RU2480748C2 - Method of diagnostics of cancer in cats and dogs - Google Patents

Method of diagnostics of cancer in cats and dogs Download PDF

Info

Publication number
RU2480748C2
RU2480748C2 RU2010115004/10A RU2010115004A RU2480748C2 RU 2480748 C2 RU2480748 C2 RU 2480748C2 RU 2010115004/10 A RU2010115004/10 A RU 2010115004/10A RU 2010115004 A RU2010115004 A RU 2010115004A RU 2480748 C2 RU2480748 C2 RU 2480748C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
intensity
frequency
cancer
ratio
scattered
Prior art date
Application number
RU2010115004/10A
Other languages
Russian (ru)
Other versions
RU2010115004A (en
Inventor
Георгий Маркович Янковский
Original Assignee
Георгий Маркович Янковский
Общество с ограниченной ответственностью "ВЕТБИОСПЕКТР"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Георгий Маркович Янковский, Общество с ограниченной ответственностью "ВЕТБИОСПЕКТР" filed Critical Георгий Маркович Янковский
Priority to RU2010115004/10A priority Critical patent/RU2480748C2/en
Publication of RU2010115004A publication Critical patent/RU2010115004A/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2480748C2 publication Critical patent/RU2480748C2/en

Links

Landscapes

  • Investigating Or Analysing Materials By Optical Means (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

FIELD: veterinary medicine.
SUBSTANCE: method includes performing of laser light-scattering spectroscopy of blood serum. And the investigation of the spectrum of light scattering intensity is performed after heating the serum to 70-90°C and slow cooling to a temperature of 10-50°C. The time dependence of intensity of scattered laser radiation is subjected to Fourier transformation, the resulting curve represents a dependence of intensity of scattered laser radiation on frequency. In the presence of cancer in the animal, the ratio of the intensity of scattered radiation at a frequency of 200 Hz to the intensity of the signal at a frequency of 400 Hz is lower than 1.65, in animals without cancer the ratio of the intensity of scattered radiation at a frequency of 200 Hz to the intensity of the signal at a frequency of 400 Hz exceeds 1.8. If the ratio of the intensity of scattered laser radiation at a frequency of 200 Hz to the intensity of the signal at a frequency of 400 Hz is in the range from 1.65 to 1.8, the risk of cancer in the animal is diagnosed.
EFFECT: reliable diagnostics of cancer in animals, including at early stage of the disease.
4 ex

Description

Область примененияApplication area

Изобретение относится к ветеринарии, а именно к способам диагностики онкологических заболеваний у животных, в частности для диагностики ранней стадии онкологических заболеваний, и послеоперационного сопровождения животных для выявления признаков рецидива.The invention relates to veterinary medicine, and in particular to methods for diagnosing cancer in animals, in particular for diagnosing an early stage of cancer, and postoperative follow-up of animals to detect signs of relapse.

Предшествующий уровень техникиState of the art

Большинство известных методов диагностики онкозаболеваний у людей и животных направлено на выявление опухоли только одной этиологии. До настоящего времени существует проблема создания универсального способа диагностики злокачественных опухолей, позволяющего выявлять наличие злокачественного опухолевого роста любой этиологии.Most of the known methods for the diagnosis of cancer in humans and animals are aimed at identifying a tumor of only one etiology. To date, there is the problem of creating a universal method for the diagnosis of malignant tumors, allowing to detect the presence of malignant tumor growth of any etiology.

Ряд исследователей считает, что наиболее перспективными в этом направлении являются методы, основанные на определении опухолевых маркеров в биологических жидкостях организма, в частности в крови. Известен способ диагностики злокачественных опухолей человека, основанный на выявлении в крови обследуемого белковых фракций, специфичных для злокачественного роста (Короткоручко В.П. Осадочная реакция на рак при диагностике опухолевой болезни. Киев, "Наукова думка". 1967). Выявление этой белковой фракции осуществляли путем выдерживания сыворотки крови в растворе соляной кислоты с последующим осаждением белка азотной кислотой и дальнейшим растворением его в дистиллированной воде. Образующийся осадок белков сыворотки крови онкологических больных в отличие от здоровых людей не растворялся. Результат реакции, получившей название осадочной реакции на рак (ОРР), учитывали по визуальному определению белкового осадка. Этот известный способ является универсальным и позволяет выявить различные формы и локализации злокачественных новообразований. Недостаток способа заключается в его трудоемкости, сложности и низкой чувствительности и специфичности.A number of researchers believe that the most promising in this direction are methods based on the determination of tumor markers in biological fluids of the body, in particular in the blood. A known method for the diagnosis of human malignant tumors, based on the detection in the blood of the examined protein fractions specific for malignant growth (V. Korotorkuchko. Precipitation of cancer in the diagnosis of tumor disease. Kiev, "Naukova Dumka. 1967). Identification of this protein fraction was carried out by keeping the blood serum in a solution of hydrochloric acid, followed by precipitation of the protein with nitric acid and its further dissolution in distilled water. The resulting precipitate of blood serum proteins of cancer patients, unlike healthy people, did not dissolve. The result of the reaction, called the sedimentary response to cancer (ORP), was taken into account by visual determination of protein precipitate. This known method is universal and allows you to identify various forms and localization of malignant neoplasms. The disadvantage of this method lies in its complexity, complexity and low sensitivity and specificity.

