RU2595881C2

RU2595881C2 - Use of nanophospholipid composition of rifampicine together with protionamide or its nanophospholipid form in treatment of tuberculosis

Info

Publication number: RU2595881C2
Application number: RU2014141377/15A
Authority: RU
Inventors: Ольга Михайловна Ипатова; Владимир Николаевич Прозоровский; Оксана Сергеевна Дружиловская; Наталья Велориковна Медведева; Елена Георгиевна Тихонова; Любовь Викторовна Кострюкова; Василий Андреевич Кудинов; Максим Александрович Санжаков; Татьяна Ивановна Торховская
Original assignee: Общество С Ограниченной Ответственностью "Ибмх-Экобиофарм"
Priority date: 2014-10-15
Filing date: 2014-10-15
Publication date: 2016-08-27
Also published as: RU2014141377A

Abstract

FIELD: medicine.

SUBSTANCE: invention refers to medicine and pharmacology and concerns using of nanophospholipid composition of rifampicine together with protionamide or its nanophospholipid form for treatment of tuberculosis.

EFFECT: invention provides reducing of collateral toxic damage.

1cl, 1 tbl

Description

Изобретение относится к медицине и фармакологии и касается применения нанофосфолипидной композиции рифампицина совместно с протионамидом или его нанофосфолипидной формой в комбинированной противотуберкулезной терапии.The invention relates to medicine and pharmacology, and for the use of the nanophospholipid composition of rifampicin in conjunction with protionamide or its nanophospholipid form in combination anti-tuberculosis therapy.

В настоящее время противотуберкулезные препараты делят на основные и резервные. К основным препаратам относят изониазид, рифампицин, пиразинамид, стрептомицин и этамбутол.Currently, anti-TB drugs are divided into primary and backup. The main drugs include isoniazid, rifampicin, pyrazinamide, streptomycin and ethambutol.

Резервные препараты включают этионамид, протионамид, антибиотики - циклосерин, капреомицин, канамицин, амикацин, рифабутин, парааминосалициловую кислоту (ПАСК); в ту же группу входят фторхинилоны - ломефлоксацин, ципрофлоксацин и офлаксоцин.Reserve preparations include ethionamide, protionamide, antibiotics - cycloserine, capreomycin, kanamycin, amikacin, rifabutin, paraaminosalicylic acid (PASK); the same group includes fluoroquinilones - lomefloxacin, ciprofloxacin and oflaxocin.

Основные препараты высокоэффективны, но к ним у микобактерий относительно быстро (через 3-4 месяца) вырабатывается резистентность. Значительно медленнее развивается устойчивость при одновременном применении разных препаратов. Поэтому основным принципом современного лечения туберкулеза является комбинированная двухэтапная химиотерапия.The main drugs are highly effective, but mycobacteria develop resistance relatively quickly (after 3-4 months). Resistance develops much more slowly with the simultaneous use of different drugs. Therefore, the basic principle of the modern treatment of tuberculosis is combined two-stage chemotherapy.

Вместе с тем, необходимо учитывать, что действие противотуберкулезных препаратов сопровождается обычно побочными эффектами, выраженность которых может возрастать при их совместном применении.However, it must be borne in mind that the effect of anti-TB drugs is usually accompanied by side effects, the severity of which may increase with their combined use.

Протионамид относится к резервным препаратам. Быстро всасывается из желудочно-кишечного тракта (ЖКТ), С_мах составляет 2-3 час; легко проникает в ткани, частично метаболизируется, выводится с мочой и фекалиями.Protionamide is a reserve drug. Quickly absorbed from the gastrointestinal tract (GIT), C _max is 2-3 hours; easily penetrates into tissues, partially metabolized, excreted in urine and feces.

Рифампицин относится к основным препаратам. Является полусинтетическим антибиотиком широкого спектра действия. Активен в отношении микобактерий туберкулеза и лепры, влияет на грамположительные (особенно стафилококки) и грамотрицательные (менингококки, гонококки) бактерии, а также на возбудителей бруцеллеза, легионеллеза, сыпного тифа и трахомы. Эффективен при приеме внутрь, имеет широкий спектр антибактериального действия.Rifampicin is one of the main drugs. It is a semi-synthetic antibiotic with a wide spectrum of action. Active against tuberculosis and leprosy mycobacteria, affects gram-positive (especially staphylococci) and gram-negative (meningococci, gonococci) bacteria, as well as pathogens of brucellosis, legionellosis, typhus and trachoma. Effective when taken orally, has a wide range of antibacterial effects.

