RU2430728C1

RU2430728C1 - Комбинированное антиагрегантное и антиоксидантное лекарственное средство

Info

Publication number: RU2430728C1
Application number: RU2010100876/15A
Authority: RU
Inventors: Антон Эдуардович Левых (UA); Антон Эдуардович Левых; Виталий Иосифович Мамчур (UA); Виталий Иосифович Мамчур; Иван Антонович Мазур (UA); Иван Антонович Мазур; Людмила Ивановна Кучеренко (UA); Людмила Ивановна Кучеренко; Геннадий Викторович Георгиевский (UA); Геннадий Викторович Георгиевский; Оксана Владимировна Тригубчак (UA); Оксана Владимировна Тригубчак
Original assignee: Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственное объединение "Фарматрон" (НПО "Фарматрон")
Priority date: 2010-01-12
Filing date: 2010-01-12
Publication date: 2011-10-10
Also published as: RU2010100876A

Abstract

Изобретение относится к лекарственным средствам и касается комбинированного антиагрегантного и антиоксидантного лекарственного средства, содержащего как активную основу ацетилсалициловую кислоту, отличающегося тем, что активная основа дополнительно содержит тиотриазолин. Предложенное комбинированное лекарственное средство обладает более выраженным антиагрегантным и антиоксидантным действием и обеспечивает снижение частоты проявлений нежелательных эффектов длительной фармакотерапии. 1 з.п. ф-лы, 1 ил., 7 табл.

Description

Изобретение относится к медицине и фармации, в частности, к лекарственным средствам, используемым для лечения и профилактики заболеваний, характеризующихся повышенной тенденцией к тромбозам (инфаркт миокарда, ишемический инсульт).

Известно лекарственное средство «Ацетилсалициловая кислота» [Машковский М.Д. Лекарственные средства, 15 издание. / М.Д.Машковский // М.: Медицина. - 2005. - T.1. - С.41-42].

Ацетилсалициловая кислота (АСК) является одним из наиболее эффективных нестероидных противовоспалительных лекарственных средств (НПВС). В то же время важной особенностью АСК является ее способность оказывать антиагрегационное действие, ингибировать спонтанную и индуцированную агрегацию тромбоцитов. На сегодня АСК в низких дозах (75-150 мг) однозначно рекомендуется как препарат первого ряда для вторичной профилактики кардиоваскулярных событий и смерти у кардиологических пациентов высокого риска [3]. Современные международные рекомендации по лечению различных категорий кардиологических пациентов высокого риска классифицируют применение ацетилсалициловой кислоты на уровне рекомендаций 1 класса (безусловно доказанная полезность данного терапевтического подхода) и уровня доказательности А (эффективность и безопасность препарата при данных клинических состояниях доказана минимум в двух многоцентровых рандомизированных плацебо контролированных исследованиях).

Побочным негативным действием ацетилсалициловой кислоты является повреждение слизистых оболочек. Использование АСК может привести к возникновению эрозий из язв слизистых оболочек желудочно-кишечного тракта (в первую очередь желудка и 12-перстной кишки), а также к кровотечению. Эти побочные эффекты являются дозозависимыми, и частота их проявления значительно возрастает при использовании высоких доз АСК. Однако даже при использовании низких «кардиологических» доз АСК для антитромбоцитарной терапии нарушения со стороны желудочно-кишечного тракта остаются одними из наиболее распространенных побочных действий. Кроме того, АСК может приводить к развитию реакций гиперчувствительности (бронхоспазм, отек, крапивница и другие кожные реакции), тромбоцитопении, нарушению функций печени и почек.

Известное лекарственное средство тиотриазолин [Тиотриазолин. / [И.А.Мазур, Н.А.Волошин, И.С.Чекман и др.]. - Запорожье, Львов. - 2005. - С.26-40] обладает ярко выраженными антиоксидантными свойствами - реактивирует такие антиоксидантные ферменты, как супероксиддисмутаза и каталаза, снижает степень окислительной модификации белка и липопероксидации, снижает образование супероксидрадикала и пероксинитрита. Кроме этого, тиотриазолин обладает выраженным энерготропным эффектом, что обуславливает улучшение метаболических процессов различных органов и систем. Титриазолин характеризуется наличием гастропротекторного, гепатопротекторного, кардиопротекторного и нейропротекторного действия.

