RU2481126C1

RU2481126C1 - Disinfectant

Info

Publication number: RU2481126C1
Application number: RU2012105078/15A
Authority: RU
Inventors: Анатолий Валерьевич Кунгуров; Константин Игоревич Гурин; Иван Петрович Погорельский; Илья Владимирович Дармов; Дмитрий Анатольевич Кутаев; Евгений Юрьевич Вахнов
Priority date: 2012-02-14
Filing date: 2012-02-14
Publication date: 2013-05-10

Abstract

FIELD: medicine, pharmaceutics.

SUBSTANCE: invention refers to medical microbiology and medicine, namely to disinfection, and may be used for preparing disinfectants for disinfection of the surfaces contaminated by microorganisms, medical, sanitary and microbiological equipment. The disinfectant contains hydrogen peroxide, a water suspension of silver nanoparticles and non-ionic detergent Triton X-100 in certain amounts.

EFFECT: invention provides improved microbicidal activity on vegetative and spore forms of microorganisms at the low concentrations of its ingredients.

4 dwg, 3 ex

Description

Изобретение относится к области медицинской микробиологии и медицины, в частности к дезинфектологии, и может быть использовано для получения дезинфицирующего средства с высокой бактерицидной и спороцидной активностью с целью деконтаминации поверхностей медицинского, санитарного и микробиологического оборудования.The invention relates to the field of medical microbiology and medicine, in particular to disinfection, and can be used to obtain a disinfectant with high bactericidal and sporocidal activity in order to decontaminate the surfaces of medical, sanitary and microbiological equipment.

В настоящее время на территории Российской Федерации при конструировании дезинфицирующих растворов и композиций разрешены к применению и традиционно используются действующие вещества следующих химических групп: галоидосодержащие, окислители, поверхностно-активные вещества, производные гуанидина, фенольные, альдегиды, спирты, кислоты, щелочи (Пантелеева Л.Г. Современные антимикробные дезинфектанты. Основные итоги и перспективы разработки новых средств // Дезинфекционное дело. - 2005. - №2. - С.49-56).Currently, in the construction of disinfectant solutions and compositions in the Russian Federation, the active substances of the following chemical groups are allowed and traditionally used: halide-containing, oxidizing agents, surfactants, guanidine derivatives, phenolic, aldehydes, alcohols, acids, alkalis (Panteleeva L. G. Modern antimicrobial disinfectants. The main results and prospects for the development of new tools // Disinfection business. - 2005. - No. 2. - P.49-56).

Наиболее широко в дезинфектологической практике применяются дезинфектанты на основе хлора, перекиси водорода, четвертичных аммонийных соединений и альдегидов. Не умаляя достоинств каждого из перечисленных дезинфектантов, следует указать на существующие проблемы, связанные с их применением (в меньшей степени, относящиеся к перекиси водорода), а именно токсичность, экологическая опасность, недостаточный биоцидный эффект, отрицательное воздействие на организм человека (Севидова Е.К., Рой И.Д., Левитин Е.Я. Сравнительная оценка коррозивности современных дезинфицирующих средств // Фармаком. - 2003. - №2. - С.2-4; Смирнов A.M., Таланов Г.А. Диоксины: санитарное и токсикологическое значение // Ветеринария. - 1999. - №9. - С.49-51; Соколова Н.Ф. Современные проблемы организации и проведения дезинфекционных мероприятий в ЛПУ в целях профилактики внутрибольничных инфекций // Дезинфекционное дело. - 2005. - №4. - С.31-39). В связи с этим остается актуальной проблема создания и поиска новых действующих веществ для получения дезинфектантов с улучшенными эксплуатационными характеристиками. Большинство новых дезинфицирующих средств представляют собой композиции традиционных действующих веществ из разных химических групп в различных соотношениях.The most widely used in disinfectological practice are disinfectants based on chlorine, hydrogen peroxide, quaternary ammonium compounds and aldehydes. Without diminishing the merits of each of the listed disinfectants, it is necessary to point out the existing problems associated with their use (to a lesser extent, related to hydrogen peroxide), namely toxicity, environmental hazard, insufficient biocidal effect, negative effect on the human body (Sevidova E.K. ., Roy I.D., Levitin E.Ya. Comparative assessment of the corrosivity of modern disinfectants // Farmakom. - 2003. - No. 2. - C.2-4; Smirnov AM, Talanov GA Dioxins: sanitary and toxicological value // Veterinary medicine. - 1999. - No. 9. - S.49-51; Sokolova NF Modern problems of the organization and conduct of disinfection measures in hospitals for the prevention of nosocomial infections // Disinfection business. - 2005. - No. 4. - S.31-39). In this regard, the urgent problem of creating and searching for new active substances for disinfectants with improved performance characteristics. Most new disinfectants are compositions of traditional active ingredients from different chemical groups in various ratios.

