RU2517213C2 - Agent of peptide structure possessing anti-inflammatory, antibacterial, wound-healing, regenerative, analgesic, burntreating action and based dosage forms - Google Patents
Agent of peptide structure possessing anti-inflammatory, antibacterial, wound-healing, regenerative, analgesic, burntreating action and based dosage forms Download PDFInfo
- Publication number
- RU2517213C2 RU2517213C2 RU2012133274/15A RU2012133274A RU2517213C2 RU 2517213 C2 RU2517213 C2 RU 2517213C2 RU 2012133274/15 A RU2012133274/15 A RU 2012133274/15A RU 2012133274 A RU2012133274 A RU 2012133274A RU 2517213 C2 RU2517213 C2 RU 2517213C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- wound
- pro
- och
- inflammatory
- substance
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/05—Dipeptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области биологически активных соединений и может быть использовано для получения ранозаживляющих лекарственных препаратов для лечения повреждения кожи, ран, ожогов и кожных заболеваний, способа его получения.The invention relates to the field of biologically active compounds and can be used to obtain wound healing drugs for the treatment of skin damage, wounds, burns and skin diseases, a method for its preparation.
Проблема лечения ран, ожогов и других повреждений кожи, несмотря на большое разнообразие предлагаемых методов и препаратов, остается актуальной. В большинстве случаев при лечении ран предпочтение отдается местному медикаментозному лечению ((Гаврилюк Б.К. Нанокомпозитные регенерационные системы для лечения ран/ Б. К. Гаврилюк, В. Б. Гаврилюк. - (Биофизика сложных систем) //Биофизика. - 2011. - Т. 56, №6. - С.1138-1141; Lloyd ЕС, Rodgers ВС, Michener М, Williams MS. Outpatient burns: prevention and care. Am Fam Physician. 2012 Vol.85(1), P.25-32; Profyris C, Tziotzios C, Do Vale I. Cutaneous scarring: Pathophysiology, molecular mechanisms, and scar reduction therapeutics Part I. The molecular basis of scar formation. J Am Acad Dermatol. 2012, Vol.66(1), P.1-12; Elliot D, Sierakowski A. The surgical management of painful nerves of the upper limb: a unit perspective. J Hand Surg Eur Vol.2011 Vol.36(9), P.760-770). Однако следует отметить, что эффективность предлагаемой терапии зависит в этом случае не только от правильного выбора лекарственного средства, но и формы, в которой оно должно быть применено (Endorf FW, Ahrenholz D. Burn management. Curr Opin Crit Care. 2011 Vol.17(6), P.601-605). Широко применяют противовоспалительные лекарственные средства, которые подразделяются на стероидные и нестероидные. Нестероидные противовоспалительные средства уменьшают экссудацию, тормозят пролиферацию тканей, обезболивают и снижают температуру. Их недостатком является высокая токсичность. Стероидные противовоспалительные средства являются аналогами глюкокортикоидов. По силе антиэкссудативного действия превосходят нестероидные противовоспалительные средства в несколько раз, но не обладают анальгезирующим и жаропонижающим действием и при длительном применении вызывают нарушение гормонального фона в организме. Также применяют противомикробные препараты, однако они способствуют аллергизации организма, развитию устойчивой раневой микрофлоры и дисбактериозу. Применение препаратов ферментов (протеаз, трипсина, хемотрипсина, аминокислот и другие) ограничено их эффективностью только в первой фазе раневого процесса и необходимостью их сочетать с другими ранозаживляющими лекарственными средствами. Комплексное действие на рану оказывают лекарственные средства растительного происхождения благодаря содержанию комплекса флавоноидных соединений и витаминов, однако они не обладают обезболивающим действием (Mendonca Machado N, Gragnani A, Masako Ferreira L. Bums, metabolism and nutritional requirements. Nutr Hosp.2011 Aug; 26(4):692-700; Lloyd EC, Rodgers ВС, Michener M, Williams MS. Outpatient burns: prevention and care. Am Fam Physician. 2012 Vol.85(1), P.25-32). Известны ранозаживляющие и противовоспалительные препараты в виде кремов и мазей, содержащие активное вещество, жирную основу (смесь ланолина и вазелина) и добавки. Однако вазелино-ланолиновая основа в этих лекарственных препаратах препятствует нормальному газообмену, что снижает ранозаживляющую активность препарата, особенно при вялотекущих процессах (Profyris С, Tziotzios С, Do Vale I. Cutaneous scarring: Pathophysiology, molecular mechanisms, and scar reduction therapeutics Part I. The molecular basis of scar formation. J Am Acad Dermatol. 2012, Vol.66(1), P.1-12.).The problem of treating wounds, burns and other skin lesions, despite the wide variety of methods and drugs proposed, remains relevant. In most cases, in the treatment of wounds, local drug treatment is preferred ((Gavrilyuk B.K. Nanocomposite regenerative systems for treating wounds / B.K. Gavrilyuk, V. B. Gavrilyuk. - (Biophysics of complex systems) // Biophysics. - 2011. - T. 56, No. 6. - P.1138-1141; Lloyd EC, Rodgers BC, Michener M, Williams MS. Outpatient burns: prevention and care. Am Fam Physician. 2012 Vol.85 (1), P.25- 32; Profyris C, Tziotzios C, Do Vale I. Cutaneous scarring: Pathophysiology, molecular mechanisms, and scar reduction therapeutics Part I. The molecular basis of scar formation. J Am Acad Dermatol. 2012, Vol.66 (1), P. 1-12; Elliot D, Sierakowski A. The surgical management of painful nerves of the upper limb: a unit perspective. J Hand Surg Eur Vol. 2011 Vol. 36 (9), P.760-770). It is noted that the effectiveness of the proposed treatment in this case depends not only on the correct choice of medicament but also the form in which it is to be applied (Endorf FW, Ahrenholz D. Burn management. Curr Opin Crit Care. 2011 Vol.17 (6), P.601-605). Anti-inflammatory drugs are widely used, which are divided into steroid and non-steroidal. Nonsteroidal anti-inflammatory drugs reduce exudation, inhibit tissue proliferation, anesthetize and lower the temperature. Their disadvantage is high toxicity. Steroidal anti-inflammatory drugs are analogues of glucocorticoids. The strength of antiexudative action is several times superior to non-steroidal anti-inflammatory drugs, but they do not have an analgesic and antipyretic effect and, with prolonged use, cause hormonal imbalance in the body. Antimicrobials are also used, however, they contribute to the allergization of the body, the development of sustainable wound microflora and dysbiosis. The use of enzyme preparations (proteases, trypsin, chemotrypsin, amino acids and others) is limited by their effectiveness only in the first phase of the wound process and the need to combine them with other wound healing drugs. Herbal drugs have a complex effect on the wound due to the content of the complex of flavonoid compounds and vitamins, but they do not have an analgesic effect (Mendonca Machado N, Gragnani A, Masako Ferreira L. Bums, metabolism and nutritional requirements. Nutr Hosp. 2011 Aug; 26 ( 4): 692-700; Lloyd EC, Rodgers BC, Michener M, Williams MS. Outpatient burns: prevention and care. Am Fam Physician. 2012 Vol. 85 (1), P.25-32). Wound healing and anti-inflammatory drugs are known in the form of creams and ointments containing the active substance, a greasy base (a mixture of lanolin and petrolatum) and additives. However, the vaseline-lanolin base in these drugs interferes with normal gas exchange, which reduces the wound healing activity of the drug, especially during slow processes (Profyris C, Tziotzios C, Do Vale I. Cutaneous scarring: Pathophysiology, molecular mechanisms, and scar reduction therapeutics Part I. The molecular basis of scar formation. J Am Acad Dermatol. 2012, Vol. 66 (1), P.1-12.).
Эффективными формами ранозаживляющих средств являются гели. В качестве гелеобразователя могут быть использованы полисахариды: галактоманнан, или глюкоманнан, или альгиновые кислоты, или соли альгиновых кислот, или агар-агар, или гиалуроновая кислота, или желатин, или пектин, или аэросил, или цеолиты, или коллодий или 1,2 пропиленгликоль (Elliot D, Sierakowski A. The surgical management of painful nerves of the upper limb: a unit perspective. J Hand Surg Eur Vol.2011 Vol.36(9), P.760-770).Effective forms of wound healing agents are gels. Polysaccharides can be used as a gelling agent: galactomannan, or glucomannan, or alginic acids, or salts of alginic acids, or agar-agar, or hyaluronic acid, or gelatin, or pectin, or aerosil, or zeolites, or collodion, or 1,2 propylene glycol (Elliot D, Sierakowski A. The surgical management of painful nerves of the upper limb: a unit perspective. J Hand Surg Eur Vol. 2011 Vol. 36 (9), P.760-770).
