RU2477134C1 - Ингибитор репродукции вич-1 и вируса гриппа а - Google Patents
Ингибитор репродукции вич-1 и вируса гриппа а Download PDFInfo
- Publication number
- RU2477134C1 RU2477134C1 RU2012110841/15A RU2012110841A RU2477134C1 RU 2477134 C1 RU2477134 C1 RU 2477134C1 RU 2012110841/15 A RU2012110841/15 A RU 2012110841/15A RU 2012110841 A RU2012110841 A RU 2012110841A RU 2477134 C1 RU2477134 C1 RU 2477134C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- hiv
- influenza
- virus
- antiviral activity
- antiviral
- Prior art date
Links
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области фармацевтики и медицины и касается ингибитора репродукции ВИЧ-1 и вируса гриппа А, представляющего собой 2-гидроксимино-3-оксолуп-20(29)-ен-28-овую кислоту и обладающего высокой противовирусной активностью. 1 табл., 2 пр.
Description
Изобретение относится к области фармакологии и касается средств с противовирусной активностью в отношении вируса иммунодефицита человека типа 1 (ВИЧ-1) и вируса гриппа A (H7N1).
Перспективной основой для получения разнообразных биологически активных производных являются природные пентациклические тритерпеноиды бетулин и бетулиновая кислота.
Бетулиновая кислота проявляет ингибирующую активность в отношении репродукции ВИЧ-1 (ЕС50 1,4 мкМ) [Т.Fujioka, Y.Kashiwada, R.E.Kilkuskie, L.M.Cosentino, L.M.Ballas, J.B.Jiang, W.P.Janzen, I.-S.Chen, K.-H.Lee. Anti-AIDs agents. II. Betulinic acid and platanic acid as anti-HIV principles from Syzigium claviflorum, and the anti-HIV activity of structurally related triterpenoids // Journal of Natural Products. - 1994. - №57. - С.243-247], но практически не активна (ЕС50>219,0 мкМ) в отношении вируса гриппа A [N.I.Pavlova, O.V.Savinova, S.N.Nikolaeva, E.I.Boreko, O.B.Flekhter. Antiviral activity of betulin, betulinic and betulonic acids against some enveloped and non-enveloped viruses // Fitoterapia. - 2003. - V.74. - P.489-492].
Обнаружение анти-ВИЧ свойств у бетулиновой кислоты стимулировало работы по ее дальнейшей химической модификации.
Противовирусная активность наиболее часто обнаруживается у азотсодержащих тритерпеновых производных лупанового типа - соответствующих амидов, пептидов, гидразидов, гидразонов и оксимов.
Так, высокой (ЕС50 2,17 мкМ) противовирусной активностью в отношении вируса гриппа А обладает 3-оксим бетулоновой кислоты [О.Б.Флехтер, Е.И.Бореко, Л.Р.Нигматуллина, Н.И.Павлова, И.И.Медведева, С.Н.Николаева, Е.В.Третьякова, O.B.Савинова, Л.А.Балтина, Л.Т.Карачурина, Ф.З.Галин, Ф.З.Зарудий, Г.А.Толстиков. Синтез и фармакологическая активность ацилированных оксимов бетулоновой кислоты и 28-оксоаллобетулона // Химико-фармацевтический журнал. - 2004. - Т.38. - №3. - С.31-34], сведения об антиретровирусной активности которого отсутствуют.
Азотсодержащие тритерпеновые производные представляют интерес и в качестве синтетической основы для новых фармакологически активных соединений.
Так, неактивный в отношении ВИЧ-1 диоксим 3-оксобетулин-28-аля является ключевым интермедиатом в синтезе анти-ВИЧ активных агентов [I.-C.Sun, H.-K.Wang, Y.Kashiwada, J.-K.Shen, L.M.Cosentino, C.-H.Chen, L.-M.Yang, K.-H.Lee. Synthesis and structure-activity relationships of betulin derivatives as anti-HIV agents // Journal of Medicinal Chemistry. - 1998. - V.41. - №23. - P.4648-4657].
Одна из основных проблем антиретровирусной терапии - высокая стоимость специфичных противовирусных препаратов, которая значительно возрастает в условиях развития ВИЧ-ассоциированных заболеваний. В связи с этим актуальной является разработка препаратов с возможностью одновременного антивирусного действия в отношении нескольких вирусов, включая ВИЧ-1.
