RU2566732C1 - Method for prediction of lymphatic cancer spread accompanying non-specific breast carcinoma - Google Patents

Method for prediction of lymphatic cancer spread accompanying non-specific breast carcinoma Download PDF

Info

Publication number
RU2566732C1
RU2566732C1 RU2014128079/15A RU2014128079A RU2566732C1 RU 2566732 C1 RU2566732 C1 RU 2566732C1 RU 2014128079/15 A RU2014128079/15 A RU 2014128079/15A RU 2014128079 A RU2014128079 A RU 2014128079A RU 2566732 C1 RU2566732 C1 RU 2566732C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
value
lymphogenous
probability
hsp27
developing
Prior art date
Application number
RU2014128079/15A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Евгения Викторовна Кайгородова
Марина Викторовна Завьялова
Владимир Михайлович Перельмутер
Мария Вячеславовна Богатюк
Надежда Васильевна Крахмаль
Елена Михайловна Слонимская
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт онкологии" Сибирского отделения Российской академии медицинских наук (ФГБУ "НИИ онкологии" СО РАМН)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт онкологии" Сибирского отделения Российской академии медицинских наук (ФГБУ "НИИ онкологии" СО РАМН) filed Critical Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт онкологии" Сибирского отделения Российской академии медицинских наук (ФГБУ "НИИ онкологии" СО РАМН)
Priority to RU2014128079/15A priority Critical patent/RU2566732C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2566732C1 publication Critical patent/RU2566732C1/en

Links

Images

Abstract

FIELD: medicine.
SUBSTANCE: method involves an immunohistological analysis of primary tumour tissue specimens aiming at determining a percentage of expression of Hsp27 non-phosphorylated molecular chaperone protein in a tumour cell nucleus with taking into account patient's menstrual health, primary tumour size and a degree of malignancy; a regression equation is calculated, and further a probability P of lymphatic cancer spread is derived. If P≥50%, a high risk is predicted, whereas P<50% shows a low risk of developing lymphatic cancer spread.
EFFECT: method enables the high-accuracy and information value prediction of developing lymphatic cancer spread accompanying invasive non-specific breast carcinoma and optimised therapeutic approach to patient management.
2 ex, 5 tbl, 1 dwg

Description

Изобретение относится к области медицины, конкретно к онкологии, и касается способов прогнозирования лимфогенного метастазирования при инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы.The invention relates to medicine, specifically to oncology, and relates to methods for predicting lymphogenous metastasis in invasive carcinoma of a non-specific type of breast.

В настоящее время одним из общепризнанных параметров, ассоциированных с частотой лимфогенного метастазирования при раке молочной железы, является размер опухоли. Известно, что по мере увеличения размера новообразования риск метастатического поражения возрастает. Так, при размере новообразования более 5 мм частота регионарного метастазирования увеличивается до 46%, опухоли менее 5 мм метастазируют в 18% [1, 2].Currently, one of the generally recognized parameters associated with the frequency of lymphogenous metastasis in breast cancer is the size of the tumor. It is known that as the size of the neoplasm increases, the risk of metastatic lesion increases. So, with a tumor size of more than 5 mm, the frequency of regional metastasis increases to 46%, tumors less than 5 mm metastasize in 18% [1, 2].

Гистологическим параметром, связанным с риском лимфогенного метастазирования, принято считать степень злокачественности, определяемую по модифицированной схеме P. Scarff, Н. Bloom и W. Richardson на основании степени тканевой и клеточной атипии (образование тубулярных и протокоподобных структур, число митозов и клеточный полиморфизм) [3]. Степень злокачественности отражается на частоте регионального метастазирования, так при первой степени злокачественности лимфогенное метастазирование наблюдается в 21%, при второй - в 44%, при третьей - в 33% [4]. Другим гистологическим параметром, связанным с риском лимфогенного метастазирования, является опухолевая эмболия в сосудах новообразования [5, 6].The histological parameter associated with the risk of lymphogenous metastasis is considered to be the degree of malignancy determined by the modified scheme of P. Scarff, N. Bloom and W. Richardson based on the degree of tissue and cell atypia (the formation of tubular and duct-like structures, the number of mitoses and cell polymorphism) [ 3]. The degree of malignancy is reflected in the frequency of regional metastasis, so in the first degree of malignancy, lymphogenous metastasis is observed in 21%, in the second - in 44%, in the third - in 33% [4]. Another histological parameter associated with the risk of lymphogenous metastasis is tumor embolism in neoplasms [5, 6].

Наиболее близким к настоящему способу прогнозирования лимфогенного метастазирования при раке молочной железы является способ, предложенный Ермиловой В.Д. с соавт. Суть этого способа основывается на определении уровня экспрессии Her2/neu иммуногистохимическим методом. При этом уровень экспрессии данного маркера оценивается полуколичественно по характеру, интенсивности мембранной реакции и пропорции иммунопозитивных клеток. Неr2/nеu негативными считаются случаи с отсутствием или слабым прерывистым окрашиванием менее чем в 30% клеток (0) или со слабым прерывистым мембранным окрашиванием более чем в 30% клеток (1+). Случаи с умеренным непрерывным мембранным окрашиванием более чем в 30% клеток или интенсивным непрерывным мембранным окрашиванием менее чем в 10% клеток считаются «сомнительными» (2+). Her2/neu позитивными считаются опухоли с непрерывным мембранным окрашиванием более чем в 30% клеток (3+). Установлено, что Неr2/nеu позитивные новообразования (3+) обладают склонностью к более частому метастатическому поражению регионарных лимфатических узлов [7].Closest to the present method for predicting lymphogenous metastasis in breast cancer is the method proposed by Ermilova V.D. et al. The essence of this method is based on determining the level of Her2 / neu expression by the immunohistochemical method. Moreover, the expression level of this marker is evaluated semi-quantitatively by the nature, intensity of the membrane reaction and the proportion of immunopositive cells. Non-negative are considered cases with the absence or weak intermittent staining in less than 30% of cells (0) or with weak intermittent staining in more than 30% of cells (1+). Cases with moderate continuous membrane staining in more than 30% of cells or intensive continuous membrane staining in less than 10% of cells are considered “doubtful” (2+). Her2 / neu are considered positive tumors with continuous membrane staining in more than 30% of cells (3+). It was established that Ner2 / neu positive neoplasms (3+) are prone to more frequent metastatic lesions of regional lymph nodes [7].

