RU2445116C1 - METHOD FOR CONCENTRATING NATIBE O-ANTIGEN Vibrio cholerae - Google Patents
METHOD FOR CONCENTRATING NATIBE O-ANTIGEN Vibrio cholerae Download PDFInfo
- Publication number
- RU2445116C1 RU2445116C1 RU2011108391/15A RU2011108391A RU2445116C1 RU 2445116 C1 RU2445116 C1 RU 2445116C1 RU 2011108391/15 A RU2011108391/15 A RU 2011108391/15A RU 2011108391 A RU2011108391 A RU 2011108391A RU 2445116 C1 RU2445116 C1 RU 2445116C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- antigen
- native
- concentration
- molecular weight
- concentrating
- Prior art date
Links
Classifications
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к технологии производства медицинских иммунобиологических препаратов, в частности к способам концентрирования нативного O-антигена Vibrio cholerae, и может быть использовано в практике производства вакцины оральной холерной бивалентной химической таблетированной.The invention relates to a technology for the production of medical immunobiological preparations, in particular to methods for concentrating the native Vibrio cholerae O-antigen, and can be used in the practice of manufacturing an oral cholera bivalent chemical tablet vaccine.
O-антиген V. cholerae 01 классического биовара штамма М-41 серовара Огава, наряду с холерогеном-анатоксином и O-антигеном V. cholerae O1 классического биовара штамма 569 В серовара Инаба являются основными компонентами вакцины оральной холерной бивалентной химической таблетированной.O-antigen of V. cholerae 01 of the classical biovar of strain M-41 of serovar Ogawa, along with the cholerogen-toxoid and O-antigen of V. cholerae O1 of the classical biovar of strain 569 B of serovar Inaba are the main components of the oral cholera bivalent chemical tablet vaccine.
Данная вакцина в 2001 году Приказом Минздрава России (№229 от 27.06.2001 г.) включена в Национальный календарь профилактических прививок по эпидемическим показаниям, предусматривающим проведение вакцинации лиц, выезжающих в неблагополучные по холере страны, и населения приграничных районов России в случае возникновения неблагоприятной по холере обстановке на сопредельной территории.This vaccine in 2001 by Order of the Ministry of Health of Russia (No. 229 dated 06/27/2001) was included in the National Preventive Vaccination Calendar for epidemiological indications, providing for vaccination of people traveling to countries that are not at home for cholera and the population of the border regions of Russia in case of adverse cholera setting in the adjacent territory.
Известен способ получения пероральной химической вакцины (патент России №2076734, 1997 г.). В данном изобретении разработан промышленный способ изготовления химической оральной вакцины, содержащей анатоксин-холероген и O-антиген, таблетированной с ацидорезистентным покрытием. Сущность данного способа заключается в раздельном получении анатоксина-холерогена и соматического O-антигена, что достигается последовательным фракционным выделением сульфатом аммония из обеззараженной формальдегидом культуральной жидкости гипертоксигенных полученных методом генной инженерии штаммов холерного вибриона соматического O-антигена между 0,2-0,35 насыщения и анатоксина-холерогена между 0,35-0,80 насыщения.A known method of obtaining an oral chemical vaccine (Russian patent No. 2076734, 1997). The present invention has developed an industrial method for the manufacture of a chemical oral vaccine containing an toxoid-cholerogen and an O-antigen tabletted with an acid-resistant coating. The essence of this method is to separately obtain the toxoid-cholerogen and somatic O-antigen, which is achieved by successive fractional isolation of ammonium sulfate from formaldehyde-free culture fluid of hypertoxic genetically engineered strains of cholera vibrio of somatic O-antigen between 0.2-0.35 saturation and toxoid-cholerogen between 0.35-0.80 saturation.
