RU2404797C1 - COMPOSITION CONTAINING HUMAN RECOMBINANT INTERFERON ALPHA-2b, AND MEDICINAL AGENT OF PROLONGED ACTION FOR VETERINARY SCIENCE ON ITS BASIS, HAVING ANTIVIRUS AND IMMUNOMODULATORY ACTION - Google Patents
COMPOSITION CONTAINING HUMAN RECOMBINANT INTERFERON ALPHA-2b, AND MEDICINAL AGENT OF PROLONGED ACTION FOR VETERINARY SCIENCE ON ITS BASIS, HAVING ANTIVIRUS AND IMMUNOMODULATORY ACTION Download PDFInfo
- Publication number
- RU2404797C1 RU2404797C1 RU2009109059/15A RU2009109059A RU2404797C1 RU 2404797 C1 RU2404797 C1 RU 2404797C1 RU 2009109059/15 A RU2009109059/15 A RU 2009109059/15A RU 2009109059 A RU2009109059 A RU 2009109059A RU 2404797 C1 RU2404797 C1 RU 2404797C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- interferon
- solution
- drug
- injection
- veterinary science
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Description
Область техникиTechnical field
Изобретение относится к ветеринарии и представляет собой композицию на основе человеческого рекомбинантного интерферона альфа-2b, обладающую противовирусным и иммуномодулирующим действием.The invention relates to veterinary medicine and is a composition based on human recombinant interferon alpha-2b with antiviral and immunomodulating effects.
Предшествующий уровень техникиState of the art
Использование в медицине человеческого рекомбинантного интерферона в качестве противовирусного и иммуномодулирующего средства в последние годы получило широкое распространение. Часто для проведения подобной терапии используют свечи или растворы местного применения (например, препарат Гриппферон).The use of human recombinant interferon in medicine as an antiviral and immunomodulating agent in recent years has become widespread. Often, candles or topical solutions (for example, the preparation of Grippferon) are used to carry out such therapy.
Известен препарат в форме раствора или сухой лиофилизированной массы для приготовления раствора, содержащий следующие компоненты: раствор рекомбинантного альфа-2 интерферона человека с активностью 2·106-4·107 МЕ/мл 1-100 мкг/мл, ацетат альфа-токоферола 0,1-5 мкг/мл, полиглюкин 0.1-1.0 мг/мл, ЭДТА 0.8-1.6 мг/мл, буферобразующие соли в количестве, обеспечивающем pH в диапазоне от 5.0 до 8.4 (патент РФ №2294372). Композиция обеспечивает стабильность препарата интерферона в течение всего срока годности. Данная композиция может являться основой инъекционного препарата, однако полученный препарат не будет обладать пролонгированным действием.Known drug in the form of a solution or dry lyophilized mass for the preparation of a solution containing the following components: a solution of recombinant human alpha-2 interferon with an activity of 2 · 10 6 -4 · 10 7 IU / ml 1-100 μg / ml, alpha-
Известен препарат в форме раствора для применения в качестве глазных капель, интраназально, интравагинально, интрауретально, для введения в гайморовы пазухи и для орошения слизистой оболочки респираторного тракта. Препарат обладает пролонгированным действием и содержит в мг на 1 мл: интерферон человеческий рекомбинантный (1-50)·103 ME, лимонную кислоту 1-3, борную кислоту 8-11, натрия тетраборат 5-10, унитол 1-5, альбумин сывороточный человеческий 1-5, натрия хлорид 1-3, натрия карбоксиметилцеллюлозу или гидроксиэтилцеллюлозу 5-50 и воду очищенную до 1 мл (патент РФ №2270692). Данный препарат предназначен для местного применения и не рассматривается в качестве инъекционного препарата вследствие значительно меньших количеств интерферона, чем необходимо для проведения инъекционной терапии. Кроме того, в составе препарата используется альбумин сывороточный человеческий, использование которого в инъекционных формах препаратов связано с рисками заражения пациентов вирусами ВИЧ, гепатита и какими-либо другими вирусами.Known drug in the form of a solution for use as eye drops, intranasally, intravaginally, intrauretally, for introduction into the maxillary sinuses and for irrigation of the mucous membrane of the respiratory tract. The drug has a prolonged action and contains in mg per 1 ml: recombinant human interferon (1-50) · 10 3 ME, citric acid 1-3, boric acid 8-11, sodium tetraborate 5-10, unitol 1-5, serum albumin human 1-5, sodium chloride 1-3, sodium carboxymethyl cellulose or hydroxyethyl cellulose 5-50 and purified water to 1 ml (RF patent No. 2270692). This drug is intended for local use and is not considered as an injectable drug due to significantly lower amounts of interferon than is necessary for injection therapy. In addition, the composition uses human serum albumin, the use of which in injectable formulations is associated with the risk of infection of patients with HIV, hepatitis viruses and any other viruses.
