RU2466391C1 - Diagnostic technique for recurrent hemorrhage - Google Patents
Diagnostic technique for recurrent hemorrhage Download PDFInfo
- Publication number
- RU2466391C1 RU2466391C1 RU2011111590/15A RU2011111590A RU2466391C1 RU 2466391 C1 RU2466391 C1 RU 2466391C1 RU 2011111590/15 A RU2011111590/15 A RU 2011111590/15A RU 2011111590 A RU2011111590 A RU 2011111590A RU 2466391 C1 RU2466391 C1 RU 2466391C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- recurrent
- hemorrhage
- cells
- expression
- diagnostic technique
- Prior art date
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к судебной медицине, в частности к судебно-медицинской экспертизе.The invention relates to forensic medicine, in particular to a forensic medical examination.
Известен способ диагностики рецидивирующей кровопотери путем обнаружения гемосидерина в альвеолярных макрофагах при легочном кровотечении и клетках Купфера при ранении печени. У человека гемосидерин в макрофагах появляется через 50-72 часа после кровоизлияния (Betz P, Eisenmenger W. // Int J Legal Med. - 1996. - Vol.108. - №5. - P.262-264), а через 8 дней с момента кровопотери гемосидерин составляет примерно 20% изученных полей зрения (Sherman JM, Winnie G, Thomassen MJ, Abdul-Karim FW, Boat TF. // Chest. - 1984. - Vol.86. - №3. - P.409-411). При наличии признаков свежего кровотечения гемосидерин является маркером повторной кровопотери.A known method for the diagnosis of recurrent hemorrhage by detecting hemosiderin in alveolar macrophages with pulmonary hemorrhage and Kupffer cells with liver injury. In humans, hemosiderin in macrophages appears 50-72 hours after hemorrhage (Betz P, Eisenmenger W. // Int J Legal Med. - 1996. - Vol.108. - No. 5. - P.262-264), and after 8 days after hemorrhage, hemosiderin accounts for approximately 20% of the studied visual fields (Sherman JM, Winnie G, Thomassen MJ, Abdul-Karim FW, Boat TF. // Chest. - 1984. - Vol.86. - No. 3. - P.409 -411). If there are signs of fresh bleeding, hemosiderin is a marker of repeated hemorrhage.
Однако у данного метода есть ряд недостатков:However, this method has several disadvantages:
1. Количество гемосидерина зависит не только от давности, но и от выраженности кровопотери, а также от индивидуальной макрофагальной активности (Sherman JM et all, см выше).1. The amount of hemosiderin depends not only on prescription, but also on the severity of blood loss, as well as on individual macrophage activity (Sherman JM et all, see above).
2. Гемосидерофаги могут быть обнаружены и при другой судебно-медицинской патологии, например, при наркотическом отравлении (Rajs J, Härm Т, Ormstad К. // Virchows Arch A Pathol Anat Histopathol. - 1984. - Vol.402. - №4. - P.405-414). Выраженность гемосидероза при такой патологии зависит от длительности употребления наркотика, одновременного использования алкогольных напитков или салицилатов, наличия сердечно-легочных заболеваний и возраста пострадавшего (Rajs J, Härm T, Ormstad К., см выше).2. Hemosiderophages can also be detected in other forensic pathologies, for example, with drug poisoning (Rajs J, Härm T, Ormstad K. // Virchows Arch A Pathol Anat Histopathol. - 1984. - Vol. 422. - No. 4. - P.405-414). The severity of hemosiderosis with this pathology depends on the duration of drug use, the simultaneous use of alcoholic beverages or salicylates, the presence of cardiopulmonary diseases and the age of the victim (Rajs J, Härm T, Ormstad K., see above).
3. Данный способ диагностики рецидивирующей кровопотери применим только для случаев с кровоизлияниями в легкие и печень. Время появления и количество гемосидерина в других органах и тканях у человека не известны. Существующие работы, отражающие эти вопросы, носят экспериментальный характер и связаны преимущественно с лабораторными животными.3. This method for the diagnosis of recurrent hemorrhage is applicable only for cases with hemorrhage in the lungs and liver. The appearance and amount of hemosiderin in other organs and tissues in humans is not known. Existing works reflecting these issues are experimental in nature and are mainly associated with laboratory animals.
