RU2560679C1 - Diagnostic technique for tuberculosis infection - Google Patents
Diagnostic technique for tuberculosis infection Download PDFInfo
- Publication number
- RU2560679C1 RU2560679C1 RU2014141474/15A RU2014141474A RU2560679C1 RU 2560679 C1 RU2560679 C1 RU 2560679C1 RU 2014141474/15 A RU2014141474/15 A RU 2014141474/15A RU 2014141474 A RU2014141474 A RU 2014141474A RU 2560679 C1 RU2560679 C1 RU 2560679C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- diaskintest
- ifn
- lymphocytes
- tuberculosis
- tuberculosis infection
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к фтизиатрии и лабораторной диагностике, и может быть использовано для диагностики туберкулезной инфекции при сложно интерпретируемых результатах кожных проб in vivo путем определения иммунного ответа in vitro на антигены (гаптены), используемые для кожных проб.The invention relates to medicine, namely to phthisiology and laboratory diagnostics, and can be used to diagnose tuberculosis infection with difficult to interpret results of skin tests in vivo by determining the immune response in vitro to antigens (haptens) used for skin tests.
Известен способ диагностики туберкулезной инфекции по внутрикожной пробе Манту 2ТЕ, суть которого заключается в том, что положительная проба Манту является фактом наличия в организме микобактерий туберкулеза (1).A known method for the diagnosis of tuberculosis infection by the intradermal Mantoux test 2TE, the essence of which is that a positive Mantoux test is a fact of the presence of tuberculosis mycobacteria in the body (1).
Недостатком данного способа является наличие положительного результата у людей как вакцинированных вакциной BCG, так и инфицированных микобактериями человеческого типа, что осложняет дифференциальную диагностику послевакцинной и инфекционной аллергии. При получении пробы инфекционного характера, пациент направляется в диспансер, где ему проводятся дополнительные обследования.The disadvantage of this method is the presence of a positive result in people both vaccinated with BCG vaccine and those infected with human mycobacteria, which complicates the differential diagnosis of post-vaccination and infectious allergies. Upon receipt of a sample of an infectious nature, the patient is sent to a dispensary, where additional examinations are performed.
Известен способ диагностики туберкулезной инфекции с помощью внутрикожной пробы Диаскинтест. Проба Диаскинтест положительна только в случае активно размножающихся микобактерий человеческого типа (2, 3).A known method for the diagnosis of tuberculosis infection using an intradermal test Diaskintest. Diaskintest test is positive only in the case of actively propagating human type mycobacteria (2, 3).
Недостаток этого способа в том, что он идентифицирует микобактерии человеческого вида в фазе активного размножения. Однако результат может быть сомнительным или отрицательным при доказанных случаях туберкулеза с бактериовыделением и при внелегочном туберкулезе, также может быть отрицательным в начальной стадии заболевания (4).The disadvantage of this method is that it identifies mycobacteria of the human species in the phase of active reproduction. However, the result may be doubtful or negative in proven cases of tuberculosis with bacterial excretion and in extrapulmonary tuberculosis, it may also be negative in the initial stage of the disease (4).
Известны диагностические тест-системы на основе аналогов микобактериальных антигенов синтетических пептидов белка ESAT-6 (IGRA, ELISPOT, CLINISPOT-TB) для диагностики туберкулеза, отличающиеся только фирмами-производителями. В основе таковых лежит определение количества высвобождающегося ИФН-γ при контакте эффекторных Т-лимфоцитов со специфическими антигенами ESAT-6 в тест-системе in vitro. Увеличение продукции ИФН-γ свидетельствует об инфицировании МБТ, а ее отсутствие - о вакцинации или ревакцинации вакциной БЦЖ (5, 6).Known diagnostic test systems based on analogues of mycobacterial antigens of synthetic peptides of the ESAT-6 protein (IGRA, ELISPOT, CLINISPOT-TB) for the diagnosis of tuberculosis, differing only by manufacturers. These are based on the determination of the amount of IFN-γ released upon contact of effector T lymphocytes with specific ESAT-6 antigens in an in vitro test system. An increase in IFN-γ production indicates infection with the MBT, and its absence indicates vaccination or revaccination with BCG vaccine (5, 6).
Недостатками данного метода является сложность лабораторного исследования и наличие высококвалифицированного персонала, дороговизна. Основными недостатками этого теста является то, что результат может быть положительным только при инфицировании и активном размножении в организме микобактерий, содержащих ESAT-6 и CFP-10, и отрицательный - при их отсутствии. Кроме того, здесь используются антигены, не идентичные по изготовлению антигенам, находящимся в препарате Диаскинтест для кожных проб.The disadvantages of this method are the complexity of laboratory research and the presence of highly qualified personnel, high cost. The main disadvantages of this test is that the result can be positive only with infection and active reproduction in the body of mycobacteria containing ESAT-6 and CFP-10, and negative in their absence. In addition, antigens that are not identical in manufacturing to the antigens found in Diaskintest for skin samples are used here.
