RU2446772C1 - Method of improving spermatosoid mobility - Google Patents
Method of improving spermatosoid mobility Download PDFInfo
- Publication number
- RU2446772C1 RU2446772C1 RU2011111211/15A RU2011111211A RU2446772C1 RU 2446772 C1 RU2446772 C1 RU 2446772C1 RU 2011111211/15 A RU2011111211/15 A RU 2011111211/15A RU 2011111211 A RU2011111211 A RU 2011111211A RU 2446772 C1 RU2446772 C1 RU 2446772C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- sperm
- ascorbic acid
- mobility
- improving
- carnosine
- Prior art date
Links
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области животноводства и может быть использовано при искусственном осеменении животных.The invention relates to the field of animal husbandry and can be used for artificial insemination of animals.
Известен способ повышения концентрации сперматозоидов за счет центрифугирования. Для улучшения исходных свойств спермы используют методики, основанные на центрифугировании или флотации сперматозоидов в специальных средах (Бесплодие в супружестве / под ред. И.Ф. Юнды // Киев, "Здоровья". - 1990 - 464 с.; Panel P. Insemenation artificielles intra-uterines / P.Panel, J.P.Chansigaud, J.B. de Meeus, G.Magnin // J.Gynecol. Obstet. Biol. Reprod. - 1995. - N 24 - p.496-504).A known method of increasing sperm concentration due to centrifugation. To improve the initial properties of sperm, methods based on centrifugation or flotation of spermatozoa in special media are used (Infertility in Matrimony / edited by I.F. Undy // Kiev, Zdorovye. - 1990 - 464 p .; Panel P. Insemenation artificielles intra-uterines / P. Panel, JPChansigaud, JB de Meeus, G. Magnin // J. Gynecol. Obstet. Biol. Reprod. - 1995. - N 24 - p. 496-504).
Существенным недостатком центрифугирования является механическое повреждение, алютинация, в результате чего снижается подвижность сперматозоидов и, как следствие, оплодотворяющая активность. Метод флотации не приводит к механическому повреждению сперматозоидов, при этом повышение подвижности происходит за счет перемещения активноподвижных сперматозоидов.A significant drawback of centrifugation is mechanical damage, alutination, resulting in reduced sperm motility and, as a result, fertilizing activity. The flotation method does not lead to mechanical damage to the sperm, with an increase in motility due to the movement of actively motivated sperm.
Известен способ улучшения подвижности сперматозоидов путем воздействия на пробу раствором α2-макроглобулина (RU №2167675, МПК А61К 39/395, А61Р 15/08, публ. 10.11.1999).There is a method of improving sperm motility by exposing the sample to a solution of α 2 -macroglobulin (RU No. 2167675, IPC A61K 39/395, A61P 15/08, publ. 10.11.1999).
Известен способ повышения качественных показателей спермы, таких как увеличение числа подвижных сперматозоидов, увеличение дыхательной способности сперматозоидов и другие, путем обработки спермы перфтораном. Перфторан - кровезаменитель с газотранспортной функцией улучшает газообмен и метаболизм на уровне тканей (RU №2318211, МПК G01N 33/48, публ. 27.02.2008).There is a method of increasing the quality of sperm, such as increasing the number of motile sperm, increasing the respiratory capacity of sperm and others, by treating sperm with perfluorane. Perftoran - a blood substitute with a gas transport function improves gas exchange and metabolism at the tissue level (RU No. 2318211, IPC G01N 33/48, publ. February 27, 2008).
Недостатками известных способов является то, что они не обладают генопротекторным действием и не защищают ДНК сперматозоидов от повреждающего действия свободных радикалов. Известно, что одной из причин низкой оплодотворяемости сперматозоидов выступает модификация ДНК свободными радикалами, образующимися при окислительном стрессе, возникающем при действии неблагоприятных факторов эндогенной и экзогенной природы. Причем окислительный стресс может приводить к гибели сперматозоидов путем апоптоза.The disadvantages of the known methods is that they do not have a gene protective effect and do not protect sperm DNA from the damaging effect of free radicals. It is known that one of the reasons for low sperm fertility is DNA modification by free radicals formed during oxidative stress that occurs under the influence of adverse factors of endogenous and exogenous nature. Moreover, oxidative stress can lead to the death of sperm by apoptosis.
