RU2488356C1 - Method of correcting immune disorders - Google Patents
Method of correcting immune disorders Download PDFInfo
- Publication number
- RU2488356C1 RU2488356C1 RU2012107519/14A RU2012107519A RU2488356C1 RU 2488356 C1 RU2488356 C1 RU 2488356C1 RU 2012107519/14 A RU2012107519/14 A RU 2012107519/14A RU 2012107519 A RU2012107519 A RU 2012107519A RU 2488356 C1 RU2488356 C1 RU 2488356C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cells
- immune disorders
- bone marrow
- animals
- correction
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области медицины, а именно к экспериментальной хирургии и патофизиологии, и может быть использовано для коррекции иммунных нарушений.The invention relates to medicine, namely to experimental surgery and pathophysiology, and can be used to correct immune disorders.
Известно, что удаление селезенки, относящейся к наиболее крупным периферическим лимфоидным органам, вызывает изменение пула периферических иммунокомпетентных клеток, вследствие чего нарушается клеточное звено иммунитета, что приводит к угнетению фагоцитарной активности клеток крови и развитию иммунодефицита.It is known that the removal of the spleen, which belongs to the largest peripheral lymphoid organs, causes a change in the pool of peripheral immunocompetent cells, as a result of which the cellular immunity is disrupted, which leads to inhibition of the phagocytic activity of blood cells and the development of immunodeficiency.
Известны различные способы коррекции нарушения иммунитета, как в клинике, так и в эксперименте.There are various methods for correcting immunity disorders, both in the clinic and in the experiment.
Так, известен способ коррекции иммунодефицита в клинике путем внутривенного введения препарата Ронколейкин® в суточной дозе от 125 до 500 тыс ME. Курс лечения составляет 4-8 внутривенных инфузий. (Скляр Л.Ф., Маркелова Е.В. Клинико-иммунологическая эффективность применения Ронколейкина® при лечении хронического вирусного гепатита С. // Здравоохранение Урала. - 2002 - №5 Т.11 - с.39-43).So, there is a known method for the correction of immunodeficiency in the clinic by intravenous administration of the drug Roncoleukin ® in a daily dose of 125 to 500 thousand ME. The course of treatment is 4-8 intravenous infusions. (Sklyar L.F., Markelova E.V. Clinical and immunological efficacy of Roncoleukin ® in the treatment of chronic viral hepatitis C. // Public Health of the Urals. - 2002 - No. 5 T.11 - p. 39-43).
Основным недостатком известного способа является то, что при спленэктомии происходит одномоментная потеря огромного количества иммунокомпетентных клеток, вследствие чего иммуностимуляция Ронколейкином затруднена.The main disadvantage of this method is that during splenectomy there is a simultaneous loss of a huge number of immunocompetent cells, as a result of which Roncoleukin immunostimulation is difficult.
К недостаткам данного способа следует также отнести и его внутривенное введение, т.к. такое применение препарата в эксперименте затруднено в связи с использованием мелких лабораторных животных. В связи с небольшим весом и размерами вен животных имеется сложность в подборе дозы от 125 до 500 тыс. ME при 8-ми кратном внутривенном введении препарата, что сопряжено с дополнительным воздействием на животное (стресс, наркозные препараты, повреждение вен, болевой синдром, кровотечение). Эти дополнительные факторы не позволяют стандартизировать полученные результаты.The disadvantages of this method should also include its intravenous administration, as such use of the drug in the experiment is difficult due to the use of small laboratory animals. Due to the small weight and size of the veins of the animals, it is difficult to select a dose of 125 to 500 thousand ME with 8-fold intravenous administration of the drug, which is associated with additional effects on the animal (stress, anesthetic drugs, damage to the veins, pain, bleeding ) These additional factors do not allow standardizing the results.
Кроме этого, по данным авторов заявляемого способа, не известно использование Ронколейкина для коррекции нарушений иммунитета после спленэктомии.In addition, according to the authors of the proposed method, it is not known the use of Roncoleukin for the correction of immune disorders after splenectomy.
Наиболее близким по технической сущности к предлагаемому является способ коррекции иммунных нарушений после спленэктомии путем подкожного введения криоконсервированных клеток селезенки (Прокопьев М.В. Применение ксенотрансплантации криоконсервированных клеток селезенки для коррекции постспленэктомического гипоспленизма (экспериментальное исследование): дис.… канд. мед. наук. - Иркутск, 2001. - С.29).The closest in technical essence to the proposed one is a method for the correction of immune disorders after splenectomy by subcutaneous injection of cryopreserved spleen cells (Prokopyev M.V. Application of xenograft of cryopreserved spleen cells to correct post-splenectomy hyposplenism (experimental study): thesis ... Candidate of medical sciences. - Irkutsk, 2001 .-- P.29).