Известен способ диагностики туберкулезного инфицирования, суть которого состоит в том, что цельную гепаринизированную кровь инкубируют в пробирках с микобактериальными антигенами (смесью белков ESAT-6, CFP-10 и ТВ 7.7) (антиген-индуцированная продукция) и без антигенов (спонтанная продукция), определяют содержание интерлейкина - 2 в обеих пробах, разность между антигениндуцированной и спонтанной продукцией, сопоставляют с пороговым значением интерлейкина - 2 и при его достижении или превышении диагностируют наличие туберкулезного инфицирования, а при значении ниже порогового - его отсутствие. В качестве порогового значения интерлейкина - 2, при котором достигается чувствительность выявления инфицированных лиц 86%-95%, была определена величина 36 пг/мл (7).A known method for the diagnosis of tuberculosis infection, the essence of which is that whole heparinized blood is incubated in tubes with mycobacterial antigens (a mixture of proteins ESAT-6, CFP-10 and TB 7.7) (antigen-induced products) and without antigens (spontaneous production), determine the content of interleukin-2 in both samples, the difference between antigen-induced and spontaneous production is compared with the threshold value of interleukin-2 and, when it is reached or exceeded, the presence of tuberculosis infection is diagnosed I, and at a value below the threshold - its absence. As the threshold value of interleukin-2, at which the sensitivity of detecting infected individuals is 86% -95%, a value of 36 pg / ml was determined (7).
Недостаток данного способа связан с тем, что имеются высокие требования к оснащению лаборатории и квалификации медицинского персонала, возможны технические ошибки и неоднозначность результатов при пограничных значениях. В качестве стимулирующего агента здесь используется смесь антигенов, не идентичных по изготовлению и составу антигенам, находящимся в препарате Диаскинтест, используемым для постановки кожных проб.The disadvantage of this method is that there are high requirements for equipping the laboratory and the qualifications of medical personnel, technical errors and ambiguity of the results at boundary values are possible. As a stimulating agent, a mixture of antigens is used here, which are not identical in manufacture and composition to the antigens found in the Diaskintest preparation used for staging skin samples.
Известен in vitro способ QuantiFERON-TB Gold in Tube, где для стимуляции клеток гепаринизированной цельной крови используется коктейль пептидов ESAT-6, CFP-10, ТВ 7.7(р4).The QuantiFERON-TB Gold in Tube method is known in vitro, where a cocktail of peptides ESAT-6, CFP-10, TB 7.7 (p4) is used to stimulate heparinized whole blood cells.
Основой заявляемого способа является стимуляция клеток крови пептидными антигенами и последующее количественное определение выброса гамма-интерферона (ИФН-γ). Данные пептидные антигены стимулируют продукцию ИФН-γ Т-клетками пациентов, инфицированных микобактериями туберкулеза, и не вызывают никакой реакции у неинфицированных людей (8).The basis of the proposed method is the stimulation of blood cells by peptide antigens and the subsequent quantitative determination of the release of gamma interferon (IFN-γ). These peptide antigens stimulate the production of IFN-γ by T cells of patients infected with mycobacterium tuberculosis and do not cause any reaction in uninfected people (8).
Недостатком данного способа является высокая стоимость, невозможность с его помощью выявить микобактерии бычьего типа, вакцинного штамма и эффективность вакцинации. Результаты могут быть как отрицательными, так и сомнительными у лиц с активным туберкулезом. В качестве стимулирующего агента здесь используется смесь антигенов, не идентичных по изготовлению и составу антигенам, находящимся в препарате Диаскинтест, используемым для постановки кожных проб.The disadvantage of this method is the high cost, the inability to use it to detect bovine type mycobacteria, a vaccine strain and the effectiveness of vaccination. The results can be both negative and doubtful in individuals with active tuberculosis. As a stimulating agent, a mixture of antigens is used here, which are not identical in manufacture and composition to the antigens found in the Diaskintest preparation used for staging skin samples.
Данный способ и был использован как прототип.This method was used as a prototype.
Целью изобретения является разработка способа диагностики туберкулезной инфекции у пациентов с отрицательными кожными пробами на препарат Диаскинтест. Эта цель достигается тем, что диагностику туберкулезной инфекции выполняют у людей с отрицательными кожными пробами на препарат Диаскинтест; для стимуляции клеток гепаринизированной цельной крови применяют препарат Диаскинтест, использующийся для постановки кожных проб; дополнительно в гепаринизированной цельной крови определяют уровень CD4+CD27- -лимфоцитов методом лазерной проточной цитофлюориметрии и при совокупном повышении уровня стимулированного ИФН-γ более 18,0 пг/мл и CD4+CD27- - лимфоцитов более 15,0% подтверждают наличие туберкулезной инфекции.The aim of the invention is to develop a method for the diagnosis of tuberculosis infection in patients with negative skin tests for the drug Diaskintest. This goal is achieved by the fact that the diagnosis of tuberculosis infection is performed in people with negative skin tests for the drug Diaskintest; to stimulate heparinized whole blood cells, Diaskintest is used, which is used for staging skin samples; further in heparinized whole blood determine the level of CD4 + CD27 - lymphocytes by laser flow cytometry and total raising stimulated IFN-γ over 18.0 pg / ml and CD4 + CD27 - - more than 15.0% lymphocytes confirmed the presence of tuberculosis infection.
