RU2568998C2 - Composition for producing cross-linked hyaluronic acid and method of producing cross-linked hyaluronic acid - Google Patents
Composition for producing cross-linked hyaluronic acid and method of producing cross-linked hyaluronic acid Download PDFInfo
- Publication number
- RU2568998C2 RU2568998C2 RU2013153007/13A RU2013153007A RU2568998C2 RU 2568998 C2 RU2568998 C2 RU 2568998C2 RU 2013153007/13 A RU2013153007/13 A RU 2013153007/13A RU 2013153007 A RU2013153007 A RU 2013153007A RU 2568998 C2 RU2568998 C2 RU 2568998C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- hyaluronic acid
- crosslinked hyaluronic
- composition
- producing
- crosslinked
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
Abstract
Description
Область изобретенияField of Invention
Настоящее изобретение относится к композиции для получения вязкоупругой сшитой гиалуроновой кислоты и к сшитой гиалуроновой кислоте как с однофазными, так и с двухфазными характеристиками, полученной путем ее применения, и более конкретно к композиции для получения вязкоупругой сшитой гиалуроновой кислоты, которая содержит щелочной водный раствор гиалуроновой кислоты с концентрацией от 15 до 25 мас.% и сшивающий агент и имеет значение коэффициента механических потерь (Tan δ) от 0,5 до 1,5 при частоте от 0,02 до 1 Гц, и к сшитой гиалуроновой кислоте как с однофазными, так и с двухфазными характеристиками, полученной путем ее применения.The present invention relates to a composition for producing viscoelastic crosslinked hyaluronic acid and crosslinked hyaluronic acid with both single-phase and biphasic characteristics obtained by its use, and more particularly, to a composition for producing viscoelastic crosslinked hyaluronic acid, which contains an alkaline aqueous solution of hyaluronic acid with a concentration of 15 to 25 wt.% and a crosslinking agent and has a mechanical loss coefficient (Tan δ) of 0.5 to 1.5 at a frequency of 0.02 to 1 Hz, and crosslinked hyaluronic acid e both with single-phase and with two-phase characteristics obtained by its application.
Предшествующий уровень техникиState of the art
Гиалуроновая кислота является биополимерным веществом и широко используется в лечебных, медико-санитарных и косметических целях благодаря ее биосовместимости и вязкоупругости. Однако гиалуроновая кислота как таковая легко разлагается in vivo или в кислых или щелочных условиях, и ее применение ограничено. Следовательно, предпринимается множество усилий для разработки структурно стабильного производного гиалуроновой кислоты (Laurent, Т.С. "The chemistry, biology and medical applications of hyaluronan and its derivatives" Portland Press Ltd., London, 1998).Hyaluronic acid is a biopolymer substance and is widely used for medicinal, medical, sanitary and cosmetic purposes due to its biocompatibility and viscoelasticity. However, hyaluronic acid as such is readily degraded in vivo or under acidic or alkaline conditions, and its use is limited. Therefore, a lot of effort is being made to develop a structurally stable hyaluronic acid derivative (Laurent, T. S. "The chemistry, biology and medical applications of hyaluronan and its derivatives" Portland Press Ltd., London, 1998).
В качестве традиционного способа получения сшитой гиалуроновой кислоты в патентной публикации США 2003/0148995 раскрыт способ получения геля посредством реакции гиалуроновой кислоты в концентрации 12,8% в присутствии щелочи с использованием относительного избытка полифункциональных эпоксидных сшивающих агентов.As a traditional method for producing crosslinked hyaluronic acid, US Patent Publication 2003/0148995 discloses a method for producing a gel by reacting hyaluronic acid at a concentration of 12.8% in the presence of alkali using a relative excess of polyfunctional epoxy crosslinking agents.
Кроме того, в патентной публикации Кореи 10-2009-0085102 раскрыт дополнительный эффект ингибирования экспрессии ММР (матриксная металлопротеиназа) и восстановления ткани посредством внутрикожной или подкожной инъекции при добавлении маннита в качестве антиоксиданта в смесь сшитой гиалуроновой кислоты и свободной гиалуроновой кислоты. В этом случае, хотя применимость может быть улучшена путем смешивания дополнительной свободной гиалуроновой кислоты со сшитой гиалуроновой кислотой для ингибирования экспрессии ММР, сложно ожидать значимости свободной гиалуроновой кислоты в восстановление и поддержание ткани, так как недостатком свободной гиалуроновой кислоты является легкое разложение посредством ферментативной реакции.In addition, Korean Patent Publication No. 10-2009-0085102 discloses the additional effect of inhibiting the expression of MMP (matrix metalloproteinase) and tissue repair by intradermal or subcutaneous injection by adding mannitol as an antioxidant to a mixture of crosslinked hyaluronic acid and free hyaluronic acid. In this case, although applicability can be improved by mixing additional free hyaluronic acid with crosslinked hyaluronic acid to inhibit the expression of MMP, it is difficult to expect the significance of free hyaluronic acid in tissue repair and maintenance, since the disadvantage of free hyaluronic acid is easy decomposition by enzymatic reaction.
Обобщая традиционные методики, в раскрытых способах получения сшитой гиалуроновой кислоты с использованием многих типов сшивающих агентов или посредством различных способов получения не было упоминания сшитого продукта, который демонстрирует как вязкие, так и упругие характеристики с устойчивостью в отношении фермента. Кроме того, многие из существующих способов получения не подходят для крупномасштабного производства.Summarizing traditional techniques, in the disclosed methods for producing crosslinked hyaluronic acid using many types of crosslinking agents or through various manufacturing methods, there was no mention of a crosslinked product that exhibits both viscous and elastic characteristics with enzyme resistance. In addition, many of the existing production methods are not suitable for large-scale production.