Недостатком этого способа является достаточно частое обнаружение случаев с «сомнительной» (2+) экспрессией, требующей дополнительного выявления наличия амплификации гена HER2/neu методом FISH или CISH /SISH.The disadvantage of this method is the rather frequent detection of cases with “doubtful” (2+) expression, requiring additional detection of the presence of HER2 / neu gene amplification by FISH or CISH / SISH.

Новый технический результат - повышение точности и информативности при упрощении способа.A new technical result is an increase in accuracy and information content while simplifying the method.

Для решения поставленной задачи в способе прогнозирования лимфогенного метастазирования при инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы проводят иммуногистохимическое исследование препаратов ткани первичной опухоли. На основании иммуногистохимического исследования определяют процент экспрессии нефосфорилированной формы молекулярного шаперона Hsp27 в ядре опухолевых клеток, также учитывают состояние менструальной функции пациентки, размер первичной опухоли и степень ее злокачественности, рассчитывают значение уравнения регрессии Y по формулеTo solve the problem in a method for predicting lymphogenous metastasis with invasive carcinoma of a non-specific type of breast, an immunohistochemical study of the tissue preparations of the primary tumor is carried out. Based on the immunohistochemical study, the percentage of expression of the non-phosphorylated form of the Hsp27 molecular chaperone in the nucleus of the tumor cells is determined, the state of the patient's menstrual function, the size of the primary tumor and its degree of malignancy are also taken into account, and the value of the Y regression equation is calculated by

Y=(24+12X1-39,9Х2-33,1Х3+47,7X4), Y = (24 + 12X 1 -39.9X 2 -33.1X 3 + 47.7X 4 ),

где Y - значение уравнения регрессии;where Y is the value of the regression equation;

(24) - значение коэффициента регрессии свободного члена;(24) - the value of the regression coefficient of the free member;

X1 - состояние менструальной функции пациентки (1 - сохранена; 2 - менопауза),X 1 - the state of the patient's menstrual function (1 - saved; 2 - menopause),

(12) - значение коэффициента регрессии этого признака; (12) - the value of the regression coefficient of this sign;

Х2 - размер первичной опухоли (1 - до 2 см; 2 - 2-5 см; 3 - более 5 см),X 2 - the size of the primary tumor (1 - up to 2 cm; 2 - 2-5 cm; 3 - more than 5 cm),

(-39,9) - значение коэффициента регрессии этого признака;(-39.9) - the value of the regression coefficient of this sign;

Х3 - степень злокачественности (1 - низкая; 2 - умеренная; 3 - высокая),X 3 - the degree of malignancy (1 - low; 2 - moderate; 3 - high),

(-33,1) - значение коэффициента регрессии этого признака;(-33.1) - the value of the regression coefficient of this sign;

X4 - наличие экспрессии нефосфорилированной формы молекулярного шаперона Hsp27 в ядре опухолевых клеток (1 - нет; 2 - есть),X 4 - the presence of expression of the non-phosphorylated form of the molecular chaperone Hsp27 in the nucleus of tumor cells (1 - no; 2 - yes),

(47,7) - значение коэффициента регрессии этого признака.(47.7) - the value of the regression coefficient of this sign.

Значение вероятности развития лимфогенных метастазов рассчитывают по формуле Р=eY/(1+eY),The probability of developing lymphogenous metastases is calculated by the formula P = e Y / (1 + e Y ),

где Р - значение вероятности развития признака; where P is the value of the probability of development of the sign;

е - математическая константа, равная 2,72.e is the mathematical constant equal to 2.72.

При Р≥50% прогнозируют высокий, а при Р<50% - низкий риск развития лимфогенных метастазов.At P≥50%, a high risk is predicted, and at P <50%, a low risk of developing lymphogenous metastases is predicted.

Способ осуществляют следующим образом.The method is as follows.

Макроскопической оценке подвергают ткань первичной опухоли и все удаленные лимфатические узлы.The tissue of the primary tumor and all removed lymph nodes are subjected to macroscopic evaluation.

Материал фиксируют в 10-12% растворе нейтрального формалина. Проводку материала и изготовление гистологических препаратов осуществляют по стандартной методике. Препараты окрашивают гематоксилином и эозином. Гистологический тип рака устанавливают согласно рекомендациям ВОЗ, Женева, 2012.The material is fixed in a 10-12% solution of neutral formalin. Posting the material and the manufacture of histological preparations is carried out according to standard methods. The drugs are stained with hematoxylin and eosin. The histological type of cancer is determined according to WHO recommendations, Geneva, 2012.

Степень злокачественности оценивают по модифицированной схеме P. Scarff, H. Bloom и W. Richardson. Для определения степени злокачественности исследуют 3 гистологических параметра, каждый из которых оценивают в баллах от 1 до 3: количество тубулярных и протоковых структур (>75% - 1 балл, >10<75% - 2 балла, <10% - 3 балла), число митозов (<10 в 10 полях зрения - 1 балл, >10<20 - 2 балла, >20 - 3 балла), клеточный полиморфизм (клетки одного размера и формы, мелкие, с дисперсным распределением хроматина, без ядрышек - 1 балл, небольшой полиморфизм ядер, некоторое укрупнение клеток - 2 балла, ядра крупные различной формы с одним или несколькими ядрышками, с грубым хроматином - 3 балла). На основании суммы баллов 3 параметров определяют степень злокачественности (3-5 баллов - низкая степень, 6-7 баллов - умеренная степень, 8-9 баллов - высокая степень злокачественности).The degree of malignancy is evaluated by a modified scheme of P. Scarff, H. Bloom and W. Richardson. To determine the degree of malignancy, 3 histological parameters are examined, each of which is rated from 1 to 3: the number of tubular and ductal structures (> 75% - 1 point,> 10 <75% - 2 points, <10% - 3 points), the number of mitoses (<10 in 10 fields of view - 1 point,> 10 <20 - 2 points,> 20 - 3 points), cell polymorphism (cells of the same size and shape, small, with dispersed chromatin distribution, without nucleoli - 1 point, small polymorphism of nuclei, some enlargement of cells - 2 points, large nuclei of various shapes with one or more nucleoli, with coarse chromatin - 3 points). Based on the sum of the points of 3 parameters, the degree of malignancy is determined (3-5 points - low degree, 6-7 points - moderate degree, 8-9 points - high degree of malignancy).