Заявляемый в способе ИФН-γ среди множества направлений своей биологической активности, в том числе является показателем состояния функциональной активности лимфоцитов и отражает направленность реализации иммунного ответа по клеточному типу активности иммунной системы.Declared in the method of IFN-γ among many directions of its biological activity, including is an indicator of the state of the functional activity of lymphocytes and reflects the orientation of the implementation of the immune response according to the cellular type of activity of the immune system.
ИФН-γ представляет собой гликопротеин с M=21 кDa и относится к интерферонам II типа. Ключевыми продуцентами являются макрофаги, натуральные киллеры (NK) и Th1 - лимфоциты непосредственно после их активации вирусными, бактериальными, паразитарными и другими вызывающими воспаление агентами. ИФН-γ играет важную роль в формировании и развитии Th1-клеточного иммунного ответа и осуществляет регуляторные функции в развитии гуморального Th2-иммунного ответа, в связи с чем он осуществляет центральную роль в развитии многих иммунопатологических состояний. Сниженная способность клеток продуцировать ИФН-γ в ответ на внедрение в организм Mycobacterium tuberculosis препятствует элиминации возбудителя и, в конечном счете, приводит к развитию хронической инфекции.IFN-γ is a glycoprotein with M = 21 kDa and belongs to type II interferons. Key producers are macrophages, natural killer (NK) and Th1 lymphocytes immediately after their activation by viral, bacterial, parasitic and other inflammation-causing agents. IFN-γ plays an important role in the formation and development of the Th1-cell immune response and carries out regulatory functions in the development of the humoral Th2-immune response, and therefore it plays a central role in the development of many immunopathological conditions. The reduced ability of cells to produce IFN-γ in response to the introduction of Mycobacterium tuberculosis into the body prevents the elimination of the pathogen and, ultimately, leads to the development of chronic infection.
При туберкулезе основную роль в протективном иммунитете играют T-хелперы I типа (Th1-лимфоциты), которые продуцируют ИФН-γ и активируют макрофаги (9, 10).In tuberculosis, the main role in protective immunity is played by type I T-helpers (Th1 lymphocytes), which produce IFN-γ and activate macrophages (9, 10).
Рецепторы CD27 относятся к семейству фактора некроза опухоли. Они экспрессируются на В-лимфоцитах, T-лимфоцитах и NK-клетках (11). Рецепторы CD27 играют большую роль в образовании эффекторных Τ-хелперов. Процессы естественной дифференцировки T-хелперов сопровождаются снижением экспрессии CD27, в результате чего зрелые T-хелперы становятся высокодифференцированными и приобретают фенотип CD4+CD27- (12). По литературным данным, доля CD4+CD27- - лимфоцитов у здоровых лиц не превышает 12,0% (13). При длительной антигенной стимуляции Mycobacterium tuberculosis дифференцировка эффекторных CD4+CD27+ - лимфоцитов в CD4+CD27- - клетки повышается, в связи с чем происходит накопление пула CD4+CD27" - клеток. Доказано, что CD4+CD27- - лимфоциты обладают более выраженной способностью к продукции ИФН-γ, чем клетки с фенотипом CD4+CD27+ (14).CD27 receptors belong to the tumor necrosis factor family. They are expressed on B lymphocytes, T lymphocytes and NK cells (11). CD27 receptors play a large role in the formation of effector Τ helpers. The processes of natural differentiation of T-helpers are accompanied by a decrease in CD27 expression, as a result of which mature T-helpers become highly differentiated and acquire the CD4 + CD27 - phenotype (12). According to published data, the proportion of CD4 + CD27 - - lymphocytes in healthy individuals does not exceed 12.0% (13). With prolonged antigenic stimulation of Mycobacterium tuberculosis, the differentiation of effector CD4 + CD27 + - lymphocytes in CD4 + CD27 - - cells increases, and therefore the accumulation of a pool of CD4 + CD27 "- cells. It is proved that CD4 + CD27 - - lymphocytes have a more pronounced ability to IFN-γ production than cells with the CD4 + CD27 + phenotype (14).
Заявляемый способ включает стандартизованные лабораторные методы, что позволяет использовать его в клинической практике.The inventive method includes standardized laboratory methods, which allows its use in clinical practice.
Заявляемый способ осуществляется следующим образом.The inventive method is as follows.
У пациента в положении сидя забирают периферическую венозную кровь, помещают ее в пробирку с антикоагулянтом гепарином. В части этой гепаринизированной крови выполняют стимулирование клеток крови препаратом Диаскинтест, использующимся для постановки кожных проб, и определяют уровень ИФН-γ иммуноферментным методом. Дополнительно в другой части гепаринизированной периферической венозной крови определяют уровни CD4+CD27- - клеток методом лазерной проточной цитофлюориметрии.Peripheral venous blood is taken from a patient in a sitting position, placed in a test tube with an anticoagulant heparin. In part of this heparinized blood, blood cells are stimulated with Diaskintest, which is used for staging skin samples, and the level of IFN-γ is determined by the enzyme immunoassay. Additionally, in another part of the heparinized peripheral venous blood, CD4 + CD27 - - cell levels are determined by laser flow cytofluorimetry.
