RU2518303C2 - ANTIBACTERIAL COMPOSITION, STRAIN OF BACTERIOPHAGE Escherichia coli, USED FOR OBTAINING THEREOF - Google Patents
ANTIBACTERIAL COMPOSITION, STRAIN OF BACTERIOPHAGE Escherichia coli, USED FOR OBTAINING THEREOF Download PDFInfo
- Publication number
- RU2518303C2 RU2518303C2 RU2012127139/10A RU2012127139A RU2518303C2 RU 2518303 C2 RU2518303 C2 RU 2518303C2 RU 2012127139/10 A RU2012127139/10 A RU 2012127139/10A RU 2012127139 A RU2012127139 A RU 2012127139A RU 2518303 C2 RU2518303 C2 RU 2518303C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- bacteriophage
- escherichia coli
- salmonella
- filtrate
- phagolysate
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к пищевой промышленности, биотехнологии и может быть использовано в производстве биологически активных добавок и добавок к пище.The invention relates to the food industry, biotechnology and can be used in the production of biologically active additives and food additives.
Распространение антибиотикоустойчивых бактерий, а также открытие роли биопленок, устойчивых к антибиотикам, в развитии хронических инфекций, возродило интерес к использованию бактериофагов. В настоящее время проводится интенсивная разработка «пищевых» бактериофагов. Ведутся исследования в отношении возможности применения фагов в виде биологически активных добавок к пище (БАД) для санации потенциальных бактериовыделителей (Протокол заседания Ученого совета Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека от 21.06.2011 №18. - URL: http://rospotrebnadzor.ru/c/document_library/get_file?uuid=786c5589-е19с-4550-9a7e-c4675d621cca&groupId=37752).The proliferation of antibiotic-resistant bacteria, as well as the discovery of the role of antibiotic-resistant biofilms in the development of chronic infections, revived interest in the use of bacteriophages. Currently, intensive development of "food" bacteriophages is underway. Studies are underway regarding the possibility of using phages in the form of biologically active food additives (BAA) for the rehabilitation of potential bacterial isolators (Minutes of the meeting of the Academic Council of the Federal Service for Supervision of Consumer Protection and Human Well-Being of June 21, 2011 No. 18. - URL: http: //rospotrebnadzor.ru/c/document_library/get_file?uuid=786c5589-е19с-4550-9a7e-c4675d621cca&groupId=37752).
Известно использование бактериофагов в качестве пищевых добавок - ингредиентов - для предотвращения размножения в пищевых продуктах патогенных бактерий: Campylobacter jejuni, Campylobacter coli, Escherichia coli, Listeria monocytogenes, Salmonella spp., Enterobacter sakazakii, Pseudomonas spp. (Hagens S., Loessner M.J. Bacteriophage for biocontrol of foodborne pathogens: calculations and considerations. - Current Pharmaceutical Biotechnology. - 2010. - Vol.11, №1. - P.58-68; Walker К. Use of bacteriophages as novel food additives. - URL: http://biocontrolfood.esr.cri.nz/Phage%201aw%20downloads/Phages%20and%20food%20regulation%20in%20the%20US%20by%20Kathy%20Walker.pdf).It is known to use bacteriophages as food additives - ingredients - to prevent the propagation of pathogenic bacteria in food products: Campylobacter jejuni, Campylobacter coli, Escherichia coli, Listeria monocytogenes, Salmonella spp., Enterobacter sakazakii, Pseudomonas spp. (Hagens S., Loessner MJ Bacteriophage for biocontrol of foodborne pathogens: calculations and considerations. - Current Pharmaceutical Biotechnology. - 2010. - Vol.11, No. 1. - P.58-68; Walker K. Use of bacteriophages as novel food additives. - URL: http://biocontrolfood.esr.cri.nz/Phage%201aw%20downloads/Phages%20and%20food%20regulation%20in%20the%20US%20by%20Kathy%20Walker.pdf).
Основным недостатком известных аналогов применения бактериофагов в качестве пищевых ингредиентов является необходимость включения в состав добавок достаточно большого числа бактериофагов для расширения спектра специфической активности в связи с отсутствием использования бактериофагов, обладающих литический активностью по отношению к нескольким бактериям (далее по тексту описания, формулы и реферата изобретения такие бактериофаги называются поливалентными бактериофагами), и целевых добавок, обеспечивающих стабилизацию поливалентной и индуцированной активности бактериофагов.The main disadvantage of the known analogues of the use of bacteriophages as food ingredients is the need to include a sufficiently large number of bacteriophages in the composition to expand the spectrum of specific activity due to the lack of use of bacteriophages with lytic activity against several bacteria (hereinafter, the description, claims and abstract of the invention such bacteriophages are called polyvalent bacteriophages), and targeted additives that stabilize the watering tnoj and induced activity of bacteriophages.
Известны бактериофаги, обладающие литический активностью по отношению к нескольким бактериям (поливалентные бактериофаги), например: бактериофаг ϕmp, вызывающий лизис Escherichia coli, Klebsiella pneumonia и Aerobacter aerogenes (Souza K.A., Ginoza H.S., Haight R.D. Isolation of a polyvalent bacteriophage for Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, and Aerobacter aerogenes. - Journal of virology. - 1972. - Vol.9, №5 - P.851-856); бактериофаг O-1, вызывающий лизис сальмонелл и Escherichia coli (Welkos S., Schreiber M., Baer H. Identification of Salmonella with the O-1 bacteriophage. - Applied microbiology. - 1974. - Vol.28, №4. - P.618-622).Bacteriophages with lytic activity against several bacteria are known (polyvalent bacteriophages), for example: bacteriophage ϕmp, causing lysis of Escherichia coli, Klebsiella pneumonia and Aerobacter aerogenes (Souza KA, Ginoza HS, Haight RD Isolation of a polyvalent bacteriophage for Escherichbs pneumoniae, and Aerobacter aerogenes. - Journal of virology. - 1972. - Vol. 9, No. 5 - P.851-856); bacteriophage O-1, causing lysis of Salmonella and Escherichia coli (Welkos S., Schreiber M., Baer H. Identification of Salmonella with the O-1 bacteriophage. - Applied microbiology. - 1974. - Vol. 28, No. 4. - P .618-622).
Основным недостатком данных известных технических решений является то, что они не могут быть использованы в качестве БАД, так как не обладают активностью против необходимого спектра возбудителей и не содержат целевых добавок, обеспечивающих стабилизацию поливалентной и индуцированной активности бактериофагов.The main disadvantage of these known technical solutions is that they cannot be used as dietary supplements, since they do not have activity against the necessary spectrum of pathogens and do not contain targeted additives that stabilize the polyvalent and induced activity of bacteriophages.
Наиболее близким аналогом - прототипом - заявляемого технического решения является композиция, которая может быть использована в производстве БАД, содержащая видоспецифические вирулентные бактериофаги и бактериофаги с индуцированной вирулентностью с литической активностью не ниже 10-4 по Аппельману в отношении тест-штаммов и выделенных из организма человека изолятов бактерий в фильтрате фаголизата нелизогенных бактерий, и целевые добавки. Данная композиция может содержать бактериофаги, выбранные из ряда: стафилококковый бактериофаг, стрептококковый бактериофаг, коли бактериофаг, протейный бактериофаг, синегнойный бактериофаг, сальмонеллезный бактериофаг, шигеллезный бактериофаг, энтерококковый бактериофаг и клебсиеллезный бактериофаг. Композиция может также содержать целевые добавки в количестве 1,0÷95,0 мас.% от массы композиции, выбранные из ряда: глицин, цистеин, гистидин, хинозол, хитозан, экстракт корня солодки, экстракт шиповника, экстракт душицы, экстракт клюквы и вкусоароматическая добавка, и представлена в виде суспензии (патент RU 2366437 от 10.05.2009, А61К 35/74, А61Р 31/04).The closest analogue - the prototype - of the claimed technical solution is a composition that can be used in the production of dietary supplements containing species-specific virulent bacteriophages and bacteriophages with induced virulence with lytic activity not lower than 10 -4 according to Appelman in relation to test strains and isolates isolated from the human body bacteria in the filtrate of the phagolysate of non-isogenic bacteria, and targeted additives. This composition may contain bacteriophages selected from the following: staphylococcal bacteriophage, streptococcal bacteriophage, coli bacteriophage, proteus bacteriophage, Pseudomonas bacteriophage, salmonella bacteriophage, shigellosis bacteriophage, enterococcal bacteriophage and Klebsiella bacteriophage. The composition may also contain target additives in an amount of 1.0 ÷ 95.0 wt.% By weight of the composition selected from the series: glycine, cysteine, histidine, chinosol, chitosan, licorice root extract, rosehip extract, oregano extract, cranberry extract and flavor additive, and is presented in the form of a suspension (patent RU 2366437 from 05/10/2009, A61K 35/74, A61P 31/04).
Основным недостатком известного прототипа является необходимость включения в состав добавок большого числа бактериофагов для расширения спектра специфической активности в связи с отсутствием использования поливалентных бактериофагов и подбора состава целевых добавок, обеспечивающих стабилизацию поливалентной и индуцированной активности бактериофагов.The main disadvantage of the known prototype is the need to include in the composition of the additives a large number of bacteriophages to expand the spectrum of specific activity due to the lack of use of polyvalent bacteriophages and the selection of the composition of target additives that stabilize the polyvalent and induced activity of bacteriophages.
Главной задачей, решаемой изобретением, является упрощение состава биологически активной добавки к пище на основе бактериофагов при достижении необходимого спектра специфической активности за счет включения поливалентного бактериофага в состав активных ингредиентов и подбора целевых добавок, обеспечивающих стабилизацию поливалентной и индуцированной активности бактериофагов (далее по тексту описания, формулы и реферата изобретения - целевые добавки).The main task solved by the invention is to simplify the composition of a biologically active food supplement based on bacteriophages when the required spectrum of specific activity is achieved by including a polyvalent bacteriophage in the composition of active ingredients and selecting targeted additives that stabilize the polyvalent and induced activity of bacteriophages (hereinafter, the description, formulas and abstract of the invention - target additives).
