RU2393211C2 - Anaplasma speciosus omsk strain of new genotype used for identifying anaplasma and making diagnostic preparations - Google Patents

Anaplasma speciosus omsk strain of new genotype used for identifying anaplasma and making diagnostic preparations Download PDF

Info

Publication number
RU2393211C2
RU2393211C2 RU2008135545/13A RU2008135545A RU2393211C2 RU 2393211 C2 RU2393211 C2 RU 2393211C2 RU 2008135545/13 A RU2008135545/13 A RU 2008135545/13A RU 2008135545 A RU2008135545 A RU 2008135545A RU 2393211 C2 RU2393211 C2 RU 2393211C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
anaplasma
strain
omsk
speciosus
genotype
Prior art date
Application number
RU2008135545/13A
Other languages
Russian (ru)
Other versions
RU2008135545A (en
Inventor
Николай Викторович Рудаков (RU)
Николай Викторович Рудаков
Людмила Валерьевна Кумпан (RU)
Людмила Валерьевна Кумпан
Ирина Евгеньевна Самойленко (RU)
Ирина Евгеньевна Самойленко
Канатжан Каиргельдинович Бейсембаев (RU)
Канатжан Каиргельдинович Бейсембаев
Александр Пантелеевич Красиков (RU)
Александр Пантелеевич Красиков
Original Assignee
Федеральное государственное учреждение науки "Омский научно-исследовательский институт природно-очаговых инфекций" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное учреждение науки "Омский научно-исследовательский институт природно-очаговых инфекций" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека filed Critical Федеральное государственное учреждение науки "Омский научно-исследовательский институт природно-очаговых инфекций" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека
Priority to RU2008135545/13A priority Critical patent/RU2393211C2/en
Publication of RU2008135545A publication Critical patent/RU2008135545A/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2393211C2 publication Critical patent/RU2393211C2/en

Links

Classifications

    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02ATECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

FIELD: chemistry; biochemistry.
SUBSTANCE: invention pertains to biotechnology. The Anaplasma speciosus OmsK strain is the first anaplasma representative of this genotype. Based on studying phenotype and genotype features, the strain is classified as Rickettsiales of the Anaplasmatacea family of the Anaplasma genus. From results of studying and comparing nucleotide sequences of the 16S rRNA gene, the strain has 99.7% homology with Anaplasma marginale and Anaplasma centrale. The strain is deposited in the Museum of Rickettsial Strains of the Gamaleya Institute of Epidemiology and Microbiology of the Russian Academy of Medical Sciences under No. 138 dated 19.09.2005.
EFFECT: obtaining a strain which can be used for identifying anaplasma based on genotype and phenotype features and obtaining diagnostic preparations.
2 ex

Description

Изобретение относится к области биотехнологии. Штамм "Anaplasma speciosus Omsk" является первым представителем анаплазм данного генотипа. На основании изучения фенотипических и генотипических признаков штамм отнесен к порядку Rickettsiales семейству Anaplasmatacea роду Anaplasma. По результатам изучения и сравнения нуклеотидных последовательностей гена 16S рРНК имеет 99,7% гомологии с Anaplasma marginale и Anaplasma centrale. Штамм “Anaplasma speciosus Omsk” культивируется в культуре клеток Vero.The invention relates to the field of biotechnology. The strain "Anaplasma speciosus Omsk" is the first representative of anaplasmas of this genotype. Based on the study of phenotypic and genotypic characters, the strain is assigned to the Rickettsiales order of the Anaplasmatacea family of the genus Anaplasma. According to the results of studying and comparing the nucleotide sequences of the 16S gene, rRNA has 99.7% homology with Anaplasma marginale and Anaplasma centrale. The strain “Anaplasma speciosus Omsk” is cultured in a Vero cell culture.

Штамм “Anaplasma speciosus Omsk" выделен в 2004 году из селезенки коровы с клиническими проявлениями анаплазмоза в Большереченском районе Омской области.The strain “Anaplasma speciosus Omsk" was isolated in 2004 from a cow spleen with clinical manifestations of anaplasmosis in the Bolsherechensky district of the Omsk region.

