RU2421731C2 - Method to detect specific antibodies to virus respiratory infections of cattle - Google Patents
Method to detect specific antibodies to virus respiratory infections of cattle Download PDFInfo
- Publication number
- RU2421731C2 RU2421731C2 RU2008126759/10A RU2008126759A RU2421731C2 RU 2421731 C2 RU2421731 C2 RU 2421731C2 RU 2008126759/10 A RU2008126759/10 A RU 2008126759/10A RU 2008126759 A RU2008126759 A RU 2008126759A RU 2421731 C2 RU2421731 C2 RU 2421731C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- sera
- negative
- positive
- values
- optical
- Prior art date
Links
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к ветеринарной вирусологии и биотехнологии и может быть использовано как для широкомасштабных, так и для выборочных исследований сывороток крови, молока, молозива животных на наличие специфических антител к возбудителям вирусных респираторных инфекций крупного рогатого скота.The invention relates to veterinary virology and biotechnology and can be used both for large-scale and for selective studies of blood serum, milk, colostrum of animals for the presence of specific antibodies to causative agents of viral respiratory infections of cattle.
В основу комплексной тест-системы ИФА для одновременного обнаружения специфических антител в сыворотках крови к антигенам респираторных вирусов заложены результаты изготовления тест-панелей для выявления антител к антигенам вирусов инфекционного ринотрахеита (ИРТ), парагриппа-3 (ПГ-3), респираторно-синцитиального (PC), аденовирусной инфекции (АВИ) и вирусной диареи-болезни слизистой (ВД-БС) крупного рогатого скота (КРС) в отдельности.The integrated ELISA test system for the simultaneous detection of specific antibodies in the blood serum against respiratory virus antigens is based on the results of the production of test panels for the detection of antibodies to infectious rhinotracheitis virus viruses (IRT), parainfluenza-3 (PG-3), and respiratory syncytial ( PC), adenovirus infection (AVI), and viral diarrhea-mucosal disease (VD-BS) of cattle separately.
С помощью разработанной тест-системы испытано 126 сывороток крови КРС разных возрастных групп, полученных из различных хозяйств и регионов РФ, а также пробы молока и молозива. Полученные данные показали, что при комплексном анализе сывороток крови вакцинированных животных высокие показатели оптической плотности отмечались в гомологичной системе антиген-антитело.Using the developed test system, we tested 126 cattle blood serum of different age groups obtained from various farms and regions of the Russian Federation, as well as milk and colostrum samples. The data obtained showed that, in a complex analysis of the blood serum of vaccinated animals, high optical density values were observed in a homologous antigen-antibody system.
Клинико-эпизоотологические исследования в хозяйствах, неблагополучных по массовым респираторным болезням крупного рогатого скота, показали, что во всех случаях, характер течения и симптоматика болезней телят не позволяют достоверно дифференцировать их этиологическую принадлежность. Поэтому очень важна лабораторная диагностика. Лабораторная диагностика в этих случаях осуществлялась путем изоляции штаммов в культуре клеток, исследовании парных проб сывороток в реакции нейтрализации (РН), реакции непрямой гемагглютинации (РНГА) и ИФА.Clinical and epizootological studies in farms unsuccessful in mass respiratory diseases of cattle showed that in all cases, the nature of the course and symptoms of calf diseases do not allow to reliably differentiate their etiological affiliation. Therefore, laboratory diagnosis is very important. Laboratory diagnosis in these cases was carried out by isolating the strains in cell culture, studying paired serum samples in the neutralization reaction (PH), indirect hemagglutination reaction (RNGA) and ELISA.
Вирусологическими исследованиями диагностировались ИРТ, ВД-БС, PC, АВИ или смешанное вирусное заболевание с участием ПГ-3, респираторно-синцитиального вируса.Virological studies diagnosed IRT, VD-BS, PC, AVI or a mixed viral disease involving PG-3, a respiratory syncytial virus.
Исследования показали широкое распространение ИРТ и ВД-БС. В 80% хозяйств выявлены антитела в диагностических титрах к одному или обоим возбудителям. Титр специфических антител в РН колебался от 1:4 до 1:12.8.Studies have shown the widespread use of RTI and VD-BS. In 80% of households, antibodies were detected in diagnostic titers for one or both pathogens. The titer of specific antibodies in the pH ranged from 1: 4 to 1: 12.8.