Известен способ производственного получения O-антигена Огава (патент России №2080121, 1997 г.), при котором проводят глубинное культивирование вибрионов в реакторе, обезвреживание, сепарирование микробных тел, выделение и очистку O-антигена из культуральной жидкости, диализ, лиофильное высушивание, добавление к компонентам оральной вакцины, таблетирование и покрытие ацидорезистентной оболочкой. O-антиген Огава получают из культуральной жидкости, выдержанной в течение 20-30 дней при 10-12°C с 0,2-0,3% формалина, путем осаждения сульфатом аммония при 0,5 насыщении при рН 7,0±0,3 и фракционированием между 0,3-0,4 насыщения при рН 6,8±0,1 и концентрации белка 1,0±0,2% с последующей лиофилизацией и обогащением полученным антигеном Огава препарата.A known method for the production of Ogawa O-antigen (Russian patent No. 2080121, 1997), in which deep vibrios are cultured in a reactor, neutralization, separation of microbial bodies, isolation and purification of O-antigen from the culture fluid, dialysis, freeze drying, addition to the components of an oral vaccine, tabletting and coating with an acid-resistant coating. Ogawa O-antigen is obtained from a culture fluid aged for 20-30 days at 10-12 ° C with 0.2-0.3% formalin, by precipitation with ammonium sulfate at 0.5 saturation at pH 7.0 ± 0, 3 and fractionation between 0.3-0.4 saturation at pH 6.8 ± 0.1 and protein concentration 1.0 ± 0.2%, followed by lyophilization and enrichment of the preparation with the Ogawa antigen.
Известен способ получения О-антигена штамма возбудителя холеры 0139 серовара (Джапаридзе М.Н., Наумов А.В., Громова О.В. и др. Использование нового штамма Vibrio cholerae 0139 в качестве продуцента энтеральной химической вакцины. Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии, 1996; 2:52-55), в котором выделение антигена из культуральной жидкости проводится фракционированием сульфатом аммония в интервале 0,2-0,8 насыщения при рН 7,0±0,3, с последующим диализом и лиофилизацией.A known method for producing the O-antigen of the strain of the causative agent of cholera 0139 serovar (Dzhaparidze M.N., Naumov A.V., Gromova O.V. et al. Use of a new strain of Vibrio cholerae 0139 as a producer of enteric chemical vaccine. Journal of Microbiology, Epidemiology and immunology, 1996; 2: 52-55), in which the selection of antigen from the culture fluid is carried out by fractionation of ammonium sulfate in the range of 0.2-0.8 saturation at pH 7.0 ± 0.3, followed by dialysis and lyophilization.
Недостатком описанных способов является применение значительного количества сульфата аммония, затрачиваемого на выделение O-антигенов из большого объема культуральной жидкости.The disadvantage of the described methods is the use of a significant amount of ammonium sulfate spent on the allocation of O-antigens from a large volume of culture fluid.
Известен способ получения O-антигена холерного очищенного для специфической индикации и диагностики холеры (патент России №2143280, 1999 г.), сущность которого заключается в том, что из нативного O-антигена удаляют балластные белки осаждением их при рН 4,4±0,2 с последующим центрифугированием, далее концентрируют и отделяют неспецифические примеси с молекулярной массой менее 100 кДа ультрафильтрацией, а неспецифические примеси с молекулярной массой менее 300 кДа отделяют колоночной хроматографией. Недостатком данного способа является то, что концентрирование и очистка O-антигена осуществляется в две стадии (ультрафильтрация с последующим хроматографированием).A known method of producing O-antigen of cholera purified for specific indication and diagnosis of cholera (Russian patent No. 2143280, 1999), the essence of which is that ballast proteins are removed from the native O-antigen by precipitation at pH 4.4 ± 0, 2 followed by centrifugation, then non-specific impurities with a molecular weight of less than 100 kDa are then concentrated and separated by ultrafiltration, and non-specific impurities with a molecular weight of less than 300 kDa are separated by column chromatography. The disadvantage of this method is that the concentration and purification of O-antigen is carried out in two stages (ultrafiltration followed by chromatography).
