RU2486520C1 - Instant diagnostic technique for enterovirus antigens in cerebrospinal fluid - Google Patents
Instant diagnostic technique for enterovirus antigens in cerebrospinal fluid Download PDFInfo
- Publication number
- RU2486520C1 RU2486520C1 RU2012122533/15A RU2012122533A RU2486520C1 RU 2486520 C1 RU2486520 C1 RU 2486520C1 RU 2012122533/15 A RU2012122533/15 A RU 2012122533/15A RU 2012122533 A RU2012122533 A RU 2012122533A RU 2486520 C1 RU2486520 C1 RU 2486520C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cerebrospinal fluid
- enterovirus
- antigens
- diagnosis
- complement
- Prior art date
Links
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области медицины, а именно к вирусологии, и может найти применение в инфекционных стационарах, вирусологических лабораториях и центрах для диагностики энтеровирусной инфекции (ЭВИ).The invention relates to medicine, namely to virology, and may find application in infectious diseases hospitals, virology laboratories and centers for the diagnosis of enterovirus infection (EVI).
За последние годы накопился обширный материал о роли энтеровирусов в инфекционной патологии человека. Они широко распространены повсеместно, вызывают различные по клиническим проявлениям и степени тяжести заболевания, представляя серьезную проблему для здравоохранения во многих странах мира. В структуре заболеваемости энтеровирусной инфекцией 32% составляют энтеровирусные менингиты, которые регистрируются в 43 субъектах Российской Федерации - 3223 случая (2,2 на 100 тыс. населения), при этом около 90% заболеваний приходится на детей до 17 лет. Среди энтеровирусов, патогенных для человека, выделяют 23 типа вируса Коксаки А, 6 типов Коксаки В, 31 тип вирусов ECHO - enteric cytophatogenic orphans - кишечные цитопатогенные вирусы. Источником инфекции является больной человек или носитель, который может быть заразен в течение нескольких недель и месяцев. Основной механизм передачи инфекции фекально-оральный с пищевым путем передачи, возможен и аспирационный механизм передачи, через воздушно-капельный путь. Инкубационный период длится от 2 до 10 дней.In recent years, extensive material has accumulated on the role of enteroviruses in human infectious diseases. They are widespread everywhere, cause various clinical manifestations and severity of the disease, representing a serious public health problem in many countries of the world. In the structure of the incidence of enterovirus infection, 32% are enteroviral meningitis, which are registered in 43 regions of the Russian Federation - 3223 cases (2.2 per 100 thousand of the population), with about 90% of the diseases occurring in children under 17 years of age. Among enteroviruses pathogenic for humans, 23 types of Coxsackie A virus are distinguished, 6 types of Coxsackie B viruses, 31 types of ECHO viruses - enteric cytophatogenic orphans - intestinal cytopathogenic viruses. The source of infection is a sick person or carrier that can be contagious for several weeks and months. The main mechanism of transmission of infection is fecal-oral with a food-borne transmission route, and an aspiration transmission mechanism is also possible, through the airborne droplet. The incubation period lasts from 2 to 10 days.
Обычно для подтверждения диагноза ЭВИ вирус выделяют в культуре клеток, наиболее часто выделяют вирус из кала, отделяемого носоглотки и мазков из зева. Из цереброспинальной жидкости (ЦСЖ) при поражении центральной нервной системы (ЦНС) энтеровирусы выделяют значительно реже, важно вирусы выделить в начале заболевания.Usually, to confirm the diagnosis of EVI, the virus is isolated in cell culture; the virus is most often isolated from feces, nasopharynx, and throat swabs. When cerebrospinal fluid (CSF) is damaged in the central nervous system (CNS), enteroviruses are isolated much less frequently; it is important to isolate viruses at the onset of the disease.
Современные методы диагностики показали, что инфицированность людей энтеровирусными инфекциями достигает 35-37%.Modern diagnostic methods have shown that infection of people with enterovirus infections reaches 35-37%.