Известен ранозаживляющий лекарственный препарат "Линимент метилурацила" (патент РФ N 2007997, приор, от 08.07.92 г., А61К 9/06), содержащий в качестве активного вещества β-форму метилурацила, а качестве основы - касторовое масло. Препарат обладает повышенной ранозаживляющей активностью за счет высокой биодоступности лекарственной формы. Однако в данном лекарственном препарате активное вещество не обладает противоинфекционными и интерфероногенными свойствами, что не позволяет лечить инфицированные раны.Known wound healing drug "Liniment methyluracil" (RF patent N 2007997, prior, from 08.07.92, A61K 9/06) containing β-form of methyluracil as the active substance, and castor oil as the base. The drug has an increased wound healing activity due to the high bioavailability of the dosage form. However, in this drug, the active substance does not have anti-infective and interferonogenic properties, which does not allow the treatment of infected wounds.
Задачей настоящего изобретения является создание средства, лишенного вышеперечисленных недостатков, при этом технический результат, достигаемый при реализации такой задачи, состоит в получении эффективного противовоспалительного, ранозаживляющего и обезболивающего средства для наружного применения.The objective of the present invention is to provide a means devoid of the above disadvantages, while the technical result achieved by the implementation of this task is to obtain an effective anti-inflammatory, wound healing and analgesic for external use.
Указанный технический результат достигается тем, что в качестве активного вещества используется оригинальное вещество пептидной природы Tyr-Pro-Х, где X - ОН, NH2, ОСН3, ОС2Н5 в следующих видах лекарственных форм: мази, гели, линименты, спреи, суппозитории, пластыри, орально-дезинтегрируемые таблетки и капли.The specified technical result is achieved in that the original substance of the peptide nature Tyr-Pro-X is used as the active substance, where X is OH, NH 2 , OCH 3 , OS 2 H 5 in the following types of dosage forms: ointments, gels, liniment, sprays , suppositories, patches, oral disintegrating tablets and drops.
В частности, заявлено применение дипептида общей формулы Tyr-Pro-Х, где Х-ОН, NH2, ОСН3, ОС2Н5, в качестве противовоспалительного, антибактериального, ранозаживляющего, регенеративного, анальгетического и противоожогового средства, а также лекарственная форма, содержащая в качестве действующего вещества дипептид общей формулы Tyr-Pro-X, где X - ОН, NH2, ОСН3, ОС2Н5, применяемая в качестве противовоспалительного, антибактериального, ранозаживляющего, регенеративного, анальгетического и противоожогового средства;In particular, the use of the dipeptide of the general formula Tyr-Pro-X is claimed, where X-OH, NH 2 , OCH 3 , OS 2 H 5 , as an anti-inflammatory, antibacterial, wound healing, regenerative, analgesic and anti-burn agent, as well as a dosage form, containing as an active substance a dipeptide of the general formula Tyr-Pro-X, where X is OH, NH 2 , OCH 3 , OS 2 H 5 , used as an anti-inflammatory, antibacterial, wound healing, regenerative, analgesic and anti-burn agent;
предпочтительные, но не обязательные варианты исполнения лекарственной формы предполагают ее исполнение в виде одной из следующих лекарственных форм: мазь, гель, линимент, спрей, суппозитории, пластырь, орально-дезинтегрируемые таблетки, капли.Preferred, but not required, versions of the dosage form assume its execution in the form of one of the following dosage forms: ointment, gel, liniment, spray, suppositories, patch, oral disintegrating tablets, drops.
Пептидные соединения согласно настоящей заявке, их свойства и способ получения в литературе не описаны.Peptide compounds according to the present application, their properties and the method of preparation are not described in the literature.
Синтез соединений. Tyr-Pro-Х синтезировали с применением тетрабутиламмонийных солей (ТБА) и пивалоил хлорида (PivCL). Для синтеза использовали производные D; L; DL аминокислот. Упаривание растворов проводили на вакуумном испарителе при 40°С. Температуры плавления, определенные на столике для плавления Boetiys, даны без исправления. Контроль над синтезом и индивидуальность полученных соединений проверяли с помощью тонкослойной хроматографии на пластинках с силикагелем фирмы Silufol (ЧСФР) при опрыскивании раствором нингидрина в системах растворителей:Synthesis of compounds. Tyr-Pro-X was synthesized using tetrabutylammonium salts (TBA) and pivaloyl chloride (PivCL). For the synthesis used derivatives of D; L; DL amino acids. The solutions were evaporated on a vacuum evaporator at 40 ° C. Melting points determined on the Boetiys melting table are given without correction. The synthesis control and the individuality of the obtained compounds were checked using thin-layer chromatography on silica gel plates from Silufol (CSFR) when spraying with a solution of ninhydrin in solvent systems:
1 - гексан: ацетон (3:2);1 - hexane: acetone (3: 2);
2 - этилацетат:ацетон:50% уксусная кислота (2:1:1);2 - ethyl acetate: acetone: 50% acetic acid (2: 1: 1);
3 - бензол:этанол (8:2);3 - benzene: ethanol (8: 2);
4 - хлороформ:метанол:аммиак (7:2.5:0.5);4 - chloroform: methanol: ammonia (7: 2.5: 0.5);
5 - хлороформ:метанол:аммиак (6:4:1);5 - chloroform: methanol: ammonia (6: 4: 1);
6 - хлороформ:метанол:уксусная кислота (42:7:1);6 - chloroform: methanol: acetic acid (42: 7: 1);
7 - ацетон:бензол:уксусная кислота (2:1:1);7 - acetone: benzene: acetic acid (2: 1: 1);
8 - хлороформ:метанол:аммиак (8:1.75:0.25);8 - chloroform: methanol: ammonia (8: 1.75: 0.25);
9 - хлороформ.метанол (9:1);9 - chloroform methanol (9: 1);
10 - этанол:аммиак (7:3).10 - ethanol: ammonia (7: 3).
11 - изо-пропанол:муравьиная кислота:вода (20:1:5).11 - iso-propanol: formic acid: water (20: 1: 5).
Далее по тексту в скобках после Rf указана система растворителей.The solvent system is indicated in parentheses after Rf.
Все растворители абсолютировали соответствующим образом. Точки плавления не корректировали. Колоночную хроматографию проводили с использованием носителей Силикагель L-40/100 m и Silasorb 600 [LC] фирмы Chemapol (ЧСФР).All solvents were absolutated accordingly. Melting points are not corrected. Column chromatography was performed using silica gel L-40/100 m and Silasorb 600 [LC] from Chemapol (CSFR).
Принятые сокращения: Ас - ацетат; Вос - трет-бутилоксикарбонильная группа; ОБТ - I-оксибензтриазол; ДМФА - диметилформамид; ДЦГК дициклогексилкарбодиимид; PivCI - пивалоил хлорид; ТБА - тетрабутиламмоний; ТЭА - триэтиламин; OSu - N-оксисукцинимидный эфир; ДЦГК - N,N-дициклогексикарбодиимид; ОМе - метиловый эфир; DiBoc - трет-бутилоксикарбонил; ТСХ - тонкослойная хроматография.Accepted abbreviations: Ac - acetate; Boc — tert-butyloxycarbonyl group; MBT - I-hydroxybenzotriazole; DMF - dimethylformamide; DCGC dicyclohexylcarbodiimide; PivCI - pivaloyl chloride; TBA - tetrabutylammonium; TEA - triethylamine; OSu N-oxysuccinimide ester; DCCA - N, N-dicyclohexycarbodiimide; OMe - methyl ether; DiBoc - tert-butyloxycarbonyl; TLC - thin layer chromatography.
Получение дипептида Tyr-Pro.Obtaining Tyr-Pro Dipeptide.