Анализ полученных данных свидетельствовал о значительном количестве серопозитивных животных. Следует отметить, что в 80% случаев были выявлены антитела к вирусу ВД-БС КРС в исследуемом материале с одновременным обнаружением антител к другим вирусным антигенам в различных сочетаниях. Так, в 27% пробах сывороток выявлялись антитела только к вирусу ВД-БС КРС. Вируснейтрализующие антитела к антигенам ИРТ и ВД-БС были найдены у 33% обследованных животных. Только 7% проб содержали антитела к вирусам ИРТ, ПГ-3 и ВД-БС одновременно, в 10% - только к вирусу ИРТ, 7% - только к вирусу PC, 14% -к ПГ-3.An analysis of the data indicated a significant number of seropositive animals. It should be noted that in 80% of cases, antibodies to the VD-BS virus of cattle were detected in the test material with the simultaneous detection of antibodies to other viral antigens in various combinations. So, in 27% of serum samples, antibodies only to the VD-BS virus of cattle were detected. Virus neutralizing antibodies to RTI and VD-BS antigens were found in 33% of the examined animals. Only 7% of the samples contained antibodies to the IRT, PG-3 and VD-BS viruses simultaneously, in 10% - only to the IRT virus, 7% - only to the PC virus, 14% to PG-3.
Противовирусные антитела выявлялись как у клинически здоровых животных, так и у животных с различной патологией. Наличие противовирусных антител в сыворотках крови, молоке и молозиве у невакцинированного ранее крупного рогатого скота свидетельствовал о контакте особей с вирусными антигенами и формировании постинфекционного иммунитета, а после вакцинации - о напряженности поствакцинального иммунитета у привитых животных.Antiviral antibodies were detected both in clinically healthy animals and in animals with various pathologies. The presence of antiviral antibodies in blood serum, milk and colostrum in previously unvaccinated cattle indicated the contact of individuals with viral antigens and the formation of post-infection immunity, and after vaccination, the intensity of post-vaccination immunity in vaccinated animals.
В тех случаях, когда в одном стаде циркулируют несколько возбудителей, применение моновакцин, как правило, не обеспечивало положительной динамики заболеваний.In cases where several pathogens circulate in one herd, the use of monovaccines, as a rule, did not provide positive dynamics of diseases.
Специфическая профилактика указанных выше заболеваний осложняется тем, что восприимчивые к ним в раннем возрасте телята имеют недостаточно сформированную иммунную систему. Иммунитет у них в этот период обеспечивается антителами, полученными с молозивом матерей. Использование вакцин для активной иммунизации телят в раннем возрасте, вероятно, неоправданно, так как в крови циркулируют защитные материнские антитела. Более того, Fremont G. (17) при проведении такой вакцинации отмечал увеличение заболеваемости и даже смертности телят за счет торможения синтеза собственных секреторных антител, пассивно приобретенных с молозивом материнскими антителами, по принципу обратной связи. Установлено, если у матерей титр антител в РНГА превышает 1:256, то у детенышей концентрация колостральных антител будет не меньше 1:40 и воспрепятствует нормальному формированию поствакцинального иммунитета. С другой стороны, материнские антитела, защищая от вирулентного вируса, также могут инактивировать и вакцинный вирус и поэтому воспрепятствовать созданию напряженного поствакцинального иммунитета. Следовательно, телят от таких матерей нельзя прививать в такой период. Наиболее оптимальной в данной ситуации была бы более поздняя вакцинация, когда антитела у них полностью исчезнут. Наилучшим способом решения данной проблемы является определение уровня антител с помощью ИФА, по результатам которого можно скорректировать сроки вакцинации.The specific prevention of the above diseases is complicated by the fact that calves susceptible to them at an early age have an insufficiently formed immune system. Their immunity during this period is provided by antibodies obtained with colostrum of mothers. The use of vaccines for the active immunization of calves at an early age is probably unjustified, since protective maternal antibodies circulate in the blood. Moreover, Fremont G. (17) during such vaccination noted an increase in the incidence and even mortality of calves due to inhibition of the synthesis of their own secretory antibodies passively acquired with colostrum by maternal antibodies, according to the feedback principle. It was established that if in mothers the antibody titer in RNGA exceeds 1: 256, then in young animals the concentration of colostral antibodies will be not less than 1:40 and will prevent the normal formation of post-vaccination immunity. On the other hand, maternal antibodies, protecting against a virulent virus, can also inactivate the vaccine virus and therefore prevent the creation of intense post-vaccination immunity. Consequently, calves from such mothers cannot be vaccinated in such a period. The most optimal in this situation would be a later vaccination, when their antibodies completely disappear. The best way to solve this problem is to determine the level of antibodies using ELISA, according to the results of which you can adjust the timing of vaccination.
Но проблема не исчерпывается блокирующим влиянием колостральных антител.But the problem is not limited to the blocking effect of colostral antibodies.