Для диагностики ЭВИ широко используется полимеразная цепная реакция (ПЦР), обладающая весьма высокой чувствительностью. Однако нередко количество вирусного материала в исследуемых образцах может быть ниже детектируемого ПЦР (например, вследствие несоблюдения условий хранения или транспортировки клинического материала). Для определения низких количеств вирусной РНК в пробах применяется гнездовая модификация ПЦР, позволяющая повысить чувствительность в 10000 раз (1. Medical virology: The practical Approach Series / Ed. by U. Desselberger. - Oxford Univ.: IRL Press, 1995. - 214 p.; 2. Taylor M.J., Godfrey E., Baczko R. et al. // J. Gen. Virol. - 1991. - V.72, N 1. - P.83-88).For the diagnosis of EVI, polymerase chain reaction (PCR) is widely used, which has a very high sensitivity. However, often the amount of viral material in the studied samples can be lower than detectable PCR (for example, due to non-compliance with the storage or transportation of clinical material). To determine low amounts of viral RNA in samples, a nested modification of PCR is used to increase sensitivity by 10,000 times (1. Medical virology: The practical Approach Series / Ed. By U. Desselberger. - Oxford Univ .: IRL Press, 1995. - 214 p .; 2. Taylor MJ, Godfrey E., Baczko R. et al. // J. Gen. Virol. - 1991. - V.72, N 1. - P.83-88).
Однако это может привести к значительному увеличению частоты ложноположительных результатов вследствие кросс-контаминации (из пробирки в пробирку). Этот недостаток существенно ограничивает область применения метода гнездовой ПЦР, делая его слишком рискованным для проведения рутинных исследований, а отсутствие соответствующего оборудования или возможности проводить данные исследования полностью исключает его использование.However, this can lead to a significant increase in the frequency of false-positive results due to cross-contamination (from tube to tube). This drawback significantly limits the scope of the nested PCR method, making it too risky for routine studies, and the lack of appropriate equipment or the ability to conduct these studies completely precludes its use.
Наиболее близким к предлагаемому способу является способ иммунологической экспресс-диагностики энтеровирусных инфекций (патент №2034025). Сущность его заключается в проведении реакции связывания комплемента со специфическими сыворотками и спектрофотометрическому учету лизиса эритроцитов в зависимости от уровня освободившейся из них каталазы. Проведение данного метода предполагает обследование образцов фекальных масс больного, подвергшихся обработке с помощью питательной среды 199, внесением 0,05 г стрептомицина сульфата, 100000 ед бензилпенициллиновой натриевой соли, термостатирования и двукратного ценрифугирования при 1500 и 3000 об/мин. На этапе учета реакции используется ортофенилендиамин, а при постановке контролей - вероналово-мединаловый буфер. Все используемые в реакции поли- или моновалентные иммунные сыворотки к энтеровирусам различных типов готовятся в одном разведении 1:10. После добавления комплемента в проводимую реакцию исследуемые образцы термостатируют при 37°С в течение 60 мин.Closest to the proposed method is a method of immunological rapid diagnosis of enteroviral infections (patent No. 2034025). Its essence is to conduct the complement binding reaction with specific sera and spectrophotometric recording of erythrocyte lysis, depending on the level of catalase released from them. Carrying out this method involves examining samples of the patient's fecal masses that were processed using nutrient medium 199, adding 0.05 g of streptomycin sulfate, 100,000 units of benzylpenicillin sodium salt, temperature control and double centrifugation at 1,500 and 3,000 rpm. At the reaction accounting stage, orthophenylenediamine is used, and when setting up the controls, the veronal-medial buffer is used. All poly- or monovalent immune serums used for the reaction to enteroviruses of various types are prepared in one 1:10 dilution. After the complement was added to the reaction, the test samples were thermostated at 37 ° C for 60 min.
