RU2570637C1 - Способ определения токсичности среды по степени угнетения роста тест-культур микроорганизмов - Google Patents

Способ определения токсичности среды по степени угнетения роста тест-культур микроорганизмов Download PDF

Info

Publication number
RU2570637C1
RU2570637C1 RU2014141447/10A RU2014141447A RU2570637C1 RU 2570637 C1 RU2570637 C1 RU 2570637C1 RU 2014141447/10 A RU2014141447/10 A RU 2014141447/10A RU 2014141447 A RU2014141447 A RU 2014141447A RU 2570637 C1 RU2570637 C1 RU 2570637C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
growth
points
toxicity
test
micromycetes
Prior art date
Application number
RU2014141447/10A
Other languages
English (en)
Inventor
Дмитрий Валерьевич Кряжев
Василий Филиппович Смирнов
Ольга Николаевна Смирнова
Елена Александровна Захарова
Надежда Андреевна Аникина
Original Assignee
федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского" filed Critical федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского"
Priority to RU2014141447/10A priority Critical patent/RU2570637C1/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2570637C1 publication Critical patent/RU2570637C1/ru

Links

Images

Landscapes

  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Изобретение относится к области биохимии. Способ определения токсичности среды включает определение показателей роста тест-культур в контроле и опыте. В качестве тест-культур используют микромицеты и предварительно определяют показатель степени угнетения роста тест-культур в опыте по отношению к контролю, %, по формуле:
Figure 00000004
.
Осуществляют определение интегрального показателя токсичности среды в баллах по общему количеству баллов у всех тест-культур за весь период инкубации, который сравнивают с пятью классами опасности среды, условно установленными в зависимости от балльной интегральной оценки токсичности исследуемой среды от 0 до 100 баллов. Изобретение позволяет повысить объективность оценки токсичности среды для растений, животных и человека. 8 з.п. ф-лы, 4 ил., 1 пр.