Учитывая широкое применение ацетилсалициловой кислоты в качестве антиагрегантного средства, нами она принята за прототип.

В основу изобретения поставлена задача - разработать лекарственное средство с широким спектром фармакологического действия и низкой частотой развития побочных эффектов, превосходящее прототип по достигаемому антиагрегантному эффекту.

Решение поставленной задачи обеспечивает комбинированное антиагрегантное и антиоксидантное средство, содержащее в качестве активной основы ацетилсалициловую кислоту, за счет того, что активная основа дополнительно содержит тиотриазолин при соотношении ацетилсалициловой кислоты к тиотриазолину 4:1.

Фармакологический эффект от использования изобретения

Использование комбинации ацетилсалициловая кислота + тиотриазолин приводит к усилению антиагрегантных свойств ацетилсалициловой кислоты. Результаты исследований показали, что на фоне введения исследуемой комбинации уменьшались степень и скорость индуцированной агрегации тромбоцитов при использовании основных индукторов агрегации (коллагена, аденозиндифосфата, арахидоновой кислоты). Также было отмечено значительное снижение ульцерогенных свойств ацетилсалициловой кислоты, обусловленных нарушением синтеза гастропротекторных простагландинов в слизистой оболочке желудка. В результате скрининговых исследований удалось выявить, что наиболее удачной комбинацией является использование препаратов ацетилсалициловая кислота + тиотриазолин в соотношении 4:1, при которой каждый из компонентов комбинации использован в своей среднетерапевтической дозе (по антиагрегантной активности).

Использование предложенного комбинированного лекарственного средства, согласно приведенному ниже описанию, позволит повысить его антиагрегантную активность в сравнении с ацетилсалициловой кислотой (табл.1-3), что обусловлено наличием собственной активности титриазолина в отношении ингибирования агрегации тромбоцитов, способностью стабилизировать мембраны тромбоцитов, уменьшая тем самым выделение из них арахидоновой кислоты, в процессе метаболизма которой образуется один из наиболее мощных индукторов агрегации и вазоконстрикторов - тромбоксан А₂.

Таблица 1
Влияние препаратов на максимальную степень индуцированной агрегации тромбоцитов
Группы	Показатели	Используемый индуктор агрегации
		Коллаген (2 мг/мл)	Арахидоновая кислота (1 ммоль/л)	АДФ (20 мкмоль/л)	АДФ (5 мкмоль/л)
		Максимальная степень агрегации, %
Контроль (интактные животные) (n=6)	М±m	82,0±4,16	82,5±3,67	70,8±3,33	44,5±3,55
Ацетилсалициловая кислота,	М±m	65,6±2,66	55,6±8,79	56,8±3,82	42,7±3,68
10 мг/кг (n=6)	%	-20,0*	-32,6*	-19,8*	-4.0
Ацетилсалициловая кислота, 10 мг/кг + Тиотриазолин, 2,5 мг/кг (n=6)	М±m	52,4±4,53	49,4±6,56	35,1±2,9	30,5±2,3
	%	-36,1/*	-40,1*	-50,4/*	-31,5/*
Примечание: В таблице изменения показателей приведены в процентах от контрольной группы, которые приняты за 100%. (+) - увеличение, (-) -уменьшение.
* - различия достоверны по отношению к контрольной группе (Р<0,05);
** - различия достоверны по отношению к группе АСК, 10 мг/кг(Р<0,05).

