RU2465588C1 - Diagnostic technique for cattle leukaemia - Google Patents

Diagnostic technique for cattle leukaemia Download PDF

Info

Publication number
RU2465588C1
RU2465588C1 RU2011116025/15A RU2011116025A RU2465588C1 RU 2465588 C1 RU2465588 C1 RU 2465588C1 RU 2011116025/15 A RU2011116025/15 A RU 2011116025/15A RU 2011116025 A RU2011116025 A RU 2011116025A RU 2465588 C1 RU2465588 C1 RU 2465588C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
animals
cattle
leukaemia
levamisole
lymphocytes
Prior art date
Application number
RU2011116025/15A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Василий Сергеевич Власенко (RU)
Василий Сергеевич Власенко
Ольга Владимировна Морозова (RU)
Ольга Владимировна Морозова
Михаил Аристоклевич Бажин (RU)
Михаил Аристоклевич Бажин
Артем Николаевич Новиков (RU)
Артем Николаевич Новиков
Татьяна Сергеевна Дудоладова (RU)
Татьяна Сергеевна Дудоладова
Original Assignee
Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт бруцеллеза и туберкулеза животных Российской академии сельскохозяйственный наук (ГНУ ВНИИБТЖ Россельхозакадемии)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт бруцеллеза и туберкулеза животных Российской академии сельскохозяйственный наук (ГНУ ВНИИБТЖ Россельхозакадемии) filed Critical Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт бруцеллеза и туберкулеза животных Российской академии сельскохозяйственный наук (ГНУ ВНИИБТЖ Россельхозакадемии)
Priority to RU2011116025/15A priority Critical patent/RU2465588C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2465588C1 publication Critical patent/RU2465588C1/en

Links

Landscapes

  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

FIELD: medicine.
SUBSTANCE: diagnostic technique for cattle leukaemia, detection of animals showing a positive result in an immunodiffusion test, a haematological method of examination, determination of a T-lymphocyte percentage by spontaneous rosette formation with bovine erythrocytes (%E-ROK). Additionally, blood is examined for the T-lymphocyte percentage after incubation with levamisole in the final concentration of 0.5 mcg/ml by spontaneous rosette formation with bovine erythrocytes. It is followed by calculating a shear index (SI) by formula:
Figure 00000004
% E - ROK before incubation with levamisole at SI equal to 1, 2 and more, the animal is stated to suffer from cattle leukaemia and withdrawn from an animal stock. The invention provides higher accuracy and reliability of diagnosing cattle leukaemia. The diagnostic technique detects the animals suffering cattle leukaemia by 11.8% more cases; it is more accurate and more reliable.
EFFECT: technique may be used for diagnosing leukaemia in the animals wherein the immunostimulating agent is introduced.
4 tbl, 3 ex

Description

Изобретение относится к ветеринарии, а именно - к лабораторной диагностике иммунологическими методами, и может быть использовано для выявления больного и инфицированного вирусом лейкоза крупного рогатого скота.The invention relates to veterinary medicine, namely to laboratory diagnostics by immunological methods, and can be used to identify a sick and infected cattle leukemia virus.

Известен гематологический способ выявления больного лейкозом крупного рогатого скота, включающий предварительное выявление животных, положительно реагирующих в реакции иммунодиффузии (РИД), основанное на обнаружении в сыворотке крови специфических антител к антигенам вируса лейкоза крупного рогатого скота. Животных, сыворотки крови которых дали положительный результат в РИД, признают зараженными вирусом лейкоза и исследуют гематологическим методом, заключающимся в подсчете лейкоцитов в единице объема крови. При обнаружении повышенного их количества выводят лейкоцитарную формулу и оценивают статус животного по лейкозу согласно «лейкозному ключу» как здорового, подозрительного по заболеванию лейкозом или больного лейкозом. Больных животных выводят из стада [Методические указания по диагностике лейкоза крупного скота / Департамент ветеринарии, Минсельхоз России - 2000 - №13-7-2/2130].A known hematological method for identifying a patient with cattle leukemia, including preliminary identification of animals that respond positively to the immunodiffusion reaction (RID), based on the detection of specific antibodies to cattle leukemia virus antigens in blood serum. Animals whose blood serum tested positive in RID are recognized as infected with the leukemia virus and examined by the hematological method, which consists in counting leukocytes per unit volume of blood. If an increased number of them is detected, the leukocyte formula is derived and the status of the animal is estimated by leukemia according to the “leukemia key” as healthy, suspicious for leukemia or suffering from leukemia. Sick animals are taken out of the herd [Guidelines for the diagnosis of cattle leukemia / Department of Veterinary Medicine, Ministry of Agriculture of Russia - 2000 - No. 13-7-2 / 2130].