Description

Изобретение относится к области биохимии, к способам измерения или испытания, использующих микроорганизмы, касается способа определения токсичности среды по степени угнетения роста тест-культур микроорганизмов, который может найти применение при эколого-токсических исследованиях промышленных и строительных материалов, грунта, водоемов, технологических отходов, анализе пищевых продуктов, кормов сельскохозяйственных животных, при оценке токсичности биоцидов и дезинфицирующих средств и т.п.
В настоящее время для оценки токсичности среды все более широкое применение находят тест-культуры - биологические объекты (штаммы бактерий, растения, животные), реагирующие на наличие токсикантов в среде, в которую они помещены, например: US 2008200346 А1, 2008-08-21; ЕР 1302546 A2, 2003-04-16; KR 20030021091 A, 2003-03-12; WO 9218642 A1, 1992-10-29; WO 2009153074 A1, 2009-12-23; GB 2344106 A, 2000-05-31; RU 2245367 C2, 2005-01-27; RU 2342434 С1, 2008-12-27.
Известно также использование тест-культур плесневых грибов, таких как: Alternaria alternata, Aspergillus niger, Fusarium moniliforme, Penicillium chrysogenum; для определения бактерицидного действия химических препаратов, например: дезинфицирующего средства в патенте RU 2345794 C2, кл. A61L 2/16, опубл. 10.02.2009 г.; эпоксидного состава для покрытий в патенте RU 2282649 C1, кл. С09В 5/14, C09D 163/00, C09J 163/00, C08L 63/00, C08K 5/17, опубл. 10.02.2009 г.; мономерных и полимерных биоцидов в патенте RU 2343707 C1, кл. A1N 25/00, A61L 2/08, опубл. 20.01.2009 г.
В зависимости от типа тест-культуры ее реакция на токсичность среды выражается в изменении численности, скорости накопления биомассы, интенсивности выделения или поглощения энергии, (например, свечения для люминесцирующих бактерий) и т.п. Применение тест-культур все более вытесняет химический анализ, предусматривающий выявление в среде химических токсикантов с применением реагентов, специфичных для обнаружения конкретных химических веществ и соединений. Для выявления в исследуемой среде всех токсикантов химический анализ требует применения большого числа реагентов, что экономически не выгодно, поэтому реально химический анализ не позволяет оценить интегральную токсичность среды, определяемую наличием в среде всех токсикантов с учетом синергетического или антагонистического эффектов, выражающихся в усилении или ослаблении суммарного воздействия токсикантов на человека.
Одним из самых важных достоинств применения тест-культур является возможность определения интегрального влияния на жизнедеятельность человека и животных всех имеющихся в исследуемой среде веществ без определения их химического состава. Наиболее часто токсичность среды с применением биосенсоров характеризуется величинами 20% или 50% летальности (LD20, LD50) или подавления жизнедеятельности (ЕС20, ЕС50) у используемых биосенсоров (ФР. 1.39.2007.03222 «Методика определения токсичности воды и водных вытяжек из почв, осадков сточных вод, отходов по смертности и изменению плодовитости дафний»).
В то же время использование того или иного типа тест-культуры имеет свои недостатки. Например, применение животных, растений и микроорганизмов целесообразно для анализа только тех сред, в которых они проживают и размножаются (например, дафний и штамма Vibrio fischeri ВКПМ В-9579 - для анализа воды), а использование люминесцирующих бактерий требует применения специальной аппаратуры, позволяющей с высокой степенью точности оценить изменение интенсивности испускаемого ими излучения, поскольку уменьшение интенсивности пропорционально токсическому эффекту.
Так, например, известен способ биотестирования токсичности воздушной среды (RU 2063630 C1, кл. G01N 33/48, опубл. 07.10.1996 г.), оценивают эффект различных веществ на зимозан-стимулированную люминол-зависимую биолюминесценцию лейкоцитов из донорской крови. Тест-объект инкубируют в физиологически уравновешенной среде с водорастворимыми токсикантами воздушной среды, барботированной через физиологический раствор в стандартных условиях. Токсичность воздушной среды определяют по уменьшению максимума биолюминесценции по сравнению с контролем, не содержащим токсикантов. Известный способ осуществляется следующим образом. Лейкоциты периферической крови человека выделяют по стандартной схеме. Инкубационная среда для определения токсичности исследуемого образца содержит 50-100 мкл взвеси лейкоцитов в растворе Хенкса с цитратом натрия и глюкозой (конечная концентрация 1%) и люминол в конечной концентрации 1×10-5 Μ. Биолюминесценцию клеток вызывают добавлением 100 мкл суспензии опсонизированного зимозана (1 мг/мл). Конечный объем пробы 1 мл, температура 37°C. Контрольная