Поставленная задача реализуется за счет того, что композиция антибактериальная включает комбинацию фильтратов фаголизатов бактерий с литической активностью не ниже 10-4 по Аппельману в отношении тест-штаммов и выделенных из организма человека изолятов бактерий: фильтрат фаголизата Escherichia coli, содержащий поливалентный бактериофаг, обладающий литический активностью по отношению к патогенным бактериям не менее двух разных родов семейства Enterobacteriaceae, фильтрат фаголизата Escherichia coli, содержащий коли бактериофаг, фильтрат стафилококкового фаголизата, фильтрат сальмонеллезного фаголизата, фильтрат фаголизата Listeria monocyctogenes и целевые добавки. Фильтрат фаголизата Escherichia coli в качестве вирулентного поливалентного бактериофага может содержать штамм бактериофага Escherichia coli ECD7, депонированный в коллекции музея микроорганизмов Федерального бюджетного учреждения науки «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН ГНЦ ПМБ Роспотребнадзора) под номером Ph 64. Фильтрат фаголизата Escherichia coli может содержать вирулентный коли бактериофаг и/или коли бактериофаг с индуцированной вирулентностью. Фильтрат стафилококкового фаголизата может содержать вирулентный стафилококковый бактериофаг и/или стафилококковый бактериофаг с индуцированной вирулентностью. Композиция в качестве фильтрата сальмонеллезного фаголизата может включать фильтрат фаголизата Salmonella enteritidis, фильтрат фаголизата Salmonella infantis и фильтрат фаголизата Salmonella typhimurium. Фильтраты фаголизатов Salmonella enteritidis, Salmonella infantis и Salmonella typhimurium могут содержать вирулентный сальмонеллезный бактериофаг и/или сальмонеллезный бактериофаг с индуцированной вирулентностью. Фильтрат фаголизата Listeria monocyctogenes может содержать вирулентный листериозный бактериофаг и/или листериозный бактериофаг с индуцированной вирулентностью. Композиция может включать целевые добавки в количестве 1,0÷95,0 мас.% от массы композиции в виде их смеси ингредиентов, выбранных из ряда: сироп корня солодки, пектин яблочный, глицин. Данная композиция в связи с достаточным спектром стабильной специфической активности может быть использована при профилактике и лечении инфекционного заболевания в виде БАД.The task is realized due to the fact that the antibacterial composition includes a combination of bacterial phagolysate filtrates with lytic activity of at least Appelman no less than 10 -4 for test strains and bacterial isolates isolated from the human body: Escherichia coli phagolysate filtrate containing a polyvalent bacteriophage with lytic activity in relation to pathogenic bacteria of at least two different genera of the Enterobacteriaceae family, Escherichia coli phagolysate filtrate containing coli bacteriophage, staphylococcal phage filtrate olysate, salmonella phagolysate filtrate, Listeria monocyctogenes phagolysate filtrate and targeted additives. The Escherichia coli phagolysate filtrate as a virulent polyvalent bacteriophage may contain the bacteriophage strain Escherichia coli ECD7 deposited in the collection of the Museum of microorganisms of the Federal budget institution of science “State Scientific Center for Applied Microbiology and Biotechnology” of the Federal Service for Supervision of Consumer Protection and Human Well-being PMB Rospotrebnadzor) under the number Ph 64. The Escherichia coli phagolysate filtrate may contain virulent coli bacteriophage and / or coli bacteriophage with ovannoy virulence. The staphylococcal phagolysate filtrate may contain virulent staphylococcal bacteriophage and / or staphylococcal bacteriophage with induced virulence. The composition as a salmonella phagolysate filtrate may include a Salmonella enteritidis phagolysate filtrate, a Salmonella infantis phagolysate filtrate and a Salmonella typhimurium phagolysate filtrate. The phagolysate filtrates of Salmonella enteritidis, Salmonella infantis and Salmonella typhimurium may contain virulent salmonella bacteriophage and / or salmonella bacteriophage with induced virulence. The Listeria monocyctogenes phagolysate filtrate may contain virulent listeriosis bacteriophage and / or listeriosis bacteriophage with induced virulence. The composition may include targeted additives in an amount of 1.0 ÷ 95.0 wt.% By weight of the composition in the form of a mixture of ingredients selected from the range: licorice root syrup, apple pectin, glycine. This composition in connection with a sufficient spectrum of stable specific activity can be used in the prevention and treatment of infectious diseases in the form of dietary supplements.
Штамм бактериофага Escherichia coli ECD7 выделен из фекалий бройлерных кур на культуре бактерий штамма Escherichia coli O104:H4 №112027 и депонирован в коллекции музея микроорганизмов Федерального бюджетного учреждения науки «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН ГНЦ ПМБ Роспотребнадзора) под номером Ph 64.The strain of the bacteriophage Escherichia coli ECD7 was isolated from broiler chicken feces on a bacterial culture of the strain Escherichia coli O104: H4 No. 112027 and deposited in the collection of the Museum of microorganisms of the Federal budget institution of science "State scientific center for applied microbiology and biotechnology" of the Federal service for the supervision of consumer protection and human well-being (FBUN SSC PMB Rospotrebnadzor) under the number Ph 64.
Штамм бактериофага Escherichia coli ECD7 характеризуется следующими свойствами:The strain of the bacteriophage Escherichia coli ECD7 is characterized by the following properties:
- обладает литической поливалентной активностью по отношению к энтерогеморрагическим штаммам Escherichia coli серотипов O104:H4, O157:Н7, Escherichia coli некоторых других клинически значимых серогрупп, указанных в таблице 1, кроме того, лизирует бактерии некоторых штаммов возбудителей дизентерии человека - Shigella sonnei и Shigella flexneri;- possesses lytic polyvalent activity with respect to enterohemorrhagic strains of Escherichia coli serotypes O104: H4, O157: H7, Escherichia coli of some other clinically significant serogroups listed in table 1, in addition, it lyses bacteria of some strains of human dysentery pathogens - Shigella sonnei and Shigella flexner ;
- не подавляет рост бактерий непатогенного для человека штамма Escherichia coli М-17;- does not inhibit the growth of bacteria non-pathogenic for humans strain Escherichia coli M-17;
- на чувствительном бактериальном штамме формирует мутные негативные колонии диаметром 1-2 мм.- on a sensitive bacterial strain forms turbid negative colonies with a diameter of 1-2 mm.
В качестве коли бактериофага, стафилококкового бактериофага, сальмонеллезного бактериофага и листериозного бактериофага композиция может содержать любые бактериофаги с соответствующей специфической активностью, используемые в виде фаголизатов (фильтратов фаголизатов), пригодные для получения медицинских иммунобиологических препаратов, пищевых добавок или биологически активных добавок к пище (например: Бактерийные, вирусные и сывороточные лечебно-профилактические препараты Аллергены. Дезинфекционно-стерилизационные режимы поликлиник. - СПб.: Фолиант, 1998. - С.180-244; патент SU 538025 от 05.12.1976, С12К 1/04, А61В 10/00; патент WO 2008/100273 от 21.08.2008, C12N 7/00, 7/01, 7/02; патент RU 2425877 от 26.02.2010, C12N 7/00, C12R 1/19).As a bacteriophage, staphylococcal bacteriophage, salmonella bacteriophage and listeriophage bacteriophage, the composition may contain any bacteriophages with the corresponding specific activity used in the form of phagolysates (phagolysate filtrates) suitable for the preparation of medical immunobiological preparations, food additives or biologically active food additives (for example: Bacterial, viral and serum treatment and prophylactic drugs Allergens. Disinfection and sterilization modes of poly face. - St. Petersburg: Folio, 1998. - P.180-244; patent SU 538025 dated 05.12.1976, C12K 1/04, A61B 10/00; patent WO 2008/100273 dated 08.21.2008, C12N 7/00, 7/01, 7/02; patent RU 2425877 from 02.26.2010, C12N 7/00, C12R 1/19).
В качестве коли бактериофага в композиции может использоваться бактериофаг, специфичный для всех изолятов Escherichia coli O157:H7, который может быть не активен для других эшерихий, шигелл и иерсиний.As a bacteriophage in the composition, a bacteriophage specific for all Escherichia coli O157: H7 isolates, which may be inactive for other Escherichia, Shigella and Yersinia, can be used.
В качестве стафилококкового бактериофага в композиции может использоваться бактериофаг, вирулентный для клинических штаммов Staphylococcus aureus, в том числе штаммов MRSA - метициллин-резистентных штаммов Staphylococcus aureus.As a staphylococcal bacteriophage in the composition, a bacteriophage virulent for clinical strains of Staphylococcus aureus, including MRSA strains, methicillin-resistant strains of Staphylococcus aureus, can be used in the composition.
В качестве сальмонеллезного бактериофага в композиции могут использоваться бактериофаги против Salmonella enteritidis (в том числе штаммов SE6, SE19 и/или SE40), против Salmonella typhimurium и/или против Salmonella infantis.Bacteriophages against Salmonella enteritidis (including strains SE6, SE19 and / or SE40), against Salmonella typhimurium and / or against Salmonella infantis can be used as a salmonella bacteriophage in the composition.
В качестве листериозного бактериофага в композиции может использоваться бактериофаг, лизирующий штаммы Listeria monocytogenes (например, штаммы 2, 6, 660, 944, 4908, 4909, 4910, 4913, 4944, 7973, 10522, 766ГИСК, 4ИП, 12ИП, 16ИП, 20ИП, 46ИП, 53ИП, 61ИП, 766ИП, Аисх., С20/10357, C-52, C-212, EGD, EGDe, Gim03, M-5, M-6).As a listeriotic bacteriophage in the composition, a bacteriophage lysing strains of Listeria monocytogenes can be used (e.g., strains 2, 6, 660, 944, 4908, 4909, 4910, 4913, 4944, 7973, 10522, 766GISK, 4IP, 12IP, 16IP, 20IP, 46 IP, 53 IP, 61 IP, 766 IP, Aish., C20 / 10357, C-52, C-212, EGD, EGDe, Gim03, M-5, M-6).