Хорошо и быстро всасывается в ЖКТ, при приеме внутрь С_махсоставляет 2,0-2,5 час. Легко проникает в ткани и жидкости организма и обнаруживается в терапевтических концентрациях в плевральном экссудате, мокроте, содержимом каверн, костной ткани; небольшая концентрация создается в тканях печени и почек; выводится с желчью и мочой.It is well and quickly absorbed in the digestive tract, when taken orally, the _max is 2.0-2.5 hours. It easily penetrates into body tissues and fluids and is found in therapeutic concentrations in pleural exudate, sputum, contents of caverns, bone tissue; a small concentration is created in the tissues of the liver and kidneys; excreted in the bile and urine.

В основном, все противотуберкулезные препараты являются плохо растворимыми соединениями с ограниченной биодоступностью. Использование этих препаратов длительно в больших дозах, преимущественно в комбинированных схемах лечения, из-за лекарственной резистентности создает предпосылки поиска новых и усовершенствование известных лекарственных препаратов [1, 2].Basically, all anti-TB drugs are poorly soluble compounds with limited bioavailability. The use of these drugs for a long time in large doses, mainly in combined treatment regimens, due to drug resistance creates the prerequisites for the search for new and improvement of known drugs [1, 2].

Известна стабильная при хранении наносистема с размером частиц от 10 до 30 нм, включающая фосфатидилхолин и мальтозу, предназначенная для включения в фосфолипидные наночастицы лекарственных средств [3]. Известно снижение токсичности противотуберкулезных препаратов путем включения этих препаратов в состав фосфолипидных наночастиц [4]. Однако вопрос снижения токсичности противотуберкулезных средств при комбинированной противотуберкулезной терапии является по-прежнему актуальным.Known storage stable nanosystem with a particle size of from 10 to 30 nm, including phosphatidylcholine and maltose, intended for inclusion in phospholipid nanoparticles of drugs [3]. It is known to reduce the toxicity of anti-TB drugs by including these drugs in the composition of phospholipid nanoparticles [4]. However, the issue of reducing the toxicity of anti-TB drugs in combination anti-TB therapy is still relevant.

Задачей настоящего изобретения является снижение побочных токсических эффектов при комбинированной противотуберкулезной терапии.An object of the present invention is to reduce toxic side effects in combination anti-tuberculosis therapy.

Указанная задача может быть решена путем применения нанофосфолипидной композиции рифампицина совместно с протионамидом или его нанофосфолипидной формой в лечении туберкулеза.This problem can be solved by applying the nanophospholipid composition of rifampicin together with protionamide or its nanophospholipid form in the treatment of tuberculosis.

Исходя из принятых рекомендаций, для лечения туберкулеза используется комбинированная терапия с обязательным включением помимо рифампицина также и другого резервного препарата.Based on the accepted recommendations, combination therapy is used for the treatment of tuberculosis with the obligatory inclusion of another reserve drug in addition to rifampicin.

Был поставлен эксперимент по сравнению эффективности лечения одновременным введением 2-х препаратов, например рифампицина и протионамида, в случае замены одного из них или обоих на соответствующую нанофосфолипидную форму (табл.1).An experiment was performed to compare the effectiveness of treatment with the simultaneous administration of 2 drugs, for example, rifampicin and protionamide, in the case of replacing one or both of them with the corresponding nanophospholipid form (Table 1).

Были исследованы показатели выраженности туберкулезного процесса инфекции у мышей, зараженных М. tuberculosis Erdman, через 6 недель от начала курса лечения комбинациями противотуберкулезных препаратов (ПТП), содержащими рифампицин и протионамид и/или их фосфолипидные композиции.We studied the severity of the tuberculosis infection process in mice infected with M. tuberculosis Erdman, 6 weeks after the start of treatment with combinations of anti-TB drugs (RTP) containing rifampicin and protionamide and / or their phospholipid compositions.

