RU2493569C1 - Method of diagnostics of leptospirosis in farm animals - Google Patents
Method of diagnostics of leptospirosis in farm animals Download PDFInfo
- Publication number
- RU2493569C1 RU2493569C1 RU2012136015/15A RU2012136015A RU2493569C1 RU 2493569 C1 RU2493569 C1 RU 2493569C1 RU 2012136015/15 A RU2012136015/15 A RU 2012136015/15A RU 2012136015 A RU2012136015 A RU 2012136015A RU 2493569 C1 RU2493569 C1 RU 2493569C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- leptospirosis
- serogroups
- hebdomadis
- tarassovi
- grippotyphosa
- Prior art date
Links
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к ветеринарии, а именно к диагностике инфекционных заболеваний и может быть использовано для диагностики лептоспироза у сельскохозяйственных животных.The invention relates to veterinary medicine, namely to the diagnosis of infectious diseases and can be used to diagnose leptospirosis in farm animals.
Известен способ диагностики лептоспироза, основанный на использовании реакции микроагглютинации - РМА (ГОСТ 25380-91. Животные сельскохозяйственные. Методы лабораторной диагностики лептоспироза. - Взамен ГОСТ 325386-82; введ. 1993-01-01. - М.: Изд-во стандартов, 1992. - 30 с.), который осуществляется путем добавления лептоспирозной культуры к исследуемой сыворотке крови животного с последующим определением титров лептоспирозных антител. В качестве антигенов для обнаружения специфических антител в сыворотке крови животных в РМА используют живые культуры лептоспир. При этом обязательным является использование при плановом исследовании на лептоспироз каждой сыворотки крови минимум семи антигенов (живых лептоспир серогрупп L.hebdomadis, L.pomona, L.tarassovi, L.grippotyphosa, L.canicola, L.sejroe, L.icterohaemorrhagiae). Диагностические штаммы лептоспир лаборатории поддерживают периодическими пересевами через каждые 10-15 дней. В реакции используют культуры лептоспир в возрасте 5-10 дней без признаков агглютинации и лизиса с накоплением микробных клеток 50-100 млн/см3.A known method for the diagnosis of leptospirosis, based on the use of the microagglutination reaction - PMA (GOST 25380-91. Agricultural animals. Laboratory methods for the diagnosis of leptospirosis. - Instead of GOST 325386-82; introduced. 1993-01-01. - M .: Publishing house of standards, 1992. - 30 p.), Which is carried out by adding a leptospirosis culture to the test blood serum of the animal, followed by determination of the titers of leptospirosis antibodies. As antigens for the detection of specific antibodies in the blood serum of animals in PMA, live cultures of leptospira are used. At the same time, it is mandatory to use at least seven antigens (live leptospira of the serogroups L.hebdomadis, L.pomona, L.tarassovi, L..grippotyphosa, L.canicola, L.sejroe, L.icterohaemorrhagiae) in a routine study on leptospirosis of each blood serum. Laboratory leptospira diagnostic strains are maintained by periodic reseeding every 10-15 days. The reaction uses cultures of leptospira aged 5-10 days without signs of agglutination and lysis with the accumulation of microbial cells 50-100 million / cm 3 .
Однако известный способ имеет существенные недостатки: большая трудоемкость, субъективная оценка результатов диагностики, невозможность стандартизации проведения диагностики, необходимость учета реакции только под микроскопом. Кроме того, способ требует постоянного поддерживания в стабильном состоянии полного диагностического набора живых лептоспир, что может представлять угрозу здоровью персонала ветеринарных лабораторий.However, the known method has significant drawbacks: high complexity, subjective assessment of the diagnostic results, the inability to standardize the diagnosis, the need to take into account the reaction only under a microscope. In addition, the method requires constant maintenance in a stable state of a complete diagnostic set of living leptospira, which may pose a threat to the health of personnel of veterinary laboratories.
