, and increase in productivity |
-
2015
- 2015-04-21 RU RU2015114832/10A patent/RU2596405C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2303061C2 (en) * | 2005-09-06 | 2007-07-20 | Закрытое акционерное общество научно-производственное предприятие "Биомедхим" (ЗАО НПП "Биомедхим") | Nutrient medium for culturing microorganisms of genus pseudomonas |
| RU2529958C1 (en) * | 2013-08-20 | 2014-10-10 | Закрытое акционерное общество научно-производственное предприятие "Биомедхим" (ЗАО НПП "Биомедхим") | Strain of nitrogen-fixing bacteria pseudomonas sp for obtaining biological product against diseases of wheat caused by phytopathogenic fungi, and increase in productivity |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| ГОРДИЕНКО А.С., ЧЕБОТАРЕВ А.Ю., КУРДИШ И.К., Влияние диоксида титана на рост Azotobacter Vinelandii ИМВ В-7076, Журнал микробиологии, 2009, т. 71,N3, с. 19-25. * |
| Под ред. ЛАБИНСКОЙ А.С., и др., Частная медицинская микробиология с техникой микробиологических исследований, М, Медицина, 2005, с. 509. * |
| СУХУШИНА О.А., МИНАЕВА О.М. Влияние наночастиц диоксида титана на рост культуры клеток бактерий Pseudomonas aureifaciens BS 1393, Наука XXI века: Новый подход: Материалы VIII молодежной международной научно-практической конференции студентов, аспирантов и молодых ученых, 28-;29 января 2014 г., СПб.: Изд-во ";Айсинг";, 2014., с. 55-;59. СУХУШИНА А.О., МИНАЕВА О.М., Влияние наночастиц диокисда титана на культуру бактерий Pseudomonas fluorescens и продуцирование метаболитов, Биология. Наука 21 века, Пущино, 2012, с.40-41. * |
| СУХУШИНА О.А., МИНАЕВА О.М. Влияние наночастиц диоксида титана на рост культуры клеток бактерий Pseudomonas aureifaciens BS 1393, Наука XXI века: Новый подход: Материалы VIII молодежной международной научно-практической конференции студентов, аспирантов и молодых ученых, 28-;29 января 2014 г., СПб.: Изд-во ";Айсинг";, 2014., с. 55-;59. СУХУШИНА А.О., МИНАЕВА О.М., Влияние наночастиц диокисда титана на культуру бактерий Pseudomonas fluorescens и продуцирование метаболитов, Биология. Наука 21 века, Пущино, 2012, с.40-41. ГОРДИЕНКО А.С., ЧЕБОТАРЕВ А.Ю., КУРДИШ И.К., Влияние диоксида титана на рост Azotobacter Vinelandii ИМВ В-7076, Журнал микробиологии, 2009, т. 71,N3, с. 19-25. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Deamici et al. | Static magnetic fields in culture of Chlorella fusca: Bioeffects on growth and biomass composition | |
| Wang et al. | Biodegradation of aniline by Candida tropicalis AN1 isolated from aerobic granular sludge | |
| Sayadi et al. | Removal of nitrate and phosphate from aqueous solutions by microalgae: an experimental study. | |
| JP2016521980A (en) | Bacterial fermentation process and composition | |
| CN108192889B (en) | Method for treating wastewater by using bacterial cellulose immobilized microalgae | |
| CN109153966A (en) | Produce the biological technique method and related new strains of acrylamide | |
| JP2012239452A5 (en) | ||
| CN102851211B (en) | Formula of nannochloropsis oculata medium and three-stage cultivation method | |
| Karim et al. | OPTIMIZATION OF ENZYME ACTIVITY OF L-ASPARAGINASE DERIVED FROM Enterobacter agglomerans SB 221 BACTERIAL SYMBIONT OF BROWN ALGAE Sargassum sp. | |
| CN108587914B (en) | Method for separating and purifying haematococcus pluvialis strain | |
| Nadaf et al. | Isolation, screening and characterization of L-arginase producing soil bacteria | |
| CN103184157B (en) | A kind ofly administer protozoon and realize stablizing the algal culture technique of high yield | |
| WO2016004688A1 (en) | Preparation method of transpiration inhibitor based on spirulina-induced immune response pore closure | |
| RU2596405C1 (en) | METHOD FOR CULTURING Pseudomonas BACTERIA | |
| JP2008245597A (en) | Method for promoting proliferation of and improving activity of microorganism | |
| CN103667107B (en) | A kind of manure enterococcin strain producing Pfansteihl | |
| EP1233057B1 (en) | Sterilized microbial cells | |
| CN113637651B (en) | Preparation method and application of nitrite reductase | |
| CN106754829B (en) | Method for producing chitosanase by using bacillus HS17 fermentation and application thereof | |
| Karim et al. | Determination of L-Glutaminase Activity by Some Bacterial Species | |
| CN105779349B (en) | A kind of dissolution pond advantage dinoflagellate-Scrippsiella trochoidea Bacillus cereus strain JZBC1 and its application | |
| CA2738248A1 (en) | Methods and compositions for clostridium difficile toxin production | |
| Ibrahim et al. | Biological Co-existence of the Microalgae–Bacteria System in Dairy Wastewater using photo-bioreactor | |
| KR101972494B1 (en) | Noverl microalgae having resistance against selenium | |
| JP5926818B2 (en) | Cell killing method using polyethylene glycol nonionic surfactant |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20180422 |