RU2412160C1 - 7-[n'-(4-trifluoromethylbenzolyl)-hydrazinocarbonyl]-tricyclo[3.2.2.02,4]non-8-ene-6-carboxylic acid, having antiviral activity - Google Patents
7-[n'-(4-trifluoromethylbenzolyl)-hydrazinocarbonyl]-tricyclo[3.2.2.02,4]non-8-ene-6-carboxylic acid, having antiviral activity Download PDFInfo
- Publication number
- RU2412160C1 RU2412160C1 RU2009135764/04A RU2009135764A RU2412160C1 RU 2412160 C1 RU2412160 C1 RU 2412160C1 RU 2009135764/04 A RU2009135764/04 A RU 2009135764/04A RU 2009135764 A RU2009135764 A RU 2009135764A RU 2412160 C1 RU2412160 C1 RU 2412160C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- virus
- antiviral activity
- viruses
- hydrazinocarbonyl
- tricyclo
- Prior art date
Links
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к новому биологически активному химическому соединению, обладающему противовирусной активностью, может применяться в медицине для лечения и профилактики заболеваний, вызываемых патогенными для человека и животных вирусами, в частности ортопоксвирусами.The invention relates to a new biologically active chemical compound with antiviral activity, can be used in medicine for the treatment and prevention of diseases caused by viruses pathogenic for humans and animals, in particular orthopoxviruses.
Наиболее опасными для человеческой популяции из-за чрезвычайно высокой патогенности, многообразия и эпидемиологических показателей являются вирусы группы оспы. В последние годы неожиданную остроту и актуальность приобрела проблема человеческой оспы, поскольку вакцинация населения с 1980 г. не проводится, появилась значительная часть населения без иммунитета или с ослабленным иммунитетом и отсутствуют гарантии полного исчезновения возбуждающих это заболевание вирусов, а также несанкционированной утечки вирусного материала из мест его официального хранения. Более того, в условиях постоянного роста категорий населения с иммунодефицитными состояниями сама идея вакцинации живым вирусом осповакцины становится проблематичной, и важное значение приобретает задача успешного купирования поствакцинальных осложнений, а также вспышек заболеваний, вызванных ортопоксвирусами, с помощью высокоэффективных химиотерапевтических препаратов. Кроме того, следует отметить и высокую патогенность вирусов оспы обезьян, коров, относящихся к тому же роду Orthopoxvirus, способных вызывать заболевание и у людей со смертельным исходом. Так, в последнее время в Африке, особенно в районах с высоким процентом ВИЧ-инфицированных, отмечаются вспышки оспы обезьян (летальность достигает 10-20%). Кроме того, существует реальная возможность генетической модификации вирусов оспы животных, что может привести к повышению их патогенности для человека.Smallpox viruses are the most dangerous for the human population due to the extremely high pathogenicity, diversity and epidemiological indicators. In recent years, the problem of human smallpox has become unexpectedly acute and urgent, since the vaccination of the population has not been carried out since 1980, a significant part of the population has appeared without immunity or with weakened immunity and there are no guarantees for the complete disappearance of the viruses that cause this disease, as well as unauthorized leakage of viral material from places its official storage. Moreover, in the context of the constant growth of categories of the population with immunodeficiency states, the very idea of vaccination with the smallpox vaccine virus becomes problematic, and the task of successfully managing post-vaccination complications and outbreaks of diseases caused by orthopoxviruses with the help of highly effective chemotherapeutic drugs is becoming important. In addition, it should be noted the high pathogenicity of smallpox viruses in monkeys and cows belonging to the same genus Orthopoxvirus, which can cause disease in people with fatal outcomes. So, recently in Africa, especially in areas with a high percentage of HIV-infected people, there have been outbreaks of monkeypox (mortality reaches 10-20%). In addition, there is a real possibility of the genetic modification of smallpox viruses in animals, which can lead to an increase in their pathogenicity to humans.
В настоящее время практически нет средств специфической профилактики и лечения заболеваний, вызываемых вирусами группы оспы, поэтому разработка высокоэффективных противовирусных препаратов, обладающих высокой активностью, низкой токсичностью и продолжительным действием в отношении ортопоксвирусов является важной задачей для обеспечения безопасности здоровья и жизни людей.Currently, there are practically no means of specific prophylaxis and treatment of diseases caused by smallpox viruses; therefore, the development of highly effective antiviral drugs with high activity, low toxicity, and long-term action against orthopoxviruses is an important task to ensure the safety of human health and life.
Предшествующий уровень техникиState of the art
Известен препарат метисазон (Марборан®), который обладает только профилактической активностью в отношении вируса натуральной оспы.Known drug metisazon (Marboran ® ), which has only preventive activity against variola virus.