Известен препарат в форме стабильного инъекционного раствора, содержащий в 1 мл следующие компоненты: безводный двузамещенный фосфат натрия 1,8 мг, моногидрат однозамещенного фосфата натрия 1,3 мг, дигидроэтилендиаминтетраацетат динатрия 0,1 мг, полисорбат 80-0,1 мг, метилпарабен 1,2 мг, пропилпарабен 0,12 мг, хлорид натрия 7,5 мг, вода для инъекций до 1 мл. При этом концентрация интерферона альфа-2 составляет (5-50)х106 МЕ/мл (патент РФ №2157236). Данный препарат является инъекционным раствором, однако не обеспечивает пролонгированного эффекта.A known preparation in the form of a stable injection solution containing 1 ml of the following components: anhydrous disubstituted sodium phosphate 1.8 mg, monosubstituted sodium phosphate monohydrate 1.3 mg, disodium ethylene diamine tetraacetate 0.1 mg, polysorbate 80-0.1 mg, methyl paraben 1 , 2 mg, propyl paraben 0.12 mg, sodium chloride 7.5 mg, water for injection up to 1 ml. The concentration of interferon alpha-2 is (5-50) x 106 IU / ml (RF patent No. 2157236). This drug is an injectable solution, but does not provide a prolonged effect.
Наиболее близким к предложенному лекарственному средству является препарат, содержащий в 1 г следующие компоненты: интерферон человеческий рекомбинантный (104-3·106) ME, полиэтиленгликоль 4000-6000 0,0001-0,5, полиглюкин 0,001-0,1, структурообразователь (мальтоза, манит, глюкоза, фруктоза) 0,01-0,8, набухающее и диспергирующее вещество (целлюлоза, метилцеллюлоза, ацетилфталилцеллюлоза, натрий карбоксиметилцеллюлоза и т.д.) 0,001-0,1 и целевая добавка остальное. При этом препарат представляет собой смесь для формирования таблетки или содержимого капсулы. В качестве интерферона используют сухую субстанцию, сублимированную из раствора, содержащего полиглюкин, структурообразователь и рекомбинантный человеческий интерферон, адсорбированный полиэтиленгликолем (RU, патент №2292907, 03.03.2006, A61K 38/19,..). Однако данный препарат не является инъекционным, а указанная композиция должна была увеличить биодоступность рекомбинантного человеческого интерферона в таблетированном виде. Подобная композиция не будет обеспечивать пролонгированного эффекта.Closest to the proposed drug is a preparation containing 1 g of the following components: human recombinant interferon (10 4 -3 · 10 6 ) ME, polyethylene glycol 4000-6000 0.0001-0.5, polyglyukin 0.001-0.1, structurant (maltose, beckon, glucose, fructose) 0.01-0.8, swelling and dispersing substance (cellulose, methyl cellulose, acetylphthalyl cellulose, sodium carboxymethyl cellulose, etc.) 0.001-0.1 and the target additive is the rest. In this case, the preparation is a mixture for the formation of tablets or capsule contents. As the interferon, a dry substance is used, sublimated from a solution containing polyglucin, a structurant and recombinant human interferon adsorbed by polyethylene glycol (RU, patent No. 2292907, 03.03.2006, A61K 38/19, ..). However, this drug is not injectable, and the specified composition was to increase the bioavailability of recombinant human interferon in tablet form. Such a composition will not provide a prolonged effect.
Подробное описание изобретенияDETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
В области ветеринарной сельскохозяйственной медицины использование свечей, растворов местного применения или таблеток является трудоемким и неудобным процессом. При этом для подобных препаратов необходимо использовать более высокие концентрации интерферона, что связано с большей массой животных по сравнению с людьми. В этой области наиболее удобной формой препарата являются инъекционные растворы. Но и использование инъекционных форм, в случае, если терапию препаратом необходимо проводить несколько раз в неделю, является затратным процессом, т.к. в случае проведения сезонной терапии необходимо обработать все поголовье. В этом случае экономически выгодным является использование препарата интерферона, обладающего пролонгированным действием, который бы позволил весь курс лечения проводить за одну-две инъекции.In the field of veterinary agricultural medicine, the use of suppositories, topical solutions or tablets is a laborious and inconvenient process. Moreover, for such drugs, it is necessary to use higher concentrations of interferon, which is associated with a larger mass of animals compared to humans. In this area, the most convenient form of the drug is injectable solutions. But the use of injectable forms, in case it is necessary to carry out drug therapy several times a week, is a costly process, as in the case of seasonal therapy, it is necessary to process the entire population. In this case, it is economically advantageous to use an interferon preparation with a prolonged action, which would allow the entire course of treatment to be carried out in one or two injections.