Наиболее близким аналогом (прототипом) настоящего изобретения является 28-оксим бетулиналя [О.Б.Флехтер, О.Ю.Ашавина, Е.И.Бореко, Л.Т.Карачурина, Н.И.Павлова, Н.Н.Кабальнова, О.В.Савинова, Ф.З.Галин, С.Н.Николаева, Ф.С.Зарудий, Л.А.Балтина, Г.А.Толстиков. Синтез 3-O-ацетилбетулинового и бетулонового альдегидов по Сверну и фармакологическая активность их оксимов // Химико-фармацевтический журнал. - 2002. - Т.36. - №6. - С.21-24]. Однако известно о противовирусном действии 28-оксима бетулиналя только в отношении вируса гриппа А (ЕС50 0,43 мкМ и МПК/ЕС50 31,3).
Задачей изобретения является разработка средства с противовирусной активностью в отношении нескольких вирусов для расширения арсенала противовирусных средств.
Для решения задачи предлагается ингибитор репродукции ВИЧ-1 и вируса гриппа А, представляющий собой 2-гидроксимино-3-оксолуп-20(29)-ен-28-овую кислоту.
2-Гидроксимино-3-оксолуп-20(29)-ен-28-овая кислота известна в качестве промежуточного соединения для получения 1-циано-2,3-секолуп-20(29)-ен-3-аль-28-овой кислоты, проявляющей противовирусную активность в отношении вирусов герпеса простого I типа и гриппа А [патент РФ №2410390. 2,3-Секопроизводные бетулиновой кислоты / Толмачева И.А., Гришко В.В., Бореко Е.И., Савинова О.В., Павлова Н.И. Опубл. 27.01.2011]. Сведения о противовирусной активности соединения, заявляемого в качестве ингибитора, отсутствуют.
Пример 1. Методика исследования противовирусной активности в отношении ВИЧ-1
Испытания проводили на перевиваемой суспензионной Т-лимфо-бластоидной линии клеток человека МТ-4 (плотность 4-5×105 клеток/мл) на питательной среде RPMI-1640 Sigma-Aldrich (США). В качестве инфекционного агента использовали высокорепликативный изолят ВИЧ-1zmb с титром 6,0 lg ТЦД50. Определение наличия анти-ВИЧ активности проводили с помощью формазанового теста в МТТ-варианте. Исходный раствор препарата (10,3 мкМ) готовили ex tempore путем растворения в 10% этаноле. Базовый раствор титровали в лунках 96-луночной панели, после чего в лунки последовательно вносили клетки и вирус (терапевтическая схема). Конечный объем реакционной смеси составлял 200 мкл/лунку. Контролями служили необработанные препаратом ВИЧ-инфицированные клетки (контроль вируса) и необработанные препаратом неинфицированные клетки (контроль клеток). Панели инкубировали в атмосфере, содержащей 5% CO2 при 37°С. Учет результатов осуществляли через 72 ч. В качестве позитивного контроля на анти-ВИЧ активность использовали коммерческий препарат азидотимидина, который титровали параллельно с исследуемым образцом.
Методика базируется на определении интенсивности образования формазанового продукта при внесении в клеточную культуру реагента МТТ (3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолия бромид). После 3-часовой экспозиции при 37°С надосадок удаляли, а образовавшийся формазановый продукт растворяли в диметилсульфоксиде, затем проводили измерение интенсивности развившегося окрашивания на спектрофотометре Plate Reader DAS A3 (Италия) при длине волны 550/630 нм. Результаты теста учитывали путем определения индекса защиты клеток, который в положительных случаях должен быть не ниже 50%. Вычисляли ЕС50 препарата и соотношение МПК/ЕС50, характеризующее широту спектра его нетоксических эффективных концентраций.
Пример 2. Исследование противовирусной активности в отношении вируса гриппа А
При проведении испытаний использовали культуру клеток первичных фибробластов эмбрионов кур (ФЭК), а также вирус гриппа A/FPV/Rostock/34 (H7N1). Исследования проводили методом редукции количества бляшек под агаровым покрытием. Монослойную культуру ФЭК, выращенную во флаконах, отмывали от ростовой среды, инфицировали различными разведениями вируса в пределах 0,01-0,0001 БОЕ/клетка путем нанесения на клетки вируссодержащей суспензии в объеме 0,1 мл на 1 ч при 37°С. Затем жидкость удаляли и клетки покрывали расплавом питательной среды на основе концентрата среды 199 с добавлением 1% бактагара и 0,005% нейтрального красного (все реактивы - Sigma) и различных концентраций исследуемого препарата. После застывания покрытия флаконы помещали в термостат на 36 ч и затем подсчитывали количество бляшек, видимых благодаря присутствию в покрытии витального красителя.