Известный способ осуществляют следующим образом. Животным через час после спленэктомии выполняют подкожное введение 1 мл взвеси, содержащей 2×106 клеток селезенки. Введение проводят в область передней брюшной стенки. При этом инъекционную иглу вводят на всю длину в толщу подкожной жировой клетчатки параллельно коже. Затем при порционном введении взвеси клеток проводят постепенное подтягивание иглы на себя. Этим достигают равномерного распределения ксенотрансплантата в подкожной жировой клетчатке.The known method is as follows. One hour after splenectomy, animals are subcutaneously injected with 1 ml of suspension containing 2 × 10 6 spleen cells. The introduction is carried out in the region of the anterior abdominal wall. In this case, the injection needle is injected the entire length into the thickness of the subcutaneous fatty tissue parallel to the skin. Then, with a portioned introduction of a suspension of cells, a gradual pulling of the needle onto itself is carried out. This achieves a uniform distribution of the xenograft in the subcutaneous fat.
К недостаткам данного способа следует отнести низкую активацию фагоцитоза, т.к. трансплантированные ксеногенные клетки не восстанавливают Т-клеточное звено иммунитета у аспленизированных животных. Кроме этого, за счет использования ксеногенных клеток, время эффективного их воздействия ограничено, так как существует риск их отторжения.The disadvantages of this method include the low activation of phagocytosis, because transplanted xenogenic cells do not restore the T-cell immunity in asplenized animals. In addition, due to the use of xenogenic cells, their effective exposure time is limited, since there is a risk of rejection.
Задачей заявляемого изобретения является разработка способа коррекции иммунных нарушений в эксперименте.The task of the invention is to develop a method for the correction of immune disorders in an experiment.
Техническим результатом предлагаемого способа является повышение эффективности коррекции иммунных нарушений, за счет восстановления процессов фагоцитоза и Т-клеточного звена иммунитета у аспленизированных животных.The technical result of the proposed method is to increase the efficiency of correction of immune disorders, due to the restoration of the processes of phagocytosis and T-cell immunity in asplenized animals.
Технический результат заявляемого способа достигается тем, что коррекция иммунных нарушений, вызванных полной аспленизацией животного, в эксперименте включает однократное введение в раннем послеоперационном периоде взвеси культивированных клеток.The technical result of the proposed method is achieved in that the correction of immune disorders caused by complete asplenization of the animal in the experiment includes a single injection in the early postoperative period of suspension of cultured cells.
Основным отличием предлагаемого способа является то, что аспленизированным крысам линии Вистар вводят 1 мл взвеси суточной культуры аллогенных мононуклеарных клеток костного мозга здоровых крыс, содержащей 2,4×108 клеток.The main difference of the proposed method is that 1 ml of suspension of a 24-hour culture of healthy rat allogenic mononuclear bone marrow cells of healthy rats containing 2.4 × 10 8 cells is administered to asplenated Wistar rats.
Отличие заявляемого способа так же заключается и в том, что аллотрансплантацию суточной культуры мононуклеарных клеток костного мозга проводят внутрибрюшинно.The difference of the proposed method also lies in the fact that the allograft daily culture of bone marrow mononuclear cells is performed intraperitoneally.
Сопоставительный анализ заявляемого технического решения с прототипом позволяет сделать вывод о соответствии заявляемого технического решения критерию изобретения «новизна».A comparative analysis of the proposed technical solution with the prototype allows us to conclude that the claimed technical solution meets the criteria of the invention of "novelty."