Известен способ диагностики онкологического заболевания [1] у людей, включающий забор пробы крови у пациента и ее спектральный анализ с последующей идентификацией заболевания путем сравнения спектров крови пациента и здорового человека, отличающийся тем, что спектральный анализ крови осуществляют в условиях многократного нарушенного полного внутреннего отражения в инфракрасной области спектра, а заболевание идентифицируют по появлению в спектре полос поглощения в диапазоне частот 1500-3000 см-1, при появлении в спектре полосы поглощения на частоте 1625 см-1 идентифицируют рак крови, при появлении в спектре полосы поглощения на частоте 1735 см-1 идентифицируют рак молочной железы, при появлении в спектре полосы поглощения на частоте 1580 см-1 идентифицируют рак печени, при появлении в спектре полосы поглощения на частоте 2864 см-1 идентифицируют лимфогранулематоз. Недостаток способа заключается в его трудоемкости и сложности.A known method for the diagnosis of cancer [1] in humans, including the collection of a blood sample from a patient and its spectral analysis with subsequent identification of the disease by comparing the blood spectra of a patient and a healthy person, characterized in that the spectral analysis of blood is carried out in conditions of multiple impaired total internal reflection in infrared region of the spectrum, and the disease is identified by the appearance in the spectrum of absorption bands in the frequency range 1500-3000 cm -1 , when the absorption band appears in the spectrum at a frequency of 1625 cm -1 , blood cancer is identified, when an absorption band appears at 1735 cm -1 in the spectrum, breast cancer is identified, when an absorption band appears at a frequency of 1580 cm -1 , liver cancer is identified, when an absorption band appears at a frequency of 2864 cm -1 identify lymphogranulomatosis. The disadvantage of this method is its complexity and complexity.

Известен также способ отбора лиц для выявления злокачественных новообразований [2], который используется в медицине, а именно при плановом диспансерном профилактичеком обследовании людей с целью оперативного обнаружения онкологических больных на ранних стадиях развития опухолей. Способ включает взятие у обследуемых проб биологического материала, выделение из него культур эшерихиа и стрептококка с последующей инкубацией в присутствии клеток опухоли L929, приготовление мазка и его окрашивание, а также микроскопическое исследование с расчетом диагностического индекса целых клеток /ИЦК/. При ИЦК 50-60% больных отбирают в группу риска, а при ИЦК равном 49% и ниже в группу больных злокачественными новообразованиями. Недостаток способа также заключается в его трудоемкости и сложности, что отражается на точности показателей.There is also a method of selecting individuals for the detection of malignant neoplasms [2], which is used in medicine, namely during routine preventive medical examination of people with the aim of prompt detection of cancer patients in the early stages of tumor development. The method includes taking biological samples from examined samples, isolating Escherichia and streptococcus cultures from it, followed by incubation in the presence of L929 tumor cells, preparing a smear and staining, as well as microscopic examination with the calculation of the diagnostic index of whole cells / ICC /. With an ICC, 50-60% of patients are selected at risk, and with an ICI of 49% or lower, in the group of patients with malignant neoplasms. The disadvantage of this method also lies in its complexity and complexity, which affects the accuracy of the indicators.

Известен способ дифференциальной диагностики облигатных форм предрака и злокачественных новообразований [3], который основан на определении в плазме человека наличия частиц с гидродинамическими радиусами 5-30 нм, в соотношении 35-55% у обследуемого диагностируют облигатную форму предрака. При определении 55% и выше этих частиц диагностируют злокачественные новообразования. При определении других соотношений этих же частиц делают вывод об отсутствии данных заболеваний. Способ позволяет выявить и оценить изменения в системе гомеостаза.A known method for the differential diagnosis of obligate forms of precancer and malignant neoplasms [3], which is based on the determination in the human plasma of the presence of particles with hydrodynamic radii of 5-30 nm, in the ratio of 35-55%, the obligate form of precancer is diagnosed in the subject. When determining 55% and above, these particles are diagnosed with malignant neoplasms. When determining other ratios of the same particles, they conclude that these diseases are absent. The method allows to identify and evaluate changes in the homeostasis system.