Используемый для прижизненной диагностики гематологический метод позволяет выявить только 60-65% больных лейкозом. 35-40% животных не имеют лейкозных изменений, и это затрудняет эффект проводимых оздоровительных мероприятий. Из хозяйств выбывают животные с лейкемоидными реакциями, а больные лейкозом нередко остаются [Нахмансон В.М. Меры профилактики и борьбы с лейкозом крупного рогатого скота из генетически устойчивых линий и семейств [В.М.Нахмансон, Е.А.Дун и др. // Тр. ВИЭВ. - 1986. - Т.59. - С.82-86].Used for intravital diagnosis, the hematological method allows you to identify only 60-65% of patients with leukemia. 35-40% of the animals do not have leukemic changes, and this complicates the effect of the ongoing recreational activities. Animals with leukemoid reactions are eliminated from the farms, and patients with leukemia often remain [Nachmanson V.M. Measures for the prevention and control of cattle leukemia from genetically stable lines and families [V.M. Nakhmanson, E.A. Dun, etc. // Tr. VIEV. - 1986.- T.59. - S. 82-86].

При некоторых патологических состояниях, таких как лимфогранулематоз, онкологические заболевания, кратковременная инкубация лимфоцитов in vitro в среде с левамизолом приводит к повышению числа Е-РОК, что свидетельствует о модификации рецепторов к эритроцитам барана на Т-лимфоцитах больных. Авторы рассматривают наблюдавшийся эффект как свидетельство устранения блокады Т-клеток [Дондоладзе М.Б. Анализ диагностической значимости модификации поверхности Т-клеток при лимфопролиферативных заболеваниях / М.Б.Дондоладзе, А.А.Ярилин, Н.З.Пирадашвили // Иммунология. - 1986. - №2. - С.66-68].In some pathological conditions, such as lymphogranulomatosis, oncological diseases, short-term incubation of lymphocytes in vitro in a medium with levamisole leads to an increase in the number of E-ROCK, which indicates the modification of sheep red blood cell receptors on T-lymphocytes of patients. The authors consider the observed effect as evidence of the elimination of T-cell blockade [Dondoladze MB Analysis of the diagnostic significance of surface modification of T cells in lymphoproliferative diseases / M.B.Dondoladze, A.A. Yarilin, N.Z.Piradashvili // Immunology. - 1986. - No. 2. - S.66-68].

Известен способ определения чувствительности лимфоцитов к левамизолу [авторское свидетельство СССР SU №1064952; МПК A61K 39/00], который предусматривает использование левамизола в концентрации 0,01 мкг/мл среды.A known method for determining the sensitivity of lymphocytes to levamisole [USSR copyright certificate SU No. 1064952; IPC A61K 39/00], which provides for the use of levamisole in a concentration of 0.01 μg / ml of medium.

Наиболее близким к изобретению является способ диагностики лейкоза крупного рогатого скота, включающий выявление положительно реагирующих в реакции иммунодиффузии животных и гематологический метод исследования, у инфицированных животных определяют процентное содержание общего числа лимфоцитов в мазке крови и Т-лимфоцитов методом спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана, определяют коэффициент отношения (Ко) содержания лимфоцитов к числу Т-лимфоцитов, при Ко, равном 4,3 и более, животное считают больным и с повышенным риском к заболеванию вирусом лейкоза крупного рогатого скота и выводят из стада [патент РФ RU №2379683; МПК G01N 33/48].Closest to the invention is a method for the diagnosis of cattle leukemia, including the detection of animals that respond positively to the immunodiffusion reaction and the hematological research method. In infected animals, the percentage of the total number of lymphocytes in the blood smear and T-lymphocytes is determined by spontaneous rosette formation with sheep red blood cells, and the coefficient is determined ratio (K o) content of lymphocytes to the number of T-lymphocytes, the K about equal to 4.3 or more, an animal considered sick and with a high p skom to the disease leukemia virus of cattle and removed from the herd [RF patent RU №2379683; IPC G01N 33/48].

Недостатком метода является то, что сниженная экспрессия рецепторов к эритроцитам барана Т-лимфоцитов может наблюдаться при многих инфекционных заболеваниях и других состояниях организма, сопровождающихся вторичными иммунодефицитами. Введение иммуномодуляторов, стимулирующих Т-систему организма, также затрудняет выявление животных с повышенным риском к заболеванию лейкозом.The disadvantage of this method is that reduced expression of sheep red blood cell receptors for T-lymphocytes can be observed in many infectious diseases and other conditions of the body, accompanied by secondary immunodeficiencies. The introduction of immunomodulators that stimulate the body's T-system also makes it difficult to identify animals with an increased risk of leukemia.