Исходя из таких предпосылок авторы настоящего изобретения получили композицию для получения вязкоупругой сшитой гиалуроновой кислоты путем корректировки композиции для получения вязкоупругой сшитой гиалуроновой кислоты, которая представлена в виде смеси щелочного водного раствора гиалуроновой кислоты с концентрацией от 15 до 25 мас.% и сшивающего агента, так чтобы она имела значение Tan δ от 0,5 до 1,5 при частоте в диапазоне от 0,02 до 1 Гц, перед осуществлением реакции сшивания, и определили, что сшитая гиалуроновая кислота, обладающая как вязкими, так и упругими характеристиками, может быть получена путем сшивания композиции для получения сшитой гиалуроновой кислоты для завершения настоящего изобретения.Based on these assumptions, the authors of the present invention have obtained a composition for the preparation of viscoelastic crosslinked hyaluronic acid by adjusting the composition to obtain a viscoelastic crosslinked hyaluronic acid, which is presented as a mixture of an alkaline aqueous solution of hyaluronic acid with a concentration of from 15 to 25 wt.% And a crosslinking agent so that it had a Tan δ value from 0.5 to 1.5 at a frequency in the range from 0.02 to 1 Hz, before the crosslinking reaction was carried out, and it was determined that the crosslinked hyaluronic acid having both elastic and elastic characteristics can be obtained by crosslinking the composition to obtain a crosslinked hyaluronic acid to complete the present invention.
Описание изобретенияDescription of the invention
Техническая задачаTechnical challenge
Одной задачей настоящего изобретения является предложить композицию для получения вязкоупругой сшитой гиалуроновой кислоты.One object of the present invention is to provide a composition for the preparation of viscoelastic crosslinked hyaluronic acid.
Другой задачей настоящего изобретения является предложить сшитую гиалуроновую кислоту, обладающую как однофазными, так и двухфазными характеристиками, полученную путем применения вышеуказанной композиции.Another objective of the present invention is to provide a crosslinked hyaluronic acid having both single-phase and biphasic characteristics obtained by using the above composition.
Другой задачей настоящего изобретения является предложить способ получения сшитой гиалуроновой кислоты, обладающей как однофазными, так и двухфазными характеристиками, полученной с использованием вышеуказанной композиции.Another objective of the present invention is to provide a method for producing a cross-linked hyaluronic acid having both single-phase and biphasic characteristics obtained using the above composition.
Техническое решениеTechnical solution
Для решения указанных задач в настоящем изобретении предложена композиция для получения сшитой гиалуроновой кислоты, содержащая водный щелочной раствор гиалуроновой кислоты с концентрацией от 15 до 25 мас.% и сшивающий агент и имеющая значение Tan δ от 0,5 до 1,5 в диапазоне частот от 0,02 до 1 Гц.To solve these problems, the present invention provides a composition for the preparation of crosslinked hyaluronic acid, containing an aqueous alkaline solution of hyaluronic acid with a concentration of from 15 to 25 wt.% And a crosslinking agent and having a Tan δ value of from 0.5 to 1.5 in the frequency range from 0.02 to 1 Hz.
Коэффициент механических потерь Tan δ представляет собой численное значение величины вязкоупругих свойств материала, где Tan δ может быть вычислен как соотношение G″ к G′ (G″/G′). В этом расчете G′ представляет собой модуль упругости, a G″ представляет собой модуль вязкости.The mechanical loss coefficient Tan δ is the numerical value of the viscoelastic properties of the material, where Tan δ can be calculated as the ratio of G ″ to G ′ (G ″ / G ′). In this calculation, G ′ represents the modulus of elasticity, and G ″ represents the modulus of viscosity.
Настоящее изобретение отличается тем, что композиция для получения сшитой гиалуроновой кислоты, которая предложена в виде смеси щелочного водного раствора гиалуроновой кислоты с концентрацией от 15 до 25 мас.% и сшивающего агента, имеет значение Tan δ от 0,5 до 1,5 в диапазоне частот от 0,02 до 1 Гц перед реакцией сшивания.The present invention is characterized in that the composition for producing crosslinked hyaluronic acid, which is proposed as a mixture of an alkaline aqueous solution of hyaluronic acid with a concentration of from 15 to 25 wt.% And a crosslinking agent, has a Tan δ value of from 0.5 to 1.5 in the range frequencies from 0.02 to 1 Hz before the crosslinking reaction.
Предпочтительно, композиция имеет значение Tan δ от 0,5 до 1,5 при частоте 0,02 Гц.Preferably, the composition has a Tan δ value of from 0.5 to 1.5 at a frequency of 0.02 Hz.
В настоящем изобретении можно получить вязкоупругую сшитую гиалуроновую кислоту, которая демонстрирует как вязкие, так и упругие характеристики, путем предложения композиции со значением Tan δ от 0,5 до 1,5 в диапазоне частот от 0,02 до 1 Гц в качестве композиции для получения сшитой гиалуроновой кислоты.In the present invention, it is possible to obtain a viscoelastic crosslinked hyaluronic acid that exhibits both viscous and elastic characteristics by proposing a composition with a Tan δ value from 0.5 to 1.5 in the frequency range from 0.02 to 1 Hz as a composition for producing crosslinked hyaluronic acid.