Авторами предлагаемого способа установлено, что аллотрансплантация суточной культуры мононуклеарных клеток костного мозга, в активной фазе их жизнедеятельности, обеспечивает активацию фагоцитоза и Т-клеточного звена иммунной системы, угнетенного спленэктомией. Введение взвеси аллогенных мононуклеарных клеток костного мозга в концентрации 2,4×108 в 1 мл обеспечивает активацию иммунной системы, что подтверждает выживаемость экспериментальных животных после тотальной аспленизации. Так, на 10-е сутки эксперимента выживаемость крыс, которым была выполнена трансплантация аллогенных мононуклеарных клеток костного мозга составила 58,4%. Летальность в этой группе животных наблюдалась с 5-х по 8-е сутки после спленэктомии, в то время как в группе животных без коррекции иммунных нарушений летальность к 10-м суткам составила 100%.The authors of the proposed method found that allotransplantation of a 24-hour culture of bone marrow mononuclear cells, in the active phase of their life, ensures the activation of phagocytosis and the T-cell link of the immune system inhibited by splenectomy. The introduction of a suspension of allogeneic mononuclear bone marrow cells at a concentration of 2.4 × 10 8 in 1 ml ensures the activation of the immune system, which confirms the survival of experimental animals after total asplenization. So, on the 10th day of the experiment, the survival rate of rats that underwent transplantation of allogeneic bone marrow mononuclear cells was 58.4%. Mortality in this group of animals was observed from the 5th to the 8th day after splenectomy, while in the group of animals without correction of immune disorders, the mortality rate by 10th day was 100%.
Авторами заявляемого способа опытным путем определен оптимальный путь введения мононуклеарных клеток костного мозга. Исследования показали, что наилучшие иммунологические показатели получены у животных после однократного внутрибрюшинного введения взвеси культивированных мононуклеарных клеток, в сравнении с их внутривенным и подкожным введением. Так при внутрибрюшинном введении аллогенных культивированных мононуклеарных клеток костного мозга летальность экспериментальных животных составила 41,6%, при внутривенной их трансплантации - 83,3%, при подкожном введении - 75%.The authors of the proposed method empirically determined the optimal route of administration of bone marrow mononuclear cells. Studies have shown that the best immunological parameters were obtained in animals after a single intraperitoneal injection of a suspension of cultured mononuclear cells, in comparison with their intravenous and subcutaneous administration. So, with intraperitoneal administration of allogeneic cultured mononuclear bone marrow cells, the mortality rate of experimental animals was 41.6%, with intravenous transplantation - 83.3%, with subcutaneous administration - 75%.
При исследовании показателей воспалительной реакции организма в условиях иммунных нарушений и трансплантации мононуклеарных клеток костного мозга установлена нормализация показателей к 21-м суткам (лейкоциты 5,2 (3,3-7,7)×109; лимфоциты 56,7 (51,0-58,0)%, тогда как в контроле выявлены прогрессирующие расстройства (см. Приложение к описанию, табл.1). Показатели фагоцитоза в условиях иммунных нарушений и трансплантации мононуклеарных клеток костного мозга существенно возрастали на 7-е сутки: фагоцитарный индекс (ФИ)=76,0 (65,0-80,0); фагоцитарное число (ФЧ)=3,4 (3,4-4,5); НСТсп 6,6 (6,0-7,0); спонтанный тест восстановления нитросинего тетразолия (НСТ-сп)=20,0 (19,0-21,5) (см. Приложение к описанию, табл.2), при стабильно низких показателях в группе контроля. При оценке Т-клеточного звена иммунитета в условиях иммунных нарушений и трансплантации мононуклеарных клеток костного мозга установлено увеличение количества T-зрелых лимфоцитов и Т-хелперов, снижение цитотоксических супрессорных клеток, тогда как в контроле отмечали снижение количества T-зрелых лимфоцитов и Т-хелперов, увеличение цитотоксических супрессорных клеток (см. Приложение к описанию, табл.3).In the study of indicators of the inflammatory response of the body in conditions of immune disorders and transplantation of bone marrow mononuclear cells, normalization of indicators by the 21st day was established (leukocytes 5.2 (3.3-7.7) × 10 9 ; lymphocytes 56.7 (51.0 -58.0)%, while progressive disorders were detected in the control (see Appendix to the description, Table 1.) Phagocytosis in conditions of immune disorders and transplantation of bone marrow mononuclear cells significantly increased on the 7th day: phagocytic index (FI ) = 76.0 (65.0-80.0); phagocytic number (PS) = 3.4 (3 , 4-4.5); HCT sp 6.6 (6.0-7.0); spontaneous nitro blue tetrazolium reduction test (HCT-sp) = 20.0 (19.0-21.5) (see Appendix to the description, Table 2), at a consistently low performance in the control group. When assessing the T-cell immunity under conditions of immune disorders and transplantation of bone marrow mononuclear cells, an increase in the number of T-mature lymphocytes and T-helper cells, a decrease in cytotoxic suppressor cells, whereas in the control there was a decrease in the number of T-mature lymphocytes and T-helpers, an increase in cytotoxic suppressors x cells (see. Appendix to the description, table 3).