Техническим результатом является повышение точности и достоверности диагностики лейкоза крупного рогатого скота.The technical result is to increase the accuracy and reliability of the diagnosis of leukemia in cattle.

Указанный технический результат достигается тем, что способ диагностики лейкоза крупного рогатого скота включает выявление положительно реагирующих в реакции иммунодиффузии животных, гематологический метод исследования, у инфицированных животных определение процентного содержания Т-лимфоцитов методом спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана, дополнительно в крови определяют процентное содержание Т-лимфоцитов после инкубации с левамизолом в конечной концентрации 0,5 мкг/мл с помощью спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана, вычисляют индекс сдвига (ИС) по формуле:The specified technical result is achieved by the fact that the method for the diagnosis of cattle leukemia includes the identification of animals that respond positively to the immunodiffusion reaction, a hematological research method, in infected animals, the percentage of T-lymphocytes is determined by spontaneous rosette formation with ram red blood cells, and the percentage of T- is determined in blood lymphocytes after incubation with levamisole at a final concentration of 0.5 μg / ml using spontaneous rosette formation with e itrotsitami ram calculated shear index (SI) using the formula:

Figure 00000001
Figure 00000001

при ИС, равном 1,2 и более, животное считают больным лейкозом крупного рогатого скота и выводят из стада.with IP equal to 1.2 or more, the animal is considered to be sick with cattle leukemia and removed from the herd.

Способ осуществляется следующим образом. У животных осуществляют забор проб крови, выявляют положительно реагирующих в реакции иммунодиффузии животных, проводят гематологический метод исследования, определяют процентное содержание Т-лимфоцитов, используя реакцию спонтанного розеткообразования (Е-РОК). Реакцию ставят параллельно с двумя пробами лимфоцитов: чистой взвесью (контрольная) и с обработанными левамизолом (опытная). Лимфоциты опытной пробы обрабатывают левамизолом в концентрации 0,5 мкг/мл среды 199, содержащей 1·105 лимфоцитов, и инкубируют 1 час при 37°C.The method is as follows. In animals, blood samples are taken, animals positively reacting in the immunodiffusion reaction are detected, a hematological research method is carried out, the percentage of T-lymphocytes is determined using the reaction of spontaneous rosette formation (E-ROCK). The reaction is put in parallel with two samples of lymphocytes: a pure suspension (control) and treated with levamisole (experimental). Lymphocytes of the experimental sample are treated with levamisole in a concentration of 0.5 μg / ml of medium 199 containing 1 · 10 5 lymphocytes, and incubated for 1 hour at 37 ° C.

Постановку реакции Е-розеткообразования проводят путем 5-минутного центрифугирования смеси суспензии лимфоцитов с 0,4%-ной взвесью эритроцитов барана и двухэтапной инкубацией: 30 мин в термостате при 37°C и 18-20 ч в холодильнике при 10°C.The reaction of E-rosette formation is carried out by 5-minute centrifugation of a mixture of a suspension of lymphocytes with a 0.4% suspension of sheep erythrocytes and two-stage incubation: 30 minutes in an thermostat at 37 ° C and 18-20 hours in a refrigerator at 10 ° C.

В опытной и контрольной группах подсчитывают процент розеток и высчитывают индекс сдвига (ИС), вызванного инкубацией с левамизолом, при ИС, равном 1,2 и более, животное считают больным лейкозом крупного рогатого скота и выводят из стада.In the experimental and control groups, the percentage of outlets is calculated and the shift index (IS) caused by incubation with levamisole is calculated, with an IS equal to 1.2 or more, the animal is considered to be sick with cattle leukemia and removed from the herd.

Вычисление индекса сдвига (ИС) применяется для оценки влияния левамизола на активность клеток в тесте [Лебедев К.А. Иммунная недостаточность (выявление и лечение) / К.А.Лебедев, И.Д.Понякина. - М.: Медицинская книга, Н.Новгород: Изд-во НГМА, 2003. - С.405-407].The calculation of the shear index (IS) is used to assess the effect of levamisole on cell activity in the test [K. Lebedev Immune deficiency (detection and treatment) / K.A. Lebedev, I.D. Ponyakina. - M .: Medical book, N. Novgorod: Publishing house of the Novosibirsk State Medical Academy, 2003. - S.405-407].

Увеличение ИС свидетельствует о наличии Т-клеточного дефицита, вызванного вирусом лейкоза крупного рогатого скота. Если ИС≤1,0, то животное считают здоровым, если ИС≥1,2, то животное считают больным.An increase in IP indicates a T-cell deficiency caused by cattle leukemia virus. If IP ≤1.0, then the animal is considered healthy, if IP ≥1.2, then the animal is considered sick.

Сущность изобретения поясняется на конкретных примерах выполнения способа.The invention is illustrated by specific examples of the method.

