RU2550936C1 - Способ определения липоевой кислоты в биологически активных добавках методом катодной вольтамперометрии - Google Patents
Способ определения липоевой кислоты в биологически активных добавках методом катодной вольтамперометрии Download PDFInfo
- Publication number
- RU2550936C1 RU2550936C1 RU2014106381/15A RU2014106381A RU2550936C1 RU 2550936 C1 RU2550936 C1 RU 2550936C1 RU 2014106381/15 A RU2014106381/15 A RU 2014106381/15A RU 2014106381 A RU2014106381 A RU 2014106381A RU 2550936 C1 RU2550936 C1 RU 2550936C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- lipoic acid
- voltammetry
- cathode
- biologically active
- solution
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине и описывает способ определения липоевой кислоты в биологически активных добавках методом катодной вольтамперометрии, включающий перевод вещества из пробы в раствор и вольтамперометрическое определение, при этом проводят катодную вольтамперометрию на ртутно-пленочном электроде при потенциале -0.373 В относительно насыщенного хлорид-серебряного электрода на фоне боратного буферного раствора pH 9,18 при постоянно токовой форме развертки потенциала со скоростью 0,06 В/с с областью определяемых содержаний липоевой кислоты от 4.5·106 до 1.1·10-3 моль/л. Изобретение обеспечивает увеличение чувствительности и экспрессности способа определения липоевой кислоты в таблетированной форме БАД методом катодной вольтамперометрии. 1 табл., 1 пр., 3 ил.
Description
Изобретение относится к области количественного определения липоевой кислоты с выраженными антиоксидантными свойствами в биологически активных добавках к пище. Метод определения - катодная вольтамперометрия.
Липоевая кислота (α-липоевая кислота, 3-(4-карбоксибутил)-1,2-дитиолан, тиоктовая кислота или липоиковая кислота) является коферментом, участвующим в каталитических реакциях переноса атомов водорода и ацильных групп, играет одну из основных ролей в метаболизме человека и животных, является мощным антиоксидантом.
Антиоксидантные свойства липоевой кислоты обусловлены наличием двух тиоловых групп в молекуле (фиг.1), а также способностью связывать молекулы радикалов и свободное тканевое железо, предотвращая его участие в перекисном окислении липидов. Известно, что липоевая кислота не только обладает самостоятельным антиоксидантным потенциалом, но и обеспечивает мощную поддержку работы других антиоксидантных звеньев в организме. В этом отношении ее протективное действие тесно связано с гомеостазом в системе глутатиона и убихинона.
Известно, что существует комплекс антиоксидантов, с которыми может взаимодействовать липоевая кислота и поддерживать как липидный, так и водный антиоксидантный статус, что важно для терапии или профилактики различных заболеваний, при которых отмечается дисбаланс окислительно-восстановительного клеточного статуса, таких как сахарный диабет, нарушения функции печени и др.
На основе липоевой кислоты создан целый ряд синтетических антиоксидантов для защиты клеток от окислительного стресса в виде биологически активных добавок к пище (БАД).
Эффективным и быстрым методом определения липоевой кислоты в фармацевтических препаратах считается капиллярный электрофорез со спектрофотометрическим способом детектирования (Sitton A., Schmid M.G., Gubitz G., Hassan Y. Aboul-Enein. Determination of lipoic acid in dietary supplement preparations by capillary electrophoresis // J. of Biochem. And Biophysic. Methods. - 2004. - V.61, №2. - P.119-124). В данном методе липоевую кислоту определяют в УФ-области при 208 нм. Время анализа не превышало 9 минут. Данный метод используют для определения липоевой кислоты в области от 0.8 до 2.5 мг/мл. Метод разработан для определения липоевой кислоты в биологически активных добавках диетического питания. Недостатком метода можно считать низкую чувствительность определения липоевой кислоты в БАД.
