RU2380706C2 - Differential diagnostic technique for cataract caused by age-associated metabolic disorders, and for cataract caused by crystalline lens changes induced by metabolic interference, and choice of modality - Google Patents
Differential diagnostic technique for cataract caused by age-associated metabolic disorders, and for cataract caused by crystalline lens changes induced by metabolic interference, and choice of modality Download PDFInfo
- Publication number
- RU2380706C2 RU2380706C2 RU2008148855/15A RU2008148855A RU2380706C2 RU 2380706 C2 RU2380706 C2 RU 2380706C2 RU 2008148855/15 A RU2008148855/15 A RU 2008148855/15A RU 2008148855 A RU2008148855 A RU 2008148855A RU 2380706 C2 RU2380706 C2 RU 2380706C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cataract
- age
- metabolic disorders
- lens
- fragments
- Prior art date
Links
Landscapes
- Prostheses (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области медицины, а именно к офтальмологии. Предлагаемое изобретение на основании использования методик, относящихся к нанотехнологиям, может быть использовано при диагностике вида катаракты, предоперационной подготовке больных с осложненной катарактой, прогнозировании послеоперационных осложнений и зрительных функции после оперативного вмешательства.The invention relates to medicine, namely to ophthalmology. The present invention based on the use of techniques related to nanotechnology, can be used in the diagnosis of cataract type, preoperative preparation of patients with complicated cataract, prediction of postoperative complications and visual function after surgery.
В концепцию «метаболического синдрома» в офтальмологии можно включить весь комплекс (кластер) взаимосвязанных метаболических нарушений, предрасполагающих к развитию витреоретинальных осложнений сахарного диабета 2 типа и ишемической болезни сердца (ИБС). Кроме того, к данному комплексу относятся все механизмы пролиферации как компенсации повреждения сосудистого тракта, стекловидного тела, сетчатки, зрительного нерва вне зависимости от причины. Установлено, что наличие метаболического синдрома сопровождается повышением риска развития сосудистых осложнений в 3 раза.In the concept of “metabolic syndrome” in ophthalmology, one can include the entire complex (cluster) of interrelated metabolic disorders predisposing to the development of vitreoretinal complications of type 2 diabetes and coronary heart disease (CHD). In addition, this complex includes all proliferation mechanisms as compensation for damage to the vascular tract, vitreous body, retina, optic nerve, regardless of the cause. It was established that the presence of metabolic syndrome is accompanied by an increase in the risk of developing vascular complications by 3 times.
Исследования факторов, значимых для прогноза результата хирургического лечения при экстракции катаракты и исхода пролиферативной ретинопатии различного генеза, продвигались от изучения отдельных клинических параметров (Х.П.Тахчиди, Л.И.Балашевич, Т.М.Джусоев, А.Р.Кнежевич, И.В.Хижняк, Я.В.Байбородов, Н.В.Мацко, Р.Р.Валеева) до сложных гистохимических исследований стекловидного тела, в частности гликозаминогликанов в эксперименте (И.П.Хорошилова-Маслова, Д.О.Шкворченко, Л.Д.Андреева, И.Х.Шерафетдинов, И.А.Маклакова), и иммунологических исследований (О.С.Слепова, Л.Е.Теплинская, Т.А.Новикова-Билак, В.Евсегнеева, С.А.Марных).Studies of factors that are significant for predicting the outcome of surgical treatment for cataract extraction and the outcome of proliferative retinopathy of various genesis have progressed from the study of individual clinical parameters (H.P. Takhchidi, L.I. Balashevich, T.M. Dzhusoev, A.R. Knezhevich, I.V. Khizhnyak, Ya.V. Baiborodov, N.V. Matsko, R.R. Valeeva) before complex histochemical studies of the vitreous body, in particular glycosaminoglycans in the experiment (I.P. Khoroshilova-Maslova, D.O. Shkvorchenko , L.D. Andreeva, I.Kh.Sherafetdinov, I.A. Maklakova), and immunological studies vany (O.S.Slepova, L.E.Teplinskaya, T.A.Novikova-Bilak, V.Evsegneeva, S.A.Marnyh).
Подводя итог поискам решения актуальной научной проблемы катаракты, пролиферативной витреоретинопатии (ПВР), необходимо отметить отсутствие единого подхода к патогенетическим механизмам их развития, показаниям к хирургическому лечению, самой технике и медикаментозному сопровождению выбранного инвазивного метода воздействия.Summing up the search for a solution to the urgent scientific problem of cataracts, proliferative vitreoretinopathy (PVR), it is necessary to note the lack of a unified approach to the pathogenetic mechanisms of their development, indications for surgical treatment, the technique itself and the medical support of the chosen invasive method of exposure.