Известен препарат цидофовир (Vistide®), который проходит в настоящее время исследования как профилактический или лечебный препарат, но пока его исследования не закончены. На фармацевтическом рынке в настоящее время практически нет препаратов, активных в отношении вирусов группы оспы, в этой связи поиск (выявление?) таких веществ может стать важным шагом в обеспечении фармакологической безопасности жизни людей.The known drug cidofovir (Vistide ® ), which is currently undergoing research as a preventive or therapeutic drug, but so far its studies are not completed. Currently, there are practically no drugs on the pharmaceutical market that are active against smallpox viruses; therefore, the search (identification?) Of such substances can be an important step in ensuring the pharmacological safety of people's lives.
Известно, что производные адамантана являются потенциальными источниками веществ с противовирусными свойствами. В частности, ингибиторы вируса осповакцины выявлены в ряду адамантоил-1-гидразинов (Гужова С.В., Даниленко Г.И., Коробченко Л.В., Денисова Л.В., Андреева О.Т., Бореко Е.И., Даниленко В.Ф., Баклан В.Ф. Ингибиторы вируса вакцины в ряду адамантоил-1-гидразинов // Физиол. Активн. В-ва. Киев: Наукова думка. 1986. Вып.18. С.24). Изомерные 1-(аминобензоил)аминоадамантаны наряду с действием на различные типы вирусов проявляют умеренную активность в отношении вируса осповакцины (Вотяков В.И., Андреева О.Т., Кицара М.С. и др. // В сб.: Физиологически активные вещества. Киев. 1978. Вып.10. С.88). Опубликованы данные о выраженном ингибирующем действии на размножение вирусов осповакцины замещенных аминоацетиладамантиламинов, аминоалкоксиацетиладамантиламинов и тромантадина (May G., Peteri D. // Arzneimitt.- Forsch. 1973. Bd.23. N.5. S.718). Широкий ряд гидрокси-, азотсодержащих и серосодержащих функциональных производных адамантанового ряда проявил слабую и умеренную степень активности против вируса осповакцины (Климочкин Ю.Н., Леонова М.В., Коржев И.Р., Моисеев И.К., Владыко Г.В., Коробченко Л.В., Бореко Е.И., Николаева С.Н. // Хим.-фарм. журнал. 1992. N.7-8. C.58; Климочкин Ю.Н., Моисеев И.К., Владыко Г.В., Коробченко Л.В., Бореко Е.И. // Хим.-фарм. журнал. 1991. Т.25. N.7. С.46; Климочкин Ю.Н., Моисеев И.К., Абрамов О.В., Владыко Г.В., Коробченко Л.В., Бореко Е.И. // Хим.-фарм. ж. 1991. Т.25. N.7. С.49).Adamantane derivatives are known to be potential sources of substances with antiviral properties. In particular, vaccinia virus inhibitors were detected in the series of adamantoyl-1-hydrazines (Guzhova S.V., Danilenko G.I., Korobchenko L.V., Denisova L.V., Andreeva O.T., Boreko E.I. , Danilenko VF, Baklan VF Inhibitors of the vaccine virus in the series of adamantoyl-1-hydrazines // Fiziol. Active. V-va. Kiev: Naukova Dumka. 1986. Vol. 18. P.24). The isomeric 1- (aminobenzoyl) aminoadamantanes, along with the action on various types of viruses, exhibit moderate activity against the vaccinia virus (Votyakov V.I., Andreeva O.T., Kitsara M.S. et al. // Sat: Physiologically active substances. Kiev. 1978. Issue 10. S.88). Published evidence of a marked inhibitory effect on the propagation of vaccinia viruses of substituted aminoacetyladamantylamines, aminoalkoxyacetyladamantylamines and thromantadine (May G., Peteri D. // Arzneimitt.-Forsch. 1973. Bd.23. N.5. S.718). A wide range of hydroxy-, nitrogen-containing and sulfur-containing functional derivatives of the adamantane series showed a weak and moderate degree of activity against the vaccinia virus (Klimochkin Yu.N., Leonova M.V., Korzhev I.R., Moiseev I.K., Vladyko G.V. ., Korobchenko L.V., Boreko E.I., Nikolaeva S.N. // Chemical and Pharmaceutical Journal 1992. N.7-8. P. 58; Klimochkin Yu.N., Moiseev I.K. ., Vladyko G.V., Korobchenko L.V., Boreko E.I. // Chemical and Pharmaceutical Journal 1991. V.25. N.7. P.46; Klimochkin Yu.N., Moiseev I .K., Abramov O.V., Vladyko G.V., Korobchenko L.V., Boreko E.I. // Chem.-Pharm. J. 1991. V.25. N.7. S.49) .
Недостатком вышеперечисленных аналогов является невысокая активность соединений в отношении вируса осповакцины.The disadvantage of the above analogues is the low activity of the compounds against the vaccinia virus.
Среди производных адамантана известно биологически активное соединение 1-адамантаноилгидразон α-азидометил(1-адамантил)кетона (прототип), обладающее противовирусной активностью в отношении вируса осповакцины (Авторское свидетельство СССР №1568481, МПК C07D 253/06, опубл. 2006).Among the adamantane derivatives, the biologically active compound 1-adamantanoylhydrazone α-azidomethyl (1-adamantyl) ketone (prototype) is known to have antiviral activity against vaccinia virus (USSR Author's Certificate No. 1568481, IPC C07D 253/06, publ. 2006).