Титр вируса в присутствии исследуемого вещества и в контроле рассчитывали в lg БОЕ (бляшкообразующих единиц) в 1 мл. Первичным критерием противовирусного действия считали наличие различий в сравнении с контролем вируса. Обработку полученных данных (вычисление титра вируса и средней ошибки средней арифметической, Sx) выполняли методами статистики для малых значений n в несгруппированном ряду данных. Концентрацию вещества, подавляющую размножение вируса на 50% (среднеэффективная концентрация, ЕС50), определяли на основе пробит-анализа и взвешенной линейной регрессии. Вычисляли также отношение максимальной переносимой концентрации (МПК) вещества к ЕС50. МПК определяли как максимальную концентрацию вещества, не оказывающую влияния на морфологию неокрашенной культуры клеток и нарушения поглощения ей витального красителя (нейтрального красного).
В результате исследований установлено, что 2-гидроксимино-3-оксолуп-20(29)-ен-28-овая кислота обладает способностью подавлять репродукцию ВИЧ-1 и вируса гриппа А в диапазоне концентраций 3,1-0,06 и 824,7-12,9 мкМ соответственно (см. таблицу).
| Противовирусные свойства 2-гидроксимино-3-оксолуп-20(29)-ен-28-овой кислоты | ||||
| МПК МТ-4/RD, мкМ | Противовирусные свойства | |||
| ВИЧ-1 | вирус гриппа А | |||
| ЕС50, мкМ | отношение МПК/ЕС50 | ЕС50, мкМ | отношение МПК/ЕС50 | |
| 3,1/824,7 | 0,06 | 51,5 | 12,9 | 64,1 |
Установлено, что в отличие от прототипа с избирательным действием в отношении одного из вирусов, 2-гидроксимино-3-оксолуп-20(29)-ен-28-овая кислота сочетает выраженное антиретровирусное (анти-ВИЧ) действие с противовирусной активностью в отношении вируса гриппа А, что позволяет рассматривать данное соединение в качестве перспективного ингибитора репродукции вирусов.
Claims (1)
- Ингибитор репродукции ВИЧ-1 и вируса гриппа А, представляющий собой 2-гидроксимино-3-оксолуп-20(29)-ен-28-овую кислоту.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012110841/15A RU2477134C1 (ru) | 2012-03-21 | 2012-03-21 | Ингибитор репродукции вич-1 и вируса гриппа а |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012110841/15A RU2477134C1 (ru) | 2012-03-21 | 2012-03-21 | Ингибитор репродукции вич-1 и вируса гриппа а |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2477134C1 true RU2477134C1 (ru) | 2013-03-10 |
Family
ID=49124163
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2012110841/15A RU2477134C1 (ru) | 2012-03-21 | 2012-03-21 | Ингибитор репродукции вич-1 и вируса гриппа а |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2477134C1 (ru) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2211843C1 (ru) * | 2002-01-25 | 2003-09-10 | Новосибирский институт органической химии им. Н.Н.Ворожцова СО РАН | N'-{n-[3-оксо-20(29)-лупен-28-оил]-9-аминононаноил}-3-амино-3-фенилпропио новая кислота, обладающая иммуностимулирующей и противовирусной активностью |
| RU2317996C1 (ru) * | 2006-10-30 | 2008-02-27 | Институт нефтехимии и катализа РАН | N'-{n-[3-оксо-лупан-28-оил]-9-аминононаноил}-3-амино-3-фенил-пропионовая кислота и ее соли как противовирусные и иммуностимулирующие агенты |
| RU2353623C1 (ru) * | 2007-09-17 | 2009-04-27 | Новосибирский институт органической химии им. Н.Н. Ворожцова СО РАН (НИОХ СО РАН) | Корректор цитостатической полихимиотерапии |
| RU2410390C1 (ru) * | 2009-08-03 | 2011-01-27 | Учреждение Российской академии наук Институт технической химии Уральского отделения РАН | 2,3-секо-производные бетулоновой кислоты |
-
2012
- 2012-03-21 RU RU2012110841/15A patent/RU2477134C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2211843C1 (ru) * | 2002-01-25 | 2003-09-10 | Новосибирский институт органической химии им. Н.Н.Ворожцова СО РАН | N'-{n-[3-оксо-20(29)-лупен-28-оил]-9-аминононаноил}-3-амино-3-фенилпропио новая кислота, обладающая иммуностимулирующей и противовирусной активностью |