Недостатками способа [3] является низкая информативность, которая связана с тем, что биологические макромолекулы сыворотки крови: липопротеины, липиды, белки в сыворотке крови нестабильны и сами по себе могут образовывать комплексы во время получения и приготовления образца, использование физиологического раствора без стабилизации его кислотности при проведении измерений. Особенности забора образца, время, затраченное на получение сыворотки или плазмы крови, температура в помещении во время проведения исследования - все это оказывает влияние на формирование и диссоциацию образцов и приводит к тому, что указанный способ дает много ложноположительных результатов. А отсутствие стабилизации кислотности физиологического раствора только усиливает нестабильность исследуемого образца.The disadvantages of the method [3] is the low information content, which is associated with the fact that biological serum macromolecules: lipoproteins, lipids, proteins in the blood serum are unstable and can themselves form complexes during sample preparation and preparation, the use of physiological saline without stabilizing its acidity when taking measurements. Features of the sampling, the time taken to obtain serum or plasma, the room temperature during the study - all this affects the formation and dissociation of the samples and leads to the fact that this method gives many false positive results. And the lack of stabilization of the acidity of physiological saline only enhances the instability of the test sample.

Однако способ [3] можно принять за наиболее близкий аналог к заявляемому изобретению.However, the method [3] can be taken as the closest analogue to the claimed invention.

Техническим результатом, на достижение которого направлено заявляемое изобретение, является обеспечение достоверной диагностики онкологического заболевания, в том числе на ранней стадии заболевания, путем анализа преобразованной методом Фурье интенсивности светорассеяния излучения при проведении спектроскопии лазерного рассеяния нативной сыворотки крови в условиях контроля концентрации солей и кислотности раствора и снятия спектра интенсивности светорассеяния с контролем температуры образцов, кроме того, техническим результатом является доступность, простота, экономичность способа, а также высокая достоверность диагностики онкологического заболевания, а также возможного риска его возникновения.The technical result, to which the claimed invention is directed, is to provide reliable diagnosis of cancer, including at an early stage of the disease, by analyzing the Fourier transform of the light scattering radiation during laser spectroscopy of native blood serum under conditions of monitoring the concentration of salts and the acidity of the solution and measuring the spectrum of light scattering with temperature control of the samples, in addition, the technical result m is the availability, simplicity, process efficiency, as well as high accuracy of diagnosis of cancer and the possible risk of its occurrence.

Раскрытие изобретенияDisclosure of invention

Технический результат достигается тем, что предложен способ диагностики онкологического заболевания у животных, в частности кошек и собак, включающий анализ преобразованной методом Фурье временного хода интенсивности светорассеяния при проведении спектроскопии лазерного рассеяния сыворотки крови животных при температуре 10-50°С, после нагрева сыворотки в буферном растворе до 70-90°С и последующего охлаждения до температуры 10-50°С.The technical result is achieved by the fact that a method for diagnosing cancer in animals, in particular cats and dogs, is proposed, which includes analyzing the Fourier transform of the time course of the light scattering intensity during laser spectroscopy of animal blood serum at a temperature of 10-50 ° C, after heating the serum in a buffer solution to 70-90 ° C and subsequent cooling to a temperature of 10-50 ° C.

