RU2554055C1 - Immunisation method of animals against brucellosis - Google Patents

Immunisation method of animals against brucellosis Download PDF

Info

Publication number
RU2554055C1
RU2554055C1 RU2013146586/10A RU2013146586A RU2554055C1 RU 2554055 C1 RU2554055 C1 RU 2554055C1 RU 2013146586/10 A RU2013146586/10 A RU 2013146586/10A RU 2013146586 A RU2013146586 A RU 2013146586A RU 2554055 C1 RU2554055 C1 RU 2554055C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
brucellosis
days
antigen
vaccine
vaccination
Prior art date
Application number
RU2013146586/10A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Михаил Иванович Гулюкин
Марат Идрисович Искандаров
Мкртич Погосович Альбертян
Андрей Иванович Федоров
Сальмиханум Самурхановна Искандарова
Original Assignee
Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии имени Я Р Коваленко Российской академии сельскохозяйственных наук
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии имени Я Р Коваленко Российской академии сельскохозяйственных наук filed Critical Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии имени Я Р Коваленко Российской академии сельскохозяйственных наук
Priority to RU2013146586/10A priority Critical patent/RU2554055C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2554055C1 publication Critical patent/RU2554055C1/en

Links

Landscapes

  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Abstract

FIELD: biotechnologies.
SUBSTANCE: method involves use of inactivated antibrucellar vaccine or a brucellar antigen; with that, vaccination is performed every day, perorally during 5-10 days, in 7-15 days after vaccination is completed, single peroral revaccination is performed with an antigen or vaccine together with an immune stimulant; with that, vaccine or antigen is introduced together with feedstuff or water. The proposed invention provides for peroral vaccination of animals by adding a vaccinating preparation to feedstuff, which considerably reduces costs for preventive measures against brucellosis.
EFFECT: invention allows reducing a level of specific brucellar antigens to a non-diagnostic level, which obstructs no further differentiation between sick and healthy population of animals immediately after preventive measures have been taken.
3 tbl, 22 ex

Description

Изобретение относится к области ветеринарной микробиологии, в частности к профилактике бруцеллезной инфекции.The invention relates to the field of veterinary microbiology, in particular to the prevention of brucellosis infection.

Бруцеллез - инфекционное заболевание, поражающее различные виды животных и человека. Заболевание передается только от животного к человеку или от животного к животному. Бруцеллез наносит существенный экономический ущерб животноводству, так как вызывает уменьшение продуктивности, снижение жизнеспособности приплода, а проводимые ветеринарно-санитарные мероприятия требуют значительных материальных затрат. Бруцеллез возникает в результате проникновения возбудителя (бруцелл) через желудочно-кишечный тракт или поврежденную кожу и слизистые оболочки.Brucellosis is an infectious disease that affects various species of animals and humans. The disease is transmitted only from animal to person or from animal to animal. Brucellosis causes significant economic damage to livestock, as it causes a decrease in productivity, a decrease in the viability of the offspring, and the veterinary and sanitary measures require significant material costs. Brucellosis occurs as a result of the penetration of the pathogen (brucella) through the gastrointestinal tract or damaged skin and mucous membranes.

Несмотря на более чем столетний период изучения и борьбы с бруцеллезной инфекцией, она все еще широко распространена в животноводческих хозяйствах.Despite more than a century of research and control of brucellosis infection, it is still widespread in livestock farms.

Ущерб, причиняемый бруцеллезом, усугубляется заболеванием людей, которое ведет к потере трудоспособности и часто к пожизненной инвалидности.The damage caused by brucellosis is exacerbated by the disease of people, which leads to disability and often to lifelong disability.

Важнейшим элементом в комплексной системе борьбы с бруцеллезом является вакцинация. В настоящее время известен и наиболее широко применяется парентеральный способ введения противобруцеллезных вакцин. Для профилактики бруцеллеза в настоящее время используют живые вакцины из штаммов, находящихся в стабильной S-форме - В.abortus 19, B.melitensis Rev-1, из RS-штаммов бруцелл (из штамма 82, 75/79-АВ), убитая вакцина из штамма В.abortus KB 17/100), а также известна вакцина на основе антигенов выделенных из клеток бруцелл (бруцеллезная химическая вакцина). Данные вакцины при парентеральном введении в той или иной степени обладают серопозитивностью, т.е. способностью индуцировать специфические бруцеллезные антитела, которые длительно присутствуют в крови вакцинированных животных. В результате вакцинации в течение длительного времени затрудняется дифференциация вакцинированных животных от инфицированных (1, 2, 3).The most important element in a comprehensive system for controlling brucellosis is vaccination. Currently, the parenteral route of administration of anti-brucellosis vaccines is known and most widely used. For the prevention of brucellosis, live vaccines are currently being used from strains in the stable S-form - B. abortus 19, B. melitensis Rev-1, from RS-strains of brucella (from strain 82, 75/79-AB), killed vaccine from strain B. abortus KB 17/100), and also a vaccine based on antigens isolated from brucella cells (brucellosis chemical vaccine) is known. These parenteral vaccines to one degree or another have seropositivity, i.e. the ability to induce specific brucellosis antibodies that are present in the blood of vaccinated animals for a long time. As a result of vaccination, the differentiation of vaccinated animals from infected is difficult for a long time (1, 2, 3).