За прототип принят способ обнаружения лептоспирозных антител в сыворотке крови свиней с помощью иммуноферментного анализа (ИФА), где для изготовления антигена используют лептоспиры 7-ми серогрупп: L.hebdomadis, L.pomona, L.tarassovi, L.grippotyphosa, L.canicola, L.sejroe, L.icterohaemorrhagiae (см. Патент РФ №2053513, МПК A61K 39/00 от 27.01.96.). Однако данный способ трудоемок, т.к. для получения антигена необходимо использовать лептоспиры 7-ми серогрупп и при этом данный способ не предназначен для выявления лептоспирозных антител у других видов сельскохозяйственных животных.The prototype is a method for detecting leptospirosis antibodies in the blood serum of pigs using enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), where the leptospira of 7 serogroups is used for the production of antigen: L.hebdomadis, L.pomona, L.tarassovi, L..grippotyphosa, L.canicola L.sejroe, L.icterohaemorrhagiae (see RF Patent No. 2053513, IPC A61K 39/00 dated 01/27/96.). However, this method is time-consuming, because to obtain the antigen, it is necessary to use leptospira of 7 serogroups and this method is not intended to detect leptospirosis antibodies in other types of farm animals.
Задачей изобретения является расширение арсенала способов диагностики лептоспироза, обеспечивающего в короткие сроки с максимальной точностью и объективностью получение результатов, свидетельствующих о наличии в исследуемых сыворотках крови сельскохозяйственных животных антител к патогенным лептоспирам, а также безопасные условия труда для персонала диагностических лабораторий.The objective of the invention is to expand the arsenal of methods for the diagnosis of leptospirosis, providing in a short time with maximum accuracy and objectivity to obtain results indicating the presence in the blood serum of farm animals of antibodies to pathogenic leptospira, as well as safe working conditions for personnel of diagnostic laboratories.
Поставленная задача решается тем, что в способе диагностики лептоспироза сельскохозяйственных животных, включающем метод непрямого твердофазного ИФА для выявления антител к антигенам семи серогрупп L.hebdomadis, L.pomona, L.tarassovi, L.grippotyphosa, L.canicola, L.sejroe и L.icterohaemorrhagiae в сыворотке крови, согласно изобретения, в качестве антигена применяют смешанные в равных количествах антигенные белки из лептоспир трех серогрупп - L.tarassovi, L.grippotyphosa и L.hebdomadis. Данный способ позволяет выявлять лептоспирозные антитела у разных видов сельскохозяйственных животных.The problem is solved in that in a method for the diagnosis of leptospirosis of farm animals, including the method of indirect solid-phase ELISA for the detection of antibodies to antigens of the seven serogroups L.hebdomadis, L.pomona, L.tarassovi, L..grippotyphosa, L.canicola, L.sejroe and L .icterohaemorrhagiae in blood serum, according to the invention, antigen mixed antigenic proteins from leptospira of three serogroups L. tarassovi, L. grippotyphosa and L. hebdomadis are used as antigen. This method allows the detection of leptospirosis antibodies in different types of farm animals.
Способ осуществляется следующим образом.The method is as follows.
Полученным антигеном сенсибилизируют полистироловые планшеты для ИФА в течение 16-18 ч при 20-22°C, с последующим наслаиванием 1% раствора БСА с экспозицией в 1 ч при 37°C и последующей трехкратной промывкой.Polystyrene ELISA plates were sensitized with the obtained antigen for 16-18 hours at 20-22 ° C, followed by layering of a 1% BSA solution with an exposure of 1 hour at 37 ° C, followed by three times washing.
В две лунки планшета вносят по 100 мкл положительного контрольного образца (К+), в две другие лунки планшета - по 100 мкл отрицательного контрольного образца (К-). В остальные лунки планшета вносят по 50 мкл разводящего буферного раствор для сывороток (РБР-С) и по 50 мкл исследуемых сывороток. Раствор перемешивают 5 раз пипетированием, не касаясь дна лунки.100 μl of a positive control sample (K +) is added to two wells of a tablet, 100 μl of a negative control sample (K-) to two other wells of a tablet. In the remaining wells of the tablet, 50 μl of serum dilution buffer solution (RBR-C) and 50 μl of test sera are added. The solution was stirred 5 times by pipetting without touching the bottom of the well.