Однако указанное соединение не изучалось на предмет противовирусной активности в отношении вируса оспы коров, вируса оспы обезьян и других. К недостаткам этого соединения следует отнести также и недостаточно высокую эффективность в отношении вируса осповакцины.However, this compound has not been studied for antiviral activity against cow pox virus, monkeypox virus and others. The disadvantages of this compound should also include insufficiently high efficiency against vaccinia virus.
Известны 3-фенил-6-R1-7-R2-1,2,4-бензотриазины (соединение СК-29 и его производные), обладающие противовирусной активностью, в частности в отношении ортопоксвирусов, патогенных для человека (патент РФ №2252218, МПК C07D 253/10, А61К 31/53, опубл. 20.05.2005) [1].Known 3-phenyl-6-R 1 -7-R 2 -1,2,4-benzotriazines (compound SK-29 and its derivatives) having antiviral activity, in particular against orthopoxviruses pathogenic for humans (RF patent No. 2252218 IPC C07D 253/10, A61K 31/53, publ. 05.20.2005) [1].
Однако и эти химические соединения обладают недостаточной противовирусной активностью и невысоким индексом селективности в отношении ортопоксвирусов.However, these chemical compounds also possess insufficient antiviral activity and a low selectivity index for orthopoxviruses.
Наиболее близким аналогом (прототипом) является химическое соединение 4-трифторметил-N-(3,3а,4,4а,5,5а,6,6а-октагидро-1,3-диоксо-4,6-этеноциклопроп[f]изоиндол-2(1H)-ил)бензамида, обладающее противовирусной активностью в отношении ортопоксвирусов с высоким индексом селективности (заявка США №20060235051, МПК А61К 31/4439, C07D 403/02, опубл. 19.10.2006 г.) [2].The closest analogue (prototype) is the chemical compound 4-trifluoromethyl-N- (3,3a, 4,4a, 5,5a, 6,6a-octahydro-1,3-dioxo-4,6-ethenocycloprop [f] isoindole- 2 (1H) -yl) benzamide with antiviral activity against orthopoxviruses with a high selectivity index (US application No. 20060235051, IPC A61K 31/4439, C07D 403/02, publ. 19.10.2006) [2].
Однако указанное химическое соединение имеет достаточно сложную двухстадийную технологию получения, что повышает стоимость получения данного продукта.However, this chemical compound has a rather complex two-stage production technology, which increases the cost of obtaining this product.
Техническим результатом предлагаемого изобретения является получение нового химического соединения, имеющего более простую (одностадийную) технологию получения, обладающего высоким индексом селективности и противовирусным действием в отношении ряда ортопоксвирусов, патогенных для человека и животных.The technical result of the invention is to obtain a new chemical compound having a simpler (one-stage) production technology, which has a high selectivity index and antiviral effect against a number of orthopoxviruses pathogenic for humans and animals.
Технический результат достигается новым химическим соединением (I): 7-[N'-(4-трифторметилбензоил)-гидразинокарбонил]-трицикло[3.2.2.02,4]нон-8-ен-6-карбоновой кислотой, проявляющей противовирусную активность по отношению к ортопоксвирусам.The technical result is achieved by a new chemical compound (I): 7- [N '- (4-trifluoromethylbenzoyl) -hydrazinocarbonyl] -tricyclo [3.2.2.0 2,4 ] non-8-en-6-carboxylic acid, which exhibits antiviral activity in relation to orthopoxviruses.
Заявляемое соединение (I) получают взаимодействием гидразида 4-трифторбензойной кислоты с 4,4а,5,5а,6,6а-гексагидро-4,6-этено-1H-циклопроп[f]изобензофуран-1,3(3aH)-дионом, взятыми в соотношении 1:1 в метаноле при охлаждении до 0°С в течение 2.5 час по следующей схеме:The inventive compound (I) is prepared by reacting 4-trifluorobenzoic acid hydrazide with 4.4a, 5.5a, 6,6a-hexahydro-4,6-etheno-1H-cycloprop [f] isobenzofuran-1,3 (3aH) -dione, taken in the ratio 1: 1 in methanol while cooling to 0 ° C for 2.5 hours according to the following scheme:
Сопоставительный анализ с аналогами показывает, что заявляемое соединение принципиально отличается тем, что является трициклическим соединением, содержит в молекуле карбоксильную группу и диацилированный гидразиновый фрагмент, не входящий в состав гетероциклической - изоиндольной структуры.Comparative analysis with analogues shows that the claimed compound is fundamentally different in that it is a tricyclic compound, contains a carboxyl group and a diacylated hydrazine fragment in the molecule, which is not part of the heterocyclic isoindole structure.