Перекись водорода традиционно используется в качестве дезинфектанта. Обладая высокой химической активностью и способностью образовывать активные радикалы, перекись водорода оказывает выраженный биоцидный эффект на микроорганизмы в высоких концентрациях (Шамб У., Сеттерфилд Ч., Винтвортс С. Перекись водорода / Пер. с англ. - М.: Иностранная литература, 1958. - 586 с.). Низкие ее концентрации (0,1-1,0%) не вызывают быстрой гибели микроорганизмов. Обычно в качестве дезинфектантов используются растворы перекиси водорода в концентрации 3-6% по действующему веществу (Безопасность работы с микроорганизмами

I-II групп патогенности (опасности): СП 1.3.1285-03 / Госсанэпиднадзор России. - Утв. 25.06.2003. Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней: СП 1.3.2322-08 / Госсанэпиднадзор России. - Утв. 29.01.2008). Так, в составе дезинфицирующего средства (Патент РФ №2286145. Дезинфицирующее средство) наряду с алкилдиметилбензиламмонийхлоридом 20,0-22,5 (здесь и далее мас.%), бензотриазолом - 3,0-5,0, одноатомным спиртом 5,0-10,0 используется перекись водорода 5,0-10,0.Hydrogen peroxide is traditionally used as a disinfectant. Possessing high chemical activity and the ability to form active radicals, hydrogen peroxide has a pronounced biocidal effect on microorganisms in high concentrations (Shamb W., Setterfield Ch., Wintworths S. Hydrogen peroxide / Transl. From English - Moscow: Foreign literature, 1958. - 586 p.). Its low concentrations (0.1-1.0%) do not cause the rapid death of microorganisms. Usually, hydrogen peroxide solutions in a concentration of 3-6% of the active substance are used as disinfectants (Safety of work with microorganisms

I-II groups of pathogenicity (danger): SP 1.3.1285-03 / Sanitary Inspection of Russia. - Approved. 06/25/2003. Safety of work with microorganisms of the III-IV groups of pathogenicity (danger) and pathogens of parasitic diseases: SP 1.3.2322-08 / State Sanitary and Epidemiological Supervision of Russia. - Approved. 01/29/2008). So, in the composition of the disinfectant (RF Patent No. 2286145. Disinfectant) along with alkyldimethylbenzylammonium chloride 20.0-22.5 (hereinafter wt.%), Benzotriazole - 3.0-5.0, monohydroxy alcohol 5.0- 10.0 uses hydrogen peroxide 5.0-10.0.

Другие дезинфицирующие средства, такие как Деконекс 50ФФ, Лизафин, Катамин А, Б, Аламинол, Стеррилиум и др., хотя и не содержат перекись водорода, но сконструированы на основе алкилдиметилбензиламмонийхлорида и неионогенного поверхностно-активного вещества (ПАВ) (Лизафин) или дидецилдиметиламмонийхлорида и неионогенного ПАВ (Деконекс 50ФФ) и т.д. и используются в дезинфектологической практике. В то же время следует признать, что указанные средства недостаточно эффективны в отношении спорообразующих микроорганизмов, имеют высокие концентрации рабочих растворов, длительную экспозицию. При разведении дезинфицирующего средства отмечается снижение микробоцидного, в том числе спороцидного действия.Other disinfectants, such as Deconex 50FF, Lysafin, Catamine A, B, Alaminol, Sterrillium and others, although they do not contain hydrogen peroxide, are constructed on the basis of alkyl dimethylbenzylammonium chloride and nonionic surfactant (LASAPHIN) or dimethylchloride dimethyl dimethyl dimethyl dimethyl nonionic surfactant (Deconex 50FF), etc. and are used in disinfection practice. At the same time, it should be recognized that these agents are not effective against spore-forming microorganisms, have high concentrations of working solutions, and a long exposure. When diluting a disinfectant, a decrease in the microbicidal, including sporocidal, effect is noted.