В стратегии профилактики болезней телят, как правило, отдают предпочтение формированию у них колострального иммунитета за счет получения молозива иммунизированных матерей. Следует отметить, чтобы избежать возможности гипериммунизации взрослых коров в случае занесения на ферму вируса, необходима еще одна корректировка специфических мероприятий - внедрить в практику выборочную проверку наличия противовирусных антител перед вакцинацией и после вакцинации путем определения напряженности поствакцинального иммунитета (по РНГА или ИФА). Формирование поствакцинального иммунитета может быть также нарушено из-за угнетения иммунокомпетентной системы при значительном распространении на ферме инфекций, свойственных ИРТ и особенно ВД-БС, обладающих выраженной иммуносупрессией (7, 8, 9, 12, 13, 15, 22).In the strategy for the prevention of diseases of calves, as a rule, they give preference to the formation of their colostral immunity by obtaining colostrum of immunized mothers. It should be noted that in order to avoid the possibility of hyperimmunization of adult cows if the virus is introduced into the farm, one more adjustment of specific measures is necessary - to put into practice a random check of the presence of antiviral antibodies before vaccination and after vaccination by determining the strength of post-vaccination immunity (by PHA or ELISA). The formation of post-vaccination immunity can also be impaired due to inhibition of the immunocompetent system with a significant spread of infections on the farm, characteristic of IRT and especially VD-BS, with pronounced immunosuppression (7, 8, 9, 12, 13, 15, 22).
В условиях, когда необходимо обеспечить уровень защиты, телят раннего возраста часто прививают целым рядом вакцин, в состав которых входят порой антигены возбудителей, имеющих второстепенное значение (9).In conditions when it is necessary to provide a level of protection, young calves are often vaccinated with a number of vaccines, which sometimes include secondary antigens of pathogens (9).
Учитывая вышеизложенное, можно сделать вывод, что разработанная нами тест-система позволяет делать предварительные прогнозы об инфицированности стада. Для подтверждения прогноза, конечно, потребуются дополнительные методы исследования (изоляция вируса в культуре клеток, метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) для выявления генома вируса и т.д.). В результате таких исследований можно научно обосновывать выбор мер по оздоровлению хозяйств (5, 6, 7, 11, 12, 13, 17, 18).Considering the above, we can conclude that the test system developed by us allows us to make preliminary forecasts about the infection of the herd. To confirm the forecast, of course, additional research methods will be required (isolation of the virus in cell culture, polymerase chain reaction (PCR) method to detect the virus genome, etc.). As a result of such studies, it is possible to scientifically substantiate the choice of measures for the improvement of farms (5, 6, 7, 11, 12, 13, 17, 18).
Итак, использование в практической деятельности серологических исследований сыворотки крови животных методом ИФА позволит более рационально и надежно организовывать работу по профилактике и оздоровлению стад от инфекционных заболеваний.So, the use in practice of serological studies of animal blood serum by ELISA will allow more rational and reliable organization of work on the prevention and recovery of herds from infectious diseases.
Для исследования сывороток крови по одному разведению необходимо устанавливать оптимальное рабочее разведение сывороток, позитивно-негативный порог реакции, допустимые величины оптических плотностей отрицательных и положительных сывороток, а также определить чувствительность и специфичность метода ИФА по отношению к базовым реакциям.For the study of blood serum in one dilution, it is necessary to establish the optimal working dilution of sera, positive-negative reaction threshold, acceptable optical densities of negative and positive sera, as well as determine the sensitivity and specificity of the ELISA method with respect to the basic reactions.
Способ осуществляют следующим образом.The method is as follows.
Пример 1. Установление оптимального рабочего разведения сывороток с помощью отношения значений оптической плотности испытуемой сыворотки к значению оптической плотности положительного контроля (S/P).Example 1. The establishment of the optimal working dilution of sera using the ratio of the optical density of the test serum to the optical density of the positive control (S / P).
С целью определения оптимального рабочего разведения сывороток вычисляли зависимость титра антител lg(T), определенного методом последовательных разведений сывороток, от значений lg(S/P), подсчитанных на 100 сыворотках для разведений 1:100, 1:200, 1:400 и 1:800. Для каждого разведения была построена отдельная линия регрессии. Результаты регрессионного анализа по всему массиву данных представлены в таблице 1.In order to determine the optimal working dilution of sera, the dependence of the antibody titer lg (T), determined by the method of successive dilutions of sera, on the values of lg (S / P) calculated on 100 sera for dilutions of 1: 100, 1: 200, 1: 400 and 1 was calculated : 800. A separate regression line was constructed for each breeding. The results of the regression analysis for the entire data array are presented in table 1.