Таблица 2
Влияние препаратов на скорость (за 30 сек) индуцированной агрегации тромбоцитов
Группы	Показатели	Используемый индуктор агрегации
		Коллаген (2 мг/мл)	Арахидоновая кислота (1 ммоль/л)	АДФ (20 мкмоль/л)	АДФ (5 мкмоль/л)
		Скорость агрегации (%/мин)
Контроль (интактные животные) (n=6)	М±m	16,1±1,27	43,3±3,85	50,3±3,53	45,2±4,07
Ацетилсалициловая кислота, 10 мг/кг (n=6)	М±m	14,1±1,04	51,5±16,43	36,8±1,93	42,1±3,22
Ацетилсалициловая кислота, 10 мг/кг (n=6)	%	-12,4	+18,9	-26,8*	-6,9
Ацетилсалициловая кислота, 10 мг/кг + Тиотриазолин, 2,5 мг/кг (n=5)	М±m	6,7±0,66	59,7±11,01	32,7±1,17	29,7±2,42
	%	-58,4/*	+37,9	-35,0*	-34,3/*
Примечание: В таблице изменения показателей приведены в процентах от контрольной группы, которые приняты за 100%. (+) - увеличение, (-) - уменьшение. * - различия достоверны по отношению к контрольной группе (Р<0,05); ** - различия достоверны по отношению к группе АСК, 10 мг/кг (Р<0,05).

Таблица 3 Влияние препаратов на время максимума индуцированной агрегации тромбоцитов
Группы	Показатели	Используемый индуктор агрегации
		Коллаген (2 мг/мл)	Арахидоновая кислота (1 ммоль/л)	АДФ (20 мкмоль/л)	АДФ (5 мкмоль/л)
		Время максимума, с
Контроль (интактные животные) (n=6)	М±m	932±58	318±51	454±34	152±12
Ацетилсалициловая кислота, 10 мг/кг (n=6)	М±m	717±58	330±163	364±33	151±15
Ацетилсалициловая кислота, 10 мг/кг (n=6)	%	-23,1*	+3,8	-19,8	-0,7
Ацетилсалициловая кислота, 10 мг/кг + Тиотриазолин, 2,5 мг/кг (n=6)	М±m	649±26	507±104	351±28	167±18
	%	-30,4*	+59,4	-22,7*	+9,9
Примечание: В таблице изменения показателей приведены в процентах от контрольной группы, которые приняты за 100%. (+) - увеличение, (-) - уменьшение.
* - различия достоверны по отношению к контрольной группе (Р<0,05);
** - различия достоверны по отношению к группе АСК, 10 мг/кг (Р<0,05).

Для реализации этой задачи имеет значение снижение образования активных форм кислорода и реактивация антиоксидантной системы, а также гастропротекторное действие, присущее тиотриазолину, что подтверждается нашими данными по изучению ульцерогенности (табл.4).

Таблица 4
Воздействие препаратов на развитие поражений слизистой оболочки желудка
Показатель	Группы животных
	1	2	3	4
Язвенный индекс %	10,17	4,33	3,67	0
	+177,1	+18,0	-	-
Примечание:
Группы животных, которые получали препараты (в каждой группе n=6):
1 - ацетилсалициловая кислота (10 мг/кг);
2 - ацетилсалициловая кислота (10 мг/кг) + тиотриазолин (2,5 мг/кг);
3 - растворитель в адекватном количестве (контрольная группа);
4 - полноценное питание, препараты не вводились.

В таблице изменения показателей приведены в процентах от контрольной группы, которые приняты за 100%. (+) - увеличение, (-) - уменьшение.

Суть изобретения объясняется приведенным ниже описанием предлагаемого лекарственного средства и примерами его использования при фиксированном соотношении активных компонентов и лекарственного средства, принятого в качестве прототипа.

В результате исследования были установлены особенности проявлений антиагрегантного и ульцерогенного действия изучаемых препаратов и их влияния на антиоксидантные эффекты. Препараты вводили внутрижелудочно (per os) на 1% крахмальной слизи ежедневно в течение 5 дней в дозах, указанных в таблицах 1-3 и 5. В каждой группе использовалось по 6 животных.