Целью настоящего изобретения является создание лекарственного средства для ветеринарии на основе человеческого рекомбинантного интерферона альфа-2b, обладающего противовирусным и иммуномодулирующим действием, в виде стабильного инъекционного раствора или лиофилизата для приготовления инъекционного раствора. При этом указанное средство должно обладать пролонгированным действием.The aim of the present invention is to provide a medicine for veterinary medicine based on human recombinant interferon alpha-2b with antiviral and immunomodulating effects, in the form of a stable injection solution or lyophilisate for the preparation of an injection solution. Moreover, this tool should have a prolonged effect.
Поставленная цель была достигнута путем создания лекарственного средства, в котором в качестве активного вещества используют гидрофобный комплекс интерферона и двух биологических полимеров - декстрана и метилцеллюлозы, за счет которых высвобождение интерферона в организме происходит постепенно и достигается пролонгация его действия. В качестве декстрана используется декстран с молярной массой 30000 или 60000 или смесь их. Так же композиция содержит фосфатный буфер для стабилизации pH. Наиболее оптимальное соотношение компонентов следующее: человеческий рекомбинантный интерферон альфа-2b (10-200) млн ME, декстран (5-10) мг, метилцеллюлоза (1-20) мг, натрий фосфатный буфер 50 ммоль, натрий хлористый 8,7 мг, калий хлористый 0,3 мг, кислота соляная или натрия гидроксид до pH (5,0-7,5), вода для инъекций до 1 мл. Лекарственное средство представляет собой стабильный стерильный раствор для инъекций или стерильный лиофилизат для приготовления раствора для инъекций.The goal was achieved by creating a drug in which the hydrophobic complex of interferon and two biological polymers, dextran and methylcellulose, is used as the active substance, due to which the release of interferon in the body occurs gradually and its prolongation is achieved. As dextran, dextran with a molar mass of 30,000 or 60,000 or a mixture thereof is used. The composition also contains phosphate buffer to stabilize the pH. The most optimal component ratio is as follows: human recombinant interferon alpha-2b (10-200) ppm ME, dextran (5-10) mg, methyl cellulose (1-20) mg, sodium phosphate buffer 50 mmol, sodium chloride 8.7 mg, potassium chloride 0.3 mg, hydrochloric acid or sodium hydroxide to pH (5.0-7.5), water for injection up to 1 ml. The drug is a stable sterile solution for injection or a sterile lyophilisate for the preparation of a solution for injection.
Лекарственное средство предназначено для инъекционного введения - внутримышечно, подкожно, внутривенно.The drug is intended for injection - intramuscularly, subcutaneously, intravenously.
Сущность изобретения поясняется в следующих примерах.The invention is illustrated in the following examples.
Пример 1. Получение лекарственного средства в виде раствора для инъекцийExample 1. Obtaining a drug in the form of a solution for injection
В емкость на 150 л последовательно заливают воду для инъекций по ФС 42-2620-97 - 70 л, засыпают Na2HPO4*12H2O 1696 г и NaH2PO4*2H2O 41,3 г и растворяют. При постоянном перемешивании в емкость засыпают 5000 г декстрана 70000 и 1500 г метилцеллюлозы. Растворяют при постоянном перемешивании. Доводят pH раствора гидрооксидом натрия или соляной кислотой до 8,0 и доводят объем до 100 л водой для инъекций. Охлаждают раствор до (4±2)°C. При постоянном перемешивании добавляют концентрированный раствор человеческого рекомбинантного интерферона в количестве 22,8 мл или 1010 ME (исходная концентрация интерферона 2 мг/мл или 4,4·108 МЕ/мл). Полученный раствор инкубируют в течение 16 часов при температуре (4±2)°C и постоянном медленном перемешивании около 10-20 rpm. Далее при постоянном объеме и при температуре (4±2)°C проводят тангенсальную диафильтрацию с использованием 50 кДа ультрафильтрационных фильтрационных элементов с площадью поверхности не менее 3 м, не менее 4-х объемов, против 50 мМ натрий фосфатного буфера, pH 6,5. Диафильтрацию прекращают по достижению pH значения 6,8-7,1. Выход интерферона в данном процессе составляет (97±5)% по данным биологического тестирования с использованием человеческих диплоидных фибробластов и вируса везикулярного стоматита.In a container of 150 l, water for injection according to FS 42-2620-97 - 70 l is successively poured, Na 2 HPO 4 * 12H 2 O 1696 g and 41.3 g NaH 2 PO 4 * 2H 2 O are poured and dissolved. With constant stirring, 5000 g of dextran 70,000 and 1500 g of methyl cellulose are poured into the container. Dissolve with constant stirring. The pH of the solution was adjusted with sodium hydroxide or hydrochloric acid to 8.0 and the volume was adjusted to 100 l with water for injection. Cool the solution to (4 ± 2) ° C. With constant stirring, a concentrated solution of human recombinant interferon is added in an amount of 22.8 ml or 10 10 ME (initial concentration of interferon 2 mg / ml or 4.4 · 10 8 IU / ml). The resulting solution was incubated for 16 hours at a temperature of (4 ± 2) ° C and constant slow stirring at about 10-20 rpm. Then, at a constant volume and at a temperature of (4 ± 2) ° C, tangential diafiltration is carried out using 50 kDa of ultrafiltration filtration elements with a surface area of at least 3 m, at least 4 volumes, against 50 mM sodium phosphate buffer, pH 6.5 . Diafiltration is stopped when the pH reaches 6.8-7.1. The yield of interferon in this process is (97 ± 5)% according to biological testing using human diploid fibroblasts and vesicular stomatitis virus.