Использование этого способа в настоящее время ограничено в связи с приказом №322 МЗ РФ от 21.10.2002 о запрете к применению диагностических препаратов, содержащие в качестве хромогена (субстрата) ортофенилендиамин (ОФД), который является высокоактивным канцерогеном, опасным для здоровья людей и требующим специальной технологии утилизации, и приказом МЗ и Соц. развития №706Н от 23.08.10 о специальных условиях хранения сильнодействующих лекарственных препаратов. Кроме того, приготовление иммунных сывороток к энтеровирусам различных типов в одном разведении 1:10 и 60-минутное термостатирование при 37°С существенно снижает точность определения энтеровирусного антигена в фекалиях, а определение антигена энтеровируса в ликворе делает применение данного способа невозможным, а только обнаружение в ЦСЖ возбудителя или его антигенов является «золотым» стандартом для этиологической расшифровки заболевания (СП 3.1.1.2343-08).The use of this method is currently limited in connection with the order No. 322 of the Ministry of Health of the Russian Federation dated 10.21.2002 on the ban on the use of diagnostic preparations containing orthophenylenediamine (CRF) as a chromogen (substrate), which is a highly active carcinogen that is dangerous to human health and requires special disposal technology, and by order of the Ministry of Health and Social. Development No. 706H of 08/23/10 on special storage conditions for potent drugs. In addition, the preparation of immune serums for enteroviruses of various types in one dilution of 1:10 and 60-minute incubation at 37 ° C significantly reduces the accuracy of determination of enterovirus antigen in feces, and determination of enterovirus antigen in cerebrospinal fluid makes this method impossible, but only detection in CSF of the pathogen or its antigens is the "gold" standard for the etiological decoding of the disease (SP 3.1.1.2343-08).
Технический результат настоящего изобретения состоит в повышении точности и экспрессивности диагностики за счет использования в качестве биологического материала цереброспинальной жидкости и определения в нем антигенов энтеровирусов при нейроинфекциях.The technical result of the present invention is to increase the accuracy and expressiveness of diagnosis due to the use of cerebrospinal fluid as a biological material and the determination of enterovirus antigens in it during neuroinfection.
Этот результат достигается тем, что наряду с определением антигенов в биологическом материале модифицированной реакцией связывания комплемента в качестве биологического материала используют цереброспинальную жидкость, в нее вносят гемолитическую сыворотку, затем исследуемые образцы выдерживают 12-16 часов при t4ºC, после чего проводят количественное определение оксидазных ферментов посредством 0,05% тетраметилбензидина и при наличии антигена в исследуемом материале диагностируют энтеровирусную инфекцию.This result is achieved in that along with the determination of antigens in the biological material by the modified complement binding reaction, cerebrospinal fluid is used as the biological material, hemolytic serum is introduced into it, then the test samples are kept for 12-16 hours at t4ºC, after which the oxidase enzymes are quantified by 0.05% tetramethylbenzidine and, in the presence of antigen in the test material, enterovirus infection is diagnosed.
Авторами впервые предложен эффективный лабораторный экспресс-способ этиологической диагностики нейроинфекций. Метод имеет ряд отличий и преимуществ. Обнаружение энтеровирусных антигенов в ЦСЖ позволяет по одной пробе провести раннюю этиологическую диагностику нейроинфекций с определением серотипа энтеровируса. Способ обеспечивает его проведение в любом стационаре, оснащенном лабораторией ИФА, что экономит время диагностики при доставке ликвора с соблюдением «холодовой» цепи в специализированные лаборатории.The authors first proposed an effective laboratory rapid method for the etiological diagnosis of neuroinfections. The method has a number of differences and advantages. Detection of enteroviral antigens in CSF allows one etiologic diagnosis of neuroinfection to be carried out with a single test to determine the serotype of enterovirus. The method provides for its implementation in any hospital equipped with an IFA laboratory, which saves diagnostic time when delivering cerebrospinal fluid in compliance with the "cold" chain in specialized laboratories.
Авторы решили эту задачу, заявляя способ экспресс-диагностики антигенов энтеровирусов в цереброспинальной жидкости при нейроинфекциях с помощью модифицированной реакции связывания комплемента с последующим количественным учетом энтеровирусных антигенов.The authors solved this problem by stating a method for the rapid diagnosis of enterovirus antigens in cerebrospinal fluid during neuroinfection using a modified complement binding reaction followed by quantitative consideration of enterovirus antigens.
