RU2529814C1 - Method for authentication and determination of quantitative content of benzethonium chloride in medicinal drugs - Google Patents
Method for authentication and determination of quantitative content of benzethonium chloride in medicinal drugs Download PDFInfo
- Publication number
- RU2529814C1 RU2529814C1 RU2013122991/15A RU2013122991A RU2529814C1 RU 2529814 C1 RU2529814 C1 RU 2529814C1 RU 2013122991/15 A RU2013122991/15 A RU 2013122991/15A RU 2013122991 A RU2013122991 A RU 2013122991A RU 2529814 C1 RU2529814 C1 RU 2529814C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- benzethonium chloride
- drug
- peak
- benzethonium
- standard sample
- Prior art date
Links
Abstract
Description
Изобретение относится к области контроля качества лекарственных препаратов, в частности к способам определения подлинности и количественного определения бензэтония хлорида в лекарственных препаратах.The invention relates to the field of quality control of drugs, in particular to methods for determining the authenticity and quantification of benzethonium chloride in drugs.
Известен способ определения бензэтония хлорида [1], включающий определение подготовленных проб стандартных образцов антимикробных консервантов крезола, хлоркрезола и бензэтония хлорида методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с УФ-детектированием на колонке [С18 (250×4.6 мм, 5 мкм)] и подвижной фазой A, содержащей 0,01 M фосфат калия в воде (одноосновный) (рН 3,3), и подвижной фазой B, содержащей метанол. Способ обладает высокой точностью определения крезола, хлоркрезола и бензэтония хлорида, легко воспроизводится. Разделение компонентов возможно путем градиентного элюирования подвижными фазами A и B при температуре разделения 40°C.A known method for the determination of benzethonium chloride [1], including the determination of prepared samples of standard samples of antimicrobial preservatives of cresol, chlorocresol and benzethonium chloride by high performance liquid chromatography (HPLC) with UV detection on a column [C18 (250 × 4.6 mm, 5 μm)] and mobile phase A containing 0.01 M potassium phosphate in water (monobasic) (pH 3.3); and mobile phase B containing methanol. The method has a high accuracy in the determination of cresol, chlorocresol and benzethonium chloride, is easily reproduced. Separation of components is possible by gradient elution with mobile phases A and B at a separation temperature of 40 ° C.
К недостаткам этого известного способа следует отнести:The disadvantages of this known method include:
использование градиентного элюирования;the use of gradient elution;
необходимость термостатирования колонки и подогрева подвижной фазы;the need for column temperature control and heating of the mobile phase;
применимость способа для анализа крезола, хлоркрезола и бензэтония хлорида только в стандартных образцах веществ.the applicability of the method for the analysis of cresol, chlorocresol and benzethonium chloride only in standard samples of substances.
Наиболее близким к заявленному способу является способ определения бензэтония хлорида в составе сибиреязвенной вакцины [2]. При анализе препарата вакцины необходима предварительная пробоподготовка, заключающаяся в удалении адъюванта Алгидрогеля путем подкисления исследуемого препарата вакцины. Хроматографию проводили изократичным обратно-фазовым разделением с подвижной фазой метанол/262 мМ ацетат аммония (80/20 об./об.) на колонке [С18 (250×4.6 мм, 5 мкм)] с диодной матрицей детектора. Предел обнаружения бензэтония хлорида составляет 0,5 частей на миллион (ppm), и предел количественного определения - 1,5 ppm с динамическим диапазоном в 100 ppm [2].Closest to the claimed method is a method for determining benzethonium chloride in the composition of anthrax vaccine [2]. When analyzing a vaccine preparation, preliminary sample preparation is required, which consists in removing the Alhydrogel adjuvant by acidifying the test vaccine preparation. Chromatography was performed by isocratic reverse phase separation with a mobile phase of methanol / 262 mM ammonium acetate (80/20 v / v) on a column [C18 (250 × 4.6 mm, 5 μm)] with a diode detector matrix. The detection limit of benzethonium chloride is 0.5 ppm (ppm), and the quantification limit is 1.5 ppm with a dynamic range of 100 ppm [2].
К недостаткам данного способа следует отнести:The disadvantages of this method include:
необходимость предварительной пробоподготовки;the need for preliminary sample preparation;
длительное время разделения компонентов смеси;long time separation of the components of the mixture;
использование хроматографической колонки длиной 250 мм.use of a chromatographic column 250 mm long.
В аналоге и заявляемом изобретении совпадает основной принцип определения бензэтония хлорида в лекарственных препаратах - применение для этой цели ВЭЖХ.In the analogue and the claimed invention, the basic principle of determining benzethonium chloride in drugs coincides - the use of HPLC for this purpose.
Задачей изобретения является сокращение времени анализа бензэтония хлорида в лекарственных препаратах.The objective of the invention is to reduce the analysis time of benzethonium chloride in drugs.
Поставленная задача решается благодаря тому, что в способе анализа бензэтония хлорида в лекарственных препаратах, включающем определение бензэтония хлорида методом ВЭЖХ, предусмотрены следующие отличия:The problem is solved due to the fact that in the method for the analysis of benzethonium chloride in drugs, including the determination of benzetonium chloride by HPLC, the following differences are provided:
хроматографическая колонка с немодифицированным силикагелем может быть заменена на колонки с сорбентами С8, фенильными или нитрильными сорбентами;a chromatographic column with unmodified silica gel can be replaced by columns with C8 sorbents, phenyl or nitrile sorbents;
подвижные фазы представляют собой смеси ацетонитрила и воды, либо спирта метилового и воды с обязательным присутствием солей тетраалкиламмониевых оснований (тетрабутиламмония, тетрагексиламмония, тетрагептиламмония).the mobile phases are mixtures of acetonitrile and water, or methyl alcohol and water with the obligatory presence of salts of tetraalkylammonium bases (tetrabutylammonium, tetrahexylammonium, tetraheptylammonium).