В емкость на 600 л заливают воду для инъекций с температурой (23±2)°C 400 л, засыпают 4350 г хлористого натрия, 150 г хлористого кальция, Na2HPO4*12H2O 6784 г и Na2HPO4*2H2O 165,2 г и растворяют при постоянном перемешивании. В емкость заливают раствор комплекса интерферона, декстрана и метилцеллюлозы. Доводят pH гидрооксидом натрия или соляной кислотой до 6,5 и доводят объем до 500 л водой для инъекций в случае необходимости.In a 600-liter container, pour water for injection with a temperature of (23 ± 2) ° C 400 l, pour 4350 g of sodium chloride, 150 g of calcium chloride, Na 2 HPO 4 * 12H 2 O 6784 g and Na 2 HPO 4 * 2H 2 O 165.2 g and dissolved with constant stirring. A solution of the complex of interferon, dextran and methylcellulose is poured into the container. Adjust the pH with sodium hydroxide or hydrochloric acid to 6.5 and adjust the volume to 500 L with water for injection if necessary.
Раствор подвергают асептической фильтрации в стерильную емкость, переводят в помещение класса «А», где осуществляют асептический розлив в 10, 20 или 100 мл флаконы. Флаконы укупоривают резиновыми пробками и обкатывают алюминиевыми колпачками. Полученный препарат содержит (18-22) млн ME интерферона в мл, в виде комплекса с декстраном и метилцеллюлозой.The solution is subjected to aseptic filtration in a sterile container, transferred to a class “A” room, where aseptic filling is carried out in 10, 20 or 100 ml vials. The bottles are corked with rubber stoppers and wrapped in aluminum caps. The resulting preparation contains (18-22) million ME of interferon in ml, in the form of a complex with dextran and methyl cellulose.
Пример 2. Получение лекарственной формы в виде лиофилизата для приготовления раствора для инъекцийExample 2. Obtaining a dosage form in the form of a lyophilisate for the preparation of a solution for injection
В емкость на 150 л последовательно заливают воду для инъекций по ФС 42-2620-97 70 л, засыпают Na2HPO4*12H2O 1696 г и Na2HPO4*2H2O 41,3 г и растворяют. При постоянном перемешивании в емкость засыпают 5000 г декстрана 70000 и 1500 г метилцеллюлозы. Растворяют при постоянном перемешивании. Доводят pH раствора гидрооксидом натрия или соляной кислотой до 8,0 и доводят объем до 100 л водой для инъекций. Охлаждают раствор до (4±2)°C. При постоянном перемешивании добавляют концентрированный раствор человеческого рекомбинантного интерферона в количестве 22,8 мл или 1010 ME (исходная концентрация интерферона 2 мг/мл или 4,4·108 МЕ/мл). Полученный раствор инкубируют в течение 16 часов при температуре (4±2)°С и постоянном медленном перемешивании около 10-20 rpm. Далее при постоянном объеме и при температуре (4±2)°C проводят тангенсальную диафильтрацию с использованием 50 кДа ультрафильтрационных фильтрационных элементов с площадью поверхности не менее 3 м2, не менее 4-х объемов, против 50 мМ натрий фосфатного буфера, содержащего 8,7 г/л хлорида натрия и 0,3 г/л хлорида калия, pH 5,5. Диафильтрацию прекращают по достижении pH значения 5,8-6,1. Выход интерферона в данном процессе составляет (98±5)% по данным биологического тестирования с использованием человеческих диплоидных фибробластов и вируса везикулярного стоматита. Полученный раствор быстро нагревают до (30±2)°C в течение примерно 30 минут и подвергают асептической фильтрации в стерильную емкость. Стерильный раствор переводят в помещение класса «А», где осуществляют асептический розлив в 10 мл флаконы по 2 мл при комнатной температуре. Флаконы замораживают на -40°C на 24 часа, после чего переносят в лиофильную сушилку и проводят сублимирование. По окончании процесса флаконы в асептических условиях укупоривают стерильными резиновыми пробками и обкатывают алюминиевыми колпачками. Полученный лиофилизат содержит 90-110 млн ME интерферона на флакон в виде комплекса с декстраном и метилцеллюлозой.In a container of 150 l, water for injection according to FS 42-2620-97 70 l is successively poured, Na 2 HPO 4 * 12H 2 O 1696 g and Na 2 HPO 4 * 2H 2 O 41.3 g are poured and dissolved. With constant stirring, 5000 g of dextran 70,000 and 1500 g of methyl cellulose are poured into the container. Dissolve with constant stirring. The pH of the solution was adjusted with sodium hydroxide or hydrochloric acid to 8.0 and the volume was adjusted to 100 l with water for injection. Cool the solution to (4 ± 2) ° C. With constant stirring, a concentrated solution of human recombinant interferon is added in an amount of 22.8 ml or 10 10 ME (initial concentration of interferon 2 mg / ml or 4.4 · 10 8 IU / ml). The resulting solution was incubated for 16 hours at a temperature of (4 ± 2) ° C and constant slow stirring at about 10-20 rpm. Then, at a constant volume and at a temperature of (4 ± 2) ° C, tangential diafiltration is carried out using 50 kDa of ultrafiltration filtration elements with a surface