Перечень тест-штаммов, в отношении которых фильтраты фаголизатов композиции антибактериальной обладают литической активностью:The list of test strains for which the filtrates of the phagolysates of the antibacterial composition have lytic activity:
Escherichia coli штамм К-12 C600F, Escherichia coli серотип O157:H7 штамм 1330, Escherichia coli серотип O157:H7 штамм АТСС 51658, Escherichia coli серотип O157:H7 штамм 4, Escherichia coli серотип O157:H7 штамм Т 5133, Escherichia coli серотип O78 штамм 3001; Staphylococcus aureus штаммы 2075, FRI-722, 1789 WOOD, 209-P; Salmonella enteritidis штаммы М4, 1540, 9, 10, 14, 29, 31, 37, 47, 48, 53, 60, 85, 89, 92, 93, 109, 111, 114 m-, 121, 124, 126, 127, 128, 132, 137, 139, 140 g-, 141; Salmonella typhimurium штамм ТГ1; Salmonella infantis штамм 1271; Listeria monocytogenes штаммы EGDe, Gim03, 7973, C20/10357, C-52, Аисх., EGD, M-6, 12ИП, 20ИП, 4908, 4944, 944, C-212, 6, M-3, 2, 16ИП, 660, 4909, 4913, 766ГИСК, 61ИП, 53ИП, М-5, 766ИП, 46ИП, 10522, 4ИП, 4910, WSLC 1001.Escherichia coli strain K-12 C600F, Escherichia coli serotype O157: H7 strain 1330, Escherichia coli serotype O157: H7 strain ATCC 51658, Escherichia coli serotype O157: H7 strain 4, Escherichia coli serotype O157: H7 strain T 5133, Esc strain 3001; Staphylococcus aureus strains 2075, FRI-722, 1789 WOOD, 209-P; Salmonella enteritidis strains M4, 1540, 9, 10, 14, 29, 31, 37, 47, 48, 53, 60, 85, 89, 92, 93, 109, 111, 114 m-, 121, 124, 126, 127 128, 132, 137, 139, 140 g-, 141; Salmonella typhimurium strain TG1; Salmonella infantis strain 1271; Listeria monocytogenes strains EGDe, Gim03, 7973, C20 / 10357, C-52, Aix., EGD, M-6, 12IP, 20IP, 4908, 4944, 944, C-212, 6, M-3, 2, 16IP, 660, 4909, 4913, 766 GISK, 61 IP, 53 IP, M-5, 766 IP, 46 IP, 10522, 4 IP, 4910, WSLC 1001.
В основу заявляемого изобретения положена обеспечивающая решение поставленной задачи новая совокупность оригинальных отличительных признаков: впервые предложено использование поливалентного бактериофага, обладающего литический активностью по отношению к патогенным бактериям не менее двух родов семейства Enterobacteriaceae, как основы композиции в виде БАД при оригинальном сочетании поливалентного бактериофага с моновалентными, дополняющими необходимый спектр специфической активности, вирулентными бактериофагами и бактериофагами с индуцированной вирулентностью при впервые подобранной смеси целевых добавок, обеспечивающих стабилизацию как поливалентной, так и индуцированной активности бактериофагов.The claimed invention is based on a new combination of original distinctive features that provides a solution to the problem: for the first time, the use of a polyvalent bacteriophage with lytic activity against pathogenic bacteria of at least two genera of the Enterobacteriaceae family is proposed as the basis for a dietary supplement in the original combination of a multivalent bacteriophage with monovalent complementing the necessary spectrum of specific activity, virulent bacteriophages and bacteriophages with ind -skilled virulence when selected first target mixture of additives providing stabilization as a polyvalent or induced activity of bacteriophages.
Из патентно-технической литературы и практики производства биологически активных добавок, добавок к пище и медицинских иммунобиологических препаратов неизвестно об антибактериальной композиции, включающей комбинацию фильтратов фаголизатов бактерий, которая были бы идентична заявляемой.From the patent technical literature and the practice of producing biologically active additives, food additives and medical immunobiological preparations, it is not known about the antibacterial composition, including a combination of bacterial phagolysate filtrates, which would be identical to the claimed one.
Отсюда правомерен вывод о соответствии заявляемого решения критерию «новизна».Hence, the conclusion about the conformity of the proposed solution to the criterion of "novelty" is legitimate.
Указанная выше совокупность существенных признаков необходима и достаточна для получения технического результата - упрощения состава биологически активной добавки к пище на основе бактериофагов при достижении необходимого спектра специфической активности за счет включения поливалентного бактериофага в состав активных ингредиентов и подбора целевых добавок. Между существующими признаками и решаемой задачей существует причинно-следственная связь, где каждый признак необходим и влияет на получение технического результата, а вместе взятые признаки достаточны для его получения. Правомерен вывод о соответствии заявляемого технического решения критерию «изобретательский уровень».The above set of essential features is necessary and sufficient to obtain a technical result - simplification of the composition of a biologically active food supplement based on bacteriophages when the required spectrum of specific activity is achieved due to the inclusion of a polyvalent bacteriophage in the composition of the active ingredients and the selection of target additives. There is a causal relationship between the existing features and the problem to be solved, where each feature is necessary and influences the receipt of a technical result, and the combined features are sufficient to obtain it. The conclusion that the claimed technical solution meets the criterion of "inventive step" is legitimate.
Предлагаемый способ может быть реализован многократно, а, значит, заявляемое техническое решение соответствует критерию «промышленная применимость».The proposed method can be implemented many times, and, therefore, the claimed technical solution meets the criterion of "industrial applicability".
Предлагаемый способ апробирован в Федеральном бюджетном учреждении науки «Московский институт эпидемиологии и микробиологии имени Г.Н. Габричевского» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского Роспотребнадзора).The proposed method was tested at the Federal budget institution of science "Moscow Institute of Epidemiology and Microbiology named after G.N. Gabrichevsky ”Federal Service for Supervision of Consumer Rights Protection and Human Well-being (FBUN MNIIEM them. GN Gabrichevsky Rospotrebnadzor).
Сущность изобретения поясняется на следующих примерах, полученных при апробации предлагаемого способа, показывающих упрощение состава биологически активной добавки к пище на основе бактериофагов при достижении необходимого спектра специфической активности за счет включения поливалентного бактериофага в состав активных ингредиентов и подбора целевых добавок. При этом приведенные примеры вариантов композиции антибактериальной, получения фаголизата Escherichia coli, содержащего поливалентный бактериофаг штамма Escherichia coli ECD7, проверки спектра антибактериального действия штамма бактериофага ECD7, проверки взаимодействия бактериофагов композиции антибактериальной с производственными штаммами лактобацилл и бифидобактерий и с нормальной микрофлорой кишечника показывают конкретную реализацию заявляемого изобретения.The invention is illustrated by the following examples obtained by testing the proposed method, showing the simplification of the composition of a biologically active food supplement based on bacteriophages when the required spectrum of specific activity is achieved due to the inclusion of a polyvalent bacteriophage in the composition of the active ingredients and the selection of target additives. At the same time, the examples of the antibacterial composition options, obtaining the Escherichia coli phagolysate containing the multivalent bacteriophage of the Escherichia coli strain ECD7, checking the spectrum of the antibacterial activity of the bacteriophage ECD7 strain, checking the interaction of the bacteriophages of the antibacterial composition with production strains of lactobacilli and the bifidobacter bacteriophobia and the normal invention show normal .
Пример 1. Получение фильтрата фаголизата Escherichia coli, содержащего поливалентный бактериофаг штамма Escherichia coli ECD7. К 1 млExample 1. Obtaining a filtrate of Escherichia coli phagolysate containing a multivalent bacteriophage of Escherichia coli strain ECD7. K 1 ml
ночной бульонной культуры Escherichia coli К-12 C600F добавляли 4 мл бульона LB (содержащего на 1 л среды 10 г триптона Bacto, 5 г дрожжевого экстракта Bacto, 10 г натрия хлорида) и 10 мкл суспензии штамма бактериофага Escherichia coli ECD7 с концентрацией 109 БОЕ/мл. Смесь инкубировали на качалке при температуре 37°С до наступления просветления бактериальной культуры, добавляют 0,5 мл хлороформа и интенсивно перемешивали в течение 20 мин. Низкоскоростным центрифугированием (10000 g, 15 мин) с последующей микрофильтрацией (размер пор фильтра 0,22 мкм) удаляли обломки бактериальных клеток и титровали фильтрат фаголизата методом двойных агаровых слоев. Концентрацию бактериофага выражали в количестве бляшкообразующих единиц (БОЕ) в 1 мл фаголизата. В полученном фаголизате концентрация бактериофага составляла 109 БОЕ/мл.overnight broth culture of Escherichia coli K-12 C600F was added 4 ml of LB broth (containing 10 g of Bacto tryptone, 5 g of Bacto yeast extract, 10 g of sodium chloride per 1 liter of medium) and 10 μl of a suspension of the bacteriophage strain Escherichia coli ECD7 with a concentration of 10 9 PFU / ml The mixture was incubated on a rocking chair at a temperature of 37 ° C until the bacterial culture enlightened, 0.5 ml of chloroform was added, and it was intensively mixed for 20 minutes. By low-speed centrifugation (10,000 g, 15 min) followed by microfiltration (filter pore size 0.22 μm), debris was removed from the cells and the phagolysate filtrate was titrated by double agar layers. The concentration of the bacteriophage was expressed as the number of plaque forming units (PFU) in 1 ml of phagolysate. The concentration of bacteriophage in the resulting phagolysate was 10 9 PFU / ml.
