RU2426441C2 - Method for production of tea products enriched with theaflavins - Google Patents

Method for production of tea products enriched with theaflavins Download PDF

Info

Publication number
RU2426441C2
RU2426441C2 RU2009125002/10A RU2009125002A RU2426441C2 RU 2426441 C2 RU2426441 C2 RU 2426441C2 RU 2009125002/10 A RU2009125002/10 A RU 2009125002/10A RU 2009125002 A RU2009125002 A RU 2009125002A RU 2426441 C2 RU2426441 C2 RU 2426441C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
tea
fermentation
theaflavins
epicatechin
tea raw
Prior art date
Application number
RU2009125002/10A
Other languages
Russian (ru)
Other versions
RU2009125002A (en
Inventor
Ашим МУЛЛИК (IN)
Ашим Муллик
Сароя Мани ПУТРЕВУ (IN)
Сароя Мани ПУТРЕВУ
Original Assignee
Юнилевер Н.В.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Юнилевер Н.В. filed Critical Юнилевер Н.В.
Publication of RU2009125002A publication Critical patent/RU2009125002A/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2426441C2 publication Critical patent/RU2426441C2/en

Links

Landscapes

  • Tea And Coffee (AREA)

Abstract

FIELD: food industry.
SUBSTANCE: one provides for a method for production of a tea product enriched with theaflavins; the method involves a stage of tea raw material enzymic fermentation in the presence of added exogenic epicatechin.
EFFECT: development of an effective method for production of a tea product enriched with theaflavins.
15 cl, 5 tbl, 15 ex

Description

Область техники, к которой относится изобретениеFIELD OF THE INVENTION

Изобретение относится к области обработки чая. В частности, оно относится к способу производства чайного продукта, обогащенного теафлавинами.The invention relates to the field of tea processing. In particular, it relates to a method for producing a tea product enriched in theaflavins.

Уровень техникиState of the art

Любое обсуждение предшествующего уровня техники в тексте описания ни в коей мере не должно рассматриваться как признание того, что этот предшествующий уровень техники широко известен или составляет часть общего знания в указанной области техники.Any discussion of the prior art in the text of the description should in no way be construed as an admission that this prior art is widely known or forms part of the general knowledge in the art.

Теафлавины - это соединения, которые характеризуются наличием в них бензотрополонового кольца и которые образуются в процессе окислительной ферментации чайного листа или при ферментации его в производстве черного чая. Теафлавины являются единственными в своем роде соединениями черного чая и чая оолонг (красный чай), в которых присутствуют четыре основных вида теафлавинов - теафлавин (TF1), теафлавин-3-моногаллат (TF2), теафлавин-3'-моногаллат (TF3) и теафлавин-3-3'-дигаллат (TF4). В листьях чая эпикатехин (ЕС) и эпикатехингаллат (ECG) являются простыми катехинами, в то время как эпигаллокатехин (EGC) и эпигаллокатехингаллат (EGCG) - галлокатехинами, которые участвуют в образовании четырех видов теафлавинов. Окислительная биотрансформация катехинов, подобно другим процессам биотрансформации, представляет собой сложный процесс, включающий множество реакций, в результате которых образуются димеры теафлавинов и высокомолекулярные соединения, известные как теарубигины.Theaflavins are compounds that are characterized by the presence of a benzotropolone ring in them and which are formed during the oxidative fermentation of tea leaves or during fermentation in the production of black tea. Theaflavins are unique compounds of black tea and oolong tea (red tea), in which there are four main types of theaflavins - theaflavin (TF1), theaflavin-3-monogallate (TF2), theaflavin-3'-monogallate (TF3) and theaflavin -3-3'-digallate (TF4). In tea leaves, epicatechin (EC) and epicatechin gallate (ECG) are simple catechins, while epigallocatechin (EGC) and epigallocatechin gallate (EGCG) are gallocatechins, which are involved in the formation of four types of theaflavins. Oxidative biotransformation of catechins, like other biotransformation processes, is a complex process involving many reactions that result in theaflavins dimers and high molecular weight compounds known as thearubigins.

Известно, что теафлавины обладают антиоксидантными, противомикробными и противовоспалительными свойствами. Сообщалось, что теафлавины довольно эффективны против различных заболеваний, включая рак, сердечно-сосудистые заболевания и нарушения мозгового кровообращения, диабет и гиперхолестеринемия. Однако обычный уровень содержания теафлавинов в чае составляет 1-2% в пересчете на сухую массу в зависимости от таких факторов, как географическое происхождение и разновидность чая. Поэтому крайне желательным является производство чайных продуктов с повышенным уровнем теафлавинов. В прошлом исследователи предпринимали попытки обогащения чайных продуктов теафлавинами на основе разных подходов.Theaflavins are known to have antioxidant, antimicrobial, and anti-inflammatory properties. Theaflavins have been reported to be quite effective against various diseases, including cancer, cardiovascular diseases and cerebrovascular diseases, diabetes and hypercholesterolemia. However, the usual level of theaflavins in tea is 1-2% in terms of dry weight, depending on factors such as geographical origin and type of tea. Therefore, the production of tea products with elevated levels of theaflavins is highly desirable. In the past, researchers have attempted to enrich tea products with theaflavins based on different approaches.

Cloughley & Ellis (J. Sci. Food Agric. 31 (1980) 924-934) описан способ обогащения чая теафлавинами за счет проведения стадии ферментации при низком pH. Однако чай, полученный этим способом, может содержать остаточную кислотность, которая может вызвать свертывание молока при добавлении его в ходе приготовления чайного напитка с молоком.Cloughley & Ellis (J. Sci. Food Agric. 31 (1980) 924-934) describes a method for enriching tea with theaflavins by performing a low pH fermentation step. However, tea obtained by this method may contain residual acidity, which can cause coagulation of milk when it is added during the preparation of a tea drink with milk.

US 6113965 (2000, Lipton) раскрывает способ получения теафлавина путем отделения его от суспензии, которая является продуктом окислительной ферментации зеленого листового чая, предварительно обработанного танназой перед проведением окислительной ферментации. Указанный документ раскрывает также способы получения обогащенных теафлавином экстрактов и обеспечивает растворимые в холодной воде чайные порошки и продукты.US 6113965 (2000, Lipton) discloses a method for producing theaflavin by separating it from a suspension, which is the product of oxidative fermentation of green leaf tea pre-treated with tannase before oxidative fermentation. This document also discloses methods for preparing theaflavin-enriched extracts and provides tea soluble tea powders and products.

Однако обогащение теафлавином, полученным вышеуказанным способом, довольно ограничено, и поэтому по-прежнему сохраняется потребность в чайных продуктах с повышенными уровнями теафлавина.However, enrichment with theaflavin obtained by the aforementioned method is rather limited, and therefore there is still a need for tea products with elevated levels of theaflavin.

В дополнение к этому способы предшествующего уровня техники являются, как установлено, дорогостоящими, и поэтому существует потребность в разработке эффективного в плане затрат способа производства обогащенных теафлавинами чайных продуктов.In addition to this, prior art methods are found to be expensive, and therefore there is a need to develop a cost-effective method for producing theaflavin-enriched tea products.

Задачей настоящего изобретения является устранение или исправление, по меньшей мере, одного из недостатков предшествующего уровня техники или обеспечение полезной альтернативы.An object of the present invention is to eliminate or correct at least one of the drawbacks of the prior art or provide a useful alternative.

Одной из задач настоящего изобретения является обеспечение способа производства обогащенного теафлавинами чайного продукта, содержащего повышенные уровни совокупности теафлавинов по сравнению со способами предшествующего уровня техники.One of the objectives of the present invention is the provision of a method of manufacturing enriched with theaflavins tea product containing elevated levels of theaflavins in comparison with the methods of the prior art.

Другой задачей настоящего изобретения является обеспечение способа производства обогащенного теафлавинами чайного продукта эффективным в плане затрат образом.Another objective of the present invention is to provide a method for the production of theaflavins-enriched tea product in a cost-effective manner.