Стимулирование клеток гепаринизированной крови препаратом Диаскинтест проводится следующим образом. Гепаринизированная кровь разливается по 800 мкл в две пробирки. Пробирка №1, контрольная - содержит 200 мкл физиологического раствора + 800 мкл гепаринизированной венозной крови.Stimulation of heparinized blood cells with Diaskintest is carried out as follows. Heparinized blood is dispensed in 800 μl in two tubes. Test tube No. 1, control - contains 200 μl of physiological saline + 800 μl of heparinized venous blood.
Пробирка опытная №2 - содержит 200 мкл препарата Диаскинтест, содержащего антигены микобактерий человеческого вида + 800 мкл гепаринизированной венозной крови. Содержимое каждой пробирки тщательно перемешивают, пробирки инкубируют в термостате при 37C° в течение 24 часов.Experimental test tube No. 2 - contains 200 μl of Diaskintest preparation containing antigens of mycobacteria of the human species + 800 μl of heparinized venous blood. The contents of each tube are thoroughly mixed, the tubes are incubated in an incubator at 37 ° C for 24 hours.
После инкубации в контрольной и опытной пробирках определяют уровень ИФН-γ иммуноферментным методом с использованием коммерческих иммуноферментных тест-систем в соответствии с методическими рекомендациями фирмы - производителя ("Вектор-Бест", г. Новосибирск).After incubation in the control and experimental tubes, the level of IFN-γ is determined by the enzyme immunoassay using commercial enzyme immunoassay test systems in accordance with the methodological recommendations of the manufacturer (Vector-Best, Novosibirsk).
Уровень стимулированного ИФН-γ у здоровых людей не превышает 18,0 пг/мл и в среднем составляет 4,14 пг/мл.The level of stimulated IFN-γ in healthy people does not exceed 18.0 pg / ml and averages 4.14 pg / ml.
Исследование уровня CD4+CD27- - клеток в цельной гепаринизированный крови осуществляли в соответствии с инструкциями фирмы-производителя МКАТ ООО «Сорбент» (Москва) и методическими рекомендациями (15).The study of the level of CD4 + CD27 - - cells in whole heparinized blood was carried out in accordance with the instructions of the manufacturer MKAT LLC Sorbent (Moscow) and methodological recommendations (15).
Определение содержания CD4+CD27- - клеток в пробах проводили с использованием цитометра Calibur (USA) в режиме CellQest при установленных рабочих параметрах, относительно CD4+гейта.The content of CD4 + CD27 - - cells in the samples was determined using a Calibur (USA) cytometer in the CellQest mode at the established operating parameters, relative to the CD4 + gate.
Уровень CD4+CD27- - клеток в периферической крови здоровых детей составляет в среднем 4,15%. По нашим данным, доля CD4+CD27- - клеток у детей с туберкулезом составляет в среднем 56,5%, с виражом туберкулиновых проб 14,8%.The level of CD4 + CD27 - - cells in the peripheral blood of healthy children is on average 4.15%. According to our data, the proportion of CD4 + CD27 - cells in children with tuberculosis averages 56.5%, with a turn of tuberculin samples of 14.8%.
Интерпретация результатов комплекса проведенных исследований проводится следующим образом. Если у ребенка с отрицательным результатом Диаскинтеста in vivo в периферической крови регистрируется совокупно уровень ИФН-γ в тест-системе с Диаскинтестом in vitro более 18,0 пг/мл и уровень CD4+CD27- - лимфоцитов в негепаринизированной цельной периферической венозной крови более 15,0%, то диагносцируют инфицирование МБТ.Interpretation of the results of the complex of studies carried out as follows. If a child with a negative Diaskintest in vivo result in peripheral blood has a cumulative level of IFN-γ in the test system with a Diaskintest in vitro of more than 18.0 pg / ml and a CD4 + CD27 - level of lymphocytes in non-heparinized whole peripheral venous blood of more than 15, 0%, then the infection of the office is diagnosed.
Пример 1. Девочка В., 5 лет, вакцинирована БЦЖ в роддоме. Пробы Манту 2ТЕ по годам: 1 год - 7 мм, 2 год - 5 мм, 3 год - 5 мм, 4 год - 4 мм, 5 год - 7 мм. В 5 лет поставлена проба Диаскинтеста для дифференциальной диагностики поствакцинальной и инфекционной аллергии. Результат кожной пробы Диаскинтест отрицательный.Example 1. Girl V., 5 years old, vaccinated with BCG in the hospital. Mantoux test 2TE by years: 1 year - 7 mm, 2 years - 5 mm, 3 years - 5 mm, 4 years - 4 mm, 5 years - 7 mm. At 5 years old, a Diaskintest test was delivered for the differential diagnosis of post-vaccination and infectious allergies. The result of a skin test Diaskintest is negative.