1. К Pro 150 мг (1.326 ммоль) добавляли 2.83 мл (1.326 моль) 13% ТБА, упаривали 1 раз с этанолом, 1 раз с изо-пропанолом, 1 раз с бензолом, охлаждали до 0°С.1. To Pro 150 mg (1.326 mmol), 2.83 ml (1.326 mol) of 13% TBA was added, evaporated 1 time with ethanol, 1 time with isopropanol, 1 time with benzene, cooled to 0 ° C.
2. К охлажденному раствору ТБА Pro в 10 мл абс. этилацетата при охлаждении добавляли в сухом виде DiBoc-Tyr-OSu 634.5 мг (1.326 моль), перемешивали 1 час при комнатной температуре на магнитной мешалке, за ходом реакции следили по ТСХ в системе (7).2. To a cooled solution of TBA Pro in 10 ml abs. while cooling ethyl acetate, DiBoc-Tyr-OSu 634.5 mg (1.326 mol) was added in dry form, stirred for 1 hour at room temperature on a magnetic stirrer, the progress of the reaction was monitored by TLC in system (7).
По окончании реакции растворитель упаривали, добавляли воду, подкисляли NaHSO4 (пятикратный избыток) до рН 3, экстрагировали 5 раз по 50 мл этилацетатом. Объединенные фракции этилацетата промывали водой, 10% раствором KHSO4, водой, сушили над MgSO4, упаривали, высаждали из эфира гексаном (дважды). Осадок в виде порошка сушили в вакууме.At the end of the reaction, the solvent was evaporated, water was added, acidified with NaHSO 4 (five-fold excess) to pH 3, extracted 5 times with 50 ml of ethyl acetate. The combined ethyl acetate fractions were washed with water, 10% KHSO 4 solution, water, dried over MgSO 4 , evaporated, precipitated from ether with hexane (twice). The powder precipitate was dried in vacuo.
Выход 1.32 г (2.76 ммоль).Yield 1.32 g (2.76 mmol).
Rf=0.382 (7).Rf = 0.382 (7).
Нижеследующие примеры иллюстрирую эффективность применения заявленного нового пептидного соединения в качестве действующего вещества в противовоспалительных, ранозаживляющих и обезболивающих средствах для наружного применения, а также варианты получения таких средств. Подразумевается, что хотя в подробном описании и конкретных примерах раскрыты предпочтительные варианты осуществления изобретения, они приведены лишь для наглядности, поскольку из описания, а также формулы изобретения для специалиста в данной области техники станут очевидными различные изменения и усовершенствования, не выходящие за пределы существа и объема изобретения.The following examples illustrate the effectiveness of the claimed new peptide compound as an active substance in anti-inflammatory, wound healing and analgesics for external use, as well as options for obtaining such funds. It is intended that although preferred embodiments of the invention are disclosed in the detailed description and specific examples, they are provided for illustrative purposes only, as various changes and improvements will be apparent to those skilled in the art from the description as well as the claims, without departing from the spirit and scope. inventions.
Пример 1. На 100 суппозиториев: в раствор вещества пептидной структуры Tyr-Pro-Х, где X - ОН, NH2, ОСН3, ОС2Н5, с концентрацией с=1-50 мг/мл вводят 55,0 г расплава смеси ПЭГ 1500 и ПЭГ 400 с 5,0 г эмульгатора, затем перемешивают 10 минут. К смеси постепенно прибавляют 275 г предварительно расплавленной гидрофобной основы (витепсол) с 15,0 г стабилизатора (нипагин) и перемешивают 30 минут. Полученную взвесь разливают в предварительно охлажденные суппозиторные формы и помещают в холодильник при -4°С. Препарат используют в качестве суппозиториев. В 1 суппозитории содержится 1-50 мг вещества пептидной природы Tyr-Pro-Х, где X - ОН, NH2, ОСН3, ОС2Н5.Example 1. For 100 suppositories: in a solution of the substance of the peptide structure Tyr-Pro-X, where X is OH, NH 2 , OCH 3 , OS 2 H 5 , with a concentration of c = 1-50 mg / ml, 55.0 g of melt is introduced a mixture of PEG 1500 and PEG 400 with 5.0 g of emulsifier, then stirred for 10 minutes. 275 g of pre-molten hydrophobic base (vitepsol) with 15.0 g of stabilizer (nipagin) are gradually added to the mixture and stirred for 30 minutes. The resulting suspension is poured into pre-cooled suppository forms and placed in a refrigerator at -4 ° C. The drug is used as suppository. In 1 suppository contains 1-50 mg of a substance of peptide nature Tyr-Pro-X, where X is OH, NH 2 , OCH 3 , OS 2 H 5 .
Пример 2. На 100 суппозиториев: в раствор вещества пептидной структуры Tyr-Pro-Х, где X - ОН, NH2, ОСН3, ОС2Н5, с концентрацией с=1-50 мг/мл постепенно прибавляют 275 г предварительно расплавленной дифильной основы (Suppocire АР) с 15,0 г стабилизатора (нипагин) и перемешивают 30 минут. Полученную взвесь разливают в предварительно охлажденные суппозиторные формы и помещают в холодильник при -4°С. Препарат используют в качестве суппозиториев. В 1 суппозитории содержится 1-50 мг вещества пептидной природы Tyr-Pro-Х, где X -ОН, NH2) ОСН3, ОС2Н5.Example 2. For 100 suppositories: in a solution of a substance of the peptide structure Tyr-Pro-X, where X is OH, NH 2 , OCH 3 , OC 2 H 5 , with a concentration of c = 1-50 mg / ml, 275 g of pre-molten are gradually added diphilic base (Suppocire AR) with 15.0 g of stabilizer (nipagin) and stirred for 30 minutes. The resulting suspension is poured into pre-cooled suppository forms and placed in a refrigerator at -4 ° C. The drug is used as suppository. In 1 suppository contains 1-50 mg of a substance of peptide nature Tyr-Pro-X, where X is OH, NH 2) OCH 3 , OS 2 H 5 .
Пример 3. На 100 г мази: раствор вещества пептидной структуры Tyr-Pro-Х, где X - ОН, NH2, ОСН3, ОС2Н5, с концентрацией с=1-50 мг/мл вводят в 85,0 г расплава смеси ПЭГ 1500 и ПЭГ 400 с 5,0 г стабилизатора (нипазол), перемешивают 30 минут. Препарат используют в виде мази, в которой содержится 1-50 мг вещества пептидной природы Tyr-Pro-Х, где X - ОН, NH2, ОСН3, ОС2Н5.Example 3. For 100 g of ointment: a solution of a substance of the peptide structure Tyr-Pro-X, where X is OH, NH 2 , OCH 3 , OS 2 H 5 , with a concentration of c = 1-50 mg / ml, 85.0 g are introduced the melt mixture of PEG 1500 and PEG 400 with 5.0 g of stabilizer (nipazole), stirred for 30 minutes. The drug is used in the form of an ointment, which contains 1-50 mg of a substance of peptide nature Tyr-Pro-X, where X is OH, NH 2 , OCH 3 , OS 2 H 5 .
Пример 4. На 100 г мази: раствор вещества пептидной структуры Tyr-Pro-Х, где X - ОН, NH2, ОСН3, ОС2Н5, с концентрацией с=1-50 мг/мл вводят в 40,0 г расплава смеси ПЭГ 1500 и ПЭГ 40 с 5,0 г эмульгатора, затем перемешивают 10 минут. К смеси постепенно прибавляют 45 г предварительно расплавленной гидрофобной основы (силоксановая основа) с 5,0 г стабилизатора (нипагин) и перемешивают 30 минут. Препарат используют в виде мази, в которой содержится 1-50 мг вещества пептидной природы Tyr-Pro-Х, где X - ОН, NH2, ОСН3, ОС2Н5.Example 4. For 100 g of ointment: a solution of a substance of the peptide structure Tyr-Pro-X, where X is OH, NH 2 , OCH 3 , OS 2 H 5 , with a concentration of c = 1-50 mg / ml, 40.0 g are introduced melt a mixture of PEG 1500 and PEG 40 with 5.0 g of emulsifier, then mix for 10 minutes. 45 g of a pre-molten hydrophobic base (siloxane base) with 5.0 g of stabilizer (nipagin) are gradually added to the mixture and stirred for 30 minutes. The drug is used in the form of an ointment, which contains 1-50 mg of a substance of peptide nature Tyr-Pro-X, where X is OH, NH 2 , OCH 3 , OS 2 H 5 .