В примерах настоящего изобретения после получения композиции со значением Tan δ 0,7, 0,97 или 1,39 при частоте 0,02 Гц, в течение определенного времени наблюдали за ее реологическими свойствами, и результаты свидетельствовали о том, что композиция обладает превосходными вязкоупругими свойствами (Примеры 1-3, Фиг. 1).In the examples of the present invention, after obtaining a composition with a Tan value of 0.7, 0.97, or 1.39 at a frequency of 0.02 Hz, its rheological properties were observed for a certain time, and the results showed that the composition has excellent viscoelastic properties (Examples 1-3, Fig. 1).
Кроме того, при использовании композиции для получения сшитой гиалуроновой кислоты по настоящему изобретению может быть получена вязкоупругая сшитая гиалуроновая кислота, обладающая стабильностью в отношении фермента, отличными свойствами восстановления ткани и длительным действием.In addition, when using the composition for the preparation of crosslinked hyaluronic acid of the present invention, a viscoelastic crosslinked hyaluronic acid having enzyme stability, excellent tissue repair properties and a long-lasting effect can be obtained.
При использовании в данной заявке термин "гиалуроновая кислота" относится ко всему из гиалуроновой кислоты самой по себе, ее солей или их комбинации. Соль гиалуроновой кислоты включает неорганические соли, такие как гиалуронат натрия, гиалуронат калия, гиалуронат кальция, гиалуронат магния, гиалуронат цинка, гиалуронат кобальта, и органические соли, такие как гиалуронат тетрабутиламмония. В настоящем изобретении гиалуроновая кислота может быть использована отдельно в виде гиалуроновой кислоты самой по себе или отдельно в виде ее соли; либо гиалуроновая кислота или ее соль может быть использована в комбинации из двух или более ингредиентов: гиалуроновой кислоты самой по себе или ее соли.When used in this application, the term "hyaluronic acid" refers to all of the hyaluronic acid itself, its salts or a combination thereof. The hyaluronic acid salt includes inorganic salts such as sodium hyaluronate, potassium hyaluronate, calcium hyaluronate, magnesium hyaluronate, zinc hyaluronate, cobalt hyaluronate, and organic salts such as tetrabutylammonium hyaluronate. In the present invention, hyaluronic acid can be used separately in the form of hyaluronic acid per se or separately in the form of its salt; or hyaluronic acid or its salt can be used in combination of two or more ingredients: hyaluronic acid per se or its salt.
В настоящем изобретении молекулярная масса гиалуроновой кислоты может составлять от 100000 до 5000000.In the present invention, the molecular weight of hyaluronic acid may be from 100,000 to 5,000,000.
В настоящем изобретении щелочной водный раствор может представлять собой раствор NaOH, но не ограничен им. При этом раствор NaOH может быть использован в концентрации от 0,25 н. до 5 н.In the present invention, the alkaline aqueous solution may be, but is not limited to, a NaOH solution. In this case, the NaOH solution can be used in a concentration of 0.25 N. up to 5 n.
В настоящем изобретении сшивающий агент может представлять собой 1,4-бутандиолдиглицидиловый простой эфир, но не ограничен им.In the present invention, the crosslinking agent may be, but is not limited to, 1,4-butanediol diglycidyl ether.
Кроме того, в настоящем изобретении предложена сшитая гиалуроновая кислота, полученная путем сшивания композиции для получения сшитой гиалуроновой кислоты, которая содержит щелочной водный раствор гиалуроновой кислоты с концентрацией от 15 до 25 мас.% и сшивающий агент и имеет значение Tan δ от 0,5 до 1,5 в диапазоне частот от 0,02 до 1 Гц.In addition, the present invention provides a crosslinked hyaluronic acid obtained by crosslinking a composition for producing a crosslinked hyaluronic acid that contains an alkaline aqueous solution of hyaluronic acid with a concentration of 15 to 25 wt.% And a crosslinking agent and has a Tan δ value of 0.5 to 1.5 in the frequency range from 0.02 to 1 Hz.
Как указано выше, в настоящем изобретении сшитая гиалуроновая кислота как с однофазными, так и с двухфазными характеристиками может быть получена после получения сшитой гиалуроновой кислоты путем сшивания композиции с конкретным диапазоном значений Tan δ в конкретном диапазоне частот.As indicated above, in the present invention, cross-linked hyaluronic acid with both single-phase and two-phase characteristics can be obtained after obtaining cross-linked hyaluronic acid by crosslinking a composition with a specific Tan δ range in a particular frequency range.
Другими словами, в настоящем изобретении конечная сшитая гиалуроновая кислота имеет как однофазные, так и двухфазные характеристики. Также, конечная сшитая гиалуроновая кислота имеет стабильность в отношении фермента, отличные свойства восстановления ткани и длительное действие.In other words, in the present invention, the final crosslinked hyaluronic acid has both single-phase and biphasic characteristics. Also, the final crosslinked hyaluronic acid has enzyme stability, excellent tissue repair properties and a long-lasting effect.
В примере по настоящему изобретению результат исследования на устойчивость к ферменту сшитой гиалуроновой кислоты, полученной путем сшивания смеси со значением Tan δ 0,97, показал отличную устойчивость в отношении гиалуронидазы.In the example of the present invention, the result of a crosslinked hyaluronic acid enzyme resistance test obtained by crosslinking a mixture with a Tan δ value of 0.97 showed excellent hyaluronidase resistance.
Кроме того, в настоящем изобретении предложен способ получения сшитой гиалуроновой кислоты, включающийIn addition, the present invention provides a method for producing a crosslinked hyaluronic acid, comprising
1) получение сшитой гиалуроновой кислоты путем сшивания композиции для получения сшитой гиалуроновой кислоты, содержащей водный щелочной раствор гиалуроновой кислоты с концентрацией от 15 до 25 мас.% и сшивающий агент и имеющей значение Tan δ от 0,5 до 1,5 при частоте от 0,02 до 1 Гц (Стадия 1).1) obtaining a crosslinked hyaluronic acid by crosslinking a composition to obtain a crosslinked hyaluronic acid containing an aqueous alkaline solution of hyaluronic acid with a concentration of from 15 to 25 wt.% And a crosslinking agent and having a Tan value of from 0.5 to 1.5 at a frequency of 0 , 02 to 1 Hz (Stage 1).