Следовательно, предлагаемый способ обеспечивает достижение усматриваемого заявителем технического результата, а именно - повышение эффективности коррекции иммунных нарушений после полной аспленизации животного в эксперименте, за счет активации процессов фагоцитоза, Т-клеточного звена иммунитета и ограничения воспаления.Therefore, the proposed method ensures the achievement of the technical result perceived by the applicant, namely, improving the efficiency of correction of immune disorders after complete animal asplenization in the experiment, by activating the processes of phagocytosis, T-cell immunity and limiting inflammation.
Проведенный анализ известных технических решений показал отсутствие сведений о влиянии отличительных признаков заявляемого способа на достижение усматриваемого заявителем технического результата. Это позволяет считать предлагаемое изобретение соответствующим критерию «изобретательский уровень».The analysis of known technical solutions showed the lack of information about the influence of the distinctive features of the proposed method on the achievement of the technical result perceived by the applicant. This allows us to consider the invention in accordance with the criterion of "inventive step".
Способ, составляющий заявляемое изобретение предназначен для использования в медицине. Возможность его осуществления подтверждена описанными в заявке приемами и средствами. Следовательно, заявляемое изобретение соответствует условию патентоспособности «промышленная применимость».The method comprising the claimed invention is intended for use in medicine. The possibility of its implementation is confirmed by the methods and means described in the application. Therefore, the claimed invention meets the condition of patentability "industrial applicability".
Предлагаемый способ осуществляют следующим образом.The proposed method is as follows.
Состояние иммунодефицита у экспериментального животного получают проведением спленэктомии с удалением всех обнаруженных добавочных очагов селезеночной ткани, т.е. проведением полной аспленизации. После чего экспериментальному животному (крысе) вводят однократно внутрибрюшинно 1 мл взвеси суточной культуры аллогенных мононуклеарных клеток костного мозга здоровых крыс, содержащей 2,4×108 клеток.An immunodeficiency state in an experimental animal is obtained by splenectomy with removal of all detected additional foci of splenic tissue, i.e. carrying out full asplenization. After that, an experimental animal (rat) is injected once intraperitoneally with 1 ml of a suspension of a 24-hour culture of allogeneic mononuclear cells of the bone marrow of healthy rats containing 2.4 × 10 8 cells.
Предлагаемый способ поясняется примером конкретного выполнения.The proposed method is illustrated by an example of a specific implementation.
В эксперименте были использованы животные крысы-самцы линии Wistar в возрасте не менее 6 месяцев, весом 200-250 г. Животных содержали в условиях вивария при свободном доступе к воде и пище соответственно нормативам ГОСТа «Содержание экспериментальных животных в питомниках НИИ» (виварий I категории, вет. удостоверение 238 №0015220 от 28 ноября 2011 г, служба ветеринарии Иркутской области). Опыты на животных проводили в соответствии с правилами гуманного обращения с животными, которые регламентированы «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных», утвержденных Приказом МЗ СССР №742 от 13.11.84 г. «Об утверждении правил проведения работ с использованием экспериментальных животных» и №48 от 23.01.85 г. «О контроле за проведением работ с использованием экспериментальных животных».In the experiment, male Wistar rats of at least 6 months of age weighing 200-250 g were used. Animals were kept in a vivarium with free access to water and food in accordance with the standards of GOST "Keeping experimental animals in nurseries of the research institute" (vivarium category I , vet certificate 238 No. 0015220 of November 28, 2011, the veterinary service of the Irkutsk region). Animal experiments were carried out in accordance with the rules for the humane treatment of animals, which are regulated by the "Rules for the use of experimental animals", approved by Order of the Ministry of Health of the USSR No. 742 of 11/13/84, "On the approval of the rules for working with experimental animals" and No. 48 dated January 23, 855, “On the control of work using experimental animals”.
У всех экспериментальных животных, в стерильных условиях, под общим обезболиванием была выполнена спленэктомия с удалением всех обнаруженных очагов резидуальной ткани (полная аспленизация).In all experimental animals, under sterile conditions, under general anesthesia, a splenectomy was performed with the removal of all detected foci of residual tissue (complete asplenization).