Для диагностики онкологического заболевания у животного по предлагаемому способу из образца крови получают сыворотку, которую анализируют методом спектроскопии лазерного рассеяния. Временную зависимость интенсивности рассеянного лазерного излучения подвергают преобразованию Фурье, полученная в результате кривая представляет собой зависимость интенсивности рассеянного лазерного излучения от частоты. При проведении исследования сыворотки крови животных для выявления онкологического заболевания анализируют форму кривой, полученной в результате преобразования Фурье. Наблюдается характерная форма кривых в случае животных, больных онкологическим заболеванием и не больных онкологическим заболеванием. У животного, больного онкологическим заболеванием, отношение интенсивности рассеянного излучения на частоте 200 Гц к интенсивности сигнала на частоте 400 Гц меньше величины 1,65. У животных, не больных онкологическим заболеванием, отношение интенсивности рассеянного излучения на частоте 200 Гц к интенсивности сигнала на частоте 400 Гц превышает величину 1,8. Если отношение интенсивности рассеянного лазерного излучения на частоте 200 Гц к интенсивности сигнала на частоте 400 Гц лежит в пределах от 1,65 до 1,8, то диагностируют риск заболевания животного онкологическим заболеванием.For the diagnosis of cancer in an animal according to the proposed method, serum is obtained from a blood sample, which is analyzed by laser scattering spectroscopy. The time dependence of the intensity of the scattered laser radiation is subjected to Fourier transform, the resulting curve is the frequency dependence of the intensity of the scattered laser radiation. When conducting a study of the blood serum of animals to identify cancer, analyze the shape of the curve obtained by the Fourier transform. A characteristic shape of the curves is observed in the case of animals sick with cancer and not sick with cancer. In an animal with cancer, the ratio of the intensity of the scattered radiation at a frequency of 200 Hz to the signal intensity at a frequency of 400 Hz is less than 1.65. In animals not suffering from cancer, the ratio of the intensity of the scattered radiation at a frequency of 200 Hz to the signal intensity at a frequency of 400 Hz exceeds 1.8. If the ratio of the intensity of the scattered laser radiation at a frequency of 200 Hz to the signal intensity at a frequency of 400 Hz is in the range from 1.65 to 1.8, then the risk of cancer of the animal is diagnosed.

Точность диагностического метода была подтверждена многочисленными примерами спектров излучений, полученных при исследовании сывороток, которые были взяты у животных, не больных онкологическими заболеваниями, так и у животных, больных онкологическими заболеваниями, - пациентов, у которых диагноз онкологического заболевания подтвердился другими методами анализа.The accuracy of the diagnostic method has been confirmed by numerous examples of emission spectra obtained in the study of sera taken from animals not suffering from cancer, and from animals suffering from cancer, patients whose cancer diagnosis was confirmed by other methods of analysis.

Заявляемый способ осуществляют следующим образом.The inventive method is as follows.

Из вены обследуемого животного берут натощак кровь. Затем из крови получают сыворотку любым из общепринятых способов. Для этого пробирку с кровью выдерживают до образования сгустка, а затем отделяют образовавшийся тромб от стен пробирки круговым движением. Пробирку центрифугируют при 1500-2000 оборотах в минуту в течение 10-30 минут, и супернатант переносят в чистую пробирку, которую или замораживают, или передают оператору прибора для выполнения анализа. Аликвоту со 100 мкл сыворотки или плазмы крови помещают в кювету, содержащую гипоизотонический раствор: от 10 до 100% от изотоничности физиологического раствора или от 0.09 до 0.9 г соли хлорида натрия и фосфорной кислоты на 100 г воды, фосфатный водный буфер рН 7.0 - рН 7.8 при температуре 10-40°С. Общий объем образца в кювете составляет 1.0 мл. Затем данный образец нагревают до 70-90°С и постепенно охлаждают до 10-50°С. Проводят лазерную спектроскопию приготовленного образца. Измеряя отношение интенсивности сигнала на частоте 200 Гц и 400 Гц делают заключение о наличии риска онкологического заболевания, или о наличии онкологического заболевания, или об отсутствии онкологического заболевания. При наличии у животного онкологического заболевания отношение интенсивности рассеянного излучения на частоте 200 Гц к интенсивности сигнала на частоте 400 Гц меньше величины 1,65, у животных, не больных онкологическим заболеванием, отношение интенсивности рассеянного излучения на частоте 200 Гц к интенсивности сигнала на частоте 400 Гц превышает величину 1,8. Если отношение интенсивности рассеянного лазерного излучения на частоте 200 Гц к интенсивности сигнала на частоте 400 Гц лежит в пределах от 1,65 до 1,8, то диагностируют риск заболевания животного онкологическим заболеванием.Fasting blood is taken from a vein of the examined animal. Then, serum is obtained from the blood by any of the generally accepted methods. For this, the blood tube is kept until a clot forms, and then the formed thrombus is separated from the walls of the tube in a circular motion. The tube is centrifuged at 1500-2000 rpm for 10-30 minutes, and the supernatant is transferred to a clean tube, which is either frozen or transferred to the device operator for analysis. An aliquot of 100 μl of serum or blood plasma is placed in a cuvette containing a hypoisotonic solution: from 10 to 100% of the isotonicity of physiological saline or from 0.09 to 0.9 g of sodium chloride and phosphoric acid salt per 100 g of water, phosphate aqueous buffer pH 7.0 - pH 7.8 at a temperature of 10-40 ° C. The total sample volume in the cuvette is 1.0 ml. Then this sample is heated to 70-90 ° C and gradually cooled to 10-50 ° C. Laser spectroscopy of the prepared sample is carried out. By measuring the ratio of signal intensity at a frequency of 200 Hz and 400 Hz, a conclusion is made about the risk of cancer, or the presence of cancer, or the absence of cancer. If the animal has an oncological disease, the ratio of the intensity of the scattered radiation at a frequency of 200 Hz to the signal intensity at a frequency of 400 Hz is less than 1.65, in animals not suffering from cancer, the ratio of the intensity of the scattered radiation at a frequency of 200 Hz to the signal intensity at a frequency of 400 Hz exceeds 1.8. If the ratio of the intensity of scattered laser radiation at a frequency of 200 Hz to the signal intensity at a frequency of 400 Hz is in the range from 1.65 to 1.8, then the risk of cancer of the animal is diagnosed.