Авторами настоящего изобретения совершенно неожиданно было установлено, что присутствие экзогенного эпикатехина в процессе энзимной ферментации чайного сырья приводит к получению обогащенного теафлавинами чайного продукта.The authors of the present invention quite unexpectedly found that the presence of exogenous epicatechin in the enzymatic fermentation of tea raw materials leads to theaflavins enriched tea product.

Раскрытие изобретенияDisclosure of invention

Согласно настоящему изобретению обеспечивается способ производства обогащенного теафлавинами чайного продукта, включающий стадию подвергания чайного сырья энзимной ферментации в присутствии добавленного экзогенного эпикатехина.According to the present invention, there is provided a method of manufacturing a theaflavin-enriched tea product, comprising the step of subjecting the tea raw materials to enzymatic fermentation in the presence of added exogenous epicatechin.

Предпочтительно энзимная ферментация согласно настоящему изобретению осуществляется с участием эндогенных ферментов чайного сырья.Preferably, the enzymatic fermentation according to the present invention is carried out with the participation of endogenous enzymes of tea raw materials.

Согласно одному из предпочтительных аспектов изобретения количество указанного эпикатехина составляет от 35 до 750, более предпочтительно - от 75 до 520, наиболее предпочтительно - от 120 до 260 мг/г сухой массы растворимых сухих веществ в указанном чайном сырье. Согласно предпочтительному аспекту эпикатехин добавляется в чайное сырье перед его ферментацией.According to one preferred aspect of the invention, the amount of said epicatechin is from 35 to 750, more preferably from 75 to 520, most preferably from 120 to 260 mg / g dry weight of soluble solids in said tea raw material. According to a preferred aspect, epicatechin is added to the tea raw materials before fermentation.

Чайное сырье предпочтительно обрабатывается танназой перед или в процессе ферментации.The tea raw materials are preferably treated with tannase before or during the fermentation process.

Согласно предпочтительному аспекту ферментация проводится в присутствии добавленной воды. Количество добавленной воды предпочтительно составляет от 0,1 до 500 г/г растворимых сухих веществ в чайном сырье.According to a preferred aspect, the fermentation is carried out in the presence of added water. The amount of added water is preferably from 0.1 to 500 g / g soluble solids in tea raw materials.

ТерминологияTerminology

Термин "чайное сырье" в контексте описания относится к любому материалу, полученному из растения Camellia sinensis либо Camellia assamica, или к любому материалу, полученному в результате обработки указанного растительного материала.The term “tea raw materials” as used herein refers to any material obtained from a plant of Camellia sinensis or Camellia assamica, or to any material obtained by processing said plant material.

Термин "чайный продукт" в контексте описания обозначает любой продукт, полученный из чайного сырья. Он включает (но весь перечень не ограничивается только названными здесь) черный чай, чай оолонг (улунский чай, полуферментированный, красный чай), быстрорастворимый чай и зеленый чай. Он также включает суспензию, содержащую смесь чайного продукта с водой.The term "tea product" in the context of the description refers to any product obtained from tea raw materials. It includes (but the entire list is not limited to those mentioned here) black tea, oolong tea (Oolong tea, semi-fermented, red tea), instant tea and green tea. It also includes a suspension containing a mixture of the tea product with water.

Термин "обогащенный теафлавинами" в контексте описания относится к чайному продукту с более высоким уровнем теафлавинов, включая TF1, TF2, TF3 и TF4, по сравнению с исходным чайным сырьем. В частности, чайный продукт обычно содержит более высокое количество теафлавинов/грамм сухой массы растворимых сухих веществ чайного продукта по сравнению с количеством теафлавинов/грамм сухой массы растворимых сухих веществ в чайном сырье.The term “theaflavins enriched,” as used herein, refers to a tea product with a higher level of theaflavins, including TF1, TF2, TF3, and TF4, as compared to the raw tea stock. In particular, the tea product typically contains a higher amount of theaflavins / gram dry weight of soluble solids of the tea product compared to the number of theaflavins / gram dry weight of soluble solids in the tea raw materials.

Термин "листья чая" в контексте описания включает листья, почки и другие части растения Camellia sinensis или Camellia assamica.The term "tea leaves" as used herein includes leaves, buds, and other parts of the plant Camellia sinensis or Camellia assamica.

Термин дхул ("dhool") в контексте описания обозначает мацерированные листья чая. Мацерация листьев чая может осуществляться традиционно используемыми способами, такими как скручивание, измельчение скрученного чайного листа (СТС), купажирование с помощью кухонного смесителя и др.The term dhool ("dhool") as used herein refers to macerated tea leaves. Maceration of tea leaves can be carried out by traditionally used methods, such as twisting, chopping twisted tea leaves (CTC), blending using a kitchen mixer, etc.

Термин "энзиматическая ферментация" в контексте описания обозначает окислительные биотрансформации с участием ферментов. Ферментация может проводиться с участием эндогенных ферментов чайного сырья, способных к энзимной ферментации. Не ограничивающие весь перечень примеры такого чайного сырья включают листья чая и дхул ("dhool"). Ферментация может также проводиться с помощью экзогенного фермента и соответствующего косубстрата.The term “enzymatic fermentation” as used herein refers to oxidative biotransformation involving enzymes. Fermentation can be carried out with the participation of endogenous enzymes of tea raw materials capable of enzymatic fermentation. Non-limiting examples of such tea raw materials include tea leaves and dhul ("dhool"). Fermentation can also be carried out using an exogenous enzyme and the corresponding cosubstrate.

Термин "инактивированные, в основном, эндогенные ферменты" относится к чайному сырью, подвергнутому стадии инактивирования ферментов, эндогенно присутствующих в чайном сырье. В типичных случаях инактивирование достигается нагревом, т.е. подверганием стадии воздействия температурой выше 100°C, известной также как огневая сушка. Примеры чайного сырья с инактивированными, в основном, эндогенными ферментами включают быстрорастворимый чай и зеленый чай.The term "mainly inactivated endogenous enzymes" refers to tea raw materials subjected to the stage of inactivation of enzymes endogenously present in tea raw materials. In typical cases, inactivation is achieved by heating, i.e. exposing the exposure step to temperatures above 100 ° C, also known as fire drying. Examples of tea raw materials with inactivated mainly endogenous enzymes include instant tea and green tea.

Термин "растворимые сухие вещества чайного сырья" в контексте описания означает количество сухих веществ, обеспечиваемое путем (а) контактирования чайного сырья с водой при 90°C в течение 1 часа, (б) отделения жидкой фазы от нерастворимых сухих веществ центрифугированием/фильтрацией (фильтр из бумаги Ватман 541) и (в) выпаривания воды из жидкой фазы с получением растворимых сухих веществ.The term "soluble solids of tea raw materials" in the context of the description means the amount of solids provided by (a) contacting the tea raw materials with water at 90 ° C for 1 hour, (b) separation of the liquid phase from insoluble solids by centrifugation / filtration (filter from Whatman paper 541) and (c) evaporating water from the liquid phase to obtain soluble solids.

Термин "в пересчете на сухую массу" в контексте описания относится к составу, выраженному как соотношение или мас.% в пересчете на сухие вещества, т.е. исключая влагу. Термин "в пересчете на свежую массу" в контексте описания относится к составу, выраженному как мас.% материала, включая влагу. В типичных случаях листья чая содержат примерно 70% влаги и около 30% сухих веществ. В общем содержании сухих веществ растворимые сухие вещества обычно составляют около 40 мас.% (в пересчете на сухую массу). Таким образом, ~12% растворимых сухих веществ в пересчете на свежую массу эквивалентны ~40% растворимых сухих веществ в пересчете на сухую массу. Следует заметить, что приведенные выше типичные цифры являются репрезентативными, а фактические цифры могут меняться в некоторой степени в зависимости от географического происхождения, разновидностей чая и влажности.The term "in terms of dry weight" in the context of the description refers to the composition, expressed as a ratio or wt.% In terms of dry matter, i.e. excluding moisture. The term "in terms of fresh weight" in the context of the description refers to the composition, expressed as wt.% Material, including moisture. In typical cases, tea leaves contain about 70% moisture and about 30% solids. In the total solids content, soluble solids typically comprise about 40 wt.% (In terms of dry weight). Thus, ~ 12% of soluble solids in terms of fresh weight is equivalent to ~ 40% of soluble solids in terms of dry weight. It should be noted that the above typical numbers are representative, and the actual numbers may vary to some extent depending on geographical origin, varieties of tea and humidity.