Для обеспечения контроля качества БАД, содержащих липоевую кислоту, необходимо разработать методику количественного определения ее в БАД. В настоящее время из методик количественного определения липоевой кислоты в разных объектах широко используются электрохимические методы.
Наиболее близким к теме изобретения является вольтамперометрическое определение липоевой кислоты в модельных растворах на стеклоуглеродном электроде (Г.К. Зиятдинова, Г.К. Будников, В.И. Погорельцев // Электрохимическое определение липоевой кислоты. Журнал аналитической химии. 2004. Т.59. №3. С.324-326). При вольтамперометрическом определении α-липоевой кислоты авторы использовали стационарный стеклоуглеродный электрод на фоне 0.05 моль/л H2SO4, при этом четко выраженный сигнал наблюдался при потенциале 0.72 В. Диапазон определяемых вольтамперометрически содержаний липоевой кислоты составил от 1.15·1-5 до 1.73·10-4 моль/л на стеклоуглеродном электроде.
Использование условий в способе-прототипе не обеспечивает чувствительности определения липоевой кислоты в реальных объектах БАД, что связано с внесением погрешности в суммарный сигнал определения липоевой кислоты через влияние сопутствующих компонентов БАД.
Новая техническая задача - увеличение чувствительности и экспрессности способа определения липоевой кислоты в таблетированной форме БАД методом катодной вольтамперометрии. Поставленная задача достигается тем, что липоевую кислоту переводят из таблетированной формы в раствор и проводят вольтамперометрическое определение, используя катодную вольтамперометрию. Для разработки методики определения липоевой кислоты использован аналитический сигнал восстановления липоевой кислоты при потенциале -0.373 В в боратном буферном растворе pН 9.18 на ртутно-пленочном электроде (РПЭ). Циклическая вольтамперограмма липоевой кислоты на РПЭ представлена на фиг.2. Зависимость прироста предельного тока восстановления липоевой кислоты от увеличения ее концентрации в модельном растворе линейна. Эта область находится между концентрациями от 4.5·10-6 моль/л до 1.1·10-3 моль/л (фиг.3). Скорость развертки потенциала составила 0.06 В/с.
Предел обнаружения липоевой кислоты 9.3·10-6 моль/л достаточен для применения ее в оценке количественного содержания в БАД.
Значения пределов повторяемости, воспроизводимости и критического диапазона измерений концентрации липоевой кислоты при доверительной вероятности Р=0,95 представлены в табл.1.
Пример 1. Определение липоевой кислота в таблетках БАД «Липоевая кислота».
Одну таблетку растирают в ступке до получения порошка. Порошок взвешивают и переносят в колбу 50 мл, добавляют 10-15 мл боратного буферного раствора pH 9.18 и нагревают на водяной бане при температуре 45-50°C в течение 10 минут. После этого раствор фильтруют через бумажный фильтр, который промывают буфером два раза по 5 мл. Затем в кварцевый стаканчик вместимостью 20 мл вносят 10.0 мл раствора фонового электролита боратного буферного раствора pH 9.18, помещают в электрохимическую ячейку вольтамперометрического анализатора (ТА-2, г.Томск). Опускают в раствор электроды: индикаторный - ртутно-пленочный электрод, вспомогательный и электрод сравнения - насыщенные хлорид-серебряные. Регистрацию фоновой линии проводят в постоянно токовом режиме съемки при линейной скорости развертки потенциала 60 мВ/с после удаления кислорода из электрохимичекой ячейки инертным азотом в течение 15 минут, в интервале потенциалов от 0 до -0.8 В. Отсутствие пиков на вольтамперограмме и воспроизводимые кривые свидетельствовали о чистоте фона. После получения удовлетворительных кривых фона вносят аликвоту фильтрата липоевой кислоты объемом 0,1 мл. Перемешивают раствор 10 с газом азотом, успокаивают 20 с и снимают вольтамперограмму в тех же условиях. Катодный пик регистрируют при потенциале -0.373 В. Концентрацию липоевой кислоты оценивали по высоте катодного пика методом добавок аттестованных смесей липоевой кислоты по общепринятой методике.