Предпочтительно, способ получения сшитой гиалуроновой кислоты по настоящему изобретению может включать получение суспензии сшитой гиалуроновой кислоты путем дробления сшитой гиалуроновой кислоты, промывания солевым раствором и набухания, и затем измельчения (Стадия 2) после Стадии 1.Preferably, the method for preparing the crosslinked hyaluronic acid of the present invention may include preparing a suspension of the crosslinked hyaluronic acid by crushing the crosslinked hyaluronic acid, washing with saline and swelling, and then grinding (Step 2) after
Стадия 1 получения сшитой гиалуроновой кислоты путем сшивания композиции для получения сшитой гиалуроновой кислоты, которая содержит щелочной водный раствор гиалуроновой кислоты с концентрацией от 15 до 25 мас.% и сшивающий агент и имеет значение Tan δ от 0,5 до 1,5 при частоте от 0,02 до 1 Гц, представляет собой стадию получения изначально вязкоупругой сшитой гиалуроновой кислоты путем сшивания композиции для получения сшитой гиалуроновой кислоты с конкретным значением Tan δ в конкретном диапазоне частот.
В способе получения сшитой гиалуроновой кислоты по настоящему изобретению сшитая гиалуроновая кислота со многими характеристиками может быть получена путем индуцирования прививки, а не сшивания, путем индуцирования разложения гиалуроновой кислоты для некоторых и путем индуцирования реакции сшивания для других в процессе смешивания исходного вещества, который является одним из наиболее важным процессов.In the method for producing crosslinked hyaluronic acid of the present invention, crosslinked hyaluronic acid with many characteristics can be obtained by inducing inoculation, rather than crosslinking, by inducing decomposition of hyaluronic acid for some and by inducing a crosslinking reaction for others in the process of mixing the starting material, which is one of most important processes.
Для индуцирования вышеуказанной реакции, важными могут быть концентрация гиалуроновой кислоты и диапазон значений Tan δ смеси.To induce the above reaction, the concentration of hyaluronic acid and the range of Tan δ values of the mixture may be important.
Во-первых, концентрация щелочного водного раствора гиалуроновой кислоты, используемая для реакции сшивания, должна быть доведена до диапазона концентраций от 15 до 25 мас.%. Если концентрация щелочного водного раствора гиалуроновой кислоты составляет менее чем 10% по массе, степень свободы молекулярной цепи гиалуроновой кислоты увеличивается и образуется сшитый продукт, обладающий вязкостью, а если она составляет более чем 25% по массе, вязкоупругие свойства являются высокими, но биосовместимость является низкой, что может вызывать побочные эффекты в организме человека.Firstly, the concentration of an alkaline aqueous solution of hyaluronic acid used for the crosslinking reaction should be brought to a concentration range of 15 to 25 wt.%. If the concentration of the alkaline aqueous solution of hyaluronic acid is less than 10% by mass, the degree of freedom of the molecular chain of hyaluronic acid increases and a crosslinked product with a viscosity is formed, and if it is more than 25% by mass, the viscoelastic properties are high, but the biocompatibility is low that can cause side effects in the human body.
Кроме того, вышеуказанная реакция может быть завершена путем смешивания и взаимодействия в гетерогенных условиях в ходе смешивания исходного вещества. Гетерогенное смешивание может быть индуцировано добавлением сшивающего агента после первоначального смешивания щелочного раствора и гиалуроновой кислоты. Гомогенность смеси может быть проверена по значению Tan δ вязкоупругой жидкости, а степень растворения может быть подтверждена путем контролирования значения Tan δ, так как значение Tan δ, близкое к 1, указывает на раствор, а близкое к 0, указывает на эластомер.In addition, the above reaction can be completed by mixing and reacting under heterogeneous conditions during the mixing of the starting material. Heterogeneous mixing can be induced by the addition of a crosslinking agent after the initial mixing of the alkaline solution and hyaluronic acid. The homogeneity of the mixture can be checked by the Tan δ value of the viscoelastic fluid, and the degree of dissolution can be confirmed by controlling the Tan δ value, since a Tan δ value close to 1 indicates a solution, and close to 0 indicates an elastomer.
В настоящем изобретении сшитая гиалуроновая кислота, обладающая как вязкостью, так и упругостью, может быть получена путем применения композиции для получения сшитой гиалуроновой кислоты, где значение Tan δ скорректировано к диапазону от 0,5 до 1,5 при частоте от 0,02 до 1 Гц. Сшитая гиалуроновая кислота по настоящему изобретению может находиться в инъецируемой форме, так как она обладает как вязкостью, так и упругостью, как указано выше, и обладает преимуществом превосходной стабильности и свойствами восстановления ткани без дополнительных полимеров.In the present invention, a crosslinked hyaluronic acid having both viscosity and elasticity can be obtained by using a composition to produce a crosslinked hyaluronic acid, where the Tan δ value is adjusted to a range of 0.5 to 1.5 at a frequency of 0.02 to 1 Hz The crosslinked hyaluronic acid of the present invention may be in an injectable form, as it has both viscosity and elasticity as described above and has the advantage of excellent stability and tissue repair properties without additional polymers.