Термин "ферментация суспензии" в контексте описания обозначает ферментацию чайного сырья, при которой отношение добавленной воды к чайному сырью составляет более 2:1 в пересчете на свежую массу или 6,7:1 в пересчете на сухую массу, и 17:1 в пересчете на растворимые сухие вещества.The term "suspension fermentation" in the context of the description refers to the fermentation of tea raw materials, in which the ratio of added water to tea raw materials is more than 2: 1 in terms of fresh weight or 6.7: 1 in terms of dry weight, and 17: 1 in terms of soluble solids.

Термин "ферментация в твердом состоянии" в контексте описания обозначает энзиматическую ферментацию чайного сырья, при которой отношение добавленной воды к чайному сырью составляет менее 2:1 в пересчете на свежую массу или 6,7:1 в пересчете на сухую массу и 17:1 в пересчете на растворимые сухие вещества. В типичных случаях отношение добавленной воды к чайному сырью составляет менее 2:1 в пересчете на растворимые сухие вещества.The term "solid state fermentation" as used herein refers to enzymatic fermentation of tea raw materials in which the ratio of added water to tea raw materials is less than 2: 1 in terms of fresh weight or 6.7: 1 in terms of dry weight and 17: 1 in in terms of soluble solids. In typical cases, the ratio of added water to tea raw materials is less than 2: 1 in terms of soluble solids.

Термин "экзогенный эпикатехин" в контексте описания относится к эпикатехину, который извне добавляется к чайному сырью, и не включает эпикатехин, который может присутствовать в чайном сырье.The term "exogenous epicatechin" as used herein refers to epicatechin, which is externally added to tea raw materials, and does not include epicatechin, which may be present in tea raw materials.

Ферментативная активность выражается в единицах активности или просто в единицах. Единицы активности танназы берутся из данных поставщика. Активность экзогенных ферментов, таких как полифенолоксидаза (РРО) и пероксидаза (POD), может определяться следующим образом.Enzymatic activity is expressed in units of activity or simply in units. Tannase activity units are taken from the supplier data. The activity of exogenous enzymes such as polyphenol oxidase (PPO) and peroxidase (POD) can be determined as follows.

Проба на полифенолоксидазу (PРО)Polyphenol Oxidase Test (PPO)

РРО определяется спектрофотометрически с использованием (+)-катехина в качестве субстрата. Проба проводится в объеме реакционной смеси 3 мл, содержащей 3 мМ катехина в 0,1 М фосфатно-цитратном буфере с pH 5,5. Аликвотное количество 150 мкл свежеприготовленного 60 мМ маточного раствора катехина в смеси воды (70% об./об.) с этанолом (30% об./об.) используется для обеспечения концентрации катехина порядка 3 мМ в реакционной смеси. Раствор фермента в соответствующем разбавлении добавляется для инициирования реакции, а инкубация смеси проводится при 40°C в течение от 10 до 20 мин. Реакция останавливается за счет добавления 200 мкл раствора, содержащего ацетонитрил (60% об./об.), уксусную кислоту (10% об./об.) и воду (30% об./об.). Затем определяется спектральная поглощательная способность (СПС) при 400 нм, и рассчитывается активность с учетом существующей зависимости: активность 1 единицы=увеличению СПС на 0,001.PPO is determined spectrophotometrically using (+) - catechin as a substrate. The sample is carried out in a 3 ml reaction mixture containing 3 mM catechin in 0.1 M phosphate-citrate buffer with a pH of 5.5. An aliquot of 150 μl of a freshly prepared 60 mM catechin stock solution in a mixture of water (70% v / v) with ethanol (30% v / v) is used to provide a catechin concentration of about 3 mM in the reaction mixture. An enzyme solution in the appropriate dilution is added to initiate the reaction, and the mixture is incubated at 40 ° C for 10 to 20 minutes. The reaction is stopped by adding 200 μl of a solution containing acetonitrile (60% vol./about.), Acetic acid (10% vol./about.) And water (30% vol./about.). Then the spectral absorption capacity (SPS) is determined at 400 nm, and the activity is calculated taking into account the existing dependence: 1 unit activity = an increase in SPS by 0.001.

Проба на пероксидазу (POD)Peroxidase Assay (POD)

Проба на POD идентична пробе на РРО, за исключением того, что реакционная смесь содержит еще 7,3 мМ пероксида водорода. Требуемое количество пероксида водорода обеспечивается 1,5% (масс./об.) маточным раствором. Реакционная смесь инкубируется в течение от 10 до 20 мин при 30°C. Затем реакция останавливается, как описано выше, и определяется спектральная поглощательная способность (СПС) при 400 нм. Активность рассчитывается также с учетом зависимости: активность 1 единицы = увеличению СПС на 0,001.The POD assay is identical to the PPO assay, except that the reaction mixture contains another 7.3 mM hydrogen peroxide. The required amount of hydrogen peroxide is provided by 1.5% (w / v) stock solution. The reaction mixture is incubated for 10 to 20 minutes at 30 ° C. Then the reaction is stopped, as described above, and the spectral absorbance (SPS) at 400 nm is determined. Activity is also calculated taking into account the dependence: activity of 1 unit = increase in ATP by 0.001.

Осуществление изобретенияThe implementation of the invention

Согласно настоящему изобретению обеспечивается способ производства обогащенного теафлавинами чайного продукта, включающий стадию подвергания чайного сырья энзимной ферментации в присутствии добавленного экзогенного эпикатехина.According to the present invention, there is provided a method of manufacturing a theaflavin-enriched tea product, comprising the step of subjecting the tea raw materials to enzymatic fermentation in the presence of added exogenous epicatechin.

Предпочтительно энзимная ферментация согласно настоящему изобретению осуществляется с помощью эндогенных ферментов чайного сырья, способных к такой ферментации.Preferably, the enzymatic fermentation according to the present invention is carried out using endogenous tea raw material enzymes capable of such fermentation.

Может использоваться и реализуемый на рынке экзогенный эпикатехин (например, от Sigma, Herbs-Tech и др.). Другие источники экзогенного эпикатехина, которые могут добавляться согласно настоящему изобретению, включают богатые эпикатехином экстракты других растительных материалов, таких как какао, виноградный сок и др.Exogenous epicatechin sold on the market can also be used (for example, from Sigma, Herbs-Tech, etc.). Other sources of exogenous epicatechin that can be added according to the present invention include epicatechin-rich extracts of other plant materials, such as cocoa, grape juice, etc.

Способ согласно настоящему изобретению может осуществляться в присутствии других экзогенных катехинов (включающих эпикатехингаллат, эпигаллактокатехин и эпигаллактокатехингаллат), добавленных вместе с экзогенным эпикатехином. Предпочтительно отношение экзогенного эпикатехина к общему количеству экзогенных катехинов превышает отношение эндогенного эпикатехина к общему количеству эндогенных катехинов в чайном сырье.The method according to the present invention can be carried out in the presence of other exogenous catechins (including epicatechin gallate, epigallactocatechin and epigallactocatechin gallate) added together with exogenous epicatechin. Preferably, the ratio of exogenous epicatechin to total exogenous catechins exceeds the ratio of endogenous epicatechin to total endogenous catechins in tea raw materials.