Предложенный способ количественного определения липоевой кислоты отличается простотой, не требует больших трудозатрат, значительного количества реактивов и отличается высокой экспрессностью и чувствительностью.
Предложенный способ может быть использован для количественного определения липоевой кислоты в БАД и лекарственных формах.
| Таблица 1 | |||
| Диапазон измерений, моль/л | Предел повторяемости (относительное значение допускаемого расхождения между двумя результатами измерений, полученными в одной лаборатории в условиях повторяемости), r, % | Критический диапазон (относительное значение допускаемого расхождения между наибольшим и наименьшим из трех результатов измерений, полученных в одной лаборатории в условиях повторяемости), СR0,95 (3),% | Предел Воспроизводимости (относительное значение допускаемого расхождения между двумя результатами измерений, полученными в разных лабораториях), R, % |
| от 4.5·10-6 до 1.1·10-3 включ. | 16 | 19 | 25 |
Claims (1)
- Способ определения липоевой кислоты в биологически активных добавках методом катодной вольтамперометрии, включающий перевод вещества из пробы в раствор и вольтамперометрическое определение, отличающийся тем, что проводят катодную вольтамперометрию на ртутно-пленочном электроде при потенциале -0.373 В относительно насыщенного хлорид-серебряного электрода на фоне боратного буферного раствора pH 9,18 при постоянно токовой форме развертки потенциала со скоростью 0,06 В/с с областью определяемых содержаний липоевой кислоты от 4.5·106 до 1.1·10-3 моль/л.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2014106381/15A RU2550936C1 (ru) | 2014-02-20 | 2014-02-20 | Способ определения липоевой кислоты в биологически активных добавках методом катодной вольтамперометрии |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2014106381/15A RU2550936C1 (ru) | 2014-02-20 | 2014-02-20 | Способ определения липоевой кислоты в биологически активных добавках методом катодной вольтамперометрии |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2550936C1 true RU2550936C1 (ru) | 2015-05-20 |
Family
ID=53294200
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2014106381/15A RU2550936C1 (ru) | 2014-02-20 | 2014-02-20 | Способ определения липоевой кислоты в биологически активных добавках методом катодной вольтамперометрии |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2550936C1 (ru) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2441224C1 (ru) * | 2010-10-12 | 2012-01-27 | Российская Федерация, От Имени Которой Выступает Министерство Образования И Науки Российской Федерации | Вольтамперометрический способ количественного определения суммарного содержания флавоноидов в растительном сырье |
| RU2441225C1 (ru) * | 2010-10-12 | 2012-01-27 | Российская Федерация, От Имени Которой Выступает Министерство Образования И Науки Российской Федерации | Способ определения глутатиона в биологически активных добавках методом катодной вольтамперометрии |
-
2014
- 2014-02-20 RU RU2014106381/15A patent/RU2550936C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2441224C1 (ru) * | 2010-10-12 | 2012-01-27 | Российская Федерация, От Имени Которой Выступает Министерство Образования И Науки Российской Федерации | Вольтамперометрический способ количественного определения суммарного содержания флавоноидов в растительном сырье |
| RU2441225C1 (ru) * | 2010-10-12 | 2012-01-27 | Российская Федерация, От Имени Которой Выступает Министерство Образования И Науки Российской Федерации | Способ определения глутатиона в биологически активных добавках методом катодной вольтамперометрии |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| Г.К. Зиятдинова, Г.К. Будников, В.И. Погорельцев // Электрохимическое определение липоевой кислоты. Журнал аналитической химии. 2004. Т.59. N3. С.324-326. * |