С целью увеличения активности дезинфицирующего средства в отношении спорообразующих микроорганизмов при сохранении широкого спектра действия в малых концентрациях, повышения экологической и эксплуатационной безопасности разработано дезинфицирующее средство (Патент РФ №2395962. Дезинфицирующее средство), в котором одновременно присутствует четвертичная аммонийная соль, глутаровый альдегид, этиловый спирт, перекись водорода с сульфанолом и перфтордекалином. Концентрация перекиси водорода в указанном дезинфицирующем средстве составляет 5,0 мас.% Повышение антимикробной активности запатентованного состава авторы объясняют взаимным влиянием ингредиентов состава друг на друга, в том числе за счет использования перфтордекалина, микрочастицы которого обеспечивают транспорт комплекса микробных компонентов дезинфицирующего средства через мембраны в микробную клетку.In order to increase the activity of the disinfectant against spore-forming microorganisms while maintaining a wide spectrum of action at low concentrations, to improve environmental and operational safety, a disinfectant has been developed (RF Patent No. 2395962. Disinfectant), in which quaternary ammonium salt, glutaraldehyde, ethyl alcohol are simultaneously present hydrogen peroxide with sulfanol and perfluorodecalin. The concentration of hydrogen peroxide in the specified disinfectant is 5.0 wt.%. The authors explain the increase in the antimicrobial activity of the patented composition by the mutual influence of the ingredients of the composition on each other, including through the use of perfluorodecalin, the microparticles of which ensure the transport of the complex of microbial components of the disinfectant through the membrane into the microbial the cage.

Широкие возможности обеспечения транспорта антимикробных соединений в бактериальную клетку предоставляет нанотехнология. Независимо от способа получения наночастицы проявляют уникальные физические и химические свойства, которые в большей степени определяются свойствами индивидуальных молекул, чем свойствами массивного вещества того же состава (Колесников С.И. Правовое обеспечение безопасности нанотехнологий, производства и применения наноматериалов и его значение для медицины // Нанотехнологии и охрана здоровья. - 2009. - №3(1). - С.10-17). Высокая удельная поверхность (в расчете на единицу массы) увеличивает химическую реакционную способность наночастиц. Это может привести, в частности, к увеличению продукции свободных радикалов и активных форм кислорода и далее к повреждению биологических структур микробной клетки (липидов, белков, нуклеиновых кислот). Учитывая высокую абсорбционную и проникающую способность наночастиц, возможно их использование в смеси с антимикробными агентами в более низких концентрациях по действующему химическому соединению.Broad opportunities for the transport of antimicrobial compounds into a bacterial cell are provided by nanotechnology. Regardless of the method of obtaining nanoparticles, they exhibit unique physical and chemical properties, which are more determined by the properties of individual molecules than the properties of a massive substance of the same composition (Kolesnikov S.I. Legal support for the safety of nanotechnology, production and use of nanomaterials and its significance for medicine // Nanotechnology and health protection. - 2009. - No. 3 (1). - S.10-17). A high specific surface area (calculated per unit mass) increases the chemical reactivity of nanoparticles. This can lead, in particular, to an increase in the production of free radicals and reactive oxygen species and further to damage to the biological structures of the microbial cell (lipids, proteins, nucleic acids). Given the high absorption and penetrating ability of nanoparticles, it is possible to use them in a mixture with antimicrobial agents in lower concentrations by the active chemical compound.