Изменения в типе хроматографических колонок и составе подвижных фаз позволяют отказаться от предварительной обработки проб перед этапом хроматографирования, либо с целью повышения эффективности колонки образцы при необходимости только разводят подвижными фазами в 2-3 раза.Changes in the type of chromatographic columns and the composition of the mobile phases make it possible to abandon the preliminary processing of samples before the chromatographic step, or, in order to increase the efficiency of the column, the samples can only be diluted with mobile phases 2-3 times if necessary.
Кроме того, предложенный способ отличается тем, что с целью сокращения времени анализа уменьшена длина хроматографических колонок с 250 до 150-125 мм.In addition, the proposed method is characterized in that in order to reduce the analysis time, the length of the chromatographic columns is reduced from 250 to 150-125 mm.
Сущность предложенного способа заключается в следующем:The essence of the proposed method is as follows:
1. Жидкие лекарственные препараты, содержащие в своем составе бензэтоний хлорид (глазные капли, растворы для внутривенного и внутримышечного введения), вводят в хроматограф непосредственно без разведения либо предварительно разводят подвижными фазами в 2-3 раза. Разведение анализируемого образца производят с целью повышения эффективности разделения на хроматографических колонках, при этом объем вводимой пробы целесообразно увеличить с 20 до 50 мкл. Без разведения анализируемого образца для некоторых моделей детекторов жидкостных хроматографов может наблюдаться неприемлемое уменьшение чувствительности.1. Liquid medicines containing benzethonium chloride (eye drops, solutions for intravenous and intramuscular administration) are introduced into the chromatograph directly without dilution or previously diluted with mobile phases 2-3 times. Dilution of the analyzed sample is carried out in order to increase the separation efficiency on chromatographic columns, and it is advisable to increase the volume of the introduced sample from 20 to 50 μl. Without dilution of the sample to be analyzed, an unacceptable decrease in sensitivity may be observed for some models of liquid chromatograph detectors.
2. Подвижные фазы представляют собой смеси спирта метилового и воды в соотношении (75:25) с концентрацией тетрабутиламмония в подвижной фазе 1,25 мМ, либо тетрагексиламмония или тетрагептиламмония с концентрацией в подвижной фазе 0,75 мМ.2. The mobile phases are mixtures of methyl alcohol and water in the ratio (75:25) with a concentration of tetrabutylammonium in the mobile phase of 1.25 mM, or tetrahexylammonium or tetraheptylammonium with a concentration in the mobile phase of 0.75 mM.
В качестве подвижных фаз также могут быть использованы смеси ацетонитрила и воды в соотношении от (65:35) до (50:50) с концентрацией тетрабутиламмония в подвижной фазе 1,3-1,75 мМ, либо тетрагексиламмония или тетрагептиламмония с концетрацией 0,78-1,05 мМ.Mixtures of acetonitrile and water in a ratio of (65:35) to (50:50) with a tetrabutylammonium concentration in the mobile phase of 1.3-1.75 mM, or tetrahexylammonium or tetraheptylammonium with a concentration of 0.78 can also be used as mobile phases -1.05 mmol.
Тетраалкиламины препятствуют ассоциации молекул бензэтония в надмолекулярные структуры в водных растворах и следствием этого является возможность непосредственного анализа лекарственных препаратов без предварительной подготовки анализируемой пробы.Tetraalkylamines interfere with the association of benzethonium molecules into supramolecular structures in aqueous solutions, and this leads to the possibility of direct analysis of drugs without preliminary preparation of the analyzed sample.
Тетраалкиламины для приготовления подвижных фаз могут применяют в форме гидросульфата, гидрофосфатов, бромидов, а также в форме солей с иными анионами. С целью повышения эффективности хроматогрфической колонки, подвижная фаза также может содержать эквимолярное количество гептансульфоната натрия.Tetraalkylamines for the preparation of mobile phases can be used in the form of hydrosulfate, hydrophosphates, bromides, as well as in the form of salts with other anions. In order to increase the efficiency of the chromatographic column, the mobile phase may also contain an equimolar amount of sodium heptanesulfonate.
При применении тетраалкиламинов в форме гидросульфатов и гидрофосфатов подвижная фаза может также содержать эквимолярное количество двузамещенного фосфата калия или натрия для нейтрализации избыточной кислотности солей тетраалкиламмониевых оснований. При этом тетраалкиламины за счет конкурентной сорбции на сорбент способствуют повышению точности определения бензэтония при проведении анализа.When using tetraalkylamines in the form of hydrosulfates and hydrophosphates, the mobile phase may also contain an equimolar amount of disubstituted potassium or sodium phosphate to neutralize the excess acidity of the salts of tetraalkylammonium bases. In this case, tetraalkylamines due to competitive sorption on the sorbent contribute to increasing the accuracy of determination of benzethonium during the analysis.
3. Уменьшение времени хроматографирования беннзэтония хлорида достигается за счет использования колонки с сорбентами С8, фенильными или нитрильными сорбентами. При одинаковых условиях хроматогафирования анализ на колонках с этими сорбентами занимает меньше времени, чем на наиболее часто применяющихся в обращено-фазовой хроматографии колонках с сорбентами С18. Также для уменьшения времени анализа длина колонок была сокращена. При прочих равных условиях уменьшение длины колонок с 250 до 150 мм сокращает время анализа в 1,66 раза.3. Reducing the chromatographic time of benzenetonium chloride is achieved by using a column with sorbents C8, phenyl or nitrile sorbents. Under the same chromatographic conditions, analysis on columns with these sorbents takes less time than on columns most often used in reverse phase chromatography with sorbents C18. Also, to reduce analysis time, the length of the columns was reduced. All things being equal, reducing the length of the columns from 250 to 150 mm reduces the analysis time by 1.66 times.