Опытную группу (ОГ) составили 56 животных, которым через час после полной аспленизации внутрибрюшинно однократно вводили 1 мл клеточной взвеси, содержащей 2,4×108 суточной культуры мононуклеарных клеток костного мозга. В качестве трансплантата были использованы мононуклеарные клетки костного мозга здоровых крыс линии Wistar, а именно их суточная культура в концентрации 2,4×108 в 1 мл. Жизнеспособность клеток составила 99,8%.The experimental group (OG) consisted of 56 animals, which, 1 hour after complete aspiration, were injected intraperitoneally once with 1 ml of cell suspension containing a 2.4 × 10 8 daily culture of bone marrow mononuclear cells. The bone marrow mononuclear cells of healthy Wistar rats were used as a graft, namely, their daily culture at a concentration of 2.4 × 10 8 in 1 ml. Cell viability was 99.8%.
Контрольной группе (КГ) животных (n=56) через час после аспленизации выполняли внутрибрюшинно инъекцию 1 мл физиологического раствора.The control group (CG) of animals (n = 56), an hour after asplenization, was injected intraperitoneally with 1 ml of physiological saline.
Проведено исследование общего анализа крови и иммунологических показателей у всех животных. Забор анализов выполняли на 2-е, 5-е и 7-е сутки послеоперационного периода. За норму приняты показатели, полученные у 6-ти здоровых животных.A study of the general analysis of blood and immunological parameters in all animals was conducted. Analysis was performed on the 2nd, 5th and 7th day of the postoperative period. The indicators obtained from 6 healthy animals are taken as the norm.
Иммунологические методы исследования. Для определения параметров фагоцитарной реакции нейтрофилов крови использовали убитые при 80-90°С, клетки дрожжей Saccharomyces cerevisiae. Оценивали фагоцитарную активность по проценту фагоцитов из числа сосчитанных нейтрофилов (ФИ) и по фагоцитарному числу (ФЧ) - среднее число дрожжей, поглощенных одним нейтрофилом.Immunological research methods. To determine the parameters of the phagocytic reaction of blood neutrophils, yeast cells Saccharomyces cerevisiae killed at 80-90 ° C were used. Phagocytic activity was evaluated by the percentage of phagocytes from the number of counted neutrophils (PH) and by the phagocytic number (PS) - the average number of yeast absorbed by one neutrophil.
Для оценки степени антигенной раздраженности не активированных in vitro гранулоцитов крови исследовали спонтанный тест восстановления нитросинего тетразолия (НСТ-сп), выражая результаты в процентах. Активированный тест восстановления нитросинего тетразолия (НСТ-инд) в %%, определяли для оценки функционального резерва кислородзависимого механизма бактерицидности фагоцитов.To assess the degree of antigenic irritation of blood granulocytes not activated in vitro, a spontaneous nitrosine tetrazolium reduction test (HCT-cn) was studied, expressing the results in percent. The activated nitrosine tetrazolium reduction test (HCT-ind) in %% was determined to evaluate the functional reserve of the oxygen-dependent mechanism of phagocyte bactericidal activity.
Лабораторные методы исследования крови. Подсчитывали количество эритроцитов, лейкоцитов, лейкоцитарную формулу крови по общепринятым методикам.Laboratory blood tests. We counted the number of red blood cells, white blood cells, white blood cell count according to standard methods.
Проточная цитометрия выполнена на двулазерном проточном флуориметре Facs Calibur BD (США) с использованием крысиных моноклональных антител к CD3+, CD4+, CD8+ (фирмы Coltak).Flow cytometry was performed on a Facs Calibur BD two-laser flow fluorimeter (USA) using rat monoclonal antibodies to CD3 +, CD4 +, CD8 + (Coltak).
При исследовании показателей воспалительной реакции организма у животных контрольной группы (табл.1) отмечали лейкоцитоз, с максимальным увеличением на 7-е сутки до 32,0 (23,0-38,0), возрастало количество сегментоядерных нейтрофилов 52,0 (47,0-57,0) и снижалось общее количество лимфоцитов. Летальность животных контрольной группы составила 100%.In the study of indicators of the body's inflammatory response in animals of the control group (Table 1), leukocytosis was noted, with a maximum increase on the 7th day to 32.0 (23.0-38.0), the number of segmented neutrophils increased 52.0 (47, 0-57.0) and the total number of lymphocytes decreased. Mortality of animals in the control group was 100%.
При исследовании показателей воспалительной реакции организма в условиях иммунных нарушений и трансплантации мононуклеарных клеток костного мозга выявлено существенное (pW≤0,05) снижение лейкоцитоза и нормализация количества лейкоцитов и форменных элементов крови к двадцать первым суткам исследования, по сравнению с контрольной группой. В группе контроля наблюдали прогрессирующие расстройства, характерные для иммунодефицита. Показано, что трансплантация мононуклеарных клеток костного мозга способствует ограничению воспалительной реакции.When studying the indicators of the inflammatory response of the body under conditions of immune disorders and transplantation of bone marrow mononuclear cells, a significant (p W ≤0.05) decrease in leukocytosis and normalization of the number of leukocytes and blood cells by the twenty-first days of the study were revealed, compared with the control group. In the control group, progressive disorders characteristic of immunodeficiency were observed. It has been shown that transplantation of bone marrow mononuclear cells helps to limit the inflammatory response.
