RU2480845C1 - Способ моделирования бактериального кератита - Google Patents
Способ моделирования бактериального кератита Download PDFInfo
- Publication number
- RU2480845C1 RU2480845C1 RU2012107121/14A RU2012107121A RU2480845C1 RU 2480845 C1 RU2480845 C1 RU 2480845C1 RU 2012107121/14 A RU2012107121/14 A RU 2012107121/14A RU 2012107121 A RU2012107121 A RU 2012107121A RU 2480845 C1 RU2480845 C1 RU 2480845C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cornea
- keratitis
- bacterial
- stroma
- bacterial suspension
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и касается моделирования бактериального кератита. Для этого производят трепанацию роговицы на глубину передней 1/3 стромы и формируют карман, в который вводят бактериальную суспензию штамма Staphylococcus aureus в дозе 0,1 мл. Дополнительно проводят деэпителизацию роговицы с последующим закапыванием бактериальной суспензии. Способ обеспечивает формирование модели кератита, приближенного к клинической практике при исключении значительного повреждения роговицы, что создает удобные условия для изучения лечебных факторов воздействия при кератитах различной этиологии. 3 ил., 1 пр.
Description
Предлагаемое изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может быть использовано для изучения научных исследований бактериальных процессов в роговице.
Известен способ моделирования микст-инфекции (вирусного и бактериального поражения) роговицы (Авторское свидетельство СССР 1784227, кл. A61F 9/00, 1992 г.), заключающийся во введении вируса простого герпеса в дозе не менее 104-105 в центр роговицы, а через 48-72 часа - культуру золотистого стафилококка в дозе 6,5 - 12,5 млн микробных тел в строму роговицы на расстоянии 1-4 мм от лимба. Однако этот способ имеет существенные недостатки: низкая частота (31%) воспроизведения герпес-стафилококковой язвы роговицы на фоне высокой частоты поражения сосудистого тракта (78%) и развитие эндофтальмита (44%), не позволяющего использовать модель воспроизводимого заболевания для изучения его патогенеза и отбора наиболее эффективных лекарственных средств и их сочетаний.
Также известен способ моделирования герпес-стафилококковой язвы роговой оболочки в эксперименте, заключающийся в заражении роговой оболочки глаза одновременно вирусом простого герпеса и культурой золотистого стафилококка путем одновременного их введения в переднюю камеру глаза экспериментального животного в дозе не менее 1000 ТЦД50/0,1 мл вируса простого герпеса и 2 млн микробных тел золотистого стафилококка (Способ моделирования герпес-стафилококковой язвы роговой оболочки, Мальханов В.Б., Идиятуллина Г.К., Гимранов P.M., Хафизов Г.Г., Шевчук Н.Е, пат. №2187843, заяв. 13.06.1997, опубл. 20.08.2002 г.). Исследования роговой оболочки проводили на 3-5 сутки инфицирования.
Этот способ является травматичным и представляет проникающее колотое ранение роговицы, так как сопровождается введением агентов в переднюю камеру, нарушением внутриглазных структур, вовлечением в воспалительный процесс переднего отдела сосудистого тракта. Способ исключает чистоту получения кератита роговицы в связи с вхождением в переднюю камеру. Кроме того, учитывая правила и нормативы этического обращения с животными необходима помощь анестезиолога и дача наркоза для предупреждения болевых ощущений животного.
Известен способ создания экспериментальной модели бактериального кератита путем введения 20 мкл бактериальной суспензии в роговицу с помощью иглы 30 G (Mucoadhesive polymer extracted from tamarind seed improves the intraocular penetration and efficacy of rufloxacin in topical treatment of experimental bacterial keratitis / E.Ghelardi [et al.] // Antimicrobial Agents and Chemotherapy. - 2004. - Vol.48. - P. 3396-3401). Недостатком данного способа является развитие ограниченного абсцесса роговицы, а не кератита. Не указаны объективные данные, свидетельствующие об образовании кератита, сроки его возникновения.
Известен способ получения экспериментальной модели бактериального кератита (Волкович Т. К., Самсонова И. В., Новости хирургии том 18, №3, 2010 г., стр.26-31). Экспериментальным животным после местной анестезии в оптической зоне выполняли послойную трепанацию роговицы трепаном диаметром 5 мм до 1/3 толщины стромы. Далее роговицу инфицировали возбудителем путем инстилляции в конъюнктивальную полость бактериальной суспензии лабораторного штамма Staphylococcus aureus. Предварительно живую культуру разводили физиологическим раствором до 3 единиц McFarland, что соответствовало 105-106 Мт/мл. Для заражения поврежденной поверхности роговицы использовали 1 мл культуры. Недостаток способа: малая раневая поверхность кератотомии, способная к быстрой адаптации и заживлению, учитывая высокую регенераторную способность кроликов. Кроме того, малый участок соприкосновения с бактериальной инфекцией под влиянием слезы может быстро освободиться от нее и исключить условия для возникновения кератита. Вызывает сомнение возможность развития кератита через одни сутки при таком методе воспроизведения.