Пример 5. На 100 г геля: раствор вещества пептидной структуры Tyr-Pro-Х, где X - ОН, NH2, ОСН3, ОС2Н5, с концентрацией с=1-50 мг/мл вводят в 85,0 г расплава смеси ПВП 12600 и ПВП 8000 с 5,0 г стабилизатора (нипазол), перемешивают 30 минут. Препарат используют в виде геля, в котором содержится 1-50 мг вещества пептидной природы Tyr-Pro-Х, где X - ОН, NH2, ОСН3, ОС2Н5.Example 5. For 100 g of gel: a solution of a substance of the peptide structure Tyr-Pro-X, where X is OH, NH 2 , OCH 3 , OS 2 H 5 , with a concentration of c = 1-50 mg / ml, 85.0 g are introduced melt a mixture of PVP 12600 and PVP 8000 with 5.0 g of stabilizer (nipazole), stirred for 30 minutes. The drug is used in the form of a gel, which contains 1-50 mg of a substance of peptide nature Tyr-Pro-X, where X is OH, NH 2 , OCH 3 , OS 2 H 5 .
Пример 6. На 100 мл спрея: раствор вещества пептидной структуры Tyr-Pro-Х, где X - ОН, NH2, ОСН3, ОС2Н5, с концентрацией с=1-50 мг/мл вводят в смесь, содержащую 20 мг пропиленгликоля, 20 мг ПЭГ 1000 цетостеарилового эфира, 5 мл воды очищенный и 50 мл этанола ректифицированного, перемешивают в течение 10 минут и заправляют в полипропиленовый флакон с дозирующим насосом и насадкой. Препарат используют в виде спрея, в котором содержится 1-50 мг вещества пептидной природы Tyr-Pro-Х, где X - ОН, NH2, ОСН3, ОС2Н5.Example 6. Per 100 ml of spray: a solution of a substance of the peptide structure Tyr-Pro-X, where X is OH, NH 2 , OCH 3 , OC 2 H 5 , with a concentration of c = 1-50 mg / ml, is introduced into a mixture containing 20 mg of propylene glycol, 20 mg of PEG 1000 cetostearyl ether, 5 ml of purified water and 50 ml of rectified ethanol, stirred for 10 minutes and charged into a polypropylene bottle with a metering pump and nozzle. The drug is used in the form of a spray, which contains 1-50 mg of a substance of peptide nature Tyr-Pro-X, where X is OH, NH 2 , OCH 3 , OS 2 H 5 .
Пример 7. На 100 пластырей: 5 г вещества пептидной структуры Tyr-Pro-Х, где X - ОН, NH2, ОСН3, ОС2Н5, вводят в смесь, состоящую из 9,72 г поли(DL-лактид) и/или поли(DL-лактид-согликолид) с молекулярной массой 50000 Да и соотношением 50:50 с 1,0 г стабилизатора (бензоат натрия) в 60 мл хлороформа. Смесь тщательно перемешивают и разливают тонким слоем, после чего сушат теплым воздухом до полного удаления органического растворителя. Полученную пленку соединяют с тканной основой. Препарат используют в виде пластыря, в котором содержится 1-50 мг вещества пептидной природы Tyr-Pro-Х, где X - ОН, NH2, ОСН3, ОС2Н5.Example 7. For 100 plasters: 5 g of a substance of the peptide structure Tyr-Pro-X, where X is OH, NH 2 , OCH 3 , OS 2 H 5 , is introduced into a mixture consisting of 9.72 g of poly (DL-lactide) and / or poly (DL-lactide-soglycolide) with a molecular weight of 50,000 Da and a ratio of 50:50 with 1.0 g of stabilizer (sodium benzoate) in 60 ml of chloroform. The mixture is thoroughly mixed and poured in a thin layer, after which it is dried with warm air until the organic solvent is completely removed. The resulting film is combined with a woven base. The drug is used in the form of a patch, which contains 1-50 mg of a substance of peptide nature Tyr-Pro-X, where X is OH, NH 2 , OCH 3 , OS 2 H 5 .
Пример 8. На 100 орально дезинтегрируемых таблеток: таблетки получали методом прямого прессования на таблеточном прессе смеси, содержащей 1 г вещества пептидной структуры Tyr-Pro-Х, где X - ОН, NH2, ОСН3, ОС2Н5, и 20 г комбинированного наполнителя "Ludiflash".Example 8. For 100 orally disintegrating tablets: tablets were prepared by direct compression on a tablet press of a mixture containing 1 g of a substance of the peptide structure Tyr-Pro-X, where X is OH, NH 2 , OCH 3 , OS 2 H 5 , and 20 g combined filler "Ludiflash".
Пример 9. На 100 орально дезинтегрируемых таблеток: таблетки получают методом влажной грануляции таблеточной смеси, содержащей 1 г вещества пептидной структуры Tyr-Pro-Х, где X - ОН, NH2, ОСН3, ОС2Н5, и 20 г комбинированного наполнителя "Ludiflash".Example 9. For 100 orally disintegrating tablets: tablets are prepared by wet granulation of a tablet mixture containing 1 g of Tyr-Pro-X peptide structure substance, where X is OH, NH 2 , OCH 3 , OS 2 H 5 , and 20 g of combined excipient "Ludiflash".
Пример 10. На 100 орально дезинтегрируемых таблеток: таблетки получают методом сухой грануляции таблеточной смеси, содержащей 1 г вещества пептидной структуры Tyr-Pro-Х, где X - ОН, NH2, ОСН3, ОС2Н5, и 20 г комбинированного наполнителя "Ludiflash".Example 10. For 100 orally disintegrating tablets: tablets are prepared by dry granulation of a tablet mixture containing 1 g of Tyr-Pro-X peptide structure substance, where X is OH, NH 2 , OCH 3 , OS 2 H 5 , and 20 g of combined excipient "Ludiflash".
Пример 12. На 1 мл раствора для капель раствор вещества пептидной природы Tyr-Pro-Х, где X - ОН, NH2, ОСН3, ОС2Н5, с концентрацией с=0,01-10 мг вводят в смесь, содержащую натрия гидрофосфат 0,1-5,0 мг, натрия дигидрофосфат 1,0-10,0 мг, сорбитол 1,0-25,0 мг, бензалкония хлорид 0,1-3,0 мг, масло лавандовое 1,0-30,0 мг, вода очищенная до 1,0 мл. Препарат используют в виде назальных капель, в котором содержится 0,01-10 мг вещества пептидной природы Tyr-Pro-Х, гдеExample 12. For 1 ml of a solution for drops, a solution of a substance of peptide nature Tyr-Pro-X, where X is OH, NH 2 , OCH 3 , OC 2 H 5 , with a concentration of c = 0.01-10 mg, is introduced into a mixture containing sodium hydrogen phosphate 0.1-5.0 mg, sodium dihydrogen phosphate 1.0-10.0 mg, sorbitol 1.0-25.0 mg, benzalkonium chloride 0.1-3.0 mg, lavender oil 1.0-30 , 0 mg, purified water to 1.0 ml. The drug is used in the form of nasal drops, which contains 0.01-10 mg of a substance of peptide nature Tyr-Pro-X, where
Х-ОН, NH2, ОСН3, ОС2Н5.X-OH, NH 2 , OCH 3 , OS 2 H 5 .
Пример 13. Изучение средства наружного применения, содержащего оригинальное вещество пептидной структуры Tyr-Pro-Х, где X - ОН, NH2, ОСН3, ОС2Н5, в тесте формалиновой боли для выявления анальгетической и противовоспалительной активности.Example 13. The study of the external product containing the original substance of the peptide structure Tyr-Pro-X, where X is OH, NH 2 , OCH 3 , OS 2 H 5 , in the formalin pain test to detect analgesic and anti-inflammatory activity.