ПримерыExamples

Пример 1.Example 1

Собака, сука, возраст 9 лет. Диагноз: рак молочной железы.Dog, female, 9 years old. Diagnosis: breast cancer.

Кровь была взята из вены. Плазму центрифугировали при 1500-2000 оборотах в минуту в течение 30 минут. Аликвоту сыворотки помещают в кювету, содержащую изотонический фосфатный буфер рН 7.0 - рН 7.8 при температуре 10-50°С. Сначала образец нагревают до 70-90°С, а затем постепенно охлаждают до 10-50°С и проводят спектроскопию лазерного рассеяния приготовленного образца. После преобразования Фурье временной зависимости интенсивности рассеянного лазерного излучения сравнивают сигнал на частотах 200 Гц и 400 Гц, отношение интенсивностей составляет величину 1,3, что свидетельствует о наличии у животного онкологического заболевания.Blood was taken from a vein. Plasma was centrifuged at 1500-2000 rpm for 30 minutes. An aliquot of serum is placed in a cuvette containing isotonic phosphate buffer pH 7.0 - pH 7.8 at a temperature of 10-50 ° C. First, the sample is heated to 70-90 ° C, and then gradually cooled to 10-50 ° C and laser scattering spectroscopy of the prepared sample is carried out. After the Fourier transform of the time dependence of the intensity of the scattered laser radiation, the signal is compared at frequencies of 200 Hz and 400 Hz, the intensity ratio is 1.3, which indicates the presence of an oncological disease in the animal.

Пример 2.Example 2

Собака, кобель 7 лет. Диагноз - плоскоклеточный рак кожи.Dog, male 7 years old. The diagnosis is squamous cell carcinoma of the skin.

Образец сыворотки был заморожен при -20°С. После оттаивания образца, хранившегося в течение 10 дней при температуре -20°С, образец центрифугировали при 1500-2000 оборотах в минуту в течение 30 минут. Аликвоту сыворотки помещают в кювету, содержащую изотонический фосфатный буфер рН 7.0 - рН 7.8 при температуре 10-50°С. Сначала образец нагревают до 70-90°С, а затем постепенно охлаждают до 10-50°С и проводят спектроскопию лазерного рассеяния приготовленного образца. После преобразования Фурье временной зависимости интенсивности рассеянного лазерного излучения сравнивают сигнал на частотах 200 Гц и 400 Гц, отношение интенсивностей составляет величину - 1,1, что свидетельствует о наличии у животного онкологического заболевания.A serum sample was frozen at -20 ° C. After thawing the sample, stored for 10 days at a temperature of -20 ° C, the sample was centrifuged at 1500-2000 rpm for 30 minutes. An aliquot of serum is placed in a cuvette containing isotonic phosphate buffer pH 7.0 - pH 7.8 at a temperature of 10-50 ° C. First, the sample is heated to 70-90 ° C, and then gradually cooled to 10-50 ° C and laser scattering spectroscopy of the prepared sample is carried out. After the Fourier transform of the time dependence of the intensity of the scattered laser radiation, the signal is compared at frequencies of 200 Hz and 400 Hz, the ratio of intensities is 1.1, which indicates the presence of an oncological disease in the animal.