Штамм нового генотипа "Anaplasma speciosus Omsk" хранится во Всероссийском музее риккетсиозных культур ГУ НИИЭМ им. Н.Ф.Гамалеи РАМН под инвентарным номером 138 от 19 сентября 2005 г.The strain of the new genotype "Anaplasma speciosus Omsk" is stored in the All-Russian Museum of Rickettsial Cultures of the NIIEM them. NF Gamalei RAMS under inventory number 138 of September 19, 2005

Задача изобретения - оригинальный штамм "Anaplasma speciosus Omsk" нового генотипа анаплазм.The objective of the invention is the original strain "Anaplasma speciosus Omsk" of a new genotype of anaplasma.

Технический результат - использование первого выделенного в России штамма возбудителя анаплазмоза крупного рогатого скота - "Anaplasma speciosus Omsk", отнесенного по филогенетическим критериям к новому генотипу рода Anaplasma, меняет представление о популяции анаплазм, циркулирующих в Евразии.EFFECT: use of the first strain of cattle anaplasmosis causative agent isolated in Russia - Anaplasma speciosus Omsk, classified according to phylogenetic criteria to the new genotype of the genus Anaplasma, changes the idea of the population of anaplasma circulating in Eurasia.

Гипериммунная сыворотка, полученная с использованием изученного штамма, строго специфична к антигену, против которого она получена, и демонстрирует в реакции непрямой иммунофлюоресценции высокий уровень антител (1:160), что позволяет оценивать данный штамм как кандидат для разработки диагностических препаратов.Hyperimmune serum obtained using the studied strain is strictly specific to the antigen against which it was obtained and exhibits a high level of antibodies in the indirect immunofluorescence reaction (1: 160), which allows this strain to be evaluated as a candidate for the development of diagnostic drugs.

Это обусловливает необходимость изменения методических подходов к диагностике анаплазмозов и мониторингу анаплазм.This necessitates a change in methodological approaches to the diagnosis of anaplasmosis and monitoring of anaplasmas.

Выделенный штамм "Anaplasma speciosus Omsk" нового генотипа характеризуется следующими признаками.The isolated strain "Anaplasma speciosus Omsk" of the new genotype is characterized by the following features.

Морфологические признаки. Типичны для анаплазм. В окрашенных по Романовскому - Гимзе мазках из периферической крови от больного животного анаплазмы обнаруживаются в виде одного-двух, реже трех в одном эритроците розовато-фиолетовых точкоподобных включений округлой или овальной формы. Расположение в эритроците преимущественно периферическое, иногда эксцентричное. Грамотрицательны.Morphological signs. Typical for anaplasma. In Romanovsky-Giemsa stained smears from peripheral blood from a sick animal, anaplasmas are found in the form of one or two, less often three in one red blood cell, pinkish-purple dot-like inclusions of round or oval shape. The location in the red blood cell is mainly peripheral, sometimes eccentric. Gram-negative.

Культуральные свойства. Успешно пассируются в культуре клеток Vero с накоплением от единичных до 90 микробных тел в поле зрения.Cultural properties. They are successfully passaged in Vero cell culture with accumulation from single to 90 microbial bodies in the field of view.

Пассажная характеристика. Культура штамма "Anaplasma speciosus Omsk" лиофильно высушена на 7 пассаже в культуре клеток Vero.Passage characteristic. The culture of the strain "Anaplasma speciosus Omsk" was lyophilized at passage 7 in a Vero cell culture.

Антигенные свойства. Антигенные детерминанты выявляются методом непрямой флюоресценции с гомологичной кроличьей иммунной сывороткой к штамму.Antigenic properties. Antigenic determinants are detected by indirect fluorescence with a homologous rabbit immune serum to the strain.

Вирулентные свойства. Оказывает цитопатическое действие в культуре клеток Vero. Вызывает клинические проявления анаплазмоза у сельскохозяйственных (коровы) и экспериментальных лабораторных животных (кролики, белые мыши), зараженных штаммом.Virulent properties. It has a cytopathic effect in Vero cell culture. It causes clinical manifestations of anaplasmosis in agricultural (cows) and experimental laboratory animals (rabbits, white mice) infected with the strain.