Предлагаемый нами способ базируется на оригинальной модификации, заключающейся в том, что за его основу была принята не стандартная реакция связи вируса с антителами, закрепленными на твердой матрице, а высокочувствительная разновидность реакции сорбции комплемента на иммунный комплекс, образующийся в жидкой фазе реакции. Данный комплекс образуется между антителами диагностической сыворотки к энтеровирусу и соответствующим антигеном, присутствующим в экстракте фекалий, крови или ликворе больного. Остаток не сорбированного на комплекс комплемента учитывался при помощи спектрофотометрической аппаратуры. Цифровой учет остаточного комплемента стал возможным благодаря тому, что при лизисе эритроцитов, которые являются основой визуального тестирования результатов РСК, в жидкостную фазу реакции выходит группа оксидазных ферментов, таких как пероксидаза мембран, различные оксидазы и гемоглобин, находящиеся во внутренней структуре эритроцитов. Эти ферменты достаточно легко определяются с помощью оптического тестирования после контакта их с 0.05% тетраметилбензидина. Учет результатов проводится на любом иммуноферментном анализаторе с использованием длины волны, равной 495 нм. Данный принцип задействован и в классическом твердофазном иммуноферментном тесте, где пероксидаза конъюгирована с тестирующим белком (например, антиглобулин). Использовать данные ферменты в нативном виде при лизисе эритроцитов барана (например, гемоглобин), являющихся одним из основных компонентов РСК нам не представлялось возможным, так как проводимые опыты показывали чрезвычайно малую величину оптической плотности, не дающую возможность калибровочно дифференцировать титры антител. Внесение в лизат эритроцитов раствора стандартного 0.05% препарата тетраметилбензидина резко увеличивает показатель оптической плотности, что создавало условия для точного учета минимальных концентраций антител и калибровки проводимой реакции. Точный подбор концентрации эритроцитов в гемолитической системе, состоящей из эритроцитов барана и гемолитической сыворотки, показал, что для создания оптической плотности в пределах 0,300-0,500 оптических единиц (длина волны 495 нм) необходимо использовать 0,1% взвесь эритроцитов барана.Our proposed method is based on the original modification, which was based on not the standard reaction of the virus binding to antibodies fixed on a solid matrix, but a highly sensitive variant of the complement sorption reaction on the immune complex formed in the liquid phase of the reaction. This complex is formed between the antibodies of the diagnostic serum to enterovirus and the corresponding antigen present in the extract of feces, blood or cerebrospinal fluid of the patient. The remainder of the complement not adsorbed onto the complex was taken into account using spectrophotometric equipment. Digital accounting of the residual complement became possible due to the fact that upon lysis of the red blood cells, which are the basis for visual testing of CSC results, a group of oxidase enzymes, such as membrane peroxidase, various oxidases and hemoglobin, located in the internal structure of red blood cells, enter the liquid phase of the reaction. These enzymes are quite easily determined by optical testing after contact with 0.05% tetramethylbenzidine. The results are taken into account on any enzyme-linked immunosorbent analyzer using a wavelength of 495 nm. This principle is also used in the classical enzyme-linked immunosorbent assay, where peroxidase is conjugated to a test protein (for example, antiglobulin). It was not possible for us to use these enzymes in their native form in the lysis of sheep erythrocytes (for example, hemoglobin), which are one of the main components of CSCs, since the experiments showed an extremely low optical density, which makes it impossible to gauge differentiate antibody titers. The addition of a solution of a standard 0.05% tetramethylbenzidine preparation to the erythrocyte lysate sharply increases the optical density index, which created the conditions for accurately taking into account the minimum antibody concentrations and calibrating the reaction. Accurate selection of the concentration of red blood cells in the hemolytic system, consisting of sheep erythrocytes and hemolytic serum, showed that to create an optical density in the range of 0.300-0.500 optical units (wavelength 495 nm), it is necessary to use a 0.1% suspension of sheep erythrocytes.
Сущность способа заключается в следующем.The essence of the method is as follows.
Если биологический материал ЦСЖ, требующий исследования, содержал энтеровирусные частицы, то при проведении реакции, т.е. добавлении к испытуемому материалу стандартных диагностических сывороток и комплемента, образовывался комплекс антиген + антитела + белки системы комплемента и после добавления гемолитической системы, состоящей из эритроцитов барана и гемолитической сыворотки, начинался лизис эритроцитов и выход в раствор оксидазных ферментов, концентрация которых была незначительна, а добавление 0.05% тетраметилбензидина и перекиси водорода давала низкий цифровой показатель экстинции. Если ликвор не содержал антигены энтеровирусов, то при аналогичном проведении исследования комплекса не образовывалось и после добавления гемолитической системы происходил лизис эритроцитов барана, сопровождавшийся массивным выходом оксидазных ферментов, а, следовательно, после добавления 0.05% тетраметилбензидина величина экстинции резко увеличивалась.If the biological material of the CSF, requiring research, contained enteroviral particles, then during the reaction, i.e. adding standard diagnostic sera and complement to the test material, an antigen + antibody + complement system complex was formed, and after adding a hemolytic system consisting of ram erythrocytes and hemolytic serum, erythrocyte lysis began and the oxidase enzymes were released into the solution, the concentration of which was low, and the addition 0.05% tetramethylbenzidine and hydrogen peroxide gave a low digital extinction index. If the cerebrospinal fluid did not contain enterovirus antigens, then, in a similar study, the complex did not form and after the hemolytic system was added, sheep erythrocytes were lysed, accompanied by a massive release of oxidase enzymes, and, therefore, after the addition of 0.05% tetramethylbenzidine, the extinction value increased sharply.