4. Подлинность бензэтония хлорида в препарате подтверждается на основании совпадения времен удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора и пика бензэтония хлорида на хроматограмме раствора стандартного образца.4. The authenticity of benzethonium chloride in the preparation is confirmed on the basis of the coincidence of the retention times of the main peak in the chromatogram of the test solution and the peak of benzethonium chloride in the chromatogram of the solution of the standard sample.
5. Количественное содержание бензэтония хлорида в препарате рассчитывается на основании сравнения площади пика бензэтония на хроматограмме стандартного раствора с известной концентрацией и площади пика бензэтония на хроматограмме испытуемого образца.5. The quantitative content of benzethonium chloride in the preparation is calculated based on a comparison of the peak area of benzethonium in the chromatogram of a standard solution with a known concentration and the peak area of benzethonium in the chromatogram of the test sample.
Между совокупностью существенных признаков заявляемого объекта и достигаемым техническим результатом существует причинно-следственная связь, а именно применение подвижных фаз с солями тетраалкиламмониевых оснований (тетрабутиламмония, тетрагексиламмония, тетрагептиламмония) и использование хроматографических колонок с иными типами сорбентов сокращает время проведения анализа за счет исключения стадии подготовки анализируемой пробы. В этой связи следует отметить, что в способе ближайшего аналога (прототипа) процессу предварительной подготовки пробы подвергают как образцы лекарственных препаратов, так и раствор стандартного образца бензэтония хлорида.There is a causal relationship between the set of essential features of the claimed object and the achieved technical result, namely the use of mobile phases with salts of tetraalkylammonium bases (tetrabutylammonium, tetrahexylammonium, tetraheptylammonium) and the use of chromatographic columns with other types of sorbents reduces the analysis time by eliminating the preparation stage of the analyzed samples. In this regard, it should be noted that in the method of the closest analogue (prototype), both drug samples and a solution of a standard sample of benzethonium chloride are subjected to the preliminary sample preparation process.
Кроме того, повышается точность определения бензэтония хлорида в лекарственных препаратах за счет исключения возможности неконтролируемых потерь анализируемых образцов в процессе подготовки проб. По заявляемому способу подготовка пробы либо исключается совсем, либо ограничивается только разведением образцов подвижными фазами.In addition, the accuracy of determination of benzethonium chloride in drugs is increased by eliminating the possibility of uncontrolled losses of the analyzed samples during sample preparation. According to the claimed method, sample preparation is either completely excluded, or limited only to the dilution of samples by mobile phases.
Изобретение позволяет:The invention allows:
1. Сократить общее время проведения анализа лекарственных препаратов на наличие бензэтония хлорида.1. Reduce the total time for drug analysis for benzethonium chloride.
2. Повысить точность определения бензэтония хлорида в лекарственных препаратах.2. Improve the accuracy of determination of benzethonium chloride in drugs.
3. Исключить использование дополнительного лабораторного оборудования (роторного испарителя, либо иного устройства для удаления хлороформа из анализируемых образцов).3. To exclude the use of additional laboratory equipment (rotary evaporator, or other device for removing chloroform from the analyzed samples).
4. Сократить общие затраты труда как при проведении анализа, так и при проведении вспомогательных операций (мытье делительной воронки и иной лабораторной посуды и т.п.).4. To reduce the total labor costs both during analysis and during auxiliary operations (washing a separatory funnel and other laboratory glassware, etc.).
Возможность осуществления заявляемого изобретения показана следующими примерами.The possibility of carrying out the claimed invention is shown by the following examples.
Содержание бензэтония хлорида в исследованных образцах лекарственных препаратах, в соответствии с инструкцией по применению препарата, составляло 0,1 мг/мл.The content of benzethonium chloride in the studied samples of drugs, in accordance with the instructions for use of the drug, was 0.1 mg / ml.
Пример 1.Example 1
Анализ препарата «Проксокарпин», капли глазные.Analysis of the drug "Proxocarpine", eye drops.
Препарат и раствор стандартного образца бензэтония хлорид (0,1 мг/мл) предварительно разводят подвижной фазой в соотношении (1:1).The drug and a solution of a standard sample of benzethonium chloride (0.1 mg / ml) are pre-diluted with the mobile phase in the ratio (1: 1).
Последовательно по 20 мкл препарата и раствора стандартного образца бензэтония хлорида вводят в жидкостной хроматограф с установленной колонкой Диасфер Фенил 150×4,6 мм (5 мкм).In succession, 20 μl of the preparation and a solution of a standard sample of benzethonium chloride are introduced into a liquid chromatograph with a Diasfer Phenyl column 150 × 4.6 mm (5 μm) installed.
Условия хроматогафии.Chromatography conditions.
Подвижная фаза: смесь ацетонитрила и 5 мМ тетрабутиламмоний гидрофосфата в воде (65:35)Mobile phase: a mixture of acetonitrile and 5 mm tetrabutylammonium hydrogen phosphate in water (65:35)
Скорость потока: 1,0 мл/минFlow rate: 1.0 ml / min
Длина волны детектирования: 230 нмDetection Wavelength: 230 nm
Температура колонки: комнатная (от 15 до 25°C)Column temperature: indoor (15 to 25 ° C)
Результаты хроматографирования.Chromatography results.