После внесения проб сывороток планшет помещают в пластиковый пакет или накрывают крышкой и инкубируют 60 минут при 37°C. После инкубации лунки освобождают от содержимого и пятикратно промывают рабочим фосфатно-солевым буферным раствором с твином (ФСБ-Т).After making serum samples, the plate is placed in a plastic bag or covered with a lid and incubated for 60 minutes at 37 ° C. After incubation, the wells are freed from the contents and washed five times with working phosphate-saline buffer solution with tween (FSB-T).
После промывки в лунки планшета вносят по 100 мкл раствора конъюгата, конъюгированного с пероксидазой хрена (РКг-G); планшет помещают в пластиковый пакет или накрывают крышкой и выдерживают 30 минут при 37°C.After washing, 100 μl of conjugate conjugated with horseradish peroxidase (PKg-G); the tablet is placed in a plastic bag or covered with a lid and incubated for 30 minutes at 37 ° C.
После повторной инкубации лунки освобождают от содержимого и проводят пятикратное промывание рабочим раствором ФСБ-Т. После промывки в лунки планшета вносят по 100 мкл раствора хромоген - тетраметилбензидин субстрата (ТМБ-субстрат) и выдерживают 30 минут при 37°C в темноте. По истечению указанного времени реакцию останавливают добавлением в каждую используемую лунку по 50 мкл стоп-раствора.After re-incubation, the wells are freed from the contents and a five-fold washing with the FSB-T working solution is carried out. After washing, 100 μl of a solution of chromogen - tetramethylbenzidine substrate (TMB substrate) is added to the wells of the plate and incubated for 30 minutes at 37 ° C in the dark. After this time, the reaction is stopped by adding 50 μl of stop solution to each well used.
Оценка результатов реакции:Assessment of the results of the reaction:
Результаты ИФА регистрируют на спектрофотометре. Оптическую плотность (ОП) измеряют при длине волны 450 нм. Нулевой уровень («бланк») задают по воздуху. Рассчитывают ОПкрит. по формуле:ELISA results are recorded on a spectrophotometer. Optical density (OD) is measured at a wavelength of 450 nm. The zero level (“blank”) is set by air. Calculate OPcrit. according to the formula:
ОПкрит.=ОПК-(ср.)+0,2,OPcrit. = OPK- (cf.) + 0.2,
где ОПК-(ср.) - среднее значение ОП (ОПК-) по двум лункам.where OPK- (cf.) is the average value of OP (OPK-) over two wells.
Если значение оптической плотности исследуемого образца не превышает ОПкрит., то образцы рассматриваются как отрицательные на наличие лептоспирозных антител к серогруппам L.pomona, L.tarassovi, L.hebdomadis, L.icterohaemorrhagiae, L.grippotyphosa, L.sejroe и L.canicola.If the optical density of the test sample does not exceed OPcrit., Then the samples are considered negative for the presence of leptospirosis antibodies to the serogroups L. pomona, L. tarassovi, L. hebdomadis, L. icterohaemorrhagiae, L. grippotyphosa, L. sejroe and L. canicola.
Если значение оптической плотности исследуемого образца превышает ОПкрит., то образцы рассматриваются как положительные на наличие лептоспирозных антител к серогруппам L.pomona, L.tarassovi, L.hebdomadis, L.icterohaemorrhagiae, L.grippotyphosa, L.sejroe и L.canicola в любом сочетании.If the optical density of the test sample exceeds OPcrit., Then the samples are considered positive for the presence of leptospirosis antibodies to the serogroups L.pomona, L.tarassovi, L.hebdomadis, L.icterohaemorrhagiae, L..grippotyphosa, L.sejroe and L.canicola in any combination.