| RU2317996C1 (ru) * | 2006-10-30 | 2008-02-27 | Институт нефтехимии и катализа РАН | N'-{n-[3-оксо-лупан-28-оил]-9-аминононаноил}-3-амино-3-фенил-пропионовая кислота и ее соли как противовирусные и иммуностимулирующие агенты |
| RU2353623C1 (ru) * | 2007-09-17 | 2009-04-27 | Новосибирский институт органической химии им. Н.Н. Ворожцова СО РАН (НИОХ СО РАН) | Корректор цитостатической полихимиотерапии |
| RU2410390C1 (ru) * | 2009-08-03 | 2011-01-27 | Учреждение Российской академии наук Институт технической химии Уральского отделения РАН | 2,3-секо-производные бетулоновой кислоты |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Soleymani et al. | Antiviral effects of saffron and its major ingredients | |
| RU2769317C2 (ru) | Способы лечения гриппа | |
| Cerchiaro et al. | Isatin-Schiff base copper (II) complexes and their influence on cellular viability | |
| Albulescu et al. | Suramin inhibits chikungunya virus replication through multiple mechanisms | |
| Mercier et al. | Galectin-1 promotes HIV-1 infectivity in macrophages through stabilization of viral adsorption | |
| DK2576586T3 (en) | C-28 AMINES OF MODIFIED C-3-BETULIN ACID DERIVATIVES AS ANTI-HUMIDITY INHIBITORS | |
| Xie et al. | Apoptotic activities of brusatol in human non-small cell lung cancer cells: Involvement of ROS-mediated mitochondrial-dependent pathway and inhibition of Nrf2-mediated antioxidant response | |
| Cagno et al. | In vitro evaluation of the antiviral properties of Shilajit and investigation of its mechanisms of action | |
| Navid et al. | Pentacyclic triterpenes in birch bark extract inhibit early step of herpes simplex virus type 1 replication | |
| Baltina et al. | Glycyrrhizic acid derivatives as Dengue virus inhibitors | |
| Göktaş et al. | Microwave assisted synthesis and anti-influenza virus activity of 1-adamantyl substituted N-(1-thia-4-azaspiro [4.5] decan-4-yl) carboxamide derivatives | |
| EP2186795B1 (en) | (1s, 2s, 3s, 4r)-3-ý(1s)-1-acetylamino-2-ethyl-butyl¨-4-guanidino-2- hydroxyl-cyclopentyl-1-carboxylic acid hydrates and pharmaceutical uses thereof | |
| Liu et al. | Synthesis, characterization and antiviral activity against influenza virus of a series of novel manganese-substituted rare earth borotungstates heteropolyoxometalates | |
| JP7031002B2 (ja) | ピリジノイミダゾール系化合物の結晶型、塩型及びその製造方法 | |
| Meira et al. | Antiparasitic evaluation of betulinic acid derivatives reveals effective and selective anti-Trypanosoma cruzi inhibitors | |
| Perković et al. | Novel NSAID 1-acyl-4-cycloalkyl/arylsemicarbazides and 1-acyl-5-benzyloxy/hydroxy carbamoylcarbazides as potential anticancer agents and antioxidants | |
| Zhang et al. | A novel danshensu-tetramethylpyrazine conjugate DT-010 provides cardioprotection through the PGC-1α/Nrf2/HO-1 pathway | |
| Yang et al. | The neuroprotective effect of praeruptorin C against NMDA-induced apoptosis through down-regulating of GluN2B-containing NMDA receptors | |
| WO2019055245A1 (en) | IMPROVED METHOD AND COMPOSITION FOR THE TREATMENT OF TRITERPENE SENSITIVE CONDITIONS, DISEASES OR DISORDERS | |
| Ota et al. | Metformin prevents methylglyoxal-induced apoptosis of mouse Schwann cells | |
| JP2010505871A (ja) | 抗ウイルス性コロイド状銀組成物 | |
| RU2470003C1 (ru) | Лупановые а-секотритерпеноиды, проявляющие противовирусную активность | |
| RU2477134C1 (ru) | Ингибитор репродукции вич-1 и вируса гриппа а | |
| WO2010044924A1 (en) | Novel antiviral agents for enveloped viruses | |
| Uchide et al. | Inhibition of influenza-virus-induced apoptosis in chorion cells of human fetal membranes by nordihydroguaiaretic Acid |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20150322 |