Пример 2. Проверка спектра антибактериального действия штамма бактериофага ECD7. Спектр антибактериального действия штамма бактериофага Escherichia coli ECD7 проверяли методом спот-тестов. Для этого по 0,5 мл ночных бульонных бактериальных культур, указанных в таблице 1, смешивали с 4 мл полужидкого агара (бульона LB, содержащего 0,7% агара) при температуре 47°С и распределяли по поверхности питательного агара (например, Nutrient Agar, HIMEDIA) в чашке Петри. Через 20 мин на поверхность наносили каплю штамма бактериофага ECD7 (107 БОЕ/мл) и инкубировали при температуре 37°С в течение ночи. При визуальном осмотре на чашках с чувствительными культурами бактерий рост бактериального газона отсутствовал в местах внесения штамма бактериофага (прозрачное пятно лизиса). Во всех остальных случаях таких зон не обнаруживалось.Example 2. Checking the spectrum of antibacterial action of the strain of bacteriophage ECD7. The antibacterial spectrum of the bacteriophage strain Escherichia coli ECD7 was checked by the method of spot tests. To do this, 0.5 ml of the nightly broth bacterial cultures shown in Table 1 were mixed with 4 ml of semi-liquid agar (LB broth containing 0.7% agar) at 47 ° C and distributed over the surface of nutrient agar (e.g. Nutrient Agar , HIMEDIA) in a petri dish. After 20 minutes, a drop of the ECD7 bacteriophage strain (10 7 PFU / ml) was applied to the surface and incubated at 37 ° C overnight. When visual inspection on plates with sensitive cultures of bacteria, the growth of bacterial lawn was absent at the sites of introduction of the bacteriophage strain (transparent lysis spot). In all other cases, such zones were not detected.
Пример 3. Получена композиция антибактериальная с литической активностью не ниже 10-4 по Аппельману в отношении тест-штаммов и выделенных из организма человека изолятов бактерий, включающая фильтрат фаголизата Escherichia coli, содержащий поливалентный бактериофаг Escherichia coli ECD7, обладающий литический активностью по отношению к патогенным бактериям двух родов семейства Enterobacteriaceae (Escherichia и Shigella), депонированный в коллекции музея микроорганизмов (ФБУН ГНЦ ПМБ Роспотребнадзора) под номером Ph 64, фильтрат фаголизата Escherichia coli, содержащий коли бактериофаг в виде вирулентного бактериофага и бактериофага с индуцированной вирулентностью, фильтрат стафилококкового фаголизата, содержащий стафилококковый бактериофаг в виде вирулентного бактериофага и бактериофага с индуцированной вирулентностью, фильтрат фаголизата Salmonella enteritidis, содержащий сальмонеллезный бактериофаг в виде вирулентного бактериофага и бактериофага с индуцированной вирулентностью, обладающие литической активностью по отношению к Salmonella enteritidis, фильтрат фаголизата Salmonella infantis, содержащий сальмонеллезный бактериофаг в виде вирулентного бактериофага и бактериофага с индуцированной вирулентностью, обладающие литической активностью по отношению к Salmonella infantis, фильтрат фаголизата Salmonella typhimurium, содержащий сальмонеллезный бактериофаг в виде вирулентного бактериофага и бактериофага с индуцированной вирулентностью, обладающие литической активностью по отношению к Salmonella typhimurium, фильтрат фаголизата Listeria monocyctogenes, содержащий листериозный бактериофаг в виде вирулентного бактериофага и бактериофага с индуцированной вирулентностью. Композиция также включала целевые добавки в количестве 1,0 мас.% от массы композиции в виде смеси ингредиентов, выбранных из ряда: сироп корня солодки, пектин яблочный и глицин. Проведены исследования стабильности поливалентной активности штамма бактериофага Escherichia coli ECD7 в образцах композиции, хранящихся в течение года, и тестирование всех бактериофагов композиции на лизогению. Литическая активность поливалентного штамма бактериофага Escherichia coli ECD7 по отношению к чувствительным к нему штаммам Escherichia coli серотипов O104:Н4, O157:Н7, O104:Н12, O6, O26, O126, O25, O78 и К-12 C600F, чувствительным к нему штаммам Shigella sonnei, Shigella flexneri составляла не ниже 10-4 по Аппельману. Литическая активность других штаммов бактериофагов композиции также составляла не ниже 10-4 по Аппельману. Тесты на лизогению были отрицательные. Для испытания биодоступности полученной композиции ее образец массой 0,6 г вносился в среду 199. Отмечалось равномерное диспергирование препарата в водной среде и сохранение в растворе не менее 99% литической активности композиции.Example 3. The obtained antibacterial composition with lytic activity not lower than 10 -4 according to Appelman in relation to test strains and bacterial isolates isolated from the human body, including Escherichia coli phagolysate filtrate containing polyvalent bacteriophage Escherichia coli ECD7, having lytic activity against pathogenic bacteria two genera of the Enterobacteriaceae family (Escherichia and Shigella), deposited in the collection of the Museum of Microorganisms (FBUN SSC PMB Rospotrebnadzor) under the number Ph 64, filtrate of the Escherichia coli phagolysate containing coli bacterioph ag in the form of a virulent bacteriophage and a bacteriophage with induced virulence, a staphylococcal phagolysate filtrate containing a staphylococcal bacteriophage in the form of a virulent bacteriophage and a bacteriophage with virulence induced, a filtrate of a phagolysate of vaginal bacteriophage-associated bacteriophage-associated bacteriophobia bacteriophobia bacteriophage in relation to Salmonella enteritidis, a salmonella infantis phagolysate filtrate containing salmonella bacteriophage in ide of a virulent bacteriophage and a bacteriophage with induced virulence, with lytic activity against Salmonella infantis, a filtrate of the salmonella typhimurium phagolysate containing a salmonella bacteriophage in the form of a virulent bacteriophage and a bacteriophage with lytic lyme activity containing a listeriotic bacteriophage in the form of a virulent bacteriophage and a bacteriophage with induced virulence. The composition also included targeted additives in an amount of 1.0 wt.% By weight of the composition in the form of a mixture of ingredients selected from the range: licorice root syrup, apple pectin and glycine. The stability studies of the multivalent activity of the bacteriophage strain Escherichia coli ECD7 in the samples of the composition stored for a year, and testing of all bacteriophages of the composition for lysogenesis were studied. The lytic activity of the polyvalent strain of the bacteriophage Escherichia coli ECD7 in relation to the strains of Escherichia coli sensitive to it, serotypes O104: H4, O157: H7, O104: H12, O6, O26, O126, O25, O78 and K-12 C600F, Shigella strains sensitive to it sonnei, Shigella flexneri was at least 10 -4 according to Appelman. The lytic activity of other strains of bacteriophage composition was also not less than 10 -4 according to Appelman. Tests for lysogenesis were negative. To test the bioavailability of the obtained composition, its sample weighing 0.6 g was introduced into medium 199. It was noted that the preparation was uniformly dispersed in an aqueous medium and that the solution retained at least 99% of the lytic activity of the composition.
Пример 4. Получена композиция антибактериальная с литической активностью не ниже 10-4 по Аппельману в отношении тест-штаммов и выделенных из организма человека изолятов бактерий, включающая фильтрат фаголизата Escherichia coli, содержащий поливалентный бактериофаг Escherichia coli ECD7, обладающий литический активностью по отношению к патогенным бактериям двух родов семейства Enterobacteriaceae (Escherichia и Shigella), депонированный в коллекции музея микроорганизмов (ФБУН ГНЦ ПМБ Роспотребнадзора) под номером Ph 64, фильтрат фаголизата Escherichia coli, содержащий коли бактериофаг в виде бактериофага с индуцированной вирулентностью, фильтрат стафилококкового фаголизата, содержащий стафилококковый бактериофаг в виде вирулентного бактериофага и бактериофага с индуцированной вирулентностью, фильтрат фаголизата Salmonella enteritidis, содержащий сальмонеллезный бактериофаг в виде бактериофага с индуцированной вирулентностью, обладающие литической активностью по отношению к Salmonella enteritidis, фильтрат фаголизата Salmonella infantis, содержащий сальмонеллезный бактериофаг в виде вирулентного бактериофага и бактериофага с индуцированной вирулентностью, обладающие литической активностью по отношению к Salmonella infantis, фильтрат фаголизата Salmonella typhimurium, содержащий сальмонеллезный бактериофаг в виде вирулентного бактериофага и бактериофага с индуцированной вирулентностью, обладающие литической активностью по отношению к Salmonella typhimurium, фильтрат фаголизата Listeria monocyctogenes, содержащий листериозный бактериофаг в виде вирулентного бактериофага и бактериофага с индуцированной вирулентностью. Композиция также включала целевые добавки в количестве 1,0 мас.% от массы композиции в виде смеси ингредиентов, выбранных из ряда: сироп корня солодки и глицин. Проведены исследования стабильности поливалентной активности штамма бактериофага Escherichia coli ECD7 в образцах композиции, хранящихся в течение года, и тестирование всех бактериофагов композиции на лизогению. Литическая активность поливалентного штамма бактериофага Escherichia coli ECD7 по отношению к чувствительным к нему штаммам Escherichia coli серотипов O104:Н4, O157:Н7, O104:Н12, O6, O26, O126, O25, O78 и К-12 C600F, чувствительным к нему штаммам Shigella sonnet, Shigella flexneri составляла не ниже 10-4 по Аппельману. Литическая активность других штаммов бактериофагов композиции также составляла не ниже 10-4 по Аппельману. Тесты на лизогению были отрицательные. Для испытания биодоступности полученной композиции ее образец массой 0,6 г вносился в среду 199. Отмечалось равномерное диспергирование препарата в водной среде и сохранение в растворе не менее 99% литической активности композиции.Example 4. The obtained antibacterial composition with lytic activity not lower than 10 -4 according to Appelman in relation to test strains and bacterial isolates isolated from the human body, including Escherichia coli phagolysate filtrate containing polyvalent bacteriophage Escherichia coli ECD7, having lytic activity against pathogenic bacteria two genera of the Enterobacteriaceae family (Escherichia and Shigella), deposited in the collection of the Museum of Microorganisms (FBUN SSC PMB Rospotrebnadzor) under the number Ph 64, filtrate of the Escherichia coli phagolysate containing coli bacterioph ag in the form of a bacteriophage with induced virulence, a staphylococcal phagolysate filtrate containing a staphylococcal bacteriophage in the form of a virulent bacteriophage and a bacteriophage with induced virulence, a phagolysate filtrate of Salmonella enteritidis containing a salmonella bacteriophage with an active bacteriophage of phagolysate of Salmonella infantis containing salmonella bacteriophage in the form of a virulent bacteriophage and a bacteriophage from inducers virulence, having lytic activity against Salmonella infantis, Salmonella typhimurium phagolysate filtrate containing salmonella bacteriophage in the form of a virulent bacteriophage and virulence-induced bacteriophage, lytic activity against Salmonella typhimurium, a lysophageal lactogenic bacteriophage bacteriophage and bacteriophage with induced virulence. The composition also included targeted additives in an amount of 1.0 wt.% By weight of the composition as a mixture of ingredients selected from the range: licorice root syrup and glycine. The stability studies of the multivalent activity of the bacteriophage strain Escherichia coli ECD7 in the samples of the composition stored for a year, and testing of all bacteriophages of the composition for lysogenesis were studied. The lytic activity of the polyvalent strain of the bacteriophage Escherichia coli ECD7 in relation to the strains of Escherichia coli sensitive to it, serotypes O104: H4, O157: H7, O104: H12, O6, O26, O126, O25, O78 and K-12 C600F, Shigella strains sensitive to it sonnet, Shigella flexneri was at least 10 -4 according to Appelman. The lytic activity of other strains of bacteriophage composition was also not less than 10 -4 according to Appelman. Tests for lysogenesis were negative. To test the bioavailability of the obtained composition, its sample weighing 0.6 g was introduced into medium 199. It was noted that the preparation was uniformly dispersed in an aqueous medium and that the solution retained at least 99% of the lytic activity of the composition.