Иммуногистохимическое исследование осуществляют по стандартной методике с использованием моноклональных антител Anti-Hsp27 antibody (клон G3.1, рабочее разведение 1:500, Abcam, ab5579). Отмечают наличие экспрессии Hsp27. Экспрессию оценивают по процентному содержанию позитивно окрашенных ядер клеток на 1000 клеток в 10 полях зрения при большом увеличении микроскопа (×400). Также учитывают состояние менструальной функции пациентки, размер первичной опухоли и степень ее злокачественности. Рассчитывают значение уравнения регрессии Y по формулеImmunohistochemical studies are carried out according to standard methods using monoclonal antibodies Anti-Hsp27 antibody (clone G3.1, working dilution 1: 500, Abcam, ab5579). The presence of Hsp27 expression is noted. Expression is evaluated by the percentage of positively stained cell nuclei per 1000 cells in 10 fields of view at a large magnification of the microscope (× 400). The state of the patient's menstrual function, the size of the primary tumor and the degree of its malignancy are also taken into account. Calculate the value of the regression equation Y by the formula

Y=(24+12X1-39,9Х2-33,1Х3+47,7X4), Y = (24 + 12X 1 -39.9X 2 -33.1X 3 + 47.7X 4 ),

где Y - значение уравнения регрессии;where Y is the value of the regression equation;

(24) - значение коэффициента регрессии свободного члена;(24) - the value of the regression coefficient of the free member;

X1 - состояние менструальной функции пациентки (1 - сохранена; 2 - менопауза),X 1 - the state of the patient's menstrual function (1 - saved; 2 - menopause),

(12) - значение коэффициента регрессии этого признака; (12) - the value of the regression coefficient of this sign;

Х2 - размер первичной опухоли (1 - до 2 см; 2 - 2-5 см; 3 - более 5 см),X 2 - the size of the primary tumor (1 - up to 2 cm; 2 - 2-5 cm; 3 - more than 5 cm),

(-39,9) - значение коэффициента регрессии этого признака;(-39.9) - the value of the regression coefficient of this sign;

Х3 - степень злокачественности (1 - низкая; 2 - умеренная; 3 - высокая),X 3 - the degree of malignancy (1 - low; 2 - moderate; 3 - high),

(-33,1) - значение коэффициента регрессии этого признака;(-33.1) - the value of the regression coefficient of this sign;

Х4 - наличие экспрессии нефосфорилированной формы молекулярного шаперона Hsp27 в ядре опухолевых клеток (1 - нет; 2 - есть),X 4 - the presence of expression of the non-phosphorylated form of the molecular chaperone Hsp27 in the nucleus of tumor cells (1 - no; 2 - have),

(47,7) - значение коэффициента регрессии этого признака.(47.7) - the value of the regression coefficient of this sign.

Значение вероятности развития лимфогенных метастазов определяют по формуле Р=eY/(1+eY),The probability of developing lymphogenous metastases is determined by the formula P = e Y / (1 + e Y ),

где Р - значение вероятности развития признака;where P is the value of the probability of development of the sign;

е - математическая константа, равная 2,72.e is the mathematical constant equal to 2.72.

При Р≥50% прогнозируют высокий, а при Р<50% низкий риск развития лимфогенных метастазов.At P≥50%, a high risk is predicted, and at P <50%, a low risk of developing lymphogenous metastases.

Hsp27 (HspB1) является одним из представителей малых белков теплового шока (small heat shock proteins, sHsp), который ранее был изучен как р29, srp27 и р24 [8]. Основными функциями Hsp27 является фолдинг, мисфолдинг и рефолдинг белков. Шаперон Hsp27 влияет на регуляцию множества внутриклеточных процессов. Так, Hsp27 защищает клетки от запуска апоптоза, препятствуя образованию апоптосомы и нарушая активацию каспаз, участвует в балансе «спокойного» состояния и интенсивного роста опухоли, принимает участие в регуляции эпителиально-мезенхимального перехода и др. [9, 10, 11, 12]. В настоящее время шаперон Hsp27 рассматривают в качестве молекулярного маркера рака молочной железы [10, 13, 14].Hsp27 (HspB1) is one of the representatives of small heat shock proteins (sHsp), which was previously studied as p29, srp27, and p24 [8]. The main functions of Hsp27 are folding, misfolding and protein refolding. Chaperone Hsp27 affects the regulation of many intracellular processes. So, Hsp27 protects cells from starting apoptosis, preventing the formation of apoptosomes and disrupting caspase activation, participates in the balance of the “calm” state and intensive tumor growth, takes part in the regulation of the epithelial-mesenchymal transition, etc. [9, 10, 11, 12]. Chaperone Hsp27 is currently considered as a molecular marker for breast cancer [10, 13, 14].

Сущность предлагаемого способа иллюстрируется следующими примерами.The essence of the proposed method is illustrated by the following examples.

Пример 1. Больная Т., 56 лет, с инвазивной карциномой неспецифического типа молочной железы, в менопаузе (2), с размером опухоли 1,5 см (1), со второй степенью злокачественности (2), с наличием экспрессии нефосфорилированной формы молекулярного шаперона Hsp27 в ядре опухолевых клеток (2). Example 1. Patient T., 56 years old, with invasive carcinoma of a non-specific type of breast, in menopause (2), with a tumor size of 1.5 cm (1), with a second degree of malignancy (2), with the presence of expression of a non-phosphorylated form of molecular chaperone Hsp27 in the nucleus of tumor cells (2).

Рассчитывали значение уравнения регрессии Y:The value of the regression equation Y was calculated:

Y=24+12×2-39,9×1-33,1×2+47,7×2=37,3.Y = 24 + 12 × 2-39.9 × 1-33.1 × 2 + 47.7 × 2 = 37.3.

Значение вероятности развития лимфогенных метастазов определяли по формуле Р=eY/(1+eY)=2,7237,3/(1+2,7237,3)=0,99. The value of the probability of developing lymphogenous metastases was determined by the formula P = e Y / (1 + e Y ) = 2.72 37.3 / (1 + 2.72 37.3 ) = 0.99.