Лечение животных начинали через 7 дней после заражения. Препараты в дозе 10 мг/кг растворяли в воде и вводили внутрижелудочно через атравматичный зонд ежедневно (кроме выходных), в течение 6 недель, через неделю после заражения. Объем вводимого препарата составлял 0,5 мл/мышь. Развитие туберкулезного процесса тестировалось по общему состоянию животных (снижение активности, снижение веса, затрудненное дыхание). Лечение заканчивалось, когда в контрольной группе (зараженные мыши без лечения) смертность достигала 70-100% [5].Treatment of animals began 7 days after infection. Preparations at a dose of 10 mg / kg were dissolved in water and administered intragastrically through an atraumatic probe daily (except weekends), for 6 weeks, a week after infection. The volume of drug administered was 0.5 ml / mouse. The development of the tuberculosis process was tested according to the general condition of the animals (decreased activity, weight loss, difficulty breathing). Treatment ended when in the control group (infected mice without treatment) mortality reached 70-100% [5].

Показатели массы тела мышей учитывали еженедельно, с 1-го по 42 день после инфицирования.The body weight of the mice was monitored weekly, from the 1st to 42th day after infection.

Для микробиологических и морфологических исследований животных выводили из эксперимента дислокацией шейных позвонков. С целью мониторинга процесса через 7 дней после инфицирования пять мышей из контрольной группы вывели из эксперимента для определения КОЕ Mtb в легких перед началом лечения.For microbiological and morphological studies of animals, the cervical vertebrae were dislocated from the experiment. In order to monitor the process 7 days after infection, five mice from the control group were removed from the experiment to determine CFU of Mtb in the lungs before treatment.

Применение нанофосфолипидной формы (НФО) рифампицина в комплексе с противотуберкулезным препаратом протионамидом способствовало приросту эффективности проводимой химиотерапии: индекс эффективности лечения (ИЭ) увеличился на 19,25% по сравнению с группой контроля терапии за счет снижения величины всех тестируемых показателей (в 1,2 раза коэффициента массы легких, в 1,3 раза индекса их поражения и в 1,4 раза высеваемости Mtb). При этом средний суммарный показатель пораженности у этих животных снизился в 1,2 раза (2,47 против 3,07).The use of the nanophospholipid form (NFO) of rifampicin in combination with the anti-tuberculosis drug protionamide contributed to an increase in the effectiveness of chemotherapy: the treatment effectiveness index (IE) increased by 19.25% compared to the control group due to a decrease in the value of all tested parameters (1.2 times coefficient of mass of the lungs, 1.3 times the index of their defeat and 1.4 times the seeding rate of Mtb) At the same time, the average total index of lesion in these animals decreased by 1.2 times (2.47 against 3.07).

Использование комбинированной терапии ПТП, включающей рифампицин и НФО протионамида, привело к снижению индекса эффективности комплексного лечения на 20,13% с вариацией показателя от +8,26 (по коэффициенту массы легких) до +20,39 (по показателю индекса поражения легких) при увеличении массивности КОЕ Mtb на 107%. При этом средний суммарный показатель пораженности у этих животных увеличился в 1,8 раза (5,51 против 3,07).The use of combination therapy with anti-TB drugs, including rifampicin and protionamide NFOs, led to a decrease in the index of the effectiveness of complex treatment by 20.13% with a variation from +8.26 (in terms of lung mass coefficient) to +20.39 (in terms of index of lung damage) an increase in the mass of CFU Mtb by 107%. At the same time, the average total index of damage in these animals increased 1.8 times (5.51 versus 3.07).

Использование НФО форм как рифампицина, так и протионамида в комбинированной терапии ПТП показало значительное повышение эффективности использованной химиотерапии: индекс эффективности увеличился на 25,72% по сравнению с группой контроля терапии. При этом наблюдалось снижение всех тестируемых показателей: коэффициента массы легких - на 25,69%; индекса поражения легких - на 23,3% и высеваемости Mtb - на 28,17%.The use of NFO forms of both rifampicin and protionamide in combination therapy with anti-TB drugs showed a significant increase in the effectiveness of the chemotherapy used: the efficiency index increased by 25.72% compared with the control group of therapy. At the same time, there was a decrease in all tested parameters: lung mass coefficient - by 25.69%; lung injury index - by 23.3% and sowing rate of Mtb - by 28.17%.