Технический результат заключается в улучшении оплодотворяющих свойств спермы за счет повышения подвижности и жизнеспособности сперматозоида.The technical result consists in improving the fertilizing properties of sperm by increasing the mobility and viability of the sperm.
Сущность изобретения заключается в том, что в способе улучшения подвижности сперматозоидов в пробу эякулята добавляют такое количество раствора карнозина с аскорбиновой кислотой, чтобы получить концентрацию карнозина равной 4-5 мМ с 0,02% аскорбиновой кислотой с последующей оценкой возрастания активности сперматозоидов как высокую и достаточную для оплодотворения.The essence of the invention lies in the fact that in the method of improving sperm motility, an amount of a solution of carnosine with ascorbic acid is added to the ejaculate sample so as to obtain a carnosine concentration of 4-5 mM with 0.02% ascorbic acid, with a subsequent assessment of the increase in sperm activity as high and sufficient for fertilization.
Карнозин является природным антиоксидантом и эффективным буфером, поддерживающим рН в цитоплазме клеток (Болдырев А.А. Карнозин. Правдивая история о сказочном соединении и его исследованиях / А.А. Болдырев // Химия и жизнь. 1997. - №10 - С.10-15). Карнозин ранее применялся в медицине для лечения катаракты, воспалительных процессов глаза различной этиологии (глазные капли «Карнозин 5%», «Севитин»), лечения трофических язв, развившихся на почве хронической венозной недостаточности.Carnosine is a natural antioxidant and an effective buffer that maintains the pH in the cytoplasm of cells (A. Boldyrev Karnozin. The true story of the fabulous compound and its research / A. A. Boldyrev // Chemistry and Life. 1997. - No. 10 - P.10 -fifteen). Carnosine was previously used in medicine for the treatment of cataracts, inflammatory processes of the eye of various etiologies (eye drops "Carnosine 5%", "Sevitin"), treatment of trophic ulcers that developed on the basis of chronic venous insufficiency.
Если концентрация карнозина будет менее 5 мМ, а аскорбиновой кислоты менее 0,02%, то антиоксидантное и генопротекторное действие компонентов на сперматозоиды будет недостаточным и при этом эффект повышения подвижности сперматозоидов малозначимым.If the concentration of carnosine is less than 5 mM, and ascorbic acid less than 0.02%, then the antioxidant and gene protective effect of the components on the sperm will be insufficient and the effect of increasing sperm motility will be insignificant.
Способ осуществляется следующим образом. Эякулят, применяемый для искусственного осеменения свиноматок, получен от хряков-производителей и разбавлен в соотношении 1:1 средой для хранения ГХЦС (глюкозо-хелато-цитратно-сульфатная). Обрабатывают образцы, хранящиеся при 16-18°С. Рассчитано, что к образцу спермы объемом 9,9 мл добавляют 0,1 мл раствора, содержащего 50 мМ карнозина с 0,2% аскорбиновой кислотой на цитрат-фосфатном буфере, чтобы получить концентрацию карнозина равной 4-5 мМ с 0,02% аскорбиновой кислотой. Смесь инкубируют в течение 30 мин. Определяют подвижность путем микрокопирования нативного препарата. Подвижность спермиев (Пс) в баллах вычисляют по формуле согласно указаниям ГОСТ 20909.4 (Национальный стандарт Российской Федерации. Сперма хряков разбавленная, сохраненная. Санитарные и биологические нормы. Технические требования и методы испытания / М.: Стандартин-форм-2010):The method is as follows. The ejaculate used for artificial insemination of sows was obtained from boars-producers and diluted in a 1: 1 ratio with storage medium HCC (glucose-chelate-citrate-sulfate). Process samples stored at 16-18 ° C. It is estimated that 0.1 ml of a solution containing 50 mM carnosine with 0.2% ascorbic acid in citrate phosphate buffer is added to a 9.9 ml semen sample to obtain a carnosine concentration of 4-5 mM with 0.02% ascorbic acid. The mixture is incubated for 30 minutes. Mobility is determined by microcopying the native drug. Sperm motility (P s ) in points is calculated according to the formula according to the instructions of GOST 20909.4 (National Standard of the Russian Federation. Boar semen diluted, preserved. Sanitary and biological standards. Technical requirements and test methods / M .: Standard-form-2010):
где: n - общее число подсчитанных спермиев;where: n is the total number of sperm counts;
n1 - число подсчитанных спермиев с прямолинейным поступательным движением;n 1 is the number of counted sperm with rectilinear translational motion;
10 - постоянный коэффициент.10 is a constant coefficient.