Таким образом, вероятность развития лимфогенных метастазов составила 99%. В операционном материале в исследованных аксиллярных лимфатических узлах определялось метастатическое поражение.Thus, the probability of developing lymphogenous metastases was 99%. In the surgical material in the examined axillary lymph nodes, metastatic lesion was determined.

Пример 2. Больная К., 65 лет, с инвазивной карциномой неспецифического типа молочной железы, в менопаузе (2), с размером опухоли 1,5 см (1), с первой степенью злокачественности (1), с отсутствием экспрессии нефосфорилированной формы молекулярного шаперона Hsp27 в ядре опухолевых клеток (1).Example 2. Patient K., 65 years old, with invasive carcinoma of a non-specific type of breast, in menopause (2), with a tumor size of 1.5 cm (1), with a first degree of malignancy (1), with no expression of a non-phosphorylated form of molecular chaperone Hsp27 in the nucleus of tumor cells (1).

Рассчитывали значение уравнения регрессии YThe value of the regression equation Y was calculated

Y=24+12×2-39,9×1 -33,1×1+47,7×1=22,7.Y = 24 + 12 × 2-39.9 × 1 -33.1 × 1 + 47.7 × 1 = 22.7.

Значение вероятности развития лимфогенных метастазов определяли по формуле Р=eY/(1+eY)=2,7222,7/(1+2,7222,7)=0,01. The probability of developing lymphogenous metastases was determined by the formula P = e Y / (1 + e Y ) = 2.72 22.7 / (1 + 2.72 22.7 ) = 0.01.

Вероятность развития лимфогенных метастазов составила 1%. В операционном материале в исследованных аксиллярных лимфатических узлах метастатического поражения обнаружено не было.The likelihood of developing lymphogenous metastases was 1%. No metastatic lesions were found in the surgical material in the axillary lymph nodes examined.

Предлагаемый способ основан на анализе результатов клинических наблюдений, данных морфологического и иммуногистохимического исследования биопсийного и операционного материала.The proposed method is based on the analysis of the results of clinical observations, data of morphological and immunohistochemical studies of biopsy and surgical material.

Изучался биопсийный материал от 36 больных инвазивной карциномой неспецифического типа молочной железы стадии T1-3N0-3M0. Средний возраст больных составил 49,1±8,5 лет. Больные не получали неоадъювантной терапии. Операция выполнялась в объеме радикальной мастэктомии или радикальной резекции молочной железы.Biopsy material was studied from 36 patients with invasive carcinoma of a non-specific type of mammary gland of the T1-3N0-3M0 stage. The average age of patients was 49.1 ± 8.5 years. Patients did not receive neoadjuvant therapy. The operation was performed in the amount of radical mastectomy or radical resection of the mammary gland.

Макроскопической оценке подвергалась ткань первичной опухоли и все удаленные аксиллярные лимфатические узлы.The tissue of the primary tumor and all removed axillary lymph nodes were subjected to macroscopic evaluation.

Материал фиксировали в 10-12% растворе нейтрального формалина. Проводка материала и изготовление гистологических препаратов осуществляли по стандартной методике. Препараты окрашивали гематоксилином и эозином. Гистологический тип рака устанавливали согласно рекомендациям ВОЗ, Женева, 2012.The material was fixed in a 10-12% solution of neutral formalin. Posting the material and the manufacture of histological preparations was carried out according to standard methods. The preparations were stained with hematoxylin and eosin. The histological type of cancer was determined according to WHO recommendations, Geneva, 2012.

Степень злокачественности оценивали по модифицированной схеме P. Scarff, H. Bloom и W. Richardson. При этом учитывали количество тубулярных и протоковых структур, число митозов и клеточный полиморфизм.The degree of malignancy was evaluated by a modified scheme of P. Scarff, H. Bloom and W. Richardson. The number of tubular and ductal structures, the number of mitoses, and cell polymorphism were taken into account.

Иммуногистохимическое исследование осуществляли по стандартной методике с использованием моноклональных антител Anti-Hsp27 antibody (клон G3.1, рабочее разведение 1:500, Abcam, ab5579). Отмечали наличие экспрессии Hsp27. Экспрессию оценивали по процентному содержанию позитивно окрашенных ядер клеток на 1000 клеток в 10 полях зрения при большом увеличении микроскопа (×400).Immunohistochemical studies were carried out according to standard methods using monoclonal antibodies Anti-Hsp27 antibody (clone G3.1, working dilution 1: 500, Abcam, ab5579). The presence of Hsp27 expression was noted. Expression was evaluated by the percentage of positively stained cell nuclei per 1000 cells in 10 fields of view at high magnification of the microscope (× 400).

Статистическую обработку результатов выполняли с помощью пакета программ «Statistica 6.0 for Windows». Обсуждали результаты с достоверностью различий при р<0,05, и с тенденцией при р<0,1.Statistical processing of the results was performed using the software package “Statistica 6.0 for Windows”. The results were discussed with significance of differences at p <0.05, and with a trend at p <0.1.

Для предсказания риска развития лимфогенных метастазов использовали метод логистической регрессии. Была определена формула To predict the risk of lymphogenous metastases, the logistic regression method was used. The formula was determined

Y=(24+12Х1-39,9Х2-33,1Х3+47,7X4),Y = (24 + 12X 1 -39.9X 2 -33.1X 3 + 47.7X 4 ),

где Y - значение уравнения регрессии; where Y is the value of the regression equation;

(24) - значение коэффициента регрессии свободного члена;(24) - the value of the regression coefficient of the free member;

X1 - состояние менструальной функции пациентки (1 - сохранена; 2 - менопауза), (12) - значение коэффициента регрессии этого признака;X 1 - the state of the patient's menstrual function (1 - saved; 2 - menopause), (12) - the value of the regression coefficient of this symptom;

Х2- размер первичной опухоли (1 - до 2 см; 2 - 2-5 см; 3 - более 5 см),X 2 - the size of the primary tumor (1 - up to 2 cm; 2 - 2-5 cm; 3 - more than 5 cm),

(-39,9) - значение коэффициента регрессии этого признака;(-39.9) - the value of the regression coefficient of this sign;

Х3 - степень злокачественности (1 - низкая; 2 - умеренная; 3 - высокая),X 3 - the degree of malignancy (1 - low; 2 - moderate; 3 - high),

(-33,1) - значение коэффициента регрессии этого признака;(-33.1) - the value of the regression coefficient of this sign;

Х4 - наличие экспрессии нефосфорилированной формы молекулярного шаперона Hsp27 в ядре опухолевых клеток (1 - нет; 2 - есть),X 4 - the presence of expression of the non-phosphorylated form of the molecular chaperone Hsp27 in the nucleus of tumor cells (1 - no; 2 - have),

(47,7) - значение коэффициента регрессии этого признака.(47.7) - the value of the regression coefficient of this sign.