Пример 1. В неблагополучном по лейкозу хозяйстве исследуют 20 коров, из которых формируют 3 группы: 1 группа - 6 коров вирусоносителей (РИД-положительные); 2 группа - 4 больные коровы, положительно реагирующие в РИД и подтвержденные гематологическим методом исследования, и 3 группа - 10 здоровых (не реагирующих в РИД) коров. В периферической крови определяют число Т-лимфоцитов с помощью спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана (Е-РОК) при постановке реакции со средой №199 (контроль), а также количество Е-РОК при воздействии левамизола in vitro, используя различные его концентрации: 50 мкг/мл, 0,5 мкг/мл и 0,01 мкг/мл.Example 1. In a dysfunctional leukemia farm, 20 cows are examined, of which 3 groups are formed: 1 group - 6 virus-carrying cows (RID-positive); Group 2 - 4 sick cows that respond positively to RID and confirmed by the hematological method of research, and group 3 - 10 healthy (non-responsive to RID) cows. In the peripheral blood, the number of T-lymphocytes is determined by spontaneous rosette formation with sheep erythrocytes (E-ROCK) when setting up reaction with medium No. 199 (control), as well as the amount of E-ROCK when exposed to levamisole in vitro, using various concentrations of it: 50 μg / ml, 0.5 μg / ml and 0.01 μg / ml.

Определение чувствительности лимфоцитов к левамизолу осуществляли по методике В.В.Казимирчука с соавторами [авторское свидетельство SU №1064952, МПК A61K 39/00], по мнению авторов, оптимальной концентрацией левамизола при исследовании чувствительности к ним лимфоцитов (in vitro) является 0,01 мкг/мл.The determination of the sensitivity of lymphocytes to levamisole was carried out according to the method of V.V. Kazimirchuk et al [copyright certificate SU No. 1064952, IPC A61K 39/00], according to the authors, the optimal concentration of levamisole in the study of sensitivity of lymphocytes to them (in vitro) is 0.01 mcg / ml.

Другими исследователями для изучения действия левамизола in vitro на Т-лимфоциты у больных лимфогранулематозом людей предлагается использовать концентрацию 50 мкг/мл [Пантелеева Е.С. О причинах дефицита Т-лимфоцитов периферической крови у больных лимфогранулематозом / Е.С.Пантелеева, А.А.Ярилин, Г.С.Неприна, Г.Д.Байсоголов // Иммунология. - 1981. - №1. - С.70-74].Other researchers to study the effect of levamisole in vitro on T-lymphocytes in patients with lymphogranulomatosis in humans, it is proposed to use a concentration of 50 μg / ml [Panteleeva ES On the causes of deficiency of peripheral blood T-lymphocytes in patients with lymphogranulomatosis / E.S. Panteleeva, A.A. Yarilin, G.S. Neprina, G.D. Baysogolov // Immunology. - 1981. - No. 1. - S.70-74].

С целью выбора оптимальной концентрации для изучения действия левамизола in vitro на Т-лимфоциты носителей ВЛКРС и больных лейкозом коров были взяты различные концентрации препарата (табл.1).In order to choose the optimal concentration for studying the effect of levamisole in vitro on T-lymphocytes of VLCCR carriers and patients with leukemia cows, various concentrations of the drug were taken (Table 1).

Из таблицы 1 видно, что при определении чувствительности in vitro Е-РОК к левамизолу в концентрации 50 мкг/мл отмечено подавление розеткообразования у животных всех групп, наиболее выраженное при повышенном уровне этих клеток в периферической крови (РИД-отрицательные).Table 1 shows that when determining the in vitro sensitivity of E-ROCK to levamisole at a concentration of 50 μg / ml, inhibition of rosette formation was observed in animals of all groups, most pronounced with an increased level of these cells in peripheral blood (RID-negative).

Таблица 1.Table 1. Изучение действия различных концентраций левамизола в реакции Е-РОК на лимфоциты in vitro у крупного рогатого скота с разной степенью компрометации к лейкозуStudy of the effect of various concentrations of levamisole in the reaction of E-ROCK on lymphocytes in vitro in cattle with varying degrees of compromise to leukemia Группа животныхGroup of animals Символы статисти-
ки
Symbols of statistics
ki
Е-РОК, %E-ROCK,%
Контроль(без левамизола)Control (without levamisole) с левамизолом, мкг/млwith levamisole, mcg / ml 50fifty 0,50.5 0,010.01 ВирусоносителиVirus carriers M±mM ± m 20,16±1,0820.16 ± 1.08 12,66±1,312.66 ± 1.3 32,83±3,34 32.83 ± 3.34 21,16±2,3621.16 ± 2.36 (РИД+)(Reed +) PP <0,001<0.001 <0,01<0.01 >0,05> 0.05 ГембольныеGambling M±mM ± m 19,5±2,0619.5 ± 2.06 15,0±1,15 15.0 ± 1.15 32,0±1,22 32.0 ± 1.22 21,25±2,5321.25 ± 2.53 PP >0,05> 0.05 <0,01<0.01 >0,05> 0.05 Здоровые (РИД-)Healthy (reed) M±mM ± m 30,0±2,3030.0 ± 2.30 10,7±1,5010.7 ± 1.50 22,8±2,8422.8 ± 2.84 19,8±1,92 19.8 ± 1.92 PP <0,001<0.001 >0,05> 0.05 <0,01<0.01