Время удерживания бензэтония - 2,69 минBenzethonium retention time - 2.69 min
Время удерживания стандартного образца бензэтония хлорида - 2,69 The retention time of a standard sample of benzethonium chloride is 2.69
Эффективность хроматографической колонки по пику бензэтония хлорида - 7730 теоретических тарелокThe efficiency of the chromatographic column at the peak of benzethonium chloride - 7730 theoretical plates
Коэффициент асимметрии пика бензэтония хлорида - 0,93The asymmetry coefficient of the peak of benzethonium chloride is 0.93
Коэффициент асимметрии пика стандартного образца бензэтония хлорида - 0,93.The peak asymmetry coefficient of the standard sample of benzethonium chloride is 0.93.
Содержание бензэтония хлорида, определенное в опыте, составило 0,097 мг/мл.The benzethonium chloride content determined in the experiment was 0.097 mg / ml.
Данный пример показывает возможность определения бензэтония хлорида в лекарственном препарате с достаточной точностью.This example shows the ability to determine benzethonium chloride in a drug with sufficient accuracy.
Пример 2.Example 2
Анализ препарата «Проксокарпин», капли глазныеAnalysis of the drug "Proxocarpine", eye drops
Препарат и раствор стандартного образца бензэтония хлорид (0,1 мг/мл) подвижной фазой не разводили.The drug and a solution of a standard sample of benzethonium chloride (0.1 mg / ml) were not diluted with the mobile phase.
Последовательно по 20 мкл препарата и раствора стандартного образца бензэтония хлорида вводят в жидкостной хроматограф с установленной колонкой Zorbax SB С8 150×4,6 мм (3,5 мкм).In succession, 20 μl of the preparation and a solution of a standard sample of benzethonium chloride are introduced into a liquid chromatograph with a Zorbax SB C8 column installed 150 × 4.6 mm (3.5 μm).
Условия хроматографии.Chromatography conditions.
Подвижная фаза: смесь метанола и 5 мМ тетрабутиламмоний гидроген фосфата в воде (75:35)Mobile phase: a mixture of methanol and 5 mm tetrabutylammonium hydrogen phosphate in water (75:35)
Скорость потока: 1,0 мл/минFlow rate: 1.0 ml / min
Длина волны детектирования: 230 нмDetection Wavelength: 230 nm
Температура колонки: комнатная (от 15 до 25°C).Column temperature: room temperature (15 to 25 ° C).
Результаты хроматографирования. Chromatography results.
Время удерживания бензэтония хлорида - 4,53 минRetention time of benzethonium chloride - 4.53 min
Время удерживания стандартного образца бензэтония хлорида - 4,53 мин Эффективность хроматографической колонки по пику бензэтония хлорида - 3720 теоретических тарелокThe retention time of a standard sample of benzethonium chloride is 4.53 min. The efficiency of the chromatographic column at the peak of benzethonium chloride is 3720 theoretical plates.
Коэффициент асимметрии пика бензэтония хлорида - 1,81The asymmetry coefficient of the peak of benzethonium chloride is 1.81
Коэффициент асимметрии пика стандартного образца бензэтония хлорида - 1,80.The peak asymmetry coefficient of the standard sample of benzethonium chloride is 1.80.
Содержание бензэтония хлорида, определенное в опыте, составило 0,092 мг/мл.The benzethonium chloride content determined in the experiment was 0.092 mg / ml.
Данный пример показывает возможность определения бензэтония хлорида в лекарственном препарате с достаточной точностью.This example shows the ability to determine benzethonium chloride in a drug with sufficient accuracy.
Пример 3.Example 3
Анализ препарата «Проксофелин», капли глазные.Analysis of the drug "Proxofelin", eye drops.
Препарат и раствор стандартного образца бензэтония хлорид (0,1 мг/мл) предварительно разводят подвижной фазой в соотношении (1:1).The drug and a solution of a standard sample of benzethonium chloride (0.1 mg / ml) are pre-diluted with the mobile phase in the ratio (1: 1).
Последовательно по 20 мкл препарата и раствора стандартного образца бензэтония хлорида вводят в жидкостной хроматограф с установленной колонкой Luna С8(2) 150×4,6 мм (5 мкм).In succession, 20 μl of the preparation and a solution of a standard sample of benzethonium chloride are introduced into a liquid chromatograph with a Luna C8 (2) column mounted 150 × 4.6 mm (5 μm).
Условия хроматографии.Chromatography conditions.
Подвижная фаза: смесь ацетонитрила и 2,5 мМ тетрабутиламмоний гидрофосфата, 2,5 мМ гептансульфоната натрия в воде (65:35)Mobile phase: a mixture of acetonitrile and 2.5 mm tetrabutylammonium hydrogen phosphate, 2.5 mm sodium heptanesulfonate in water (65:35)
Скорость потока: 1,0 мл/минFlow rate: 1.0 ml / min
Длина волны детектирования: 230 нмDetection Wavelength: 230 nm
Температура колонки: комнатная (от 15 до 25°C).Column temperature: room temperature (15 to 25 ° C).
Результаты хроматографирования.Chromatography results.
Время удерживания бензэтония - 2,46 минBenzethonium retention time - 2.46 min
Эффективность хроматографической колонки по пику бензэтония хлорида - 7540 теоретических тарелокThe efficiency of the chromatographic column at the peak of benzethonium chloride - 7540 theoretical plates
Коэффициент асимметрии пика бензэтония хлорида - 1,20Benzethonium chloride peak asymmetry coefficient - 1.20
Коэффициент асимметрии пика стандартного образца бензэтония хлорида - 1,20.The peak asymmetry coefficient of the standard sample of benzethonium chloride is 1.20.
Содержание бензэтония хлорида, определенное в опыте, составило 0,096 мг/мл.The benzethonium chloride content determined in the experiment was 0.096 mg / ml.