Известным и наиболее близким к заявляемому решению является способ получения O-антигена (Дятлов И.А., Нижегородцев С.А., Громова О.В. и др. Разработка ультрафильтрационной технологии получения O-антигена холерного вибриона для производства вакцин. Пробл. особо опасных инф. 2001; 2(82):133-139), реализованный в технологии производства вакцины холерной бивалентной химической таблетированной, сущность которого заключается в том, что нативный О-антиген, полученный при глубинном культивировании V.cholerae O1 классического биовара штамма М-41 серовара Огава и отделенный от биомассы центрифугированием, концентрируют ультрафильтрацией в тупиковом режиме на установке с модулями из полых волокон с номинальной отсечкой по молекулярной массе 17 кДа при давлении фильтруемого материала на входе в установку с модулями из полых волокон, равном 0,02-0,03 МПа, со средней удельной скоростью фильтрации 8-12 дм3/м2/ч. При данном способе концентрирования O-антиген, имеющий молекулярную массу 800-1000 кДа, остается внутри пор полых волокон, а балластные вещества с молекулярной массой менее 17 кДа отводятся в линию фильтрата. Сконцентрированный в порах полых волокон O-антиген смывают стерильной дистиллированной водой через линию отвода фильтрата. Недостатками данного способа являются следующие: большие потери при получении концентрированного O-антигена вследствие того, что значительная часть O-антигена остается в порах полых волокон после его смыва; низкая средняя удельная скорость фильтрации, обусловленная тем, что процесс фильтрации происходит при маленьком давлении фильтруемого материала на входе в установку с модулями из полых волокон и применением ультрафильтрационных модулей с малым значением номинальной отсечки по молекулярной массе.Known and closest to the claimed solution is a method for producing O-antigen (Dyatlov I.A., Nizhegorodtsev S.A., Gromova O.V. et al. Development of ultrafiltration technology for producing O-antigen of cholera vibrio for vaccine production. Problem. Particular dangerous inf. 2001; 2 (82): 133-139), implemented in the technology for the production of a bivalent chemical tablet cholera vaccine, the essence of which is that the native O-antigen obtained by deep cultivation of V. cholerae O1 of the classic biovar strain M- 41 Serovar Ogawa and separated from biomass by centrifugation, concentrated by ultrafiltration in a dead end mode on a plant with hollow fiber modules with a nominal cut-off of molecular weight of 17 kDa at a pressure of the filtered material at the inlet of the plant with hollow fiber modules equal to 0.02-0.03 MPa, with the average specific filtration rate of 8-12 DM 3 / m 2 / h With this concentration method, an O-antigen having a molecular weight of 800-1000 kDa remains inside the pores of the hollow fibers, and ballast materials with a molecular weight of less than 17 kDa are diverted to the filtrate line. O-antigen concentrated in the pores of the hollow fibers is washed off with sterile distilled water through the filtrate discharge line. The disadvantages of this method are the following: large losses in obtaining concentrated O-antigen due to the fact that a significant part of the O-antigen remains in the pores of the hollow fibers after washing off; low average specific filtration rate, due to the fact that the filtration process occurs at a small pressure of the filtered material at the inlet of the installation with hollow fiber modules and the use of ultrafiltration modules with a small nominal molecular weight cut-off.
Технический результат заключается в увеличении выхода получаемого продукта - O-антигена с сохранением показателей качества препарата и повышении средней удельной скорости фильтрации.The technical result consists in increasing the yield of the obtained product - O-antigen while maintaining the quality indicators of the drug and increasing the average specific filtration rate.
Технический результат достигается тем, что концентрирование O-антигена осуществляют путем проточной фильтрации через мембранные модули с номинальной отсечкой по молекулярной массе 500 кДа под давлением 0,24-0,26 МПа.The technical result is achieved in that the concentration of O-antigen is carried out by flow filtration through membrane modules with a nominal cut-off by molecular weight of 500 kDa under a pressure of 0.24-0.26 MPa.
Сравнение существенных признаков заявляемого способа получения концентрированного О-антигена и наиболее близкого к нему способа показывает, что общим для них является процесс концентрирования О-антигена V.cholerae.A comparison of the essential features of the proposed method for producing concentrated O-antigen and the method closest to it shows that the process of concentration of V. cholerae O-antigen is common to them.