и опытная пробы содержат физиологический раствор или материал исследуемого образца соответственно. Пробы переносят в кюветодержатель хемилюминометра и измеряют интенсивность биолюминесценции клеток, регистрируя показания прибора каждые 10 с. Максимум биолюминесценции достигается обычно через 15-20 мин. Величину максимума биолюминесценции в контрольной пробе принимают за 100%, а интенсивность биолюминесценции в опытных пробах выражают в процентах относительно максимума биолюминесценции в контрольной пробе. Найденные величины используют при расчете токсичности исследуемого образца. За условную единицу токсичности принимают такое количество водорастворенных токсикантов воздушной среды, которое вызывает 50% ингибирование биолюминесценции клеток. При определении токсичности исследуемого образца строят полулогарифмический график зависимости интенсивности биолюминесценции (% от контроля) от логарифма объема внесенного в аналитическую систему раствора токсикантов исследуемой среды. По графику определяют объем раствора токсикантов, вызывающий 50% ингибирование биолюминесценции.
Недостатками известного способа является то, что для его осуществления требуется свежая донорская кровь, не подлежащая длительному хранению, а также необходимость выполнения дополнительной процедуры по получению лейкоцитарной фракции. Кроме того, возможны колебания чувствительности и нестабильность количественных оценок при изменении функционального состояния клеток (повреждение клеток) и это обстоятельство требует принятия специальных мер для поддержания их в интактном состоянии.
Известен, также способ интегральной экспресс-оценки загрязнения окружающей среды (RU 2359036 С1, кл. C12Q 1/28, G01N 33/18, опубл. 20.06.09 г.), включающий инкубацию водорастворенных поллютантов с биологической тест-системой и количественную их оценку по вызываемому ими 50%-ному снижению величины максимальной люминолзависимой хемилюминесценции по сравнению с контролем. В качестве тест-системы используют комплексный полиферментный препарат из корня хрена, обладающий оксидазно-пероксидазной активностью, в комбинации с сульфгидрильным реагентом, который берут в конечной концентрации не менее 0,1 мкг/мл и не более 100 мкг/мл. Изобретение позволяет повысить чувствительность способа определения загрязнения окружающей среды, а также обеспечивает возможность интегральной и количественной оценки загрязненности объектов окружающей среды.
Недостатками данного способа являются использование при его осуществлении дорогостоящих коммерческих ферментативных препаратов, а также необходимость применения специальной дорогостоящей и сложной в эксплуатации аппаратуры для определения люминолзависимой хемилюминесценции.
Наиболее распространено использование в качестве тест-культур бактерий, жизнедеятельность которых зависит от токсичности среды, в которую они помещены.
Наиболее близким по технической сущности и достигаемому результату к предлагаемому изобретению является способ определения общей токсичности твердой, жидкой и газообразной сред, защищенный патентом RU 2202619 С2, кл. C12Q 1/18, C12Q 1/06, C12R 1/07, принятый за ближайший аналог (прототип).
Способ по прототипу применим для установления степени токсичности воды и водорастворимых компонентов продуктов питания, кормов, грунта, технологических отходов. Способ основан на применении в качестве тест-культур бактерий Bacillus и Sarcina lutea B-110. Из рода Bacillus выбирают чувствительные к предположительно содержащимся в тестируемой среде токсикантам, а общую токсичность среды определяют в виде интегрального критерия, слагаемого из показателей роста каждой тест-культуры, которые ранжированы по одному из, как минимум, трех критериев токсичности: нормальный рост, угнетенный рост, отсутствие роста.
Недостатком способа, общим с другими способами, основанными на применении в качестве тест-культур бактерий, является то, что тест-культуры относятся к прокариотическим организмам, имеющим ряд существенных отличий от растений и животных на клеточном уровне, - отсутствует оформленное ядро, рибосомы 80S типа, митоз. Бактерии в филогенетическом отношении далеко отстоят от растений и животных и результаты, полученные на них как на объектах токсикологических тестов, не могут быть с достаточной степенью объективности экстраполированы на другие объекты органического мира (растения, животные, человек).
Другим существенным недостатком данного способа является то, что результирующий индивидуальный показатель токсичности каждой тест-культуры определяется на основе визуальной оценки ее роста без использования инструментально измеряемых исчисляемых показателей, т.е. способ не является достаточно точным и зависит от индивидуальных особенностей человека, проводящего анализ.