Основным контролем для исследуемых биологических проб было их обследование без добавления стандартных коммерческих диагностикумов, содержащих антитела. Если в испытуемом материале присутствовал антиген энтеровируса, и в опытной пробе происходило образование комплекса, который и ограничивал выход оксидазных ферментов, то в контрольной группе, из-за отсутствия антигенов, находящихся в диагностикумах, такой комплекс не образовывался и препятствий для массового выхода оксидазных ферментов не наблюдалось, а соответственно величина экстинции всегда была больше.The main control for the studied biological samples was their examination without the addition of standard commercial diagnostics containing antibodies. If enterovirus antigen was present in the test material, and a complex was formed in the test sample that limited the yield of oxidase enzymes, then in the control group, due to the lack of antigens in diagnosticums, such a complex did not form and there were no obstacles to the mass release of oxidase enzymes observed, and accordingly, the magnitude of extinction has always been greater.
При отсутствии вирусного материала в ликворе в обоих случаях не происходило образование комплексов и величины экстинции практически не отличались друг от друга.In the absence of viral material in the cerebrospinal fluid in both cases, the formation of complexes did not occur and the extinction values practically did not differ from each other.
Педлагаемый способ осуществляется следующим образом.The proposed method is as follows.
Полученный в лаборатории ликвор разводился физиологическим раствором в разведении 1:5, затем вносились в 96-луночные полистироловые панели, выпускаемые производством "Биополимер" (Россия) в объеме 0,05 мл. Количество лунок, занимаемых для проведения опыта соответствовало числу используемых стандартных диагностических сывороток, изготовляемые Московским институтом полиомиелита и вирусных энцефалитов МЗ и соц. Развития РФ. Сыворотки в основном опыте разводились соответственно титру, указанному в инструкции, и добавлялись в объеме 0,05 мл. В каждую из этих лунок вносилось дополнительно по 4 дозы комплемента, находящихся в объеме 0,05 мл. При такой постановке исследования для каждого материала дополнительно ставились следующие контроли:The liquor obtained in the laboratory was diluted with physiological saline at a dilution of 1: 5, then introduced into 96-well polystyrene panels manufactured by Biopolymer (Russia) in a volume of 0.05 ml. The number of wells occupied for the experiment corresponded to the number of standard diagnostic sera used, manufactured by the Moscow Institute of Poliomyelitis and Viral Encephalitis of the Ministry of Health and Social Sciences. Development of the Russian Federation. Serum in the main experiment was diluted according to the titer specified in the instructions, and was added in a volume of 0.05 ml. In each of these wells, an additional 4 doses of complement were added, which were in a volume of 0.05 ml. With this formulation of the study, the following controls were additionally set for each material:
- контроль физ. р-ра, внесенный в объеме 0,4 мл;- control of physical. solution introduced in a volume of 0.4 ml;
- контроль комплемента, включающий в себя 0,1 мл физ. р-ра и 0,1 мл комплемента;- complement control, which includes 0.1 ml of physical. solution and 0.1 ml of complement;
- контроль для системы выявления не сорбированного комплемента, куда вносились 0,2 мл физ. р-ра и 0,2 мл гемолитической системы;- control for the detection system of the non-adsorbed complement, where 0.2 ml of nat. solution and 0.2 ml of hemolytic system;
- контроль ликвора, который вносился в объеме 0,05 мл с добавлением 0,05 мл физ. р-ра;- control of cerebrospinal fluid, which was introduced in a volume of 0.05 ml with the addition of 0.05 ml of physical. solution;
- контроли для каждой из участвующих в опыте диагностической сыворотке, куда вносилось по 0,05 мл физ. р-ра и 0,05 мл данной сыворотки.- controls for each of the diagnostic serum participating in the experiment, where 0.05 ml of physical was added. solution and 0.05 ml of this serum.