При воздействии левамизола на Т-лимфоциты in vitro в концентрации 0,5 мкг/мл у вирусоносителей и больных лейкозом животных наблюдается достоверное повышение Т-розеткообразования, тогда как у РИД-отрицательных их количество оказалось сниженным.When levamisole acts on T-lymphocytes in vitro at a concentration of 0.5 μg / ml in virus carriers and animals with leukemia, a significant increase in T-rosette formation is observed, while in RID-negative their number was reduced.

Концентрация левамизола 0,01 мкг/мл существенно не повышала количества Е-РОК у вирусоносителей и больных лейкозом коров, в то же время подавляла розеткообразование у РИД-отрицательных животных.The concentration of levamisole 0.01 μg / ml did not significantly increase the amount of E-ROCK in virus carriers and patients with leukemia of cows, while at the same time it suppressed rosette formation in RID-negative animals.

Таким образом, для изучения чувствительности in vitro Е-РОК к левамизолу у носителей вируса лейкоза и больных лейкозом животных предпочтительно применение препарата в конечной концентрации 0,5 мкг/мл. При использовании этой концентрации препарата происходит стимуляция in vitro Т-лимфоцитов у животных со сниженным уровнем этих клеток в периферической крови (вирусоносители и больные), в то же время существенного влияния на лимфоциты здоровых животных не выявлено. Это может являться прогностическим критерием для характеристики индивидуально больных.Thus, to study the in vitro sensitivity of E-ROCK to levamisole in carriers of leukemia virus and patients with leukemia in animals, it is preferable to use the drug in a final concentration of 0.5 μg / ml. When using this concentration of the drug, in vitro stimulation of T-lymphocytes occurs in animals with a reduced level of these cells in the peripheral blood (virus carriers and patients), at the same time, no significant effect on healthy animals lymphocytes was detected. This may be a prognostic criterion for characterizing individually ill patients.

Пример 2. Исследуют 40 коров и по результатам серологических (РИД) и гематологических исследований разделяют на 3 группы: 1-я - 11 коров носителей вируса лейкоза крупного рогатого скота (РИД-положительные); 2-я - 12 больных лейкозом коров; 3-я - 17 здоровых, не реагирующих в РИД животных. Проводят исследование крови путем постановки реакции розеткообразования параллельно с двумя пробами лимфоцитов: чистой взвесью (контрольная) и с обработанными левамизолом (опытная). Лимфоциты опытной пробы обрабатывают левамизолом в концентрации 0,5 мкг/мл среды 199, содержащей 1·105 лимфоцитов, и инкубируют 1 час при 37°C. Затем вычисляют индекс сдвига по формуле: ИС=%Е-РОК после инкубации с левамизолом/% Е-РОК до инкубации с левамизолом.Example 2. Investigate 40 cows and according to the results of serological (RID) and hematological studies are divided into 3 groups: 1st - 11 cows carriers of the cattle leukemia virus (RID-positive); 2nd - 12 patients with leukemia of cows; 3rd — 17 healthy non-responsive animals. A blood test is carried out by setting the reaction of rosette formation in parallel with two samples of lymphocytes: a pure suspension (control) and treated with levamisole (experimental). Lymphocytes of the experimental sample are treated with levamisole in a concentration of 0.5 μg / ml of medium 199 containing 1 · 10 5 lymphocytes, and incubated for 1 hour at 37 ° C. Then, the shear index is calculated by the formula: IP =% E-ROCK after incubation with levamisole /% E-ROCK before incubation with levamisole.

Также проводят исследование крови известным способом [патент RU №2379683, МПК G01N 33/48], выводя коэффициент отношения количества общего числа лимфоцитов к количеству Т-лимфоцитов (табл.2).A blood test is also carried out in a known manner [patent RU No. 2379683, IPC G01N 33/48], deriving the coefficient of the ratio of the number of total lymphocytes to the number of T-lymphocytes (table 2).