Данные статистической обработки показывают, что все представленные разведения имеют сильную корреляционную связь, однако оптимальное значение коэффициента корреляции (R=0,9224) и стандартной ошибки имеет разведение 1:400. Это разведение было принято в качестве рабочего.Statistical processing data show that all the dilutions presented have a strong correlation, but the optimal value for the correlation coefficient (R = 0.9224) and standard error has a 1: 400 dilution. This breeding was accepted as a worker.
Используя математически выраженную линейную зависимость для lg Т и lg S/P, имеющую вид lg Т=A+B×lg S/P, (А и В - коэффициенты реакции, установленные опытным путем) было выведено уравнение линейной регрессии для выбранного разведения сыворотки 1:400.Using a mathematically expressed linear relationship for log T and log S / P, having the form log T = A + B × log S / P, (A and B are the reaction coefficients established experimentally), a linear regression equation was derived for the selected serum dilution 1 : 400.
Коэффициенты уравнения, соответствующие рабочему разведению, использовали для расчета титра антител к респираторным вирусам при тестировании сывороток в одном разведении. Уравнение для расчета регрессии имело следующий вид:The coefficients of the equation corresponding to the working dilution were used to calculate the titer of antibodies to respiratory viruses when testing sera in one dilution. The equation for calculating the regression was as follows:
lg T=3,649+1,5237×lgS/P, где S/P=(OП-NCx)/(PCx-NCx), где ОП - это измеренная оптическая плотность образца, а РСх и NCх- оптические плотности положительной и отрицательной контрольных сывороток.log T = 3,649 + 1,5237 × logS / P, where S / P = (OP-NC x ) / (PCx-NC x ), where OD is the measured optical density of the sample, and PCx and NC x are the optical densities of positive and negative control sera.
В случае перехода к другим сериям контрольных сывороток параметры регрессионного уравнения должны быть определены заново.In the case of a transition to other series of control sera, the parameters of the regression equation must be redefined.
Полученное уравнение линейной регрессии достоверно для определенных значений отрицательного и положительного контролей. Для определения допустимых величин оптической плотности для контрольных и отрицательных сывороток были проанализированы соответствующие значения оптической плотности положительной и отрицательной контрольных сывороток (n=20), исследованных в разведении 1:400. Для получения достоверных результатов реакции значение оптической плотности отрицательной контрольной сыворотки не должно превышать 0,150 оптических единиц (о.п.), а значение положительного контроля должно быть не меньше 0,439 о.п. Если значения оптической плотности контрольных сывороток выходят за рамки допустимых значений, то результаты реакции будут считаться недостоверными и пробы должны быть исследованы повторно.The obtained linear regression equation is reliable for certain values of the negative and positive controls. To determine the permissible optical density values for control and negative sera, the corresponding optical density values of the positive and negative control sera (n = 20), studied at a dilution of 1: 400, were analyzed. To obtain reliable results of the reaction, the optical density of the negative control serum should not exceed 0.150 optical units (r.p.), and the value of the positive control should not be less than 0.439 r.p. If the optical density values of the control sera are outside the acceptable range, then the reaction results will be considered unreliable and the samples should be re-examined.
Пример 2. Определение позитивно-негативного контроля значений величины титра (Т) для качественной характеристики результатов ИФА.Example 2. Determination of positive-negative control of the values of the titer (T) for the qualitative characteristics of the results of ELISA.
При определении качественной характеристики исследуемых сывороток крови по рассчитанному титру антител в ИФА за основу были взяты результаты базовых реакций.When determining the qualitative characteristics of the studied blood sera by the calculated antibody titer in ELISA, the results of the basic reactions were taken as the basis.
Для объективной оценки иммунного ответа необходимо было установить позитивно-негативный порог (ПНП) реакции.For an objective assessment of the immune response, it was necessary to establish a positive-negative threshold (ANP) of the reaction.
Тестировали по 119 заведомо отрицательных в реакции нейтрализации, в РИГА ко всем пяти респираторным вирусным инфекциям. ПНП определяли, рассчитывая средние значения оптической плотности отрицательных сывороток для разведения 1:400, прибавляя три значения стандартного отклонения (для расчета верхней границы ПНП) и два значения стандартного отклонения (для расчета нижней границы ПНП).We tested 119 obviously negative in the neutralization reaction, in RIGA to all five respiratory viral infections. ANPs were determined by calculating the average optical density of negative sera for a 1: 400 dilution, adding three standard deviation values (to calculate the upper bound of the PNP) and two standard deviations (to calculate the lower bound of the PNP).
Среднее значение оптической плотности отрицательных сывороток (0,126 о.е.), суммированное с утроенным и удвоенным значениями стандартного отклонения, составило 0,261 о.е. и 0,216 о.е.The average optical density of negative sera (0.126 p.u.), combined with triple and double the standard deviation, was 0.261 p.u. and 0.216 p.u.