Задачей изобретения является повышение точности способа и расширение возможности диагностики рецидивирующей кровопотери.The objective of the invention is to improve the accuracy of the method and expand the diagnostic capabilities of recurrent blood loss.
Поставленная задача решается способом, который заключается в том, что при кровопотере определяют признаки миоцитолиза сердечной мышцы, зернистого и глыбчатого распада кардиомиоцитов, а также степень экспрессии маркера апоптоза р53, и при величине кардиомиоцитолиза в 24,7% клеток и менее, зернисто-глыбчатого распада кардиомиоцитов в 46,8% клеток и более, экспрессии р53 в 20,0% клеток и более, делают вывод о рецидивирующей кровопотере.The problem is solved by the method, which consists in the fact that signs of myocytolysis of the heart muscle, granular and block disintegration of cardiomyocytes, as well as the degree of expression of the ap53 apoptosis marker p53, and with a value of cardiomyocytolysis of 24.7% of cells or less, granular block decay are determined during blood loss. cardiomyocytes in 46.8% of cells and more, p53 expression in 20.0% of cells and more, conclude that recurrent blood loss.
Способ осуществляют гистологическим исследованием тканей (Саркисов Д.С., Перов Ю.Л. Микроскопическая техника. М. - Медицина. - 1996 г. - С.4-50, 339-445):The method is carried out by histological examination of tissues (Sarkisov D.S., Perov Yu.L. Microscopic technique. M. - Medicine. - 1996. - S.4-50, 339-445):
1. Из области миокарда правого и левого желудочков вырезают по 4 кусочка размерами 1,0×1,0×0,5 см каждый.1. From the myocardial region of the right and left ventricles, 4 pieces of 1.0 × 1.0 × 0.5 cm each are cut.
2. Кусочки фиксируют в 10% нейтральном забуференном формалине в течение 24 часов.2. Pieces are fixed in 10% neutral buffered formalin for 24 hours.
3. Материал промывают в проточной воде в течение 30 минут, а затем подвергают обезвоживанию и заливке в парафин по следующей схеме: спирт 60,0% - 2 часа, спирт 70,0% - 2 часа, спирт 96,0% - 2 часа, спирт 96,0% - 2 часа, спирт + ксилол (1:1) - 2 часа, ксилол + парафин (1:1) - 2 часа, парафин I 56° - 2 часа, парафин II 56° - 1 час.3. The material is washed in running water for 30 minutes, and then subjected to dehydration and pouring in paraffin according to the following scheme: alcohol 60.0% - 2 hours, alcohol 70.0% - 2 hours, alcohol 96.0% - 2 hours alcohol 96.0% - 2 hours, alcohol + xylene (1: 1) - 2 hours, xylene + paraffin (1: 1) - 2 hours, paraffin I 56 ° - 2 hours, paraffin II 56 ° - 1 hour.
4. Кусочки заливают в парафиновые блоки.4. Pieces are poured into paraffin blocks.
5. На ротационном микротоме изготавливают гистологические срезы толщиной 4-6 микрон.5. On a rotary microtome, histological sections 4-6 microns thick are made.
6. Срезы подвергают депарафинизации и антигенной демаскировке в 0,1М цитратном буфере рН 6,0 в течение 30 минут (Руководство по иммуногистохимической диагностике опухолей человека / Под ред. С.В.Петрова, Н.Т.Райхлина. - Казань: Титул, 2004).6. Sections are subjected to dewaxing and antigenic unmasking in 0.1 M citrate buffer pH 6.0 for 30 minutes (Guidelines for the immunohistochemical diagnosis of human tumors / Ed. By S. V. Petrov, N. T. Reikhlina. - Kazan: Title, 2004).
7. Осуществляют обработку срезов первичным антителом Monoclonal Rb а Hu р53 Clone 318-6-11 (фирма Dako) (Петров С.В., Райхлин Н.Т., см. выше).7. Carry out the processing of sections with the primary antibody Monoclonal Rb and Hu p53 Clone 318-6-11 (Dako company) (Petrov SV, Raykhlin N.T., see above).