Пример получения 7-[N'-(4-трифторметилбензоил)-гидразинокарбонил]-трицикло[3.2.2.02,4]нон-8-ен-6-карбоновой кислоты. К охлажденному до 0°С раствору 4.1 г (20 ммоль) гидразида 4-трифторбензойной кислоты в 20 мл метанола присыпали одной порцией 3.80 г (20 ммоль) 4,4а,5,5а,6,6а-гексагидро-4,6-этено-1H-циклопроп[f]изобензофуран-1,3(3aH)-диона. Образовался гомогенный раствор, из которого примерно через 10 мин начинает выпадать осадок. Суспензию перемешивали при 0°С 2.5 час и еще 1 час при 20°С, выпавший осадок отфильтровали, промыли на фильтре охлажденным метанолом (5 мл), сушили на воздухе до постоянного веса. Получили 7.3 г (93%) вещества в виде белых кристаллов; т.пл. 168°С. ЯМР 1H (300 МГц, DMSO-d6), δ, м.д., J/Гц: 0.06 (м, 2Н); 0.98 (м, 2Н); 2.85 (дд, J=10.1, 1.9 Гц, 1Н); 3.00 (уш. с, 1Н); 3.10 (уш. с, 1Н), 3.15 (дд, J=10.1, 1.9 Гц, 1Н); 5.59 (т, J=7.4 Гц, 1Н); 5.82 (т, J=7.4 Гц, 1Н); 7.87 (д, J=8.0 Гц, 2Н); 8.05 (д, J=8.0 Гц, 2Н); 9.93 (с, 1Н); 10.57 (с, 1Н); 11.49 (уш. с, 1Н). ЯМР 19F (300 МГц, d6-DMSO, стандарт - C6F6), δ, м.д.: 101.18. ЯМР 13С (300 МГц, DMSO-d6), δ, м.д.: 3.42, 9.91, 10.65, 33.53, 37.10, 47.55, 48.84, 126.35, 127.04, 128.53, 128.93, 132.24, 137.35, 165.18, 172.17, 174.89, 175.68. ИК-спектр (KBr), см-1): 1136, 1168, 1332, 1536, 1582, 1622, 1725, 2942, 3014, 3043, 3230. Вычислено, %: С, 57.87; Н, 4.35; F, 14.45; N, 7.10. C19H17F3N2O4. Найдено, %: С, 57.59, 57.44; Н, 4.37,4.40; N, 7.21,7.18.An example of the preparation of 7- [N '- (4-trifluoromethylbenzoyl) -hydrazinocarbonyl] -tricyclo [3.2.2.0 2,4 ] non-8-en-6-carboxylic acid. To a solution of 4.1 g (20 mmol) of 4-trifluorobenzoic acid hydrazide in 20 ml of methanol cooled to 0 ° C was sprinkled with a portion of 3.80 g (20 mmol) of 4.4a, 5.5a, 6,6a-hexahydro-4,6-etheno -1H-cycloprop [f] isobenzofuran-1,3 (3aH) -dione. A homogeneous solution was formed, from which after about 10 minutes a precipitate began to precipitate. The suspension was stirred at 0 ° C for 2.5 hours and another 1 hour at 20 ° C, the precipitate was filtered off, washed on the filter with chilled methanol (5 ml), and dried in air to constant weight. Received 7.3 g (93%) of the substance in the form of white crystals; so pl. 168 ° C. 1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ), δ, ppm, J / Hz: 0.06 (m, 2H); 0.98 (m, 2H); 2.85 (dd, J = 10.1, 1.9 Hz, 1H); 3.00 (br s, 1H); 3.10 (br.s, 1H), 3.15 (dd, J = 10.1, 1.9 Hz, 1H); 5.59 (t, J = 7.4 Hz, 1H); 5.82 (t, J = 7.4 Hz, 1H); 7.87 (d, J = 8.0 Hz, 2H); 8.05 (d, J = 8.0 Hz, 2H); 9.93 (s, 1H); 10.57 (s, 1H); 11.49 (br s, 1H). NMR 19 F (300 MHz, d 6 -DMSO, standard C 6 F 6 ), δ, ppm: 101.18. 13 C NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ), δ, ppm: 3.42, 9.91, 10.65, 33.53, 37.10, 47.55, 48.84, 126.35, 127.04, 128.53, 128.93, 132.24, 137.35, 165.18, 172.17, 174.89, 175.68. IR spectrum (KBr), cm -1 ): 1136, 1168, 1332, 1536, 1582, 1622, 1725, 2942, 3014, 3043, 3230. Calculated,%: C, 57.87; H, 4.35; F, 14.45; N, 7.10. C 19 H 17 F 3 N 2 O 4 . Found,%: C, 57.59, 57.44; H, 4.37.4.40; N, 7.21.7.18.
Способ получения заявляемого вещества прост в исполнении, исходные вещества доступны, выход составляет 93% от теоретически рассчитанного. Предлагаемое соединение устойчиво на воздухе, легко растворимо в диметилформамиде и диметилсульфоксиде, малорастворимо в алифатических спиртах, ацетоне, воде, практически нерастворимо в эфире, гексане.The method of obtaining the claimed substance is simple to perform, the starting materials are available, the yield is 93% of theoretically calculated. The proposed compound is stable in air, readily soluble in dimethylformamide and dimethyl sulfoxide, slightly soluble in aliphatic alcohols, acetone, water, practically insoluble in ether, hexane.