Таблица 5
Влияние внутрижелудочного введения тиотриазолина на максимальную степень АДФ-индуцированной агрегации тромбоцитов
Группы	Показатели	Максимальная степень агрегации, %
Контроль (интактные животные, n=6)	М±m	70,8±3,33
Тиотриазолин, 0,1 мг/кг	М±m	69,9±3,52
(n=6)	%	-1,3
Тиотриазолин, 0,3 мг/кг	М±m	69,3±2,71
(n=6)	%	-2,1
Тиотриазолин, 1 мг/кг	М±m	66,2±2,97
(n=6)	%	-6,5
Тиотриазолин, 3 мг/кг	М±m	59,8±1,89
(n=6)	%	-15,5*
Тиотриазолин, 10 мг/кг	M±m	54,2±2,53
(n=6)	%	-23,4*
Тиотриазолин, 30 мг/кг	M±m	53,1±2,82
(n=6)	%	-25,0*
Тиотриазолин, 100 мг/кг	M±m	52,4±3,25
(n=6)	%	-26,0*
Тиотриазолин, 300 мг/кг	M±m	51,3±3,04
(n=6)	%	-27,5*
Тиотриазолин, 1000 мг/кг	M±m	51,1±3,48
(n=6)	%	-27,8*
Примечание: В таблице изменения показателей приведены в процентах от контрольной группы, которые приняты за 100%. (+) - увеличение, (-) - уменьшение.
* - различия достоверны по отношению к контрольной группе (Р<0,05).

Таким образом, предложенное лекарственное средство, согласно изобретению, проявляет более высокую антиагрегантную активность в сравнении с известным препаратом - ацетилсалициловой кислотой, при этом снижая побочные действия ацетилсалициловой кислоты. В предложенном лекарственном средстве наблюдается увеличение терапевтического эффекта при той же дозе ацетилсалициловой кислоты и с меньшим отрицательным влиянием на показатели физиологической активности организма.

Для иллюстрации приводим следующие примеры изучения внутрижелудочно (per os) введенных препаратов по изобретению.

Пример 1

Изучение действия тиотриазолина и комбинации препаратов на параметры индуцированной агрегации тромбоцитов.

Кровь для исследования индуцированной агрегации тромбоцитов брали у наркотизированных белых нелинейных крыс массой 220-250 г внутрисердечной пункцией. Свертываемость предупреждалась 3,8% раствором цитрата натрия, добавляемого к крови в соотношении 1:9. Для исключения контактной активации тромбоцитов в работе использовалось только пластмассовая посуда (кюветы, пробирки). Вначале кровь центрифугировали на малых оборотах (15 минут при 100 g). При этом отделяется плазма, богатая тромбоцитами (ПБТ), которую отбирали в пластмассовые пробирки. Затем оставшуюся кровь снова центрифугировали, но уже на более высоких оборотах (15 минут при 200 g). Образующийся после повторного центрифугирования верхний слой является бестромбоцитарной плазмой, которую также отбирали в пластмассовые пробирки. ПБТ использовалась для исследования функциональной активности тромбоцитов (изучение агрегации тромбоцитов), бестромбоцитарная плазма - для калибровки шкалы оптической плотности прибора (светопропускание бестромбоцитарной плазмы принималось за 100% агрегации), и, при необходимости, для разведения богатой тромбоцитами плазмы до стандартного содержания клеток, которое должно составлять 200-250×10⁹/л. Допустимый срок хранения ПБТ при комнатной температуре или с использованием водяной бани при 37°С не более 3 часов после взятия пробы крови, поэтому исследование функциональной активности тромбоцитов проводили в течение этого времени.