area of at least 3 m 2 , at least 4 volumes, against 50 mM sodium phosphate buffer containing 8, 7 g / l sodium chloride and 0.3 g / l potassium chloride, pH 5.5. Diafiltration is stopped when the pH reaches 5.8-6.1. The yield of interferon in this process is (98 ± 5)% according to biological testing using human diploid fibroblasts and vesicular stomatitis virus. The resulting solution was quickly heated to (30 ± 2) ° C for about 30 minutes and subjected to aseptic filtration in a sterile container. The sterile solution is transferred to a class “A” room, where aseptic filling is carried out in 10 ml vials of 2 ml at room temperature. The vials are frozen at -40 ° C for 24 hours, after which they are transferred to a freeze dryer and sublimation is carried out. At the end of the process, the bottles are sealed under aseptic conditions with sterile rubber stoppers and wrapped in aluminum caps. The resulting lyophilisate contains 90-110 million ME of interferon per bottle in the form of a complex with dextran and methyl cellulose.
Пример 3. Исследование физико-химического состава раствора лекарственного средства и проверка стабильности лекарственного средстваExample 3. The study of the physico-chemical composition of the solution of the drug and checking the stability of the drug
В процессе хранения в течение 1 года проводили исследования опытных партий полученного лекарственного препарата. В качестве аналитических методов использовали ультрафильтрацию с использованием лабораторной ультрафильтрационной установки Биомакс (Миллипор) с размерами пор 100 кДа с целью определения стабильности комплекса интерферона, декстрана и метилцеллюлозы и метод определения биологической активности интерферона с использованием человеческих диплоидных фибробластов в качестве тест-культуры и вируса везикулярного стоматита в качестве тест-вируса. Определение биологической активности проводили как самого раствора препарата, так и раствора препарата, подвергнутого предварительной диафильтрации для определения стабильности комплекса интерферона с декстраном и метилцеллюлозой. Препарат в виде лиофилизата предварительно растворяли в воде для инъекций добавлением во флакон 10 мл воды. Диафильтрацию проводили следующим образом: 10 мл раствора препарата разводили до 300 мл 50 мМ натрий-фосфатным буфером, pH 7,0. На установке Биомакс проводили диафильтрацию при постоянном объеме, 5 объемов. Проводили определение биологической активности интерферона в концентрате (V=300 мл) и в фильтрате (V=1500 мл). В качестве контроля ультрафильтрации в аналогичном процессе использовали раствор интерферона в фосфатном буфере, который не находился в комплексе с декстраном и метилцеллюлозой, с содержанием интерферона 667 тыс. ME/мл (200 млн ME в 300 мл). Результаты представлены в табл. 1 и 2. Как видно из Табл. 1, препарат не теряет активности в течение всего срока хранения. Данные Табл. 2 показывают отсутствие в образцах интерферона в свободной форме и подтверждают стабильность комплекса интерферона с декстраном и метилцеллюлозой в течение всего срока хранения.During storage for 1 year, research was conducted on experimental batches of the obtained drug. Ultrafiltration was used as analytical methods using a Biomax (Millipore) laboratory ultrafiltration unit with a pore size of 100 kDa to determine the stability of the complex of interferon, dextran and methylcellulose and a method for determining the biological activity of interferon using human diploid fibroblasts as a test culture and vesicular stomatitis virus as a test virus. The determination of biological activity was carried out both of the drug solution itself and of the drug solution subjected to preliminary diafiltration to determine the stability of the complex of interferon with dextran and methylcellulose. The drug in the form of a lyophilisate was previously dissolved in water for injection by adding 10 ml of water to the vial. Diafiltration was carried out as follows: 10 ml of the drug solution was diluted to 300 ml with 50 mM sodium phosphate buffer, pH 7.0. At the Biomax installation, diafiltration was carried out with a constant volume of 5 volumes. The biological activity of interferon was determined in a concentrate (V = 300 ml) and in a filtrate (V = 1500 ml). As a control of ultrafiltration in a similar process, a solution of interferon in phosphate buffer was used, which was not in complex with dextran and methylcellulose, with an interferon content of 667 thousand ME / ml (200 million ME in 300 ml). The results are presented in table. 1 and 2. As can be seen from Table. 1, the drug does not lose activity during the entire storage period. Data Tab. 2 show the absence of free-form interferon in the samples and confirm the stability of the complex of interferon with dextran and methylcellulose over the entire shelf life.