По экологической безопасности, высокой бактерицидной активности, изученности и многовековому использованию серебро является наиболее приемлемым веществом для получения на его основе наночастиц серебра. Известно, что токсическая доза серебра для человека составляет 200 мг·л^-1. В малых дозах (0,02-0,04 мг) серебро проявляет свойства микроэлемента, повышая эффективность тканевого дыхания; при его содержании в растворе 0,02-0,04 мг-мл^-1 серебро оказывает иммуностимулирующий эффект. При концентрации 0,01-0,08 мг-мл^-1 и выше серебро проявляет антимикробное действие в отношении грамположительных и грамотрицательных бактерий, кокков, вирусов, грибов, микобактерий туберкулеза, гельминтов. Коллоидное серебро в концентрации 0,01 мг·мл^-1 обладает бактерицидным действием в отношении всех изученных микроорганизмов.In terms of environmental safety, high bactericidal activity, research and centuries-old use, silver is the most acceptable substance for obtaining silver nanoparticles on its basis. It is known that the toxic dose of silver for humans is 200 mg · l ^-1 . In small doses (0.02-0.04 mg), silver exhibits trace elements, increasing the effectiveness of tissue respiration; when its content in the solution is 0.02-0.04 mg-ml ^-1 silver has an immunostimulating effect. At a concentration of 0.01-0.08 mg-ml ^-1 and higher, silver exhibits an antimicrobial effect against gram-positive and gram-negative bacteria, cocci, viruses, fungi, mycobacterium tuberculosis, and helminths. Colloidal silver at a concentration of 0.01 mg · ml ^-1 has a bactericidal effect against all studied microorganisms.

Известно несколько запатентованных дезинфицирующих средств (Патент РФ №2179155. Дезинфицирующий водный раствор; патент РФ №2187460. Концентрат дезинфицирующего средства; патент РФ №2361619. Концентрат дезинфицирующего средства) на основе перекиси водорода с включением других ингредиентов, наиболее важными из которых являются ионы серебра, соль серебра, растворимая соль серебра соответственно перечисленным запатентованным дезинфицирующим средствам. Наиболее близким к заявляемому средству является дезинфицирующий водный раствор - прототип (Патент РФ №2179155. Дезинфицирующий водный раствор), содержащий ионы серебра, лимонную или уксусную кислоту, перекись водорода (по п.6 формулы изобретения), дистиллированную воду, синергидные вещества и дополнительно ароматизатор пищевой (или концентрат пищевой, или аммиак во всех возможных его вариантах, отраженных в формуле изобретения). Указанный дезинфицирующий водный раствор, имеющий бактерицидное действие, предназначен для дезинфекции поверхностей без их предварительной подготовки, а также для стабилизации и консервирования пищевых продуктов (натуральных соков, например). Перекись водорода (по п.6 формулы изобретения) входит в состав дезинфицирующего водного раствора в концентрации 0,01-10,0 мас.%.Several patented disinfectants are known (RF Patent No. 2179155. Disinfectant aqueous solution; RF patent No. 2187460. Disinfectant concentrate; RF patent No. 2361619. Disinfectant concentrate) based on hydrogen peroxide with the inclusion of other ingredients, the most important of which are silver ions, silver salt, soluble silver salt according to the listed patented disinfectants. Closest to the claimed agent is a disinfecting aqueous solution - prototype (RF Patent No. 2179155. Disinfecting aqueous solution) containing silver ions, citric or acetic acid, hydrogen peroxide (according to claim 6), distilled water, synergistic substances and additionally flavor food (or food concentrate, or ammonia in all its possible variants reflected in the claims). The specified disinfectant aqueous solution having a bactericidal effect is intended for disinfection of surfaces without their preliminary preparation, as well as for stabilization and preservation of food products (natural juices, for example). Hydrogen peroxide (according to claim 6) is part of a disinfecting aqueous solution in a concentration of 0.01-10.0 wt.%.