Исследование агрегационной способности тромбоцитов проводили по методике G.V.Born на анализаторе агрегации тромбоцитов «SOLAR АР 2110» (Беларусь), используя в качестве индукторов растворы аденозиндифосфата (АДФ) в конечных концентрациях 5 и 20 мкМ (НПО «РЕНАМ», Россия), колагена 2 мг/мл (000 «Технология-Стандарт», Россия) и арахидоновой кислоты 1 мМ («Sigma-Aldrich», Германия). Определяли степень максимальной агрегации, время наступления максимума и скорость агрегации за 30 сек. Тромбоциты при исследовании на агрегометре АР 2110 находятся в условиях, приближающихся к физиологическим, в собственном микромире, при стандартной температуре 37°С и постоянной скорости перемешивания, моделирующей кровообращение, в интактной среде (одноразовые пластиковые кюветы). Мерой агрегационного процесса является графически регистрируемое падение оптической плотности плазмы крови в результате потребления тромбоцитов в агрегатах, образующихся под воздействием индукторов агрегации.

После приготовления всех необходимых растворов (ПБТ, бестромбоцитарная плазма, индукторы агрегации), они выдерживались в термостате в течение 3 минут. Затем на агрегометре определялась оптическая плотность бестромбоцитарной плазмы (ее светопропускание в относительной шкале прибора принималась за 100% агрегации). После этого в агрегометр помещалась кювета с ПБТ и измерялось количество тромбоцитов в образце плазмы (при необходимости производили коррекцию содержания кровяных пластинок путем разбавления ПБТ бестромбоцитарной плазмой) и ее оптическую плотность (светопропускание ПБТ в относительной шкале прибора принималось за 0% агрегации). По завершении калибровки агрегометра начинали изучение процесса агрегации тромбоцитов под влиянием различных индукторов (АДФ, коллаген, арахидоновая кислота). В кювету в 450 мкл ПБТ добавляли 50 мкл раствора индуктора агрегации и фиксировали на агрегометре время добавления. После инициации процесса агрегации наблюдали падение оптической плотности исследуемого образца ПБТ, регистрируемого прибором в виде увеличения показателя «степень агрегации» от 0% и выше (максимум до 100%). При этом на графике «степень агрегации - время» определялось 3 показателя: уровень максимального подъема кривой (максимальная степень агрегации); соответствующее ей время (время максимума) и крутизна подъема кривой (скорость агрегации). Время исследования каждого образца составляло 10 минут.

Результаты исследования влияния внутрижелудочного введения тиотриазолина в широком диапазоне доз (0,1; 0,3; 1; 3; 10; 30; 100; 300 i 1000 мг/кг) на АДФ (20 мкмоль/л) - индуцированную агрегацию тромбоцитов показали, что с увеличением дозы величина оказываемого им эффекта также возрастает (табл.5). При этом анализ полученных данных и построение кривой зависимости «доза - эффект» (чертеж) показал, что по данному действию ЕD₅₀ тиотриазолина составляет 2,52±0,24 мг/кг. Поэтому для последующих исследований была взята доза 2,5 мг/кг.

Анализ показателей агрегатограмм выявил, что внутрижелудочное введение крысам ацетилсалициловой кислоты (10 мг/кг) и ее комбинации с тиотриазолином (2,5 мг/кг) приводит к достоверному угнетению агрегации тромбоцитов при использовании всех основных индукторов (АДФ, коллаген и арахидоновая кислота). При этом различные параметры агрегации (максимальная степень, время максимума и скорость за 30 сек) изменялись по-разному, в зависимости от применяемого индуктора.

Так, использование в качестве индуктора раствора коллагена (2 мг/мл) вызывало достоверное снижение максимальной степени агрегации на 20% (Р<0,05) и 36,1% (Р<0,05) у животных, получавших АСК и комбинированный препарат АСК + тиотриазолин соответственно. Время наступления максимума также снижалось на фоне приема препаратов на 23,1% (Р<0,05) и 30,4% (Р<0,05) соответственно. В отношении влияния на скорость агрегации - АСК вызывала небольшое уменьшение этого показателя, которое было недостоверным, а комбинация АСК + тиотриазолин снижало этот показатель на 58,4% (Р<0,05).