Значение вероятности развития лимфогенных метастазов определяли по формуле Р=eY/(1+eY), где Р - значение вероятности развития признака, е - математическая константа, равная 2,72.The value of the likelihood of developing lymphogenous metastases was determined by the formula P = e Y / (1 + e Y ), where P is the value of the probability of development of the trait, e is the mathematical constant equal to 2.72.

При вероятности Р≥50% определяется высокий риск развития лимфогенных метастазов, а при вероятности Р<50% - низкий риск развития лимфогенных метастазов.With a probability of P≥50%, a high risk of developing lymphogenous metastases is determined, and with a probability of P <50%, a low risk of developing lymphogenic metastases is determined.

Модель имеет высокую степень достоверности (х2=34,3; р=0,00000). Чувствительность 100%, специфичность 90%.The model has a high degree of reliability (x 2 = 34.3; p = 0.00000). Sensitivity 100%, specificity 90%.

При анализе частоты возникновения лимфогенных метастазов от признаков, вошедших в прогностическую модель, оказалось, что метастатическое поражение регионарных лимфатических узлов чаще возникало у больных с более крупными опухолями, размеры которых варьировали в пределах от 2 до 5 см, а также при наличии ядерной экспрессии нефосфорилированной формы молекулярного шаперона Hsp27 в ткани опухоли, что показано в табл. 1, 2 и на фигуре 1, где изображена ядерная локализация нефосфорилированной формы шаперона Hsp27 в опухолевых клетках инвазивной карциномы неспецифического типа молочной железы (указана стрелкой) на основании применения метода иммуногистохимического окрашивания с использованием моноклональных антител Anti-Hsp27 (клон G3.1, рабочее разведение 1:500).When analyzing the incidence of lymphogenous metastases from signs included in the prognostic model, it turned out that metastatic lesions of regional lymph nodes occurred more often in patients with larger tumors, the sizes of which varied from 2 to 5 cm, as well as in the presence of nuclear expression of a non-phosphorylated form molecular chaperone Hsp27 in the tumor tissue, as shown in the table. 1, 2 and FIG. 1, which depicts the nuclear localization of the non-phosphorylated form of Hsp27 chaperone in tumor cells of an invasive carcinoma of a non-specific type of breast (indicated by an arrow) based on the application of immunohistochemical staining using Anti-Hsp27 monoclonal antibodies (clone G3.1, working dilution 1: 500).

Кроме того, обнаруживалась зависимость лимфогенного метастазирования от процента клеток с позитивной ядерной экспрессией Hsp27. В случаях с метастатическим поражением регионарных лимфатических узлов процент был выше (табл. 3). Изолированно, вне прогностической модели, связи лимфогенного метастазирования с состоянием менструальной функции и со степенью злокачественности опухоли обнаружено не было (табл. 4, 5).In addition, there was a dependence of lymphogenous metastasis on the percentage of cells with positive nuclear expression of Hsp27. In cases with metastatic lesion of regional lymph nodes, the percentage was higher (Table 3). In isolation, outside the prognostic model, no association of lymphogenous metastasis with the state of menstrual function and the degree of tumor malignancy was found (Tables 4, 5).

Таким образом, предлагаемый способ позволяет с большей точностью и информативностью прогнозировать развитие лимфогенных метастазов при инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы и оптимизировать тактику ведения таких больных.Thus, the proposed method allows with greater accuracy and informativeness to predict the development of lymphogenous metastases in case of invasive carcinoma of a non-specific type of breast and to optimize the management tactics of such patients.

Источники информации, принятые во внимание Sources of information taken into account

1. Завьялова М.В. Зависимость лимфогенного метастазирования от морфологического строения первичного опухолевого узла при уницентическом инфильтрирующем протоковом раке молочной железы у больных с разным состоянием менструальной функции / М.В. Завьялова, В.М. Перельмутер, Е.М. Слонимская, С.В. Вторушин / Сибирский онкологический журнал. - 2008. - №3 (27). - С. 5-9.1. Zavyalova M.V. Dependence of lymphogenous metastasis on the morphological structure of the primary tumor node in unicentric infiltrating ductal breast cancer in patients with different conditions of menstrual function / M.V. Zavyalova, V.M. Perelmuter, E.M. Slonimskaya, S.V. Vtorushin / Siberian Oncology Journal. - 2008. - No. 3 (27). - S. 5-9.

2. Page D.L. Prognosis and breast cancer. Recognition of lethal and favourable prognostic types / D. L. Page // The American journal of surgical pathology. -1991. - Vol. 15. - P. 334-346.2. Page D.L. Prognosis and breast cancer. Recognition of lethal and favored prognostic types / D. L. Page // The American journal of surgical pathology. -1991. - Vol. 15. - P. 334-346.

3. Ганцев Ш.Х. Онкология: учебник для студентов медицинских вузов. - 2-е изд., испр. и доп. - М.: ООО «Медицинское информационное агентство», 2006. - 488 с.3. Gantsev Sh. Kh. Oncology: a textbook for medical students. - 2nd ed., Rev. and add. - M .: Medical Information Agency LLC, 2006. - 488 p.

4. Elston C.W. Pathological prognostic factors in breast cancer. I. The value of histological grade in breast cancer: experience from a large study with long term follow up / C.W. Elston, I.O. Ellis // Histopathology. - 1991. - Vol. 19. - P. 403-410.4. Elston C.W. Pathological prognostic factors in breast cancer. I. The value of histological grade in breast cancer: experience from a large study with long term follow up / C.W. Elston, I.O. Ellis // Histopathology. - 1991. - Vol. 19. - P. 403-410.