Для данных значений вычисляли S/P - отношение, которое приняли в качестве критерия для разграничения различных типов реакции. Было установлено, что сыворотки следует считать отрицательными, если отношение S/P<0,2, или положительные, если S/P>0,3. Существующий между ними интервал значений соответствовал сомнительным результатам.For these values, the S / P ratio was calculated, which was taken as a criterion for distinguishing between different types of reactions. It was found that serum should be considered negative if the ratio S / P <0.2, or positive if S / P> 0.3. The interval of values existing between them corresponded to dubious results.
Пример 3. Определение допустимых величин оптической плотности (ОП) контрольных сывороток.Example 3. Determination of acceptable values of optical density (OD) of control sera.
Для получения достоверных результатов при тестировании сывороток по одному разведению необходимо было определить допустимые величины оптической плотности контрольных сывороток. Для исследования брали 17 повторностей положительной и отрицательной контрольных сывороток в разведении 1:400. Получили, что значения оптической плотности контрольных сывороток в диапазоне от 0,949 до 1,309 для положительного контроля и от 0,102 до 0,142 для отрицательного контроля являются оптимальными. (Табл.2).To obtain reliable results when testing sera from one dilution, it was necessary to determine the permissible values of the optical density of the control sera. For the study, 17 replicates of the positive and negative control sera at a dilution of 1: 400 were taken. It was found that the optical density of the control sera in the range from 0.949 to 1.309 for a positive control and from 0.102 to 0.142 for a negative control are optimal. (Table 2).
Допустимые значения ОП контрольных сыворотокtable 2
Permissible OD values of control sera
контролями
(P-N)Difference between
controls
(PN)
Если значения оптической плотности контрольных сывороток выходят за рамки допустимых значений, то результаты реакции будут считаться сомнительными, и пробы должны быть исследованы заново.If the optical density of the control sera is outside the acceptable range, then the reaction results will be considered doubtful, and the samples should be re-examined.
Пример 4. Оценка воспроизводимости результатов серологической реакции.Example 4. Evaluation of the reproducibility of the results of a serological reaction.
Для оценки воспроизводимости результатов методом одного разведения в ИФА определяли значение S/P отношения по формуле: (ОП пробы- ОПК-)/(ОПК+-ОПК-), где ОПпробы - оптическая плотность исследуемой сыворотки;To assess the reproducibility of the results by the method of one dilution in ELISA, the S / P ratio was determined by the formula: (OD of the sample - OPK - ) / (OPK + -OPA - ), where the OD of the sample is the optical density of the studied serum;
ОПК+ - оптическая плотность контрольной положительной сыворотки;OPK + - optical density of the control positive serum;
ОПК- - оптическая плотность контрольной отрицательной сыворотки.OPK - - the optical density of the control negative serum.
Для определения воспроизводимости результатов ИФА контрольную положительную сыворотку в разведении 1:400 вносили в лунки планшет и после проведения реакции сравнивали оптическую плотность в лунках. Коэффициент вариации (с) вычисляли по формулам:To determine the reproducibility of the ELISA results, a control positive serum at a dilution of 1: 400 was added to the wells of the plate and after the reaction, the optical density in the wells was compared. The coefficient of variation (s) was calculated by the formulas:
с=&/хср и &=[xmax-xmin]/k, где & - стандартное отклонение ОП, хср - среднее арифметическое ОП, к- количество определений, и он составил 3,5%, что говорит о малом рассеивании вариант и указывает на хорошую воспроизводимость результатов.c = & / x cf and & = [x max -x min ] / k, where & is the standard deviation of the OD, x cp is the arithmetic mean of the OD, k is the number of determinations, and it was 3.5%, which indicates a small dispersion option and indicates good reproducibility of the results.
Пример 5. Диагностическую чувствительность и специфичность вычисляли по формулам, рекомендованным Международным Эпизоотическим Бюро.Example 5. Diagnostic sensitivity and specificity were calculated according to the formulas recommended by the International Epizootic Bureau.
Диагностическую чувствительность и специфичность метода определяли по отношению к реакциям нейтрализации и РНГА. Диагностическую чувствительность метода (ДЧ) определяли по отношению количества положительных сывороток крови (П) к сумме истинно положительных сывороток (ИП) и ложно-отрицательных сывороток (ЛО), полученных от исследуемых иммунных животных (ИП+ЛО):Diagnostic sensitivity and specificity of the method were determined with respect to neutralization and RNGA reactions. The diagnostic sensitivity of the method (PM) was determined by the ratio of the number of positive blood serum (P) to the sum of true positive serum (PI) and false negative serum (LO) obtained from the studied immune animals (PI + LO):
ДЧ=[П/(ИП+ЛО)] 100%.PM = [P / (PI + LO)] 100%.