Общими с заявляемым дезинфицирующим средством являются перекись водорода и серебро как химический элемент. Отличием от прототипа заявляемого дезинфицирующего средства является отсутствие в его составе лимонной или уксусной кислот, других добавок, излишних при применении в медицине и медицинской микробиологии. Конечная концентрация перекиси водорода в заявляемом дезинфицирующем средстве 1%, а входящие в его состав наночастицы серебра и неионогенный детергент тритон Х-100 в силу своих специфических свойств обеспечивают синергидный с перекисью водорода биоцидный эффект.In common with the claimed disinfectant are hydrogen peroxide and silver as a chemical element. The difference from the prototype of the claimed disinfectant is the absence in its composition of citric or acetic acids, other additives that are unnecessary when used in medicine and medical microbiology. The final concentration of hydrogen peroxide in the inventive disinfectant is 1%, and the silver nanoparticles and non-ionic detergent triton X-100 included in it contain due to their specific properties a biocidal effect synergistic with hydrogen peroxide.

Задачей изобретения является разработка дезинфицирующего средства в отношении вегетативных и спорообразующих микроорганизмов, сохраняющего антимикробную активность в малых концентрациях действующих веществ, экологическую и эксплуатационную безопасность. Технический результат, который может быть достигнут при использовании предлагаемого дезинфицирующего средства, заключается в том, что высокая антимикробная активность в отношении вегетативных и спорообразующих микроорганизмов достигается при низких концентрациях рабочих растворов, непродолжительной экспозиции при обработке, сохранении экологической и эксплуатационной безопасности.The objective of the invention is the development of a disinfectant against vegetative and spore-forming microorganisms, preserving antimicrobial activity in low concentrations of active substances, environmental and operational safety. The technical result that can be achieved by using the proposed disinfectant is that high antimicrobial activity against vegetative and spore-forming microorganisms is achieved at low concentrations of working solutions, short exposure during processing, maintaining environmental and operational safety.

Поставленная задача достигается тем, что заявленное дезинфицирующее средство содержит в равных соотношениях перекись водорода и ультрадисперсную серебросодержащую водную систему, а также поверхностно-активное вещество:The problem is achieved in that the claimed disinfectant contains in equal proportions hydrogen peroxide and an ultrafine silver-containing aqueous system, as well as a surfactant:

перекись водорода 2% водный растворhydrogen peroxide 2% aqueous solution 49,5 мл49.5 ml водная суспензия наночастиц серебраaqueous suspension of silver nanoparticles 49,5 мл49.5 ml тритон Х-100newt X-100 1,0 мл1.0 ml рНpH 5,6-5,8 ед.рН5.6-5.8 u

Заявляемый состав содержит перекись водорода по ГОСТ 10929-76, водную суспензию наночастиц серебра (10-60 нм) в концентрации 10 мг·л^-1 по ТУ 9392-005-14189356-09, производитель ООО «Фрактал-М» (заявка на патент, Российская Федерация. Способ приготовления гидрозоля / Голубев В.И., Слепцов В.В., Тягинский А.Ю.; заявитель и патентообладатель В.В.Слепцов. - №2008125204/02: заявл. 23.06.2008; опубл. 20.02.2010. - бюл. №5; Заявка на патент Российская Федерация. Устройство для получения наночастиц токопроводящих материалов / Бабкин Е.А., Голубев В.Н., Коленков И.А., Слепцов В.В. и др.; заявитель и патентообладатель В.В. Слепцов.- №2010106444/22: заявл. 26.02.2010; опубл. 27.05.2010. - бюл. №15), тритон Х-100 (производство ХимТранс, Санкт-Петербург) как неионогенный детергент. В качестве водной среды используют дистиллированную, или деминерализованную, или питьевую воду по ГОСТ 6709-72 либо ГОСТ 2874-82.The inventive composition contains hydrogen peroxide according to GOST 10929-76, an aqueous suspension of silver nanoparticles (10-60 nm) at a concentration of 10 mg · l ^-1 according to TU 9392-005-14189356-09, manufacturer Fractal-M LLC (patent application , Russian Federation. Method for the preparation of a hydrosol / V. Golubev, V.V. Sleptsov, A.Yu. Tyaginsky; applicant and patent holder V.V. Sleptsov. - No. 2008125204/02: filed June 23, 2008; publ. 20.02 .2010. - Bulletin No. 5; Application for a patent of the Russian Federation. Device for producing nanoparticles of conductive materials / Babkin EA, Golubev VN, Kolenkov IA, Sleptsov VV et al .; declare s and patent VV Sleptsov.- №2010106444 / 22: appl 26.02.2010, published 27.05.2010 - Bul №15), Triton X-100 (manufacture HimTrans, St. Petersburg, Russia) as a non-ionic detergent..... As an aqueous medium, distilled or demineralized or drinking water is used according to GOST 6709-72 or GOST 2874-82.