Предпочтительное количество добавляемого экзогенного эпикатехина подбирается таким образом, чтобы молярное отношение общего количества эпигаллокатехина к общему количеству эпикатехина составляло от 1:1 до 1:16, предпочтительно - от 1:1,5 до 1:10, более предпочтительно - от 1:2 до 1:9.The preferred amount of added exogenous epicatechin is selected so that the molar ratio of the total amount of epigallocatechin to the total amount of epicatechin is from 1: 1 to 1:16, preferably from 1: 1.5 to 1:10, more preferably from 1: 2 to 1: 9.

Согласно одному из предпочтительных аспектов изобретения количество добавляемого эпикатехина составляет от 35 до 750, предпочтительно - от 75 до 520, более предпочтительно - от 120 до 260 мг/г сухой массы растворимых сухих веществ в чайном сырье.According to one preferred aspect of the invention, the amount of epicatechin added is from 35 to 750, preferably from 75 to 520, more preferably from 120 to 260 mg / g dry weight of soluble solids in tea raw materials.

Согласно предпочтительному аспекту, если в качестве чайного сырья используются листья чая, то эпикатехин добавляется к листьям чая сразу после их сбора. Согласно альтернативному предпочтительному аспекту эпикатехин добавляется к листьям чая перед сбором.According to a preferred aspect, if tea leaves are used as tea raw materials, epicatechin is added to the tea leaves immediately after collection. According to an alternative preferred aspect, epicatechin is added to the tea leaves before harvesting.

Предпочтительно, чтобы чайное сырье было, в основном, неферментированным, т.е. предварительно не подвергалось стадии энзимной ферментации. В частности, предпочтительно, чтобы массовое отношение общего количества катехинов к теафлавинам в указанном чайном сырье составляло более 10, предпочтительно - более 20, более предпочтительно - от 50 до 10 000. Альтернативно или дополнительно чайное сырье предпочтительно содержит не выше 10 мг, более предпочтительно - 5 мг, наиболее предпочтительно - 2 мг теафлавина/г сухой массы растворимых сухих веществ. Особенно предпочтительно, чтобы чайное сырье не содержало, в основном, теафлавинов.Preferably, the tea raw materials are substantially unfermented, i.e. not previously subjected to enzymatic fermentation. In particular, it is preferable that the mass ratio of the total amount of catechins to theaflavins in said tea raw materials is more than 10, preferably more than 20, more preferably 50 to 10,000. Alternatively or additionally, the tea raw materials preferably contain no more than 10 mg, more preferably 5 mg, most preferably 2 mg of theaflavin / g dry weight of soluble solids. It is particularly preferred that the tea raw materials do not contain mainly theaflavins.

Способ согласно настоящему изобретению предпочтительно включает стадию обработки чайного сырья танназой перед или в процессе вышеуказанной ферментации.The method according to the present invention preferably includes the step of treating the tea raw materials with tannase before or during the above fermentation.

Согласно предпочтительному аспекту стадия обработки чайного сырья танназой проводится перед ферментацией. Обработка танназой предпочтительно осуществляется в атмосфере азота (для предупреждения ферментации) при соответствующей температуре и в течение соответствующего промежутка времени. Пригодные режимы можно определить экспериментальным путем. Согласно альтернативному предпочтительному аспекту стадия обработки чайного сырья танназой проводится в процессе ферментации. Предпочтительно, чтобы количество танназы составляло от 0,08 до 8, более предпочтительно - от 0,2 до 4, наиболее предпочтительно - от 0,4 до 2 мг/грамм сухой массы растворимых сухих веществ в чайном сырье.According to a preferred aspect, the step of treating tea raw materials with tannase is carried out before fermentation. The tannase treatment is preferably carried out in a nitrogen atmosphere (to prevent fermentation) at an appropriate temperature and for an appropriate period of time. Suitable modes can be determined experimentally. According to an alternative preferred aspect, the step of treating the tea raw materials with tannase is carried out in a fermentation process. Preferably, the amount of tannase is from 0.08 to 8, more preferably from 0.2 to 4, most preferably from 0.4 to 2 mg / gram dry weight of soluble solids in tea raw materials.

Согласно предпочтительному аспекту ферментация проводится в присутствии добавленной воды. Количество добавляемой воды предпочтительно составляет от 0,1 до 500 г/г сухой массы растворимых сухих веществ чайного сырья. В одном из предпочтительных аспектов количество добавляемой воды составляет от 0,1 до 17, более предпочтительно - от 0,1 до 10, наиболее предпочтительно - от 0,1 до 2 г/г растворимых сухих веществ чайного сырья, что приводит к ферментации в твердом состоянии. Согласно альтернативному предпочтительному аспекту количество добавляемой воды составляет от 17 до 500, более предпочтительно - от 20 до 400, наиболее предпочтительно - от 25 до 200 г/г растворимых сухих веществ чайного сырья, что приводит к ферментации в состоянии суспензии.According to a preferred aspect, the fermentation is carried out in the presence of added water. The amount of water added is preferably from 0.1 to 500 g / g dry weight of soluble solids of tea raw materials. In one preferred aspect, the amount of added water is from 0.1 to 17, more preferably from 0.1 to 10, most preferably from 0.1 to 2 g / g of soluble solids of tea raw materials, which leads to fermentation in solid condition. According to an alternative preferred aspect, the amount of added water is from 17 to 500, more preferably from 20 to 400, most preferably from 25 to 200 g / g of soluble solids of tea raw materials, which leads to fermentation in suspension.

Согласно предпочтительному аспекту чайное сырье представляет собой листья чая, содержащие эндогенные ферменты, способные к энзимной ферментации, а способ включает стадии:According to a preferred aspect, the tea raw material is tea leaves containing endogenous enzymes capable of enzymatic fermentation, and the method comprises the steps of:

(а) завяливания листьев чая;(a) withering tea leaves;

(б) мацерации завяленных листьев;(b) maceration of withered leaves;

(в) подвергания мацерированных листьев чая энзимной ферментации в присутствии добавленного экзогенного эпикатехина и(c) subjecting the macerated tea leaves to enzymatic fermentation in the presence of added exogenous epicatechin and

(г) огневой сушки предпочтительно до температуры примерно 120°C с получением обогащенного теафлавинами черного чая.(g) fire-drying, preferably to a temperature of about 120 ° C., to obtain theaflavin-enriched black tea.

Описанный выше способ предпочтительно включает стадию обработки чайного сырья танназой перед или в процессе стадии (в), т.е. энзимной ферментации.The method described above preferably includes a step of treating the tea raw material with tannase before or in the process of step (c), i.e. enzymatic fermentation.

Согласно другому предпочтительному аспекту чайное сырье представляет собой листья чая, содержащие эндогенные ферменты, способные к энзимной ферментации, а указанный способ включает стадии:According to another preferred aspect, the tea raw material is tea leaves containing endogenous enzymes capable of enzymatic fermentation, and said method comprises the steps of:

(а) завяливания указанных листьев чая;(a) withering of said tea leaves;

(б) мацерации завяленных листьев и добавления к мацерированным листьям чая от 17 до 500 г воды/г растворимых сухих веществ с получением суспензии;(b) maceration of the dried leaves and adding to the macerated tea leaves from 17 to 500 g of water / g of soluble solids to obtain a suspension;

(в) подвергания суспензии энзимной ферментации в присутствии добавленного экзогенного эпикатехина с получением обогащенной теафлавинами суспензии.(c) exposing the suspension to enzymatic fermentation in the presence of added exogenous epicatechin to obtain a theaflavin-enriched suspension.

Описанный выше способ предпочтительно включает стадию обработки чайного сырья танназой перед или в процессе стадии (в), т.е. энзимной ферментации.The method described above preferably includes a step of treating the tea raw material with tannase before or in the process of step (c), i.e. enzymatic fermentation.