В задачу изобретения положено создание нового способа для определения токсичности среды по степени угнетения роста тест-культур микроорганизмов.
Техническим результатом от использования изобретения, является повышение объективности оценки токсичности среды для растений, животных и человека.
Поставленная задача достигается тем, что в способе определения токсичности среды по степени угнетения роста тест-культур микроорганизмов, включающем определение показателей роста тест-культур в контроле и в опыте, определение интегрального показателя (критерия) токсичности среды в баллах, сравнение интегрального показателя (критерия) с условно установленными классами опасности среды, в качестве тест-культур используют микромицеты, предварительно определяют показатель степени угнетения роста тест-культур в опыте по отношению к контролю, %, по формуле:
Figure 00000001
где d0 - диаметр колоний в контроле, d1 - диаметр колоний в опыте, на основании величины показателя ΔR дают интегральную оценку роста для каждой тест-культуры по сравнению с контролем в баллах с последующим ранжированием величины процента роста по одной из пяти категорий:
0% - 0 баллов - отсутствие роста,
1-29% - 1 балл - высоко угнетенный рост,
30-60% - 2 балла - средне угнетенный рост,
61-90% - 3 балла - слабо угнетенный рост,
91-≥100% - 4 балла - нормальный рост/стимуляция роста,
по общему количеству баллов у всех тест-культур за весь период инкубации определяют интегральный показатель (критерий) токсичности среды, который сравнивают с пятью классами опасности среды, условно установленными в зависимости от балльной интегральной оценки токсичности исследуемой среды:
I - очень высокая токсичность - 0-5 баллов;
II - высокая токсичность - 6-29 баллов;
III - средняя токсичность - 30-64 балла;
IV - слабая токсичность - 65-95 баллов;
V - отсутствие токсичности - 96-100 баллов; в качестве тест-культуры используют микромицеты из класса Deuteromycetes, порядка Moniliales, семейств Moniliaceae и Dematiaceae; в качестве тест-культуры используют микромицеты Alternaria alternata ВКМ F-1120; в качестве тест-культуры используют микромицеты Penicillium chrysogenum ВКМ F-245; в качестве тест-культуры используют микромицеты Aspergillus niger ВКМ F-1119; в качестве тест-культуры используют микромицеты Fusarium moniliforme ВКМ F-136; в качестве тест-культуры используют микромицеты из класса Ascomycetes, порядка Sphaerales, семейства Melanosporaceae; в качестве тест-культуры используют микромицеты Chaetomium globosum ВКМ F-109; определение показателей роста тест-культур осуществляют с помощью геометрической линейки.
На фиг. 1 представлена Таблица 1 «Соотношение показателя степени угнетения роста тест-культуры под действием токсиканта к контролю ΔR, % со шкалой баллов и с категориями роста тест-культуры по сравнению с контролем».
На фиг. 2 представлена Таблица 2 «Определение класса токсичности среды».
На фиг. 3 представлена Таблица 3 «Результаты измерений с использованием микромицетов при определении токсичности водных растворов с различным процентным содержанием средства «Авансепт».
На фиг. 4 представлена Таблица 4 «Результаты измерений с использованием микромицетов при определении токсичности водных растворов с различным процентным содержанием гипохлорида натрия».
Предлагаемый способ определения токсичности среды по степени угнетения роста тест-культур микроорганизмов осуществляют следующим образом.
В биологических пробирках готовят взвесь тест-культуры. Для этого берут смыв культуры с агарового косяка значительной мутности (на глаз). Для более точного учета вносимого инфекта плотность взвеси определяют, например, по бактериальному стандарту, а для максимально высокой точности просчитывают грибковые элементы в счетной камере.
Для получения контроля при помощи микропипетки из пробирки отбирают по 5 мкл взвеси культуры и в виде капли высеивают в центр чашки Петри, содержащей 15-20 мл плотной питательной среды (агар Чапека).
Затем для приготовления опытных экземпляров из пробирки отбирают по 4 мл взвеси тест-культуры, которую переносят в другую биологическую пробирку, содержащую по 1 мл водного раствора вещества, токсичность которого определяют. Содержимое пробирки тщательно перемешивают, после чего микропипеткой отбирают по 5 мкл содержимого и аналогично контролю высеивают в центр чашки Петри.
Чашки с контрольным и опытным содержимым инкубируют в термостате при температуре 28±2°C в течение 14 суток. В период инкубации на 3, 5, 7, 10 и 14 сутки проводят измерения диаметра выросших в контроле и опыте колоний тест-культур, например, при помощи геометрической линейки.