Существенными отличительными признаками заявляемого способа являются: концентрирование осуществляют в режиме проточной (тангенциальной) фильтрации через мембранные фильтры с номинальной отсечкой по молекулярной массе 500 кДа под давлением 0,24-0,26 МПа, что позволяет увеличить среднюю удельную скорость фильтрации. Осуществление процесса ультрафильтрации в режиме проточной фильтрации с отводом сконцентрированного O-антигена в отдельную емкость, что исключает операцию смыва O-антигена и приводит к уменьшению его потерь.Salient features of the proposed method are: the concentration is carried out in flow (tangential) filtration through membrane filters with a nominal cut-off molecular weight of 500 kDa under a pressure of 0.24-0.26 MPa, which allows to increase the average specific filtration rate. Implementation of the ultrafiltration process in the flow filtration mode with the removal of concentrated O-antigen into a separate container, which excludes the operation of washing off the O-antigen and reduces its losses.
Фильтрация в проточном (тангенциальном) потоке является разделительным методом, в котором поток жидкости направляется вдоль мембраны, омывая ее поверхность. Такой смывающий эффект позволяет постоянно удалять отложения, предотвращая их скапливание и образование слоя на поверхности фильтра, которое известно под названием концентрационной поляризации, уменьшающей скорость фильтрации. Материал мельче номинального порога отсечения по молекулярной массе проходит через ультрафильтрационную мембрану в линию фильтрата. Материал, превышающей номинальный порог отсечения по молекулярной массе, "отбрасывается" мембраной и концентрируется в отдельную емкость. Потери продукта за счет незначительного "мертвого" объема мембраны минимальны и сводятся к нулю путем промывки мембранного модуля дистиллированной водой в количестве, соответствующем "мертвому" объему мембраны.Filtration in the flow (tangential) flow is a separation method in which the fluid flow is directed along the membrane, washing its surface. This flushing effect allows you to constantly remove deposits, preventing their accumulation and the formation of a layer on the filter surface, which is known as concentration polarization, which reduces the filtration rate. Material smaller than the nominal cutoff threshold for molecular weight passes through the ultrafiltration membrane into the filtrate line. Material that exceeds the nominal cutoff threshold for molecular weight is “discarded” by the membrane and concentrated in a separate container. Product losses due to a slight “dead” volume of the membrane are minimal and are reduced to zero by washing the membrane module with distilled water in an amount corresponding to the “dead” volume of the membrane.
Подобранные заявителем режимы, параметры ведения технологического процесса концентрирования O-антигена на пористых мембранах и их характеристики обеспечивают снижение потерь и увеличение средней удельной скорости фильтрации.The modes selected by the applicant, the parameters of the technological process for concentrating O-antigen on porous membranes and their characteristics provide a reduction in losses and an increase in the average specific filtration rate.
Возможность осуществления заявляемого изобретения подтверждается следующими примерами.The possibility of carrying out the claimed invention is confirmed by the following examples.
Пример 1. Выбор мембран с номинальной отсечкой по молекулярной массе для концентрирования O-антигена холерного вибриона.Example 1. The choice of membranes with a nominal cut-off molecular weight for the concentration of O-antigen of cholera vibrio.
Для работы использовали нативные O-антигены V.cholerae O1 классического биовара штамма М-41 серовара Огава, полученные способом глубинного культивирования и отделенные от биомассы центрифугированием согласно регламенту производства №ПР 01898109-05-06. Для концентрирования нативного О-антигена применяли мембранные модули с номинальной отсечкой по молекулярной массе 20, 30, 50, 100, 300 и 500 кДа.We used native V. cholerae O1 O-antigens of the classic biovar of strain M-41 of Serovar Ogawa, obtained by the method of deep cultivation and separated from the biomass by centrifugation according to production regulations No. PR 01898109-05-06. To concentrate the native O-antigen, membrane modules with a nominal cut-off of 20, 30, 50, 100, 300, and 500 kDa were used.