Данный пример показывает возможность определения бензэтония хлорида в лекарственном препарате с достаточной точностью.This example shows the ability to determine benzethonium chloride in a drug with sufficient accuracy.
Пример 4.Example 4
Анализ препарата «Проксофелин», капли глазные.Analysis of the drug "Proxofelin", eye drops.
Препарат и раствор стандартного образца бензэтония хлорида (0,1 мг/мл) предварительно разводят подвижной фазой в соотношении (1:1).The drug and a solution of a standard sample of benzethonium chloride (0.1 mg / ml) are pre-diluted with the mobile phase in the ratio (1: 1).
Последовательно по 20 мкл препарата и раствора стандартного образца бензэтония хлорида вводят в жидкостной хроматограф с установленной колонкой Luna С8(2) 150×4,6 мм (5 мкм).In succession, 20 μl of the preparation and a solution of a standard sample of benzethonium chloride are introduced into a liquid chromatograph with a Luna C8 (2) column mounted 150 × 4.6 mm (5 μm).
Условия хроматографии.Chromatography conditions.
Подвижная фаза: смесь ацетонитрила и 3,7 мМ тетрабутиламмоний гидрофосфата в воде (50:50)Mobile phase: a mixture of acetonitrile and 3.7 mm tetrabutylammonium hydrogen phosphate in water (50:50)
Скорость потока: 1,0 мл/минFlow rate: 1.0 ml / min
Длина волны детектирования: 230 нмDetection Wavelength: 230 nm
Температура колонки: комнатная (от 15 до 25°C).Column temperature: room temperature (15 to 25 ° C).
Результаты хроматографирования.Chromatography results.
Время удерживания бензэтония -2,46 минBenzethonium retention time -2.46 min
Эффективность хроматографической колонки по пику бензэтония хлорида - 7890 теоретических тарелокThe efficiency of the chromatographic column at the peak of benzethonium chloride - 7890 theoretical plates
Коэффициент асимметрии пика бензэтония хлорида - 1,12The asymmetry coefficient of the peak of benzethonium chloride is 1.12
Коэффициент асимметрии пика стандартного образца бензэтония хлорида - 1,12.The peak asymmetry coefficient of the standard sample of benzethonium chloride is 1.12.
Содержание бензэтония хлорида, определенное в опыте, составило 0,098 мг/мл.The content of benzethonium chloride determined in the experiment was 0.098 mg / ml.
Данный пример показывает возможность определения бензэтония хлорида в лекарственном препарате с достаточной точностью.This example shows the ability to determine benzethonium chloride in a drug with sufficient accuracy.
Пример 5.Example 5
Анализ препарата «Проксокарпин», капли глазные.Analysis of the drug "Proxocarpine", eye drops.
Препарат и раствор стандартного образца бензэтония хлорида (0,1 мг/мл) предварительно разводят подвижной фазой в соотношении (1:1).The drug and a solution of a standard sample of benzethonium chloride (0.1 mg / ml) are pre-diluted with the mobile phase in the ratio (1: 1).
Последовательно по 20 мкл препарата и раствора стандартного образца бензэтония хлорида вводят в жидкостной хроматограф с установленной колонкой Zorbax СВ CN 150×4,6 мм, 5 мкм.In succession, 20 μl of the preparation and a solution of a standard sample of benzethonium chloride are introduced into a liquid chromatograph with a Zorbax CB CN column of 150 × 4.6 mm, 5 μm installed.
Условия хроматографии.Chromatography conditions.
Подвижная фаза: смесь ацетонитрила и 5 мМ тетрабутиламмоний гидрофосфата в воде, 5 мМ двухзамещенного фосфата калия (65:35)Mobile phase: a mixture of acetonitrile and 5 mM tetrabutylammonium hydrogen phosphate in water, 5 mM disubstituted potassium phosphate (65:35)
Скорость потока: 1,0 мл/минFlow rate: 1.0 ml / min
Длина волны детектирования: 230 нмDetection Wavelength: 230 nm
Температура колонки: комнатная (от 15 до 25°C).Column temperature: room temperature (15 to 25 ° C).
Результаты хроматографирования.Chromatography results.
Время удерживания бензэтония - 7,35 минBenzetonium retention time - 7.35 min
Эффективность хроматографической колонки по пику бензэтония хлорида - 8290 теоретических тарелокThe efficiency of the chromatographic column at the peak of benzethonium chloride - 8290 theoretical plates
Коэффициент асимметрии пика бензэтония хлорида - 1,20Benzethonium chloride peak asymmetry coefficient - 1.20
Коэффициент асимметрии пика стандартного образца бензэтония хлорида - 1,20.The peak asymmetry coefficient of the standard sample of benzethonium chloride is 1.20.
Содержание бензэтония хлорида, определенное в опыте, составило 0,099 мг/мл.The content of benzethonium chloride, determined in the experiment, was 0.099 mg / ml.
Данный пример показывает возможность определения бензэтония хлорида в лекарственном препарате с достаточной точностью.This example shows the ability to determine benzethonium chloride in a drug with sufficient accuracy.
Пример 6.Example 6
Анализ препарата «Проксокарпин», капли глазные.Analysis of the drug "Proxocarpine", eye drops.
Препарат и раствор стандартного образца бензэтония хлорида (0,1 мг/мл) предварительно разводят подвижной фазой в соотношении (1:1).The drug and a solution of a standard sample of benzethonium chloride (0.1 mg / ml) are pre-diluted with the mobile phase in the ratio (1: 1).
Последовательно по 20 мкл препарата и раствора стандартного образца бензэтония хлорида вводят в жидкостной хроматограф с установленной колонкой Zorbax СВ CN 1 50×4,6 мм, 5 мкм.In succession, 20 μl of the preparation and a solution of a standard sample of benzethonium chloride are introduced into a liquid chromatograph with a Zorbax CB CN column of 1 50 × 4.6 mm, 5 μm installed.