Прототипом предлагаемого изобретения является экспериментальная модель воспалительного инфильтрата роговицы кроликов, на которой изучалась терапевтическая эффективность глазных капель Тамерит. После местной анестезии глаз кролика 1% раствором дикаина под операционным микроскопом скальпелем с алмазным лезвием делали надрез роговицы обоих глаз примерно на ½ толщины ее стромы, отступя от верхнего лимба на 2 мм на 12 - 13 часах. Затем образовывали в толще роговицы полость, тотально расслаивая строму с помощью микрохирургического шпателя, а затем в эту полость инсулиновым шприцом вводили 0,1 мл взвеси суспензии Staphylococcus aureus (штамм №6538-р, получен из микробиологической лаборатории института) в разведении по стандарту мутности 10 ед. (Лорткипанидзе М.М., Особенности клиники и современная терапия атопического кератоконъюнктивита. Автореферат, диссертация на соискание ученой степени к.м.н., Москва, 2007 г.). Недостатком модели является излишне глубокое проникновение в роговицу, формирование полости в глубоком слое стромы, вызывая тем самым значительное травматическое повреждение, с возможным образованием абсцесса.
Технический результат при использовании изобретения - формирование патогенетически обоснованной модели заболевания в эксперименте, приближенной к клинической практике.
Указанный технический результат достигается тем, что в способе моделирования бактериального кератита, включающем введение бактериальной суспензии штамма Staphylococcus aureus в толщу роговицы в дозе 0,1 мл, согласно изобретению дополнительно проводят деэпителизацию роговицы с последующим закапыванием бактериальной суспензии на поверхность деэпителизированной роговицы, а введение суспензии в толщу роговицы производят в сформированный в передней 1/3 стромы карман.
Изобретение иллюстрируется следующими фигурами: на фиг.1 представлена фотография глаза кролика на первые сутки после введения бактериальной суспензии Staphylococcus aureus; на фиг.2 - то же, на вторые сутки после инфицирования; на фиг.3 - то же, на пятые сутки после инфицирования.
Способ моделирования кератита выполняется следующим образом. После внутримышечного обезболивания кролика ксилазином (2,0 мл) и предварительной эпибульбарной анестезии 0,5% раствором инокаина проводят трепанацию на глубину 1/3 стромы и деэпителизацию роговицы. В области трепанации лезвием делают одиночный надрез стромы, через который шпателем проходят в переднюю 1/3 стромы роговицы. В сформированный карман вводят бактериальную суспензию в объеме 0,1 мл (106 Мт/мл), придавливая рану шпателем. На поверхность деэпителизированной роговицы закапывают несколько капель бактериальной суспензии. Двойное вхождение бактериального агента на роговицу интрастромально и поверхностно способствует быстрому развитию бактериального кератита. Это важно для предупреждения процесса регенерации роговицы, который у кроликов идет интенсивнее и быстрее по времени, чем у человека. Эта методика образования экспериментальной модели приближена к механизму возникновения и развития бактериального кератита в практической офтальмологии, особенно травматической этиологии.
Заявляемый способ моделирования бактериального кератита способствует формированию патогенетически обоснованной модели заболевания, учитывающей внедрение инфекционного агента снаружи и в толщу роговицы, снижение повреждения за счет меньшей площади травматизации стромы роговицы, так как чаще при развитии кератита заинтересованы передние слои. В предлагаемой модели не формируется большая полость, а создается узкий карман, отсепарованный микрошпателем, для введения инфекционного агента. Большая часть роговицы остается неповрежденной, не происходит грубой травматизации роговицы, эпителий снимается для быстрого формирования кератита. Такие манипуляции приближены к механизму наиболее частого развития кератита различной этиологии в клинической практике.
Сущность изобретения поясняется следующим примером. Эксперимент выполнен на кролике весом 3 кг. После внутримышечного обезболивания кролика ксилазином (2,0 мл) и предварительной эпибульбарной анестезии 0,5% раствором инокаина проводят трепанацию на 1/3 стромы и деэпителизацию роговицы. Лезвием делают одиночный надрез стромы в области трепанации, затем шпателем через надрез формируют узкий карман на глубине передней 1/3 стромы роговицы. В сформированный карман вводят бактериальную суспензию в объеме 0,1 мл (106 Мт/мл). Шпателем придавливают входное отверстие в роговице. На поверхность деэпителизированной роговицы закапывают бактериальную суспензию в объеме нескольких капель. Двойное вхождение бактериального агента на роговицу интрастромально и поверхностно способствует быстрому развитию бактериального кератита.