Пример 1. Определяли оптимальное сочетание антигенных белков разных серогрупп лептоспир при получении антигена.Example 1. The optimal combination of antigenic proteins of different leptospira serogroups was determined upon receipt of the antigen.
Для этого использовали отдельно антигенные белки каждой из 5-ти серогрупп лептоспир (антигенные белки серогрупп L.canicola и L.sejroe отдельно не брали для исследования, т.к. они имеют антигенную структуру идентичную с L.icterohaemorrhagiae и L.hebdomadis соответственно), а также смешанные в равных количествах антигенные белки семи серогрупп.For this, we used separately antigenic proteins of each of the 5 serogroups leptospira (antigenic proteins of the serogroups L.canicola and L. sejroe were not taken separately for research, because they have an antigenic structure identical to L.icterohaemorrhagiae and L.hebdomadis, respectively). as well as antigenic proteins of seven serogroups mixed in equal amounts.
- №1 антигенные белки L.hebdomadis,- No. 1 antigenic proteins of L.hebdomadis,
- №2 антигенные белки L.pomona,- No. 2 antigenic proteins of L. pomona,
- №3 антигенные белки L.tarassovi,- No. 3 antigenic proteins of L. tarassovi,
- №4 антигенные белки L.icterohaemorrhagiae,- No. 4 antigenic proteins of L.icterohaemorrhagiae,
- №5 антигенные белки L.grippotyphosa,- No. 5 antigenic proteins of L.grippotyphosa,
- №6 антигенные белки L.hebdomadis+L.pomona+L.tarassovi+L.grippotyphosa+L.canicola+L.sejroe+L.icterohaemorrhagiae - поливалентный антиген.- No. 6 antigenic proteins L.hebdomadis + L.pomona + L.tarassovi + L..grippotyphosa + L.canicola + L.sejroe + L.icterohaemorrhagiae - polyvalent antigen.
Для исследования в ИФА с изготовленными антигенами использовали сыворотки крови кроликов, сенсибилизированных культурами лептоспир различных серогрупп. Предварительно сыворотки крови исследовали в РМА. В качестве контроля специфичности использовали сыворотку крови интактных кроликов с отрицательной РМА на лептоспироз (табл.1).For research in ELISA with manufactured antigens, the blood serum of rabbits was used, sensitized by cultures of leptospira of various serogroups. Pre-serum was investigated in PMA. As a specificity control, the blood serum of intact rabbits with negative PMA for leptospirosis was used (Table 1).
Результаты исследований, приведенные в таблице №1, показывают, что при исследовании сывороток крови интактных кроликов с разными антигенами в ИФА во всех случаях получили отрицательные результаты, которые совпали с РМА.The research results shown in table No. 1 show that in the study of blood serum of intact rabbits with different antigens in ELISA, in all cases, negative results were obtained that coincided with PMA.
При испытании поливалентного антигена (из L.hebdomadis+L.pomona+L.tarassovi+L.grippotyphosa+L.canicola+L.sejroe+L.icterohaemorrhagiae) положительные показания в ИФА получены у кроликов, сенсибилизированных только L.hebdomadis, L.tarassovi, L.canicola и L.sejroe, т.е. не у всех кроликов.When testing a polyvalent antigen (from L.hebdomadis + L.pomona + L.tarassovi + L..grippotyphosa + L.canicola + L.sejroe + L.icterohaemorrhagiae) positive readings in ELISA were obtained in rabbits sensitized only by L.hebdomadis, L. tarassovi, L.canicola and L.sejroe, i.e. not all rabbits.