Высокая антимикробная активность заявляемого средства связана с включением в композицию, состоящую из водного раствора перекиси водорода и водной суспензии наночастиц серебра, дополнительно неионогенного детергента тритона Х-100, антимикробное действие которого связано с солюбилизацией дивалентных катионов и разрушением клеточных мембран прокариотов. Проявляющиеся одновременно различные механизмы действия реакционно-способных компонентов предлагаемого дезинфицирующего средства изменяют ультраструктуру микробной клетки и спор микроорганизмов, нарушают проницаемость мембранных структур, прекращают функционирование ферментных комплексов, обеспечивают синергидный бактерицидный эффект используемых компонентов.The high antimicrobial activity of the claimed drug is associated with the inclusion in the composition, consisting of an aqueous solution of hydrogen peroxide and an aqueous suspension of silver nanoparticles, an additional non-ionic detergent X-100 triton, the antimicrobial effect of which is associated with the solubilization of divalent cations and destruction of the cell membranes of prokaryotes. The various mechanisms of action of the reactive components of the proposed disinfectant that appear at the same time change the ultrastructure of the microbial cell and the spores of microorganisms, disrupt the permeability of membrane structures, stop the functioning of enzyme complexes, and provide a synergistic bactericidal effect of the components used.

Дезинфицирующее средство представляет собой прозрачную жидкость, безопасную при использовании, не оказывает раздражающего действия на верхние дыхательные пути, кожу, не вызывает деструкции обрабатываемой поверхности и коррозии металлов.The disinfectant is a transparent liquid that is safe to use, does not irritate the upper respiratory tract, skin, does not cause destruction of the treated surface and corrosion of metals.

Антимикробное действие дезинфицирующего средства изучают с использованием лабораторных штаммов микроорганизмов родов Staphylococcus, Pseudomonas, Escherichia, Bacillus, Yersinia. Оценку дезинфицирующей активности проводят по методам, принятым в РФ (суспензионный метод и метод бязевых тест-объектов) в соответствии с методическими документами (Инструкция по определению бактерицидных свойств новых дезинфицирующих средств №739-68; Шандала М.Г., Пантелеева Л.Г., Соколова Н.Ф. и др. Методы испытаний дезинфекционных средств для оценки их безопасности и эффективности. - М., 1998. - 72 с.; Шандала М.Г., Соколова Н.Ф., Абрамова И.М. и др. Методы изучения и оценки спороцидной активности дезинфицирующих и стерилизующих средств. МУ 3.5.2435-09). При оценке биоцидной активности суспензионным методом используют культуры микроорганизмов в концентрации 1·10⁹ КОЕ·мл^-1; при использовании методов бязевых тест-объектов контаминацию тест-объектов проводят до уровня 1·10⁵ КОЕ·см^-2. По окончании экспозиции проводят высев исследуемых суспензий на плотные питательные среды (мясопептонный агар, агар Дифко) методом последовательных десятикратных разведений и после культивирования при заданных температурных режимах производят подсчет выросших колоний микроорганизмов. Для определения концентрации микроорганизмов используют оптический стандарт мутности производства ГИСК им. Л.А.Тарасевича, Москва, стерильный изотонический раствор хлорида натрия.The antimicrobial effect of the disinfectant is studied using laboratory strains of microorganisms of the genera Staphylococcus, Pseudomonas, Escherichia, Bacillus, Yersinia. Evaluation of disinfectant activity is carried out according to the methods adopted in the Russian Federation (suspension method and method of coarse calico test objects) in accordance with methodological documents (Instructions for determining the bactericidal properties of new disinfectants No. 739-68; Shandala MG, Panteleeva LG , Sokolova NF and others. Test methods of disinfectants to assess their safety and effectiveness. - M., 1998. - 72 pp .; Shandala MG, Sokolova NF, Abramova IM, etc. Methods of studying and evaluating the sporicidal activity of disinfectants and sterilizing agents. MU 3.5.2435-09). When assessing biocidal activity using the suspension method, microorganism cultures are used at a concentration of 1 · 10 ⁹ CFU · ml ^-1 ; when using methods of coarse calico test objects, the contamination of test objects is carried out to a level of 1 · 10 ⁵ CFU · cm ^-2 . At the end of the exposure, the test suspensions are seeded on solid nutrient media (meat peptone agar, Difco agar) by ten-fold dilutions and after cultivation at specified temperature conditions, the grown colonies of microorganisms are counted. To determine the concentration of microorganisms, use the optical turbidity standard for the production of GISK named after L.A. Tarasevich, Moscow, sterile isotonic sodium chloride solution.