Обогащенная теафлавинами суспензия может предпочтительно подвергаться сушке с целью снижения ее влагосодержания до <5% с получением обогащенного теафлавинами черного чая. В другом предпочтительном аспекте нерастворимые сухие вещества отделяются от обогащенной теафлавинами суспензии с получением богатого теафлавинами раствора. Богатый теафлавинами раствор может предпочтительно подвергаться сушке с получением обогащенного теафлавинами чайного продукта, который может, например, добавляться к черному чаю, зеленому чаю, чаю оолонг или быстрорастворимому чаю. Согласно альтернативному предпочтительному аспекту богатый теафлавинами раствор может наноситься в качестве покрытия на черный чай, зеленый чай или чай оолонг с последующей сушкой для получения обогащенного теафлавинами чая.Theaflavin-enriched suspension may preferably be dried to reduce its moisture content to <5% to produce theaflavin-rich black tea. In another preferred aspect, insoluble solids are separated from theaflavins-enriched suspension to form a theaflavins-rich solution. Theaflavin-rich solution may preferably be dried to produce a theaflavin-rich tea product, which may, for example, be added to black tea, green tea, oolong tea, or instant tea. According to an alternative preferred aspect, theaflavin-rich solution can be coated onto black tea, green tea or oolong tea, followed by drying to produce theaflavin-enriched tea.

Согласно другому предпочтительному аспекту энзимная ферментация осуществляется с применением экзогенного фермента и косубстрата. Ферментация с применением экзогенного фермента и косубстрата предпочтительна в том случае, если чайное сырье содержит инактивированные, в основном, эндогенные ферменты. Примерами чайного сырья с инактивированными, в основном, эндогенными ферментами являются зеленый чай или быстрорастворимый зеленый чай. Ферментация суспензии предпочтительна в том случае, если чайное сырье содержит инактивированные, в основном, эндогенные ферменты.According to another preferred aspect, enzymatic fermentation is carried out using an exogenous enzyme and cosubstrate. Fermentation using an exogenous enzyme and cosubstrate is preferred if the tea stock contains inactivated, mainly endogenous enzymes. Examples of tea raw materials with inactivated, mainly endogenous enzymes are green tea or instant green tea. Fermentation of the suspension is preferable if the tea raw material contains inactivated, mainly endogenous enzymes.

Требуемая комбинация экзогенного фермента и соответствующего косубстрата подбирается таким образом, чтобы такая комбинация была способна к ферментации чайного сырья.The desired combination of the exogenous enzyme and the corresponding cosubstrate is selected so that such a combination is capable of fermenting tea raw materials.

Согласно предпочтительному аспекту экзогенный фермент является полифенолоксидазой, а соответствующий косубстрат - кислородом. Согласно другому предпочтительному аспекту количество указанной полифенолоксидазы составляет от 1,5×104 до 1,5×107, более предпочтительно - от 3,5×104 до 1,5×106, наиболее предпочтительно - от 7,5×104 до 7,5×105 единиц/г сухой массы растворимых сухих веществ в указанном чайном сырье. Полифенолоксидаза может быть приобретена на рынке, например, от Worthington или может быть экстрагирована и очищена из подходящего растительного материала.According to a preferred aspect, the exogenous enzyme is polyphenol oxidase and the corresponding cosubstrate is oxygen. According to another preferred aspect, the amount of said polyphenol oxidase is from 1.5 × 10 4 to 1.5 × 10 7 , more preferably from 3.5 × 10 4 to 1.5 × 10 6 , most preferably from 7.5 × 10 4 to 7.5 × 10 5 units / g dry weight of soluble solids in the specified tea raw materials. Polyphenol oxidase can be purchased on the market, for example, from Worthington, or can be extracted and purified from a suitable plant material.

Согласно еще одному предпочтительному аспекту экзогенный фермент является пероксидазой, а косубстрат - пероксидом водорода. Пероксидаза может быть приобретена на рынке, например, от Sigma или может быть экстрагирована и очищена из подходящего растительного материала. Согласно следующему предпочтительному аспекту количество указанной пероксидазы составляет от 1,5×104 до 1,5×107, более предпочтительно - от 3,5×104 до 1,5×106, наиболее предпочтительно - от 7,5×104 до 7,5×105 единиц/г сухой массы растворимых сухих веществ в указанном чайном сырье.According to another preferred aspect, the exogenous enzyme is peroxidase and the cosubstrate is hydrogen peroxide. Peroxidase can be purchased on the market, for example, from Sigma, or can be extracted and purified from a suitable plant material. According to a further preferred aspect, the amount of said peroxidase is from 1.5 × 10 4 to 1.5 × 10 7 , more preferably from 3.5 × 10 4 to 1.5 × 10 6 , most preferably from 7.5 × 10 4 to 7.5 × 10 5 units / g dry weight of soluble solids in the specified tea raw materials.

Предпочтительно, чтобы количество указанного пероксида водорода составляло от 7 до 700 мг, более предпочтительно - от 15 до 300 мг, наиболее предпочтительно - от 35 до 100 мг/г сухой массы растворимых сухих веществ в указанном чайном сырье.Preferably, the amount of said hydrogen peroxide is from 7 to 700 mg, more preferably from 15 to 300 mg, most preferably from 35 to 100 mg / g dry weight of soluble solids in said tea raw materials.

Согласно предпочтительному аспекту чайным сырьем является зеленый чай или быстрорастворимый зеленый чай, а способ включает стадии:According to a preferred aspect, the tea raw material is green tea or instant green tea, and the method comprises the steps of:

(а) добавления в чайное сырье от 17 до 500 г воды/г растворимых сухих веществ с получением суспензии;(a) adding to tea raw materials from 17 to 500 g of water / g of soluble solids to obtain a suspension;

(б) подвергания суспензии энзимной ферментации за счет добавления экзогенного фермента и косубстрата в присутствии добавленного экзогенного эпикатехина с получением обогащенной теафлавинами суспензии.(b) exposing the suspension to enzymatic fermentation by adding an exogenous enzyme and cosubstrate in the presence of added exogenous epicatechin to obtain a theaflavin-enriched suspension.

Описанный выше способ предпочтительно включает стадию обработки чайного сырья танназой перед или в процессе стадии (б), т.е. энзимной ферментации.The method described above preferably includes a step of treating the tea raw materials with tannase before or in the process of step (b), i.e. enzymatic fermentation.

Обогащенная теафлавинами суспензия может предпочтительно подвергаться сушке с целью снижения ее влагосодержания до < 5 мас.% с получением обогащенного теафлавинами черного чая. В другом предпочтительном аспекте нерастворимые сухие вещества отделяются от обогащенной теафлавинами суспензии с получением богатого теафлавинами раствора. Богатый теафлавинами раствор может предпочтительно подвергаться сушке с получением обогащенного теафлавинами чайного продукта, который может, например, добавляться к черному чаю, зеленому чаю, чаю оолонг или быстрорастворимому чаю. Согласно альтернативному предпочтительному аспекту богатый теафлавинами раствор может наноситься в качестве покрытия на черный чай с последующей сушкой с получением обогащенного теафлавинами черного чая.Theaflavin-enriched slurry may preferably be dried to reduce its moisture content to <5 wt.% To produce theaflavin-rich black tea. In another preferred aspect, insoluble solids are separated from theaflavins-enriched suspension to form a theaflavins-rich solution. Theaflavin-rich solution may preferably be dried to produce a theaflavin-rich tea product, which may, for example, be added to black tea, green tea, oolong tea, or instant tea. According to an alternative preferred aspect, theaflavin-rich solution can be coated onto black tea, followed by drying to yield theaflavin-rich black tea.

Согласно другому предпочтительному аспекту обогащенная теафлавинами суспензия, полученная вышеописанным способом, наносится в качестве покрытия на черный чай с получением обогащенного теафлавинами черного чая.According to another preferred aspect, theaflavin-enriched suspension obtained by the above method is applied as a coating to black tea to obtain theaflavin-enriched black tea.