5. 3анкин B.B., Лазаревский M.M., Кометова B.B. Клинико-морфологические факторы прогноза (на примере рака молочной железы) // Тезисы научно-практической конференции «Модниковские чтения». Ульяновский государственный университет. 2009. Режим доступа: (дата обращения 14.05.2014).5. 3ankin B.B., Lazarevsky M.M., Kometova B.B. Clinical and morphological factors of prognosis (for example, breast cancer) // Abstracts of the scientific-practical conference "Modnikovskie readings". Ulyanovsk State University. 2009. Access mode: (accessed date May 14, 2014).

6. Mascarel I. D2-40 in breast cancer: should we detect more vascular emboli? /I. Mascarel, G. MacGrogan, M. Debled, G. Sierankowski1, V. Brouste, S. Mathoulin-Pélissier, L. Mauriac // Modern Pathology. - 2009. - Vol. 22. - P. 216-222.6. Mascarel I. D2-40 in breast cancer: should we detect more vascular emboli? / I. Mascarel, G. MacGrogan, M. Debled, G. Sierankowski1, V. Brouste, S. Mathoulin-Pélissier, L. Mauriac // Modern Pathology. - 2009. - Vol. 22. - P. 216-222.

7. Руководство по иммуногистохимической диагностике опухолей человека / под ред. С.В. Петрова, Н.Т. Райхлина. - 4-е изд., перераб. и доп. - Казань, 2012. 624 с.7. Guidance on the immunohistochemical diagnosis of human tumors / ed. S.V. Petrova, N.T. Reichlin. - 4th ed., Revised. and add. - Kazan, 2012.624 s.

8. Ciocca D.R.; Luque, Е.Н. Immunological evidence for the identity between the Hsp27 estrogen-regulated Heat-Shock Protein and the P29 estrogen receptor-associated protein in breast and endometrial cancer / D.R. Ciocca, E.H. Luque // Breast Cancer Research and Treatment. - 1991. - Vol. 20, №1. - P. 33-42.8. Ciocca D.R .; Luque, E.N. Immunological evidence for the identity between the Hsp27 estrogen-regulated Heat-Shock Protein and the P29 estrogen receptor-associated protein in breast and endometrial cancer / D.R. Ciocca, E.H. Luque // Breast Cancer Research and Treatment. - 1991. - Vol. 20, No. 1. - P. 33-42.

9. Кайгородова E.В. Молекулярные механизмы регуляторного влияния белка теплового шока 27 кДа на апоптоз опухолевых клеток // Бюллетень сибирской медицины. - 2011. - Т. 10. №4. - С. 71-76.9. Kaygorodova E.V. Molecular mechanisms of the regulatory effect of heat shock protein of 27 kDa on tumor cell apoptosis // Bulletin of Siberian medicine. - 2011. - T. 10. No. 4. - S. 71-76.

10. Straume О. Suppression of heat shock protein 27 induces long-term dormancy in human breast cancer / O. Straume, T. Shimamura, M.J. Lampa, J. Carretero, A.M. Oyan, D. Jia, C.L. Borgman, M. Soucheray, S.R. Downing, S.M. Short, et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. - 2012. - Vol. 109. N. 22. - P. 8699-8704.10. Straume O. Suppression of heat shock protein 27 induces long-term dormancy in human breast cancer / O. Straume, T. Shimamura, M.J. Lampa, J. Carretero, A.M. Oyan, D. Jia, C.L. Borgman, M. Soucheray, S.R. Downing, S.M. Short, et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. - 2012. - Vol. 109. N. 22. - P. 8699-8704.

11. Wei L. Hsp27 participates in the maintenance of breast cancer stem cells through regulation of epithelial-mesenchymal transition and nuclear factor-kappa В / L. Wei, T.T. Liu, Н.H. Wang, H.M. Hong, A.L. Yu, H.P. Feng, W.W. Chang // Breast Cancer Res. - 2011. - Vol. 13. - R101.11. Wei L. Hsp27 participates in the maintenance of breast cancer stem cells through regulation of epithelial-mesenchymal transition and nuclear factor-kappa B / L. Wei, T.T. Liu, N.H. Wang, H.M. Hong, A.L. Yu, H.P. Feng, W.W. Chang // Breast Cancer Res. - 2011 .-- Vol. 13. - R101.

12. Arrigo A.P., Gibert, B. HspB1, HspB5 and HspB4 in Human Cancers: Potent Oncogenic Role of Some of Their Client Proteins // Cancers (Basel). - 2014. - Vol. 6. N. 1. - P. 333-365.12. Arrigo A.P., Gibert, B. HspB1, HspB5 and HspB4 in Human Cancers: Potent Oncogenic Role of Some of Their Client Proteins // Cancers (Basel). - 2014 .-- Vol. 6. N. 1. - P. 333-365.

13. Targeting heat shock protein 27 (HspB1) interferes with bone metastasis and tumour formation in vivo / B. Gibert, B. Eckel, V. Gonin, D. Goldschneider, J. Fombonne, B. Deux, P. Mehlen, A-P. Arrigo, P. Clézardin, C. Diaz-Latoud // Br. J. Cancer. - 2012. - Vol. 107, №1. - P. 63-70.13. Targeting heat shock protein 27 (HspB1) interferes with bone metastasis and tumor formation in vivo / B. Gibert, B. Eckel, V. Gonin, D. Goldschneider, J. Fombonne, B. Deux, P. Mehlen, A-P. Arrigo, P. Clézardin, C. Diaz-Latoud // Br. J. Cancer. - 2012. - Vol. 107, No. 1. - P. 63-70.

14. Upregulated HSP27 in human breast cancer cells reduces Herceptin susceptibility by increasing Her2 protein stability / Kang SH, Kang KW, Kim KH, Kwon B, Kim SK, Lee HY, Kong SY, Lee ES, Jang SG, Yoo B.C. // BMC Cancer. - 2008. Oct 4;8:286. doi: 10.1186/1471-2407-8-286.14. Upregulated HSP27 in human breast cancer cells reduces Herceptin susceptibility by increasing Her2 protein stability / Kang SH, Kang KW, Kim KH, Kwon B, Kim SK, Lee HY, Kong SY, Lee ES, Jang SG, Yoo B.C. // BMC Cancer. - 2008. Oct 4; 8: 286. doi: 10.1186 / 1471-2407-8-286.