8. Срезы обрабатывают реагентами системы визуализации EnVision+System-HRP (DAY), code K4010 (фирма Dako) (Петров С.В., Райхлин Н.Т., см. выше).8. Sections are treated with the reagents of the visualization system EnVision + System-HRP (DAY), code K4010 (Dako company) (Petrov SV, Raykhlin N.T., see above).
9. Для изучения миокарда используют специальные поляризационные фильтры, один из которых (поляризатор) помещается под конденсор микроскопа, а другой фильтр (анализатор) размещается над объективом. Изучают эффект анизотропии, при котором анизотропные диски (А-диски) характеризуются свечением, чередуясь с темными изотропными дисками (I-дисками) (Капустин А.В. Фазово-контрастное и поляризационно-микроскопическое исследования миокарда в судебно-медицинской практике. // Судебно-медицинская экспертиза; - 1992. -.М. 3-с. 5-10).9. For the study of the myocardium, special polarizing filters are used, one of which (a polarizer) is placed under the microscope’s condenser, and the other filter (analyzer) is placed above the lens. They study the effect of anisotropy, in which anisotropic discs (A-discs) are characterized by glow, alternating with dark isotropic discs (I-discs) (Kapustin A.V. Phase-contrast and polarization-microscopic studies of the myocardium in forensic practice. // Forensic - medical examination; - 1992.-M. 3-s. 5-10).
10. Полученные данные обрабатывают статистически по методу Стъюдента-Фишера с 95%-ным уровнем статистической достоверности с определением средней арифметической М, средней ошибки средней арифметической m, средней ошибки относительных величин mp и коэффициента достоверности разности t. Также статистическую обработку производят с использованием таблиц сопряженности, критерия χ2 и метода множественных сравнений с поправкой Бонферрони (Гланц С. Медико-биологическая статистика. Пер. с англ. - М., Практика, 1998. - 459 с.).10. The data obtained are processed statistically by the Student-Fisher method with a 95% level of statistical reliability with the determination of the arithmetic mean M, the average error of the arithmetic mean m, the average error of the relative values of m p and the reliability coefficient of the difference t. Statistical processing is also carried out using contingency tables, χ 2 criteria and the Bonferroni correction multiple comparison method (Glants S. Biomedical statistics. Transl. From English. - M., Praktika, 1998. - 459 p.).
С помощью данных методов изучались ткани миокарда, полученные при судебно-медицинском и патологоанатомическом исследовании 387 трупов (256 лиц мужского пола и 131 лица женского пола в возрасте от 23 до 48 лет, погибших от острой кровопотери из магистральных и крупных кровеносных сосудов).Using these methods, myocardial tissue obtained in a forensic and pathological study of 387 corpses (256 males and 131 females aged 23 to 48 years old who died from acute blood loss from major and large blood vessels) was studied.
Проведенный статистический анализ установил, что гистологические маркеры ишемии и апоптоза миокарда можно использовать в качестве критериев диагностики острой рецидивирующей кровопотери.A statistical analysis showed that histological markers of myocardial ischemia and apoptosis can be used as criteria for the diagnosis of acute recurrent blood loss.
Способ диагностики рецидивирующей кровопотери апробирован на кафедре судебной медицины Первого Московского Государственного медицинского университета им. И.М.Сеченова. Благодаря данному способу удалось разграничить случаи кровопотери без признаков рецидива и случаи рецидивирующей кровопотери.A method for the diagnosis of recurrent hemorrhage was tested at the Department of Forensic Medicine of the First Moscow State Medical University. I.M.Sechenova. Thanks to this method, it was possible to distinguish between cases of blood loss without signs of relapse and cases of recurrent blood loss.
ПримерExample
В одном из клинических наблюдений согласно посмертному эпикризу больной 54 лет по поводу рака нижней трети пищевода была проведена операция Гэрлока со спленэктомией и резекцией поджелудочной железы. Через 18 дней после операции состояние больной резко ухудшилось, отмечено прогрессивное снижение артериального давления и остановка сердца.In one of the clinical observations, according to the post-mortem epicrisis, a 54-year-old patient for cancer of the lower third of the esophagus underwent a Garlock operation with splenectomy and pancreatic resection. 18 days after the operation, the patient's condition deteriorated sharply, a progressive decrease in blood pressure and cardiac arrest was noted.