Концентрированный O-антиген получали путем рециркуляции нативного O-антигена через систему (установка с кассетным модулем) с отводом фильтрата в отдельную емкость под давлением 0,14-0,18 МПа. Коэффициент кратности концентрирования фильтруемого материала по объему равен 10 раз, что соответствует способу-прототипу. Среднюю удельную скорость фильтрации определяли по объему фильтрата, удаленному за промежуток времени от начала до окончания процесса концентрирования, отнесенную к площади фильтрующей поверхности мембран. Результаты исследований представлены в таблице 1, в которой отражены показатели, полученные при концентрировании с использованием мембранных модулей с различными номинальными отсечками по молекулярной массе.Concentrated O-antigen was obtained by recirculation of the native O-antigen through a system (installation with a cassette module) with the filtrate discharged into a separate container under a pressure of 0.14-0.18 MPa. The ratio of the concentration of the filtered material by volume is 10 times, which corresponds to the prototype method. The average specific filtration rate was determined by the volume of the filtrate, removed over the period from the beginning to the end of the concentration process, referred to the area of the filtering surface of the membranes. The research results are presented in table 1, which reflects the indicators obtained by concentration using membrane modules with different nominal cut-offs by molecular weight.
Анализ данных, представленных в таблице 1, показывает, что при использовании всех мембранных модулей для концентрирования безмикробных центрифугатов содержание О-антигена в концентрате увеличивается, при этом в фильтрате он не обнаруживается. Наибольшая средняя удельная скорость фильтрации определена при использовании мембранного модуля с номинальной отсечкой по молекулярной массе 500 кДа.An analysis of the data presented in table 1 shows that when all membrane modules are used to concentrate microbial centrifugates, the O-antigen content in the concentrate increases, while it is not found in the filtrate. The highest average specific filtration rate was determined using a membrane module with a nominal cutoff of molecular weight of 500 kDa.
Пример 2. Выбор параметров ведения технологического процесса концентрирования O-антигенаExample 2. The choice of the parameters of the technological process of concentration of O-antigen
Для работы использовали нативные O-антигены V.cholerae O1 классического биовара штамма М-41 серовара Огава, полученные способом глубинного культивирования и отделенные от биомассы центрифугированием согласно регламенту производства №ПР 01898109-05-06. Для концентрирования нативного О-антигена использовали мембранный модуль с номинальной отсечкой по молекулярной массе 500 кДа. Устанавливали значения давлений на входе в установку с мембранным модулем, указанные в таблице 2. Содержание O-антигена в безмикробных центрифугатах в реакции иммунной диффузии с O1-сывороткой составляло 1:8. Концентрирование заканчивали при уменьшении объема безмикробного центрифугата в 10 раз. Среднюю удельную скорость фильтрации определяли по объему фильтрата, удаленному за промежуток времени от начала до окончания процесса концентрирования, отнесенную к площади фильтрующей поверхности мембран. Результаты исследований по обоснованию оптимальных параметров давления при проведении процесса концентрирования О-антигена штамма V.cholerae M41 серовара Огава при использовании мембранного модуля с НОММ 500 кДа представлены в таблице 2.We used native V. cholerae O1 O-antigens of the classic biovar of strain M-41 of Serovar Ogawa, obtained by the method of deep cultivation and separated from the biomass by centrifugation according to production regulations No. PR 01898109-05-06. To concentrate the native O-antigen, a membrane module with a nominal cutoff of 500 kDa molecular weight was used. The pressure values at the inlet to the installation with the membrane module were set forth in Table 2. The content of O-antigen in microbial centrifuges in the reaction of immune diffusion with O1-serum was 1: 8. Concentration was completed by reducing the volume of the microbial centrifugate 10 times. The average specific filtration rate was determined by the volume of the filtrate, removed over the period from the beginning to the end of the concentration process, referred to the area of the filtering surface of the membranes. The results of studies to substantiate the optimal pressure parameters during the concentration process of the O-antigen of strain V. cholerae M41 of Serovar Ogawa using a membrane module with HOMM 500 kDa are presented in table 2.
Как следует из данных таблицы 2, оптимальным параметром давления при проведении процесса концентрирования является 0,24-0,26 МПа, при котором наблюдается максимальная средняя удельная скорость фильтрации.As follows from the data in table 2, the optimal pressure parameter during the concentration process is 0.24-0.26 MPa, at which the maximum average specific filtration rate is observed.
Пример 3. Получение концентрированного O-антигена V.cholerae О1 классического биовара штамма М-41 серовара Огава мембранным способом в режиме проточной фильтрации с уменьшением потерь и увеличением средней удельной скорости фильтрации.Example 3. Obtaining a concentrated O-antigen of V. cholerae O1 of a classic biovar of strain M-41 of Serovar Ogawa by a membrane method in a flow filtration mode with a decrease in losses and an increase in the average specific filtration rate.