Максимальное число положительных результатов ИФА при исследовании сыворотки крови кроликов, сенсибилизированных каждым из антигенов семи серогрупп, получено при использовании антигенных белков из L.tarassovi (у кроликов, сенсибилизированных L.pomona, L.tarassovi, L.canicola, L.icterohaemorrhagiae и L.sejroe). Исключение составили сыворотки крови кроликов, сенсибилизированных лептоспирами Grippotyphosa и Hebdomadis, которые дали в ИФА отрицательный результат. Поэтому было решено использовать для изготовления антигена сочетание антигенных белков лептоспир трех серогрупп - L.tarassovi, L.grippotyphosa и L.hebdomadis.The maximum number of positive ELISA results in the study of blood serum of rabbits sensitized by each of the antigens of the seven serogroups was obtained using antigenic proteins from L. tarassovi (in rabbits sensitized by L. pomona, L. tarassovi, L. canicola, L. icterohaemorrhagiae and L. sejroe). An exception was the blood serum of rabbits sensitized by the leptospira Grippotyphosa and Hebdomadis, which gave a negative result in ELISA. Therefore, it was decided to use a combination of the leptospira antigenic proteins of three serogroups, L. tarassovi, L. grippotyphosa, and L. hebdomadis, for the production of antigen.
Пример 2. Испытания антигена, полученного из антигенных белков L.tarassovi, L.grippotyphosa и L.hebdomadis, провели с помощью ИФА на сыворотках крови кроликов, интактных и искусственно сенсибилизированных лептоспирами (табл.2).Example 2. Tests of the antigen obtained from the antigenic proteins L. tarassovi, L. grippotyphosa and L. hebdomadis were performed using ELISA on the blood serum of rabbits, intact and artificially sensitized by leptospira (table 2).
Из таблицы 2 видно, что антиген, полученный с использованием антигенных белков лептоспир 3-х серогрупп - L.tarassovi, L.grippotyphosa и L.hebdomadis, выявил в иммуноферментном анализе антитела у всех кроликов, сенсибилизированных лептоспирами как каждой из семи серогрупп, так и смесью лептоспир семи серогрупп.Table 2 shows that the antigen obtained with the use of antigenic proteins of leptospira 3 serogroups - L. tarassovi, L. grippotyphosa and L. hebdomadis, revealed antibodies in all enzymes immunosorbent, sensitized by leptospira both of each of the seven serogroups and a mixture of leptospira seven serogroups.
Интактные кролики в ИФА дали отрицательный результат.Intact rabbits in ELISA gave a negative result.
Пример 3. Разработанным антигеном в ИФА провели тестирование 25 проб сывороток крови крупного рогатого скота, часть которых были положительными на наличие лептоспирозных антител по результатам реакции микроагглютинации - РМА (табл.3).Example 3. The developed antigen in ELISA tested 25 samples of blood serum of cattle, some of which were positive for the presence of leptospirosis antibodies according to the results of the microagglutination-PMA reaction (Table 3).
В результате установлено, что все сыворотки крови, положительные по результатам РМА, дали положительный результат в ИФА с использованием антигенных белков лептоспир 3-х серогрупп - L.tarassovi, L.grippotyphosa и L.hebdomadis (100% животных). Отрицательно реагирующий в РМА крупный рогатый скот в ИФА дал отрицательный результат (100% животных).As a result, it was established that all blood serum positive by the results of PMA gave a positive result in ELISA using antigenic proteins of leptospira of 3 serogroups - L. tarassovi, L. grippotyphosa and L. hebdomadis (100% animals). Cattle negatively reacting in PMA in ELISA gave a negative result (100% of animals).
Пример 4. Разработанным антигеном в ИФА провели тестирование 14 проб сывороток крови свиней, часть которых были положительными на наличие лептоспирозных антител по результатам реакции микроагглютинации - РМА (табл.4).Example 4. The developed antigen in ELISA tested 14 samples of pig blood serum, some of which were positive for the presence of leptospirosis antibodies according to the results of the microagglutination-PMA reaction (Table 4).