Известен также конъюнктивальный метод применения живых противобруцеллезных вакцин из штаммов В.abortus 19, B.melitensis Rev-1. Однако конъюнктивальное применение живых вакцин не безопасно, так как живая культура при введении на конъюнктиву попадает не только на слизистую глаза и в окружающую среду, но и непосредственно на человека, проводящего данную манипуляцию (4).Also known is the conjunctival method of using live anti-brucellosis vaccines from B. abortus 19, B. melitensis Rev-1 strains. However, the conjunctival use of live vaccines is not safe, since a living culture, when introduced into the conjunctiva, falls not only on the mucous membrane of the eye and the environment, but also directly on the person performing this manipulation (4).

Наиболее близким способом к предложенному является пероральное применение живой противобруцеллезной вакцины из штамма B.abortus 82 на оленях (5). Вакцину применяют однократно, однако применение живой вакцины связано с процессом фиксации животного и необходимостью строго соблюдать требования безопасности, чтобы уменьшить контаминацию окружающей среды и возможность аэрозольного попадания штамма бруцелл обслуживающему персоналу во время вакцинации (прототип).The closest method to the proposed one is the oral administration of a live anti-brucellosis vaccine from B. abortus 82 strain on deer (5). The vaccine is used once, however, the use of a live vaccine is associated with the process of fixing the animal and the need to strictly comply with safety requirements in order to reduce the contamination of the environment and the possibility of aerosol exposure to the Brucella strain for maintenance staff during vaccination (prototype).

Таким образом, применение различных способов введения противобруцеллезных вакцин полностью не решает проблему профилактической вакцинации и дифференциации вакцинированных животных от больных.Thus, the use of various methods of administering anti-brucellosis vaccines does not completely solve the problem of preventive vaccination and differentiation of vaccinated animals from patients.

Задачей наших исследований является снижение негативных последствий (длительной серопозитивности) вакцинации животных противобруцеллезными вакцинами, мешающих дифференциации инфицированных и вакцинированных животных существующими коммерческими диагностикумами при проведении оздоровления хозяйств от бруцеллезной инфекции.The objective of our research is to reduce the negative consequences (prolonged seropositivity) of vaccinating animals with anti-brucellosis vaccines, which interfere with the differentiation of infected and vaccinated animals with existing commercial diagnostics during the rehabilitation of farms from brucellosis infection.

Техническим результатом является снижение титров специфических антител у животных и упрощение проведения профилактической вакцинации.The technical result is to reduce the titers of specific antibodies in animals and simplify the implementation of preventive vaccination.

Это достигается тем, что вакцинацию проводят ежедневно, перорально в течение 5-10 дней, через 7-15 дней после окончания вакцинации проводят однократную пероральную ревакцинацию специфическим бруцеллезным антигеном совместно с иммуностимулятором, антиген и иммуностимулятор можно задавать животным с кормом или водой.This is achieved by the fact that vaccination is carried out daily, orally for 5-10 days, 7-15 days after the end of vaccination, a single oral revaccination with a specific brucellosis antigen is carried out together with an immunostimulant, the antigen and immunostimulant can be given to animals with food or water.

В результате предлагаемого перорального способа иммунизации против бруцеллеза снижается индукция специфических бруцеллезных антител у животных, что позволит проводить диагностические исследования и выявлять инфицированных животных в более ранние сроки по сравнению с животными, привитыми традиционными способами введения противобруцеллезных вакцин.As a result of the proposed oral method of immunization against brucellosis, the induction of specific brucellosis antibodies in animals is reduced, which will allow for diagnostic studies and the detection of infected animals at an earlier time compared to animals vaccinated with traditional methods of administering anti-brucellosis vaccines.

Возможность осуществления изобретения с реализацией указанного назначения иллюстрируется следующими примерами.The possibility of carrying out the invention with the implementation of this purpose is illustrated by the following examples.

Пример 1. Белых мышей весом 18-19 грамм вакцинировали в течение 5 дней путем ежедневного выпаивания суспензии убитой культуры бруцелл из штамма B.abortus 82 в концентрации 10 млрд микробных клеток в объеме 0,02 мл. Через 7 дней после окончания введения антигена мышей перорально ревакцинировали суспензией бруцелл в той же концентрации в объеме 0,02 мл и иммуностимулятора Полиоксидония в дозе 0,8 мг/кг веса. Через 5 дней после ревакцинации определяли иммунологическую реактивность мышей по реакции гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) путем введения 0,01 мл бруцеллина в подушечку левой задней лапы и 0,01 мл физраствора в подушечку правой задней лапы. Через сутки мышей усыпляли, брали кровь, фекалии, отрезали лапки по пяточному бугру, взвешивали и определяли индекс ГЗТ согласно методике (6, 7). ГЗТ является одной из форм защиты организма от инфекции, в основе нее лежит специфическое воспаление, которое развивается в сенсибилизированном организме. В реакции агглютинации определяли специфические бруцеллезные антитела в крови и фекалиях. В качестве контроля служили интактные мыши, которых не вакцинировали. Результаты представлены в таблице 1.Example 1. White mice weighing 18-19 grams were vaccinated for 5 days by daily feeding of a suspension of killed brucella culture from B. abortus 82 strain at a concentration of 10 billion microbial cells in a volume of 0.02 ml. 7 days after the end of antigen administration, mice were orally revaccinated with a suspension of brucella in the same concentration in a volume of 0.02 ml and a Polyoxidonium immunostimulant at a dose of 0.8 mg / kg of body weight. 5 days after revaccination, the immunological reactivity of mice was determined by the delayed-type hypersensitivity reaction (HRT) by introducing 0.01 ml of brucellin into the paw pad of the left hind paw and 0.01 ml of saline into the paw pad of the right hind paw. After a day, the mice were euthanized, blood, feces were taken, the legs were cut off along the calcaneal tuber, weighed and the HRT index was determined according to the procedure (6, 7). HRT is one of the forms of protecting the body from infection, it is based on specific inflammation, which develops in a sensitized body. In the agglutination reaction, specific brucellosis antibodies in blood and feces were determined. Intact mice that were not vaccinated were used as controls. The results are presented in table 1.