Пример 4. Исследование фармакокинетики лекарственного средстваExample 4. The study of the pharmacokinetics of the drug
В качестве экспериментальных животных брали свиней и телят.Pigs and calves were taken as experimental animals.
А). Исследование фармакокинетики лекарственного средства на свиньях.BUT). A study of the pharmacokinetics of a drug in pigs.
Изучение препарата проводили на восьми свиньях с массой тела 150±20 кг. Животные содержались в стандартных условиях при свободном доступе к корму и воде. Перед инъекциями препарата животных взвешивали. Препарат, опытная серия 020507 (препарат в виде раствора для инъекций, содержание интерферона 20 млн МЕ/мл), вводили однократно, внутримышечно, в дозе 200 тыс. ME на кг массы тела. Объем инъекции составлял 1,3-1,7 мл препарата, в зависимости от массы животного. В качестве препарата сравнения использовали стерильный раствор интерферона в концентрации 20 млн МЕ/мл в фосфатном буфере, приготовленный накануне опыта. Кровь у экспериментальных животных отбирали до введения препарата и после введения через 0,5, 1, 2, 4, 8, 24, 48, 72, 96 и 120 часов. Отобранные пробы крови выдерживали при комнатной температуре до образования сгустка, после чего образцы центрифугировали в течение 15 минут при 2500 об/мин и отбирали по 4 мл сыворотки и замораживали. Транспортировка проб осуществлялась на льду. До анализа пробы сыворотки хранили в замороженном виде. Определение активности интерферона в крови осуществляли методом ИФА с использованием моноклональных антител на человеческий рекомбинантный интерферон альфа-2b. Результаты представлены на фиг. 1. Было определено, что максимальная концентрация интерферона в крови после введения препарата достигалась на (23±6) часов, в то время как при введении контроля (6±1) часов. Сmax были сравнимы. Площади под кривыми концентрация-время, AUC в интервале от 0 до бесконечности составляли (5100±1100) и (26800±8700) для контроля и препарата соответственно, т.е. для препарата площадь под кривой была выше в 5,2 раза. В то же время период полувыведения интерферона после инъекции контроля составил (4±1) часов, а после введения препарата (26±8) часов.The study of the drug was carried out on eight pigs with a body weight of 150 ± 20 kg. Animals were kept under standard conditions with free access to food and water. Before injection of the drug, the animals were weighed. The preparation, experimental series 020507 (preparation in the form of a solution for injection, interferon content of 20 million IU / ml), was administered once, intramuscularly, at a dose of 200 thousand ME per kg of body weight. The injection volume was 1.3-1.7 ml of the drug, depending on the weight of the animal. A sterile solution of interferon at a concentration of 20 million IU / ml in phosphate buffer prepared on the eve of the experiment was used as a comparison drug. Blood was collected from experimental animals before administration of the drug and after administration after 0.5, 1, 2, 4, 8, 24, 48, 72, 96 and 120 hours. The collected blood samples were kept at room temperature until a clot formed, after which the samples were centrifuged for 15 minutes at 2500 rpm and 4 ml of serum were taken and frozen. Samples were transported on ice. Prior to analysis, serum samples were stored frozen. The determination of the activity of interferon in the blood was carried out by ELISA using monoclonal antibodies to human recombinant interferon alpha-2b. The results are presented in FIG. 1. It was determined that the maximum concentration of interferon in the blood after administration of the drug was achieved at (23 ± 6) hours, while with the introduction of control (6 ± 1) hours. With max were comparable. The areas under the concentration-time, AUC curves from 0 to infinity were (5100 ± 1100) and (26800 ± 8700) for the control and the drug, respectively, i.e. for the preparation, the area under the curve was 5.2 times higher. At the same time, the half-life of interferon after injection of the control was (4 ± 1) hours, and after administration of the drug (26 ± 8) hours.
Б). Исследование фармакокинетики лекарственного средства на телятах.B) A study of the pharmacokinetics of a drug in calves.