Согласно еще одному предпочтительному аспекту обогащенная теафлавинами суспензия наносится в качестве покрытия на быстрорастворимый чай с получением обогащенного теафлавинами быстрорастворимого чая.According to another preferred aspect, theaflavin-enriched suspension is coated as a coating on instant tea to produce theaflavin-enriched instant tea.

ПримерыExamples

Ниже изобретение описывается со ссылкой на конкретные примеры, которые приводятся исключительно в целях иллюстрации изобретения и ни в коей мере не ограничивают масштаб изобретения.The invention is described below with reference to specific examples, which are given solely for the purpose of illustrating the invention and in no way limit the scope of the invention.

Материалы и методыMaterials and methods

В табл.1 приводится перечень материалов, используемых в примерах.Table 1 lists the materials used in the examples.

Таблица 1Table 1 Используемые материалыMaterials used ИнгредиентIngredient Форма ингредиентаIngredient form Источник и географическое происхождение ингредиентаSource and geographical origin of the ingredient Чайные листьяTea leaves Замороженные (хранившиеся при -80°C)Frozen (stored at -80 ° C) Чайные плантации Южной ИндииTea Plantations South India Дхул (dhool)Dhool Масса, приготовленная из чайных листьев, замороженных путем погружения в жидкий азот, с последующим смешиванием в кухонном блендереA mass made from tea leaves frozen by immersion in liquid nitrogen, followed by mixing in a kitchen blender ЭпикатехинEpicatechin Sigma AldrichSigma aldrich Танназа КТ-50Tannase CT-50 Маточный раствор 1 г/лStock solution 1 g / l Kikkoman, ЯпонияKikkoman, Japan

Метод анализа теафлавиновTheaflavin analysis method

Экстракция теафлавиновTheaflavin Extraction

Общий уровень теафлавинов определяли в водном метаноловом экстракте.The total level of theaflavins was determined in an aqueous methanol extract.

Образцы от ферментации в твердом состоянии подвергали экстракции 70% метанолом при ~80°C в течение 10 мин при соотношении высоководного метанолового раствора к dhool, равном 16,7:1 в пересчете на свежую массу. Образец экстракта разбавляли в соотношении 1:1 раствором, содержащим 90% об./об. воды, 10% об./об. ацетонитрила, 0,5 г/л аскорбиновой кислоты и 0,5 г/л этилендиаминтетрауксусной кислоты (EDTA), во избежание окисления теафлавинов и катехинов.Samples from solid state fermentation were subjected to extraction with 70% methanol at ~ 80 ° C for 10 min at a ratio of high-water methanol solution to dhool equal to 16.7: 1 in terms of fresh weight. A sample of the extract was diluted in a 1: 1 ratio with a solution containing 90% v / v. water, 10% v / v acetonitrile, 0.5 g / l ascorbic acid and 0.5 g / l ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA), to prevent oxidation of theaflavins and catechins.

В случае суспензионной ферментационной системы указанный экстракт приготовляли путем добавления требуемого количества 100% метанола к водной суспензии с получением композиции из 70% метанола и 30% воды. Количество добавленного метанола в 2,33 раза превышало объем присутствующей воды, так что экстракцию проводили при отношении водного метанолового раствора к dhool, равном 16,7:1 в пересчете на свежую массу или ~ 55,7:1 в пересчете на сухую массу. При таком высоком отношении 70% метанола к дхул количественная экстракция теафлавина достигалась при ~80°C и времени экстракции 10 мин.In the case of a suspension fermentation system, said extract was prepared by adding the required amount of 100% methanol to the aqueous suspension to obtain a composition of 70% methanol and 30% water. The amount of methanol added was 2.33 times the amount of water present, so extraction was carried out at a ratio of aqueous methanol solution to dhool equal to 16.7: 1 in terms of fresh weight or ~ 55.7: 1 in terms of dry weight. With such a high ratio of 70% methanol to dhul, quantitative extraction of theaflavin was achieved at ~ 80 ° C and an extraction time of 10 min.

Анализ теафлавиновTheaflavin Analysis

Образцы хранили при ~80°C; анализ теафлавинов проводили жидкой хроматографией высокого разрешения (HPLC) с диодно-матричным детектированием.Samples were stored at ~ 80 ° C; theaflavins were analyzed by high performance liquid chromatography (HPLC) with diode array detection.

Для анализа теафлавинов использовалась HPLC-система Shimadzu с заполненной октадецилкремнеземом (C18) колонкой (Nova-pak от Waters) с внутренним диаметром 3,9 мм и длиной 150 мм; детектирование проводилось при 380 нм; температура в колонке составляла 40°C, вводимый объем - 20 мкл и скорость потока - 1 мл/мин. Мобильными фазами для анализа теафлавинов служили 2% (об./об.) раствор уксусной кислоты в воде (мобильная фаза A) и ацетонитрил (мобильная фаза B). Для разделения теафлавинов после уравновешивания колонки 8% буфером A в течение 5 мин использовался градиент от 8% В до 69% B в продолжение 50 мин. Стандартами для количественной оценки служили реализуемые на рынке высокочистые теафлавины.To analyze theaflavins, the Shimadzu HPLC system was used with a column filled with octadecyl silica (C18) (Nova-pak from Waters) with an internal diameter of 3.9 mm and a length of 150 mm; detection was carried out at 380 nm; the column temperature was 40 ° C, the injection volume was 20 μl and the flow rate was 1 ml / min. The mobile phases for theaflavin analysis were a 2% (v / v) solution of acetic acid in water (mobile phase A) and acetonitrile (mobile phase B). To separate theaflavins after equilibrating the column with 8% buffer A for 5 minutes, a gradient of 8% B to 69% B was used for 50 minutes. High-purity theaflavins sold on the market served as standards for quantification.

Ферментация в твердом состоянииSolid fermentation

Ферментацию в твердом состоянии проводили при комнатной температуре (~25°C) путем распределения 5 г дхул на плоской поверхности в условиях окружающей среды. Время ферментации составило 90-120 мин. При осуществлении ферментации в твердом состоянии с участием танназы доза последней составляла 1,67 мг/г растворимых сухих веществ в чайном сырье. В дхул добавлялась вода, содержащая требуемое количество эпикатехина или эпикатехина и танназы, при отношении 1,7: 1 (в пересчете на растворимые сухие вещества).Solid fermentation was carried out at room temperature (~ 25 ° C) by distributing 5 g of dhul on a flat surface under ambient conditions. The fermentation time was 90-120 minutes. When performing solid state fermentation with the participation of tannase, the dose of the latter was 1.67 mg / g of soluble solids in tea raw materials. Water containing the required amount of epicatechin or epicatechin and tannase was added to dhul at a ratio of 1.7: 1 (in terms of soluble solids).

Количества эпикатехина и танназы, добавленные при ферментации в твердом состоянии в различных примерах, указаны в табл. 2.The amounts of epicatechin and tannase added during solid state fermentation in various examples are shown in Table. 2.

Таблица 2table 2 Примеры ферментации в твердом состоянииSolid State Fermentation Examples ПримерExample Эпикатехин (мг/г растворимых сухих веществ в дхул)Epicatechin (mg / g soluble solids in dhul) Танназа (мг/г растворимых сухих веществ в дхул)Tannase (mg / g soluble solids in dhul) Сравнительный пример AComparative Example A 00 00 1one 3535 00 22 118118 00 33 258258 00 Сравнительный пример B1Comparative Example B1 00 00 Сравнительный пример B2Benchmark B2 00 1,671,67 4four 3535 1,671,67 55 118118 1,671,67 66 258258 1,671,67 77 518518 1,671,67

Примеры 1-7 - это примеры на способы настоящего изобретения, в то время как сравнительные примеры A, B1 и B2 выходят за рамки изобретения.Examples 1-7 are examples of the methods of the present invention, while comparative examples A, B1 and B2 are beyond the scope of the invention.