Пример 3.Example 3

Кошка 7 лет. Диагноз рак молочной железы. Для этого берут кровь натощак из вены для получения сыворотки общепринятым методом: отстаивают до формирования сгустка, затем сформировавшийся сгусток отрывают круговым движением. Кровь центрифугировали при 1500-2000 оборотах в минуту в течение 30 минут и супернатант аккуратно собирают для анализа. Аликвоту (100 мкл) из этой сыворотки исследовали методом спектроскопии лазерного рассеяния. Аликвоту сыворотки помещают в кювету, содержащую изотонический фосфатный буфер рН 7.0 - рН 7.8 при температуре 10-40°С. Сначала образец нагревают до 70-90°С, а затем постепенно охлаждают до 10-50°С и проводят спектроскопию лазерного рассеяния приготовленного образца. После преобразования Фурье временной зависимости интенсивности рассеянного лазерного излучения сравнивают сигнал на частотах 200 Гц и 400 Гц, отношение интенсивностей составляет величину - 1,5, что свидетельствует о наличии у животного онкологического заболевания.The cat is 7 years old. The diagnosis of breast cancer. For this, blood is taken on an empty stomach from a vein to obtain serum by the generally accepted method: they are defended until a clot forms, then the formed clot is torn off in a circular motion. Blood was centrifuged at 1500-2000 rpm for 30 minutes and the supernatant was carefully collected for analysis. An aliquot (100 μl) of this serum was examined by laser scattering spectroscopy. An aliquot of serum is placed in a cuvette containing isotonic phosphate buffer pH 7.0 - pH 7.8 at a temperature of 10-40 ° C. First, the sample is heated to 70-90 ° C, and then gradually cooled to 10-50 ° C and laser scattering spectroscopy of the prepared sample is carried out. After the Fourier transform of the time dependence of the intensity of the scattered laser radiation, the signal is compared at frequencies of 200 Hz and 400 Hz, the ratio of intensities is 1.5, which indicates the presence of an oncological disease in the animal.

Пример 4.Example 4

Собака, кобель 4 года. Во время ветеринарного обследования, предшествующего сдаче крови, никаких патологий или заболеваний не выявлено. Кровь натощак из вены для получения сыворотки общепринятым методом: отстаивают до формирования сгустка, затем сформировавшийся сгусток отрывают круговым движением. Кровь центрифугировали при 1500-2000 оборотах в минуту в течение 30 минут, и супернатант аккуратно собирают для анализа. Аликвоту сыворотки помещают в кювету, содержащую изотонический фосфатный буфер рН 7.0 - рН 7.8 при температуре 10-50°С. Сначала образец нагревают до 70-90°С, а затем постепенно охлаждают до 10-50°С и проводят спектроскопию лазерного рассеяния приготовленного образца. После преобразования Фурье временной зависимости интенсивности рассеянного лазерного излучения сравнивают сигнал на частотах 200 Гц и 400 Гц отношение интенсивностей составляет величину - 2, что свидетельствует об отсутствии у животного онкологического заболевания.Dog, male 4 years old. During the veterinary examination prior to blood donation, no pathologies or diseases were detected. Fasting blood from a vein to obtain serum by the conventional method: defend until a clot forms, then the formed clot is torn off in a circular motion. Blood was centrifuged at 1500-2000 rpm for 30 minutes, and the supernatant was carefully collected for analysis. An aliquot of serum is placed in a cuvette containing isotonic phosphate buffer pH 7.0 - pH 7.8 at a temperature of 10-50 ° C. First, the sample is heated to 70-90 ° C, and then gradually cooled to 10-50 ° C and laser scattering spectroscopy of the prepared sample is carried out. After the Fourier transform of the time dependence of the intensity of the scattered laser radiation, the signal at frequencies of 200 Hz and 400 Hz is compared, the ratio of intensities is 2, which indicates the absence of an oncological disease in the animal.