Таблица 1. Частота лимфогенного метастазирования при инвазивной карциноме неспецифического типа в зависимости от размера опухоли. Table 1. The frequency of lymphogenous metastasis in invasive carcinoma of a non-specific type depending on the size of the tumor.

Таблица 2. Частота лимфогенного метастазирования при инвазивной карциноме неспецифического типа в зависимости от наличия экспрессии нефосфорилированной формы молекулярного шаперона Hsp27 в ядре опухолевых клеток.Table 2. The frequency of lymphogenous metastasis in invasive carcinoma of a nonspecific type, depending on the presence of expression of the non-phosphorylated form of the molecular chaperone Hsp27 in the nucleus of tumor cells.

Таблица 3. Процент экспрессии нефосфорилированной формы молекулярного шаперона Hsp27 в ядре опухолевых клеток в зависимости от наличия лимфогенного метастазирования при инвазивной карциноме неспецифического типа.Table 3. The percentage of expression of the non-phosphorylated form of the molecular chaperone Hsp27 in the nucleus of tumor cells, depending on the presence of lymphogenous metastasis in invasive carcinoma of a non-specific type.

Таблица 4. Частота лимфогенного метастазирования при инвазивной карциноме неспецифического типа в зависимости от состояния менструальной функции.Table 4. The frequency of lymphogenous metastasis in invasive carcinoma of a non-specific type depending on the state of menstrual function.

Таблица 5. Частота лимфогенного метастазирования при инвазивной карциноме неспецифического типа в зависимости от степени злокачественности.Table 5. The frequency of lymphogenous metastasis in invasive carcinoma of a non-specific type, depending on the degree of malignancy.

Таблица 1Table 1 Размер опухолиTumor size Наличие лимфогенных метастазовThe presence of lymphogenous metastases Нет (N0)No (N0) Есть (N+)There is (N +) До 2 смUp to 2 cm 14/24 (58%)14/24 (58%) 1/12 (8%)1/12 (8%) 2-5 см2-5 cm 10/24 (42%)10/24 (42%) 11/12 (92%)11/12 (92%) χ2=8,2; р=0,004χ2 = 8.2; p = 0.004

Таблица 2table 2 Наличие экспрессии нефосфорилированной формы молекулярного шаперона Hsp27 в ядре опухолевых клетокThe presence of expression of the non-phosphorylated form of the molecular chaperone Hsp27 in the nucleus of tumor cells Наличие лимфогенных метастазовThe presence of lymphogenous metastases pp Нет (N0)No (N0) Есть (N+)There is (N +) НетNo 18/24 (75%)18/24 (75%) 6/12 (50%)6/12 (50%) 0,070,07 Естьthere is 6/24 (25%)6/24 (25%) 6/12 (50%)6/12 (50%) 0,070,07

Таблица 3Table 3 Наличие лимфогенных метастазовThe presence of lymphogenous metastases Процент экспрессии молекулярного шаперона Hsp27(M±SD)The percentage of expression of the molecular chaperone Hsp27 (M ± SD) Нет (N0)No (N0) 0,5±1,1 (n=24)0.5 ± 1.1 (n = 24) Есть (N+)There is (N +) 5,5±11,6 (n=12)5.5 ± 11.6 (n = 12)   F=4,4; р=0,04F = 4.4; p = 0.04

Таблица 4Table 4 Состояние менструальной функцийMenstrual function Наличие лимфогенных метастазовThe presence of lymphogenous metastases Нет (N0)No (N0) Есть (N+)There is (N +) сохраненаsaved 5/24 (21%)5/24 (21%) 3/12 (25%)3/12 (25%) менопаузаmenopause 19/24 (79%)19/24 (79%) 9/12 (75%)9/12 (75%) χ2=0,08; р=0,77χ2 = 0.08; p = 0.77

Таблица 5Table 5 Степень злокачественностиGrade of malignancy Наличие лимфогенных метастазовThe presence of lymphogenous metastases Нет (N0)No (N0) Есть (N+)There is (N +) перваяfirst 2/24 (8%)2/24 (8%) 1/12 (8%)1/12 (8%) втораяsecond 19/24 (79%)19/24 (79%) 10/12 (84%)10/12 (84%) третьяthe third 3/24 (13%)3/24 (13%) 1/12 (8%)1/12 (8%) χ2=0,06; р=0,96χ2 = 0.06; p = 0.96

Claims (1)

Способ прогнозирования лимфогенного метастазирования при инвазивной карциноме неспецифического типа молочной железы путем проведения иммуногистохимического исследования препаратов ткани первичной опухоли, отличающийся тем, что определяют процент экспрессии нефосфорилированной формы молекулярного шаперона Hsp27 в ядре опухолевых клеток, также учитывают состояние менструальной функции пациентки, размер первичной опухоли и степень ее злокачественности, рассчитывают значение уравнения регрессии Y по формуле
Y=24+12X1-39,9Х2-33,1Х3+47,7X4,
где Y - значение уравнения регрессии;
24 - значение коэффициента регрессии свободного члена;
X1 - состояние менструальной функции пациентки (1 - сохранена; 2 - менопауза);
12 - значение коэффициента регрессии для X1;
Х2 - размер первичной опухоли (1 - до 2 см; 2 - 2-5 см; 3 - более 5 см);
-39,9 - значение коэффициента регрессии для X2;
Х3- степень злокачественности (1 - низкая; 2 - умеренная; 3 - высокая);
-33,1 - значение коэффициента регрессии для X3;
Х4 - наличие экспрессии нефосфорилированной формы молекулярного шаперона Hsp27 в ядре опухолевых клеток (1 - нет; 2 - есть);
47,7 - значение коэффициента регрессии для X4.
Значение вероятности развития лимфогенных метастазов определяют по формуле Р=eY/(l+eY),
где Р - значение вероятности развития признака;
е - математическая константа, равная 2,72.
При вероятности Р≥50% определяют высокий риск развития лимфогенных метастазов, при вероятности Р<50% - низкий риск развития лимфогенных метастазов. A method for predicting lymphogenous metastasis in an invasive carcinoma of a non-specific type of mammary gland by conducting an immunohistochemical study of preparations of tissue of the primary tumor, characterized in that the percentage of expression of the non-phosphorylated form of the molecular chaperone Hsp27 in the nucleus of the tumor cells is determined, the state of the patient's menstrual function, the size of the primary tumor and its degree are also taken into account malignancy, calculate the value of the regression equation Y according to the formula
Y = 24 + 12X 1 -39.9X 2 -33.1X 3 + 47.7X 4 ,
where Y is the value of the regression equation;
24 - value of the regression coefficient of the free member;
X 1 - the state of the menstrual function of the patient (1 - saved; 2 - menopause);
12 - value of the regression coefficient for X 1 ;
X 2 - the size of the primary tumor (1 - up to 2 cm; 2 - 2-5 cm; 3 - more than 5 cm);
-39.9 - the value of the regression coefficient for X 2 ;
X 3 - the degree of malignancy (1 - low; 2 - moderate; 3 - high);
-33.1 - the value of the regression coefficient for X 3 ;
X 4 - the presence of expression of the non-phosphorylated form of the molecular chaperone Hsp27 in the nucleus of tumor cells (1 - no; 2 - yes);
47.7 - the value of the regression coefficient for X 4 .
The probability of developing lymphogenous metastases is determined by the formula P = e Y / (l + e Y ),
where P is the value of the probability of development of the sign;
e is the mathematical constant equal to 2.72.
With a probability of P≥50%, a high risk of developing lymphogenous metastases is determined, with a probability of P <50%, a low risk of developing lymphogenous metastases is determined.
RU2014128079/15A 2014-07-08 2014-07-08 Method for prediction of lymphatic cancer spread accompanying non-specific breast carcinoma RU2566732C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2014128079/15A RU2566732C1 (en) 2014-07-08 2014-07-08 Method for prediction of lymphatic cancer spread accompanying non-specific breast carcinoma