Ферментация в состоянии суспензииSuspended Fermentation

Ферментацию в состоянии суспензии проводили во встряхиваемых склянках при 30°C с использованием орбитального встряхивающего устройства, работающего при 190-200 об/мин. В эксперименте по ферментации использовали 5 г (в пересчете на свежую массу) дхул при отношении воды к растворимым сухим веществам 41,7:1 (или 5:1 в пересчете на свежую массу). К полученной суспензии добавляли перед ферментацией требуемое количество эпикатехина. Время ферментации составило 90 мин. При проведении ферментации в состоянии суспензии с участием добавленной танназы (активность которой составляла 50 000 единиц активности танназы/г, от Kikkoman) доза последней составляла 0,83 мг/г растворимых сухих веществ при использовании маточного раствора 1 г/л.Fermentation in suspension was carried out in shaken flasks at 30 ° C using an orbital shaker operating at 190-200 rpm. In a fermentation experiment, 5 g (in terms of fresh weight) of dhul were used with a ratio of water to soluble solids of 41.7: 1 (or 5: 1 in terms of fresh weight). The required amount of epicatechin was added to the resulting suspension before fermentation. The fermentation time was 90 minutes. When conducting fermentation in a suspension state with the addition of tannase (whose activity was 50,000 units of tannase activity / g, from Kikkoman), the dose of the latter was 0.83 mg / g of soluble solids using a mother solution of 1 g / l.

Количества эпикатехина и танназы, добавленные при ферментации в состоянии суспензии в различных примерах, указаны в табл.3.The amounts of epicatechin and tannase added during suspension fermentation in various examples are shown in Table 3.

Таблица 3Table 3 Примеры ферментации в состоянии суспензииSuspension Fermentation Examples ПримерExample Эпикатехин (мг/грамм растворимых сухих веществ в дхул)Epicatechin (mg / gram soluble solids in dhul) Танназа (мг/грамм растворимых сухих веществ в дхул)Tannase (mg / gram soluble solids in dhul) Сравнительный пример CComparative Example C 00 00 88 3535 00 99 118118 00 1010 258258 00 11eleven 518518 00 Сравнительный пример D1Comparative Example D1 00 00 Сравнительный пример D2Comparative Example D2 00 0,830.83 1212 3535 0,830.83 1313 118118 0,830.83 14fourteen 258258 0,830.83 15fifteen 518518 0,830.83

Примеры 8-15 - это примеры на способы настоящего изобретения, в то время как сравнительные примеры C, D1 и D2 выходят за рамки изобретения.Examples 8-15 are examples of the methods of the present invention, while comparative examples C, D1 and D2 are beyond the scope of the invention.

Результатыresults

Во всех примерах определяли общее содержание теафлавинов в чайных продуктах; полученные результаты сведены в табл.4 (ферментация в твердом состоянии) и табл.5 (ферментация в состоянии суспензии).In all examples, the total content of theaflavins in tea products was determined; the results obtained are summarized in table 4 (solid state fermentation) and table 5 (suspension fermentation).

Таблица 4Table 4 Общее содержание теафлавинов при ферментации в твердом состоянииThe total content of theaflavins in solid state fermentation ПримерExample Общее содержание теафлавинов в чайном продукте (мас.% в пересчете на сухую массу)The total content of theaflavins in the tea product (wt.% In terms of dry weight) Сравнительный пример AComparative Example A 1,31.3 1one 1,81.8 22 2,42,4 33 1,91.9 Сравнительный пример B1Comparative Example B1 1,91.9 Сравнительный пример B2Benchmark B2 3,13,1 4four 4,34.3 55 4,04.0 66 4,94.9 77 5,25.2

Из вышеприведенного очевидно, что чайные продукты примеров 1-4, приготовленные способом, включающим стадию энзимной ферментации в присутствии экзогенного эпикатехина, содержали повышенные уровни теафлавинов по сравнению с чайным продуктом сравнительного примера A.From the above, it is obvious that the tea products of examples 1-4, prepared by a method comprising the enzymatic fermentation step in the presence of exogenous epicatechin, contained elevated levels of theaflavins compared to the tea product of comparative example A.

Равным образом, чайные продукты примеров 5-8, приготовленные способом, включающим стадию энзимной ферментации в присутствии экзогенного эпикатехина и танназы, содержали повышенные уровни теафлавинов по сравнению с чайными продуктами сравнительных примеров B1 и B2.Likewise, the tea products of examples 5-8, prepared by a method comprising the enzymatic fermentation step in the presence of exogenous epicatechin and tannase, contained elevated levels of theaflavins compared to the tea products of comparative examples B1 and B2.

Таблица 5Table 5 Общее содержание теафлавинов при ферментации суспензииThe total content of theaflavins in suspension fermentation ПримерExample Общее содержание теафлавинов в чайном продукте (мас.% в пересчете на сухую массу)The total content of theaflavins in the tea product (wt.% In terms of dry weight) Сравнительный пример СComparative Example C 1,91.9 88 2,02.0 99 2,62.6 1010 3,13,1 11eleven 2,92.9 Сравнительный пример D1Comparative Example D1 1,91.9 Сравнительный пример D2Comparative Example D2 3,73,7 1212 5,15.1 1313 6,46.4 14fourteen 6,06.0 15fifteen 6,46.4

Из вышеприведенного очевидно, что чайные продукты примеров 8-11, приготовленные способом, включающим стадию энзимной ферментации в присутствии экзогенного эпикатехина и добавленной извне воды, содержали повышенные уровни теафлавинов по сравнению с чайным продуктом сравнительного примера С.From the above it is obvious that the tea products of examples 8-11, prepared by a method comprising the enzymatic fermentation step in the presence of exogenous epicatechin and externally added water, contained elevated levels of theaflavins compared to the tea product of comparative example C.

Равным образом чайные продукты примеров 12-15, приготовленные способом, включающим стадию энзимной ферментации в присутствии экзогенного эпикатехина, танназы и добавленной извне воды, содержали повышенные уровни теафлавинов по сравнению с чайными продуктами сравнительных примеров D1 и D2.Likewise, the tea products of Examples 12-15, prepared by a method including the enzymatic fermentation step in the presence of exogenous epicatechin, tannase and externally added water, contained elevated levels of theaflavins compared to the tea products of Comparative Examples D1 and D2.

Из всех вышеописанных примеров очевидно также, что уровень теафлавинов повышался по мере увеличения уровня эпикатехина примерно до 300 мг/г сухой массы дхул. При дальнейшем увеличении уровня эпикатехина примерно до 500 мг/г сухой массы дхул отмечалось либо выравнивание, либо снижение уровня теафлавинов.Of all the examples described above, it is also clear that theaflavins increased as the level of epicatechin increased to about 300 mg / g dhul dry weight. With a further increase in the level of epicatechin to approximately 500 mg / g dry weight of dhul, either leveling or a decrease in the level of theaflavins was noted.

На основании этого можно утверждать, что введение эпикатехина на уровне, превышающем 750 мг/г сухой массы дхул, вряд ли приведет к дальнейшему повышению содержания теафлавинов или экономически выгодно.Based on this, it can be argued that the introduction of epicatechin at a level exceeding 750 mg / g of dry weight of dhul is unlikely to lead to a further increase in theaflavin content or is economically viable.

Таким образом, согласно настоящему изобретению появилась возможность производить обогащенные теафлавинами чайные продукты путем проведения энзимной ферментации в твердом состоянии, а также энзимной ферментации в состоянии суспензии в присутствии экзогенного эпикатехина и в присутствии или в отсутствие танназы.Thus, according to the present invention, it has become possible to produce tea products enriched with theaflavins by performing solid state enzymatic fermentation as well as suspension enzymatic fermentation in the presence of exogenous epicatechin and in the presence or absence of tannase.