На основании полученных данных определяют степень угнетения роста тест-культур под действием токсиканта в процентах к контролю (ΔR,%). Показатель AR определяют по формуле:
Figure 00000002
, где
d0 - диаметр колоний в контроле; d1 - диаметр колоний в опыте.
На основании величины показателя ΔR дают интегральную оценку роста для каждой тест-культуры по сравнению с контролем в баллах с последующим ранжированием величины процента роста по одной из пяти категорий в соответствии с Таблицей 1:
0% - 0 баллов - отсутствие роста;
1-29% - 1 балл - высоко угнетенный рост;
30-60% - 2 балла - средне угнетенный рост;
61 -90% - 3 балла - слабо угнетенный рост;
91-≥100% - 4 балла - нормальный рост/стимуляция роста.
Шаги ранжирования показателя ΔR, %, и интервалы его соотнесения со шкалой баллов и категорией роста тест-культуры по сравнению с контролем выведены эмпирически, путем проведения в лабораторных условиях модельных экспериментов по оценке влияния различных абиотических факторов внешней среды на рост мицелия микромицетов.
По общему количеству баллов у всех тест-культур за весь период инкубации определяют интегральный показатель (критерий) токсичности среды, который может колебаться от 0 до 100 баллов, который сравнивают с условно установленными классами опасности среды в соответствии с Таблицей 2.
Экспериментально условно установлены 5 классов опасности в зависимости от балльной интегральной оценки токсичности исследуемой среды:
I - очень высокая токсичность - 0-5 баллов;
II - высокая токсичность - 6-29 баллов;
III - средняя токсичность - 30-64 балла;
IV - слабая токсичность - 65-95 баллов;
V - отсутствие токсичности - 96-100 баллов.
Использование в качестве тест-культур микромицетов с клетками эукариотического типа, характеризующихся наличием в клетке истинного ядра, митотического деления и рибосом 80S типа, чьи клеточные мембраны содержат стеролы, обеспечивает повышение объективности оценки токсичности среды для растений, животных и человека.
Осуществление измерения диаметра выросших в контроле и опыте колоний тест-культур, а также определение степени угнетения роста тест-культур под действием токсиканта в процентах к контролю (ΔR,%) с последующим ранжированием величины процента роста по одной из пяти категорий повышает точность полученных данных, что также способствует повышению объективности оценки токсичности среды для растений, животных и человека.
Ниже приведены примеры определения токсичности известных дезинфицирующих средств с помощью заявленного способа, иллюстрирующие соответствие заявленного изобретения условию патентоспособности изобретений «промышленная применимость».
Пример 1. Оценка токсичности различных концентраций дезинфицирующего средства «Авансепт».
Средство дезинфицирующее с моющим эффектом «Авансепт» является высокотоксичным для представителей микрофлоры веществом, применяемым в качестве средства дезинфекции и предстерилизационной очистки медицинских инсрументов и принадлежностей в медицинских учреждениях. Средство содержит 6% полигексаметиленгуанидин гидрохлорид и 4,5% алкилдиметилбензиламмоний хлорид в качестве действующих веществ, а также вспомогательные компоненты: краситель, отдушку и воду. Производитель ООО «МК ВИТА-ПУЛ», Россия.
Результаты измерений с использованием конкретных микромицетов при определении токсичности водных и растворов с различным процентным содержанием средства «Авансепт» приведены в Таблице 3.
Проведенные исследования показывают, что водный раствор с 0,5% концентрацией «Авансепта» относится к категории слаботоксичных (71 балл, IV класс), водный раствор с 1,0% концентрацией «Авансепт» относится к категории среднетоксичных (34 балла, III класс), а водный раствор с 3,0% концентрацией «Авансепта» относится к категории очень высокотоксичных (5 баллов, I класс).
Пример 2. Оценка токсичности различных концентраций гипохлорида натрия (NaCIO).
Данное вещество применяется для обеззараживания поверхностей, посуды, белья, выделений больного, санитарно-технического оборудования, уборочного инвентаря. Также применяется для обеззараживания питьевой воды, воды в бассейнах, для отбелки тканей и целлюлозы, в качестве окислителя в химических производствах, для дезинфекции и обеззараживания сточных вод.
Результаты измерений с использованием конкретных микромицетов при определении токсичности водных растворов с различным процентным содержанием гипохлорида натрия приведены в Таблице 4.
Проведенные исследования показывают, что водный раствор гипохлорида натрия с 0.1% концентрацией относится к категории среднетоксичных (54 балла, III класс), водный раствор гипохлорида натрия с 15.0% концентрацией является очень высокотоксичным (0 баллов, I класс).