В качестве экспериментальных животных брали телят черно-пестрой породы, в возрасте 7 месяцев с массой около 195-208 кг в количестве 8-ми голов. В течение проведения эксперимента животные имели свободный доступ к воде и корму. Условия содержания животных были аналогичными условиям содержания стада. За несколько часов перед применением препаратов телят взвешивали и рассчитывали количества вводимых препаратов. Препарат, опытная серия 040607 (препарат в виде лиофилизата для приготовления раствора для инъекций, содержание интерферона 100 млн МЕ/флакон), растворяли в 10 мл воды для инъекций и вводили однократно, внутримышечно, в дозе 200 тыс. ME на кг массы тела. Объем инъекции составлял около 4,0 мл препарата, в зависимости от массы животного. В качестве препарата сравнения использовали стерильный раствор интерферона в концентрации 10 млн МЕ/мл в фосфатном буфере, приготовленный накануне опыта. Кровь у экспериментальных животных отбирали до введения препарата и после введения через 0,5, 1, 2, 4, 8, 24, 48, 72, 96 и часов. Отобранные пробы крови выдерживали при комнатной температуре до образования сгустка, после чего образцы центрифугировали в течение 15 минут при 2500 об/мин и отбирали по 4 мл сыворотки и замораживали. Транспортировка проб осуществлялась на льду. До анализа пробы сыворотки хранили в замороженном виде. Определение активности интерферона в крови осуществляли методом ИФА с использованием моноклональных антител на человеческий рекомбинантный интерферон альфа-2b. Результаты представлены на фиг. 2. Было определено, что максимальная концентрация интерферона в крови после введения препарата достигалась на (27±8) часов, в то время как при введении контроля (7±1) часов. Сmax были сравнимы. Площади под кривыми концентрация-время, AUC в интервале от 0 до бесконечности составляли (3300±940) и (17300±9300) для контроля и препарата соответственно, т.е. для препарата площадь под кривой была выше в 5,2 раза. В то же время период полувыведения интерферона после инъекции контроля составил (4±1) часов, а после введения препарата (23±8) часов.As experimental animals, black-motley calves were taken, at the age of 7 months with a weight of about 195-208 kg in the amount of 8 animals. During the experiment, the animals had free access to water and feed. The conditions of the animals were similar to the conditions of the herd. A few hours before the use of the preparations, the calves were weighed and the amounts of the administered preparations were calculated. The preparation, experimental series 040607 (a preparation in the form of a lyophilizate for the preparation of an injection solution, an interferon content of 100 million IU / vial) was dissolved in 10 ml of water for injection and was administered once, intramuscularly, at a dose of 200 thousand ME per kg of body weight. The injection volume was about 4.0 ml of the drug, depending on the weight of the animal. A sterile solution of interferon at a concentration of 10 million IU / ml in phosphate buffer prepared on the eve of the experiment was used as a comparison drug. Blood from experimental animals was taken before administration of the drug and after administration after 0.5, 1, 2, 4, 8, 24, 48, 72, 96 and hours. The collected blood samples were kept at room temperature until a clot formed, after which the samples were centrifuged for 15 minutes at 2500 rpm and 4 ml of serum were taken and frozen. Samples were transported on ice. Prior to analysis, serum samples were stored frozen. The determination of the activity of interferon in the blood was carried out by ELISA using monoclonal antibodies to human recombinant interferon alpha-2b. The results are presented in FIG. 2. It was determined that the maximum concentration of interferon in the blood after administration of the drug was achieved at (27 ± 8) hours, while with the introduction of control (7 ± 1) hours. With max were comparable. The areas under the concentration-time, AUC curves from 0 to infinity were (3300 ± 940) and (17300 ± 9300) for the control and preparation, respectively, i.e. for the preparation, the area under the curve was 5.2 times higher. At the same time, the half-life of interferon after injection of the control was (4 ± 1) hours, and after administration of the drug (23 ± 8) hours.
Хотя указанное изобретение описано в деталях со ссылкой на Примеры, для специалиста в указанной области техники очевидно, что могут быть совершены различные изменения и произведены эквивалентные замены и такие изменения и замены не выходят за рамки настоящего изобретения.Although the invention has been described in detail with reference to Examples, it will be apparent to those skilled in the art that various changes can be made and equivalent replacements made, and such changes and replacements are not outside the scope of the present invention.