Генотипические характеристики. Получена последовательность нуклеотидов гена 16S рРНК длиной 613 п.о. (номер в GenBank AY649325):Genotypic characteristics. The nucleotide sequence of the 16S rRNA gene was obtained with a length of 613 bp (GenBank number AY649325):

ttaacacatg caagtcgaac ggaccataca cgcagcttgc tgcgtgtatg gttagtggca gacgggtgag taatgcatag gaatctacct agtagtatgg gatagccact agaaatggtg ggtaatactg tataatccct gcgggggaaaa gatttatcgc tattagatga gcctatgtca gattagctag ttggtggggt aatggcctac caaggcggtg atctgtagct ggtctgagag gatgatcagc cacactggaa ctgagacacg gtccagactc ctacgggagg cagcagtggg gaatattgga caatgggcgc aagcctgatc cagctatgcc gcgtgagtga ggaaggcctt agggttgtaa aactctttca gtagggaaga taatgacggt acctacagaa gaagtcccgg caaactccgt gccagcagcc gcggtaatac ggagggggca agcgttgttc ggaattattg ggcgtaaagg gcatgtaggc ggtttggtaa gttaaaggtg aaataccagg gcttaaccct ggggctgctt ttaatactgc aggactagag tccggaagag gatagcggaa ttcctagtgt agaggtgaaa ttc.ttaacacatg caagtcgaac ggaccataca cgcagcttgc tgcgtgtatg gttagtggca gacgggtgag taatgcatag gaatctacct agtagtatgg gatagccact agaaatggtg ggtaatactg tataatccct gcgggggaaaa gatttatcgc tattagatga gcctatgtca gattagctag ttggtggggt aatggcctac caaggcggtg atctgtagct ggtctgagag gatgatcagc cacactggaa ctgagacacg gtccagactc ctacgggagg cagcagtggg gaatattgga caatgggcgc aagcctgatc cagctatgcc gcgtgagtga ggaaggcctt agggttgtaa aactctttca gtagggaaga taatgacggt acctacagaa gaagtcccgg caaactccgt gccagcagcc gcggtaatac ggagggggca agcgttgttc ggaattattg ggcgtaaagg gcatgtaggc ggtttggtaa gttaaaggtg aaataccagg gcttaaccct ggggctgctt ttaatactgc aggactagag tccggaagag gatagcggaa ttcctagtgt agaggtgaaa ttc.

При идентификации в Genbank приведенная последовательность нуклеотидов является уникальной. На основании филогенетических данных штамм "Anaplasma speciosus Omsk" является наиболее близким к Anaplasma marginale и Anaplasma centrale (степень гомологии 99,7%).When identified in Genbank, the cited nucleotide sequence is unique. Based on phylogenetic data, the strain "Anaplasma speciosus Omsk" is the closest to Anaplasma marginale and Anaplasma centrale (degree of homology 99.7%).

На основании морфологических, антигенных и генетических признаков изолированный штамм относят к роду Anaplasma, новому генотипу “Anaplasma speciosus Omsk".Based on morphological, antigenic and genetic characters, an isolated strain is assigned to the genus Anaplasma, the new genotype “Anaplasma speciosus Omsk".

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.The invention is illustrated by the following examples.

Пример 1. Идентификация на основании генотипических признаков.Example 1. Identification based on genotypic traits.

Экстракция ДНК.DNA extraction.

Экстракцию ДНК из пробы культур клеток осуществляют с использованием набора «Проба НК» (ДНК-технология, Москва) в соответствии с протоколом фирмы-производителя.The extraction of DNA from a sample of cell cultures is carried out using a set of "Sample NK" (DNA technology, Moscow) in accordance with the protocol of the manufacturer.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) и секвенс-реакция.Polymerase chain reaction (PCR) and sequencing reaction.

Полимеразную цепную реакцию (ПЦР) и секвенс-реакцию выполняют, применяя родоспецифичные праймеры из области гена 16S рРНК Ehrl (5'-gaacgaacgctggcggcaagc-3') и Ehr2 (5'-agta(t/c)cg(a/g)accagatagccgc-3').The polymerase chain reaction (PCR) and the sequencing reaction are performed using genus-specific primers from the 16S rRNA gene region Ehrl (5'-gaacgaacgctggcggcaagc-3 ') and Ehr2 (5'-agta (t / c) cg (a / g) accagatagccgc- 3 ').