Для работы использовали нативные O-антигены V. cholerae O1 классического биовара штамма М-41 серовара Огава, полученные способом глубинного культивирования и отделенные от биомассы центрифугированием согласно регламенту производства №ПР 01898109-05-06. Для концентрирования нативного O-антигена использовали мембранные модули с номинальной отсечкой по молекулярной массе 500 кДа.We used native O-antigens of V. cholerae O1 of the classical biovar of strain M-41 of Serovar Ogawa, obtained by the method of deep cultivation and separated from the biomass by centrifugation according to production regulations No. PR 01898109-05-06. To concentrate the native O-antigen, membrane modules with a nominal cutoff of 500 kDa molecular weight were used.
Концентрированный О-антиген получали путем рециркуляции нативного O-антигена через систему (установка с кассетным модулем) с отводом фильтрата в отдельную емкость под давлением 0,24-0,26 МПа. Коэффициент кратности концентрирования фильтруемого материала по объему равен 10 раз, что соответствует способу-прототипу. Средняя удельная скорость фильтрации концентрирования O-антигена составила: при использовании способа-прототипа (10±2) дм3/м2/ч, по заявляемому способу (79±2) дм3/м2/ч. Таким образом, производительность процесса в заявляемом способе увеличивается почти в 4 раза.Concentrated O-antigen was obtained by recirculation of the native O-antigen through the system (installation with a cassette module) with the filtrate discharged into a separate container under a pressure of 0.24-0.26 MPa. The ratio of the concentration of the filtered material by volume is 10 times, which corresponds to the prototype method. The average specific filtration rate of O-antigen concentration was: when using the prototype method (10 ± 2) dm 3 / m 2 / h, according to the claimed method (79 ± 2) dm 3 / m 2 / h. Thus, the productivity of the process in the present method increases by almost 4 times.
Характеристики лиофильно высушенных О-антигенов, полученных по способу-прототипу и заявляемому способам, приведены в таблице 3.Characteristics of freeze-dried O-antigens obtained by the prototype method and the claimed methods are shown in table 3.
Данные таблицы свидетельствуют о том, что значения показателя качества препарата соответствуют требованиям регламента производства вакцины холерной бивалентной химической таблетированной, при этом исходя из объемов безмикробных центрифугатов, подвергнутых концентрированию по способу-прототипу и заявляемому способу, и количества полученного сухого препарата O-антигена, его потери снижаются на 40%.The data in the table indicate that the values of the quality indicator of the drug correspond to the requirements for the production of cholera bivalent chemical tablet vaccines, based on the volumes of microbial centrifuges subjected to concentration according to the prototype method and the claimed method, and the amount of dry O-antigen preparation obtained, its loss reduced by 40%.
Claims (1)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2011108391/15A RU2445116C1 (en) | 2011-03-03 | 2011-03-03 | METHOD FOR CONCENTRATING NATIBE O-ANTIGEN Vibrio cholerae |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2011108391/15A RU2445116C1 (en) | 2011-03-03 | 2011-03-03 | METHOD FOR CONCENTRATING NATIBE O-ANTIGEN Vibrio cholerae |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2445116C1 true RU2445116C1 (en) | 2012-03-20 |
Family
ID=46030042
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2011108391/15A RU2445116C1 (en) | 2011-03-03 | 2011-03-03 | METHOD FOR CONCENTRATING NATIBE O-ANTIGEN Vibrio cholerae |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2445116C1 (en) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2535122C1 (en) * | 2013-11-06 | 2014-12-10 | Федеральное казенное учреждение здравоохранения "Российский научно-исследовательский противочумный институт "Микроб" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека ("РосНИПЧИ "Микроб") | Method for preparing choleragen anatoxin |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5653986A (en) * | 1993-11-30 | 1997-08-05 | University Of Maryland At Baltimore | Vibrio cholerae bengal serogroup-O139 capsular polysaccharide and protein conjugates thereof |