Claims (9)

1. Способ определения токсичности среды по степени угнетения роста тест-культур микроорганизмов, включающий определение показателей роста тест-культур в контроле и опыте, определение интегрального показателя (критерия) токсичности среды в баллах, сравнение интегрального показателя (критерия) с условно установленными классами опасности среды, отличающийся тем, что в качестве тест-культур используют микромицеты, предварительно определяют показатель степени угнетения роста тест-культур в опыте по отношению к контролю, %, по формуле:
Figure 00000003

где d0 - диаметр колоний в контроле, d1 - диаметр колоний в опыте, на основании величины показателя ΔR дают интегральную оценку роста для каждой тест-культуры по сравнению с контролем в баллах с последующим ранжированием величины процента роста по одной из пяти категорий:
0% - 0 баллов - отсутствие роста,
1-29% - 1 балл - высокоугнетенный рост,
30-60% - 2 балла - среднеугнетенный рост,
61 -90% - 3 балла - слабоугнетенный рост,
91-≥100% - 4 балла - нормальный рост/стимуляция роста,
по общему количеству баллов у всех тест-культур за весь период инкубации определяют интегральный показатель (критерий) токсичности среды, который сравнивают с пятью классами опасности среды, условно установленными в зависимости от балльной интегральной оценки токсичности исследуемой среды:
I - очень высокая токсичность - 0-5 баллов;
II - высокая токсичность - 6-29 баллов;
III - средняя токсичность - 30-64 балла;
IV - слабая токсичность - 65-95 баллов;
V - отсутствие токсичности - 96-100 баллов.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в качестве тест-культуры используют микромицеты из класса Deuteromycetes, порядка Monilales, семейств Moniliaceae и Dematiaceae.
3. Способ по п. 2, отличающийся тем, что в качестве тест-культуры используют микромицеты Alternaria alternata ВКМ F-1120.
4. Способ по п. 2, отличающийся тем, что в качестве тест-культуры используют микромицеты Penicillium chrysogenum ВКМ F-245.
5. Способ по п. 2, отличающийся тем, что в качестве тест-культуры используют микромицеты Aspergillus niger ВКМ F-1119.
6. Способ по п. 2, отличающийся тем, что в качестве тест-культуры используют микромицеты Fusarium moniliforme ВКМ F-136.
7. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в качестве тест-культуры используют микромицеты из класса Ascomycetes, порядка Sphaerales, семейства Melanosporaceae.
8. Способ по п. 7, отличающийся тем, что в качестве тест-культуры используют микромицеты Chaetomium globosum ВКМ F-109.
9. Способ по п. 1, отличающийся тем, что определение показателей роста тест-культур осуществляют с помощью геометрической линейки.
RU2014141447/10A 2014-10-14 2014-10-14 Способ определения токсичности среды по степени угнетения роста тест-культур микроорганизмов RU2570637C1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2014141447/10A RU2570637C1 (ru) 2014-10-14 2014-10-14 Способ определения токсичности среды по степени угнетения роста тест-культур микроорганизмов

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2014141447/10A RU2570637C1 (ru) 2014-10-14 2014-10-14 Способ определения токсичности среды по степени угнетения роста тест-культур микроорганизмов

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2570637C1 true RU2570637C1 (ru) 2015-12-10

Family

ID=54846680

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2014141447/10A RU2570637C1 (ru) 2014-10-14 2014-10-14 Способ определения токсичности среды по степени угнетения роста тест-культур микроорганизмов

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2570637C1 (ru)

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2626584C1 (ru) * 2016-11-03 2017-07-28 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Башкирский государственный педагогический университет им. М. Акмуллы" ФГБОУ ВО "БГПУ им. М. Акмуллы" Способ оценки пригодности микроорганизмов для формирования активного ила очистных сооружений
RU2688117C1 (ru) * 2018-04-12 2019-05-17 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Санкт-Петербургский государственный технологический институт (технический университет)" Способ оценки про- и антимикробных свойств проб
RU2689359C1 (ru) * 2018-04-12 2019-05-27 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Санкт-Петербургский государственный технологический институт (технический университет)" Способ определения бактерицидных свойств материалов
RU2751795C1 (ru) * 2020-07-21 2021-07-16 Общество с ограниченной ответственностью "Экотол-Сервис" Способ определения концентрации дидецилдиметиламмония хлорида и полигексаметиленбигуанидин гидрохлорида в фекальных стоках транспортных средств

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2202619C2 (ru) * 2001-01-09 2003-04-20 Научно-исследовательский институт химии Нижегородского государственного университета им. Н.И. Лобачевского Способ определения общей токсичности твердой, жидкой и газообразной сред

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2202619C2 (ru) * 2001-01-09 2003-04-20 Научно-исследовательский институт химии Нижегородского государственного университета им. Н.И. Лобачевского Способ определения общей токсичности твердой, жидкой и газообразной сред