Пример 5. Получена композиция антибактериальная с литической активностью не ниже 10-4 по Аппельману в отношении тест-штаммов и выделенных из организма человека изолятов бактерий, включающая фильтрат фаголизата Escherichia coli, содержащий поливалентный бактериофаг Escherichia coli ECD7, обладающий литический активностью по отношению к патогенным бактериям двух родов семейства Enterobacteriaceae (Escherichia и Shigella), депонированный в коллекции музея микроорганизмов (ФБУН ГНЦ ПМБ Роспотребнадзора) под номером Ph 64, фильтрат фаголизата Escherichia coli, содержащий коли бактериофаг в виде вирулентного бактериофага, фильтрат стафилококкового фаголизата, содержащий стафилококковый бактериофаг в виде вирулентного бактериофага, фильтрат фаголизата Salmonella enteritidis, содержащий сальмонеллезный бактериофаг в виде бактериофага с индуцированной вирулентностью, обладающие литической активностью по отношению к Salmonella enteritidis, фильтрат фаголизата Salmonella infantis, содержащий сальмонеллезный бактериофаг в виде вирулентного бактериофага и бактериофага с индуцированной вирулентностью, обладающие литической активностью по отношению к Salmonella infantis, фильтрат фаголизата Salmonella typhimurium, содержащий сальмонеллезный бактериофаг в виде вирулентного бактериофага и бактериофага с индуцированной вирулентностью, обладающие литической активностью по отношению к Salmonella typhimurium, фильтрат фаголизата Listeria monocyctogenes, содержащий листериозный бактериофаг в виде вирулентного бактериофага и бактериофага с индуцированной вирулентностью. Композиция также включала целевые добавки в количестве 1,0 мас.% от массы композиции в виде смеси ингредиентов, выбранных из ряда: сироп корня солодки, пектин яблочный и глицин. Проведены исследования стабильности поливалентной активности штамма бактериофага Escherichia coli ECD7 в образцах композиции, хранящихся в течение года, и тестирование всех бактериофагов композиции на лизогению. Литическая активность поливалентного штамма бактериофага Escherichia coli ECD7 по отношению к чувствительным к нему штаммам Escherichia coli серотипов O104:Н4, O157:Н7, O104:Н12, O6, O26, O126, O25, O78 и К-12 C600F, чувствительным к нему штаммам Shigella sonnet, Shigella flexneri составляла не ниже 10-4 по Аппельману. Литическая активность других штаммов бактериофагов композиции также составляла не ниже 10-4 по Аппельману. Тесты на лизогению были отрицательные. Для испытания биодоступности полученной композиции ее образец массой 0,6 г вносился в среду 199. Отмечалось равномерное диспергирование препарата в водной среде и сохранение в растворе не менее 99% литической активности композиции.Example 5. The obtained antibacterial composition with lytic activity not lower than 10 -4 according to Appelman in relation to test strains and bacterial isolates isolated from the human body, including Escherichia coli phagolysate filtrate containing multivalent bacteriophage Escherichia coli ECD7, having lytic activity against pathogenic bacteria two genera of the Enterobacteriaceae family (Escherichia and Shigella), deposited in the collection of the Museum of Microorganisms (FBUN SSC PMB Rospotrebnadzor) under the number Ph 64, filtrate of the Escherichia coli phagolysate containing coli bacterioph ag in the form of a virulent bacteriophage, staphylococcal phagolysate filtrate containing a staphylococcal bacteriophage in the form of a virulent bacteriophage, salmonella enteritidis phagolysate filtrate, containing a salmonella bacteriophage in the form of a bacteriophage with virulence-induced lytic activity of phallis integella in the form of a virulent bacteriophage and a bacteriophage with induced virulence, with lytic activity in relation July to Salmonella infantis, a filtrate of the salmonella typhimurium phagolysate containing salmonella bacteriophage in the form of a virulent bacteriophage and a bacteriophage with induced virulence, having lytic activity against Salmonella typhimurium, a phage of the phage golysate Listeria monocyctogenes bacteriophage vaginoformagirusofile bacteriophage vaginophagous bacteriophage vaginoformagirus. The composition also included targeted additives in an amount of 1.0 wt.% By weight of the composition in the form of a mixture of ingredients selected from the range: licorice root syrup, apple pectin and glycine. The stability studies of the multivalent activity of the bacteriophage strain Escherichia coli ECD7 in the samples of the composition stored for a year, and testing of all bacteriophages of the composition for lysogenesis were studied. The lytic activity of the polyvalent strain of the bacteriophage Escherichia coli ECD7 in relation to the strains of Escherichia coli sensitive to it, serotypes O104: H4, O157: H7, O104: H12, O6, O26, O126, O25, O78 and K-12 C600F, Shigella strains sensitive to it sonnet, Shigella flexneri was at least 10 -4 according to Appelman. The lytic activity of other strains of bacteriophage composition was also not less than 10 -4 according to Appelman. Tests for lysogenesis were negative. To test the bioavailability of the obtained composition, its sample weighing 0.6 g was introduced into medium 199. It was noted that the preparation was uniformly dispersed in an aqueous medium and that the solution retained at least 99% of the lytic activity of the composition.
Пример. 6. Проверка взаимодействия бактериофагов композиции антибактериальной с производственными штаммами лактобацилл и бифидобактерий. В 4 пробирки с 9 мл бифидум-среды (ФБУН ГНЦ ПМБ Роспотребнадзора) вносили по 1 мл суточной культуры (также выращенной на бифидум-среде при 38°С) одного из производственных штаммов лактобацилл или бифидобактерий (Lactobacillus acidophilus NK1, Lactobacillus acidophilus 100аш, Lactobacillus acidophilus K3III24, Lactobacillus plantarum 8P-A3, Bifidobacterium adolescentis MC-42, Bifidobacterium bifidum 1, Bifidobacterium bifidum 791, Bifidobacterium bifidum ЛВА-3, Bifidobacterium longum Я-3, Bifidobacterium breve 79-119, Bifidobacterium infantis 73-15) в концентрации 103 КОЕ/мл. Одна пробирка была контрольная (в среду добавляли только производственный штамм). В две другие опытные пробирки вносили по 1 мл композиции антибактериальной. В четвертую пробирку сравнения вносили 1 мл интести-бактериофага (ФГУП «НПО «Микроген» Минздравсоцразвития России). Содержимое пробирок перемешивали пипетированием и инкубировали в течение 17 часов при температуре 38°С. Оценку роста производственных штаммов проводили путем визуального сравнения оптической плотности содержимого пробирок. Сомнительные случаи проверяли титрованием. Оптическая плотность содержимого каждого ряда из четырех пробирок была одинаковая. Все штаммы лактобацилл и бифидобактерий вырастали в каждом из четырех рядов пробирок одинаково.Example. 6. Checking the interaction of bacteriophages of the antibacterial composition with industrial strains of lactobacilli and bifidobacteria. In 4 test tubes with 9 ml of bifidum medium (FBUN SSC PMB Rospotrebnadzor), 1 ml of daily culture (also grown on bifidum medium at 38 ° C) of one of the production strains of lactobacilli or bifidobacteria (Lactobacillus acidophilus NK1, Lactobacillus acidophilus acidophilus K3III24, Lactobacillus plantarum 8P-A3, Bifidobacterium adolescentis MC-42, Bifidobacterium bifidum 1, Bifidobacterium bifidum 791, Bifidobacterium bifidum LVA-3, Bifidobacterium longum I-3, Bifidobidium bium 79-1, Bifidobidium bacterium 73, Bid 3 CFU / ml. One tube was a control (only the production strain was added to the medium). In two other test tubes, 1 ml of the antibacterial composition was added. In the fourth test tube, 1 ml of the Intesti-bacteriophage was introduced (FSUE NPO Microgen of the Ministry of Health and Social Development of Russia). The contents of the tubes were mixed by pipetting and incubated for 17 hours at a temperature of 38 ° C. Growth of production strains was assessed by visual comparison of the optical density of the contents of the tubes. Doubtful cases were checked by titration. The optical density of the contents of each row of four tubes was the same. All strains of lactobacilli and bifidobacteria grew equally in each of the four rows of tubes.