Реакционная смесь для каждой пробы содержит 0,3 pmol каждого праймера, 1 единица Tag-полимеразы, 0,2 mM каждого дезоксинуклеотида, 2 mM MgCl2 и 2 мкл ДНК от каждой пробы, финальный объем составляет 100 мкл. Амплификацию выполняют по следующей программе: 3 минуты инициальной денатурации при температуре 94°С, в последующих 35 циклах 1 минута денатурации при температуре 94°С, 1 минута отжиг праймеров при температуре 57°С, элонгация в течение 1,5 минуты при температуре 72°С и 5 минут финальная элонгация при температуре 72°С. Каждая постановка включает отрицательный и положительный контроль.The reaction mixture for each sample contains 0.3 pmol of each primer, 1 unit of Tag polymerase, 0.2 mM of each deoxynucleotide, 2 mM MgCl 2 and 2 μl of DNA from each sample, the final volume is 100 μl. Amplification is performed according to the following program: 3 minutes of initial denaturation at a temperature of 94 ° C, in subsequent 35 cycles 1 minute of denaturation at a temperature of 94 ° C, 1 minute of annealing of primers at a temperature of 57 ° C, elongation for 1.5 minutes at a temperature of 72 ° C and 5 minutes final elongation at a temperature of 72 ° C. Each setting includes negative and positive controls.

Пурификацию ПЦР-продукта проводят с использованием GFX колонок («Amersham Biosciences", США). Нуклеотидные последовательности определены в Центре секвенирования ДНК СО РАН, г.Новосибирск.Purification of the PCR product was carried out using GFX columns (Amersham Biosciences, USA). The nucleotide sequences were determined at the DNA Sequencing Center SB RAS, Novosibirsk.

Пример 2. Идентификация на основании фенотипических (культуральных и антигенных) свойств.Example 2. Identification based on phenotypic (cultural and antigenic) properties.

Культивирование анаплазм.The cultivation of anaplasmas.

Монослой культуры клеток Vero во флаконе заражают 10% суспензией, которая была получена из селезенки коровы с клиническими проявлениями анаплазмоза, в дозе 0,5 мл на флакон. Флаконы с зараженными клетками центрифугируют при 8000 об/мин при температуре 22°С в течение 30 минут. После центрифугирования во все флаконы добавляют среду поддержки (Игла MEM с добавлением 1% эмбриональной сыворотки) в объеме 1,5 мл на флакон. Флаконы с зараженными клетками культивируют в углекислотном термостате при температуре 35,6°С в течение 8 суток. После завершения инкубации все флаконы подвергают замораживанию в низкотемпературном холодильнике при температуре -20°С, затем размораживают для разрушения клеток и максимального выхода из них микроорганизмов. Наличие анаплазм, так же как и стерильность культуры клеток, определяют в мазках, окрашенных по методу Романовского-Гимзе.A monolayer of Vero cell culture in a vial is infected with a 10% suspension, which was obtained from a cow spleen with clinical manifestations of anaplasmosis, at a dose of 0.5 ml per vial. Vials with infected cells are centrifuged at 8000 rpm at 22 ° C for 30 minutes. After centrifugation, support medium (MEM needle with 1% fetal serum) in a volume of 1.5 ml per vial is added to all vials. Vials with infected cells are cultured in a carbon dioxide thermostat at a temperature of 35.6 ° C for 8 days. After completion of the incubation, all the bottles are frozen in a low-temperature refrigerator at a temperature of -20 ° C, then thawed to destroy cells and maximize the release of microorganisms from them. The presence of anaplasmas, as well as the sterility of the cell culture, is determined in smears stained according to the Romanovsky-Giemsa method.

Изучение антигенных свойств.The study of antigenic properties.

Получение гипериммунной сыворотки.Getting hyperimmune serum.

В качестве антигена для гипериммунизации используют 8-суточную культуру штамма "Anaplasma speciosus Omsk”, полученную на культуре клеток Vero. Для максимального выхода анаплазм из клеток применяют метод попеременного замораживания (при температуре -20°С в течение 30 минут) и размораживания при комнатной температуре. После оттаивания клеточную взвесь центрифугируют при 3000 g в течение 15 минут. Для дальнейшей работы используют супернатант, который центрифугируют при 6000 g в течение 1 часа. Полученный осадок трижды отмывают стерильным физиологическим раствором, центрифугируя в том же режиме, и доводят до концентрации 1,7×109 микробных тел в 1 мл по ОСМ ГИСК им. Л.А.Тарасевича. Гипериммунизацию проводят на кроликах. Титры антител учитывают на 7, 14, 22 и 30 сутки после введения антигена.An 8-day old Anaplasma speciosus Omsk strain culture obtained from Vero cell culture is used as an antigen for hyperimmunization. To maximize the release of anaplasma from the cells, the method of alternating freezing (at -20 ° C for 30 minutes) and thawing at room temperature After thawing, the cell suspension is centrifuged at 3000 g for 15 minutes. For further work, a supernatant is used, which is centrifuged at 6000 g for 1 hour. The resulting pellet is washed three times with sterile saline rum, centrifuging in the same mode, and adjusted to a concentration of 1,7 × 10 September microbial bodies in 1 ml of OSM GISCO them. L.A.Tarasevicha. hyperimmunization carried out on rabbits. Antibody titers are recorded on days 7, 14, 22 and 30 day after the introduction of antigen.