Таблица 1Table 1 Результаты исследований по пероральной иммунизации белых мышейResearch Results on Oral Immunization of White Mice Пример №Example No. Вес левой лапки M±mWeight of the left foot M ± m Вес правой лапки M±mWeight of the right foot M ± m Индекс ГЗТHRT Index Титр антителAntibody titer В фекалияхIn feces В сыворотке кровиIn blood serum 1one 183,7+5,3183.7 + 5.3 172,8+4,3172.8 + 4.3 5,95.9 37,337.3 -- 22 214.3+11,3214.3 + 11.3 191,3+7,6191.3 + 7.6 10,710.7 46,746.7 -- 33 242,7+9,3242.7 + 9.3 218,1+6,4218.1 + 6.4 10,110.1 44,044.0 -- 4four 188,5+5,0188.5 + 5.0 178,1+4,3178.1 + 4.3 5,55.5 21,321.3 -- 55 184,4+18,4184.4 + 18.4 169,5+11,2169.5 + 11.2 8,18.1 22,722.7 -- 66 162,8+7,7162.8 + 7.7 159,8+9,1159.8 + 9.1 1,81.8 16,016,0 -- 77 180,3+12,1180.3 + 12.1 177,5+7,9177.5 + 7.9 1,61,6 12,712.7 -- 88 145,7+4,6145.7 + 4.6 145,9+6,7145.9 + 6.7 0,50.5 6,46.4 -- 99 170,3+9,8170.3 + 9.8 168,1+7,4168.1 + 7.4 1,31.3 4,04.0 -- 1010 169,5+4,6169.5 + 4.6 168,3+5,7168.3 + 5.7 0,70.7 4,04.0 -- 11eleven 181,3+9,7181.3 + 9.7 178,6+11,3178.6 + 11.3 1,41.4 12,012.0 -- 1212 171,5+7,1171.5 + 7.1 169,4+8,6169.4 + 8.6 1,21,2 8,68.6 -- 1313 179,3+5,7179.3 + 5.7 177,1+8,4177.1 + 8.4 1,21,2 5,65,6 Интактные животныеIntact animals 121,3+5,3121.3 + 5.3 119,4+6,1119.4 + 6.1 1,51,5 -- --

Пример 2. Аналогичен примеру 1, только пероральную ревакцинацию проводили через 15 дней и в качестве иммуностимулятора использовали Гликопин, который вводили из расчета 0.2 мг/кг. Результаты в таблице 1.Example 2. Similar to example 1, only oral revaccination was carried out after 15 days and Glycopin was used as an immunostimulant, which was administered at the rate of 0.2 mg / kg. The results are in table 1.

Пример 3. Аналогичен примеру 1, но в качестве антигена использовали адъювант вакцину из штамма KB 17/100, которую задавали перорально вместе с кормом в объеме 0,02 мл, а в качестве иммуностимулятора - Гликопин. Результаты в таблице 1.Example 3. Similar to example 1, but as an antigen, an adjuvant vaccine from strain KB 17/100 was used, which was administered orally with food in a volume of 0.02 ml, and Glycopin as an immunostimulant. The results are in table 1.

Пример 4. Аналогичен примеру 1, только вакцинацию вели бруцеллезным глюкопротеидным антигеном, полученным по А.С. СССР №691056, A61K 39/10, 1974 г., в дозе 0,05 мг в течение 10 дней. Результаты в таблице 1.Example 4. Similar to example 1, only vaccination was carried out by brucellosis glucoprotein antigen obtained by A.S. USSR No. 691056, A61K 39/10, 1974, at a dose of 0.05 mg for 10 days. The results are in table 1.

Пример 5. Аналогичен примеру 1, только белых мышей вакцинировали в течение 10 дней бруцеллезным белково-полисахаридным антигеном, полученным по А.С. СССР №467933, A61K 39/10, 1977 г., путем ежедневного выпаивания в дозе 0,05 мг в объеме 0,02 мл. Через 15 дней после окончания введения антигена мышей перорально ревакцинировали этим же антигеном совместно со стимулятором Гликопином. Результаты в таблице 1.Example 5. Similar to example 1, only white mice were vaccinated for 10 days with brucellosis protein-polysaccharide antigen obtained by A.S. USSR №467933, A61K 39/10, 1977, by daily evaporation in a dose of 0.05 mg in a volume of 0.02 ml. Fifteen days after the end of antigen administration, mice were orally revaccinated with the same antigen in conjunction with the glycopine stimulator. The results are in table 1.

Пример 6. Белых мышей вакцинировали в течение 2 дней путем ежедневного выпаивания суспензии убитой культуры бруцелл из штамма В.abortus 82 в концентрации 10 млрд микробных клеток в объеме 0,02 мл. Через 7 дней после окончания введения антигена, мышей перорально ревакцинировали этой же суспензией бруцелл (0,02 мл) и иммуностимулятора Полиоксидония в дозе 0,8 мг/кг веса. Результаты в таблице 1.Example 6. White mice were vaccinated for 2 days by daily feeding of a suspension of killed brucella culture from B. abortus 82 strain at a concentration of 10 billion microbial cells in a volume of 0.02 ml. 7 days after the end of the antigen administration, the mice were orally revaccinated with the same suspension of brucella (0.02 ml) and the Polyoxidonium immunostimulant at a dose of 0.8 mg / kg body weight. The results are in table 1.