Кроме того, в настоящем изобретении разложение гиалуроновой кислоты, подвергнутой воздействию щелочного раствора, может быть минимизировано посредством контролирования увеличения температуры, вызванного теплом смешанного трения во время смешивания щелочного раствора и гиалуроновой кислоты. При этом температура предпочтительно составляет 10-50°С, более предпочтительно 20-40°С, и наиболее предпочтительно 25-35°С.In addition, in the present invention, the decomposition of hyaluronic acid exposed to an alkaline solution can be minimized by controlling the temperature increase caused by the heat of mixed friction during mixing of the alkaline solution and hyaluronic acid. The temperature is preferably 10-50 ° C, more preferably 20-40 ° C, and most preferably 25-35 ° C.
Стадия 2 получения суспензии сшитой гиалуроновой кислоты путем измельчения после промывки солевым раствором и набухания после дробления сшитой гиалуроновой кислоты является стадией получения конечной сшитой гиалуроновой кислоты путем заключительной обработки сшитой гиалуроновой кислоты.
В настоящем изобретении конечная сшитая гиалуроновая кислота, полученная, как указано выше, имеет как однофазные, так и двухфазные характеристики. Кроме того, конечная сшитая гиалуроновая кислота имеет стабильность в отношении фермента, отличную способность восстанавливать ткань и длительное действие.In the present invention, the final crosslinked hyaluronic acid obtained as described above has both single-phase and two-phase characteristics. In addition, the final crosslinked hyaluronic acid has enzyme stability, excellent tissue repair ability and long-lasting effect.
Осуществление изобретенияThe implementation of the invention
В настоящем изобретении можно получить вязкоупругую сшитую гиалуроновую кислоту, которая имеет как вязкие, так и упругие характеристики, путем получения композиции для получения вязкоупругой сшитой гиалуроновой кислоты со значением Tan δ от 0,5 до 1,5 при частоте от 0,02 до 1 Гц. Кроме того, преимуществом настоящего изобретения является получение вязкоупругой сшитой гиалуроновой кислоты, которая имеет стабильность в отношении фермента, превосходную способность восстанавливать ткань и длительное действие, путем применения композиции для получения сшитой гиалуроновой кислоты.In the present invention, it is possible to obtain a viscoelastic crosslinked hyaluronic acid that has both viscous and elastic characteristics by preparing a composition for producing a viscoelastic crosslinked hyaluronic acid with a Tan δ value from 0.5 to 1.5 at a frequency of from 0.02 to 1 Hz . In addition, an advantage of the present invention is the preparation of a viscoelastic crosslinked hyaluronic acid that has enzyme stability, excellent tissue repair ability and long-lasting effect by using a composition for the preparation of crosslinked hyaluronic acid.
Описание графических материаловDescription of graphic materials
На Фиг. 1 представлены результаты измерения при помощи реометра реологических свойств композиции для получения сшитой гиалуроновой кислоты в зависимости от времени реакции. На Фиг. 1 красные точки (и цифра 1) обозначают Пример 1, синие точки (и цифра 2) обозначают Пример 2, желтые точки (и цифра 3) обозначают Пример 3, и зеленые точки (и цифра 4) обозначают контрольную группу.In FIG. 1 shows the measurement results using a rheometer of the rheological properties of the composition to obtain crosslinked hyaluronic acid depending on the reaction time. In FIG. 1 the red dots (and the number 1) indicate Example 1, the blue dots (and the number 2) indicate Example 2, the yellow dots (and the number 3) indicate Example 3, and the green dots (and the number 4) indicate the control group.
На Фиг. 2 представлены результаты измерения вязкоупругости во время разложения сшитой гиалуроновой кислоты гиалуронидазой в Примере 5 и в Сравнительном примере 1. На Фиг. 2 синие точки (и цифра 5) обозначают сшитую гиалуроновую кислоту из Примера 5, а красные точки (и цифра 6) обозначают сшитую гиалуроновую кислоту из Сравнительного примера 1.In FIG. 2 shows the results of measuring viscoelasticity during decomposition of crosslinked hyaluronic acid with hyaluronidase in Example 5 and Comparative Example 1. FIG. 2, the blue dots (and number 5) indicate the crosslinked hyaluronic acid from Example 5, and the red dots (and the number 6) indicate crosslinked hyaluronic acid from the Comparative Example 1.
Конкретное осуществление изобретенияSpecific Embodiment
Настоящее изобретение описано более подробно путем приведения Примеров ниже. Однако эти Примеры предназначены исключительно для иллюстрации,и никоим образом не для ограничения, заявленного изобретения.The present invention is described in more detail by providing Examples below. However, these Examples are intended solely to illustrate, and in no way to limit, the claimed invention.
Примеры 1-3: Получение композиции для получения сшитой гиалуроновой кислоты и исследование ее реологических свойств в зависимости от времени реакцииExamples 1-3: Preparation of a composition for the preparation of crosslinked hyaluronic acid and study of its rheological properties depending on the reaction time
1 г гиалуроновой кислоты (молекулярная масса: около 3 миллиона дальтон, производитель: LG Life Sciences) растворяли в 0,25 н. растворе NaOH в концентрации 20% по массе, и предварительно перемешивали, чтобы порошок не летел. Для определения степени смешивания использовали краситель, к смеси добавляли 1,4-бутандиолдиглицидиловый простой эфир в качестве сшивающего агента, гомогенно смешивали до того же состояния, после чего получали смесь, значение Tan δ которой в смешанном состоянии составляло 0,7 (Пример 1), 0,97 (Пример 2) или 1,39 (Пример 3) при 0,02 Гц. Наблюдали реологические свойства смеси в зависимости от времени реакции с использованием реометра (MCR301, Anton paar). Для сравнения, в качестве контрольной группы использовали непрореагировавшую смесь до добавления сшивающего агента.1 g of hyaluronic acid (molecular weight: about 3 million daltons, manufacturer: LG Life Sciences) was dissolved in 0.25 N. NaOH solution at a concentration of 20% by weight, and pre-mixed so that the powder does not fly. To determine the degree of mixing, a dye was used, 1,4-butanediol diglycidyl ether was added to the mixture as a crosslinking agent, homogeneously mixed to the same state, after which a mixture was obtained, the value of Tan δ of which in the mixed state was 0.7 (Example 1), 0.97 (Example 2) or 1.39 (Example 3) at 0.02 Hz. The rheological properties of the mixture were observed as a function of reaction time using a rheometer (MCR301, Anton paar). For comparison, an unreacted mixture was used as a control group until a crosslinking agent was added.