В заключительном клиническом диагнозе причиной смерти больной фигурировало внутрижелудочное кровотечение вследствие несостоятельности швов анастомоза.In the final clinical diagnosis, the patient was diagnosed with intragastric bleeding due to the failure of the anastomotic sutures.
На вскрытии в области пищеводно-желудочного анастомоза определялся дефект 1,0 см в диаметре с несостоятельностью швов анастомоза. На наружной оболочке анастомоза в области дефекта было выявлено около 750 граммов сгустков крови. В культе желудка и тонкой кишке определялось около 400 мл жидкой крови.An autopsy in the esophageal-gastric anastomosis revealed a defect of 1.0 cm in diameter with an anastomotic suture failure. About 750 grams of blood clots were detected on the outer shell of the anastomosis in the area of the defect. About 400 ml of liquid blood was determined in the cult of the stomach and small intestine.
При анализе медицинской документации выяснилось, что за 2 часа до резкого ухудшения состояния больной была выполнена эзофагогастродуоденоскопия для плановой проверки состояния анастомоза. Через 2 часа после исследования у больной развились признаки внутрижелудочного кровотечения, дважды повторно проводилась эзофагогастродуоденоскопия с целью остановки кровотечения.When analyzing medical documentation, it turned out that 2 hours before a sharp deterioration in the patient's condition, esophagogastroduodenoscopy was performed to routinely check the condition of the anastomosis. 2 hours after the study, the patient developed signs of intragastric bleeding, esophagogastroduodenoscopy was repeated twice to stop the bleeding.
При гистологическом и иммуногистохимическом исследовании в миокарде правого и левого желудочков было выявлено большое количество кардиомиоцитов с признаками апоптоза и зернисто-глыбчатого распада (64,1%) с выраженной экспрессией маркера апоптоза р53 (в 35,0% кардиомиоцитов). Величина миоцитолиза сердечной мышцы составила 17,4%.Histological and immunohistochemical studies in the myocardium of the right and left ventricles revealed a large number of cardiomyocytes with signs of apoptosis and granular block decay (64.1%) with pronounced expression of the p53 apoptosis marker (in 35.0% of cardiomyocytes). The magnitude of myocytolysis of the heart muscle was 17.4%.
Учитывая данные, выявленные на вскрытии, записи в медицинской документации и результаты морфологического исследования, был сделан вывод, что дефект с разрывом швов анастомоза образовался благодаря травматическому воздействию тубуса эндоскопа, кровотечение из области анастомоза возникло за 2 часа до смерти больной и имело рецидивирующий характер течения. Непосредственной причиной смерти явился геморрагический шок.Taking into account the data revealed at the autopsy, the records in the medical documentation and the results of the morphological study, it was concluded that the defect with rupture of the anastomotic sutures was formed due to the traumatic effect of the endoscope tube, the bleeding from the anastomotic area occurred 2 hours before the patient's death and had a recurrent course. The immediate cause of death was hemorrhagic shock.