Пример 7. Белых мышей вакцинировали в течение 20 дней путем ежедневного выпаивания суспензии убитой культуры бруцелл из штамма В.abortus 82 в концентрации 10 млрд микробных клеток в объеме 0,02 мл. Через 15 дней после окончания введения антигена мышей перорально ревакцинировали суспензией бруцелл (0,05 мл) и иммуностимулятора Полиоксидония в дозе 0,8 мг/кг веса. Результаты в таблице 1.Example 7. White mice were vaccinated for 20 days by daily feeding of a suspension of killed brucella culture from B. abortus 82 strain at a concentration of 10 billion microbial cells in a volume of 0.02 ml. Fifteen days after the end of antigen administration, the mice were orally revaccinated with a suspension of brucella (0.05 ml) and a Polyoxidonium immunostimulant at a dose of 0.8 mg / kg body weight. The results are in table 1.

Пример 8. Белых мышей вакцинировали в течение 10 дней путем ежедневного выпаивания суспензии убитой культуры бруцелл штамма В.abortus 82 в концентрации 10 млрд микробных клеток в объеме 0,02 мл без иммуностимулятора. Через 5 дней после вакцинации определяли иммунологическую реактивность мышей по реакции ГЗТ. Результаты в таблице 1.Example 8. White mice were vaccinated for 10 days by daily feeding of a suspension of a killed culture of brucella strain B. abortus 82 at a concentration of 10 billion microbial cells in a volume of 0.02 ml without immunostimulant. 5 days after vaccination, the immunological reactivity of mice was determined by HRT reaction. The results in table 1.

Пример 9. Белых мышей вакцинировали в течение 5 дней путем ежедневного выпаивания суспензии убитой культуры бруцелл штамма В.abortus 82 в концентрации 10 млрд микробных клеток в объеме 0,02 мл. Через 7 дней после окончания введения антигена мышей перорально ревакцинировали суспензией бруцелл (0,02 мл) без иммуностимулятора. Результаты в таблице 1.Example 9. White mice were vaccinated for 5 days by daily feeding of a suspension of a killed culture of brucella strain B. abortus 82 at a concentration of 10 billion microbial cells in a volume of 0.02 ml. 7 days after the end of antigen administration, the mice were orally revaccinated with a suspension of brucella (0.02 ml) without an immunostimulant. The results are in table 1.

Пример 10. Белых мышей вакцинировали в течение 5 дней путем ежедневного выпаивания суспензии убитой культуры бруцелл штамма B.abortus 82 в концентрации 10 млрд микробных клеток в объеме 0,02 мл вместе с иммуностимулятором Полиоксидоний в дозе 0,8 мг/кг веса. Результаты в таблице 1.Example 10. White mice were vaccinated for 5 days by daily feeding of a suspension of a dead culture of brucella strain B. abortus 82 at a concentration of 10 billion microbial cells in a volume of 0.02 ml together with a polyoxidonium immunostimulant at a dose of 0.8 mg / kg body weight. The results are in table 1.

Пример 11. Белых мышей вакцинировали в течение 10 дней путем ежедневного выпаивания суспензии убитой культуры бруцелл штамма B.abortus 82 в концентрации 10 млрд микробных клеток в объеме 0,02 мл, в конце курса иммунизации ввели иммуностимулятор Полиоксидония в дозе 0,8 мг/кг веса. Результаты в таблице 1.Example 11. White mice were vaccinated for 10 days by daily feeding out a suspension of a dead culture of brucella strain B. abortus 82 at a concentration of 10 billion microbial cells in a volume of 0.02 ml, at the end of the course of immunization was introduced an immunostimulant Polyoxidonium at a dose of 0.8 mg / kg weight. The results are in table 1.

Пример 12. Белых мышей вакцинировали в течение 7 дней путем ежедневного скармливания вместе с кормом бруцеллезного белково-полисахаридного антигена, полученного по А.С. СССР №467933, A61K 39/10, 1977 г., в дозе 0,05 мг. Через 30 дней после окончания введения антигена мышей перорально ревакцинировали антигеном совместно с иммуностимулятором Гликопином в дозе 0,2 мг/кг веса. Результаты в таблице 1.Example 12. White mice were vaccinated for 7 days by daily feeding together with food of brucellosis protein-polysaccharide antigen obtained by A. S. USSR №467933, A61K 39/10, 1977, at a dose of 0.05 mg. 30 days after the end of the antigen administration, the mice were orally revaccinated with the antigen in conjunction with the Glycopin immunostimulant at a dose of 0.2 mg / kg body weight. The results in table 1.

Пример 13. Белых мышей вакцинировали в течение 7 дней путем ежедневного выпаивания бруцеллезного белково-полисахаридного антигена, полученного по А.С. СССР №467933, A61K 39/10, 1977 г., в дозе 0,05 мг, растворенного в объеме 0,02 мл. Через 3 дня после окончания введения антигена мышей перорально ревакцинировали антигеном совместно с иммуностимулятором Полиоксидонием в дозе 0,8 мг/кг веса. Результаты в таблице 1.Example 13. White mice were vaccinated for 7 days by daily feeding of brucellosis protein-polysaccharide antigen obtained by A. S. USSR №467933, A61K 39/10, 1977, at a dose of 0.05 mg dissolved in a volume of 0.02 ml. 3 days after the end of the antigen administration, the mice were orally revaccinated with the antigen in conjunction with the polyoxidonium immunostimulant at a dose of 0.8 mg / kg body weight. The results are in table 1.