Заключение врача фтизиатра: поствакцинальная аллергия, не инфицирована микобактериями человеческого вида.Conclusion of a TB doctor: post-vaccination allergy, not infected with human mycobacteria.
Ребенок направлен на диагностику инфицирования МБТ по предлагаемой методике с определением в периферической крови уровня ИФН-γ в тест-системе с Диаскинтестом in vitro, уровня CD4+CD27- - лимфоцитов.The child is aimed at diagnosing MBT infection by the proposed method with the determination of peripheral blood levels of IFN-γ in a test system with Diaskintest in vitro, the level of CD4 + CD27 - - lymphocytes.
В результате проведенных лабораторных тестов получены следующие результаты:As a result of laboratory tests, the following results were obtained:
- уровень ИФН-γ в тест-системе с Диаскинтестом in vitro 24,0 пг/мл,- the level of IFN-γ in the test system with Diaskintest in vitro 24.0 PG / ml,
- уровень CD4+CD27- - лимфоцитов 21,0%.- level of CD4 + CD27 - - lymphocytes 21.0%.
Полученные показатели позволяют сделать вывод об инфицировании МБТ.The obtained indicators allow us to conclude that infection of the office.
Заключение: ребенок инфицирован МБТ и подлежит наблюдению у фтизиатра.Conclusion: the child is infected with MBT and is subject to observation by a TB doctor.
Пример 2. Мальчик Д., 2 года, вакцинирован БЦЖ в роддоме. Пробы Манту 2ТЕ: 1 год - 9 мм, 2 год - 7 мм. В 2 года поставлена проба Диаскинтеста для дифференциальной диагностики поствакцинальной и инфекционной аллергии. Результат кожной пробы Диаскинтеста отрицательный.Example 2. Boy D., 2 years old, was vaccinated with BCG in the hospital. Mantoux test 2TE: 1 year - 9 mm, 2 years - 7 mm. At 2 years old, a Diaskintest test was delivered for the differential diagnosis of post-vaccination and infectious allergies. Diaskintest skin test result is negative.
Заключение врача фтизиатра: поствакцинальная аллергия, не инфицирован микобактериями человеческого вида.Conclusion of a TB doctor: post-vaccination allergy, not infected with human mycobacteria.
Ребенок направлен на диагностику инфицирования МБТ по предлагаемой методике с определением в периферической крови уровня ИФН-γ в тест-системе с Диаскинтестом in vitro, уровня CD4+CD27- - лимфоцитов.The child is aimed at diagnosing MBT infection by the proposed method with the determination of peripheral blood levels of IFN-γ in a test system with Diaskintest in vitro, the level of CD4 + CD27 - - lymphocytes.
В результате проведенных лабораторных тестов получены следующие результаты:As a result of laboratory tests, the following results were obtained:
- уровень ИФН-γ в тест-системе с Диаскинтестом in vitro 10,0 пг/мл,- the level of IFN-γ in the test system with Diaskintest in vitro 10.0 PG / ml,
- уровень CD4+CD27- - лимфоцитов 19,0%.- the level of CD4 + CD27 - - lymphocytes 19.0%.
Полученные показатели позволяют сделать вывод о неинфекционном характере кожной пробы. Заключение: у ребенка поствакцинальная аллергия, не инфицирован МБТ и не подлежит наблюдению у фтизиатра.The obtained indicators allow us to conclude about the non-infectious nature of the skin test. Conclusion: the child has a post-vaccination allergy, is not infected with MBT and is not subject to monitoring by a TB specialist.
Пример 3. Пациент M., 6 лет, м. пола. Вакцинирован БЦЖ. Пробы Манту 2ТЕ: 1 год - 6 мм, 2 год - 4 мм, 3 год - 3 мм, 4 год - 4 мм, 5 год - 6 мм, 6 лет - 10 мм. Поставлена ребенку проба Диаскинтест - результат отрицательный. Через месяц выявлен контакт с больным туберкулезом отцом (диагноз: Инфильтративный туберкулез легких в фазе распада МБТ+). При рентгенологическом обследовании ребенка выявлен туберкулез внутригрудных лимфатических узлов справа (туморозный вариант) МБТ-.Example 3. Patient M., 6 years old, m. Gender. BCG is vaccinated. Mantoux test 2TE: 1 year - 6 mm, 2 years - 4 mm, 3 years - 3 mm, 4 years - 4 mm, 5 years - 6 mm, 6 years - 10 mm. A Diaskintest test was delivered to the child - the result is negative. A month later, contact with a father with a tuberculosis patient was diagnosed (diagnosis: Infiltrative pulmonary tuberculosis in the phase of MBT + decomposition). An X-ray examination of the child revealed tuberculosis of the intrathoracic lymph nodes on the right (tumorous version) of MBT-.
Ребенок направлен на диагностику инфицирования МБТ по предлагаемой методике с определением в периферической крови уровня ИФН-γ в тест-системе с Диаскинтестом in vitro, уровня CD4+CD27- - лимфоцитов.The child is aimed at diagnosing MBT infection by the proposed method with the determination of peripheral blood levels of IFN-γ in a test system with Diaskintest in vitro, the level of CD4 + CD27 - - lymphocytes.