Для динамического наблюдения за состоянием роговицы и переднего отрезка глаза проводили фотографирование. Биомикроскопически исследовали состояние роговицы: сроки образования и характер инфильтрата, локализация, размеры распространения воспалительного инфильтрата по площади и в глубину.
Клинически заболевание развивалось через сутки после двойного введения бактериальной суспензии. Объективно у кролика определялись признаки бактериального кератита. Присутствовали симптомы слезотечения, блефароспазма. Глазная щель была закрыта, наблюдался выраженный отек век, обильное гнойное отделяемое на веках и в конъюнктивальной полости, выраженная перикорнеальная и смешанная инъекция конъюнктивы, воспалительный очаг в оптической зоне роговицы. Имелся отек роговицы, инфильтрация поверхностных слоев стромы. Передняя камера была средней глубины, влага прозрачная, радужка без изменений (фиг.1).
На вторые сутки наблюдалась более выраженная клиническая картина бактериального кератита: обильное гнойное отделяемое на веках, выраженная перикорнеальная инъекция конъюнктивы, отек роговицы усилился, поверхностные слои роговицы деэпителизированы, появился инфильтрат в центре с нечеткими границами. Передняя камера средней глубины, влага ее прозрачная (фиг.2).
На пятые сутки выявились выраженный хемоз конъюнктивы, более глубокий очаг инфильтрации стромы роговицы (фиг.3).
Все клинические признаки говорили за развитие бактериального кератита при предложенном способе его моделирования.
Полученная экспериментальная модель имеет большое значение для научных целей и практического здравоохранения. Изучение новых противовоспалительных инстиляционных средств, которые появляются в большом количестве в аптечной сети, требуют изучения и обоснования применения их в медицинской практике. Экспериментальная модель будет использоваться для изучения влияния различных факторов физического воздействия и медикаментозных средств на роговицу при воспалении, в том числе при UV-кросслинкинге и воздействии других видов излучения.
Claims (1)
- Способ моделирования бактериального кератита, включающий введение бактериальной суспензии штамма Staphylococcus aureus в толщу роговицы в дозе 0,1 мл, отличающийся тем, что дополнительно проводят деэпителизацию роговицы с последующим закапыванием бактериальной суспензии на поверхность деэпителизированной роговицы, а введение суспензии в толщу роговицы производят в сформированный в передней 1/3 стромы карман.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2012107121/14A RU2480845C1 (ru) | 2012-02-27 | 2012-02-27 | Способ моделирования бактериального кератита |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2012107121/14A RU2480845C1 (ru) | 2012-02-27 | 2012-02-27 | Способ моделирования бактериального кератита |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2480845C1 true RU2480845C1 (ru) | 2013-04-27 |
Family
ID=49153271
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2012107121/14A RU2480845C1 (ru) | 2012-02-27 | 2012-02-27 | Способ моделирования бактериального кератита |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2480845C1 (ru) |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2668472C2 (ru) * | 2017-02-02 | 2018-10-01 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Петрозаводский государственный университет" | Микрохирургическая технология введения микрочастиц в микрорану вертикального профиля роговицы глаза |
RU2700403C1 (ru) * | 2018-09-10 | 2019-09-16 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Ставропольский государственный аграрный университет" | Способ моделирования внутриглазного инфекционного процесса |
RU2764121C1 (ru) * | 2021-04-21 | 2022-01-13 | Федеральное государственное бюджетное военное образовательное учреждение высшего образования "Военно-медицинская академия имени С.М. Кирова" Министерства обороны Российской Федерации (ВМедА) | Способ экспериментального моделирования бактериального кератита |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2256430C1 (ru) * | 2003-10-29 | 2005-07-20 | Василевич Леонид Александрович | Способ имплантации внутрироговичной линзы |
US6924413B2 (en) * | 2001-03-30 | 2005-08-02 | Biochemical And Pharmacological Laboratories, Inc. | Experimental animals for evaluation of therapeutic effects on corneal epithelial damages |
RU2346338C1 (ru) * | 2007-06-21 | 2009-02-10 | Государственное учреждение Научно-исследовательский институт глазных болезней РАМН | Способ моделирования грибкового кератита у кроликов |
-
2012
- 2012-02-27 RU RU2012107121/14A patent/RU2480845C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6924413B2 (en) * | 2001-03-30 | 2005-08-02 | Biochemical And Pharmacological Laboratories, Inc. | Experimental animals for evaluation of therapeutic effects on corneal epithelial damages |