Таким образом, заявляемый способ диагностики онкологического заболевания позволяет выявить изменения в состоянии сыворотки крови, обеспечивая при этом высокую точность и информативность. Таким образом, достигнут желаемый технический результат, на достижение которого направлено данное изобретение, а именно предложен способ диагностики онкологического заболевания у животных, который обеспечивает достоверную диагностику онкологического заболевания, в том числе на ранней стадии заболевания. Отличительной чертой способа является то, что измерение спектра интенсивности рассеянного лазерного излучения проводится однократно, при температуре 10-50°С после нагрева до 70-90°С и постепенного охлаждения до 10-50°С. Заявляемый способ диагностики онкологического заболевания имеет также еще одно принципиальные отличие от известных способов диагностики, в которых проводят абсолютное измерение каких-либо параметров образца, например процент частиц определенного размера, в то время как в заявляемом способе диагностическим критерием служит численное отношение интенсивности рассеянного лазерного излучения на частотах 200 Гц и 400 Гц, что обусловлено отличием формы спектра интенсивности рассеянного лазерного излучения при спектроскопии сыворотки животных, больных онкологическим заболеванием, и здоровых животных.Thus, the claimed method for the diagnosis of cancer can detect changes in the state of blood serum, while ensuring high accuracy and information content. Thus, the desired technical result is achieved, the invention is aimed at, namely, a method for diagnosing cancer in animals is proposed, which provides reliable diagnosis of cancer, including at an early stage of the disease. A distinctive feature of the method is that the measurement of the intensity spectrum of the scattered laser radiation is carried out once, at a temperature of 10-50 ° C after heating to 70-90 ° C and gradual cooling to 10-50 ° C. The inventive method for the diagnosis of cancer also has one more fundamental difference from the known diagnostic methods, in which an absolute measurement of any parameters of the sample is carried out, for example, the percentage of particles of a certain size, while in the inventive method, the numerical ratio of the intensity of the scattered laser radiation frequencies of 200 Hz and 400 Hz, which is due to the difference in the shape of the spectrum of the intensity of the scattered laser radiation during spectroscopy of the serum of the abdomen cancer patients, and healthy animals.

Промышленная применимостьIndustrial applicability

Изобретение относится к ветеринарии, а именно к онкологии, и может быть использовано для диагностики онкологических заболеваний у животных, в частности для диагностики ранней стадии онкологических заболеваний у собак и кошек, и выявления развития рецидивов в послеоперационный период.The invention relates to veterinary medicine, namely to oncology, and can be used for the diagnosis of cancer in animals, in particular for the diagnosis of an early stage of cancer in dogs and cats, and to identify the development of relapses in the postoperative period.

Способ достаточно прост, доступен, экономичен, так как не требует больших временных и финансовых затрат. С помощью данного способа можно выделить группы животных, нуждающихся в углубленном инструментальном исследовании с целью обнаружения опухолевого очага.The method is quite simple, affordable, economical, as it does not require large time and financial costs. Using this method, we can distinguish groups of animals that need in-depth instrumental research in order to detect a tumor focus.

Источники информацииInformation sources

1. Патент РФ №2108577, Кл. G01N 33/49, G01N 33/52, Публ. 2003.12.201. RF patent No. 2108577, Cl. G01N 33/49, G01N 33/52, Publ. 2003.12.20

2. Патент РФ №2042133, Кл. G01N 33/48, Публ. 1995.08.202. RF patent No. 2042133, Cl. G01N 33/48, Publ. 1995.08.20

3. Патент РФ №2105306, Кл. G01N 33/48, Публ. 1998.02.203. RF patent No. 2105306, Cl. G01N 33/48, Publ. 1998.02.20

Claims (1)

Способ диагностики онкологического заболевания у животных, включающий проведение спектроскопии лазерного рассеяния сыворотки крови с определением отношения интенсивности спектра рассеянного излучения на частотах 200 Гц и 400 Гц, после преобразования Фурье исходного сигнала, получают спектр интенсивности светорассеяния образца нативной сыворотки крови при 10-50°С, после ее нагрева в буферном растворе до 70-90°С и последующего охлаждения, при развитии у животного онкологического заболевания отношение интенсивности рассеянного излучения на частоте 200 Гц к интенсивности сигнала на частоте 400 Гц меньше величины - 1,65, у животных не больных онкологическим заболеванием отношение интенсивности рассеянного излучения на частоте 200 Гц к интенсивности сигнала на частоте 400 Гц превышает величину 1,8, если отношение интенсивности рассеянного лазерного излучения на частоте 200 Гц к интенсивности сигнала на частоте 400 Гц лежит в пределах от 1,65 до 1,8, то диагностируют риск заболевания животного онкологическим заболеванием. A method for diagnosing an oncological disease in animals, including laser spectroscopy of blood serum with determining the ratio of the intensity of the spectrum of scattered radiation at frequencies of 200 Hz and 400 Hz, after the Fourier transform of the original signal, a light scattering spectrum of a sample of native blood serum is obtained at 10-50 ° C, after it is heated in a buffer solution to 70-90 ° C and subsequent cooling, when an animal develops an oncological disease, the ratio of the intensity of the scattered radiation to at a frequency of 200 Hz, the signal intensity at a frequency of 400 Hz is less than 1.65, in animals not suffering from cancer, the ratio of the intensity of scattered radiation at a frequency of 200 Hz to the signal intensity at a frequency of 400 Hz exceeds 1.8 if the ratio of the intensity of scattered laser radiation at a frequency of 200 Hz to a signal intensity at a frequency of 400 Hz is in the range from 1.65 to 1.8, then the risk of cancer of the animal is diagnosed.
RU2010115004/10A 2010-04-15 2010-04-15 Method of diagnostics of cancer in cats and dogs RU2480748C2 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2010115004/10A RU2480748C2 (en) 2010-04-15 2010-04-15 Method of diagnostics of cancer in cats and dogs