Результаты показаны на Фиг. 1.The results are shown in FIG. one.
На Фиг. 1 показано, что когда значение Tan 5 смеси составляет 0,7, 0,97 или 1,39 при 0,02 Гц, изменение вязкости реагирующего вещества в зависимости от времени находится в диапазоне от 40 миллионов до 150 миллионов сП, что указывает на то, что разложение и сшивка некоторой части сшитой смеси развиваются с течением времени.In FIG. 1 shows that when the
Сравнительный пример 1: Получение сшитой гиалуроновой кислоты с однофазными характеристикамиComparative Example 1: Preparation of Cross-Linked Hyaluronic Acid with Single Phase Characteristics
Гиалуроновую кислоту (молекулярная масса: около 3 миллионов дальтон, производитель: LG Life Sciences) растворяли в растворе 0,25 н. NaOH в концентрации 10% по массе, добавляли 1,4-бутандиолдиглицидиловый простой эфир в качестве сшивающего агента и затем смешивали. После завершения смешивания смесь помещали на водяную баню с постоянной температурой и в результате реакции сшивания получали комок геля, который промывали буферным раствором и оставляли набухать.Hyaluronic acid (molecular weight: about 3 million daltons, manufacturer: LG Life Sciences) was dissolved in a solution of 0.25 N. NaOH at a concentration of 10% by weight, 1,4-butanediol diglycidyl ether was added as a crosslinking agent and then mixed. After mixing was completed, the mixture was placed in a constant temperature water bath and, as a result of the crosslinking reaction, a lump of gel was obtained, which was washed with a buffer solution and allowed to swell.
Примеры 4-6: Получение сшитой гиалуроновой кислоты как с однофазными, так и с двухфазными характеристикамиExamples 4-6: Obtaining cross-linked hyaluronic acid with both single-phase and two-phase characteristics
Сшитую гиалуроновую кислоту получали путем сшивания смеси, полученной в Примерах 1-3, измельчали до подходящего размера, промывали солевым раствором и оставляли набухать. Сшитую гиалуроновую кислоту получали после измельчения с использованием измельчающего устройства.Crosslinked hyaluronic acid was prepared by crosslinking the mixture obtained in Examples 1-3, crushed to a suitable size, washed with brine and allowed to swell. Crosslinked hyaluronic acid was obtained after grinding using a grinding device.
Экспериментальный пример 1: Исследование вязкоупругости сшитой гиалуроновой кислоты по настоящему изобретению, имеющей как однофазные, так и многофазные характеристикиExperimental Example 1: Viscoelasticity Study of Crosslinked Hyaluronic Acid of the Present Invention Having Both Single Phase and Multiphase Characteristics
Значение вязкоупругости получали при частоте 0,02 Гц после стерилизации сшитой гиалуроновой кислоты из Сравнительного примера 1 и Примеров 4-6 и затем осуществляли анализ Tan δ.A viscoelasticity value was obtained at a frequency of 0.02 Hz after sterilization of crosslinked hyaluronic acid from Comparative Example 1 and Examples 4-6, and then Tan δ analysis was performed.
Результаты показаны в Таблице 1.The results are shown in Table 1.
В Таблице 1 показано, что сшитая гиалуроновая кислота по настоящему изобретению имеет превосходную когезивность, которая соответствует вязкости, и превосходную упругость по сравнению со Сравнительным примером 1, что подтверждает, что сшитая гиалуроновая кислота по настоящему изобретению имеет отличную вязкоупругость. Кроме того, в то время как сшитая гиалуроновая кислота в Сравнительном примере 1 имеет однофазную характеристику, может быть установлено, что сшитая гиалуроновая кислота по настоящему изобретению имеет двухфазную характеристику.Table 1 shows that the crosslinked hyaluronic acid of the present invention has excellent cohesiveness, which corresponds to viscosity, and excellent elasticity compared to Comparative Example 1, which confirms that the crosslinked hyaluronic acid of the present invention has excellent viscoelasticity. In addition, while the crosslinked hyaluronic acid in Comparative Example 1 has a single-phase characteristic, it can be found that the cross-linked hyaluronic acid of the present invention has a two-phase characteristic.
Экспериментальный пример 2: Исследование устойчивости к ферменту сшитой гиалуроновой кислоты по настоящему изобретениюExperimental Example 2: Investigation of crosslinked hyaluronic acid enzyme resistance of the present invention
Сшитую гиалуроновую кислоту из Примера 5 и Сравнительного примера 1 в заключение стерилизовали после измельчения, помещали 0.6 г в пробирку Эппендорфа и добавляли 6 мкл гиалуронидазы 500 Ед/мл, гомогенно смешивали и затем измеряли вязкоупругие свойства с помощью реометра.The cross-linked hyaluronic acid from Example 5 and Comparative Example 1 was finally sterilized after grinding, placed 0.6 g in an Eppendorf tube, 6 μl of 500 U / ml hyaluronidase was added, mixed homogeneously, and then the viscoelastic properties were measured using a rheometer.