RU2256430C1 (ru) * | 2003-10-29 | 2005-07-20 | Василевич Леонид Александрович | Способ имплантации внутрироговичной линзы |
RU2346338C1 (ru) * | 2007-06-21 | 2009-02-10 | Государственное учреждение Научно-исследовательский институт глазных болезней РАМН | Способ моделирования грибкового кератита у кроликов |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
ВОЛКОВИЧ Т.К. и др. - Новости хирургии, 2010, т.18, №3, с.26-31. TUNGSIRIPAT Т, Fluoroquinolone therapy in multiple-drug resistant staphylococcal keratitis after lamellar keratectomy in a rabbit model. Am J Ophthalmol. 2003 Jul; 136(1): 76-81. * |
ЛОРТКИПАНИДЗЕ М.М. Особенности клиники и современная терапия атопического кератоконъюнктивита: Автореф. дис. на соиск. учен. степ. канд. мед. наук, 2007. * |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2668472C2 (ru) * | 2017-02-02 | 2018-10-01 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Петрозаводский государственный университет" | Микрохирургическая технология введения микрочастиц в микрорану вертикального профиля роговицы глаза |
RU2700403C1 (ru) * | 2018-09-10 | 2019-09-16 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Ставропольский государственный аграрный университет" | Способ моделирования внутриглазного инфекционного процесса |
RU2764121C1 (ru) * | 2021-04-21 | 2022-01-13 | Федеральное государственное бюджетное военное образовательное учреждение высшего образования "Военно-медицинская академия имени С.М. Кирова" Министерства обороны Российской Федерации (ВМедА) | Способ экспериментального моделирования бактериального кератита |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
AU2015257651B2 (en) | Compounds for treating ophthalmic diseases and disorders | |
Reynolds et al. | Excimer laser surface ablation–a review | |
Lin et al. | A mouse model of limbal stem cell deficiency induced by topical medication with the preservative benzalkonium chloride | |
Bian et al. | Dexamethasone drug eluting nanowafers control inflammation in alkali-burned corneas associated with dry eye | |
Lee et al. | One-snip punctoplasty and canalicular curettage through the punctum: a minimally invasive surgical procedure for primary canaliculitis | |
RU2480845C1 (ru) | Способ моделирования бактериального кератита | |
Tsujita et al. | Corneal stromal abscessation in two horses treated with intracorneal and subconjunctival injection of 1% voriconazole solution | |
Berryhill et al. | Comparison of corneal degeneration and calcific band keratopathy from 2000 to 2013 in 69 horses | |
Su et al. | Evaluation of toluidine blue-mediated photodynamic therapy for experimental bacterial keratitis in rabbits | |
Kim et al. | Experimental chronic ocular hypertension by anterior chamber injection of 0.3% carbomer solution in the rat | |
Park et al. | Effect of lovastatin on wound-healing modulation after glaucoma filtration surgery in a rabbit model | |
Ren et al. | Rho kinase inhibitor AR-12286 reverses steroid-induced changes in intraocular pressure, effective filtration areas, and morphology in mouse eyes | |
Liu et al. | Modified lamellar keratoplasty and immunosuppressive therapy guided by in vivo confocal microscopy for perforated Mooren's ulcer | |
Hafezi et al. | Repeated high-fluence accelerated slitlamp-based photoactivated chromophore for keratitis corneal cross-linking for treatment-resistant fungal keratitis | |
Ram | Tectonic corneal lamellar grafting for surgically-induced necrotizing scleritis after strabismus surgery: case report & literature review | |
Xiang-Gen et al. | Anti-infectious activity of intravitreal injectable voriconazole microspheres on experimental rabbit fungal endophthalmitis caused by Aspergillus fumigatus | |
Wang et al. | A preliminary study to treat severe endophthalmitis via a foldable capsular vitreous body with sustained levofloxacin release in rabbits | |
Soleimani et al. | Mustard Gas–Induced Ocular Surface Disorders: An Update on the Pathogenesis, Clinical Manifestations, and Management | |
Min et al. | Comparison of single versus multiple injections of the protein saratin for prolonging bleb survival in a rabbit model | |
Occhiutto et al. | Paclitaxel associated with lipid nanoparticles as a new antiscarring agent in experimental glaucoma surgery | |
TW202114657A (zh) | 用於抑制術後眼睛炎性病況的抗炎和散瞳前房溶液 | |
Yao et al. | Effect of a Topical Nonsteroidal Anti-Inflammatory Drug (0.1% Pranoprofen) on VEGF and COX-2 Expression in Primary Pterygium | |
Kiessling et al. | Impact of failed ab-interno trabeculectomy (trabectome) on subsequent XEN45 gel stent implantation in pseudophakic eyes | |
RU2764121C1 (ru) | Способ экспериментального моделирования бактериального кератита | |
Jiang et al. | Effect of hypothermic perfusion on phacoemulsification in cataract patients complicated with uveitis: A randomised trial |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20140228 |