Получение корпускулярного антигена.Getting corpuscular antigen.

После завершения культивирования в течение 8 суток зараженную штаммом "Anaplasma speciosus Omsk” культуру клеток Vero замораживают и размораживают, как описано ранее. Материал центрифугируют 15 минут при 3000 оборотах в минуту. Супернатант доводят до концентрации 1 млрд микробных тел в 1 мл, инактивируют в водяной бане 30 минут при температуре 70°С и используют для нанесения в качестве корпускулярного антигена на стекла. Полученный корпускулярный антиген применяют в реакции непрямой иммунофлюоресценции и других серологических реакциях для выявления антител к анаплазмам данного генотипа.After cultivation for 8 days, the Vero cell culture infected with the Anaplasma speciosus Omsk strain was frozen and thawed as described previously. The material was centrifuged for 15 minutes at 3000 rpm. The supernatant was adjusted to a concentration of 1 billion microbial bodies in 1 ml, inactivated in water the bath for 30 minutes at a temperature of 70 ° C and is used for applying as a particle antigen on glass.The resulting particle antigen is used in indirect immunofluorescence reactions and other serological reactions to detect anti bodies to anaplasmas of this genotype.

Таким образом, на основании приведенных выше примеров показана возможность применения штамма “Anaplasma speciosus Omsk" для идентификации анаплазм на основании генотипических (пример № 1) и фенотипических (пример № 2) признаков и получения диагностических препаратов.Thus, on the basis of the above examples, the possibility of using the strain “Anaplasma speciosus Omsk" for the identification of anaplasmas based on genotypic (example No. 1) and phenotypic (example No. 2) characters and the production of diagnostic drugs is shown.

Claims (1)

Штамм "Anaplasma speciosus Omsk" нового генотипа рода Anaplasma (коллекция Всероссийского музея риккетсиозных культур ГУ НИИЭМ им. Н.Ф.Гамалеи РАМН, регистрационный №138), используемый для идентификации анаплазм и получения диагностических препаратов. The strain "Anaplasma speciosus Omsk" of the new genotype of the genus Anaplasma (collection of the All-Russian Museum of Rickettsial Cultures of the NIIEM Gamalei RAMS RAMS, registration No. 138) used to identify anaplasmas and obtain diagnostic drugs.
RU2008135545/13A 2008-09-01 2008-09-01 Anaplasma speciosus omsk strain of new genotype used for identifying anaplasma and making diagnostic preparations RU2393211C2 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2008135545/13A RU2393211C2 (en) 2008-09-01 2008-09-01 Anaplasma speciosus omsk strain of new genotype used for identifying anaplasma and making diagnostic preparations

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2008135545/13A RU2393211C2 (en) 2008-09-01 2008-09-01 Anaplasma speciosus omsk strain of new genotype used for identifying anaplasma and making diagnostic preparations

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2008135545A RU2008135545A (en) 2010-03-10
RU2393211C2 true RU2393211C2 (en) 2010-06-27

Family

ID=42134821

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2008135545/13A RU2393211C2 (en) 2008-09-01 2008-09-01 Anaplasma speciosus omsk strain of new genotype used for identifying anaplasma and making diagnostic preparations

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2393211C2 (en)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2603254C2 (en) * 2015-09-11 2016-11-27 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Центр экспериментальной эмбриологии и репродуктивных биотехнологий" (ФГБНУ ЦЭЭРБ) SYNTHETIC OLIGODEOXYRIBONUCLEOTIDES FOR DETECTION OF msp1α RICKETTSIA Anaplasma marginale GENE BY "REAL TIME" POLYMERASE CHAIN REACTION
RU2817567C1 (en) * 2023-07-07 2024-04-16 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Федеральный научный центр - Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии имени К.И. Скрябина и Я.Р. Коваленко Российской академии наук" (ФГБНУ ФНЦ ВИЭВ РАН) Strain anaplasma ovis lestoquard, 1924, kadom_1, used for production of means diagnostic and specific prevention of anaplasmosis in sheep and goats