Таким образом, предлагаемый способ диагностики рецидивирующей кровопотери позволяет более точно диагностировать рецидивирующую кровопотерю, расширить ее возможности, более объективно оценивать механизм повреждения, роль кровотечения в танатогенезе и связь дефекта оказания медицинской помощи с непосредственной причиной смерти.Thus, the proposed method for the diagnosis of recurrent blood loss allows you to more accurately diagnose recurrent blood loss, expand its capabilities, more objectively assess the mechanism of damage, the role of bleeding in thanatogenesis and the relationship of the defect in the provision of medical care with the immediate cause of death.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2011111590/15A RU2466391C1 (en) | 2011-03-28 | 2011-03-28 | Diagnostic technique for recurrent hemorrhage |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2011111590/15A RU2466391C1 (en) | 2011-03-28 | 2011-03-28 | Diagnostic technique for recurrent hemorrhage |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2011111590A RU2011111590A (en) | 2012-10-10 |
| RU2466391C1 true RU2466391C1 (en) | 2012-11-10 |
Family
ID=47078960
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2011111590/15A RU2466391C1 (en) | 2011-03-28 | 2011-03-28 | Diagnostic technique for recurrent hemorrhage |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2466391C1 (en) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2042334C1 (en) * | 1992-02-17 | 1995-08-27 | Антон Владимирович Козлов | Method for postmortem diagnosis of acute ischemic insufficiency |
| RU2206893C1 (en) * | 2002-07-29 | 2003-06-20 | Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И.П.Павлова | Method for predicting hypertrophic cardiomyopathy |
| CN1882687A (en) * | 2003-11-21 | 2006-12-20 | 第一阿斯比奥制药株式会社 | Method of growing myocardial cells |
-
2011
- 2011-03-28 RU RU2011111590/15A patent/RU2466391C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2042334C1 (en) * | 1992-02-17 | 1995-08-27 | Антон Владимирович Козлов | Method for postmortem diagnosis of acute ischemic insufficiency |
| RU2206893C1 (en) * | 2002-07-29 | 2003-06-20 | Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И.П.Павлова | Method for predicting hypertrophic cardiomyopathy |
| CN1882687A (en) * | 2003-11-21 | 2006-12-20 | 第一阿斯比奥制药株式会社 | Method of growing myocardial cells |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| КАПУСТИН А.В. О диагностическом значении острых микроскопических изменений миокарда. Судебно-медицинская экспертиза. Научно-практический журнал, 2000, №1, т.43, с.7-11. КУЗНЕЦОВА И.А. Апоптоз кардиомиоцитов при ишемии миокарда: Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук. - СПб., 2005, с.5-14. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2011111590A (en) | 2012-10-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Inci et al. | Prospective long-term followup of patients with asymptomatic lower pole caliceal stones | |
| Hamada et al. | Morphological characteristics in peritoneum in patients with neutral peritoneal dialysis solution | |
| Jaensch | Diagnosis of avian hepatic disease | |
| Davidson et al. | Alkaline phosphatase treatment of acute kidney injury in an infant piglet model of cardiopulmonary bypass with deep hypothermic circulatory arrest | |
| Bilen et al. | Impact of percutaneous nephrolithotomy on estimated glomerular filtration rate in patients with chronic kidney disease | |
| Balasar et al. | Urinary kidney injury molecule-1 levels in renal stone patients | |
| Rothuizen et al. | Sampling and handling of liver tissue | |
| Paradies et al. | Is pulmonary hypertension a rare condition associated to angiostrongylosis in naturally infected dogs? | |
| MacLean et al. | When should renal allografts be removed? | |
| RU2466391C1 (en) | Diagnostic technique for recurrent hemorrhage | |
| Jobs et al. | Clinical immunology Interleukin-18 and NGAL in assessment of ESWL treatment safety in children with urolithiasis | |
| Luo et al. | Quantitative evaluation of renal cortex perfusion using contrast-enhanced ultrasound imaging parameters in ischemia–reperfusion injury in rabbits | |
| Carvalho et al. | Nephrectomy as a cause of chronic kidney disease in the treatment of urolithiasis: a case–control study | |
| RU2442982C1 (en) | Method for diagnostics of renal parenchyma damage in children with vesicoureteric reflux | |
| Menzies-Gow et al. | Digital blood flow and plasma endothelin concentration in clinically endotoxemic horses | |
| RU2331880C1 (en) | Method of endothelium dysfunction degree diagnostics in essential hypertension cases, complicated by ischemic stroke | |
| RU2547567C1 (en) | Method of cytological diagnostics of urinary bladder cancer | |
| RU2453844C1 (en) | Method for measuring terminal period duration in acute blood loss | |
| RU2485508C1 (en) | Method of choosing surgical approach to sialolithiasis | |
| RU2357248C1 (en) | Autointoxication severity estimation procedure | |
| RU2703289C1 (en) | Method for prediction of clinical course of obstructive jaundice of non-tumor genesis | |
| RU2694097C1 (en) | Diagnostic technique for abdominal abscess and retroperitoneal phlegmon in patients with pancreatonecrosis | |
| RU2649745C2 (en) | Method of diagnostics of interstitial cystitis in cats | |
| RU2409317C1 (en) | Method to forecast liver impairment development in post-operational period in patients after hemihepatectomy | |
| RU2633478C1 (en) | Method for diagnosis of congenital pneumonia in dead newborn by post mortem magnetic resonance imaging |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20140329 |