Использование в качестве индуктора агрегации раствора архидоновой кислоты (1 ммоль/л) приводило к снижению основного показателя функциональной активности тромбоцитов - степени агрегации 0 на 32,6% (Р<0,05) при применении АСК и АСК + тиотриазолин соответственно. Комбинированный препарат вызывал замедление наступления максимума агрегации на 59,4%, однако эти изменения были недостоверны. Выраженного влияния на скорость агрегации изучаемые препараты в данном случае не оказывали.

АДФ может использоваться в качестве индуктора агрегации в различных концентрациях. Так, использование его в более высокой концентрации (20 мкмоль/л) вызывает однофазную необратимую агрегацию, которая происходит с такой силой и скоростью, что переход первичной во вторичную фазу агрегации различить невозможно.

Под действием малой дозы АДФ (5 мкмоль/л) происходит только первичная (обратимая) агрегация с последующей дезагрегацией. При использовании в качестве индуктора раствора АДФ (20 мкмоль/л) исследуемые препараты (АСК и АСК + тиотриазолин) вызывали достоверное снижение степени максимальной агрегации на 19,9% (Р<0,05) и 50,4% (Р<0,05) соответственно. Скорость агрегации также снижалась на 26,8% (Р<0,05) и 35% (Р<0,05) соответственно. Влияние на время наступления максимума агрегации было недостоверным. При использовании раствора АДФ в более низкой концентрации (5 мкмоль/л) АСК практически не оказывала влияния на параметры агрегации, в то время, как комбинированный препарат АСК + тиотриазолин вызывал достоверное снижение степени и скорости агрегации 31,5% (Р<0,05) и 34,3% (Р<0,05) соответственно.

Результаты исследований предоставлены в таблицах 1-3.

Пример 2

Изучение ульцерогенного действия ацетилсалициловой кислоты и ее комбинации с тиотриазолином

Принцип метода заключается в макроскопичном исследовании слизистой желудков крыс, которые получали препараты на фоне голодания. Исследуемые вещества вводились внутрижелудочно один раз в сутки начиная со второго дня голодания (наличие свободного доступа к воде и отсутствие пищи). После двукратного введения препаратов (на 2 и 3 день эксперимента) животных декапитировали на четвертый день эксперимента (через 24 часа последнего введения исследуемых препаратов), извлекали желудки, рассекали их по малой кривизне и промывали и физиологическом растворе для удаления содержимого. Оценку ульцерогенного эффекта проводили визуально по количеству язвенных дефектов, что отразилось в баллах и язвенном индексе ЯИ.

Была использована 4-балльная шкала для оценки степени поражения слизистой оболочки желудка:

0 - отсутствие изменений;

1 - эрозия;

2 - единичные язвы;

3 - множественные язвы;

4 - прободные язвы.

ЯИ вычисляли по формуле:

Группы животных, которые получали препараты (в каждой группе по 6 животных):

1 - ацетилсалициловая кислота (10 мг/кг);

2 - ацетилсалициловая кислота (10 мг/кг) + тиотриазолин (2,5 мг/кг);

3 - физиологический раствор в адекватном объеме (контрольная группа);

4 - полноценное питание, препараты не вводились. Результаты исследований предоставлены в таблице 4.

Пример 3

Изучение влияния комбинации препаратов на активность перекисного окисления липидов (ПОЛ)

Интенсивность процессов свободно-радикального окисления в структурах мозга (ствол, гиппокамп, кора) и сыворотке крови белых нелинейных крыс оценивали по накоплению продуктов - диеновых конъюгатов (ДК) и малонового диальдегида (МДА).

Состояние антиоксидантной системы оценивали по активности супероксиддисмутазы (СОД) и каталазы.

Препараты вводили внутрижелудочно (per os) на 1% крахмальной слизи ежедневно в течение 5 дней в дозах, указанных в таблицах 6 и 7. В каждой группе использовалось по 6 животных.

Через 60 мин последнего введения препаратов животных подвергали атравматической фиксации и моментальной декапитации. Отдельно выделяли и анализировали следующие участки головного мозга: кора, гиппокамп, ствол.