| Е.В.Дорожко и др. Исследование антиоксидантных свойств биологически активных серусодержащих соединений вольтамперометрическим и спектрофотометрическими. Химико-фармацевтический журнал, том 44, N 10, 2010, с.53-56. Sitton A., Schmid M.G., Gubitz G., Hassan Y. Aboul-Enein. Determination of lipoic acid in dietary supplement preparations by capillary electrophoresis // J. of Biochem. And Biophysic. Methods. - 2004. - V.61, N2. - P.119-124. Э.И.Козлов и др. Определение липоевой кислоты и витаминов А, Е в препаратах с помощью ВЭЖХ. Химико-фармацевтический журнал, том 38, N 11, 2004, с.55-56 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Lee et al. | Electrochemical determination of free and total glutathione in human saliva samples | |
| Nezamzadeh-Ejhieh et al. | Voltammetric determination of cysteine using carbon paste electrode modified with Co (II)-Y zeolite | |
| Liu et al. | Novel molecularly imprinted polymer (MIP) multiple sensors for endogenous redox couples determination and their applications in lung cancer diagnosis | |
| CN110066655B (zh) | 银掺杂碳量子点及其制备方法和应用 | |
| Mülazımoğlu et al. | Quantitative determination of phenol in natural decayed leaves using procaine modified carbon paste electrode surface by cyclic voltammetry | |
| Teixeira et al. | Voltammetric determination of dipyrone using a N, N'-ethylenebis (salicylideneaminato) oxovanadium (IV) modified carbon-paste electrode | |
| Di Bernardo et al. | Intracellular anion fluorescence assay for sodium/iodide symporter substrates | |
| Ziyatdinova et al. | Determination of captopril in pharmaceutical forms by stripping voltammetry | |
| RU2441225C1 (ru) | Способ определения глутатиона в биологически активных добавках методом катодной вольтамперометрии | |
| Zhang et al. | Study on the decrease of renal D-amino acid oxidase activity in the rat after renal ischemia by chiral ligand exchange capillary electrophoresis | |
| O'Neill et al. | Anomalously high concentrations of brain extracellular uric acid detected with chronically implanted probes: implications for in vivo sampling techniques | |
| Petrova et al. | Investigation of coenzyme Q10 by voltammetry | |
| Xu et al. | Determination of isatin and monoamine neurotransmitters in rat brain with liquid chromatography using palladium hexacyanoferrate modified electrode | |
| RU2550936C1 (ru) | Способ определения липоевой кислоты в биологически активных добавках методом катодной вольтамперометрии | |
| Sazhina | Determination of antioxidant activity of various bioantioxidants and their mixtures by the amperometric method | |
| Stumpff et al. | Measuring Ca2+ binding to short chain fatty acids and gluconate with a Ca2+ electrode: Role of the reference electrode | |
| Barbosa et al. | A new indirect method based on square-wave voltammetry for ceftiofur determination in bovine milk using an alkaline degradation product | |
| Eskilsson et al. | Reductive stripping chronopotentiometry for selenium in biological materials with a flow system | |
| Benvidi et al. | Construction of a nanocomposite sensor by the modification of a carbon-paste electrode with reduced graphene oxide and a hydroquinone derivative: simultaneous determination of glutathione and penicillamine | |
| Tsai et al. | Assessment of Cell Viability Using the Chronoamperometric Method Based on Screen‐Printed Electrodes | |
| RU2224997C1 (ru) | Вольтамперометрический способ определения суммарной активности антиоксидантов | |
| Ziyatdinova et al. | Application of constant-current coulometry for estimation of plasma total antioxidant capacity and its relationship with transition metal contents | |
| Blažević et al. | Electrochemical detection of vitamin C in real samples | |
| RU2441224C1 (ru) | Вольтамперометрический способ количественного определения суммарного содержания флавоноидов в растительном сырье | |
| Li et al. | Reversible potentiometric ascorbic acid solid-state membrane sensor based on 4, 4′, 4 ″, 4′″-tetra-tert-butylphthalocyanine cobalt (II) |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20160221 |
|
| NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20170313 |
|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20180221 |