Результаты исследования показателей неспецифической резистентности организма, а именно - фагоцитоза, представлены в табл.2.The results of the study of indicators of nonspecific resistance of the body, namely phagocytosis, are presented in table 2.
В условиях иммунных нарушений и трансплантации мононуклеарных клеток костного мозга выявляли активацию фагоцитарной активности, существенно повышались показатели ФИ, ФЧ, НСТсп, НСТинд (pW≤0,05; pD≤0,05; pU≤0,05). Активация фагоцитоза отмечалась до 21-х суток исследования, отметим, что показатели НСТсп, НСТинд снижались до нормальных значений.Under conditions of immune disorders and transplantation of bone marrow mononuclear cells, activation of phagocytic activity was detected, indicators of PI, PS, NST sp , and NST ind increased significantly (p W ≤ 0.05; p D ≤ 0.05; p U ≤ 0.05). Phagocytosis activation was observed up to the 21st day of the study; we note that the rates of HCT sp , HCT ind decreased to normal values.
Для оценки T-клеточного звена иммунитета изучали субпопуляции иммунокомпетентных клеток при аспленизации и трансплантации культуры мононуклеарных клеток костного мозга, контролировали количество лейкоцитов, лимфоцитов и фракции Т-лимфоцитов в периферической крови. Полученные результаты представлены в нижеприведенной таблице (табл.3).To evaluate the T-cell immunity, we studied sub-populations of immunocompetent cells during asplenization and transplantation of a bone marrow mononuclear cell culture, and the number of leukocytes, lymphocytes, and T-lymphocyte fractions in peripheral blood was monitored. The results are presented in the table below (table 3).
В контрольной группе на вторые сутки исследования процент зрелых лимфоцитов достоверно снижался, так же отмечали существенное понижение Т-хелперов (pD≤0,05). Отметим несущественное нарастание цитотоксических супрессорных клеток.In the control group, on the second day of the study, the percentage of mature lymphocytes significantly decreased, a significant decrease in T-helpers was also noted (p D ≤0.05). Note an insignificant increase in cytotoxic suppressor cells.
На 5-е сутки, изучаемые показатели сохранялись пониженными, однако процент цитотоксических супрессорных клеток существенно возрастал (pD=0,001), достигая максимальных значений.On the 5th day, the studied parameters remained lowered, however, the percentage of cytotoxic suppressor cells increased significantly (p D = 0.001), reaching maximum values.
Таким образом, аспленизация животных приводит к выраженным изменениям выбранных показателей к 7-м суткам, с развитием иммунодефицита, что проявляется снижением количества Т-зрелых лимфоцитов и Т-хелперов, увеличением цитотоксических супрессорных клеток.Thus, asplenization of animals leads to marked changes in the selected parameters by the 7th day, with the development of immunodeficiency, which is manifested by a decrease in the number of T-mature lymphocytes and T-helpers, an increase in cytotoxic suppressor cells.
В опытной группе установлено, что на вторые сутки исследования процент зрелых лимфоцитов достоверно увеличивался, так же отмечали существенное понижение Т-хелперов (pD≤0,05). Отметим нормальную величину цитотоксических супрессорных клеток. На 5-е сутки изучаемые показатели становились нормальными, однако процент цитотоксических супрессорных клеток существенно возрастал (pD=0,004).In the experimental group, it was found that on the second day of the study, the percentage of mature lymphocytes significantly increased, a significant decrease in T-helpers was also noted (p D ≤0.05). Note the normal value of cytotoxic suppressor cells. On the 5th day, the studied parameters became normal, however, the percentage of cytotoxic suppressor cells increased significantly (p D = 0.004).
К 21-м суткам исследования изучаемые показатели иммунных нарушений нормализовались.By the 21st day of the study, the studied indicators of immune disorders returned to normal.