Условия хроматографии.Chromatography conditions.
Подвижная фаза: смесь ацетонитрила и 3 мМ тетрагексилламмоний гидрофосфата в воде, 3 мМ двухзамещенного фосфата калия (65:35)Mobile phase: mixture of acetonitrile and 3 mM tetrahexyl ammonium hydrogen phosphate in water, 3 mM disubstituted potassium phosphate (65:35)
Скорость потока: 1,0 мл/минFlow rate: 1.0 ml / min
Длина волны детектирования: 230 нмDetection Wavelength: 230 nm
Температура колонки: комнатная (от 15 до 25°C).Column temperature: room temperature (15 to 25 ° C).
Результаты хроматографирования.Chromatography results.
Время удерживания бензэтония - 6,10 минBenzethonium retention time - 6.10 min
Эффективность хроматографической колонки по пику бензэтония хлорида - 7180 теоретических тарелокThe efficiency of the chromatographic column at the peak of benzethonium chloride - 7180 theoretical plates
Коэффициент асимметрии пика бензэтония хлорида - 1,14The asymmetry coefficient of the peak of benzethonium chloride is 1.14
Коэффициент асимметрии пика стандартного образца бензэтония хлорида - 1,13.The peak asymmetry coefficient of the standard sample of benzethonium chloride is 1.13.
Содержание бензэтония хлорида, определенное в опыте, составило 0,096 мг/мл.The benzethonium chloride content determined in the experiment was 0.096 mg / ml.
Данный пример показывает возможность определения бензэтония хлорида в лекарственном препарате с достаточной точностью.This example shows the ability to determine benzethonium chloride in a drug with sufficient accuracy.
Аналогичным образом, с учетом раскрытия изобретения в описании специалистом в данной области могут быть получены, выполнены другие признаки изобретения, которые охватываются формулой изобретения, приводимой ниже.Similarly, taking into account the disclosure of the invention in the description by a specialist in this field can be obtained, other features of the invention are fulfilled, which are covered by the claims below.
Пример 7Example 7
Анализ препарата «Проксофелин», капли глазные.Analysis of the drug "Proxofelin", eye drops.
Препарат и раствор стандартного образца бензэтония хлорид (0,1 мг/мл) предварительно разводят элюентом в соотношении (1:1).The drug and a solution of a standard sample of benzethonium chloride (0.1 mg / ml) are pre-diluted with eluent in the ratio (1: 1).
Последовательно по 20 мкл препарата и раствора стандартного образца бензэтония хлорида вводят в жидкостной хроматограф с установленной колонкой Luna C8 125×4,6 мм (5 мкм).In succession, 20 μl of the preparation and a solution of a standard sample of benzethonium chloride are introduced into a liquid chromatograph with an installed Luna C8 column 125 × 4.6 mm (5 μm).
Условия хроматографии.Chromatography conditions.
Элюент: смесь ацетонитрила, 2,5 мМ тетрабутиламмония гидрофосфата и 5 мМ K2HPO4 в воде (65:35).Eluent: a mixture of acetonitrile, 2.5 mm tetrabutylammonium hydrogen phosphate and 5 mm K 2 HPO 4 in water (65:35).
Скорость потока: 1,0 мл/мин.Flow rate: 1.0 ml / min.
Длина волны детектирования: 230 нм.Detection wavelength: 230 nm.
Температура колонки: комнатная (от 20 до 25°C).Column temperature: room temperature (20 to 25 ° C).
Результаты хроматографирования.Chromatography results.
Время удерживания бензэтония хлорида - 2,17 мин.The retention time of benzethonium chloride is 2.17 minutes.
Эффективность хроматографической колонки по пику бензэтония хлорида - 6280 теоретических тарелок.The efficiency of the chromatographic column at the peak of benzethonium chloride is 6,280 theoretical plates.
Коэффициент асимметрии пика бензэтония хлорида - 1,25.The asymmetry coefficient of the peak of benzethonium chloride is 1.25.
Коэффициент асимметрии пика стандартного образца бензэтония хлорида - 1,25.The peak asymmetry coefficient of a standard sample of benzethonium chloride is 1.25.
Содержание бензэтония хлорида, определенное в опыте, составило 0,096 мг/мл.The benzethonium chloride content determined in the experiment was 0.096 mg / ml.
Данный пример показывает возможность определения бензэтония хлорида в лекарственном препарате с достаточной точностью.This example shows the ability to determine benzethonium chloride in a drug with sufficient accuracy.
Пример 8 (дополнительный)Example 8 (optional)
Анализ препарата «Проксокарпин», капли глазные.Analysis of the drug "Proxocarpine", eye drops.
Препарат и раствор стандартного образца бензэтония хлорид (0,1 мг/мл) предварительно разводят элюентом в соотношении (1:1).The drug and a solution of a standard sample of benzethonium chloride (0.1 mg / ml) are pre-diluted with eluent in the ratio (1: 1).
Последовательно по 20 мкл препарата и раствора стандартного образца бензэтония хлорида вводят в жидкостной хроматограф с установленной колонкой Диасфер Фенил 125×4,0 мм (5 мкм).In succession, 20 μl of the preparation and a solution of a standard sample of benzethonium chloride are introduced into a liquid chromatograph with a installed Diasfer Phenyl column 125 × 4.0 mm (5 μm).
Условия хроматогафии.Chromatography conditions.
Элюент: смесь ацетонитрила, 2,5 мМ тетрабутиламмония гидрофосфата и 5 мМ K2HPO4 в воде (65:35).Eluent: a mixture of acetonitrile, 2.5 mm tetrabutylammonium hydrogen phosphate and 5 mm K 2 HPO 4 in water (65:35).