После контакта данной смеси инградиентов, проходившей в течение 120 минут при 37ºС, для осуществления дальнейшего хода реакции, во все лунки, где проходит опыт по группоспецифическому типированию и контроли к нему, вносится система для выявления свободного комплемента. Такая система приготавливалась ex terpore и состояла из оттитрованных эритроцитов барана, так как каждая партия сильно разнилась от предыдущей, и процентное соотношение выбиралось, исходя из 300-500 единиц оптической плотности и гемолитической сыворотки в разведении 1:300. Реакция экпозировалась при +4ºС в течение 12-16 часов для осуществления лизиса и осаждения не гемолизированных эритроцитов. По истечении 12-16 часов из надосадочной жидкости, образовавшейся после оседания эритроцитов, во всех опытных и контрольных лунках отбиралось по 50 мкл для проведения заключительного этапа - цифровой дифференцировки наличия вируса в группоспецифическом этапе определения. Отобранная жидкость помещалась в отдельные полистироловые панели, куда добавлялось по 50 мкл 0.05% тетраметилбензидина для учета не сорбированного на эритроциты барана комплемента. Через 10 минут реакция останавливалась путем добавления 0,1 мл 1 нормальной H2SO4.After the contact of this mixture of ingredients, which took place for 120 minutes at 37 ° C, to carry out the further course of the reaction, a system for detecting free complement is introduced into all wells where the experiment on group-specific typing and controls is conducted. Such a system was prepared exterpore and consisted of titrated sheep erythrocytes, since each batch was very different from the previous one, and the percentage was selected based on 300-500 units of optical density and hemolytic serum at a dilution of 1: 300. The reaction was exposed at + 4 ° C for 12-16 hours for lysis and deposition of non-hemolized red blood cells. After 12-16 hours, from the supernatant formed after erythrocyte sedimentation, 50 μl of each experimental and control well was selected for the final stage - digital differentiation of the presence of the virus in the group-specific stage of determination. The selected liquid was placed in separate polystyrene panels, to which 50 μl of 0.05% tetramethylbenzidine was added to take into account the complement not sorbed on red blood cells. After 10 minutes, the reaction was stopped by adding 0.1 ml of 1 normal H 2 SO 4 .
Учет реакции проводился сразу после добавления кислоты, так как не исключалась возможность дальнейшего продолжения гемолиза в контрольных и опытных образцах, влекущего за собой изменение цветности реакции, а, следовательно, и изменения достоверности полученных результатов. Опыт учитывался на любом иммуноферментном анализаторе. Полученные результаты расшифровывались в сопоставлении всех контролей с исследуемым материалом. Наименьшее цифровое значение, выявляемое в одной из лунок, где находился обследуемый материал и определенная сыворотка, констатировал присутствие у больного антигена энтеровирусов соответствующего типа.The reaction was taken into account immediately after the addition of acid, since the possibility of further continuation of hemolysis in control and experimental samples, entailing a change in the color of the reaction, and, consequently, a change in the reliability of the results, was not ruled out. Experience was taken into account on any enzyme immunoassay analyzer. The results were decoded by comparing all controls with the test material. The smallest numerical value detected in one of the wells where the test material and a certain serum were located, noted the presence of the corresponding type of enterovirus antigen in the patient.
Таким образом, в течение одних суток, без использования тканевых культур, оказалось возможным обнаруживать антигены энтеровирусов в ликворе больных с определением его серопринадлежности.Thus, within one day, without the use of tissue cultures, it was possible to detect enterovirus antigens in the cerebrospinal fluid of patients with the determination of its sulfur affiliation.
В примере 1 приведены результаты обследования ликвора, направленного на энтеровирусную диагностику, от больного С.А. (8 лет) с предварительным диагнозом "серозный менингит" неясной этиологии.Example 1 shows the results of a cerebrospinal fluid examination aimed at enterovirus diagnosis from patient S.A. (8 years) with a preliminary diagnosis of "serous meningitis" of unknown etiology.