Результат показан на Фиг. 2.The result is shown in FIG. 2.
На Фиг. 2 показано, что сшитая гиалуроновая кислота по настоящему изобретению имеет превосходные вязкоупругие свойства даже при обработке гиалуронидазой, по сравнению со Сравнительным примером 1, что является подтверждением того, что сшитая гиалуроновая кислота по настоящему изобретению имеет отличную устойчивость к ферменту.In FIG. 2 shows that the crosslinked hyaluronic acid of the present invention has excellent viscoelastic properties even when treated with hyaluronidase, compared with Comparative Example 1, which confirms that the crosslinked hyaluronic acid of the present invention has excellent enzyme resistance.
Claims (6)
получение гиалуроновой кислоты путем сшивания композиции для получения сшитой гиалуроновой кислоты по любому из пп. 1-5 (стадия 1); и
получение суспензии сшитой гиалуроновой кислоты путем дробления сшитой гиалуроновой кислоты, промывки солевым раствором и набухания и измельчения сшитой гиалуроновой кислоты (стадия 2). 6. A method of obtaining a cross-linked hyaluronic acid, including:
obtaining hyaluronic acid by crosslinking the composition to obtain a crosslinked hyaluronic acid according to any one of paragraphs. 1-5 (stage 1); and
obtaining a suspension of crosslinked hyaluronic acid by crushing crosslinked hyaluronic acid, washing with saline and swelling and grinding the crosslinked hyaluronic acid (step 2).
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020130032956A KR101869988B1 (en) | 2013-03-27 | 2013-03-27 | A composition for preparation of viscoelastic crosslinked hyaluronic acid, and crosslinked hyaluronic acid obtained by using the same |
| KR10-2013-0032956 | 2013-03-27 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2013153007A RU2013153007A (en) | 2015-06-10 |
| RU2568998C2 true RU2568998C2 (en) | 2015-11-20 |
Family
ID=51594442
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2013153007/13A RU2568998C2 (en) | 2013-03-27 | 2013-11-29 | Composition for producing cross-linked hyaluronic acid and method of producing cross-linked hyaluronic acid |
Country Status (10)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR101869988B1 (en) |
| CN (2) | CN104072814A (en) |
| AR (1) | AR093689A1 (en) |
| BR (1) | BR102013030668B1 (en) |
| IN (1) | IN2013MU03773A (en) |
| MX (1) | MX366526B (en) |
| MY (1) | MY169325A (en) |
| RU (1) | RU2568998C2 (en) |
| TR (1) | TR201313318A2 (en) |
| TW (1) | TWI522134B (en) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20160268291A1 (en) * | 2015-03-13 | 2016-09-15 | Kabushiki Kaisha Toshiba | Semiconductor device and manufacturing method of semiconductor device |
| KR101720426B1 (en) * | 2015-09-01 | 2017-04-14 | (주)시지바이오 | Composition comprising hyaluronic acid and the method for preparing the same |
| KR102392812B1 (en) * | 2018-07-06 | 2022-04-29 | 주식회사 엘지화학 | Hyaluronic acid filler having both of high viscoelasticity and cohesivity |
| CA3106381C (en) * | 2018-07-10 | 2024-02-13 | Lg Chem, Ltd. | Hyaluronic acid filler having high lift capacity and low injection force |
| KR102395184B1 (en) * | 2020-03-10 | 2022-05-10 | (주)메디톡스 | Crosslinked hyaluronic acid which is neither monophasic nor biphasic, and use thereof |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5827937A (en) * | 1995-07-17 | 1998-10-27 | Q Med Ab | Polysaccharide gel composition |
| RU2398566C2 (en) * | 2004-05-05 | 2010-09-10 | Ку-Мед Аб | New use of viscoelastic composition |
Family Cites Families (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1098863C (en) * | 1995-11-15 | 2003-01-15 | 生化学株式会社 | Photocured cross-linked-hyaluronic acid gel and method of preparation thereof |
| FR2811996B1 (en) * | 2000-07-19 | 2003-08-08 | Corneal Ind | CROSS-LINKING OF POLYSACCHARIDE (S), PREPARATION OF HYDROGEL (S); POLYSACCHARIDE (S) AND HYDROGEL (S) OBTAINED, THEIR USES |
| CN101056891B (en) * | 2004-11-15 | 2010-05-26 | 株式会社资生堂 | Process for preparing crosslinked hyaluronic acid gel |
| KR100852944B1 (en) * | 2007-02-15 | 2008-08-19 | (주)아모레퍼시픽 | Preparation method of chemically cross-linked hyaluronic acid hydrogel nanoparticles |
| CN101244290A (en) * | 2007-11-30 | 2008-08-20 | 顾其胜 | Method for preparing crosslinked hyaluronic acid microgel for tissue filling |
| CN101538377A (en) * | 2008-03-20 | 2009-09-23 | 上海昊海生物科技有限公司 | Cross-linked hyaluronic acid gel and preparation method thereof |
| CN101759881A (en) * | 2008-10-08 | 2010-06-30 | 上海建华精细生物制品有限公司 | Medical cross-linking sodium hyaluronate gel derivative product and preparation method thereof |
| CN101724164B (en) * | 2008-10-31 | 2011-12-14 | 科妍生物科技股份有限公司 | Method for preparing cross-linked hyaluronic acid |
| CN102188712A (en) * | 2010-03-04 | 2011-09-21 | 上海其胜生物制剂有限公司 | Method for preparing injectable microgelparticles |
| CN102120833A (en) * | 2011-01-10 | 2011-07-13 | 深圳市资福药业有限公司 | Hyaluronate gel particle and preparation method thereof |