Пример 2. Исследование противовирусной активности заявляемого соединения.Example 2. The study of the antiviral activity of the claimed compounds.
Для оценки противовирусной активности соединений использовали следующую методику. Культуру клеток Vero выращивали в лунках плоскодонных 96-луночных планшетов. В культуральную среду добавляли серийные разведения исследуемых соединений и соответствующий вирус. После инкубирования в течение 3-5 суток монослой клеток прокрашивали витальным красителем нейтральным красным, после удаления красителя и отмывки избытка красителя вносили лизирующий раствор и количество красителя, включенного в монослой клеток, учитывали на спектрофотометре при длине волны 490 нм. В качестве контролей использовали лунки планшета, в которые вирус не вносили (контроль токсичности соединений), в которые вносили вирус без соединений (контроль вируса), и лунки, в которые не вносили ни вирус, ни соединения (контроль культуры клеток). Данная методика основана на способности тестируемых соединений предотвращать репродукцию вируса и его распространения от клетки к клетке, в связи с чем клетки не погибают и сохраняют способность фагоцитировать нейтральный красный.The following methodology was used to evaluate the antiviral activity of the compounds. A Vero cell culture was grown in the wells of flat-bottomed 96-well plates. Serial dilutions of the test compounds and the corresponding virus were added to the culture medium. After incubation for 3-5 days, the cell monolayer was stained with a neutral red vital dye, after removing the dye and washing off the excess dye, a lysis solution was added and the amount of dye included in the cell monolayer was taken into account on a spectrophotometer at a wavelength of 490 nm. As controls, we used plate wells into which the virus was not introduced (toxicity control of compounds), into which the virus was added without compounds (virus control), and wells into which neither the virus nor compounds were introduced (control of cell culture). This technique is based on the ability of the tested compounds to prevent the reproduction of the virus and its spread from cell to cell, and therefore the cells do not die and retain the ability to phagocytize neutral red.
Результаты анализировали с помощью программы SoftMax (версия 4.0, Molecular Devices, Menlo Park, USA). Данная методика основана на способности тестируемых соединений предотвращать репродукцию вируса и его распространение от клетки к клетке, в связи с чем клетки не погибают и сохраняют способность фагоцитировать нейтральный красный.The results were analyzed using the SoftMax program (version 4.0, Molecular Devices, Menlo Park, USA). This technique is based on the ability of the tested compounds to prevent the reproduction of the virus and its spread from cell to cell, and therefore the cells do not die and retain the ability to phagocytize neutral red.
В качестве исследуемых вирусов использовали патогенный для человека вирус оспы коров (штамм Гришак) и вирус осповакцины, штамм ЛИВП, используемый для вакцинации населения. Помимо ортопоксвирусов, патогенных для человека, для оценки противовирусной активности использовали вирус эктромелии (оспы мышей), штамм К-1.As the studied viruses, a cow-smallpox virus (Grishak strain) and smallpox vaccine virus, a strain of LIVP used to vaccinate the population, were pathogenic for humans. In addition to the orthopoxviruses pathogenic for humans, the ectromelia virus (mouse pox) and strain K-1 were used to evaluate antiviral activity.
Анализ полученных данных наглядно показывает, что заявляемое соединение (НИОХ-14) и соединение-прототип (ST-246) обладают высоким противовирусным действием, в частности в отношении ортопоксвирусов, патогенных для человека.Analysis of the obtained data clearly shows that the claimed compound (NIOX-14) and the prototype compound (ST-246) have a high antiviral effect, in particular against orthopoxviruses pathogenic for humans.
Как видно из данных таблицы 1, исследованные соединения (заявляемое НИОХ-14 и прототип ST-246) эффективно подавляют размножение ортопоксвирусов в культуре клеток: ингибируют размножение вируса осповакцины в концентрациях 0.005-0.009 и 0.003 мкг/мл соответственно, значения которых по величине существенно превосходят препарат-аналог [1] на основе производных бензотриазинов, активная концентрация которого составляет 0.49-0.5 мкг/мл.As can be seen from the data in Table 1, the studied compounds (the claimed NIOX-14 and prototype ST-246) effectively suppress the reproduction of orthopoxviruses in cell culture: they inhibit the multiplication of vaccinia virus in concentrations of 0.005-0.009 and 0.003 μg / ml, respectively, the values of which significantly exceed an analogue drug [1] based on benzotriazine derivatives, the active concentration of which is 0.49-0.5 μg / ml.
Пример 3. Оценка противовирусной активности препарата НИОХ-14 по отношению к вирусам: аденовирус человека 5-го серотипа, эховирус 12-го типа, вирус Западного Нила и вирус простого герпеса 2 типа.Example 3. Evaluation of the antiviral activity of the NIOX-14 preparation with respect to viruses: human adenovirus of the 5th serotype, echovirus of the 12th type, West Nile virus and herpes simplex virus of the 2nd type.