В результате проведенных лабораторных тестов получены следующие результаты:As a result of laboratory tests, the following results were obtained:
- уровень ИФН-γ в тест-системе с Диаскинтестом in vitro 26,5 пг/мл,- the level of IFN-γ in the test system with Diaskintest in vitro 26.5 PG / ml,
- уровень CD4+CD27- - лимфоцитов 24,0%.- level of CD4 + CD27 - - lymphocytes 24.0%.
Полученные показатели позволяют сделать вывод об инфицировании МБТ.The obtained indicators allow us to conclude that infection of the office.
Заключение: ребенок инфицирован МБТ, локальная форма туберкулеза (ТВГЛУ) и подлежит лечению у фтизиатра.Conclusion: the child is infected with MBT, a local form of tuberculosis (TBHLU) and should be treated by a TB specialist.
Пример 4. Пациент С., 8 лет, м. пола. Вакцинирован БЦЖ в роддоме. Пробы Манту 2ТЕ: 1 год - 8 мм, 2 год - 4 мм, 3 год - 3 мм, 4 год - отр., 5 год - отр., 6 лет - отр., 7 лет - отр., 8 лет - 14 мм. Ребенку поставлена проба с Диаскинтестом - результат 12 мм. При рентгенологическом обследовании ребенка данных за туберкулез нет.Example 4. Patient S., 8 years old, m. Gender. BCG was vaccinated in the hospital. Mantoux test 2TE: 1 year - 8 mm, 2 year - 4 mm, 3 year - 3 mm, 4 year - neg., 5 year - neg., 6 years - neg., 7 years - neg., 8 years - 14 mm A test with Diaskintest was delivered to the child - the result is 12 mm. An X-ray examination of the child has no data for tuberculosis.
Ребенок направлен на диагностику инфицирования МБТ по предлагаемой методике с определением в периферической крови уровня ИФН-γ в тест-системе с Диаскинтестом in vitro, уровня CD4+CD27- - лимфоцитов.The child is aimed at diagnosing MBT infection by the proposed method with the determination of peripheral blood levels of IFN-γ in a test system with Diaskintest in vitro, the level of CD4 + CD27 - - lymphocytes.
В результате проведенных лабораторных тестов получены следующие результаты:As a result of laboratory tests, the following results were obtained:
- уровень ИФН-γ в тест-системе с Диаскинтестом in vitro 29,4 пг/мл,- the level of IFN-γ in the test system with Diaskintest in vitro 29.4 pg / ml,
- уровень CD4+CD27- - лимфоцитов - 25,0%.- level of CD4 + CD27 - - lymphocytes - 25.0%.
Полученные показатели позволяют сделать вывод об инфицировании МБТ.The obtained indicators allow us to conclude that infection of the office.
Заключение: ребенок инфицирован МБТ и подлежит наблюдению у фтизиатра.Conclusion: the child is infected with MBT and is subject to observation by a TB doctor.
ИсточникиSources
1. Приказ от 21 марта 2003 г. №109 «О совершенствовании противотуберкулезных мероприятий в Российской федерации». - М., 2003. - С. 49-55.1. Order of March 21, 2003 No. 109 “On the improvement of anti-TB measures in the Russian Federation”. - M., 2003 .-- S. 49-55.
2. Кожная проба с препаратом "ДИАСКИНТЕСТ" - новые возможности идентификации туберкулезной инфекции./Под ред. акад. РАН и РАМН М.А. Пальцева. Изд. 2-е, перераб. и доп. - М.: Издательство "Шико", 2011. 256 с. 2. Skin test with the drug "DIASKINTEST" - new possibilities for identifying tuberculosis infection. / Ed. Acad. RAS and RAMS M.A. Finger Ed. 2nd, rev. and add. - M .: Publishing house "Shiko", 2011.256 p.
3. Слогоцкая Л.В. Кожные иммунологические методы при туберкулезе - история и современность // Туберкулез и болезни легких, 2013, №5, с. 39-46.3. Slogotskaya L.V. Skin immunological methods for tuberculosis - history and modernity // Tuberculosis and pulmonary diseases, 2013, No. 5, p. 39-46.
4. Владимирский М.А. О неправильных выводах в статье Слогоцкая Л.В. Кожные иммунологические методы при туберкулезе - история и современность // Туберкулез и болезни легких, 2014, №1, с. 53.4. Vladimirsky M.A. On the wrong conclusions in the article Slogotskaya L.V. Skin immunological methods for tuberculosis - history and modernity // Tuberculosis and pulmonary diseases, 2014, No. 1, p. 53.
5. Туберкулинодиагностика: учебное пособие. - М.: ГЕОТАР-Медиа. 2013. - С. 87.5. Tuberculin diagnostics: a training manual. - M .: GEOTAR-Media. 2013 .-- S. 87.