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2010115004/10A RU2480748C2 (en) 2010-04-15 2010-04-15 Method of diagnostics of cancer in cats and dogs

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2010115004A RU2010115004A (en) 2011-10-20
RU2480748C2 true RU2480748C2 (en) 2013-04-27

Family

ID=44998909

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2010115004/10A RU2480748C2 (en) 2010-04-15 2010-04-15 Method of diagnostics of cancer in cats and dogs

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2480748C2 (en)

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU94029177A (en) * 1994-08-03 1996-08-20 Е.И. Суслов Method of spectroscopic oncological sickness diagnosis
RU2219549C1 (en) * 2002-09-30 2003-12-20 Алексеев Сергей Григорьевич Method and device for diagnosing the cases of oncological diseases
RU2276786C1 (en) * 2005-01-24 2006-05-20 Сергей Григорьевич Алексеев Method and device for diagnosing oncologic diseases
RU2306868C1 (en) * 2006-07-10 2007-09-27 ФГУ "Московский научно-исследовательский онкологический институт им. П.А. Герцена Росздрава" Cancer diagnostic method

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU94029177A (en) * 1994-08-03 1996-08-20 Е.И. Суслов Method of spectroscopic oncological sickness diagnosis
RU2219549C1 (en) * 2002-09-30 2003-12-20 Алексеев Сергей Григорьевич Method and device for diagnosing the cases of oncological diseases
RU2276786C1 (en) * 2005-01-24 2006-05-20 Сергей Григорьевич Алексеев Method and device for diagnosing oncologic diseases
RU2306868C1 (en) * 2006-07-10 2007-09-27 ФГУ "Московский научно-исследовательский онкологический институт им. П.А. Герцена Росздрава" Cancer diagnostic method

Also Published As

Publication number Publication date
RU2010115004A (en) 2011-10-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
González-Solís et al. Cervical cancer detection based on serum sample Raman spectroscopy
RU2132635C1 (en) Method and device for diagnosing oncological diseases
Carvalho et al. Raman micro-spectroscopy for rapid screening of oral squamous cell carcinoma
EP1978867B1 (en) Methods for characterizing tissues
US20110028808A1 (en) Method and apparatus for examination of cancer, systemic lupus erythematosus (sle), or antiphospholipid antibody syndrome using near-infrared light
Zheng et al. Pursuing shell-isolated nanoparticle-enhanced Raman spectroscopy (SHINERS) for concomitant detection of breast lesions and microcalcifications
WO2018157831A1 (en) Lung cancer monitoring kit and application method thereof
CN111133312A (en) Methods for diagnosing and treating lung cancer
Sato et al. Raman spectroscopy and its use for live cell and tissue analysis
Neto et al. Micro-Raman spectroscopic study of thyroid tissues
Raypah et al. Integration of near-infrared spectroscopy and aquaphotomics for discrimination of cultured cancerous cells using phenol red
RU2480748C2 (en) Method of diagnostics of cancer in cats and dogs
Zhang et al. Application and Progress of Raman Spectroscopy in Male Reproductive System
US9709486B2 (en) Method of dynamic spectroscopy under physiological conditions
Waisberg et al. Biliary carcinoembryonic antigen levels in diagnosis of occult hepatic metastases from colorectal carcinoma
JP2001289861A (en) Method for evaluating cancer by using tumor marker
Ruxue New Technologies and Devices for Cancer Diagnosis
RU2232391C2 (en) Method for differential diagnostics of malignant neoplasms and somatic nonmalignant diseases
WO2008123790A1 (en) Oncological disease diagnosis method
Harjan et al. International Journal of Advanced Multidisciplinary Research and Studies
Alfimov et al. Markers of lithogenic activity in kidney stone disease
BR102021026038A2 (en) USE OF MACHINE LEARNING ALGORITHMS FOR THE DETECTION AND SCREENING OF BREAST CANCER
RU2246898C2 (en) Method for diagnosing the cases of prostate diseases
RU2085946C1 (en) Method of diagnosing oncologic disease
Wang et al. A feasibility study of early detection of lung cancer by saliva test using Surface Enhanced Raman scattering

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20150416