| CN102952275A (en) * | 2011-08-19 | 2013-03-06 | 上海建华精细生物制品有限公司 | Hyaluronic acid gel employing biphasic technology, and preparation method thereof |
-
2013
- 2013-03-27 KR KR1020130032956A patent/KR101869988B1/en active IP Right Grant
- 2013-11-13 TW TW102141213A patent/TWI522134B/en active
- 2013-11-14 MY MYPI2013702159A patent/MY169325A/en unknown
- 2013-11-15 TR TR2013/13318A patent/TR201313318A2/en unknown
- 2013-11-26 MX MX2013013828A patent/MX366526B/en active IP Right Grant
- 2013-11-28 BR BR102013030668A patent/BR102013030668B1/en active IP Right Grant
- 2013-11-29 AR ARP130104435A patent/AR093689A1/en active IP Right Grant
- 2013-11-29 CN CN201310631346.7A patent/CN104072814A/en active Pending
- 2013-11-29 RU RU2013153007/13A patent/RU2568998C2/en active
- 2013-11-29 CN CN201811531607.7A patent/CN110078978A/en active Pending
- 2013-12-02 IN IN3773MU2013 patent/IN2013MU03773A/en unknown
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5827937A (en) * | 1995-07-17 | 1998-10-27 | Q Med Ab | Polysaccharide gel composition |
| RU2398566C2 (en) * | 2004-05-05 | 2010-09-10 | Ку-Мед Аб | New use of viscoelastic composition |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN110078978A (en) | 2019-08-02 |
| AR093689A1 (en) | 2015-06-17 |
| KR101869988B1 (en) | 2018-06-21 |
| TR201313318A2 (en) | 2014-10-21 |
| IN2013MU03773A (en) | 2015-08-07 |
| BR102013030668B1 (en) | 2020-04-07 |
| MY169325A (en) | 2019-03-21 |
| TW201436827A (en) | 2014-10-01 |
| TWI522134B (en) | 2016-02-21 |
| BR102013030668A8 (en) | 2018-05-08 |
| MX366526B (en) | 2019-07-11 |
| MX2013013828A (en) | 2014-09-26 |
| CN104072814A (en) | 2014-10-01 |
| KR20140117956A (en) | 2014-10-08 |
| BR102013030668A2 (en) | 2015-08-04 |
| RU2013153007A (en) | 2015-06-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2568998C2 (en) | Composition for producing cross-linked hyaluronic acid and method of producing cross-linked hyaluronic acid | |
| KR102076337B1 (en) | Composition for injection of hyaluronic acid comprising cross-linked hyaluronic acid derivative and DNA fraction, and use thereof | |
| CN104086788B (en) | A kind of injection modifies hyaluronic acid sodium gel | |
| US9919076B2 (en) | Biodegradable single-phase cohesive hydrogels | |
| JP6342906B2 (en) | Injectable sterile aqueous formulation for cosmetic use based on cross-linked hyaluronic acid and hydroxyapatite | |
| RU2683286C2 (en) | Method for crosslift of hyaluronic acid, method for preparation of injection hydrogel, hydrogel and use thereof | |
| ES2549668T3 (en) | Derivatives based on hyaluronic acid, capable of forming hydrogels, method of preparation thereof, hydrogels based on said derivatives, method of preparation thereof and use | |
| KR101356320B1 (en) | A long-lasting injectable hyraluronic acid dermal filler developed by pullulan microsphere | |
| US20100028435A1 (en) | Injectable hydrogel with an enhanced remanence and with an enhanced ability to create volume | |
| CN103333349A (en) | Hyaluronic acid-collagen composite hydrogel for injection and preparation method thereof | |
| EP3316911B1 (en) | Method of preparing a composition based on hyaluronic acid | |
| CN104774337A (en) | Agarose microsphere-containing cross-linked sodium hyaluronate gel for injection and preparation method thereof | |
| CN108478875A (en) | A kind of preparation method and applications of cross-linked hyaluronic acid gel microballoon | |
| CN106519072B (en) | Injectable type sodium hyaluronate/polyethylene glycol hydrogel and its preparation method and application | |
| CZ2010687A3 (en) | Process for preparing extremely substituted hyaluronic acid amides x | |
| WO2010097993A1 (en) | Salt-resistant thickener and cosmetic comprising same | |
| JP6561133B2 (en) | Biocompatible composition and method for producing the same | |
| JP2023503894A (en) | Sulfhydryl-modified polymer compound, preparation method and use thereof | |
| CN106474569A (en) | A kind of preparation method of the critical hydrogel of carboxymethyl chitin | |
| WO2006030283A1 (en) | Process for the preparation of a polymeric hydrogel based on a highly purified polyvinylalcohol and uses thereof | |
| KR20130010973A (en) | Method of prepairing crosslinked hyaluronic acid gel | |
| EP3052529B1 (en) | Single-step functionalization and cross-linking of hyaluronic acid | |
| KR20170105212A (en) | A long-lasting injectable hyraluronic acid dermal filler developed by pullulan microsphere | |
| KR20170100746A (en) | hyraluronic acid dermal filler | |
| KR20220004678A (en) | Methods for Crosslinking Polymers |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD4A | Correction of name of patent owner | ||
| PC43 | Official registration of the transfer of the exclusive right without contract for inventions |
Effective date: 20180213 |