Изучение ультраструктуры бактерий и спор проводят с помощью сканирующего электронного микроскопа JEOL JSM-6510LV (Япония) при следующих контролируемых параметрах: ускоряющее напряжение - 30 кВ; рабочее расстояние - 10 мм; размер фокусного пятна - 30%; режим вакуума - глубокий вакуум. Препараты рассматривают при увеличении 5000-13000 раз.The ultrastructure of bacteria and spores is studied using a JEOL JSM-6510LV scanning electron microscope (Japan) with the following controlled parameters: accelerating voltage - 30 kV; working distance - 10 mm; focal spot size - 30%; vacuum mode - deep vacuum. Drugs are considered with an increase of 5000-13000 times.

Пример 1.Example 1

Готовят дезинфицирующее средство при следующем количественном соотношении компонентов:Prepare a disinfectant in the following quantitative ratio of components:

Готовят суспензию золотистого стафилококка (S.aureus) на стерильном изотоническом растворе хлорида натрия в концентрации 1·10⁹КОЕ·мл^-1. Вносят приготовленную суспензию золотистого стафилококка во флакон с дезинфицирующим средством до конечной концентрации 1·10⁸ КОЕ·мл^-1. Отбор проб проводят через 5, 20, 40 и 60 мин. Посев проб, отобранных после воздействия дезинфицирующего средства на плотные питательные среды, просматривают через 48 часов инкубации при температуре 37°С. Результаты контроля бактерицидного действия оценивают по наличию или отсутствию роста золотистого стафилококка на плотных питательных средах в чашках Петри.A suspension of Staphylococcus aureus (S.aureus) is prepared in a sterile isotonic solution of sodium chloride at a concentration of 1 · 10 ⁹ CFU · ml ^-1 . Make the prepared suspension of Staphylococcus aureus in a vial with a disinfectant to a final concentration of 1 · 10 ⁸ CFU · ml ^-1 . Sampling is carried out after 5, 20, 40 and 60 minutes. Sowing of samples taken after exposure to a disinfectant on solid nutrient media is viewed after 48 hours of incubation at 37 ° C. The results of the control of bactericidal action are evaluated by the presence or absence of growth of Staphylococcus aureus on solid nutrient media in Petri dishes.

Заявляемое дезинфицирующее средство обладает выраженной активностью в отношении золотистого стафилококка, вызывая гибель бактерий уже через 5 мин после начала воздействия.The inventive disinfectant has a pronounced activity against Staphylococcus aureus, causing the death of bacteria within 5 minutes after the start of exposure.

Пример 2.Example 2

Готовят суспензию синегнойной палочки (P.aeruginosa) на стерильном изотоническом растворе хлорида натрия в концентрации 1·10⁸КОЕ·мл^-1, обеспечивающей исходную плотность концентрации бязевых тест-объектов 1·10⁵·КОЕ·см^-2. Замачивают контаминированные псевдомонадами (синегнойной палочкой) бязевые тест-объекты, моделируя процесс специальной обработки белья и костюмов из хлопчатобумажной ткани. По окончании экспозиции взаимодействия бактерий, контаминирующих бязевые тест-объекты, с дезинфицирующим средством суспензию бактерий высевают на плотную питательную среду методом последовательных десятикратных разведении и после культивирования при температуре 37°С производят подсчет колоний, сформированных жизнеспособными бактериями.A suspension of Pseudomonas aeruginosa (P.aeruginosa) is prepared on a sterile isotonic solution of sodium chloride at a concentration of 1 · 10 ⁸ CFU · ml ^-1 , which provides an initial density concentration of coarse calico test objects 1 · 10 ⁵ · CFU · cm ^-2 . Calico test objects contaminated with pseudomonas (Pseudomonas aeruginosa) are soaked, simulating the process of special processing of linen and suits made of cotton fabric. At the end of the exposure of the interaction of bacteria that contaminate calico test objects with a disinfectant, the suspension of bacteria is plated on a solid nutrient medium by ten-fold dilution and after cultivation at 37 ° C, colonies formed by viable bacteria are counted.