Скорость потока: 1,0 мл/мин.Flow rate: 1.0 ml / min.
Длина волны детектирования: 230 нм.Detection wavelength: 230 nm.
Температура колонки: комнатная (от 20 до 25°C).Column temperature: room temperature (20 to 25 ° C).
Результаты хроматографирования.Chromatography results.
Время удерживания бензэтония - 2,99 мин.The retention time of benzethonium is 2.99 minutes.
Время удерживания стандартного образца бензэтония хлорида - 2,97.The retention time of a standard sample of benzethonium chloride is 2.97.
Эффективность хроматографической колонки по пику бензэтония хлорида - 7730 теоретических тарелокThe efficiency of the chromatographic column at the peak of benzethonium chloride - 7730 theoretical plates
Коэффициент асимметрии пика бензэтония хлорида - 0,95.The asymmetry coefficient of the peak of benzethonium chloride is 0.95.
Коэффициент асимметрии пика стандартного образца бензэтония хлорида - 0,95.The peak asymmetry coefficient of the standard sample of benzethonium chloride is 0.95.
Содержание бензэтония хлорида, определенное в опыте, составило 0,097 мг/мл.The benzethonium chloride content determined in the experiment was 0.097 mg / ml.
Данный пример показывает возможность определения бензэтония хлорида в лекарственном препарате с достаточной точностью.This example shows the ability to determine benzethonium chloride in a drug with sufficient accuracy.
Пример 9Example 9
Анализ препарата «Проксокарпин», капли глазные.Analysis of the drug "Proxocarpine", eye drops.
Препарат и раствор стандартного образца бензэтония хлорида (0,1 мг/мл) предварительно разводят элюентом в соотношении (1:1).The drug and a solution of a standard sample of benzethonium chloride (0.1 mg / ml) are pre-diluted with eluent in the ratio (1: 1).
Последовательно по 20 мкл препарата и раствора стандартного образца бензэтония хлорида вводят в жидкостной хроматограф с установленной колонкой Hypersil BDS Cyanо 125×4,0 мм, 5 мкм.In succession, 20 μl of the preparation and a solution of a standard sample of benzethonium chloride are introduced into a liquid chromatograph with a mounted Hypersil BDS Cyano 125 × 4.0 mm, 5 μm column.
Условия хроматографии.Chromatography conditions.
Элюент: смесь ацетонитрила, 2,5 мМ тетрабутиламмония гидрофосфата и 5 мМ K2HPO4 в воде (60:40).Eluent: a mixture of acetonitrile, 2.5 mm tetrabutylammonium hydrogen phosphate and 5 mm K 2 HPO 4 in water (60:40).
Скорость потока: 1,0 мл/мин.Flow rate: 1.0 ml / min.
Длина волны детектирования: 230 нм.Detection wavelength: 230 nm.
Температура колонки: комнатная (от 20 до 25°C).Column temperature: room temperature (20 to 25 ° C).
Результаты хроматографирования.Chromatography results.
Время удерживания бензэтония - 7,41 мин.The retention time of benzethonium is 7.41 minutes.
Эффективность хроматографической колонки по пику бензэтония хлорида - 8290 теоретических тарелок.The efficiency of the chromatographic column at the peak of benzethonium chloride is 8290 theoretical plates.
Коэффициент асимметрии пика бензэтония хлорида - 1,15.The asymmetry coefficient of the benzethonium chloride peak is 1.15.
Коэффициент асимметрии пика стандартного образца бензэтония хлорида - 1,18.The peak asymmetry coefficient of the standard sample of benzethonium chloride is 1.18.
Содержание бензэтония хлорида, определенное в опыте, составило 0,099 мг/мл.The content of benzethonium chloride, determined in the experiment, was 0.099 mg / ml.
Данный пример показывает возможность определения бензэтония хлорида в лекарственном препарате с достаточной точностью.This example shows the ability to determine benzethonium chloride in a drug with sufficient accuracy.
Список литературыBibliography
1. Lee J.G. et al. Determination of three preservatives, cresol, chlorocresol and benzethonium, in drugs by high performance liquid chromatography-ultraviolet (HPLC-UV) detection //Journal of Pharmaceutical Investigation. - 2012. - V. 42. - №. 1. - P. 47-50.1. Lee J.G. et al. Determination of three preservatives, cresol, chlorocresol and benzethonium, in drugs by high performance liquid chromatography-ultraviolet (HPLC-UV) detection // Journal of Pharmaceutical Investigation. - 2012. - V. 42. - No. 1. - P. 47-50.
2. Wang H., Del Grosso A.V., May J.C. Determination of benzethonium chloride in anthrax vaccine adsorbed by HPLC //Biologicals. - 2006. - V. 34. - №. 4. - P. 257-263 (БЛИЖАЙШИЙ АНАЛОГ).2. Wang H., Del Grosso A.V., May J.C. Determination of benzethonium chloride in anthrax vaccine adsorbed by HPLC // Biologicals. - 2006. - V. 34. - No. 4. - P. 257-263 (NEAREST ANALOGUE).