Пример 7. Проверка взаимодействия бактериофагов композиции антибактериальной с нормальной микрофлорой кишечника, выделенной от 50 пациентов. Фекалии, полученные от пациентов, суспендировали в физиологическом растворе из расчета 1 г фекалий на 9 мл физиологического раствора. Далее из основного разведения суспензий делали ряд последующих разведении в физиологическом растворе. Для проверки взаимодействия бактериофагов композиции антибактериальной с бифидобактериями по 1 мл суспензии из каждой пробирки полученного ряда разведении суспензий вносили в опытные пробирки, содержащие 9 мл бифидум-среды (ФБУН ГНЦ ПМБ Роспотребнадзора), и 1 мл испытуемой композиции антибактериальной. В контрольные пробирки композицию антибактериальную не добавляли. В пробирку сравнения вместо композиции антибактериальной вносили 1 мл интести-бактериофага (ФГУП «НПО «Микроген» Минздравсоцразвития России). Все образцы культивировали при 37°С двое суток, после чего сравнивали темпы роста и морфологию бифидобактерий. Угнетение роста бифидобактерий не происходило. Для проверки взаимодействия бактериофагов композиции антибактериальной с лактобациллами по 1 мл суспензии из каждой пробирки полученного ряда разведении суспензий вносили в опытные пробирки, содержащие 4,5 мл среды МРС-4 (ОАО «Биомед» им. И.И. Мечникова), и 0,5 мл испытуемой композиции антибактериальной. В контрольные пробирки композицию антибактериальную не добавляли. В пробирку сравнения вместо композиции антибактериальной вносили 1 мл интести-бактериофага (ФГУП «НПО «Микроген» Минздравсоцразвития России). Все образцы культивировали при 37°С двое суток, после чего сравнивали темпы роста и морфологию лактобацилл. Угнетение роста лактобацилл не происходило. Для проверки взаимодействия бактериофагов композиции антибактериальной с изолятами нормальной кишечной палочки использовали среду Эндо (НПО «Питательные среды», г.Махачкала). Через 24 часа инкубации в термостате при 37°С выделяли характерные для кишечной палочки колонии и идентифицировали их. Из типичных колоний готовили микробную взвесь, соответствующую по плотности 10 ед. ОСО - 0,93×109 клеток/мл. Каплю взвеси наносили на чашку Петри с плотной питательной средой на основе кровяного агара и растирали шпателем до полного высыхания по всей поверхности чашки равномерно. Делили чашку на три сектора. Через 30 мин на засеянную поверхность в первый сектор наносили каплю композиции антибактериальной, каплю интести-бактериофага - во второй сектор, а третий сектор оставляли интактным. Затем посевы термостатировали сутки при температуре 37°С. Результаты исследования оценивали визуально по наличию или отсутствию пятна лизиса в секторе. Композиция антибактериальная ни в одном случае не лизировала нормальную кишечную палочку. В 30% случаев (15 образцов штаммов нормальной кишечной палочки, выделенной от пациентов) интести-бактериофаг лизировал нормальную кишечную палочку.Example 7. Verification of the interaction of bacteriophages of an antibacterial composition with normal intestinal microflora isolated from 50 patients. Feces obtained from patients were suspended in saline at the rate of 1 g of feces per 9 ml of saline. Further, from the main dilution of suspensions, a number of subsequent dilutions were made in physiological saline. To check the interaction of bacteriophages of the antibacterial composition with bifidobacteria, 1 ml of suspension from each tube of the obtained dilution series of suspensions was introduced into test tubes containing 9 ml of bifidum medium (FBUN SSC PMB Rospotrebnadzor), and 1 ml of the tested antibacterial composition. No antibacterial composition was added to control tubes. Instead of an antibacterial composition, 1 ml of an Intesti-bacteriophage was introduced into the comparison tube (FSUE NPO Microgen of the Ministry of Health and Social Development of Russia). All samples were cultured at 37 ° C for two days, after which growth rates and the morphology of bifidobacteria were compared. Inhibition of growth of bifidobacteria did not occur. To test the interaction of bacteriophages of the antibacterial composition with lactobacilli, 1 ml of suspension from each tube of the obtained dilution series of suspensions was introduced into test tubes containing 4.5 ml of medium MPC-4 (Biomed OJSC named after II Mechnikov), and 0, 5 ml of the tested composition is antibacterial. No antibacterial composition was added to control tubes. Instead of an antibacterial composition, 1 ml of an Intesti-bacteriophage was introduced into the comparison tube (FSUE NPO Microgen of the Ministry of Health and Social Development of Russia). All samples were cultured at 37 ° C for two days, after which the growth rates and morphology of lactobacilli were compared. Inhibition of the growth of lactobacilli did not occur. To check the interaction of bacteriophages of the antibacterial composition with isolates of normal Escherichia coli, Endo medium was used (NPO Nutrient mediums, Makhachkala). After 24 hours of incubation in a thermostat at 37 ° C, colonies characteristic of E. coli were isolated and identified. A microbial suspension corresponding to a density of 10 units was prepared from typical colonies. TOC - 0.93 × 10 9 cells / ml. A drop of suspension was applied to a Petri dish with a dense nutrient medium based on blood agar and triturated with a spatula until completely dry over the entire surface of the cup evenly. They divided the cup into three sectors. After 30 minutes, a drop of the antibacterial composition was applied to the seeded surface in the first sector, a drop of intestinal bacteriophage in the second sector, and the third sector was left intact. Then the crops were thermostatically controlled at a temperature of 37 ° C. The results of the study were evaluated visually by the presence or absence of a lysis spot in the sector. The antibacterial composition in no case did not lyse a normal E. coli. In 30% of cases (15 samples of strains of normal Escherichia coli isolated from patients), an intestinal bacteriophage lysed normal Escherichia coli.
Пример 8. Пациент П., 53 года. Диагноз: Энтероколит. При микробиологическом исследовании в фекалиях была выявлена Escherichia coli серотипа O104:Н4. Затем пациенту перорально в количестве 40 мл 3 раза в сутки в течение 7 дней вводилась композиция антибактериальная, включающая фильтрат фаголизата Escherichia coli, содержащий штамм бактериофага Escherichia coli, депонированный в коллекции музея микроорганизмов Федерального бюджетного учреждения науки «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН ГНЦ ПМБ Роспотребнадзора) под номером Ph 64, фильтрат фаголизата Escherichia coli, содержащий коли бактериофаг, фильтрат стафилококкового фаголизата, фильтрат сальмонеллезного фаголизата, фильтрат фаголизата Listeria monocyctogenes и целевые добавки в количестве 1,0 мас.% от массы композиции. После прохождения курса терапии с использованием композиции антибактериальной клинические проявления энтероколита разрешились, Escherichia coli серотипа O104:Н4 микробиологическим методом в фекалиях не обнаруживалась.Example 8. Patient P., 53 years old. Diagnosis: Enterocolitis. A microbiological examination in feces revealed Escherichia coli serotype O104: H4. Then, the patient was orally in an amount of 40 ml 3 times a day for 7 days, an antibacterial composition was introduced, including the Escherichia coli phagolysate filtrate containing the bacteriophage strain Escherichia coli, deposited in the collection of the Museum of microorganisms of the Federal budget institution of science "State scientific center of applied microbiology and biotechnology" of the Federal Surveillance services in the field of consumer protection and human welfare (FBUN SSC PMB Rospotrebnadzor) under the number Ph 64, the filtrate of the phagolysate of Escherichia coli, containing oli bacteriophage filtrate staphylococcal fagolizata filtrate fagolizata Salmonella, Listeria monocyctogenes fagolizata filtrate and desired additives in an amount of 1.0 wt.% of the composition. After undergoing a course of therapy using an antibacterial composition, the clinical manifestations of enterocolitis resolved; Escherichia coli serotype O104: H4 was not detected in the feces by microbiological method.
Пример 9. Пациентка А., 45 лет. Диагноз: Сальмонеллез. При микробиологическом исследовании в фекалиях была выявлена Salmonella typhimurium. Затем пациентке перорально в количестве 30 мл 3 раза в сутки в течение 7 дней вводилась композиция антибактериальная, включающая фильтрат фаголизата Escherichia coli, содержащий штамм бактериофага Escherichia coli, депонированный в коллекции музея микроорганизмов Федерального бюджетного учреждения науки «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН ГНЦ ПМБ Роспотребнадзора) под номером Ph 64, фильтрат фаголизата Escherichia coli, содержащий коли бактериофаг, фильтрат стафилококкового фаголизата, фильтрат сальмонеллезного фаголизата, фильтрат фаголизата Listeria monocyctogenes и целевые добавки в количестве 45,0 мас.% от массы композиции. После прохождения курса терапии с использованием композиции антибактериальной клинические проявления сальмонеллеза разрешились, Salmonella typhimurium микробиологическим методом в фекалиях не обнаруживалась.Example 9. Patient A., 45 years old. Diagnosis: Salmonellosis. Microbiological examination in feces revealed Salmonella typhimurium. Then the patient received an oral antibiotic composition in an amount of 30 ml 3 times a day for 7 days, including the Escherichia coli phagolysate filtrate containing the bacteriophage strain Escherichia coli, deposited in the collection of the Museum of microorganisms of the Federal budget institution of science "State scientific center of applied microbiology and biotechnology" of the Federal Surveillance services in the field of consumer protection and human welfare (FBUN SSC PMB Rospotrebnadzor) under the number Ph 64, the filtrate of the phagolysate of Escherichia coli, containing if a bacteriophage, staphylococcal phagolysate filtrate, salmonella phagolysate filtrate, Listeria monocyctogenes phagolysate filtrate and target additives in an amount of 45.0% by weight of the composition. After undergoing a course of therapy using an antibacterial composition, the clinical manifestations of salmonellosis resolved; Salmonella typhimurium was not detected in the feces by microbiological method.
Пример 10. Пациент С., 32 года. Диагноз: Энтероколит. При микробиологическом исследовании в фекалиях была выявлена Escherichia coli серотипа O157:Н7. Затем пациенту перорально в количестве 40 мл 3 раза в сутки в течение 5 дней вводилась композиция антибактериальная, включающая фильтрат фаголизата Escherichia coli, содержащий штамм бактериофага Escherichia coli, депонированный в коллекции музея микроорганизмов Федерального бюджетного учреждения науки «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН ГНЦ ПМБ Роспотребнадзора) под номером Ph 64, фильтрат фаголизата Escherichia coli, содержащий коли бактериофаг, фильтрат стафилококкового фаголизата, фильтрат сальмонеллезного фаголизата, фильтрат фаголизата Listeria monocyctogenes и целевые добавки в количестве 95,0 мас.% от массы композиции. После прохождения курса терапии с использованием композиции антибактериальной клинические проявления энтероколита разрешились, Escherichia coli серотипа O157:Н7 микробиологическим методом в фекалиях не обнаруживалась.Example 10. Patient S., 32 years old. Diagnosis: Enterocolitis. A microbiological examination in feces revealed Escherichia coli serotype O157: H7. Then the patient was orally in an amount of 40 ml 3 times a day for 5 days, an antibacterial composition was introduced, including the Escherichia coli phagolysate filtrate containing the bacteriophage strain Escherichia coli, deposited in the collection of the Museum of microorganisms of the Federal budget institution of science "State scientific center of applied microbiology and biotechnology" of the Federal Surveillance services in the field of consumer protection and human welfare (FBUN SSC PMB Rospotrebnadzor) under the number Ph 64, the filtrate of the phagolysate of Escherichia coli, containing oli bacteriophage filtrate staphylococcal fagolizata filtrate fagolizata Salmonella, Listeria monocyctogenes fagolizata filtrate and desired additives in an amount of 95.0 wt.% of the composition. After undergoing a course of therapy using an antibacterial composition, the clinical manifestations of enterocolitis resolved; Escherichia coli serotype O157: H7 was not detected in the feces by microbiological method.