Заявляемое дезинфицирующее средство обладает выраженной бактерицидной активностью в отношении синегнойной палочки при оценке методом бязевых тест-объектов, начиная с 5 мин экспозиции.The inventive disinfectant has a pronounced bactericidal activity against Pseudomonas aeruginosa when evaluated by calico test objects, starting from 5 minutes of exposure.

Пример 3.Example 3

Готовят суспензию спор вакцинного штамма СТИ сибиреязвенного микроба B.anthracis на стерильном изотоническом растворе хлорида натрия в концентрации 1·10⁹ спор в 1 мл. Рабочую суспензию спор вакцинного штамма СТИ вносят в дезинфицирующее средство в соотношении суспензия спор: дезинфицирующее средство 1:9. Полученную рабочую суспензию перемешивают встряхиванием, после чего начинают отсчет времени эксперимента. По окончании каждой заданной экспозиции (начало эксперимента, 10 мин, 30 мин, 40 мин) отбирают пробу суспензии спор, помещают на покровное стекло, подсушивают и фиксируют в этиловом спирте (по ТУ 6-09-1710-77). Приготовленные образцы исследуют с использованием сканирующего микроскопа JEOL JSM-6510LV (Япония). Сводные данные по результатам сканирующей микроскопии спор вакцинного штамма СТИ приведены на рисунке.A spore suspension of the vaccine strain STI of the anthrax microbe B.anthracis is prepared in a sterile isotonic solution of sodium chloride at a concentration of 1 · 10 ⁹ spores in 1 ml. The working spore suspension of the STI vaccine strain is introduced into the disinfectant in the ratio of spore suspension: disinfectant 1: 9. The resulting working suspension is stirred by shaking, after which the start of the experiment. At the end of each given exposure (the beginning of the experiment, 10 min, 30 min, 40 min), a spore suspension sample is taken, placed on a coverslip, dried and fixed in ethanol (according to TU 6-09-1710-77). The prepared samples are examined using a JEOL JSM-6510LV scanning microscope (Japan). A summary of the results of scanning microscopy of spores of the STI vaccine strain is shown in the figure.

Уже через 10 мин отмечается образование конгломерата спор с разрывом оболочек и слиянием спороплазмы; споры утрачивают способность к прорастанию. Через 30 мин наблюдается разрыв оболочек спор с образованием «теней» спор, выход спороплазмы в окружающую среду. Через 40 мин наблюдается деструкция, расслоение оболочек спор и полная утрата жизнеспособности.After 10 minutes, the formation of a conglomerate of spores with rupture of the membranes and fusion of the sporoplasm is noted; spores lose their ability to germinate. After 30 minutes, spore membrane rupture is observed with the formation of “shadow” spores, the release of sporoplasm into the environment. After 40 minutes, destruction, stratification of the spore membranes and complete loss of viability are observed.

Заявляемое дезинфицирующее средство обеспечивает высокий уровень спороцидной и бактерицидной активности при низкой концентрации рабочего раствора.The inventive disinfectant provides a high level of sporocidal and bactericidal activity at a low concentration of the working solution.

Claims

A disinfectant, characterized in that silver nanoparticles are included in the composition as catalysts for biocidal processes, containing hydrogen peroxide, silver nanoparticles, a surfactant in the following quantitative ratio of components, ml:
hydrogen peroxide, 2% aqueous solution 49.5 aqueous suspension of silver nanoparticles 49.5 newt X-100 1,0,

pH 5.6-5.8.