Из таблицы 4 видно, что все сыворотки крови свиней, положительные по результатам РМА, дали положительный результат в ИФА с использованием антигенных белков лептоспир 3-х серогрупп - L.tarassovi, L.grippotyphosa и L.hebdomadis (100% животных). Отрицательно реагирующие в РМА свиньи в ИФА дали отрицательный результат (100% животных).From table 4 it is seen that all pig serum positive for PMA showed a positive result in ELISA using antigenic proteins of the leptospira 3 serogroups - L. tarassovi, L. grippotyphosa and L. hebdomadis (100% animals). Pigs negatively reacting in PMA in ELISA gave a negative result (100% of animals).
Таким образом, предлагаемый способ диагностики лептоспироза у сельскохозяйственных животных с помощью метода непрямого твердофазного иммуноферментного анализа с использованием антигенных белков лептоспир 3-х серогрупп - L.tarassovi, L.grippotyphosa и L.hebdomadis значительно упрощает диагностику лептоспироза, благодаря применению в качестве антигенов убитых штаммов лептоспир, вследствие чего устраняются большие трудности, связанные с необходимостью поддержания и использования в лабораториях полного диагностического набора живых лептоспир. Кроме того, упрощается учет полученных результатов реакции, который проводится на спектрофотометре, а не в темном поле зрения микроскопа, как при РМА, исключается возможность неправильной интерпретации результатов.Thus, the proposed method for the diagnosis of leptospirosis in farm animals using the method of indirect enzyme-linked immunosorbent assay using antigenic proteins of leptospira 3 serogroups L. tarassovi, L. grippotyphosa and L. hebdomadis greatly simplifies the diagnosis of leptospirosis, due to the use of killed strains as antigens leptospira, as a result of which great difficulties associated with the need to maintain and use in laboratories a complete diagnostic set of live leptospira are eliminated. In addition, it simplifies accounting for the results of the reaction, which is carried out on a spectrophotometer, and not in the dark field of view of the microscope, as with PMA, and the possibility of incorrect interpretation of the results is excluded.
Данный способ обладает быстротой постановки и учета, безопасностью и стандартностью, обеспечивает быстрое выявление антител к любому антигену из семи распространенных серогрупп возбудителя, что позволяет оперативно и систематически осуществлять контроль за эпизоотическим состоянием животных по лептоспирозу.This method has the speed of setting and accounting, safety and standardization, provides rapid detection of antibodies to any antigen from seven common serogroups of the pathogen, which allows you to quickly and systematically monitor the epizootic state of animals by leptospirosis.
Предлагаемый способ диагностики лептоспироза позволяет ставить диагноз на данное заболевание в минимально короткие сроки, обладает высокой специфичностью и чувствительностью.The proposed method for the diagnosis of leptospirosis allows you to diagnose this disease in the shortest possible time, has high specificity and sensitivity.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012136015/15A RU2493569C1 (en) | 2012-08-21 | 2012-08-21 | Method of diagnostics of leptospirosis in farm animals |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012136015/15A RU2493569C1 (en) | 2012-08-21 | 2012-08-21 | Method of diagnostics of leptospirosis in farm animals |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2493569C1 true RU2493569C1 (en) | 2013-09-20 |
Family
ID=49183544
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2012136015/15A RU2493569C1 (en) | 2012-08-21 | 2012-08-21 | Method of diagnostics of leptospirosis in farm animals |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2493569C1 (en) |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0125423A1 (en) * | 1983-04-13 | 1984-11-21 | Texas Instruments Incorporated | Voice messaging system with pitch tracking based on adaptively filtered LPC residual signal |
| RU2053513C1 (en) * | 1992-02-25 | 1996-01-27 | Витебский ветеринарный институт | Method of diagnosis of leptospirosis in pigs |
| RU2177617C1 (en) * | 2000-05-29 | 2001-12-27 | Волина Елена Григорьевна | Method of preparing leptospirosis diagnosticum for reaction latex-agglutination carrying out |