Показатели подвижности активных сперматозоидов оценивают до и после обработки раствором карнозина с аскорбиновой кислотой. Пригодной для успешного осеменения считается сперма, оцениваемая 6 баллами подвижности. В обработанных образцах подвижность повышается в среднем на 1,5-2 балла.The motility indices of active sperm are evaluated before and after treatment with a solution of carnosine with ascorbic acid. Suitable for successful insemination is considered to be sperm, estimated at 6 points of mobility. In the processed samples, mobility increases on average by 1.5-2 points.
По сравнению с известными решениями предлагаемое позволяет улучшить оплодотворяющие свойства спермы за счет повышения подвижности и жизнеспособности сперматозоида in vitro путем активирования подвижности всех сперматозоидов при сохранении их исходной концентрации.Compared with the known solutions, the proposed one allows to improve the fertilizing properties of sperm by increasing the mobility and viability of the sperm in vitro by activating the mobility of all sperm cells while maintaining their initial concentration.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2011111211/15A RU2446772C1 (en) | 2011-03-24 | 2011-03-24 | Method of improving spermatosoid mobility |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2011111211/15A RU2446772C1 (en) | 2011-03-24 | 2011-03-24 | Method of improving spermatosoid mobility |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2446772C1 true RU2446772C1 (en) | 2012-04-10 |
Family
ID=46031546
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2011111211/15A RU2446772C1 (en) | 2011-03-24 | 2011-03-24 | Method of improving spermatosoid mobility |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2446772C1 (en) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AT518982A4 (en) * | 2016-12-12 | 2018-03-15 | Hg Pharma Gmbh | Medicines for male sterility |
| RU2801339C1 (en) * | 2022-12-01 | 2023-08-07 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method of using extracellular folicular fluid vesicles to increase human spermatozoa mobility in virtue fertilization programs |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2159122C1 (en) * | 1999-09-20 | 2000-11-20 | Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственная фирма "Востокфарм" | Means and method for improving sperm quality |
| RU2167675C2 (en) * | 1998-02-18 | 2001-05-27 | Ивановский НИИ материнства и детства им. В.Н. Городкова | Method of improvement of spermatozoon motility |
| RU2393816C1 (en) * | 2009-02-17 | 2010-07-10 | Николай Афанасьевич Алфимцев | Method for preparation of producing animals sperm for its application |
-
2011
- 2011-03-24 RU RU2011111211/15A patent/RU2446772C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2167675C2 (en) * | 1998-02-18 | 2001-05-27 | Ивановский НИИ материнства и детства им. В.Н. Городкова | Method of improvement of spermatozoon motility |
| RU2159122C1 (en) * | 1999-09-20 | 2000-11-20 | Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственная фирма "Востокфарм" | Means and method for improving sperm quality |
| RU2393816C1 (en) * | 2009-02-17 | 2010-07-10 | Николай Афанасьевич Алфимцев | Method for preparation of producing animals sperm for its application |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AT518982A4 (en) * | 2016-12-12 | 2018-03-15 | Hg Pharma Gmbh | Medicines for male sterility |
| AT518982B1 (en) * | 2016-12-12 | 2018-03-15 | Hg Pharma Gmbh | Medicines for male sterility |