Оценку противовирусной активности исследуемых соединений проводили на культурах клеток АД293 (аденовирус человека 5-го серотипа и эховирус 12-го типа) и Vero (вирус Западного Нила и вирус простого герпеса 2 типа) в 96-луночных планшетах. IC50 соединений в отношении вышеуказанных вирусов определяли посредством регистрации ингибирования вирусиндуцированного цитопатического эффекта в присутствии различных концентраций исследуемых препаратов (конечные концентрации в лунках микропланшет с клеточным монослоем 80, 40, 20, 10 и 5 мкг/мл). После добавления к клеткам исследуемых соединений в вышеуказанных концентрациях проводили инфицирование клеток различными вирусами. Для этого использовали инфицирующие дозы каждого вируса, вызывающие 90% цитопатический эффект через трое суток после инфицирования. После инкубации клеток в планшетах в течение 72 час при 37°С в атмосфере, содержащей 5% CO2, клетки фиксировали 5% раствором глутарового альдегида. Цитопатический эффект визуализировали окрашиванием клеток 0.1% раствором кристаллического фиолетового и регистрировали спектрофотометрически при 570 нм. IC50 рассчитывали согласно G. Yang et al., 2005.Evaluation of the antiviral activity of the studied compounds was carried out on cell cultures of AD293 (human adenovirus of the 5th serotype and echovirus of the 12th type) and Vero (West Nile virus and herpes simplex virus of the 2nd type) in 96-well plates. IC 50 of compounds in relation to the above viruses was determined by recording the inhibition of the virus-induced cytopathic effect in the presence of various concentrations of the studied drugs (final concentrations in the wells of the microplate with a cell monolayer of 80, 40, 20, 10 and 5 μg / ml). After the test compounds were added to the cells at the above concentrations, cells were infected with various viruses. For this, infectious doses of each virus were used, causing a 90% cytopathic effect three days after infection. After incubation of the cells in the plates for 72 hours at 37 ° C in an atmosphere containing 5% CO 2 , the cells were fixed with a 5% glutaraldehyde solution. The cytopathic effect was visualized by staining the cells with 0.1% crystal violet solution and was recorded spectrophotometrically at 570 nm. IC 50 was calculated according to G. Yang et al., 2005.
Результаты, представленные в таблице 2, показали, что заявляемое соединение НИОХ-14 фактически не ингибирует репликацию аденовируса человека 5-го серотипа, вируса Западного Нила и вируса простого герпеса 2 типа. В отношении эховируса 12-го типа была отмечена минимальная активность препарата НИОХ-14. Препарат использовался в субтоксических концентрациях для этого типа клеток, что также дополнительно подтверждает нетоксичность препарата для клеток АД293. Фактическое отсутствие активности препарата НИОХ-14 в отношении двух типов ДНК-содержащих вирусов и двух типов РНК-содержащих вирусов говорит о том, что механизм действия препарата не связан с типом нуклеиновой кислоты.The results presented in table 2 showed that the claimed compound NIOX-14 does not actually inhibit the replication of human adenovirus of the 5th serotype, West Nile virus and herpes simplex virus type 2. With respect to echovirus of the 12th type, the minimal activity of the NIOX-14 drug was noted. The drug was used in subtoxic concentrations for this type of cell, which also further confirms the drug’s non-toxicity for AD293 cells. The actual lack of activity of the NIOX-14 preparation in relation to two types of DNA-containing viruses and two types of RNA-containing viruses suggests that the mechanism of action of the drug is not associated with the type of nucleic acid.
Для препарата НИОХ-14 IC50 в отношении вируса осповакцины составляет 0.005 мкг/мл (Таблица 1), что показывает высокую специфичность действия препарата в отношении ортопоксвирусов и свидетельствует о высокой степени селективности препарата НИОХ-14 в отношении этой группы вирусов. Индекс селективности составил 16000 для эховируса и вируса осповакцины, и он существенно выше для других исследованных вирусов.For the NIOX-14 preparation, the IC 50 for the vaccinia virus is 0.005 μg / ml (Table 1), which shows the high specificity of the drug's action against orthopoxviruses and indicates a high degree of selectivity of the NIOX-14 drug against this group of viruses. The selectivity index was 16,000 for echovirus and vaccinia virus, and it is significantly higher for other viruses studied.