Таким образом, из опытов на мышах видно, что наибольший иммунный ответ на парентеральное введение бруцеллезного антигена развивается при ежедневном введении антигена в течение 5-10 дней и последующей ревакцинации через 7-15 дней. Варьирование сроков введения и кратности не приводит к положительному результату - усилению иммунного ответа организма.Thus, from experiments in mice, it is seen that the greatest immune response to parenteral administration of brucellosis antigen develops with daily administration of antigen for 5-10 days and subsequent revaccination after 7-15 days. Varying the timing of administration and multiplicity does not lead to a positive result - to strengthen the body's immune response.

Пример 14. В качестве биологической модели при проверке иммуногенности бруцеллезных вакцин используют морских свинок. Возможность перорального метода введения противобруцеллезных антигенов испытывали на морских свинках весом 250-300 грамм. Морских свинок вакцинировали в течение 5 дней путем ежедневного выпаивания суспензии убитой культуры бруцелл из штамма B.abortus 82 в концентрации 10 млрд микробных клеток в объеме 0,5 мл. Через 7 дней после окончания курса пероральной вакцинации морских свинок перорально ревакцинировали суспензией бруцелл (0,5 мл) совместно с иммуностимулятором Полиоксидонием в дозе 0,8 мг/кг веса. Через 45 дней после ревакцинации определяли устойчивость морских свинок к экспериментальному заражению 10 ИД100 вирулентного штамма B.abortus 54. После заражения животных убивали и проводили бактериологическое исследование паренхиматозных органов и лимфатических узлов (всего 10 объектов). При выделении заражающего штамма хотя бы из одного объекта животное считалось не иммунным.Example 14. As a biological model for testing the immunogenicity of brucellosis vaccines, guinea pigs are used. The possibility of an oral method for administering anti-brucellosis antigens was tested on guinea pigs weighing 250-300 grams. Guinea pigs were vaccinated for 5 days by daily feeding out a suspension of killed brucella culture from B. abortus 82 strain at a concentration of 10 billion microbial cells in a volume of 0.5 ml. 7 days after the end of the oral vaccination course, the guinea pigs were orally revaccinated with a suspension of brucella (0.5 ml) together with the Polyoxidonium immunostimulant at a dose of 0.8 mg / kg body weight. 45 days after revaccination, the resistance of guinea pigs to experimental infection was determined 10 ID 100 of virulent B. abortus 54 strain. After infection, the animals were killed and bacteriological examination of parenchymal organs and lymph nodes (total 10 objects) was performed. When an infecting strain was isolated from at least one object, the animal was considered non-immune.

Сыворотку крови исследовали в реакции агглютинации на наличие специфических бруцеллезных антител. В качестве контролей служили следующие группы морских свинок: однократно парентерально вакцинированные коммерческой вакциной из штамма B.abortus 82 в дозе 1 млрд микробных клеток; морские свинки перорально вакцинированные вакциной из штамма B.abortus 82 в дозе 2 млрд микробных клеток. Отрицательным контролем заражения служили интактные морские свинки, которых не подвергали вакцинации. Результаты представлены в таблице 2.Blood serum was examined in an agglutination reaction for the presence of specific brucellosis antibodies. The following groups of guinea pigs served as controls: once parenterally vaccinated with a commercial vaccine from B. abortus 82 strain at a dose of 1 billion microbial cells; Guinea pigs were orally vaccinated with a vaccine from B. abortus 82 strain at a dose of 2 billion microbial cells. Intact guinea pigs, which were not vaccinated, served as a negative control of infection. The results are presented in table 2.

Пример 15. Аналогичен примеру 14, но морских свинок вакцинировали бруцеллезным белково-полисахаридным антигеном, полученным по №467933, A61K 39/10, 1977 г., в течение 10 дней, в качестве иммуностимулятора применяли Гликопин из расчета 0,2 мг/кг веса.Example 15. Similar to example 14, but guinea pigs were vaccinated with brucellosis protein-polysaccharide antigen obtained according to No. 4667933, A61K 39/10, 1977, for 10 days, Glycopin was used as an immunostimulant at the rate of 0.2 mg / kg weight .

Пример 16. Аналогичен примеру 14, но ревакцинацию проводили через 10 дней, вводили иммуностимулятор Гликопин и бруцеллезный глюкопротеидный антиген, полученный по А.С. СССР №691056, A61K 39/10, 1974 г., в дозе 0,5 мг вместе с кормом.Example 16. Similar to example 14, but revaccination was carried out after 10 days, was administered the immunostimulant Glycopin and brucellosis glucoprotein antigen obtained by A.S. USSR No. 691056, A61K 39/10, 1974, at a dose of 0.5 mg with food.

Пример 17. Аналогичен примеру 14, но при ревакцинации не вводили иммуностимулятор.Example 17. Similar to example 14, but when revaccination was not introduced immunostimulant.

Пример 18. Аналогичен примеру 14, но морских свинок вакцинировали в течение 2 дней бруцеллезным белково-полисахаридным антигеном, полученным по А.С. СССР №467933, A61K 39/10, 1977 г., и вводили иммуностимулятор Гликопин.Example 18. Similar to example 14, but guinea pigs were vaccinated for 2 days with brucellosis protein-polysaccharide antigen obtained according to A.S. USSR No. 46933, A61K 39/10, 1977, and the immunostimulant Glycopin was administered.