Лабораторный диагноз: "серозный менингит", этиологически связанный с энтеровирусом ECHO 6 типа.Laboratory diagnosis: "serous meningitis", etiologically associated with enterovirus ECHO type 6.
В примере 2 приведены результаты обследования ЦСЖ, направленных на энтеровирусную диагностику, от больной М.А. (6 лет) с предварительным диагнозом "полинейропатия".Example 2 shows the results of a survey of CSF aimed at enterovirus diagnosis from patient M.A. (6 years) with a preliminary diagnosis of polyneuropathy.
Лабораторный диагноз: "полинейропатия" энтеровирусной этиологии, поставленный по обнаружению энтеровирусного антигена (энтеро 70-типа) в ликворе.Laboratory diagnosis: "polyneuropathy" of enteroviral etiology, made by detection of enterovirus antigen (type 70 entero) in cerebrospinal fluid.
В примере 3 приведены результаты обследования ЦСЖ, направленных на энтеровирусную диагностику, от больной Ш.Е. (14 лет) с предварительным диагнозом "неврит лицевого нерва".Example 3 shows the results of a survey of CSF aimed at enterovirus diagnosis from patient Sh.E. (14 years old) with a preliminary diagnosis of facial neuritis.
14.03.2012 Анализ №72 Планшет №203/14/2012 Analysis No. 72 Tablet No. 2
Лабораторный диагноз: "неврит лицевого нерва", вызванный энтеро 68-типа, поставленный по обнаружению энтеровирусного антигена в ликворе.Laboratory diagnosis: "facial neuritis" caused by entero-type 68, made by detecting enterovirus antigen in cerebrospinal fluid.
Способ имеет большую медико-социальную значимость, отличается простотой и доступностью, не требует дорогостоящих тест-систем и оборудования. Основным значением данного способа является возможность точного обнаружения проникновение вируса в ЦНС, что дает возможность в дальнейшем прогнозировать не только течение болезни, но и ее исход.The method has great medical and social significance, is simple and affordable, does not require expensive test systems and equipment. The main value of this method is the ability to accurately detect the penetration of the virus into the central nervous system, which makes it possible in the future to predict not only the course of the disease, but also its outcome.
Предлагаемый авторами способ определения антигенов энтеровирусов в ликворе при нейроинфекциях может стать не только общедоступным но и экспрессным, поскольку специфические диагностические сыворотки отечественного производства в пересчете на одно исследование не являются затратными и обеспеченность ими доступна любой вирусологической лабораторией, занимающейся иммуноферментным анализом, проведение которого налажено во всех регионах России.The method proposed by the authors for the determination of enterovirus antigens in cerebrospinal fluid during neuroinfection can become not only public but also express, since specific domestic diagnostic sera in terms of one study are not expensive and they are available for any virology laboratory involved in enzyme immunoassay, which is carried out in all regions of Russia.
Claims (1)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2012122533/15A RU2486520C1 (en) | 2012-05-31 | 2012-05-31 | Instant diagnostic technique for enterovirus antigens in cerebrospinal fluid |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2012122533/15A RU2486520C1 (en) | 2012-05-31 | 2012-05-31 | Instant diagnostic technique for enterovirus antigens in cerebrospinal fluid |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2486520C1 true RU2486520C1 (en) | 2013-06-27 |
Family
ID=48702366
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2012122533/15A RU2486520C1 (en) | 2012-05-31 | 2012-05-31 | Instant diagnostic technique for enterovirus antigens in cerebrospinal fluid |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2486520C1 (en) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2580624C1 (en) * | 2014-10-30 | 2016-04-10 | Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Уральский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации" (ГБОУ ВПО УГМУ Минздрава России) | Method for typing enterovirus causing meningitis in children |
RU2642657C1 (en) * | 2017-03-01 | 2018-01-25 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Детский научно-клинический центр инфекционных болезней Федерального медико-биологического агентства" | Method for determination of antibodies to viruses of types 1, 3 polyomyelitis in blood serum |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2034025C1 (en) * | 1991-07-15 | 1995-04-30 | Научно-исследовательский институт детских инфекций | Method of immunological express-diagnosis of eneteroviral infections |