Самцов беспородных крыс помещали в индивидуальные пластиковые боксы. Острую воспалительную реакцию (отек) вызывали субплантарным (под подошвенный апоневроз) введением 50 мкл 5% формалина. Регистрировали число болевых реакций (постукивание лапой об пол, грызение лапы и т.д.) в первые 5-10 минут - I фаза (воздействие на первичные афференты боли) и с 30-50 минуту - II фаза (боль, возникающая в результате воспалительной реакции) (Bannon et al., 1998). Критерием анальгетического эффекта считали достоверное уменьшение числа болевых реакций в опытной группе относительно контрольной группы.Male outbred rats were placed in individual plastic boxes. An acute inflammatory reaction (edema) was caused by subplanar (under the plantar aponeurosis) injection of 50 μl of 5% formalin. The number of pain reactions (tapping the paw on the floor, biting the paws, etc.) was recorded in the first 5-10 minutes - phase I (effect on the primary afferents of pain) and from 30-50 minutes - phase II (pain resulting from inflammatory reactions) (Bannon et al., 1998). A criterion for the analgesic effect was considered a significant decrease in the number of pain reactions in the experimental group relative to the control group.
Исследуемые образцы (образец 1 - мазь 5%, образец 2 - гель 10%) наносили на лапу одновременно с введением формалина самцам нелинейных белых крыс весом 200-300 г. Контрольным животным наносили наружное средство без активного вещества. Полученные результаты приведены в таблице 1.The test samples (sample 1 — ointment 5%, sample 2 — gel 10%) were applied to the paw at the same time that formalin was administered to males of nonlinear white rats weighing 200-300 g. The control animals were treated with an external agent without an active substance. The results are shown in table 1.
* - достоверность по сравнению с контролем при Р<0,05.* - reliability compared to control at P <0.05.
Из таблицы 1 видно, что средство наружного применения, содержащее оригинальное вещество пептидной структуры Tyr-Pro-Х, где X - ОН, NH2, ОСН3, ОС2Н5, уменьшает болевую чувствительность в I фазу формалиновых болей, характеризующую воздействие на первичные афференты, и оказывает противовоспалительное действие во II фазу, вызванную развитием воспаления.From table 1 it can be seen that the external product containing the original substance of the peptide structure Tyr-Pro-X, where X is OH, NH 2 , OCH 3 , OS 2 H 5 , reduces pain sensitivity in phase I of formalin pain, which characterizes the effect on primary afferents, and has an anti-inflammatory effect in phase II, caused by the development of inflammation.
Таким образом, средство наружного применения, содержащее оригинальное вещество пептидной структуры Tyr-Pro-Х, где X - ОН, NH2, ОСН3, ОС2Н5, обладает анальгетическим и противовоспалительным действием в тесте формалиновых болей.Thus, an external agent containing the original substance of the peptide structure Tyr-Pro-X, where X is OH, NH 2 , OCH 3 , OS 2 H 5 , has analgesic and anti-inflammatory effects in the formalin pain test.
Пример 14. Изучение средства наружного применения, содержащего оригинальное вещество пептидной структуры Tyr-Pro-Х, где X - ОН, NH2, ОСН3, ОС2Н5, при моделировании термического ожога.Example 14. The study of external use containing the original substance of the peptide structure Tyr-Pro-X, where X is OH, NH 2 , OCH 3 , OS 2 H 5 , when simulating a thermal burn.
Для моделирования термического ожога использовали стандартный метод (Кочетыгов Н.И. О способах воспроизведения термических ожогов. Л.: Медицина, 1964, стр.86) на кроликах породы шиншилла весом 2,8-3,2 кг. Ожоги наносились на боковую поверхность бедра. С участка боковой поверхности бедра животного удаляли шерсть и прикладывали к коже керамический тигель диаметром 1,5 см, нагретый в муфельной печи до 600°С, а течение 5 сек. После этого осуществляли исследование в трех группах животных. В первой (контрольной) группе лечение не проводили. Во второй (опытной) группе лечение проводили средством наружного применения в виде мази без активного вещества, изготовленной согласно прототипу. В третьей (опытной) группе лечение проводили средством наружного применения в виде мази с концентрацией активного вещества 5,0 мас.%. В четвертой (опытной) группе лечение проводили заявляемым средством наружного применения с концентрацией активного вещества в виде геля 10,0 мас.%.To simulate a thermal burn, the standard method was used (NI Kochetygov, Methods of reproducing thermal burns. L .: Medicine, 1964, p. 86) on chinchilla rabbits weighing 2.8-3.2 kg. Burns were applied to the lateral thigh. Wool was removed from the side surface of the animal’s thigh and a ceramic crucible with a diameter of 1.5 cm, heated in a muffle furnace to 600 ° C, was applied to the skin for 5 seconds. After that, a study was carried out in three groups of animals. In the first (control) group, treatment was not performed. In the second (experimental) group, treatment was carried out with an external agent in the form of an ointment without an active substance made according to the prototype. In the third (experimental) group, treatment was carried out with an external agent in the form of an ointment with an active substance concentration of 5.0 wt.%. In the fourth (experimental) group, the treatment was carried out by the claimed external agent with a concentration of the active substance in the form of a gel of 10.0 wt.%.
Животных ежедневно осматривали, определяли состояние и размер ожоговой раны. На 7, 14 и 28 сутки ожоговые раны тотально вырезали вместе с участком здоровой кожи и подвергали гистологическому исследованию.The animals were examined daily, the condition and size of the burn wound were determined. On days 7, 14 and 28, burn wounds were totally excised along with a section of healthy skin and subjected to histological examination.
В контрольной группе на месте термического ожога сразу после его нанесения формировался участок сухого коагуляционного некроза, четко ограниченного от окружающей здоровой ткани. Через 1 сутки вокруг этой зоны образовалась демаркационная линия поврежденного эпидермиса размером 3-4 мм. Начиная со 2-го дня, на поверхности ожоговой раны образовалась фибриновая пленка, которая утолщалась и становилась более темной в течение первой недели. В последующие 7 дней по периферии ожога наблюдалась гиперимия и образовался воспалительный валик. При этом размеры очага поражения значительно уменьшались. К 14-му дню от начала опыта очаг уменьшился за счет врастания в него с периферии эпидермиса в виде языков. К 28-му дню ожоговая рана полностью заживилась.In the control group, a site of dry coagulation necrosis, clearly limited from the surrounding healthy tissue, was formed at the site of the thermal burn immediately after its application. After 1 day, a demarcation line of the damaged epidermis 3-4 mm in size formed around this zone. Starting from the 2nd day, a fibrin film was formed on the surface of the burn wound, which thickened and became darker during the first week. In the next 7 days, hyperimia was observed on the periphery of the burn and an inflammatory cushion formed. At the same time, the size of the lesion was significantly reduced. By the 14th day from the start of the experiment, the lesion decreased due to the growth of tongues into it from the periphery of the epidermis. By the 28th day, the burn wound had completely healed.
Во 2-й группе кроликов (использование средства наружного применения без активного вещества) заживление ожоговой раны происходило в более короткие сроки, чем в 1-й группе, однако в течение всего срока лечения было значительно выражено местное воспаление. Форма ожоговой раны менялась за счет неравномерного врастания эпидермиса. К 21-му дню рана полностью эпителизовалась с краев, а к 28-му дню полностью зажила.In the 2nd group of rabbits (using an external agent without an active substance), the healing of a burn wound took place in a shorter time than in the 1st group, however, local inflammation was significantly expressed throughout the treatment period. The shape of the burn wound changed due to the uneven ingrowth of the epidermis. By the 21st day, the wound completely epithelized from the edges, and by the 28th day it completely healed.
В 3-й группе (наружное применение лечебного средства с концентрацией активного вещества 5,0 мас.%.) были отмечены хорошие результаты. В течение первых семи дней наблюдалась интенсивная местная воспалительная реакция, однако уже на 14-е сутки воспаление полностью исчезло и ожоговая рана эпителизировалась за счет наползания регенерирующего эпителия с краев. Полное сращивание эпителия заживления раны наступило на 21-й день лечения, что на 7 дней раньше, чем во 2-й группе (прототип), и на две недели раньше, чем в контрольной группе. Не наблюдалось образование шрамов и рубцов.In the 3rd group (external use of a therapeutic agent with an active substance concentration of 5.0 wt.%.), Good results were noted. During the first seven days, an intense local inflammatory reaction was observed, but already on the 14th day the inflammation completely disappeared and the burn wound was epithelized due to the creeping of the regenerating epithelium from the edges. Complete fusion of the wound healing epithelium occurred on the 21st day of treatment, which was 7 days earlier than in the 2nd group (prototype), and two weeks earlier than in the control group. The formation of scars and scars was not observed.