Диагностическую специфичность метода (ДС) определяли по отношению количества отрицательных сывороток крови (О) к сумме истинно отрицательных сывороток (ИО) и ложно-положительных сывороток (ЛП), полученных от исследуемых иммунных животных (ИО+ЛП):The diagnostic specificity of the method (DS) was determined by the ratio of the number of negative blood sera (O) to the sum of true negative sera (IO) and false-positive sera (LP) obtained from the studied immune animals (AI + LP):
ДС=[О/(ИО+ЛП)] 100%.DS = [O / (IO + PL)] 100%.
Коэффициент вариации (с) вычисляли по формулам: с=&/хср и &=[хmах-хmin]/к, где & - стандартное отклонение ОП, хср - среднее арифметическое ОП, к - количество определений.The coefficient of variation (s) was calculated by the formulas: c = & / x cf and & = [x max- x min ] / k, where & is the standard deviation of the OD, x cp is the arithmetic mean of the OD, and k is the number of determinations.
Результаты ИФА, РН и РНГА для вычисления диагностической чувствительности и специфичностиTable 3
ELISA, pH and RNGA results for calculating diagnostic sensitivity and specificity
Диагностическая чувствительность метода составила 89%, а диагностическая специфичность 93%.The diagnostic sensitivity of the method was 89%, and the diagnostic specificity of 93%.
Аналитическую специфичность тест-системы ИФА устанавливали по перекрестной реакции с гетерологичными сыворотками. Полученные данные свидетельствуют, что тест-система ИФА для выявления специфических антител к вирусным респираторным инфекциям в биологических жидкостях организма крупного рогатого скота является специфичной, так как дифференцирует антитела, специфичные к антигенам ИРТ; ВД-БС, АВИ, PC и ПГ-3.The analytical specificity of the ELISA test system was determined by cross-reaction with heterologous sera. The data obtained indicate that the ELISA test system for detecting specific antibodies to viral respiratory infections in biological fluids of cattle is specific, as it differentiates antibodies specific for IRT antigens; VD-BS, AVI, PC and PG-3.
Источники информацииInformation sources
1. Ашмарин И.П., Воробьев В.В.// Статистические методы в микробиологических исследованиях, 1962, Медгиз, Л.1. Ashmarin I.P., Vorobyov V.V. // Statistical methods in microbiological research, 1962, Medgiz, L.
2. Амиров А.Х. Иммуноферментный анализ в диагностике вирусной диареи крупного рогатого скота. Автореф. Дис.…Канд. вет. наук, Смоленск, 2004. - С.2. Amirov A.Kh. Enzyme-linked immunosorbent assay in the diagnosis of cattle viral diarrhea. Abstract. Dis ... Cand. vet. Sciences, Smolensk, 2004. - S.
3. Верховский О.А., Федоров Ю.Н., Гараева М.М., Алипер Т.И. Структурные и функциональные особенности иммуноглобулинов птиц//Ветеринария. - 2007. - №11. - С.18-223. Verkhovsky O.A., Fedorov Yu.N., Garaeva M.M., Alipper T.I. Structural and functional features of bird immunoglobulins // Veterinary medicine. - 2007. - No. 11. - S.18-22
4. Кочиш Т.Ю. Разработка набора реагентов для определения уровня антител к респираторно-синцитиальному вирусу крупного рогатого скота в иммуноферментном анализе. Автореф. дис… канд. биол. наук. - Щ., 2004.4. Kochish T.Yu. Development of a reagent kit for determining the level of antibodies to respiratory syncytial cattle virus in an enzyme immunoassay. Abstract. dis ... cand. biol. sciences. - Sh., 2004.
5. Мищенко В.А. Проблема респираторных смешанных инфекций молодняка КРС // Актуальные проблемы инфекционной патологии животных: Мат. Междунар. научно-практ. конф., 30-31 октября 2003 г. - Владимир. - С.72-77.5. Mishchenko V.A. The problem of mixed respiratory infections of young cattle // Actual problems of infectious animal pathology: Mat. Int. scientific and practical. Conf., October 30-31, 2003 - Vladimir. - S. 72-77.
6. Мищенко В.А., Бабкин В.Ф., Базаров М.А. Иммуномониторинг вирусных инфекций. Современные аспекты ветеринарной патологии животных: Материалы конференции. Владимир, 23-25 ноября 1998. - С.31-33.6. Mishchenko V.A., Babkin V.F., Bazarov M.A. Immunomonitoring of viral infections. Modern aspects of animal veterinary pathology: Conference proceedings. Vladimir, November 23-25, 1998 .-- S. 31-33.