Таблица 2.Table 2. Сравнительная характеристика иммунного статуса крупного рогатого скота с разной степенью компрометации к лейкозу, проведенная по известному и предлагаемому способу, М±mComparative characteristics of the immune status of cattle with varying degrees of compromise to leukemia, carried out by a known and proposed method, M ± m Изучаемые величиныThe studied values ЗдоровыеHealthy ВирусоносителиVirus carriers PP БольныеSick PP Индекс сдвигаShift index 0,56±0,070.56 ± 0.07 2,45±0,332.45 ± 0.33 <0,001<0.001 2,12±0,222.12 ± 0.22 <0,001<0.001 Коэффициент отношения (прототип)Ratio ratio (prototype) 2,68±0,282.68 ± 0.28 7,70±1,707.70 ± 1.70 <0,01<0.01 7,37±1,157.37 ± 1.15 <0,01<0.01

Из таблицы 2 видно, что индекс нагрузки у носителей вируса лейкоза и больных по отношению к здоровым животным с высокой степенью достоверности увеличивается (Р<0,001). Также достоверно увеличивается у инфицированных и больных животных коэффициент отношения.From table 2 it is seen that the load index in carriers of the leukemia virus and patients in relation to healthy animals with a high degree of confidence increases (P <0.001). The ratio of ratios also significantly increases in infected and sick animals.

При анализе изучаемых величин у каждого отдельного животного устанавливают, что ИС среди здоровых животных не превышает 0,95, в то же время среди вирусоносителей и больных животных составлял от 1,2 и выше. Следует отметить, что коэффициент отношения у всех гематологически больных и у большинства вирусоносителей составил ≥4,3.When analyzing the studied values in each individual animal, it is established that the IP among healthy animals does not exceed 0.95, while at the same time among virus carriers and sick animals it was from 1.2 and higher. It should be noted that the ratio of all hematologically ill patients and the majority of virus carriers was ≥4.3.

В таблице 3 представлены результаты исследований животных, проведенных по известному и предлагаемому способу, в зависимости от степени компрометации к лейкозу.Table 3 presents the results of studies of animals conducted by the known and proposed method, depending on the degree of compromise to leukemia.

Таблица 3.Table 3. Результаты исследования животных, проведенных по известному и предлагаемому способуThe results of the study of animals carried out by a known and proposed method Группа животныхGroup of animals Количество животныхNumber of animals ВыявленоRevealed известный способknown method Предлагаемый способThe proposed method дополнительноadditionally ИС≤1,2IC ≤1.2 ИС≥1,2IC ≥ 1.2 животныхanimals %% Вирусоносители (РИД+)Virus carriers (RID +) 11eleven 88 -- 11eleven -- -- ГембольныеGambling 1212 1212 -- 1212 -- -- Здоровые (РИД-)Healthy (reed) 1717 33 1212 55 22 11,811.8

Полученные результаты подтверждают, что предлагаемый способ диагностики лейкоза наиболее точен и достоверен, так как подтвердил диагноз у всех носителей вируса лейкоза и больных лейкозом животных (табл.3). Также удалось дополнительно выявить 2 (11,8%) больных коров среди не реагирующих в РИД.The results confirm that the proposed method for the diagnosis of leukemia is the most accurate and reliable, as it confirmed the diagnosis in all carriers of the leukemia virus and patients with leukemia animals (table 3). It was also possible to additionally identify 2 (11.8%) sick cows among those who did not respond to RID.

Пример 3. Проводят опыт на 20-ти коровах, которым 3 месяца ранее был введен иммуномодулятор, стимулирующий Т-систему организма.Example 3. Conduct an experiment on 20 cows, which 3 months earlier was introduced immunomodulator, stimulating the T-system of the body.

Проводят исследование крови путем постановки реакции розеткообразования параллельно с двумя пробами лимфоцитов: чистой взвесью (контрольная) и с обработанными левамизолом (опытная). Затем вычисляют индекс сдвига. Также проводят серологические, гематологические исследования и высчитывают коэффициент отношения по известному способу.A blood test is carried out by setting the reaction of rosette formation in parallel with two samples of lymphocytes: a clean suspension (control) and treated with levamisole (experimental). Then, the shift index is calculated. Also conduct serological, hematological studies and calculate the ratio by a known method.

Результаты исследований представлены в таблице 4.The research results are presented in table 4.