В 4-й группе (наружное применение лечебного средства с концентрацией активного вещества 10,0 мас.%.) были отмечены наилучшие результаты. В течение только первых пяти дней наблюдалась интенсивная местная воспалительная реакция, однако уже на 10-е сутки воспаление полностью исчезло и ожоговая рана эпителизировалась. Полное сращивание эпителия заживления раны наступило на 18-й день лечения, что на 10 дней раньше, чем во 2-й группе (прототип) и контрольной группах. Не наблюдалось образование шрамов и рубцов.In the 4th group (external use of a therapeutic agent with an active substance concentration of 10.0 wt.%.) The best results were noted. Within only the first five days, an intense local inflammatory reaction was observed, however, already on the 10th day the inflammation completely disappeared and the burn wound was epithelized. Full fusion of the wound healing epithelium occurred on the 18th day of treatment, which is 10 days earlier than in the 2nd group (prototype) and the control group. The formation of scars and scars was not observed.
Таким образом, средство наружного применения, содержащего оригинальное вещество пептидной структуры Tyr-Pro-Х, где X - NH2, ОСН3, ОС2Н5, проявляет высокую ранозаживляющую, противовоспалительную и противоинфекционную эффективность и сокращает сроки лечения инфицированных ран и ожогов.Thus, an external product containing the original substance of the peptide structure Tyr-Pro-X, where X is NH 2 , OCH 3 , OS 2 H 5 , shows high wound healing, anti-inflammatory and anti-infective effectiveness and reduces the treatment time for infected wounds and burns.
Пример 15. Изучение средства наружного применения, содержащего оригинальное вещество пептидной структуры Tyr-Pro-Х, где X - ОН, NH2, ОСН3, ОС2Н5, при моделировании кожной раны.Example 15. The study of external use containing the original substance of the peptide structure Tyr-Pro-X, where X is OH, NH 2 , OCH 3 , OS 2 H 5 when modeling a skin wound.
Кожную рану моделировали на кроликах породы шиншилла весом 2,8-3,2 кг. Для моделирования раны у кроликов выбривали область мягких тканей бедренной части и скальпелем делали разрез глубиной 1 см и длиной 5 см. После этого осуществляли исследование в трех группах животных. В первой (контрольной) группе лечение не проводили. Во второй (опытной) группе лечение проводили средством наружного применения в виде мази без активного вещества, изготовленной согласно прототипу. В третьей (опытной) группе лечение проводили средством наружного применения в виде мази с концентрацией активного вещества 5,0 мас.%.A skin wound was modeled on chinchilla rabbits weighing 2.8-3.2 kg. To simulate wounds in rabbits, the area of soft tissues of the femoral part was shaved and a cut was made with a scalpel 1 cm deep and 5 cm long. After that, a study was performed in three groups of animals. In the first (control) group, treatment was not performed. In the second (experimental) group, treatment was carried out with an external agent in the form of an ointment without an active substance made according to the prototype. In the third (experimental) group, treatment was carried out with an external agent in the form of an ointment with an active substance concentration of 5.0 wt.%.
Эффективность препаратов в опытных и контрольной группах оценивали по срокам отторжения струпа, очищению ран от гнойно-некротических масс, времени появления грануляционной ткани в ране и началу краевой эпителизации по динамике регресса воспалительного процесса, а также по динамике бактериологической обсемененности раны.The effectiveness of drugs in the experimental and control groups was evaluated by the terms of scab rejection, cleansing the wounds from purulent necrotic masses, the time of appearance of granulation tissue in the wound and the beginning of marginal epithelization by the dynamics of the regression of the inflammatory process, as well as by the dynamics of bacterial contamination of the wound.
В контрольной группе образовался гнойник с инфильтрацией в окружающую ткань. На 6 день появилось отторжение струпа и краевая грануляционная ткань, а к 12-му дню курса лечения - первые признаки эпителизации. Полная санация раны наступила к 21-му дню.In the control group an abscess formed with infiltration into the surrounding tissue. On day 6, scab rejection and marginal granulation tissue appeared, and by the 12th day of treatment, the first signs of epithelization. Complete rehabilitation of the wound came on the 21st day.
Во второй группе кроликов наблюдалось отсутствие гнойного серозного отделяемого раны. Первичный струп на ране не препятствовал образованию грануляции. Отторжение струпа и первые признаки грануляции были отмечены на 6-й день от начала лечения. Появление краевой эпителизации раны отмечено на 12-й день курса лечения, а полная санация раны наступила к 21-му дню курса лечения.In the second group of rabbits, there was no purulent serous discharge wound. The primary scab on the wound did not prevent the formation of granulation. Scab rejection and the first signs of granulation were noted on the 6th day from the start of treatment. The appearance of regional wound epithelialization was noted on the 12th day of the course of treatment, and complete debridement of the wound occurred on the 21st day of the course of treatment.
В третьей группе (средство наружного применения, содержащее 5% вещества) были отмечены наилучшие результаты лечения. Не наблюдалось ни гнойного, ни серозного отделяемого из раны, отсутствовало воспаление, рана "сухая", наблюдалось формирование и рост грануляционной ткани (активной на периферии и островковой в центре раны). Опережающее развитие грануляционной ткани способствует более ранней эпителизации и полной санации раны, которая наступила в данной группе к 9-му дню от начала лечения, а полное излечение раны уже к 15-му дню курса лечения. Не наблюдалось образование шрамов и рубцов.In the third group (external product containing 5% of the substance), the best treatment results were noted. Neither purulent nor serous discharge from the wound was observed, there was no inflammation, the wound was “dry”, and the formation and growth of granulation tissue (active on the periphery and islet in the center of the wound) was observed. The accelerated development of granulation tissue contributes to earlier epithelization and complete debridement of the wound, which occurred in this group by the 9th day from the start of treatment, and complete healing of the wound by the 15th day of the course of treatment. The formation of scars and scars was not observed.
Таким образом, средство наружного применения, содержащего оригинальное вещество пептидной структуры Tyr-Pro-Х, где X - ОН, NH2, ОСН3, ОС2Н5, обладает ранозаживляющим действием.Thus, an external agent containing the original substance of the peptide structure Tyr-Pro-X, where X is OH, NH 2 , OCH 3 , OS 2 H 5 , has a wound healing effect.
Пример 16. Изучение средства наружного применения, содержащего оригинальное вещество пептидной структуры Tyr-Pro-Х, где X - ОН, NH2, ОСН3, ОС2Н5, в тесте нейрогенного болевого синдрома, вызванного перерезкой седалищного нерва, как модели нейропатической боли для выявления анальгетической и противовоспалительной активности.Example 16. The study of external use containing the original substance of the peptide structure Tyr-Pro-X, where X is OH, NH 2 , OCH 3 , OS 2 H 5 , in the test of neurogenic pain syndrome caused by transection of the sciatic nerve, as a model of neuropathic pain to detect analgesic and anti-inflammatory activity.
Эксперименты проводили на самцах нелинейных белых крыс весом 200-250 г. Нейрогенный болевой синдром у самцов беспородных крыс создавали перерезкой седалищного нерва на уровне подколенной ямки выше места его трифуркации на n.tibialis, n.peroneus и n.suralis и последующим его лигированием для предотвращения регенерации. Развитие болевого синдрома определяли по появлению признаков аутотомий на оперированной лапке. Интенсивность аутотомий оценивали по 11-балльной шкале: 1 балл - повреждение 1-го когтя; 2, 3, 4 и 5-ть баллов - повреждение 2-х, 3-х, 4-х и 5-ти когтей; 6 баллов - повреждение фаланги одного пальца; 7, 8, 9 и 10 баллов - повреждение фаланг соответственно на 2-х, 3-х, 4-х и 5-ти пальцах; 11 баллов повреждение плюсневых костей. Динамику развития болевого синдрома у крыс опытных и контрольной групп наблюдали в течение 25 дней (Крыжановский Г.Н. и др. 1991).The experiments were performed on male non-linear white rats weighing 200-250 g. Neurogenic pain syndrome in male outbred rats was created by cutting the sciatic nerve at the level of the popliteal fossa above the site of its trifurcation into n.tibialis, n.peroneus and n.suralis and its subsequent ligation to prevent regeneration. The development of pain was determined by the appearance of signs of autotomy on the operated leg. The intensity of autotomies was evaluated on a 11-point scale: 1 point - damage to the 1st claw; 2, 3, 4 and 5 points - damage to 2, 3, 4 and 5 claws; 6 points - damage to the phalanx of one finger; 7, 8, 9 and 10 points - damage to the phalanges, respectively, on 2, 3, 4 and 5 fingers; 11 points damage to the metatarsal bones. The dynamics of the development of pain in rats of the experimental and control groups was observed for 25 days (Kryzhanovsky G.N. et al. 1991).