| US20060204522A1 (en) * | 2005-03-14 | 2006-09-14 | Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. | Immunogenic compositions comprising Lawsonia intracellularis |
| US20110052629A1 (en) * | 2007-09-04 | 2011-03-03 | Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. | Methods of reducing concomitant infections in pigs with a pcv2 antigen |
-
2012
- 2012-08-21 RU RU2012136015/15A patent/RU2493569C1/en active
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0125423A1 (en) * | 1983-04-13 | 1984-11-21 | Texas Instruments Incorporated | Voice messaging system with pitch tracking based on adaptively filtered LPC residual signal |
| RU2053513C1 (en) * | 1992-02-25 | 1996-01-27 | Витебский ветеринарный институт | Method of diagnosis of leptospirosis in pigs |
| RU2177617C1 (en) * | 2000-05-29 | 2001-12-27 | Волина Елена Григорьевна | Method of preparing leptospirosis diagnosticum for reaction latex-agglutination carrying out |
| US20060204522A1 (en) * | 2005-03-14 | 2006-09-14 | Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. | Immunogenic compositions comprising Lawsonia intracellularis |
| US20110052629A1 (en) * | 2007-09-04 | 2011-03-03 | Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. | Methods of reducing concomitant infections in pigs with a pcv2 antigen |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Sidi‐Boumedine et al. | Development of harmonised schemes for the monitoring and reporting of Q‐fever in animals in the European Union | |
| Dargatz et al. | Evaluation of a commercial ELISA for diagnosis of paratuberculosis in cattle | |
| Cavirani et al. | Association between Chlamydia psittaci seropositivity and abortion in Italian dairy cows | |
| Stau et al. | Seroprevalence of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis in small ruminants in Germany | |
| Priyantha | Identification of biovars of Brucella abortus in aborted cattle and buffaloes herd in Sri Lanka | |
| Rahman et al. | Brucellosis in sheep and goat of Bogra and Mymensingh districts of Bangladesh | |
| CN101675340A (en) | Method of detecting infection with urogenital mycoplasmas in humans and a kit for diagnosing same | |
| Barbuddhe et al. | Immunodetection of bacteria causing brucellosis | |
| Wasinski et al. | Occurrence of leptospiral infections in swine population in Poland evaluated by ELISA and microscopic agglutination test | |
| RU2493569C1 (en) | Method of diagnostics of leptospirosis in farm animals | |
| Al-Alo et al. | A cross sectional study on the seroprevalence of bovine brucellosis in Al-Najaf province in Iraq | |
| Babar et al. | Incidence of Bovine Brucellosis in Thatta, Sindh-Pakistan | |
| Sharma et al. | Determination of herd prevalence of brucellosis using Rose Bengal Plate Test and indirect ELISA | |
| Ebrahimi et al. | Seroinvestigation of bovine leptospirosis in Shahrekord district, central Iran | |
| RU2635515C1 (en) | Method of differential express diagnostics of brucellosis of large cattle | |
| Celebi et al. | Seroepidemiological investigation of brucellosis in sheep abortions in Kars, Turkey | |
| Gilsdorf et al. | Experimental exposure of llamas (Lama glama) to Brucella abortus: humoral antibody response | |
| Khajuria et al. | Seroprevalence of brucellosis in buffaloes in North India | |
| Ueno et al. | Total serum protein reference value as a clinical diagnostic index of equine proliferative enteropathy | |
| Sharypov | Results of Laboratory Control of Brucellosis and Leptospirosis of Animals in Russia | |
| Alrodhan | Serological Investigation Of Caprine Brucellosis At Saniyah District | |
| Sivakumar et al. | Seroprevalence of Paratuberculosis infection in cattle | |
| Tufani et al. | Microscopic Agglutination Test (MAT) for Leptospirosis in association with acute renal failure in dogs | |
| Farahat et al. | Preparation of buffered acidified plate antigen from Brucella abortus strain 19 | |
| العلو et al. | دراسة مقطعیة-عرضیة مسحیة للانتشار المصلی لمرض الإجهاض الساری البقری فی محافظة النجف فی العراق |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD4A | Correction of name of patent owner | ||
| PC43 | Official registration of the transfer of the exclusive right without contract for inventions |
Effective date: 20200608 |