Таблица 4.Table 4. Результаты исследования животных неблагополучного стада после предварительного введения иммуномодулятора, стимулирующего Т-систему организма, с использованием различных способов диагностики лейкозаThe results of a study of animals in a dysfunctional herd after preliminary administration of an immunomodulator that stimulates the body's T-system using various methods for diagnosing leukemia Количество животныхNumber of animals ВыявленоRevealed ДополнительноAdditionally РИД+READ + ГематологическиHematologically Известный способKnown method Предлагаемый способThe proposed method животныхanimals %% 20twenty 77 22 22 77 22 1010

Из таблицы 4 видно, что исследование животных с помощью известного способа через 3 месяца после введения иммуномодулятора, стимулирующего Т-систему организма, затрудняет диагностику, о чем свидетельствуют только 2 выявленных из 7 инфицированных животных, тогда как предлагаемый способ позволил выявить 5 из 7 инфицированных животных, а также 2 дополнительно.Table 4 shows that the study of animals using the known method 3 months after the introduction of an immunomodulator that stimulates the T-system of the body, complicates the diagnosis, as evidenced by only 2 identified from 7 infected animals, while the proposed method allowed to identify 5 of 7 infected animals , as well as 2 extra.

Предлагаемый способ диагностики крупного рогатого скота выявляет на 11,8% больше животных больных лейкозом крупного рогатого скота, является более точным и повышает достоверность. Также может быть успешно использован для диагностики лейкоза у животных, которым были введены иммуностимулирующие средства.The proposed method for the diagnosis of cattle reveals 11.8% more animals with cattle leukemia, is more accurate and increases reliability. It can also be successfully used to diagnose leukemia in animals that have been given immunostimulating agents.

Claims (1)

Способ диагностики лейкоза крупного рогатого скота, включающий выявление положительно реагирующих в реакции иммунодиффузии животных, гематологический метод исследования, у инфицированных животных определение процентного содержания Т-лимфоцитов методом спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана (%Е-РОК), отличающийся тем, что дополнительно в крови определяют процентное содержание Т-лимфоцитов после инкубации с левамизолом в конечной концентрации 0,5 мкг/мл с помощью спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана, вычисляют индекс сдвига (ИС) по формуле
Figure 00000002

при ИС, равном 1, 2 и более, животное считают больным лейкозом крупного рогатого скота и выводят из стада.
A method for the diagnosis of cattle leukemia, including the identification of animals that respond positively to the immunodiffusion reaction, a hematological research method, in infected animals, the percentage of T-lymphocytes is determined by spontaneous rosette formation with sheep erythrocytes (% E-ROCK), characterized in that it is additionally determined in blood the percentage of T-lymphocytes after incubation with levamisole at a final concentration of 0.5 μg / ml using spontaneous rosetting with sheep red blood cells, you islyayut shear index (SI) using the formula
Figure 00000002

with IP equal to 1, 2 or more, the animal is considered to be sick with cattle leukemia and removed from the herd.
RU2011116025/15A 2011-04-22 2011-04-22 Diagnostic technique for cattle leukaemia RU2465588C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2011116025/15A RU2465588C1 (en) 2011-04-22 2011-04-22 Diagnostic technique for cattle leukaemia

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2011116025/15A RU2465588C1 (en) 2011-04-22 2011-04-22 Diagnostic technique for cattle leukaemia

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2465588C1 true RU2465588C1 (en) 2012-10-27

Family

ID=47147568

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2011116025/15A RU2465588C1 (en) 2011-04-22 2011-04-22 Diagnostic technique for cattle leukaemia

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2465588C1 (en)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2564437C2 (en) * 2013-12-26 2015-09-27 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Всероссийский научно-исследовательский институт бруцеллеза и туберкулеза животных" (ФГБНУ ВНИИБТЖ) Method of determining general redox activity of phagocytes in nitroblue tetrazolium reduction test for leukaemia of cattle
RU2615465C2 (en) * 2015-07-31 2017-04-04 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Саратовский государственный аграрный университет имени Н.И. Вавилова" Diagnostic system for detection of cattle leukemia and immune deficiency provirus dna by multiplex polymerase chain reaction
RU2767688C1 (en) * 2021-04-07 2022-03-18 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Омский аграрный научный центр" (ФГБНУ "Омский АНЦ") Method for staging indirect immunofluorescence reaction for diagnosing bovine leukaemia

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SU1064952A1 (en) * 1982-02-04 1984-01-07 Киевский Ордена Трудового Красного Знамени Медицинский Институт Им.Акад.А.А.Богомольца Method of determining the sensitivity of limphocyte to levamisol
RU2282854C1 (en) * 2004-12-30 2006-08-27 Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии им. Я.Р. Коваленко (ВИЭВ) Method for predicting leukosis in cattle
RU2303781C1 (en) * 2006-02-13 2007-07-27 Государственное научное учреждение Научно-исследовательский ветеринарный институт Нечерноземной зоны РФ Российской академии сельскохозяйственных наук Method for differential diagnostics of leukosis severity degree in cattle
RU2379683C1 (en) * 2008-06-04 2010-01-20 Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт бруцеллеза и туберкулеза животных Сибирского отделения Россельхозакадемии (ГНУ ВНИИБТЖ СО Россельхозакадемии) Method of diagnosing leukemia in cattle