Замороженные в азоте ткани мозга гомогенизировали в фарфоровых ступках. После центрифугирования при температуре 14°С и 15000g супернатант сливали в чистые пробирки. Определение активности СОД проводили по методу Чевари С. и соавт. по конкуренции с нитросиним тетразолием в системе аэробного взаимодействия НАДН и фенозиметансульфата. Активность каталазы определяли спектрофотометрически по уменьшению концентрации перекиси водорода. Содержимое ДК определяли спектрофотометрически в гептановой фазе после их экстракции смесью гептан - изопропиловый спирт. Содержимое ТБК-зависимых продуктов (МДА) определяли спектрофотометрически по реакции с тиобарбитуровой кислотой.

Анализ полученных результатов показал, что как тиотриазолин, так и ацетилсалициловая кислота обладают антиоксидантным действием. Раздельное введение этих препаратов проводило к уменьшению количества МДА и ДК, и увеличению активности СОД и каталазы. При этом тиотриазолин оказывал намного более выраженное действие по сравнению с АСК. Последняя преимущественно снижала уровень МДА и увеличивала активность СОД, меньше влияя на ДК и каталазу.

Комбинированное введение крысам тиотриазолина и АСК приводило к взаимному усилению их эффектов. При этом в сыворотке крови уровень МДА и ДК снижался на 50,4% (Р<0,05) и 40,6% (Р<0,05), а активность СОД и каталазы увеличилась на 68,8% (Р<0,05) и 36,4% (Р<0,05) соответственно по сравнению с контрольной группой. Данные изменения показателей активности процессов ПОЛ также достоверно отличались от результатов, полученных в группе АСК, что свидетельствует о более высокой антиоксидантной активности комбинированного препарата. Результаты, полученные при исследовании активности процессов ПОЛ в структурах головного мозга, подтверждают выявленные ранее закономерности. На фоне введения комбинированного препарата в стволе, гиппокампе и коре достоверно уменьшились уровни МДА и ДК, и возрастала активность СОД и каталазы.

Результаты исследований представлены в таблицах 6 и 7.

Таблица 6
Влияние тиотриазолина, ацетилсалициловой кислоты и их комбинации на показатели перекисного окисления липидов (ПОЛ) в сыворотке крови крыс
Группы	Показатели	МДА, нмоль/мг бел.	ДК, нмоль/мг бел.	СОД, у.е./мг бел./мин	Каталаза, мкат/мг бел./мин
Контроль (интактные животные) (n=6)	М±m	1,15±0,09	2,44±0,16	0,96±0,07	87,4±6,58
Тиотриазолин, 2,5 мг/кг (n=6)	М±m	0,65±0,08	1,53±0,17	1,45±0,12	108,7±9,64
Тиотриазолин, 2,5 мг/кг (n=6)	%	-43,5*	-37,3*	+51,0*	+24,4*
Ацетилсалициловая кислота, 10 мг/кг (n=6)	М±m	0,88±0,07	2,08±0,25	1,27±0,11	95,1±10,22
Ацетилсалициловая кислота, 10 мг/кг (n=6)	%	-23,5*	-14,8	+32,3*	+8,8
Ацетилсалициловая кислота, 10 мг/кг + Тиотриазолин, 2,5 мг/кг (n=6)	М±m	0,57±0,07	1,45±0,15	1,62±0,15	119,2±9,94
	%	-50,4/*	-40,6/*	+68,8/*	+36,4/*
Примечание: В таблице изменения показателей приведены в процентах от контрольной группы, которые приняты за 100%. (+) - увеличение, (-) - уменьшение.
* - различия достоверны по отношению к контрольной группе (Р<0,05);
** - различия достоверны по отношению к группе АСК, 10 мг/кг (Р<0,05).