Выявлено, что аспленизация животных приводит к выраженным изменениям с развитием иммунодефицита, что проявляется лейкоцитозом, угнетением фагоцитоза, снижением количества T-зрелых лимфоцитов и Т-хелперов, увеличением цитотоксических супрессорных клеток. Трансплантация суточной культуры мононуклеарных клеток аллогенного костного мозга, введенная внутрибрюшинно, способствует предупреждению иммунных нарушений после спленэктомии в раннем послеоперационном периоде, с нормализацией показателей к 21-м суткам. Коррекция иммунных нарушений происходит за счет активации фагоцитоза, увеличения количества Т-зрелых лимфоцитов, Т-хелперов и нормализации числа цитотоксических супрессорных клеток.It was revealed that animal asplenization leads to marked changes with the development of immunodeficiency, which is manifested by leukocytosis, inhibition of phagocytosis, a decrease in the number of T-mature lymphocytes and T-helpers, and an increase in cytotoxic suppressor cells. The transplantation of the diurnal culture of mononuclear cells of allogeneic bone marrow, administered intraperitoneally, helps to prevent immune disorders after splenectomy in the early postoperative period, with normalization of indicators by the 21st day. Correction of immune disorders occurs due to the activation of phagocytosis, an increase in the number of T-mature lymphocytes, T-helpers and normalization of the number of cytotoxic suppressor cells.
Таким образом, заявляемый способ позволяет достичь указанного технического результата - повысить эффективность коррекции иммунных нарушений, за счет восстановления процессов фагоцитоза и T-клеточного звена иммунитета у аспленизированных животных, что приводит к ограничению воспалительной реакции организма и снижению летальности.Thus, the claimed method allows to achieve the indicated technical result - to increase the efficiency of correction of immune disorders by restoring the processes of phagocytosis and T-cell immunity in asplenized animals, which leads to a limitation of the inflammatory response of the body and a decrease in mortality.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012107519/14A RU2488356C1 (en) | 2012-02-28 | 2012-02-28 | Method of correcting immune disorders |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012107519/14A RU2488356C1 (en) | 2012-02-28 | 2012-02-28 | Method of correcting immune disorders |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2488356C1 true RU2488356C1 (en) | 2013-07-27 |
Family
ID=49155553
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2012107519/14A RU2488356C1 (en) | 2012-02-28 | 2012-02-28 | Method of correcting immune disorders |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2488356C1 (en) |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20020142462A1 (en) * | 1997-11-26 | 2002-10-03 | Ildstad Suzanne T. | Methods for mobilizing hematopoietic facilitating cells and hematopoietic stem cells into the peripheral blood |
| RU2247567C2 (en) * | 2003-02-10 | 2005-03-10 | Башкирский государственный медицинский университет (БГМУ) | Method for preventing postsplenectomic syndrome in experiment |
| RU2322248C2 (en) * | 2006-02-09 | 2008-04-20 | Федеральное государственное учреждение "Научно-исследовательский институт трансплантологии и искусственных органов Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" | Method for treating chronic diseases (variants), method for obtaining a biotransplant (variants), a biotransplant (variants) |
| RU2325934C1 (en) * | 2006-10-17 | 2008-06-10 | Федеральное государственное учреждение Научно-исследовательский институт трансплантологии и искусственных органов Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию | Method of chronic cardiac insufficiency medical treatment |
| US20080279861A1 (en) * | 2003-05-13 | 2008-11-13 | Immunovative Therapies Ltd. | Method for stimulating a host immune system by administering an allogeneic cell material |
-
2012
- 2012-02-28 RU RU2012107519/14A patent/RU2488356C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20020142462A1 (en) * | 1997-11-26 | 2002-10-03 | Ildstad Suzanne T. | Methods for mobilizing hematopoietic facilitating cells and hematopoietic stem cells into the peripheral blood |
| RU2247567C2 (en) * | 2003-02-10 | 2005-03-10 | Башкирский государственный медицинский университет (БГМУ) | Method for preventing postsplenectomic syndrome in experiment |
| US20080279861A1 (en) * | 2003-05-13 | 2008-11-13 | Immunovative Therapies Ltd. | Method for stimulating a host immune system by administering an allogeneic cell material |
| RU2322248C2 (en) * | 2006-02-09 | 2008-04-20 | Федеральное государственное учреждение "Научно-исследовательский институт трансплантологии и искусственных органов Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" | Method for treating chronic diseases (variants), method for obtaining a biotransplant (variants), a biotransplant (variants) |