Пример 19. Аналогичен примеру 14, но морских свинок ревакцинировали через 4 дня и использовали бруцеллезный белково-полисахаридный антиген, полученный по А.С. СССР №467933, A61K 39/10, 1977 г.Example 19. Similar to example 14, but guinea pigs were revaccinated after 4 days and used brucellosis protein-polysaccharide antigen obtained by A.S. USSR No. 46933, A61K 39/10, 1977

Пример 20. Аналогичен примеру 14, но морских свинок вакцинировали в течение 10 дней, а ревакцинировали через 30 дней.Example 20. Similar to example 14, but guinea pigs were vaccinated for 10 days, and revaccinated after 30 days.

Пример 21. Аналогичен примеру 14, но морских свинок вакцинировали в течение 20 дней и в конце курса вакцинации вводили иммуностимулятор гликопин из расчета 0,2 мг/кг веса.Example 21. Similar to example 14, but guinea pigs were vaccinated for 20 days and at the end of the vaccination course, a glycopine immunostimulant was administered at a rate of 0.2 mg / kg body weight.

Таблица 2table 2 Результаты исследований по пероральной иммунизации морских свинокResults of Guinea Pig Oral Immunization Studies Морские свинки, вакцинированные по примеру №Guinea pigs vaccinated according to example No. К-во головGoals Титр антител в сыворотке кровиSerum antibody titer Индекс инфицированностиInfection index % иммунных% immune 14fourteen 1010 -- 22 9090 15fifteen 1212 -- 3,33.3 91,691.6 1616 1010 -- 66 8080 1717 88 -- 18,518.5 50,050,0 18eighteen 1010 -- 30thirty 4040 1919 1010 -- 2424 6060 20twenty 1212 -- 26,626.6 50fifty 2121 99 -- 31,131.1 44,444,4 Вакцинированные парентерально живой вакциной из шт. B.abortus 82Vaccinated parenterally with a live vaccine from a piece. B.abortus 82 15fifteen 82,9+21,682.9 + 21.6 7,37.3 86,786.7 Вакцинированные перорально живой вакциной из шт. B.abortus 82Vaccinated orally with live vaccine from a piece. B.abortus 82 14fourteen 40,0+7,640.0 + 7.6 15fifteen 78,678.6 Интактные морские свинкиIntact guinea pigs 1010 -- 7878 00

Пример 22. Овец в возрасте 3-5 месяцев разделили на группы. Овец опытной группы вакцинировали перорально, путем ежедневного скармливания в течение 10 дней инактивированной нагреванием вакцины из штамма В.abortus 19 в дозе 100 млрд м.к., через 7 дней провели пероральную ревакцинацию путем однократного скармливания инактивированной вакцины и дозе 100 млрд м.к. и иммуностимулятора полиоксидония в дозе 30 мг. В качестве контролей служили группа интактных животных и группа животных, вакцинированных парентерально живой вакциной из штамма В.abortus 19 в дозе 40 млрд м.к. У животных на 7, 15, 30 день брали кровь и исследовали в серологических реакциях (РБП, РА, РСК) на наличие специфических бруцеллезных антител. Через 30 дней после ревакцинации всех животных экспериментально заразили 10 ИД100 вирулентного штамма В.abortus 54. После заражения животных убивали и проводили бактериологическое исследование паренхиматозных органов и лимфатических узлов. При выделении заражающего штамма хотя бы из одного объекта животное считалось не иммунным. Результаты представлены в таблице 3.Example 22. Sheep aged 3-5 months were divided into groups. The sheep of the experimental group were vaccinated orally, by daily feeding for 10 days with a heat-inactivated vaccine from B. abortus 19 strain at a dose of 100 billion m.k., after 7 days, oral revaccination was carried out by a single feeding of an inactivated vaccine and a dose of 100 billion m.k. and a polyoxidonium immunostimulant at a dose of 30 mg. A group of intact animals and a group of animals vaccinated with a parenterally living vaccine from a strain of B. abortus 19 at a dose of 40 billion cubic meters served as controls. Blood was taken from animals on days 7, 15, and 30 and examined in serological reactions (RBP, RA, CSC) for the presence of specific brucellosis antibodies. Thirty days after revaccination, all animals were experimentally infected with 10 ID 100 of virulent strain B. abortus 54. After infection, the animals were killed and bacteriological studies of parenchymal organs and lymph nodes were performed. When an infecting strain was isolated from at least one object, the animal was considered non-immune. The results are presented in table 3.

Как следует из таблиц, при пероральном способе иммунизации специфические бруцеллезные антитела индуцируются до недиагностического уровня, что в дальнейшем позволит проводить дифференциацию между больным и здоровым поголовьем животных сразу после проведения профилактических мероприятий.As follows from the tables, with the oral method of immunization, specific brucellosis antibodies are induced to an off-diagnostic level, which will subsequently allow differentiation between a sick and healthy animal population immediately after preventive measures.