RU2143280C1 (en) * | 1999-05-26 | 1999-12-27 | Федеральное государственное учреждение Российский научно-исследовательский противочумный институт "Микроб" Министерства здравоохранения РФ | Method of preparing purified choleraic 0-antigen |
RU2159128C1 (en) * | 2000-02-24 | 2000-11-20 | Федеральное государственное учреждение Российский научно-исследовательский противочумный институт "Микроб" МЗ РФ | Oral chemical vaccine for protecting against cholera |
-
2011
- 2011-03-03 RU RU2011108391/15A patent/RU2445116C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5653986A (en) * | 1993-11-30 | 1997-08-05 | University Of Maryland At Baltimore | Vibrio cholerae bengal serogroup-O139 capsular polysaccharide and protein conjugates thereof |
RU2143280C1 (en) * | 1999-05-26 | 1999-12-27 | Федеральное государственное учреждение Российский научно-исследовательский противочумный институт "Микроб" Министерства здравоохранения РФ | Method of preparing purified choleraic 0-antigen |
RU2159128C1 (en) * | 2000-02-24 | 2000-11-20 | Федеральное государственное учреждение Российский научно-исследовательский противочумный институт "Микроб" МЗ РФ | Oral chemical vaccine for protecting against cholera |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2535122C1 (en) * | 2013-11-06 | 2014-12-10 | Федеральное казенное учреждение здравоохранения "Российский научно-исследовательский противочумный институт "Микроб" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека ("РосНИПЧИ "Микроб") | Method for preparing choleragen anatoxin |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2484135C2 (en) | Method of cleaning intended to produce cleaned virus of vesicular stomatitis from cellular culture | |
CN1195577C (en) | Filter membranes for physiologically active substances | |
RU2010151414A (en) | METHOD FOR PRODUCING MILK FRACTIONS ENRICHED WITH SECRET IMMUNOGLOBULINS | |
RU2013144326A (en) | METHOD FOR PRODUCING SUGAR SOLUTION | |
RU2014125902A (en) | IMPROVED METHOD OF PRELIMINARY WATERING FOR PROCESSING BIOMASS | |
EP0776362A1 (en) | Method for preparing an influenza virus, antigens obtained and applications thereof | |
EP2806024A1 (en) | Method for purifying the rabies virus | |
CN111920944B (en) | Preparation method of influenza virus subunit vaccine stock solution | |
CN102161702A (en) | Method for producing human blood albumin | |
RU2018106915A (en) | METHOD FOR EXTRACTION OF SAPONINS FROM AGRICULTURAL PRODUCTS | |
TWI742377B (en) | A preparation method of precursor of recombinant human insulin or analog thereof | |
US20240238728A1 (en) | Isolation and purification method of extracellular vesicles | |
RU2445116C1 (en) | METHOD FOR CONCENTRATING NATIBE O-ANTIGEN Vibrio cholerae | |
CN1477130A (en) | Separation and purification process of lentinan | |
CN102018835B (en) | Method for separating effective components in traditional Chinese medicine curculigo orchioides by membrane separation method | |
CN102133399A (en) | Novel process for preparing influenza virus split vaccine | |
CN111574639A (en) | Method for separating and purifying nitraria tangutorum bobr polysaccharide | |
CN102835652B (en) | Method for extracting cordyceps hirsutella sinensis mycelia on basis of membrane technology | |
CN104758919B (en) | A kind of calf serum de-protein injection and preparation method thereof | |
RU2493872C1 (en) | Method for influenza virus purification | |
CA3219951A1 (en) | Method and device for isolating and purifying minute useful substance | |
RU2451522C1 (en) | Method for concentration of native cholerogen-anatoxin and o-antigen of 569 v serovar inaba strain classic biovar vibrio cholerae 01 | |
CN106146608A (en) | A kind of extraction preparation method of apidaecin | |
CN101215553B (en) | Extraction method for ferulic acid esterase | |
CN102988989B (en) | Refining and extracting method of dextran by membrane separation |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
TK4A | Correction to the publication in the bulletin (patent) |
Free format text: AMENDMENT TO CHAPTER -FG4A- IN JOURNAL: 8-2012 FOR TAG: (54) |
|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20150304 |