| RU2325934C1 (en) * | 2006-10-17 | 2008-06-10 | Федеральное государственное учреждение Научно-исследовательский институт трансплантологии и искусственных органов Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию | Method of chronic cardiac insufficiency medical treatment |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| БЕРСЕНЕВ А.В. Клеточная аутологичная трансплантация при ишемии нижних конечностей в клинике 20 мая 2011 года Найдено в Интернет 20.11.2012 http://gemabank.ru/press-center/news/68. LIU JH, et al. NK-T cell activator (α-GalCer) accelerates immune and hematological reconstitution after murine allo-bone marrow transplantation Zhongguo Shi Yan Xue Ye Xue ZaZhi. 2010 Dec; 18(6): 1542-7. LUNDE K., et al. Autologous stem cell transplantation in acute myocardial infarction: The ASTAMI randomized controlled trial. Intracoronary transplantation of autologous mononuclear bone marrow cells, stady design and safety aspects. // Scand Cardiovasc J. 2005, v.39, №3, p.150-158. * |
| ПРОКОПЬЕВ М.В. Применение ксенотрансплантации криоконсервированных клеток селезенки для коррекции постспленэктомического гипоспленизма: Автореф. дисс. к.м.н. - Иркутск, 2001, с.1-29. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Pai et al. | Treatment of chronic graft-versus-host disease with bortezomib | |
| Chen et al. | Increased Foxp3+ Helios+ regulatory T cells and decreased acute graft-versus-host disease after allogeneic bone marrow transplantation in patients receiving sirolimus and RGI-2001, an activator of invariant natural killer T cells | |
| Sodani et al. | Purified T-depleted, CD34+ peripheral blood and bone marrow cell transplantation from haploidentical mother to child with thalassemia | |
| Zeiser et al. | Preclinical models of acute and chronic graft-versus-host disease: how predictive are they for a successful clinical translation? | |
| Tomblyn et al. | Autologous versus reduced-intensity allogeneic hematopoietic cell transplantation for patients with chemosensitive follicular non-Hodgkin lymphoma beyond first complete response or first partial response | |
| EP2205273B1 (en) | Use of modified cells for the treatment of multiple sclerosis | |
| Peled et al. | The high-affinity CXCR4 antagonist BKT140 is safe and induces a robust mobilization of human CD34+ cells in patients with multiple myeloma | |
| Ma et al. | Absence of Stat1 in donor CD4+ T cells promotes the expansion of Tregs and reduces graft-versus-host disease in mice | |
| Kanda et al. | Alemtuzumab for the prevention and treatment of graft-versus-host disease | |
| Zecher et al. | NK cells delay allograft rejection in lymphopenic hosts by downregulating the homeostatic proliferation of CD8+ T cells | |
| US11534460B2 (en) | Method for expansion of double negative regulatory T cells | |
| Kim et al. | CD4+ CD25+ regulatory T cells partially mediate the beneficial effects of FTY720, a sphingosine-1-phosphate analogue, during ischaemia/reperfusion-induced acute kidney injury | |
| US20160326525A1 (en) | Use of mirna-214 inhibitor in inhibiting regulatory cells | |
| Sun et al. | Differential effects of donor T-cell cytokines on outcome with continuous bortezomib administration after allogeneic bone marrow transplantation | |
| RU2488356C1 (en) | Method of correcting immune disorders | |
| Ni et al. | Sphingosine-1-phosphate receptor 1 agonist SEW2871 prolongs heterotopic heart allograft survival in mice | |
| Roggero et al. | Thymocyte depletion during acute Trypanosoma cruzi infection in C57BL/6 mice is partly reverted by lipopolysaccharide pretreatment | |
| Toyama et al. | Effect of a C5a receptor antagonist on macrophage function in an intestinal transplant rat model | |
| WO2022161484A1 (en) | Methods of treating chronic active antibody-mediated rejection using btk inhibitors | |
| Li et al. | Graft engineering using ex vivo methods to limit GVHD: fludarabine treatment generates superior GVL effects in allogeneic BMT | |
| US20220226329A1 (en) | Method to induce hematopoietic chimerism | |
| Wu et al. | Further Characterization of Multi-Organ DEARE and Protection by 16, 16 Dimethyl Prostaglandin E2 in a Mouse Model of the Hematopoietic Acute Radiation Syndrome | |
| Mims et al. | Induction of acute graft vs. host disease in lymphopenic mice | |
| Huang et al. | Suppression of graft-versus-host disease and retention of graft-versus-tumour reaction by murine genetically engineered dendritic cells following bone marrow transplantation | |
| Ma et al. | Absence of Stat1 in donor CD4+ T cells promotes the expansion of Tregs and reduces graft-versus-host disease in mice |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20140301 |