7. Слугин И.С. Совершенствование профилактики инфекционных болезней пушных зверей // Ветеринария 2003. - №7. - С.3-6.7. Slugin I.S. Improving the prevention of infectious diseases of fur animals // Veterinary 2003. - No. 7. - C.3-6.
8. RU 2306567 G01N 33/535. Способ дифференциальной диагностики вирусных желудочно-кишечных инфекций крупного рогатого скота методом иммуноферментного анализа8. RU 2306567 G01N 33/535. Method for differential diagnosis of viral gastrointestinal infections of cattle by enzyme immunoassay
9. Сюрин В.Н., Самуйленко А.Я., Соловьев Б.В., Фомина Н.В. //Вирусные болезни животных. - М., ВНИТИБП. - 1998. - С.285.9. Syurin V.N., Samuilenko A.Ya., Soloviev B.V., Fomina N.V. // Viral diseases of animals. - M., VNITIBP. - 1998. - P.285.
10. Сюрин В.Н., Белоусова Р.В., Соловьев Б.В., Фомина Н.В. Справочник Методы лабораторной диагностики вирусных болезней животных. - М.:Агропромиздат, 1986. 351 С.10. Syurin V.N., Belousova R.V., Soloviev B.V., Fomina N.V. Reference Methods of laboratory diagnosis of animal viral diseases. - M.: Agropromizdat, 1986. 351 S.
11. Технические условия 19.10.97 - 89 «Набор для иммуноферментной диагностики инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота», утвержденные ГУВ Госагропрома СССР 01.08.89.11. Specifications 19.10.97 - 89 "Set for enzyme immunoassay for the diagnosis of infectious rhinotracheitis in cattle", approved by the GUV Gosagroprom of the USSR 08/01/89.
12. Федоров Ю.Н. Стратегия и принципы иммунопрофилактики болезней новорожденных телят // Материалы научно-практической конф. «Состояние и перспективы внедрения достижений ветеринарной науки и практики в сельскохозяйственное производство». 3-4 июля 2002. Вологда. - С.41-43.12. Fedorov Yu.N. Strategy and principles of immunoprophylaxis of diseases of newborn calves // Materials of scientific and practical conf. “Status and prospects for the implementation of the achievements of veterinary science and practice in agricultural production.” 3-4 July 2002. Vologda. - S. 41-43.
13. Усов С.М. Иммунологические аспекты терапии и профилактики инфекций ринотрахеита и вирусной диареи молодняка крупного рогатого скота. Автореф. Дис. канд. вет. наук, Минск, 1998.13. Usov S.M. Immunological aspects of the treatment and prevention of rhinotracheitis infections and viral diarrhea of young cattle. Abstract. Dis. Cand. vet. Sciences, Minsk, 1998.
14. Юров К.П., Шуляк А.Ф., Алексеенкова С.В., Юров Г.К., Ткачев И.К., Осмаев А.И. Этиология, диагностика и профилактика массовых респираторных болезней телят//Мат. междунар. научно-практ. Конф «Акт. пробл. инфекц. пат. и иммунологии животных». - 2006, Москва 16-17 мая - С.128-132.14. Yurov K.P., Shulyak A.F., Alekseenkova S.V., Yurov G.K., Tkachev I.K., Osmaev A.I. Etiology, diagnosis and prevention of mass respiratory diseases of calves // Mat. Int. scientific and practical. Conf “Act. prob. infection US Pat. and animal immunology. " - 2006, Moscow May 16-17 - S.128-132.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2008126759/10A RU2421731C2 (en) | 2008-07-03 | 2008-07-03 | Method to detect specific antibodies to virus respiratory infections of cattle |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2008126759/10A RU2421731C2 (en) | 2008-07-03 | 2008-07-03 | Method to detect specific antibodies to virus respiratory infections of cattle |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2008126759A RU2008126759A (en) | 2010-01-10 |
| RU2421731C2 true RU2421731C2 (en) | 2011-06-20 |
Family
ID=41643735
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2008126759/10A RU2421731C2 (en) | 2008-07-03 | 2008-07-03 | Method to detect specific antibodies to virus respiratory infections of cattle |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2421731C2 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2681473C1 (en) * | 2018-01-16 | 2019-03-06 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Test system for detection of the virus genome of parainfluenza 3 types at cattle with a multiplex polymerase chain reaction with fluorescent detection in real time mode |
-
2008
- 2008-07-03 RU RU2008126759/10A patent/RU2421731C2/en active
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| GRUBBS S.T. et al.: "Prevalence of ovine and bovine respiratory syncytial virus infections in cattle determined with a synthetic peptide-based immunoassay", J Vet Diagn Invest, 2001, v.13, p.128-132. * |