Таблица 7 Влияние тиотриазолина, ацетилсалициловой кислоты и их комбинации на показатели перекисного окисления липидов (ПОЛ) в структурах головного мозга крыс
Группы	Структура мозга	Показатели	МДА, нмоль/мг бел.	ДК, нмоль/мг бел.	СОД, у.о./мг бел./мин	Каталаза, мкат/мг бел./мин
Контроль	ствол	М±m	2,94±0,18	5,08±0,43	0,34±0,04	44,5±3,97
(интактные животные) (n=6)	гиппокамп	М±m	2,58±0,14	4,56±0,38	0,25±0,02	39,2±2,78
(интактные животные) (n=6)	кора	М±m	2,71±0,20	4,97±0,41	0,31±0,03	44,8±2,56
Тиотриазолин, 2,5 мг/кг (n=6)	ствол	М±m	1,82±0,14	3,41±0,36	0,51±0,04	57,2±5,11
	ствол	%	-38,1*	-32,9*	+50,0*	+28,5*
	гиппокамп	М±m	1,74±0,15	3,23±0,29	0,45±0,04	51,3±4,85
		%	-32,6*	-29,2*	+80,0*	+30,9*
	кора	М±m	1,76±0,16	3,48±0,31	0,53±0,05	60,5±5,31
		%	-35,1*	-30,0*	+71,0*	+35,0*
Ацетилсалициловая кислота, 10 мг/кг (n=6)	ствол	М±m	2,21±0,19	4,29±0,51	0,45±0,06	49,9±6,35
		%	-24,8*	-15,6	+32,6*	+12,1
	гиппокамп	М±m	2,04±0,15	4,13±0,48	0,31±0,04	44,5±5,72
		%	-20,9	-9,4	+24,0*	+13,5
	кора	М±m	2,10±0,22	4,18±0,53	0,39±0,05	50,2±5,01
		%	-22,5	-15,9	+25,8*	+12,1
Ацетилсалициловая кислота, 10 мг/кг + Тиотриазолин,2,5 мг/кг (n=6)	ствол	М±m	1,45±0,09	3,17±0,28	0,72±0,05	61,8±5,23
		%	-50,7/*	-37,6/*	+111,8/*	+38,9/*
	гиппокамп	М±m	1,31±0,11	2,97±0,32	0,55±0,03	59,5±4,78
		%	-49,2/*	-34,9/*	+120,0/ *	+51,8/*
	кора	М±m	1,32±0,11	3,08±0,24	0,58±0,03	63,7±4,95
		%	-51,3/*	-38,0/*	+87,1/*	+42,2/*
Примечание: В таблице изменения показателей приведены в процентах от контрольной группы, которые приняты за 100%. (+) - увеличение, (-) - уменьшение.
* - различия достоверны по отношению к контрольной группе (Р<0,05);
** - различия достоверны по отношению к группе АСК, 10 мг/кг (Р<0,05).

Полученные результаты, анализ эффективности предложенной комбинации и препарата сравнения (прототипа) свидетельствуют, что предложенная комбинация имеет более выраженное антиагрегантное и антиоксидантное действие, ее использование позволяет снизить частоту проявления нежелательных эффектов проводимой фармакотерапии.

Заявляемый объект - комбинация классического антиагрегантного средства ацетилсалициловой кислоты и антиоксидантного препарата тиотриазолина - в условиях экспериментальной медицины способствует более сильному угнетению агрегации тромбоцитов.

Технический результат, который достигается при использовании изобретения, определяется потенцированием эффектов ацетисалициловой кислоты при использовании ее комбинации с тиотриазолином.

Использование предложенной комбинации в одной лекарственной форме уменьшает стоимость лечения, а также повышает комплаенс (склонность больных к лечению) благодаря упрощению введения и соблюдения режима приема.

Таким образом, разработанное решение задачи соответствует изобретательскому уровню и отвечает условию «промышленная пригодность», что позволяет квалифицировать его как изобретение.

Claims

1. Комбинированное антиагрегантное и антиоксидантное лекарственное средство, содержащее как активную основу ацетилсалициловую кислоту, отличающееся тем, что активная основа дополнительно содержит тиотриазолин.

2. Комбинированное антиагрегантное и антиоксидантное лекарственное средство по п.1, отличающееся тем, что оно содержит ацетилсалициловую кислоту в соотношении с тиотриазолином 4:1.