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2013122991/15A RU2529814C1 (en) | 2013-05-20 | 2013-05-20 | Method for authentication and determination of quantitative content of benzethonium chloride in medicinal drugs |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2013122991/15A RU2529814C1 (en) | 2013-05-20 | 2013-05-20 | Method for authentication and determination of quantitative content of benzethonium chloride in medicinal drugs |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2529814C1 true RU2529814C1 (en) | 2014-09-27 |
Family
ID=51656822
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2013122991/15A RU2529814C1 (en) | 2013-05-20 | 2013-05-20 | Method for authentication and determination of quantitative content of benzethonium chloride in medicinal drugs |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2529814C1 (en) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2582899C1 (en) * | 2014-12-25 | 2016-04-27 | Общество с ограниченной ответственностью "Томлесдрев" | Method of determining impurity acids in aqueous glyoxal solution |
| RU2582847C1 (en) * | 2014-12-16 | 2016-04-27 | федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный аэрокосмический университет имени академика С.П. Королева (национальный исследовательский университет)" (СГАУ) | Method of authenticating medicinal plant material |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2185806C1 (en) * | 2001-07-27 | 2002-07-27 | Чухаджян Ара Гарникович | Prolonged medicinal forms of local action which produce antibacterial and immunoactivating capacity |
| RU2472528C2 (en) * | 2007-03-16 | 2013-01-20 | Байер Энимэл Хельс ГмбХ | Vitamin b12 stabilisation |
-
2013
- 2013-05-20 RU RU2013122991/15A patent/RU2529814C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2185806C1 (en) * | 2001-07-27 | 2002-07-27 | Чухаджян Ара Гарникович | Prolonged medicinal forms of local action which produce antibacterial and immunoactivating capacity |
| RU2472528C2 (en) * | 2007-03-16 | 2013-01-20 | Байер Энимэл Хельс ГмбХ | Vitamin b12 stabilisation |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Осипов А.С., Орлов Е.Н. / Применение метода ВЭЖХ для анализа бензэтония хлорида в глазных каплях / Химико-фармацевтический журнал / 2012, т.46, стр.41-43. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2582847C1 (en) * | 2014-12-16 | 2016-04-27 | федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный аэрокосмический университет имени академика С.П. Королева (национальный исследовательский университет)" (СГАУ) | Method of authenticating medicinal plant material |
| RU2582899C1 (en) * | 2014-12-25 | 2016-04-27 | Общество с ограниченной ответственностью "Томлесдрев" | Method of determining impurity acids in aqueous glyoxal solution |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Bailac et al. | Determination of quinolones in chicken tissues by liquid chromatography with ultraviolet absorbance detection | |
| Chaves et al. | Microextraction in packed sorbent for analysis of antidepressants in human plasma by liquid chromatography and spectrophotometric detection | |
| AU2013393832B2 (en) | Analytical method for detecting sulfated oligosaccharides | |
| Unceta et al. | Development of a stir bar sorptive extraction based HPLC-FLD method for the quantification of serotonin reuptake inhibitors in plasma, urine and brain tissue samples | |
| Campillo et al. | Dispersive liquid–liquid microextraction for the determination of macrocyclic lactones in milk by liquid chromatography with diode array detection and atmospheric pressure chemical ionization ion-trap tandem mass spectrometry | |
| Lomonaco et al. | Determination of total and unbound warfarin and warfarin alcohols in human plasma by high performance liquid chromatography with fluorescence detection | |
| Michler et al. | Development of an LC‐MS method for simultaneous quantitation of amentoflavone and biapigenin, the minor and major biflavones from Hypericum perforatum L., in human plasma and its application to real blood | |
| Wu et al. | Simultaneous determination of six alkaloids in blood and urine using a hydrophilic interaction liquid chromatography method coupled with electrospray ionization tandem mass spectrometry | |
| Yuan et al. | Simultaneous determination of paraquat and diquat in human plasma by HPLC‐DAD: Its application in acute poisoning patients induced by these two herbicides | |
| RU2529814C1 (en) | Method for authentication and determination of quantitative content of benzethonium chloride in medicinal drugs | |
| Kalaichelvi et al. | Validated RP-HPLC method for analysis of aripiprazole in a formulation | |
| Djordjevic et al. | Liquid chromatographic-mass spectrometric method for the determination of fluoxetine and norfluoxetine in human plasma: application to clinical study | |
| Karakka Kal et al. | Separation and Determination of the Enantiomeric Levamisole and Dexamisole in Equine Plasma Samples Using Chiral Polysaccharide Column/LC-MS/MS | |
| JP2016538574A (en) | HPLC analysis of impurities in dianhydrogalactitol | |
| Avula et al. | Analysis of primaquine and its metabolite carboxyprimaquine in biological samples: enantiomeric separation, method validation and quantification | |
| Ito et al. | Quantification of intact carboplatin in human plasma ultrafitrates using hydrophilic interaction liquid chromatography–tandem mass spectrometry and its application to a pharmacokinetic study | |
| TWI479150B (en) | Analytical method for detecting sulfated oligosaccharides | |
| Xue-Mei et al. | A validated RP-HPLC method for the determination of citrinin in xuezhikang capsule and other Monascus-fermented products | |
| Kim et al. | Determination of coccidiostats (amprolium and decoquinate) in cattle and chicken's muscle using high performance liquid chromatography | |
| Coudoré et al. | HPLC–DAD Analysis of hydrochlorothiazide and irbesartan in hypertensive patients on fixed-dose combination therapy | |
| KR100902571B1 (en) | Simultaneous determination of demethylamphetamine, amphetamine and their metabolites by liquid chromatography | |
| Zheng et al. | Polymer monolith microextraction online coupled to hydrophilic interaction chromatography/mass spectrometry for analysis of β2‐agonist in human urine | |
| Wang et al. | Improved HPLC method for the determination of moxifloxacin in application to a pharmacokinetics study in patients with infectious diseases | |
| Bugey et al. | Application of monolithic supports to online extraction and LC‐MS analysis of benzodiazepines in whole blood samples | |
| Tsunoda et al. | A simple analytical method involving the use of a monolithic silica disk-packed spin column and HPLC-ECD for determination of l-DOPA in plasma of patients with Parkinson's disease |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20150521 |