Claims (4)
человеческий рекомбинантный интерферон альфа-2b 10-200 млн ME
декстран 5-10 мг
метилцеллюлоза 1-20 мг
натрий фосфатный буфер 50 ммоль
натрий хлористый 8,7 мг
калий хлористый 0,3 мг
кислота соляная или натрия гидроксид до рН 5,0-7,5
вода для инъекций до 1 мл 4. The drug according to claim 3, characterized in that use the following ratio of components (per ml):
human recombinant interferon alfa-2b 10-200 million ME
dextran 5-10 mg
methyl cellulose 1-20 mg
sodium phosphate buffer 50 mmol
sodium chloride 8.7 mg
potassium chloride 0.3 mg
hydrochloric acid or sodium hydroxide to a pH of 5.0-7.5
water for injection up to 1 ml
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2009109059/15A RU2404797C1 (en) | 2009-03-13 | 2009-03-13 | COMPOSITION CONTAINING HUMAN RECOMBINANT INTERFERON ALPHA-2b, AND MEDICINAL AGENT OF PROLONGED ACTION FOR VETERINARY SCIENCE ON ITS BASIS, HAVING ANTIVIRUS AND IMMUNOMODULATORY ACTION |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2009109059/15A RU2404797C1 (en) | 2009-03-13 | 2009-03-13 | COMPOSITION CONTAINING HUMAN RECOMBINANT INTERFERON ALPHA-2b, AND MEDICINAL AGENT OF PROLONGED ACTION FOR VETERINARY SCIENCE ON ITS BASIS, HAVING ANTIVIRUS AND IMMUNOMODULATORY ACTION |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2009109059A RU2009109059A (en) | 2010-09-20 |
| RU2404797C1 true RU2404797C1 (en) | 2010-11-27 |
Family
ID=42938816
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2009109059/15A RU2404797C1 (en) | 2009-03-13 | 2009-03-13 | COMPOSITION CONTAINING HUMAN RECOMBINANT INTERFERON ALPHA-2b, AND MEDICINAL AGENT OF PROLONGED ACTION FOR VETERINARY SCIENCE ON ITS BASIS, HAVING ANTIVIRUS AND IMMUNOMODULATORY ACTION |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2404797C1 (en) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2561046C1 (en) * | 2014-10-30 | 2015-08-20 | Илья Александрович Марков | Gel-like eye drops for treatment of inflammatory allergic, bacterial, viral, traumatic and dystrophic eye diseases |
| RU2789513C1 (en) * | 2022-05-24 | 2023-02-06 | Эдуард Витальевич Кравченко | Interferon-containing composition for the treatment of chronic diseases of the upper respiratory ways |
-
2009
- 2009-03-13 RU RU2009109059/15A patent/RU2404797C1/en not_active IP Right Cessation
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2561046C1 (en) * | 2014-10-30 | 2015-08-20 | Илья Александрович Марков | Gel-like eye drops for treatment of inflammatory allergic, bacterial, viral, traumatic and dystrophic eye diseases |
| RU2789513C1 (en) * | 2022-05-24 | 2023-02-06 | Эдуард Витальевич Кравченко | Interferon-containing composition for the treatment of chronic diseases of the upper respiratory ways |
| RU2795854C1 (en) * | 2022-09-27 | 2023-05-12 | Валентина Васильевна Малиновская | Medicinal product based on interferon alfa-2b human recombinant methionine-free |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2009109059A (en) | 2010-09-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI112169B (en) | Process for the preparation of preserved drugs for infusion or injection of human protein | |
| JP4536829B2 (en) | Stable lyophilized pharmaceutical formulation of monoclonal or polyclonal antibody | |
| US20160303238A1 (en) | Liquid formulation of fsh | |
| JP5388842B2 (en) | Lyophilized preparation containing influenza vaccine and method for producing the same | |
| EP1928413A1 (en) | Hfsh aqueous formulation | |
| JP4699991B2 (en) | Liquid pharmaceutical composition of FSH and LH with non-ionic surfactant | |
| EP4393480A1 (en) | Lyophilized formulation solution and lyophilized formulation, and method and use thereof | |
| KR20190086662A (en) | Pharmaceutical parenteral formulations containing carglum acid | |
| US20180071393A1 (en) | Stable intravenous formulation | |
| JP3714951B2 (en) | IL-6-containing pharmaceutical composition | |
| EA009676B1 (en) | Aqueous formulation of human erythropoietin | |
| US9801859B2 (en) | Bendamustine formulations | |
| RU2404797C1 (en) | COMPOSITION CONTAINING HUMAN RECOMBINANT INTERFERON ALPHA-2b, AND MEDICINAL AGENT OF PROLONGED ACTION FOR VETERINARY SCIENCE ON ITS BASIS, HAVING ANTIVIRUS AND IMMUNOMODULATORY ACTION | |
| CN115364060A (en) | Freeze-dried medicinal preparation and application thereof | |
| EP3040067A1 (en) | Chlorogenic acid powder-injection and preparation method thereof | |
| KR100807650B1 (en) | FREEZE-DRIED PREPARATION OF N-[o-p-PIVALOYLOXYBENZENESULFONYLAMINOBENZOYL]GLYCINE MONOSODIUM SALT TETRAHYDRATE AND PROCESS FOR PRODUCING THE SAME | |
| AU636653B2 (en) | Stabilized leukocyte-interferons | |
| KR101487953B1 (en) | Organic solvent-free aqueous solution composition of gemcitabine | |
| WO2015052115A1 (en) | Stable pharmaceutical formulations of caspofungin | |
| EP3842048B1 (en) | Novel pentosan polysulfate sodium preparation | |
| RU2218934C2 (en) | Interferon preparation | |
| KR20230096074A (en) | Phosphenytoin sodium solid composition, lyophilization method and use of phosphenytoin sodium solid composition | |
| EP0063434B1 (en) | Pharmaceutical composition comprising a penicillin derivative for the treatment of bacterial infections | |
| JP5265514B2 (en) | HGF preparation | |
| EA021610B1 (en) | Liquid antiviral formulation |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20130314 |
|
| NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20140910 |
|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20170314 |
|
| NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20180205 |
|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20210314 |