Таким образом, технический результат изобретения подтверждается тем, что заявляемое соединение - 7-[N'-(4-трифторметилбензоил)-гидразинокарбонил]-трицикло[3.2.2.02,4]нон-8-ен-6-карбоновая кислота формулы (I) - отличается от прототипа [Заявка на патент США №20060235051] более простой технологией получения: в 1 стадию, а не в две, как в прототипе, причем реакция проводится при 0°С (а не при нагревании, как в прототипе), не требует абсолютных растворителей и использования третичных аминов в качестве катализаторов. Кроме того, технический результат изобретения дополнительно подтверждается тем, что препарат НИОХ-14 при низкой токсичности для клеток млекопитающих еще обладает очень высокой селективностью по отношению к другим РНК- и ДНК-содержащим вирусам.Thus, the technical result of the invention is confirmed by the fact that the claimed compound is 7- [N '- (4-trifluoromethylbenzoyl) -hydrazinocarbonyl] -tricyclo [3.2.2.0 2,4 ] non-8-en-6-carboxylic acid of the formula (I ) - differs from the prototype [US Patent Application No. 20060235051] with a simpler production method: in stage 1, and not in two, as in the prototype, the reaction being carried out at 0 ° C (and not when heated, as in the prototype), not requires absolute solvents and the use of tertiary amines as catalysts. In addition, the technical result of the invention is further confirmed by the fact that the NIOX-14 preparation, at low toxicity for mammalian cells, still has very high selectivity with respect to other RNA and DNA viruses.
Claims (1)
[3.2.2.02,4]нон-8-ен-6-карбоновая кислота формулы (I)
проявляющая противовирусную активность в отношении ортопоксвирусов. 7- [N '- (4-Trifluoromethylbenzoyl) -hydrazinocarbonyl] -tricyclo
[3.2.2.0 2,4 ] non-8-en-6-carboxylic acid of the formula (I)
showing antiviral activity against orthopoxviruses.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2009135764/04A RU2412160C1 (en) | 2009-09-25 | 2009-09-25 | 7-[n'-(4-trifluoromethylbenzolyl)-hydrazinocarbonyl]-tricyclo[3.2.2.02,4]non-8-ene-6-carboxylic acid, having antiviral activity |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2009135764/04A RU2412160C1 (en) | 2009-09-25 | 2009-09-25 | 7-[n'-(4-trifluoromethylbenzolyl)-hydrazinocarbonyl]-tricyclo[3.2.2.02,4]non-8-ene-6-carboxylic acid, having antiviral activity |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2412160C1 true RU2412160C1 (en) | 2011-02-20 |
Family
ID=46310049
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2009135764/04A RU2412160C1 (en) | 2009-09-25 | 2009-09-25 | 7-[n'-(4-trifluoromethylbenzolyl)-hydrazinocarbonyl]-tricyclo[3.2.2.02,4]non-8-ene-6-carboxylic acid, having antiviral activity |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2412160C1 (en) |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2448086C1 (en) * | 2010-12-23 | 2012-04-20 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Ярославский государственный технический университет" (ФГБОУ ВПО "ЯГТУ") | 5-[(n'-biphenyl-4-carbonyl)-hydrazino]-5-oxopentanoic acid |
| RU2542490C1 (en) * | 2013-10-23 | 2015-02-20 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" (ФБУН ГНЦ ВБ "Вектор") | Agent for arresting undesirable vaccinal reactions and complications during primary vaccination with variolar vaccines and method for use thereof |
| RU2543338C1 (en) * | 2013-10-15 | 2015-02-27 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор"" (ФБУН ГНЦ ВБ "Вектор") | Medicated product for smallpox virus and method for producing and using it |
| RU2578606C2 (en) * | 2010-03-23 | 2016-03-27 | Сига Текнолоджиз, Инк | Polymorphic forms of st-246 compound and methods for producing |
| RU2716709C1 (en) * | 2019-08-20 | 2020-03-16 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН ГНЦ ВБ "Вектор" Роспотребнадзора) | Oral dosage form of the preparation in capsules for treating and preventing orthopoxvirus-related diseases |
| WO2021089011A1 (en) * | 2019-11-08 | 2021-05-14 | 中国科学院上海药物研究所 | Compound with bishydrazide structure, and preparation method therefor and use thereof |
| RU2800448C1 (en) * | 2022-06-24 | 2023-07-21 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Новосибирский институт органической химии им. Н.Н. Ворожцова Сибирского отделения Российской академии наук (НИОХ СО РАН) | N-bornil- and n-phenchylcarboxamides used as orthopoxvirus replication inhibitors |
-
2009