При применении комбинированной противотуберкулезной терапии с использованием противотуберкулезных препаратов в составе фосфолипидных наночастиц животные выглядели практически здоровыми, хорошо прибавляли в весе.When using combined anti-tuberculosis therapy using anti-tuberculosis drugs as part of phospholipid nanoparticles, the animals looked almost healthy, gaining good weight.

Исследования, проведенные на модели экспериментального лекарственно-чувствительного генерализованного туберкулеза у мышей, показали что встраивание рифампицина и/или протионамида в фосфолипидные наночастицы приводит к существенному повышению их противотуберкулезного действия.Studies conducted on a model of experimental drug-sensitive generalized tuberculosis in mice showed that the incorporation of rifampicin and / or protionamide into phospholipid nanoparticles leads to a significant increase in their anti-tuberculosis effect.

Установлено достоверное увеличение среднего срока жизни экспериментальных мышей, инфицированных летальной дозой М. tuberculosis Erdman и получавших внутрижелудочно исследуемые препараты в дозе 10 мг/кг в течение 6-ти недель, по сравнению с животными контрольной группы.A significant increase in the average lifespan of experimental mice infected with a lethal dose of M. tuberculosis Erdman and receiving intragastrically studied drugs at a dose of 10 mg / kg for 6 weeks was established compared with animals in the control group.

Микробиологически и морфологически установлено, что ежедневное внутрижелудочное введение исследуемых препаратов в дозе 10 мг/кг приводит к выраженному терапевтическому влиянию на течение туберкулезного воспаления.Microbiologically and morphologically, it was found that daily intragastric administration of the studied drugs at a dose of 10 mg / kg leads to a pronounced therapeutic effect on the course of tuberculous inflammation.

При вскрытии животных был выявлен выраженный гепатопротективный эффект после применяемой комбинированной терапии.An autopsy revealed a pronounced hepatoprotective effect after the combination therapy used.

Таким образом, полученные результаты позволяют сделать заключение о высокой эффективности и снижении гепатотоксичности при применении фосфолипидной композиции рифампицина совместно с протионамидом или их фосфолипидной формой в комбинированной противотуберкулезной терапии.Thus, the results obtained allow us to conclude that high efficacy and a decrease in hepatotoxicity when using the rifampicin phospholipid composition together with protionamide or their phospholipid form in combination anti-tuberculosis therapy.

ЛитератураLiterature

1. М.Д. Машковский. Лекарственные средства, изд. 15. М.: Новая волна, 2006, с. 857-871.1. M.D. Mashkovsky. Medicines, ed. 15. M .: New wave, 2006, p. 857-871.

2. J. van den Boogaard, G.S. Kibiki, E.R. Kisanga, M.J. Boeree, and R.E. Aarnoutse. New Drugs against Tuberculosis: Problems, Progress, and Evaluation of Agents in Clinical Development. // Antimicrob. Agents Chemother. - 2009. - 53(3) - P. 849-862.2. J. van den Boogaard, G.S. Kibiki, E.R. Kisanga, M.J. Boeree, and R.E. Aarnoutse. New Drugs against Tuberculosis: Problems, Progress, and Evaluation of Agents in Clinical Development. // Antimicrob. Agents Chemother. - 2009 .-- 53 (3) - P. 849-862.

3. Патент RU №2463056.3. Patent RU No. 2463056.

4. Патент RU №2472512.4. Patent RU No. 2472512.

5. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. Под общей редакцией Р.У. Хабриева. М.: Медицина, 2005, с. 571-581.5. Guidance on the experimental (preclinical) study of new pharmacological substances. Under the general editorship of R.U. Khabrieva. M .: Medicine, 2005, p. 571-581.

Claims

The use of a combination of the nanophospholipid composition of rifampicin together with protionamide or its nanophospholipid form for the treatment of tuberculosis.