| RU2801339C1 (en) * | 2022-12-01 | 2023-08-07 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method of using extracellular folicular fluid vesicles to increase human spermatozoa mobility in virtue fertilization programs |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Cocchia et al. | Effect of sod (superoxide dismutase) protein supplementation in semen extenders on motility, viability, acrosome status and ERK (extracellular signal-regulated kinase) protein phosphorylation of chilled stallion spermatozoa | |
| Andreea et al. | Role of antioxidant additives in the protection of the cryopreserved semen against free radicals | |
| Papa et al. | Effect of glycerol on the viability and fertility of cooled bovine semen | |
| Sariözkan et al. | Influence of various antioxidants on microscopic-oxidative stress indicators and fertilizing ability of frozen-thawed bull semen | |
| Waheed et al. | Influence of seminal plasma antioxidants and osteopontin on fertility of the Arabian horse | |
| Asadpour et al. | Effect of various levels of catalase antioxidant in semen extenders on lipid peroxidation and semen quality after the freeze-thawing bull semen | |
| Lançoni et al. | Melatonin added to cryopreservation extenders improves the mitochondrial membrane potential of postthawed equine sperm | |
| Malik et al. | Effects of long term storage of semen in liquid nitrogen on the viability, motility and abnormality of frozen thawed Frisian Holstein bull spermatozoa | |
| Nishijima et al. | Motility and fertility of rabbit sperm cryopreserved using soybean lecithin as an alternative to egg yolk | |
| Atroshchenko et al. | Conservation of genetic resources in horse breeding and major structural damages of sperm during semen cryopreservation in stallions | |
| Hayden et al. | The “dilution effect” in stallion sperm | |
| Abdi-Benemar et al. | Effects of DHA supplementation of the extender containing egg yolk and α-tocopherol on the freezability and post-thawing fertility of ram semen | |
| Bergstein-Galan et al. | Sperm subpopulations in ejaculated sperm and spermatozoa recovered from ovine epididymides up to 48 h after death | |
| RU2446772C1 (en) | Method of improving spermatosoid mobility | |
| US11549098B2 (en) | Processing of sperm cells | |
| Memon et al. | Effect of hypotaurine and cysteine on sperm cytological parameters of cooled and post-thaw Boer goat semen | |
| Tabatabaei et al. | Correlation between age of rooster and semen quality in Iranian indigenous broiler breeder chickens | |
| ŞEN et al. | The effect of oxytocin and prostaglandin hormones added tosemen on stallion sperm quality | |
| Soltanpour et al. | Effect of Antioxidant combinations on sperm quality of cross breed rams during liquid storage | |
| Olfati et al. | Effects of prostaglandin F2α treatment on semen characteristics of crossbred rams in the non-breeding season | |
| Pongsiri et al. | The effect of false mount on quality of frozen-thawed semen in Bos indicus beef bulls | |
| Nishijima et al. | Effects of cholesterol-loaded cyclodextrins on the rate and the quality of motility in frozen and thawed rabbit sperm | |
| DA et al. | THE EFFECT OF OXYTOCIN, PROSTAGLANDIN F2 OR GNRH INJECTION ON FRESH AND FROZEN-THAWED SEMEN CHARACTERISTICS OF RAMS | |
| El-Speiy et al. | Effect of adding protein high viscosity (gelatin) in tris extender on semen conservation status fertility rates, anti-oxidant status and sex ratio of rabbits | |
| WO2006130884A2 (en) | Medium for improving spermatozoa's vitality of domestic mammalian males and man |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20160325 |