Животным контрольной группы в день перерезки седалищного нерва и последующие 10 дней после операции наносили средство наружного применения в виде мази без активного вещества, а животным опытной группы в те же сроки наносили средство наружного применения в виде мази с активным веществом в дозе 10 мг/кг.On the day of transection of the sciatic nerve and the next 10 days after the operation, the animals of the control group were applied the external agent in the form of an ointment without an active substance, and the animals of the experimental group at the same time were applied the external agent in the form of an ointment with the active substance at a dose of 10 mg / kg.
В контрольной группе крыс развитие аутотомий после перерезки седалищного нерва появилось у 50% животных на 6 день после операции. Интенсивность болевых реакций составила 3.2±0.9 балла. На 9 день введения болевая реакция наблюдалась у 60% животных, соответствующая интенсивности 4.5±2.4 балла. На 18 сутки болевые реакции развивались у 70% и составили 6.5±3.1 балла.In the control group of rats, the development of autotomy after transection of the sciatic nerve appeared in 50% of animals on day 6 after surgery. The intensity of pain reactions was 3.2 ± 0.9 points. On the 9th day of administration, a pain reaction was observed in 60% of the animals, corresponding to an intensity of 4.5 ± 2.4 points. On day 18, pain reactions developed in 70% and amounted to 6.5 ± 3.1 points.
Нанесение средства наружного применения без активного вещества не препятствовало развитию аутотомий после перерезки седалищного нерва (40% животных на 6 день после операции). Интенсивность болевых реакций составила 2.7±1.9 балла. На 9 день введения болевая реакция наблюдалась у 50% животных, соответствующая интенсивности 3.6±2.6 балла. На 18 сутки болевые реакции развивались у 60% и составили 5.2±2.4 балла.Application of an external agent without an active substance did not prevent the development of autotomies after transection of the sciatic nerve (40% of animals on day 6 after surgery). The intensity of pain reactions was 2.7 ± 1.9 points. On the 9th day of administration, a pain reaction was observed in 50% of the animals, corresponding to an intensity of 3.6 ± 2.6 points. On day 18, pain reactions developed in 60% and amounted to 5.2 ± 2.4 points.
Нанесение средства наружного применения с активным веществом препятствовало развитию болевого синдрома. На 6 и 9 день болевые реакции не наблюдались. На 13 сутки эксперимента на 5 день после отмены введения соединения появилась болевая реакция у 10% животных средней интенсивности 1.0+1.0 балл, а на 18 день - у 10% животных, средняя интенсивность реакции составила 2.0±1.0 балла.The application of an external agent with an active substance prevented the development of a pain syndrome. No pain reactions were observed on day 6 and 9. On the 13th day of the experiment, on the 5th day after the administration of the compound was canceled, a pain reaction appeared in 10% of animals of average intensity 1.0 + 1.0 points, and on the 18th day - in 10% of animals, the average reaction intensity was 2.0 ± 1.0 points.
Таким образом, средство наружного применения, содержащее оригинальное вещество пептидной структуры Tyr-Pro-Х, где X - ОН, NH2, ОСН3, ОС2Н5, проявляет анальгетическое и противовоспалительное действие в тесте нейрогенного болевого синдрома, вызванного перерезкой седалищного нерва.Thus, an external agent containing the original substance of the peptide structure Tyr-Pro-X, where X is OH, NH 2 , OCH 3 , OS 2 H 5 , has an analgesic and anti-inflammatory effect in the test of neurogenic pain syndrome caused by sciatic nerve transection.
Пример 17. Изучение средства наружного применения, содержащего оригинальное вещество пептидной структуры Tyr-Pro Tyr-Pro-Х, где X - ОН, NH2, ОСН3, ОС2Н5, у больной Е., 68 лет. У больной диагностированы гнойные прыщи на лице в районе носа. На все пораженные участки накладывалось средство наружного применения в виде мази. На следующие сутки после однократного применения образовывалась светлая корочка, которая легко удалялась. На лице не оставалось следов от ран.Example 17. The study of external use containing the original substance of the peptide structure Tyr-Pro Tyr-Pro-X, where X is OH, NH 2 , OCH 3 , OS 2 H 5 , in patient E., 68 years old. The patient was diagnosed with purulent acne on his face in the nose. An external agent in the form of an ointment was applied to all affected areas. The next day after a single application, a light crust formed, which was easily removed. There were no traces of wounds on his face.
Пример 18. Изучение средства наружного применения, содержащего оригинальное вещество пептидной структуры Tyr-Pro-Х, где X - ОН, NH2, ОСН3, ОС2Н5, у больной А., 58 лет, с ожогом. У больной диагностирован ожог I, II степеней двух пальцев (среднего - площадью 1,5 см и безымянного площадью - 1 см) левой руки в районе ногтевого ложа раскаленным подсолнечным маслом. Травма бытовая. Наблюдалась гиперемия, отек кожи, большие сплошные пузыри с содержимым. После аппликации средства наружного применения в виде геля на следующие сутки наблюдалось значительное уменьшение гиперемии, практически полное отсутствие отека и содержимого пузырей. Средство применяли на протяжении 5 дней. На 5-й день наблюдалось отслоение тонкого слоя эпидермиса раневой поверхности, под которым образовалась молодая кожа без рубцов и воспаления. Через 14 дней наблюдалось полное восстановление поврежденной поверхности.Example 18. The study of external use containing the original substance of the peptide structure Tyr-Pro-X, where X is OH, NH 2 , OCH 3 , OS 2 H 5 , patient A., 58 years old, with a burn. The patient was diagnosed with a burn of I, II degrees of two fingers (the middle one with an area of 1.5 cm and an anonymous area of 1 cm) of the left hand in the area of the nail bed with hot sunflower oil. Personal injury. Hyperemia, swelling of the skin, large continuous blisters with contents were observed. After application of the external agent in the form of a gel, a significant decrease in hyperemia, almost complete absence of edema and blister contents was observed on the next day. The tool was used for 5 days. On the 5th day, detachment of a thin layer of the epidermis of the wound surface was observed, under which young skin formed without scars and inflammation. After 14 days, complete restoration of the damaged surface was observed.
Пример 19. Изучение средства наружного применения, содержащего оригинальное вещество пептидной структуры Tyr-Pro-Х, где X - ОН, NH2, ОСН3, ОС2Н5, у больной Т., 56 лет, с ожогом. У больной диагностирован ожог I, II степеней тыльной стороны левого предплечья в области запястья - площадью 20 см2 горячим паром. Травма бытовая. Наблюдалась гиперемия, отек кожи, большие мелкие пузыри с содержимым. Средство применяли на протяжении 3 дней. После аппликации средства наружного применения в виде мази на следующие сутки наблюдалось значительное уменьшение гиперемии, практически полное отсутствие отека и содержимого пузырей. На 5-й день наблюдалось отслоение тонкого слоя эпидермиса раневой поверхности, под которым образовалась молодая кожа без рубцов и воспаления. Через 14 дней наблюдалось полное восстановление поврежденной поверхности.Example 19. The study of external use containing the original substance of the peptide structure Tyr-Pro-X, where X is OH, NH 2 , OCH 3 , OS 2 H 5 , in patient T., 56 years old, with a burn. The patient was diagnosed with a burn of I, II degrees of the back of the left forearm in the wrist - an area of 20 cm 2 with hot steam. Personal injury. Hyperemia, swelling of the skin, large small blisters with contents were observed. The tool was used for 3 days. After application of the external product in the form of an ointment, a significant decrease in hyperemia, almost complete absence of edema and blister contents was observed on the next day. On the 5th day, detachment of a thin layer of the epidermis of the wound surface was observed, under which young skin formed without scars and inflammation. After 14 days, complete restoration of the damaged surface was observed.