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2014128079/15A RU2566732C1 (en) 2014-07-08 2014-07-08 Method for prediction of lymphatic cancer spread accompanying non-specific breast carcinoma

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2566732C1 true RU2566732C1 (en) 2015-10-27

Family

ID=54362385

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2014128079/15A RU2566732C1 (en) 2014-07-08 2014-07-08 Method for prediction of lymphatic cancer spread accompanying non-specific breast carcinoma

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2566732C1 (en)

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004045521A2 (en) * 2002-11-14 2004-06-03 John Wayne Cancer Institute Detection of micro metastasis of melanoma and breast cancer in paraffin-embedded tumor draining lymph nodes by multimaker quantitative rt-pcr
US20070134687A1 (en) * 2005-09-12 2007-06-14 Aurelium Biopharma Inc. Focused microarray and methods of diagnosing cancer
EP2553118A1 (en) * 2010-03-31 2013-02-06 Sividon Diagnostics GmbH Method for breast cancer recurrence prediction under endocrine treatment

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004045521A2 (en) * 2002-11-14 2004-06-03 John Wayne Cancer Institute Detection of micro metastasis of melanoma and breast cancer in paraffin-embedded tumor draining lymph nodes by multimaker quantitative rt-pcr
US20070134687A1 (en) * 2005-09-12 2007-06-14 Aurelium Biopharma Inc. Focused microarray and methods of diagnosing cancer
EP2553118A1 (en) * 2010-03-31 2013-02-06 Sividon Diagnostics GmbH Method for breast cancer recurrence prediction under endocrine treatment

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Руководство по иммуногистохимической диагностике опухолей человека / под ред. С.В. Петрова, Н.Т. Райхлина. - 4-е изд., перераб. и доп. - Казань, 2012. 624 с. МАТЕРИАЛЫ XVI РОССИЙСКОГО ОНКОЛОГИЧЕСКОГО КОНГРЕССА, Москва, 13-15 ноября 2012, с. 103-105. *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Lazova et al. Punctate LC3B expression is a common feature of solid tumors and associated with proliferation, metastasis, and poor outcome
Ghossein Problems and controversies in the histopathology of thyroid carcinomas of follicular cell origin
Hirche et al. ICG fluorescence-guided sentinel node biopsy for axillary nodal staging in breast cancer
He et al. Downregulation of HtrA1 promotes resistance to anoikis and peritoneal dissemination of ovarian cancer cells
Demirag et al. Expression of Plakophilins (PKP1, PKP2, and PKP3) in breast cancers
Liu et al. Roles of autophagy‑related genes Beclin‑1 and LC3 in the development and progression of prostate cancer and benign prostatic hyperplasia
Papp et al. Altered endoplasmic reticulum calcium pump expression during breast tumorigenesis
Henderson et al. Iris melanoma
Hitt et al. Prognostic value of the epidermal growth factor receptor (EGRF) and p53 in advanced head and neck squamous cell carcinoma patients treated with induction chemotherapy
Zhou et al. Significance of semaphorin‑3A and MMP‑14 protein expression in non‑small cell lung cancer
Wei et al. Decreased expression of sestrin 2 predicts unfavorable outcome in colorectal cancer
Martínez-Pérez et al. Current treatment trends and the need for better predictive tools in the management of ductal carcinoma in situ of the breast
Westekemper et al. Expression of HSP 90, PTEN and Bcl-2 in conjunctival melanoma
Barber et al. Molecular predictors of locoregional and distant metastases in oropharyngeal squamous cell carcinoma
Zhang et al. Vasohibin-1 expression detected by immunohistochemistry correlates with prognosis in non-small cell lung cancer
Louhichi et al. Clinicopathological significance of cancer stem cell markers CD44 and ALDH1 expression in breast cancer
Iwayama et al. Prognostic value of HLA class I expression in patients with colorectal cancer
Bokhari et al. Nestin suppression attenuates invasive potential of endometrial cancer cells by downregulating TGF-β signaling pathway
Nofech-Mozes et al. Immunohistochemical characterization of primary and recurrent adult granulosa cell tumors
Mercut et al. Expression of p53, D2-40 and α-smooth muscle actin in different histological subtypes of facial basal cell carcinoma
Balancin et al. Different histological patterns of type-V collagen levels confer a matrices-privileged tissue microenvironment for invasion in malignant tumors with prognostic value
Zhao et al. Fascin overexpression promotes cholangiocarcinoma RBE cell proliferation, migration, and invasion
Marioni et al. Relaxin-2 expression in temporal bone carcinoma
Spethmann et al. Opposing prognostic relevance of junction plakoglobin in distinct prostate cancer patient subsets
Adamkov et al. Survivin: a promising biomarker in breast carcinoma

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20160709