| ГРИНЬ С.А. Современные биотехнологические процессы и иммунологические методы при промышленном производстве ветеринарных препаратов», автореферат на соискание ученой степени доктора биологических наук. - Щелково, 2008. опубликован 09.01.2008 по адресу: http://vak.ed.gov.ru/common/img/uploaded/files/vak/announcements/biolog/GrinSA.doc. МАТВЕЕВА И.Н. Промышленные технологии изготовления компонентов моно- и комплексных диагностикумов инфекционных заболеваний животных, автореферат на соискание ученой степени доктора биологических наук. - Щелково, 2008. опубликован 29.09.2008 по адресу: http://vak.ed.gov.ru/common/img/uploaded/files/vak/announcements/biolog/29-09-2008/matveevain.doc. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2681473C1 (en) * | 2018-01-16 | 2019-03-06 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Test system for detection of the virus genome of parainfluenza 3 types at cattle with a multiplex polymerase chain reaction with fluorescent detection in real time mode |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2008126759A (en) | 2010-01-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Cox et al. | Development and evaluation of a rapid absorbed enzyme immunoassay test for the diagnosis of Johne's disease in cattle | |
| Sikder et al. | Seroprevalence of Salmonella and Mycoplasma gallisepticum infection in the six model breeder poultry farms at Patuakhali district in Bangladesh | |
| Strain et al. | Bovine tuberculosis: a review of diagnostic tests for M. bovis infection in badgers | |
| Reller et al. | Leptospirosis as frequent cause of acute febrile illness in southern Sri Lanka | |
| Bishop et al. | Estimation of rotavirus immunoglobulin G antibodies in human serum samples by enzyme-linked immunosorbent assay: expression of results as units derived from a standard curve | |
| Galvin et al. | The evaluation of a nucleoprotein ELISA for the detection of equine influenza antibodies and the differentiation of infected from vaccinated horses (DIVA) | |
| Genç et al. | Seroprevalence of brucellosis and leptospirosis in aborted dairy cows | |
| Yoon et al. | Comparison of a commercial H1N1 enzyme-linked immunosorbent assay and hemagglutination inhibition test in detecting serum antibody against swine influenza viruses | |
| Rekha et al. | A study on bovine brucellosis in an organized dairy farm | |
| Haralambieva et al. | Rubella virus-specific humoral immune responses and their interrelationships before and after a third dose of measles-mumps-rubella vaccine in women of childbearing age | |
| Minas et al. | Validation of fluorescence polarization assay (FPA) and comparison with other tests used for diagnosis of B. melitensis infection in sheep | |
| Seifi et al. | Incidence and risk factors of Mycoplasma synoviae infection in broiler breeder farms of Iran. | |
| RU2421731C2 (en) | Method to detect specific antibodies to virus respiratory infections of cattle | |
| SAREYYÜPOĞLU et al. | Investigation of Brucella antibodies in bovine sera by rose bengal plate test (RBPT), serum agglutination test (SAT), microagglutination test (MAT) and 2-mercaptoethanol-microagglutination (2-ME-MAT) test | |
| Abubakar et al. | Molecular and epidemiological features of Peste des petits ruminants outbreak during endemic situation | |
| Alver et al. | Investigation of serological results of patients with suspected toxoplasmosis admitted to the ELISA Laboratory of Uludağ University Hospital between 2002-2008 | |
| Kim et al. | Comparative Study of Two Point-of-Care Enzyme-Linked Immunosorbent Assays for the Detection of Antibodies against Canine Parvovirus and Canine Distemper Virus. | |
| Keshavarz et al. | Anti-rubella, mumps and measles IgG antibodies in medical students of Tehran University | |
| Cardoso et al. | Rabies neutralizing antibody detection by indirect immunperoxidase serum neutralization assay performed on chicken embryo related cell line | |
| Alton et al. | The role of the differential complement fixation test, using rough and smooth Brucella antigens, in the anamnestic test | |
| Rahman et al. | Sero-molecular epidemiology and rick factors analysis of brucellosis in human and lactating cows of military dairy farms in Bangladesh | |
| Babar et al. | Incidence of Bovine Brucellosis in Thatta, Sindh-Pakistan | |
| Enache et al. | Serological Results of MVV and CAEV Antibodies in Samples Collected from Sheep and Goat Flocks of Romania | |
| Ali et al. | Serological survey of Type A Avian Influenza antibody in chicken sera in Sudan using indirect ELISA | |
| Wolfram et al. | Diagnostic and vaccine chapter |