Пример 20. Изучение средства наружного применения, содержащего оригинальное вещество пептидной структуры Tyr-Pro-Х, где X - ОН, NH2, ОСН3, ОС2Н5, у больного ребенка С., 6 лет. На правом бедре ребенка в районе соприкосновения с резинкой диагностировано гиперемированное шероховатое пятно размером 1 см2, которое не проходило в течение 7 дней. После аппликации средства наружного применения в виде мази на следующие сутки пятно исчезло и больше не появлялось.Example 20. The study of external use containing the original substance of the peptide structure Tyr-Pro-X, where X is OH, NH 2 , OCH 3 , OS 2 H 5 , in a sick child S., 6 years old. On the right thigh of the child in the area of contact with the elastic, a hyperemic rough spot 1 cm 2 in size was diagnosed, which did not pass within 7 days. After application of the external product in the form of an ointment, the stain disappeared the next day and did not appear anymore.
Пример 21. Изучение средства наружного применения, содержащего оригинальное вещество пептидной структуры Tyr-Pro-Х, где X - ОН, NH2, ОСН3, ОС2Н5. Больная Г., 33 года. На левом боку в районе соприкосновения с резинкой находилось гиперемированное пятно размером 1,5 см2, которое не проходило в течение 10 дней. После аппликации средства наружного применения в виде спрея на следующие сутки пятно исчезло и больше не появлялось.Example 21. The study of external use containing the original substance of the peptide structure Tyr-Pro-X, where X is OH, NH 2 , OCH 3 , OS 2 H 5 . Patient G., 33 years old. On the left side in the area of contact with the rubber was a hyperemic spot of 1.5 cm 2 that did not pass for 10 days. After application of the external product in the form of a spray the next day the spot disappeared and did not appear anymore.
Пример 22. Изучение средства наружного применения, содержащего оригинальное вещество пептидной структуры Tyr-Pro-Х, где X - ОН, NH2, ОСН3, ОС2Н5. Больная К., 45 лет. На левом локте больной находилось гиперемированное пятно площадью 3 см2, которое не проходило в течение длительного времени. Больная неоднократно обращалась в лечебные учреждения, но результатов не было. После однократной аппликации средства наружного применения в виде пластыря через двое суток пятно исчезло и больше не появлялось.Example 22. The study of external use containing the original substance of the peptide structure Tyr-Pro-X, where X is OH, NH 2 , OCH 3 , OS 2 H 5 . Patient K., 45 years old. On the patient’s left elbow there was a hyperemic spot with an area of 3 cm 2 , which did not pass for a long time. The patient repeatedly went to medical institutions, but there were no results. After a single application of the external product in the form of a patch, the stain disappeared after two days and did not appear anymore.
Claims (3)
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012133274/15A RU2517213C2 (en) | 2012-08-03 | 2012-08-03 | Agent of peptide structure possessing anti-inflammatory, antibacterial, wound-healing, regenerative, analgesic, burntreating action and based dosage forms |
| PCT/RU2013/000625 WO2014021737A1 (en) | 2012-08-03 | 2013-07-19 | Pharmaceutical preparation of dipeptide tyr-pro with anti-inflammatory, antibacterial, wound-und burnhealing action |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012133274/15A RU2517213C2 (en) | 2012-08-03 | 2012-08-03 | Agent of peptide structure possessing anti-inflammatory, antibacterial, wound-healing, regenerative, analgesic, burntreating action and based dosage forms |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2012133274A RU2012133274A (en) | 2014-03-27 |
| RU2517213C2 true RU2517213C2 (en) | 2014-05-27 |
Family
ID=49304294
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2012133274/15A RU2517213C2 (en) | 2012-08-03 | 2012-08-03 | Agent of peptide structure possessing anti-inflammatory, antibacterial, wound-healing, regenerative, analgesic, burntreating action and based dosage forms |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2517213C2 (en) |
| WO (1) | WO2014021737A1 (en) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2139085C1 (en) * | 1998-06-23 | 1999-10-10 | Санкт-Петербургская общественная организация "Институт биорегуляции и геронтологии" | Agent stimulating reparative processes and method of its use |
| WO2011146922A2 (en) * | 2010-05-21 | 2011-11-24 | Cytogel Pharma, Llc | Materials and methods for treatment of inflammation |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3047596A1 (en) * | 1980-12-17 | 1982-07-22 | Victor Dipl.- Chem. 8000 München Brantl | Neuroleptic tyrosyl-proline di:peptide derivs. - prepd. by conventional linking of the component aminoacid(s) |
| RU2007997C1 (en) | 1992-07-08 | 1994-02-28 | Леонидов Николай Борисович | Methyluracil liniment |
| WO2008020778A1 (en) * | 2006-07-31 | 2008-02-21 | Institut Molekulyarnoi Genetiki Rossiiskoi Akademii Nauk (Img Ran) | Analgetically active peptide family |
-
2012
- 2012-08-03 RU RU2012133274/15A patent/RU2517213C2/en not_active IP Right Cessation
-
2013
- 2013-07-19 WO PCT/RU2013/000625 patent/WO2014021737A1/en active Application Filing
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2139085C1 (en) * | 1998-06-23 | 1999-10-10 | Санкт-Петербургская общественная организация "Институт биорегуляции и геронтологии" | Agent stimulating reparative processes and method of its use |
| WO2011146922A2 (en) * | 2010-05-21 | 2011-11-24 | Cytogel Pharma, Llc | Materials and methods for treatment of inflammation |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ГУЗЕВАТЫХ Л.С. "Поиск средств фармакологической регуляции болевой чувствительности среди фрагментов атипичных опиоидных пептидов" , Автореферат к диссертации д.б.н., Москва, 2010, стр.1-47. KILIAN G et al "Antimicrobial activity of liposome encapsulated cyclo(L-tyrosil-Lprolyl)", Pharmazie, 2011, Jun; 66(6):421-423. GOLDBERG JS ;Low Molecular Weight Opioid Peptide Esters Could be Developed as a New Class of Analgesics", Perspect Medicin Chem., 2011;5:19-26. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2014021737A1 (en) | 2014-02-06 |
| RU2012133274A (en) | 2014-03-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2139085C1 (en) | Agent stimulating reparative processes and method of its use | |
| TW202023623A (en) | New conjugates of montelukast and peptides | |
| WO2008037262A1 (en) | Wound healing composition comprising phosphate, iron and copper | |
| AU2005261276A1 (en) | Compositions and methods for dermatological wound healing | |
| JP2021525242A (en) | New drug use | |
| KR20180119941A (en) | A pharmaceutical composition for wound healing comprising extract of Euodia sutchuenensis Dode | |
| KR20080071385A (en) | Composition comprising the extract of ulmus macrocarpa hance for preventing and treating skin wound and skin ulcer | |
| US20180116986A1 (en) | Composition of novel powder formulations of tranexamic acid | |
| JP5872673B2 (en) | Methods for treating skin diseases | |
| US11696907B2 (en) | Wound healing composition | |
| NZ512713A (en) | New use of melagatran | |
| WO2020143744A1 (en) | New formulations containing leukotriene receptor antagonists | |
| KR20220079860A (en) | new peptide | |
| RU2517213C2 (en) | Agent of peptide structure possessing anti-inflammatory, antibacterial, wound-healing, regenerative, analgesic, burntreating action and based dosage forms | |
| AU2015349153B2 (en) | Application of levalbuterol formulation in treatment of skin and mucous membrane traumatic ulcers | |
| JPH09157161A (en) | Treating agent for skin disease | |
| WO2012077622A1 (en) | Therapeutic or prophylactic agent for keloid or hypertrophic scar, and agent for inhibiting tissue hypertrophy in injured part of airway | |
| RU2810444C1 (en) | Method of treatment vulgar and plantar warts | |
| WO2023182468A1 (en) | Wound treatment composition | |
| RU2278689C2 (en) | Method for treatment of trophic ulcer and long-term open septic wound | |
| WO2015048930A1 (en) | Pharmaceutical composition containing lornoxicam and povidone iodine | |
| JP2023503373A (en) | Novel multifunctional oligopeptide | |
| AU6468800A (en) | Pharmaceutical composition for topical application, uses and process for the preparation thereof | |
| CA3160167A1 (en) | Peptides and their use in the treatment of inflammation | |
| CN116919968A (en) | Application of ponifinib phosphate in preparation of medicine for promoting skin wound healing |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20190804 |