Пример 11. Проверка профилактического действия композиции антибактериальной. В стационарах лечебно-профилактического учреждения города N наблюдались случаи нозокомиальной инфекции, вызванной Salmonella typhimurium. Каждому второму пациенту, поступающему в стационар, в количестве 40 мл 3 раза в сутки в течение 6 дней вводилась композиция антибактериальная, включающая фильтрат фаголизата Escherichia coli, содержащий штамм бактериофага Escherichia coli, депонированный в коллекции музея микроорганизмов Федерального бюджетного учреждения науки «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН ГНЦ ПМБ Роспотребнадзора) под номером Ph 64, фильтрат фаголизата Escherichia coli, содержащий коли бактериофаг, фильтрат стафилококкового фаголизата, фильтрат сальмонеллезного фаголизата, фильтрат фаголизата Listeria monocyctogenes и целевые добавки в количестве 1,0 мас.% от массы композиции. Среди пациентов, не получавших композицию антибактериальную, наблюдались случаи нозокомиальной инфекции, вызванной Salmonella typhimurium. Среди пациентов, получавших композицию антибактериальную, случаи нозокомиальной инфекции, вызванной Salmonella typhimurium, не наблюдались.Example 11. Verification of the prophylactic effect of an antibacterial composition. In hospitals of the city N treatment-and-prophylactic institution, cases of nosocomial infection caused by Salmonella typhimurium were observed. Every second patient entering the hospital, in an amount of 40 ml 3 times a day for 6 days, was given an antibacterial composition, including the Escherichia coli phagolysate filtrate containing the bacteriophage strain Escherichia coli, deposited in the collection of the Museum of microorganisms of the Federal budget institution of science “State Scientific Center for Applied Science Microbiology and Biotechnology »of the Federal Service for Supervision of Consumer Rights Protection and Human Well-Being (FBUN SSC PMB Rospotrebnadzor) under the number Ph 64, filtrate phagolysis Escherichia coli ata containing coli bacteriophage, staphylococcal phagolysate filtrate, salmonella phagolysate filtrate, Listeria monocyctogenes phagolysate filtrate and target additives in an amount of 1.0% by weight of the composition. Among patients who did not receive the antibacterial composition, there were cases of nosocomial infection caused by Salmonella typhimurium. Among patients treated with the antibacterial composition, no nosocomial infection caused by Salmonella typhimurium was observed.
Пример 12. Проверка профилактического действия композиции антибактериальной. В городе N в летний период среди туристов наблюдались случаи инфекции, вызванной Salmonella enteritidis. Группе туристов в количестве 100 человек, приехавших в город N, в количестве 40 мл 3 раза в сутки в течение 6 дней вводилась композиция антибактериальная, включающая фильтрат фаголизата Escherichia coli, содержащий штамм бактериофага Escherichia coli, депонированный в коллекции музея микроорганизмов Федерального бюджетного учреждения науки «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН ГНЦ ПМБ Роспотребнадзора) под номером Ph 64, фильтрат фаголизата Escherichia coli, содержащий коли бактериофаг, фильтрат стафилококкового фаголизата, фильтрат сальмонеллезного фаголизата, фильтрат фаголизата Listeria monocyctogenes и целевые добавки в количестве 55,0 мас.% от массы композиции. Среди туристов, не получавших композицию антибактериальную, наблюдались случаи инфекции, вызванной Salmonella enteritidis. Среди туристов, получавших композицию антибактериальную, случаи инфекции, вызванной Salmonella enteritidis, не наблюдались.Example 12. Verification of the prophylactic effect of an antibacterial composition. In the city of N, during the summer, among tourists, there were cases of infection caused by Salmonella enteritidis. A group of tourists in the amount of 100 people who arrived in the city of N, in the amount of 40 ml 3 times a day for 6 days, was injected with an antibacterial composition, including the Escherichia coli phagolysate filtrate containing the bacteriophage strain Escherichia coli, deposited in the collection of the Museum of microorganisms of the Federal budget institution of science " State Scientific Center for Applied Microbiology and Biotechnology of the Federal Service for Supervision of Consumer Rights Protection and Human Well-Being (FBUN SSC PMB Rospotrebnadzor) under the number Ph 64, filter fagolizata Escherichia coli, comprising coli bacteriophage filtrate staphylococcal fagolizata filtrate fagolizata Salmonella, Listeria monocyctogenes fagolizata filtrate and desired additives in an amount of 55.0 wt.% of the composition. Among tourists who did not receive the antibacterial composition, there were cases of infection caused by Salmonella enteritidis. Among tourists receiving the antibacterial composition, no cases of Salmonella enteritidis infection were observed.
Пример 13. Проверка профилактического действия композиции антибактериальной. На предприятии общественного питания города N среди клиентов наблюдались случаи пищевой инфекции, вызванной Escherichia coli серотипа O157:Н7. Каждому второму клиенту, посещающему предприятие общественного питания, в количестве 40 мл 3 раза в сутки в течение 5 дней вводилась композиция антибактериальная, включающая фильтрат фаголизата Escherichia coli, содержащий штамм бактериофага Escherichia coli, депонированный в коллекции музея микроорганизмов Федерального бюджетного учреждения науки «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН ГНЦ ПМБ Роспотребнадзора) под номером Ph 64, фильтрат фаголизата Escherichia coli, содержащий коли бактериофаг, фильтрат стафилококкового фаголизата, фильтрат сальмонеллезного фаголизата, фильтрат фаголизата Listeria monocyctogenes и целевые добавки в количестве 95,0 мас.% от массы композиции. Среди клиентов, не получавших композицию антибактериальную, наблюдались случаи кишечной инфекции, вызванной Escherichia coli серотипа O157:Н7. Среди клиентов, получавших композицию антибактериальную, случаи кишечной инфекции, вызванной Escherichia coli серотипа O157:Н7, не наблюдались. С целью дальнейшего предотвращения распространения кишечной инфекции, вызванной Escherichia coli серотипа O157:Н7, деятельность предприятия была приостановлена на 5 дней и персоналу предприятия количестве 40 мл 3 раза в сутки в течение 5 дней вводилась композиция антибактериальная, включающая фильтрат фаголизата Escherichia coli, содержащий штамм бактериофага Escherichia coli, депонированный в коллекции музея микроорганизмов Федерального бюджетного учреждения науки «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН ГНЦ ПМБ Роспотребнадзора) под номером РП 64, фильтрат фаголизата Escherichia coli, содержащий коли бактериофаг, фильтрат стафилококкового фаголизата, фильтрат сальмонеллезного фаголизата, фильтрат фаголизата Listeria monocyctogenes и целевые добавки в количестве 95,0 мас.% от массы композиции. После этого случаи кишечной инфекции, вызванной Escherichia coli серотипа O157:Н7, на предприятии общественного питания среди клиентов прекратились.Example 13. Verification of the prophylactic effect of an antibacterial composition. At the N city food service enterprise, there were cases of foodborne infection among clients caused by Escherichia coli serotype O157: H7. Every second client visiting a catering company, in the amount of 40 ml 3 times a day for 5 days, was given an antibacterial composition, including the Escherichia coli phagolysate filtrate containing the bacteriophage strain Escherichia coli, deposited in the collection of the Museum of microorganisms of the Federal budget institution of science “State Scientific Center Applied Microbiology and Biotechnology ”of the Federal Service for Supervision of Consumer Rights Protection and Human Well-being (FBUN SSC PMB Rospotrebnadzor) under the number Ph 64, Escherichia coli phagolysate filtrate containing coli bacteriophage, staphylococcal phagolysate filtrate, salmonella phagolysate filtrate, Listeria monocyctogenes phagolysate filtrate and target additives in an amount of 95.0% by weight of the composition. Among clients who did not receive the antibacterial composition, there were cases of intestinal infection caused by Escherichia coli serotype O157: H7. Among clients receiving the antibacterial composition, there were no cases of intestinal infection caused by Escherichia coli serotype O157: H7. In order to further prevent the spread of intestinal infection caused by Escherichia coli serotype O157: H7, the activity of the enterprise was suspended for 5 days and the personnel of the enterprise in the amount of 40 ml 3 times a day for 5 days was given an antibacterial composition, including Escherichia coli phagolysate filtrate containing a bacteriophage strain Escherichia coli deposited in the collection of the Museum of Microorganisms of the Federal Budgetary Institution of Science "State Scientific Center for Applied Microbiology and Biotechnology" of the Federal Service on Supervision of Consumer Rights Protection and Human Well-being (FBSI SSC PMB Rospotrebnadzor) under the number РП 64, Escherichia coli phagolysate filtrate containing coli bacteriophage, staphylococcal phagolysate filtrate, salmonella phagolysate filtrate, and Listeria monocyctogen wt.% by weight of the composition. After this, cases of intestinal infection caused by Escherichia coli serotype O157: H7 stopped at the catering facility among customers.