6. Oxford Immunotec, USPTO Applicaton №20070196878.6. Oxford Immunotec, USPTO Applicaton No. 20070196878.
7. Способ диагностики туберкулезного инфицирования. - Патент №2503006.7. A method for diagnosing tuberculosis infection. - Patent No. 2503006.
8. CDC. Guidelines for using the QuantiFERON- ТВ test for diagnosing latent mycobacterium tuberculosis infection. MMWR 2003: 52 (No RR-2): 15-8.8. CDC. Guidelines for using the QuantiFERON- TV test for diagnosing latent mycobacterium tuberculosis infection. MMWR 2003: 52 (No RR-2): 15-8.
9. Ярилин А.А. Основы иммунологии. - M., 1999.9. Yarilin A.A. The basics of immunology. - M., 1999.
10. Janeway С.A., Travers P., Walport M., Capra J.D. Immunobiology: the immune system in health and disease. - Elsevier Scince Ltd, 1999.10. Janeway S.A., Travers P., Walport M., Capra J.D. Immunobiology: the immune system in health and disease. - Elsevier Scince Ltd, 1999.
11. Watts Т.Н. TNFR family members in costimulation of Tcell responses // Annu. Rev. Immunol. - 2005. - Vol. 23. P. 23-68.11. Watts T.N. TNFR family members in costimulation of Tcell responses // Annu. Rev. Immunol. - 2005. - Vol. 23. P. 23-68.
12. Karin M., Lin A. NF - kB at the cross roads of life and death // Nat. Immunol. - 2002. - Vol. 173. - P. 7292-7298.12. Karin M., Lin A. NF - kB at the cross roads of life and death // Nat. Immunol. - 2002. - Vol. 173. - P. 7292-7298.
13. Лядова, Никитина, Кондратюк, Васильева. «Способ оценки эффективности лечения и динамики деструктивных изменений в легочной ткани при туберкулезе легких». - Заявка на патент №2010150484/15(072863).13. Lyadova, Nikitina, Kondratyuk, Vasilyeva. "A method for evaluating the effectiveness of treatment and the dynamics of destructive changes in lung tissue in pulmonary tuberculosis." - Application for patent No.2010150484 / 15 (072863).
14. Lyadova I.V., Oberdorf S., Kaprina М.А. et al. CD4 T cells producing IFN - gamma in the lung of mice challenged with mycobacteria express a CD27 - negative phenotype // Clin. Exp. Immunol. - 2004. - Vol. 138. - P. 21-29.14. Lyadova I.V., Oberdorf S., Kaprina M.A. et al. CD4 T cells producing IFN - gamma in the lung of mice challenged with mycobacteria express a CD27 - negative phenotype // Clin. Exp. Immunol. - 2004. - Vol. 138.- P. 21-29.
15. Методические рекомендации «Стандартизация методов иммунофенотипирования клеток крови и костного мозга человека» // Медицинская иммунология. - 1999. - Т. 1. - №5. - С. 21-43.15. Methodological recommendations "Standardization of methods for immunophenotyping of blood cells and bone marrow of a person" // Medical immunology. - 1999. - T. 1. - No. 5. - S. 21-43.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2014141474/15A RU2560679C1 (en) | 2014-10-14 | 2014-10-14 | Diagnostic technique for tuberculosis infection |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2014141474/15A RU2560679C1 (en) | 2014-10-14 | 2014-10-14 | Diagnostic technique for tuberculosis infection |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2560679C1 true RU2560679C1 (en) | 2015-08-20 |
Family
ID=53880780
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2014141474/15A RU2560679C1 (en) | 2014-10-14 | 2014-10-14 | Diagnostic technique for tuberculosis infection |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2560679C1 (en) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2633339C1 (en) * | 2016-07-13 | 2017-10-11 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Центральный научно-исследовательский институт туберкулеза" | Method for differential diagnostics of tuberculosis and nonspecific pathology of respiratory organs in children and adolescents |
| RU2680838C1 (en) * | 2016-09-27 | 2019-02-28 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Уральский научно-исследовательский институт фтизиопульмонологии" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "УНИИФ" Минздрава России) | Diagnosis of pulmonary tuberculosis |
| RU2799137C1 (en) * | 2022-02-10 | 2023-07-04 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method of assessing the probability of the presence of pulmonary tuberculosis in the general medical network in patients with a preliminary diagnosis of community-acquired pneumonia |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU79337U1 (en) * | 2008-06-25 | 2008-12-27 | Татьяна Николаевна Власик | TEST SYSTEM FOR IMMUNO-ENZYME DIAGNOSTICS "TV-GAMMA-INTERFERON-TEST" |
| US7514232B2 (en) * | 1996-12-06 | 2009-04-07 | Becton, Dickinson And Company | Method for detecting T cell response to specific antigens in whole blood |
| RU2491551C1 (en) * | 2011-12-26 | 2013-08-27 | Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ГБОУ ВПО СамГМУ Минздрава России) | Method for species identification of tuberculosis mycobacteria in individuals infected with tuberculosis mycobacteria |
-
2014
- 2014-10-14 RU RU2014141474/15A patent/RU2560679C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7514232B2 (en) * | 1996-12-06 | 2009-04-07 | Becton, Dickinson And Company | Method for detecting T cell response to specific antigens in whole blood |