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
КРЯЖЕВ Д.В., СМИРНОВ В.Ф., Новые аспекты применения низкоинтенсивных излучений (КВЧ) в экобиотехнологии, Вестник Нижегородского Университета им. Н.И. Лобаческого. Общая биология. 2010 N2 (2) с.418-422. КРЯЖЕВ Д.В., СМИРНОВ В.Ф., Новые аспекты применения низкоинтенсивных излучений (КВЧ) в экобиотехнологии,Вестник Нижегородского университета им. Н.И. Лобачевского,2010, N2 (2), с. 418-422. КРЯЖЕВ Д.В., и др., Высоко и низкоиненсивные электромагнитные излучения как средство профилактики внутрибольничных инфекций, вызываемых микромицетами- биодетрукторами, Медицинский альманах. Эпидемиология, 2011, N4 (17), с. 81-83. *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2626584C1 (ru) * 2016-11-03 2017-07-28 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Башкирский государственный педагогический университет им. М. Акмуллы" ФГБОУ ВО "БГПУ им. М. Акмуллы" Способ оценки пригодности микроорганизмов для формирования активного ила очистных сооружений
RU2688117C1 (ru) * 2018-04-12 2019-05-17 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Санкт-Петербургский государственный технологический институт (технический университет)" Способ оценки про- и антимикробных свойств проб
RU2689359C1 (ru) * 2018-04-12 2019-05-27 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Санкт-Петербургский государственный технологический институт (технический университет)" Способ определения бактерицидных свойств материалов
RU2751795C1 (ru) * 2020-07-21 2021-07-16 Общество с ограниченной ответственностью "Экотол-Сервис" Способ определения концентрации дидецилдиметиламмония хлорида и полигексаметиленбигуанидин гидрохлорида в фекальных стоках транспортных средств

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2570637C1 (ru) Способ определения токсичности среды по степени угнетения роста тест-культур микроорганизмов
Mesquita et al. Flow cytometry as a tool to assess the effects of gamma radiation on the viability, growth and metabolic activity of fungal spores
JP2010539903A (ja) 殺生物剤の嫌気性微生物に対する評価のための高処理量の試験方法
Gorokhova et al. A comparison of TO-PRO-1 iodide and 5-CFDA-AM staining methods for assessing viability of planktonic algae with epifluorescence microscopy
Gadd Toxicity screening using fungi and yeasts
MacIntyre et al. Enumerating viable phytoplankton using a culture-based Most Probable Number assay following ultraviolet-C treatment
Poletta et al. Comet assay in gill cells of Prochilodus lineatus exposed in vivo to cypermethrin
CN105986000B (zh) 一种混合菌生物传感器检测污染物生物毒性的方法
Dolezalova et al. A new biological test of water toxicity–yeast Saccharomyces cerevisiae conductometric test
US20210115494A1 (en) Improved method for measurement of microbial biomass
Jofré et al. Fish toxicity of commercial herbicides formulated with glyphosate
Balakrishnan et al. Genotoxic potential of nonylphenol in freshwater fish, Oreochromis mossambicus
Nagai A novel, efficient, and ecologically relevant bioassay method using aquatic fungi and fungus‐like organisms for fungicide ecological effect assessment
Lovinskaya et al. Complex study of potential toxicity and genotoxicity of water samples from natural sources of the suburban zone of Almaty
CA2293875A1 (en) Use of spore adhesion assays in fungicide screening
Johnson et al. Toxicity of triclosan, penconazole and metalaxyl on Caulobacter crescentus and a freshwater microbial community as assessed by flow cytometry
Nanieva et al. Hydra attenuata, a model system for determining the acute lethal and chronic toxicity of drinking and natural waters and aqueous solutions of chemicals
Altomare et al. Assessing potential cytotoxicity of biocontrol microorganisms using invertebrate assays
Thomas et al. Real-time detection of potassium cyanide pollution in surface waters using electric organ discharges wave emitted by the tropical fish, Apteronotus albifrons
Kramer et al. Impact of pulsed light on cellular activity of Salmonella enterica
Vergolyas et al. Cytotoxic effect of chlorophenols on cells of the root meristem of welsh onion (Allium fistulosum L.) seeds
Gong et al. Development of the yeast Saccharomyces cerevisiae as a biosensor for the toxicity detection of toxic substances
Goncharuk et al. Genetically safe drinking water. requirements and methods of its quality control
Okay et al. Comparison of several toxicity tests applied to complex wastewaters and mussel biomarkers in receiving waters
Lorin et al. The mycobiota composition in eight Romanian representative poultry and swine farms

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20191015