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ЗАБЛОЦКИЙ В.Т., КАЗАКОВ Н.А. Вакцинопрофилактика анаплазмоза овец. Труды ВИЭВ. - М.: 2003, Т.73, С.134-139. *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2603254C2 (en) * 2015-09-11 2016-11-27 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Центр экспериментальной эмбриологии и репродуктивных биотехнологий" (ФГБНУ ЦЭЭРБ) SYNTHETIC OLIGODEOXYRIBONUCLEOTIDES FOR DETECTION OF msp1α RICKETTSIA Anaplasma marginale GENE BY "REAL TIME" POLYMERASE CHAIN REACTION
RU2817567C1 (en) * 2023-07-07 2024-04-16 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Федеральный научный центр - Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии имени К.И. Скрябина и Я.Р. Коваленко Российской академии наук" (ФГБНУ ФНЦ ВИЭВ РАН) Strain anaplasma ovis lestoquard, 1924, kadom_1, used for production of means diagnostic and specific prevention of anaplasmosis in sheep and goats

Also Published As

Publication number Publication date
RU2008135545A (en) 2010-03-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Alipour et al. Evaluation of different methods to detect methicillin resistance in Staphylococcus aureus (MRSA)
Mori et al. Critical aspects for detection of Coxiella burnetii
Pennisi et al. Molecular detection of Bartonella henselae and Bartonella clarridgeiae in clinical samples of pet cats from Southern Italy
RU2422535C1 (en) METHOD FOR Yersinia pestis Yersinia pseudotuberculosis STRAIN IDENTIFICATION
Grudlewska-Buda et al. Comparison of the intensity of biofilm formation by Listeria monocytogenes using classical culture-based method and digital droplet PCR
Boden et al. First isolation of Coxiella burnetii from clinical material by cell-free medium (ACCM2)
JP2020072679A (en) Method of detecting microorganism in sample by fluorescence based detection method
CN110564880A (en) Method for detecting live attenuated Brucella vaccine strain and wild strain and application
Gupta et al. Single-step PCR for detection of Brucella melitensis from tissue and blood of goats
Wang et al. Development and application of specific polymerase chain reaction assay targeting the gyrB gene for rapid detection of Riemerella anatipestifer
Tamás et al. Comparison of conventional and molecular diagnostic techniques for detection of Blastocystis sp. in pig faeces
RU2393211C2 (en) Anaplasma speciosus omsk strain of new genotype used for identifying anaplasma and making diagnostic preparations
RU2551208C1 (en) SET OF OLIGONUCLEOTIDE PRIMERS AND FLUORESCENTLY LABELLED PROBE FOR IDENTIFICATION OF Burkholderia mallei AND ITS DIFFERENTIATION FROM Burkholderia pseudomallei
Vishovan et al. Biofilm formation and antibiotic resistance in Staphylococcus isolated from different objects
Ahmadi et al. Comparison of polymerase chain reaction (PCR) and conventional cultivation methods for detection of carriers of Salmonella spp. in cattle and buffalo
Asgharzade et al. Detection of Mycoplasma gallisepticum in experimentally infected broiler chickens using culture, SPA, ELISA, and PCR methods
RU2354691C1 (en) Strain of rickettsiaceae "candidatus rickettsia tarasevichiae''-candidate to new species used for rickettsiaceae identification and obtaining diagnostic preparations
KR20160075943A (en) Primer for diagnosis of virus that cause diseases of allomyrina dichotoma and method for diagnosis using the same
RU2560422C2 (en) Means of obtaining preparations for diagnosing rickettsiosis caused by rickettsia slovaca
RU2616287C1 (en) Agent for producing preparations for diagnostics of typhus caused by rickettsia raoultii with genotype dns28
Fawzy et al. Improvement of sensitivity for Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP) detection in bovine fecal samples by specific duplex F 57/IC real-time and conventional IS 900 PCRs after solid culture enrichment
Çağatay FTA® card tool for sampling and rapid diagnosis of bacterial diseases from rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) tissue
Abdoli et al. Molecular detection and identification of Rickettsia spp. in collected ticks from domestic animals in Southeastern of Iran
Kour et al. Genotypic and phenotypic correlation of antimicrobial resistance in bacterial isolates from mastitic milk
RU2795987C1 (en) Set of oligonucleotide primers and fluorescently labeled probes and a method for detecting brucellosis pathogen dna

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20120902

NF4A Reinstatement of patent

Effective date: 20140120