Таблица 3Table 3 Результаты применения пероральной иммунизации против бруцеллеза на овцахSheep Brucellosis Oral Immunization Results Метод вакцинацииVaccination method К-во головGoals Титр антителAntibody titer Индекс инфицированностиInfection index % иммунных% immune РАRA РСКRSK РБПBbp ПероральныйOral 1212 00 00 отрneg 00 100one hundred ПарентеральныйParenteral 1010 680±162680 ± 162 -- полfloor 00 100one hundred Интактные животныеIntact animals 88 56,756.7 00

Представленные данные свидетельствуют также о том, что пероральная иммунизация животных инактивированной противобруцеллезной вакциной из штамма B.abortus 82 или бруцеллезными антигенами предложенным способом позволяет вызывать эффективную защиту от экспериментального заражения бруцеллезом. Длительность первичной ежедневной вакцинации 5-10 дней и интервал между вакцинацией и ревакцинацией 7-15 являются оптимальными, иммунный ответ организма при этом по своей эффективности не уступает реакции организма на введение живой противобруцеллезной вакцины. В то же время данный способ позволяет проводить профилактическую вакцинацию животных путем добавления в корм вакцинирующего препарата, что значительно сокращает затраты на проведение профилактических мероприятий против бруцеллеза особенно овец при отарном пастбищном содержании, а также с целью профилактики бруцеллеза у диких животных в заповедниках и заказниках. Дозы антигенов, вводимых животным перорально, зависят от свойств и вида антигена.The data presented also indicate that oral immunization of animals with an inactivated anti-brucellosis vaccine from B. abortus 82 strain or brucellosis antigens by the proposed method allows effective protection against experimental infection with brucellosis. The duration of the initial daily vaccination of 5-10 days and the interval between vaccination and revaccination of 7-15 are optimal, the immune response of the body is not inferior in its effectiveness to the body's response to the introduction of a live anti-brucellosis vaccine. At the same time, this method allows for the prophylactic vaccination of animals by adding a vaccine to the feed, which significantly reduces the cost of carrying out preventive measures against brucellosis, especially sheep with cattle grazing, as well as for the prevention of brucellosis in wild animals in reserves and sanctuaries. Doses of antigens administered orally to animals depend on the properties and type of antigen.

Предложенный способ апробирован с положительным результатом на лабораторных животных, работы проводили в период с 2009 по 2013 год на опытной базе ГНУ Всероссийского научно-исследовательского института экспериментальной ветеринарии имени Я.Р. Коваленко Российской академии сельскохозяйственных наук в Вышнем Волочке, в соответствии с Российской Научно-технической программой по фундаментальным и приоритетным прикладным исследованиям по научному обеспечению развития агропромышленного комплекса (АПК), задание 08.02.01.The proposed method was tested with a positive result on laboratory animals, the work was carried out in the period from 2009 to 2013 at the experimental base of the GNU All-Russian Research Institute of Experimental Veterinary Medicine named after Ya.R. Kovalenko of the Russian Academy of Agricultural Sciences in Vyshny Volochyok, in accordance with the Russian Scientific and Technical Program for Fundamental and Priority Applied Research on the Scientific Support for the Development of the Agro-Industrial Complex (AIC), task 08.02.01.

Способ пероральной иммунизации путем введения в корм инактивированных противобруцеллезных вакцин или антигенов может найти применение при проведении массовой профилактической вакцинации сельскохозяйственных и диких животных.The method of oral immunization by introducing inactivated anti-brucellosis vaccines or antigens into the feed may find application in mass prophylactic vaccination of farm and wild animals.

Источники информацииInformation sources

1. Ж. Ветеринария, 1963, №6, с.23-26.1. J. Veterinary Medicine, 1963, No. 6, pp. 23-26.

2. Труды ВИЭВ, М., 1967 г., том 33, с.105-115.2. Proceedings of the VIEV, M., 1967, volume 33, p.105-115.

3. Искандаров М.И. Диссертация на соискание ученой степени доктора ветеринарных наук «Бруцеллез животных в России: эпизоотологические особенности и совершенствование специфической профилактики» Москва, 2012 г., с.382.3. Iskandarov M.I. The dissertation for the degree of Doctor of Veterinary Sciences "Animal brucellosis in Russia: epizootological features and the improvement of specific prophylaxis" Moscow, 2012, p. 382.

4. Доклады ВАСХНИЛ. М., 1988, №3, с.44-46.4. Reports of the Supreme Agricultural Academy. M., 1988, No. 3, pp. 44-46.

5. Слепцов Е.С. Диссертация на соискание ученой степени доктора ветеринарных наук «Иммунопрофилактика бруцеллеза животных с использованием вакцин из штаммов Br.abortus 19, 104М, 82 и Br.suis 61» Санкт-Петербург, 1992 г., с.371.5. Sleptsov E.S. The dissertation for the degree of Doctor of Veterinary Sciences “Immunoprophylaxis of animal brucellosis using vaccines from strains Br.abortus 19, 104M, 82 and Br.suis 61” St. Petersburg, 1992, p. 371.

6. Хабриев Р.У. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических средств / М. Медицина, 2005 г., с.63.6. Khabriev R.U. Guidelines for the experimental (preclinical) study of new pharmacological agents / M. Medicine, 2005, p.63.

7. Определение безопасности и эффективности биологически активных добавок к пище. МУК 2.3.2721-9S МЗ России. 1999 г., с.4.7. Determination of the safety and effectiveness of dietary supplements. MUK 2.3.2721-9S of the Ministry of Health of Russia. 1999, p. 4.