| RU79337U1 (en) * | 2008-06-25 | 2008-12-27 | Татьяна Николаевна Власик | TEST SYSTEM FOR IMMUNO-ENZYME DIAGNOSTICS "TV-GAMMA-INTERFERON-TEST" |
| RU2491551C1 (en) * | 2011-12-26 | 2013-08-27 | Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ГБОУ ВПО СамГМУ Минздрава России) | Method for species identification of tuberculosis mycobacteria in individuals infected with tuberculosis mycobacteria |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| CDC. Guidelines for using the QuantiFERON-TB test for diagnosing latent Mycobacterium tuberculosis infection. MMWR 2003: 52(No. RR-2): 15-18 [Найдено 28.05.2015] [он-лайн]. Найдено из Интернет: URL: http://www.cdc.gov/mmwr/preview/mmwrhtml/rr5202a2.htm. * |
| СЛОГОЦКАЯ Л.В. Эффективность кожного теста с аллергеном туберкулёзным, содержащим рекомбинантный белок CFP10-ESAT6, в диагностике, выявлении и определении активности туберкулёзной инфекции. Автореф. дисс. доктора мед. наук. Москва, 2011, 45 c. [Найдено 28.05.2015] [он-лайн]. Найдено из Интернет: URL: http://medical-diss.com/docreader/66489/a#?page=1. * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2633339C1 (en) * | 2016-07-13 | 2017-10-11 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Центральный научно-исследовательский институт туберкулеза" | Method for differential diagnostics of tuberculosis and nonspecific pathology of respiratory organs in children and adolescents |
| RU2680838C1 (en) * | 2016-09-27 | 2019-02-28 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Уральский научно-исследовательский институт фтизиопульмонологии" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "УНИИФ" Минздрава России) | Diagnosis of pulmonary tuberculosis |
| RU2799137C1 (en) * | 2022-02-10 | 2023-07-04 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method of assessing the probability of the presence of pulmonary tuberculosis in the general medical network in patients with a preliminary diagnosis of community-acquired pneumonia |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Muñoz et al. | Diagnosis and management of latent tuberculosis infection | |
| Abate et al. | Asymptomatic helminth infection in active tuberculosis is associated with increased regulatory and Th-2 responses and a lower sputum smear positivity | |
| CnU'rE | The Dual Antibody Response to Experimenial Trichinosis | |
| Okuno et al. | Assessment of skin test with varicella-zoster virus antigen for predicting the risk of herpes zoster | |
| Govindasamy | Human brucellosis in South Africa: A review for medical practitioners | |
| Johnson et al. | Risk factors for relapse in human immunodeficiency virus type 1 infected adults with pulmonary tuberculosis | |
| RU2560679C1 (en) | Diagnostic technique for tuberculosis infection | |
| Tambunan et al. | CD4+ AND CD8+ T-cells expressing interferon gamma in active pulmonary tuberculosis patients | |
| Sayyahfar et al. | Comparison of Tuberculin Skin Test result and interferon gamma response to human PPD in BCG scar positive and negative children | |
| CN106405107A (en) | Use of mycobacterium tuberculosis antigen protein Rv2941 and its T cell epitope peptide | |
| Scordo et al. | Recall responses in the lung environment are impacted by age in a pilot study of Mycobacterium bovis-BCG vaccinated rhesus macaques | |
| Rodriguez-Molina et al. | The circumoval precipitin test in Schistosoma mansoni: A study of 300 patients | |
| Stabel et al. | Comparative cellular immune responses in calves after infection with Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis, M. avium subsp. avium, M. kansasii and M. bovis | |
| Alam et al. | An adaptable in vitro cytokine release assay (CRA): Susceptibility to cytokine storm in COVID-19 as a model | |
| Uncu et al. | Case report of systemic tularemia in Cyprus | |
| Kulkarni et al. | Primary tuberculous myositis: A rare clinical entity | |
| Ali et al. | Evaluation of TLR-2 sera levels in a sample of Iraqi pulmonary TB patients | |
| Kathim et al. | IL-6, IL-0, IFN Gamma and CRP in Newly Diagnosed COVID 19 Patients | |
| Bernardeschi et al. | Febrile exanthema revealing toxocariasis: a case report. | |
| RU2621303C1 (en) | Method for selection of substances for directed immune response modulation after vaccination against plague | |
| Mustafa | T-helper 1, T-helper 2, pro-inflammatory and anti-inflammatory cytokines in tuberculosis | |
| Safutri et al. | IFN-γ and IL-4 secretion after stimulation of EC610 fusion antigens (ESAT-6-CFP-10) in patients with active pulmonary TB and latent TB | |
| RU2399055C2 (en) | Diagnostic technique for tuberculosis infection | |
| Hassan et al. | Differences in IgG and IFN γ levels generated against different types of vaccines available in Iraq | |
| Martínez-Romero et al. | Immunity towards tuberculosis infection: A review |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20161015 |