RU2339039C1 (en) * | 2007-06-15 | 2008-11-20 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Дальневосточный государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" | Method of differential diagnostics of meningococcus and serous meningitis of enterovirus of etiology on basis of studying of free-radikal status of liquor at children |
UA43230U (en) * | 2009-03-10 | 2009-08-10 | Запорізька Медична Академія Післядипломної Освіти | Method for diagnostics of enterovirus infection |
-
2012
- 2012-05-31 RU RU2012122533/15A patent/RU2486520C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2034025C1 (en) * | 1991-07-15 | 1995-04-30 | Научно-исследовательский институт детских инфекций | Method of immunological express-diagnosis of eneteroviral infections |
RU2339039C1 (en) * | 2007-06-15 | 2008-11-20 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Дальневосточный государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" | Method of differential diagnostics of meningococcus and serous meningitis of enterovirus of etiology on basis of studying of free-radikal status of liquor at children |
UA43230U (en) * | 2009-03-10 | 2009-08-10 | Запорізька Медична Академія Післядипломної Освіти | Method for diagnostics of enterovirus infection |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2580624C1 (en) * | 2014-10-30 | 2016-04-10 | Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Уральский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации" (ГБОУ ВПО УГМУ Минздрава России) | Method for typing enterovirus causing meningitis in children |
RU2642657C1 (en) * | 2017-03-01 | 2018-01-25 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Детский научно-клинический центр инфекционных болезней Федерального медико-биологического агентства" | Method for determination of antibodies to viruses of types 1, 3 polyomyelitis in blood serum |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Xie et al. | Characteristics of patients with coronavirus disease (COVID‐19) confirmed using an IgM‐IgG antibody test | |
Maniruzzaman et al. | COVID-19 diagnostic methods in developing countries | |
Vasan et al. | Medical devices for low-and middle-income countries: a review and directions for development | |
Gupte et al. | Diagnosis of human brucellosis | |
Huits et al. | Kinetics of Zika virus persistence in semen | |
US8232046B2 (en) | Distinction between bacterial meningitis and viral meningitis | |
Chen et al. | Coronavirus Disease 2019 (COVID‐19): Emerging detection technologies and auxiliary analysis | |
KR20080012449A (en) | Diagnostic methods for sars by using nucleocapside or spike protein | |
Sinha et al. | COVID-19 rhapsody: Rage towards advanced diagnostics and therapeutic strategy | |
RU2486520C1 (en) | Instant diagnostic technique for enterovirus antigens in cerebrospinal fluid | |
Coller et al. | Chronic human Pegivirus 2 without Hepatitis C virus co-infection | |
Hammad et al. | Hepatitis G virus infection in Egyptian children with chronic renal failure (single centre study) | |
David | Role of the RT-PCR method in ante-mortem & post-mortem rabies diagnosis | |
Dhibika et al. | Comparison of manual and automated nucleic acid (RNA) extraction methods for the detection of SARS-CoV-2 by qRT-PCR | |
Phair et al. | Diagnosis of infection with the human immunodeficiency virus | |
Salman et al. | Evaluation of the employment of four laboratory diagnostic methods of detecting Gairdia lamblia among Children in Kirkuk city | |
Muthuraj et al. | Serum zinc, calcium and albumin levels in pulmonary tuberculosis patients co-Infected with HIV | |
Palmer et al. | Antibodies to Viruses and to Pancreatic Islets in Nondiabetic and Insulkin-dependent Diabetic Patients | |
RU2642657C1 (en) | Method for determination of antibodies to viruses of types 1, 3 polyomyelitis in blood serum | |
Hoffman et al. | Understanding COVID-19: the virus | |
Breesam et al. | Evaluation of the Immunochromatography Assay's Diagnostic Performance for Quickly Detecting the Presence of COVID-19 Antigen in Patients with Positive PCR Results | |
RU2508405C1 (en) | Method for obtaining incorporated control specimens for immunoenzyme test systems by drying in pits of board | |
Luptakova et al. | Evaluation of detection of Toxoplasma gondii DNA in animal blood samples by quantitative PCR | |
RU2408024C1 (en) | Method for making low-titre serum panel for quality control of test systems and immunoblots used for diagnosing antibodies to various cvh subtypes | |
CN114113594B (en) | Antigen diluent and immunodeficiency virus detection kit |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20150601 |