8. А.С. СССР «Способ получения бруцеллезного антигена» №691056, A61K 39/10, 1974 г.8. A.S. USSR "Method for producing brucellosis antigen" No. 691056, A61K 39/10, 1974

9. А.С. СССР «Способ получения антигена» №467933, A61K 39/10, 1977 г.9. A.S. USSR "Method for producing antigen" No. 46933, A61K 39/10, 1977

Claims (1)

Способ иммунизации животных против бруцеллеза, отличающийся тем, что вакцинацию инактивированной противобруцеллезной вакциной или бруцеллезным антигеном проводят перорально, ежедневно в течение 5-10 дней, через 7-15 дней после вакцинации проводят однократную пероральную ревакцинацию антигеном или вакциной совместно с иммуностимулятором, вакцину или антиген вводят вместе с кормом или водой. A method of immunizing animals against brucellosis, characterized in that the vaccination with an inactivated brucellosis vaccine or brucellosis antigen is carried out orally, daily for 5-10 days, 7-15 days after vaccination, a single oral revaccination with an antigen or vaccine is carried out together with an immunostimulant, the vaccine or antigen is administered along with food or water.
RU2013146586/10A 2013-10-18 2013-10-18 Immunisation method of animals against brucellosis RU2554055C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2013146586/10A RU2554055C1 (en) 2013-10-18 2013-10-18 Immunisation method of animals against brucellosis

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2013146586/10A RU2554055C1 (en) 2013-10-18 2013-10-18 Immunisation method of animals against brucellosis

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2554055C1 true RU2554055C1 (en) 2015-06-20

Family

ID=53433903

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2013146586/10A RU2554055C1 (en) 2013-10-18 2013-10-18 Immunisation method of animals against brucellosis

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2554055C1 (en)

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2065749C1 (en) * 1993-06-08 1996-08-27 Александров Игорь Дмитриевич Method of prophylaxis of brucellosis in cattle
RU2238759C2 (en) * 2002-11-11 2004-10-27 Игнатов Петр Евгеньевич Method for preventing brucellosis
US20070224257A1 (en) * 2006-03-21 2007-09-27 The Secretary Of State For Environment, Foods & Rural Affairs Brucellosis dna vaccine

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2065749C1 (en) * 1993-06-08 1996-08-27 Александров Игорь Дмитриевич Method of prophylaxis of brucellosis in cattle
RU2238759C2 (en) * 2002-11-11 2004-10-27 Игнатов Петр Евгеньевич Method for preventing brucellosis
US20070224257A1 (en) * 2006-03-21 2007-09-27 The Secretary Of State For Environment, Foods & Rural Affairs Brucellosis dna vaccine

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Mina J. Izadjoo et al., Oral Vaccination with Brucella melitensis WR201 Protects Mice against Intranasal Challenge with Virulent Brucella melitensis 16M, INFECTION AND IMMUNITY, July 2004, Vol. 72, No. 7, p. 4031–4039 *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Tabynov et al. Novel vector vaccine against Brucella abortus based on influenza A viruses expressing Brucella L7/L12 or Omp16 proteins: evaluation of protection in pregnant heifers
Qureshi et al. Estimation of titers of antibody against Pasteurella multocida in cattle vaccinated with haemorrhagic septicemia alum precipitated vaccine
BR112015012711B1 (en) METHOD FOR PREPARING AN IMMUNOGENIC COMPOSITION FOR THE TREATMENT AND/OR PROPHYLAXIS OF MYCOPLASMA INFECTIONS
Fontana et al. Rabies VLPs adjuvanted with saponin-based liposomes induce enhanced immunogenicity mediated by neutralizing antibodies in cattle, dogs and cats
Bano et al. A review of rabies disease, its transmission and treatment
UA121097C2 (en) Immunogenic composition comprising mycoplasma antigens
Mazija et al. Immunogenicity and safety of Queensland V4 and Ulster 2C strains of Newcastle disease virus given to maternally immune, newly hatched chickens by nebulization
Denisov et al. The Russian experience in brucellosis veterinary public health
RU2554055C1 (en) Immunisation method of animals against brucellosis
Tabynov et al. Simultaneous subcutaneous and conjunctival administration of the influenza viral vector based Brucella abortus vaccine to pregnant heifers provides better protection against B. abortus 544 infection than the commercial B. abortus S19 vaccine
IQBAL et al. Immune response of rabbits to hemorrhagic septicemia vaccine formulations adjuvanted with montanide ISA-206, paraffin oil and alum
Wambura et al. Protective immune response of chickens to oral vaccination with thermostable live Fowlpox virus vaccine (strain TPV-1) coated on oiled rice
RU2570630C2 (en) Method of reducing seropositivity of live brucellosis vaccines for farm animals
Akter et al. Investigation on the efficacy of a killed Salmonella pullorum vaccine.
Cooper et al. Viral diseases of the ostrich (Struthio camelus var. domesticus)
RU2424823C1 (en) Method of specific prevention of rhinopneumonia and salmonellosis abortion in horses by associated vaccine under conditions of herd keeping
El-Din et al. Humeral and cellular immune response of Egyptian trivalent foot and mouth disease oil vaccine in sheep.
Bouchemla et al. Clinical results of an inactivated anti-brucella vaccine in combination with immunomodulators
RU2506093C1 (en) Method for specific prevention of herd equine rhinopneumonia, salmonella abortion and strangles with using associated vaccine
Evstifeev et al. Development of associated vaccine against Piv-3, Ibr, Bvd and chlamidiosis of cattle
Abousenna et al. Evaluation of the Humoral Immune Response and Milk Antibody Transfer in Cattle vaccinated with inactivated H5 Avian Influenza vaccine
Nimisha et al. Seroconversion studies of Brucella abortus SR51 vaccine in cattle
Syame et al. Protection of buffaloes against oedematous skin disease by recombinent-bacterin and toxoid-bacterin vaccines
Nalyvayko et al. Poultry Reovirus infection and development of its specific prevention in hens
El-Bagoury et al. Improving performance of Pneumo-4 vaccine using montanide oil