Claims (11)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012127139/10A RU2518303C2 (en) | 2012-06-29 | 2012-06-29 | ANTIBACTERIAL COMPOSITION, STRAIN OF BACTERIOPHAGE Escherichia coli, USED FOR OBTAINING THEREOF |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012127139/10A RU2518303C2 (en) | 2012-06-29 | 2012-06-29 | ANTIBACTERIAL COMPOSITION, STRAIN OF BACTERIOPHAGE Escherichia coli, USED FOR OBTAINING THEREOF |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2012127139A RU2012127139A (en) | 2014-01-10 |
| RU2518303C2 true RU2518303C2 (en) | 2014-06-10 |
Family
ID=49884096
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2012127139/10A RU2518303C2 (en) | 2012-06-29 | 2012-06-29 | ANTIBACTERIAL COMPOSITION, STRAIN OF BACTERIOPHAGE Escherichia coli, USED FOR OBTAINING THEREOF |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2518303C2 (en) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2565559C1 (en) * | 2014-11-19 | 2015-10-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт химической биологии и фундаментальной медицины Сибирского отделения Российской академии наук (ИХБФМ СО РАН) | STRAIN OF BACTERIOPHAGE Citrobacter freundii CF17 ABLE TO LYSE PATHOGENIC STRAINS CITROBACTER FREUNDII |
| RU2628312C2 (en) * | 2015-03-16 | 2017-08-15 | Общество с ограниченной ответственностью "БиФаг" | Antibacterial composition for prevention or treatment of hospital infections (versions), bacteriophage stamps used to obtain such composition |
| RU2644667C1 (en) * | 2016-12-23 | 2018-02-13 | Андрей Владимирович Алешкин | Antibacterial composition for the extension of the expiry date of frozen fish and the risk reduction of food-infection-based infections, bacteriophagic stamps used for its obtaining |
| RU2730615C1 (en) * | 2019-05-08 | 2020-08-24 | федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н.Ф. Гамалеи» Министерства здравоохранения Российской Федерации | Antibacterial composition (embodiments) and use of protein as antimicrobial agent directed against gram-negative bacteria: pseudomonas aeruginosa, acinetobacter baumannii, klebsiella pneumoniae and salmonella typhi (embodiments) |
| RU2730616C1 (en) * | 2019-05-08 | 2020-08-24 | федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н.Ф. Гамалеи" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Antibacterial composition (embodiments) and use of protein as an antimicrobial agent directed against acinetobacter baumannii bacteria, (embodiments) |
| RU2732792C1 (en) * | 2020-02-28 | 2020-09-22 | Общество с ограниченной ответственностью "Центр биотехнологической обработки продуктов питания при институте прикладной микроэкологии" | Method of phage-mediated bioprocessing for extension of shelf life of cooled fish |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114369579B (en) * | 2021-09-27 | 2023-03-14 | 东北农业大学 | Bacteriophage for efficiently cracking cronobacter sakazakii and application thereof |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2244747C2 (en) * | 2002-11-01 | 2005-01-20 | Закрытое акционерное общество "ПИ-ПРО-ЛАЙФ" | Bacteriophage-base biopreparation for prophylaxis and treatment of colibacillosis (eshcerichiosis)in animals |
| EP1305038B1 (en) * | 2000-07-25 | 2005-10-05 | THE GOVERNMENT OF THE UNITED STATES OF AMERICA, as represented by THE SECRETARY, DEPARTMENT OF HEALTH AND HUMAN SERVICES | Bacteriophage having multiple host range |
| RU2366437C2 (en) * | 2007-10-29 | 2009-09-10 | Общество с ограниченной ответственностью "Амфита" (ООО "Амфита") | Bacteriophage composition (versions) |
| RU2410084C1 (en) * | 2009-06-19 | 2011-01-27 | Федеральное государственное унитарное предприятие "Научно-производственное объединение по медицинским иммунобиологическим препаратам "Микроген" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Sextaphage (pyobacteriophage polyvalent) or bacteriophage salmonellous pharmaceutical composition and method for producing thereof |
| US20110052542A1 (en) * | 2009-09-03 | 2011-03-03 | Cj Cheiljedang Corporation | Novel bacteriophage and antibacterial composition comprising the same |
-
2012
- 2012-06-29 RU RU2012127139/10A patent/RU2518303C2/en active
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1305038B1 (en) * | 2000-07-25 | 2005-10-05 | THE GOVERNMENT OF THE UNITED STATES OF AMERICA, as represented by THE SECRETARY, DEPARTMENT OF HEALTH AND HUMAN SERVICES | Bacteriophage having multiple host range |
| RU2244747C2 (en) * | 2002-11-01 | 2005-01-20 | Закрытое акционерное общество "ПИ-ПРО-ЛАЙФ" | Bacteriophage-base biopreparation for prophylaxis and treatment of colibacillosis (eshcerichiosis)in animals |
| RU2366437C2 (en) * | 2007-10-29 | 2009-09-10 | Общество с ограниченной ответственностью "Амфита" (ООО "Амфита") | Bacteriophage composition (versions) |
| RU2410084C1 (en) * | 2009-06-19 | 2011-01-27 | Федеральное государственное унитарное предприятие "Научно-производственное объединение по медицинским иммунобиологическим препаратам "Микроген" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Sextaphage (pyobacteriophage polyvalent) or bacteriophage salmonellous pharmaceutical composition and method for producing thereof |
| US20110052542A1 (en) * | 2009-09-03 | 2011-03-03 | Cj Cheiljedang Corporation | Novel bacteriophage and antibacterial composition comprising the same |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2565559C1 (en) * | 2014-11-19 | 2015-10-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт химической биологии и фундаментальной медицины Сибирского отделения Российской академии наук (ИХБФМ СО РАН) | STRAIN OF BACTERIOPHAGE Citrobacter freundii CF17 ABLE TO LYSE PATHOGENIC STRAINS CITROBACTER FREUNDII |
| RU2628312C2 (en) * | 2015-03-16 | 2017-08-15 | Общество с ограниченной ответственностью "БиФаг" | Antibacterial composition for prevention or treatment of hospital infections (versions), bacteriophage stamps used to obtain such composition |
| RU2644667C1 (en) * | 2016-12-23 | 2018-02-13 | Андрей Владимирович Алешкин | Antibacterial composition for the extension of the expiry date of frozen fish and the risk reduction of food-infection-based infections, bacteriophagic stamps used for its obtaining |
| RU2730615C1 (en) * | 2019-05-08 | 2020-08-24 | федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н.Ф. Гамалеи» Министерства здравоохранения Российской Федерации | Antibacterial composition (embodiments) and use of protein as antimicrobial agent directed against gram-negative bacteria: pseudomonas aeruginosa, acinetobacter baumannii, klebsiella pneumoniae and salmonella typhi (embodiments) |
| RU2730616C1 (en) * | 2019-05-08 | 2020-08-24 | федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н.Ф. Гамалеи" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Antibacterial composition (embodiments) and use of protein as an antimicrobial agent directed against acinetobacter baumannii bacteria, (embodiments) |
| RU2732792C1 (en) * | 2020-02-28 | 2020-09-22 | Общество с ограниченной ответственностью "Центр биотехнологической обработки продуктов питания при институте прикладной микроэкологии" | Method of phage-mediated bioprocessing for extension of shelf life of cooled fish |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2012127139A (en) | 2014-01-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2518303C2 (en) | ANTIBACTERIAL COMPOSITION, STRAIN OF BACTERIOPHAGE Escherichia coli, USED FOR OBTAINING THEREOF | |
| Prabhurajeshwar et al. | Probiotic potential of Lactobacilli with antagonistic activity against pathogenic strains: An in vitro validation for the production of inhibitory substances | |
| Sharma et al. | Effect of bacteriocin and exopolysaccharides isolated from probiotic on P. aeruginosa PAO1 biofilm | |
| Campana et al. | Antagonistic activity of Lactobacillus acidophilus ATCC 4356 on the growth and adhesion/invasion characteristics of human Campylobacter jejuni | |
| Nascimento et al. | Probiotic potential and safety of enterococci strains | |
| US9255246B2 (en) | Use of lactobacilli inhibiting gas producing coliform bacterial isolated from infants affected by colic | |
| WO2016003307A1 (en) | Bacteriophage strains, compositions and related methods | |
| Jeronymo-Ceneviva et al. | Probiotic properties of lactic acid bacteria isolated from water-buffalo mozzarella cheese | |
| Al-Bahry et al. | Staphylococcus aureus contamination during food preparation, processing and handling | |
| Kowalska et al. | Anti-salmonella potential of new strains with the application in the poultry industry | |
| Yu et al. | Screening for Lactobacillus plantarum with potential inhibitory activity against enteric pathogens | |
| Altun et al. | Identification and characterization of Bacillus coagulans strains for probiotic activity and safety | |
| Kumar et al. | Lactobacillus plantarum (VR1) isolated from an Ayurvedic medicine (Kutajarista) ameliorates in vitro cellular damage caused by Aeromonas veronii | |
| RU2460778C1 (en) | Method for producing autoprobiotic of enterocuccus faecium being representative of indigenic host intestinal microflora | |
| Park et al. | Characterization of Lactobacillus fermentum PL9988 isolated from healthy elderly Korean in a longevity village | |
| AL-Saadi | Estimation of minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC) of cell-free extracts of Bifidobacterium species against methicillin-resistant Staphylococcus aureus in vitro | |
| RU2553372C1 (en) | Method of prevention post-infectious irritable bowel syndrome | |
| US11285181B2 (en) | Lactic acid bacteria, methods and uses thereof | |
| Hock et al. | Biocontrol potential of phage Deep-Blue against psychrotolerant Bacillus weihenstephanensis | |
| Ahmed14TP0F | In vitro screening of Lactobacillus species from homemade yoghurt for antagonistic effects against common bacterial pathogens | |
| Feng et al. | Probiotic properties of Lactobacillus plantarum and application in prebiotic gummies | |
| Siddique et al. | Efficacy of lytic bacteriophages against multidrug resistant salmonella enteritidis from milk and meat. | |
| Salleh et al. | Antimicrobial activity of cell free supernatant of lactic acid bacteria isolated from fermented Durian flesh against multiple antibiotic resistance’s Salmonella associated with food poisoning cases in Malaysia | |
| Geng et al. | In vitro screening of synbiotics composed of Lactobacillus paracasei VL8 and various prebiotics and mechanism to inhibits the growth of Salmonella Typhimurium | |
| Mohammed et al. | Antimicrobial activity of probiotic lactobacilli against some pathogenic bacteria |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| QB4A | Licence on use of patent |
Free format text: LICENCE Effective date: 20141124 |