- 2009-09-25 RU RU2009135764/04A patent/RU2412160C1/en active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Колобов А.В. и др. «N-алкилирование N-(2,5-диоксопирролидин-1-ил)бензамидов», ИЗВЕСТИЯ ВЫСШИХ УЧЕБНЫХ ЗАВЕДЕНИЙ: ХИМИЯ И ХИМИЧЕСКАЯ ТЕХНОЛОГИЯ, 2004, т.47, вып.6, с.120-123. Гужова С.В. и др. «Ингибиторы вируса вакцины в ряду адамантоил-1-гидразинов», ФИЗИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫЕ ВЕЩЕСТВА. - Киев: Наукова думка, 1986, вып.18, с.24-26. Климочкин Ю.Н. и др. «Синтез и исследование вирусингибирующего действия азотсодержащих производных адамантана» ХИМИКО-ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ, 1991, т.25, №7, с.46-49. Вотяков В.И. и др. «Антивирусное действие производных адамантилазобензолов» ФИЗИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫЕ ВЕЩЕСТВА. - Киев, 1978, вып.10, с.88-92. * |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2578606C2 (en) * | 2010-03-23 | 2016-03-27 | Сига Текнолоджиз, Инк | Polymorphic forms of st-246 compound and methods for producing |
| RU2448086C1 (en) * | 2010-12-23 | 2012-04-20 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Ярославский государственный технический университет" (ФГБОУ ВПО "ЯГТУ") | 5-[(n'-biphenyl-4-carbonyl)-hydrazino]-5-oxopentanoic acid |
| RU2543338C1 (en) * | 2013-10-15 | 2015-02-27 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор"" (ФБУН ГНЦ ВБ "Вектор") | Medicated product for smallpox virus and method for producing and using it |
| RU2542490C1 (en) * | 2013-10-23 | 2015-02-20 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" (ФБУН ГНЦ ВБ "Вектор") | Agent for arresting undesirable vaccinal reactions and complications during primary vaccination with variolar vaccines and method for use thereof |
| RU2716709C1 (en) * | 2019-08-20 | 2020-03-16 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН ГНЦ ВБ "Вектор" Роспотребнадзора) | Oral dosage form of the preparation in capsules for treating and preventing orthopoxvirus-related diseases |
| WO2021089011A1 (en) * | 2019-11-08 | 2021-05-14 | 中国科学院上海药物研究所 | Compound with bishydrazide structure, and preparation method therefor and use thereof |
| RU2800448C1 (en) * | 2022-06-24 | 2023-07-21 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Новосибирский институт органической химии им. Н.Н. Ворожцова Сибирского отделения Российской академии наук (НИОХ СО РАН) | N-bornil- and n-phenchylcarboxamides used as orthopoxvirus replication inhibitors |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2412160C1 (en) | 7-[n'-(4-trifluoromethylbenzolyl)-hydrazinocarbonyl]-tricyclo[3.2.2.02,4]non-8-ene-6-carboxylic acid, having antiviral activity | |
| JP5657489B2 (en) | Compounds, compositions and methods for treating and preventing orthopoxvirus infection and related diseases | |
| RU2423359C1 (en) | Antiviral agent | |
| EA032362B1 (en) | Indole derivatives as dengue viral replication inhibitors | |
| JP2011529502A (en) | Antimalarial compounds | |
| CN105061358A (en) | Crystalline methylthioninium chloride hydrates | |
| JP7522845B2 (en) | Use of nucleotide-based compounds in the treatment of coronavirus infections | |
| CN114957165A (en) | Antiviral compound and preparation method and application thereof | |
| CN108853106B (en) | Use of imine phenazine compound as rabies virus inhibitor | |
| WO2021037179A1 (en) | Sting pathway modulator and use thereof | |
| CN105748476A (en) | Iminosugars And Methods Of Treating Filoviral Diseases | |
| CN104211708A (en) | Benzoxazinone derivatives and application thereof as antibacterial agent | |
| Zhang et al. | Carbamate-based N-Substituted tryptamine derivatives as novel pleiotropic molecules for Alzheimer's disease | |
| WO2022192665A1 (en) | Compositions and methods for inhibiting plpro protease activity and for preventing and treating sars-cov-2 infection | |
| RU2412168C1 (en) | Hydrate of n-{3,5-dioxo-4-azatetracyclo[5.3.2.02,6.08,10]dodec-11-en-4-yl}-2-hydroxybenzamide, having antiviral activity towards orthopoxviruses | |
| CN103113285B (en) | Indole compound and application thereof as HIV-1 reverse transcriptase inhibitor | |
| RU2412167C1 (en) | {3,5-dioxo-4-azatetracyclo[5.3.2.02,6.08,10]dodec-11-en-4-yl}thiourea, having antiviral activity towards orthopoxviruses | |
| RU2440983C1 (en) | Methyl, chloro and nitro-derivatives of n-{3, 5-dioxo-4-azatetracyclo [5.3.2.02,6.08,10]dodec-11-en-4-yl}-2-hydroxybenzamide - antiviral agents inhibiting replication of different types of orthopoxviruses | |
| US8592603B2 (en) | Synthesis of 2-(4-aminophenyl) benzothiazole derivatives and use thereof | |
| RU2424800C1 (en) | N-{3,5-dioxo-4-azatetracyclo[5.3.2.02,6.08,10]dodec-11-en-4-yl}-4-hydroxybenzamide, antiviral medication, inhibiting replication of various species of orthopoxviruses | |
| CN114748466B (en) | Application of Napyradiomycin compounds in preparation of porcine pseudorabies virus inhibitor | |
| CN109897036A (en) | Triazolopyridines compound and its preparation method and application | |
| CN107311933B (en) | Benzimidazole derivative, preparation method and application thereof | |
| RU2376283C2 (en) | Hydrazones of azidoketones of alicyclic and aliphatic range, having antiviral activity | |
| CN114144196B (en) | Engineered vaccinia virus |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD4A | Correction of name of patent owner |