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SU1064952A1 (en) * 1982-02-04 1984-01-07 Киевский Ордена Трудового Красного Знамени Медицинский Институт Им.Акад.А.А.Богомольца Method of determining the sensitivity of limphocyte to levamisol
RU2282854C1 (en) * 2004-12-30 2006-08-27 Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии им. Я.Р. Коваленко (ВИЭВ) Method for predicting leukosis in cattle
RU2303781C1 (en) * 2006-02-13 2007-07-27 Государственное научное учреждение Научно-исследовательский ветеринарный институт Нечерноземной зоны РФ Российской академии сельскохозяйственных наук Method for differential diagnostics of leukosis severity degree in cattle
RU2379683C1 (en) * 2008-06-04 2010-01-20 Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт бруцеллеза и туберкулеза животных Сибирского отделения Россельхозакадемии (ГНУ ВНИИБТЖ СО Россельхозакадемии) Method of diagnosing leukemia in cattle

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2564437C2 (en) * 2013-12-26 2015-09-27 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Всероссийский научно-исследовательский институт бруцеллеза и туберкулеза животных" (ФГБНУ ВНИИБТЖ) Method of determining general redox activity of phagocytes in nitroblue tetrazolium reduction test for leukaemia of cattle
RU2615465C2 (en) * 2015-07-31 2017-04-04 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Саратовский государственный аграрный университет имени Н.И. Вавилова" Diagnostic system for detection of cattle leukemia and immune deficiency provirus dna by multiplex polymerase chain reaction
RU2767688C1 (en) * 2021-04-07 2022-03-18 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Омский аграрный научный центр" (ФГБНУ "Омский АНЦ") Method for staging indirect immunofluorescence reaction for diagnosing bovine leukaemia

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Cywinska et al. Serum amyloid A level as a potential indicator of the status of endurance horses
Meredith et al. Equine leukocyte antigens: relationships with sarcoid tumors and laminitis in two pure breeds
Rodríguez et al. Early detection of Haemonchus contortus infection in sheep using three different faecal occult blood tests
Lepper et al. Sequential bacteriological observations in relation to cell‐mediated and humoral antibody responses of cattle infected with Mycobacterium paratuberculosis and maintained on normal or high iron intake
RU2465588C1 (en) Diagnostic technique for cattle leukaemia
Ahmad et al. Hematological and serum biochemical parameters of rescued Sunda pangolins (Manis javanica) in Singapore
Ahmad et al. Hematology and serum biochemistry of captive Sunda pangolin (Manis javanica) in Wildlife Reserves Singapore
Kırbaş et al. Evaluation of serum cardiac troponin-i concentration and cardiac enzyme activities in neonatal calves with sepsis
Dulman et al. Variations in standard blood count and biochemical parameters in dogs with atopic dermatitis.
Marco et al. The stress response to repeated capture in mouflon (Ovis ammon): physiological, haematological and biochemical parameters
Nazifi et al. Clinical relevance of serum sialic acids evaluation and correlation with haptoglobin and serum amyloid A in diseased cattle.
Ehtisham-ul-Haque et al. Monitoring the Health Status and Herd-Level Risk Factors of Tuberculosis in Water Buffalo (Bubalus bubalis) Dairy Farms in Pakistan.
Garell et al. Hematology and serum chemistry values for free-ranging golden crowned sifaka (Propithecus tattersalli)
RU2379683C1 (en) Method of diagnosing leukemia in cattle
CN111157741B (en) Application of myeloid cell trigger receptor 1 in preparation of gastritis diagnosis or treatment reagent and kit
RU2549467C1 (en) Method of determination of atherogenicity of immune complexes
Vengušt et al. Haematological and biochemical values of farmed fallow deer (Dama dama) after using different methods of capture
Sesztakova et al. Changes in haematological parameters in wild ruminants experimentally infected with
Al Sadoon Relationship between coccidiosis and lipid peroxidation‎ level in blood of cattle.‎
AL-Badranii et al. Electrocardiographic Changes Associated with Trypanosomiasis in Horses
RU2283498C1 (en) Method for obtaining erythrocytic antigen for reaction of indirect hemagglutination in case of brucellosis
Georgieva et al. Field study on plasma haptoglobin concentrations and total milk somatic cell counts in cows with untreated and treated mastitis
Bozkurt et al. The effect of multiple-dose ivermectin treatment on CD4+/CD8+ and the oxidative stress index in goats with udder viral papillomatosis
RU2408018C2 (en) Method for assessment of cattle immune status in case of leucosis
RU2564437C2 (en) Method of determining general redox activity of phagocytes in nitroblue tetrazolium reduction test for leukaemia of cattle

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20140423