Claims (15)

1. Способ производства обогащенного теафлавинами чайного продукта, включающий стадию подвергания чайного сырья энзимной ферментации в присутствии добавленного экзогенного эпикатехина.1. A method of manufacturing a tea product enriched with theaflavins, comprising the step of subjecting the tea raw materials to enzymatic fermentation in the presence of added exogenous epicatechin. 2. Способ по п.1, в котором количество указанного эпикатехина составляет от 35 до 750 мг/г сухой массы растворимых сухих веществ в указанном чайном сырье.2. The method according to claim 1, in which the amount of said epicatechin is from 35 to 750 mg / g dry weight of soluble solids in said tea raw material. 3. Способ по п.1, включающий стадию обработки чайного сырья танназой перед или в процессе указанной ферментации.3. The method according to claim 1, comprising the step of treating the tea raw materials with tannase before or during said fermentation. 4. Способ по п.3, в котором количество указанной танназы составляет от 0,08 до 8 мг/г сухой массы указанных растворимых сухих веществ.4. The method according to claim 3, in which the amount of said tannase is from 0.08 to 8 mg / g dry weight of said soluble solids. 5. Способ по п.1, в котором указанная ферментация проводится в присутствии добавленной воды.5. The method according to claim 1, wherein said fermentation is carried out in the presence of added water. 6. Способ по п.5, в котором количество указанной воды составляет от 0,1 до 500 г/г сухой массы растворимых сухих веществ в указанном чайном сырье.6. The method according to claim 5, in which the amount of said water is from 0.1 to 500 g / g dry weight of soluble solids in said tea raw material. 7. Способ по любому из предшествующих пунктов, в котором указанное чайное сырье представляет собой листья чая, содержащие эндогенные ферменты, способные к указанной энзимной ферментации, а указанный способ включает стадии:
(а) завяливания указанных листьев чая;
(б) мацерации завяленных листьев;
(в) подвергания мацерированных листьев чая энзимной ферментации в присутствии добавленного экзогенного эпикатехина и
(г) огневой сушки с получением обогащенного теафлавинами черного чая.
7. The method according to any one of the preceding paragraphs, wherein said tea raw material is tea leaves containing endogenous enzymes capable of said enzymatic fermentation, and said method comprises the steps of:
(a) withering of said tea leaves;
(b) maceration of withered leaves;
(c) subjecting the macerated tea leaves to enzymatic fermentation in the presence of added exogenous epicatechin and
(g) fire drying to obtain theaflavins-enriched black tea.
8. Способ по любому из пп.1-6, в котором указанное чайное сырье представляет собой листья чая, содержащие эндогенные ферменты, способные к энзимной ферментации, а указанный способ включает стадии:
(а) завяливания указанных листьев чая;
(б) мацерации завяленных листьев и добавления к мацерированным листьям чая от 17 до 500 г воды/г растворимых сухих веществ с получением суспензии;
(в) подвергания суспензии энзимной ферментации в присутствии добавленного экзогенного эпикатехина с получением обогащенной теафлавинами суспензии.
8. The method according to any one of claims 1 to 6, wherein said tea raw material is tea leaves containing endogenous enzymes capable of enzymatic fermentation, and said method comprises the steps of:
(a) withering of said tea leaves;
(b) maceration of the dried leaves and adding to the macerated tea leaves from 17 to 500 g of water / g of soluble solids to obtain a suspension;
(c) exposing the suspension to enzymatic fermentation in the presence of added exogenous epicatechin to obtain a theaflavin-enriched suspension.
9. Способ по п.1, в котором указанная ферментация осуществляется путем добавления экзогенного фермента и косубстрата.9. The method according to claim 1, wherein said fermentation is carried out by adding an exogenous enzyme and cosubstrate. 10. Способ по п.9, в котором указанное чайное сырье содержит инактивированные, в основном, эндогенные ферменты.10. The method according to claim 9, in which the specified tea raw material contains inactivated, mainly endogenous enzymes. 11. Способ по п.9, в котором указанный экзогенный фермент является полифенолоксидазой, а указанный косубстрат - кислородом.11. The method according to claim 9, wherein said exogenous enzyme is polyphenol oxidase and said cosubstrate is oxygen. 12. Способ по п.9, в котором указанный экзогенный фермент является пероксидазой, а указанный косубстрат - пероксидом водорода.12. The method according to claim 9, in which said exogenous enzyme is peroxidase, and said cosubstrate is hydrogen peroxide. 13. Способ по любому из пп.9-12, в котором указанное чайное сырье является зеленым чаем или быстрорастворимым чаем, и указанный способ включает стадии:
(а) добавления в чайное сырье от 17 до 500 г воды/г растворимых сухих веществ с получением суспензии;
(б) подвергания суспензии энзимной ферментации путем добавления экзогенного эпикатехина и косубстрата в присутствии добавленного экзогенного эпикатехина с получением обогащенной теафлавинами суспензии.
13. The method according to any one of claims 9-12, wherein said tea raw material is green tea or instant tea, and said method comprises the steps of:
(a) adding to tea raw materials from 17 to 500 g of water / g of soluble solids to obtain a suspension;
(b) subjecting the suspension to enzymatic fermentation by adding exogenous epicatechin and cosubstrate in the presence of added exogenous epicatechin to obtain a theaflavin-enriched suspension.
14. Способ по любому из пп.1-6 или 9-12, в котором массовое отношение общего количества катехинов к теафлавинам в указанном чайном сырье составляет более 10.14. The method according to any one of claims 1 to 6 or 9-12, in which the mass ratio of the total number of catechins to theaflavins in said tea raw material is more than 10. 15. Способ по любому из пп.1-6 или 9-12, в котором указанное чайное сырье содержит не более 10 мг теафлавинов/г сухой массы растворимых сухих веществ. 15. The method according to any one of claims 1 to 6 or 9-12, wherein said tea raw material contains not more than 10 mg of theaflavins / g dry weight of soluble solids.
RU2009125002/10A 2006-12-01 2007-11-15 Method for production of tea products enriched with theaflavins RU2426441C2 (en)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP06125217.7 2006-12-01
EP06125217 2006-12-01
IN792MU2007 2007-04-24
IN792/MUM/2007 2007-04-24
EP07111788.1 2007-07-05

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2009125002A RU2009125002A (en) 2011-01-10
RU2426441C2 true RU2426441C2 (en) 2011-08-20

Family

ID=44054224

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2009125002/10A RU2426441C2 (en) 2006-12-01 2007-11-15 Method for production of tea products enriched with theaflavins

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2426441C2 (en)

Also Published As

Publication number Publication date
RU2009125002A (en) 2011-01-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP2096937B1 (en) Process for the preparation of theaflavin-enhanced tea products
US6482450B1 (en) Cold water infusing leaf tea
US20100086642A1 (en) Process for manufacturing tea products
JP4699110B2 (en) Fermented tea beverage and method for producing the same
EP2192844B1 (en) Process for extracting theaflavins from tea
US6589575B2 (en) Cold water soluble tea
Mahanta et al. Changes of polyphenol oxidase and peroxidase activities and pigment composition of some manufactured black teas (Camellia sinensis L.)
US6348224B1 (en) Black tea manufacture
Shitandi et al. Tea processing and its impact on catechins, theaflavin and thearubigin formation
US20080254190A1 (en) Extraction of theaflavins
RU2426441C2 (en) Method for production of tea products enriched with theaflavins
Maulana et al. Changes of chemical contents during the withering process of white tea
JP7074418B1 (en) Fermented tea extract manufacturing method
Murugesan et al. Enhancing the quality of naturally oxidized tea with ascorbic acid
GB2348104A (en) Manufacture of black tea involving amino and phenolic acids
JP2000228951A (en) Production of black tea
JP2012507993A (en) Tea composition
EP4311435A1 (en) A process for producing a tea product
EA023943B1 (en) Process for manufacturing tea products

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20121116