Известны результаты научного исследования на тему «Протеомика в офтальмологии» (Г.Р.Каламкаров. Материалы научно-практической конференции «Нанотехнологии в диагностике и лечении патологии органа зрения» 23-24 апреля 2008 года; В.В.Нероев, Р.А.Гундорова, Е.Н.Вериго. Нанотехнологии в диагностике и лечении патологии органа зрения. Российский офтальмологический журнал, 2008; 1:56-59), которые решают близкую по сути задачу. В этих работах также использовались протеомные исследования, а именно масс-спектрометрия. Однако в офтальмологии это касалось только белкового профиля тканей глаза, слезы и внутриглазных жидкостей при друзах сетчатки - «сухой» и «влажной» формах инволюционной макулодистрофии. Г.Р.Каламкаров исследовал протеом сетчатки при ее дистрофии и получил данные, указывающие на прямое участие процессов окислительного стресса и процессов шаперонного взаимодействия белков на развитие данной патологии. При этом недостатком данного способа является тот факт, что не было сделано попыток определить белки-маркеры в слезе участвующих в локальных изменениях метаболизма при осложненных (катаракта, обусловленная изменениями хрусталика в ответ на фоновые расстройства метаболизма) и возрастных катарактах в сравнении с содержанием маркеров слезы здоровых лиц. Значит, не было выделения измененных структурно белков до масс-спектрометрии, что не обеспечивало точность диагностики.The results of a scientific study on the topic “Proteomics in Ophthalmology” (GR Kalamkarov. Materials of the scientific-practical conference “Nanotechnologies in the diagnosis and treatment of pathology of the organ of vision” on April 23-24, 2008; V.V. Neroev, R.A. Gundorova, E.N. Verigo, Nanotechnology in the Diagnosis and Treatment of Pathology of the Organ of Vision, Russian Ophthalmological Journal, 2008; 1: 56-59), which solve an essentially close problem. These studies also used proteomic studies, namely mass spectrometry. However, in ophthalmology, this concerned only the protein profile of the eye tissues, tears, and intraocular fluids with druse of the retina — “dry” and “wet” forms of involutional macular degeneration. G.R.Kalamkarov studied the retinal proteome during its degeneration and obtained data indicating the direct participation of oxidative stress processes and the processes of chaperone interaction of proteins in the development of this pathology. At the same time, the disadvantage of this method is the fact that no attempts were made to identify marker proteins in the tear involved in local metabolic changes in complicated (cataract due to changes in the lens in response to background metabolic disorders) and age-related cataracts in comparison with the content of healthy tear markers persons. This means that there was no isolation of structurally altered proteins prior to mass spectrometry, which did not ensure the accuracy of diagnosis.
Наш способ документирует наличие активного пероксиредоксина VI как маркера геронтологических сдвигов при возрастной катаракте, у здоровых лиц данный белок (16 кДа) не был идентифицирован.Our method documents the presence of active peroxyredoxin VI as a marker of gerontological changes in age-related cataracts; in healthy individuals, this protein (16 kDa) was not identified.
Что же касается факта, что регуляторные белки (РБ) излишне стимулируют процессы в патологически измененных тканях путем усиления пролиферации и миграции соединительно-тканных элементов, то на сегодняшний день на передний план в офтальмологии выходят ингибиторы пролиферации, а не стимуляторы, что связано с высоким риском развития исхода ПВР - тракционной отслойки сетчатки. Второй эффект РБ - усиление миграции соединительно-тканных элементов, в основном связан с рубцовым процессом роговицы глаза при травмах, исходом воспалительных заболеваний роговицы. Стимуляция миграции соединительно-тканных элементов способствует развитию вторичной глаукомы. Остальные механизмы действия РБ показаны только в эксперименте на животных (М.С.Краснов).As regards the fact that regulatory proteins (RBs) unnecessarily stimulate processes in pathologically altered tissues by enhancing the proliferation and migration of connective tissue elements, today proliferation inhibitors rather than stimulants come to the fore in ophthalmology, which is associated with a high risk the development of the outcome of PVR - traction retinal detachment. The second effect of RB is an increase in the migration of connective tissue elements, mainly associated with the cicatricial process of the cornea of the eye with injuries, the outcome of inflammatory diseases of the cornea. Stimulation of migration of connective tissue elements contributes to the development of secondary glaucoma. The remaining mechanisms of action of RB are shown only in an experiment on animals (M.S.Krasnov).
Аналогом предлагаемого способа является изучение иммунологической реактивности и состояния процессов перекисного окисления липидов в случаях предоперационной подготовки и последующей реабилитации пациентов с осложненной катарактой. В известном способе у пациентов с осложненной катарактой определяли показатели иммунного статуса организма (определение содержания Т-лимфоцитов и их субстанций, В-лимфоцитов, иммуноглобулинов А, М, G), исследовали показатели перекисного окисления липидов (ПОЛ) - малонового диальдегида крови и слезы. Исследовали содержание сульфгидрильных групп крови у больных осложненной катарактой (С.Я.Щербаков, М.А.Щепетнева, Л.А.Филина. Анализ эффективности применения предоперационной подготовки при экстракции осложненной катаракты. Сборник научных трудов, посвященный 110-летию Воронежской областной клинической офтальмологической больницы. Воронеж: изд-во им. Е.А.Болховитинова. - 2008. - С.187-190). Использование данного способа предполагает анализ состояния иммунного статуса и перекисного окисления липидов одновременно. Т.е. при осложненной катаракте нужно диагностировать Т-лимфопению, снижение Т-супрессоров и В-лимфоцитов, увеличение иммуноглобулинов А и G и снижение IgM, а параллельно определять повышенное содержание сульфгидрильных групп слезы и крови по сравнению с физиологической нормой. Следовательно, больному с осложненной катарактой следует выполнить трудоемкое, дорогостоящее обследование и получить пределы колебания физиологических величин при сравнении не с показателями данного больного до развития осложненной катаракты, а со значениями физиологической нормы. При этом известно, что данные иммунологического статуса и ПОЛ не могут иметь физиологической нормы, нормой для этих показателей являются пределы колебаний физиологических величин (Земсков A.M., Земсков В.М. Справочник оперативной информации по клинической иммунологии и аллергологии. - Воронеж, 1993. - С.35-45; Земсков A.M., Соколов М.И., Земсков В.М. Основы общей микробиологии, вирусологии и иммунологии. - М., 1972. - 18 с.). Кроме того, нет параллелизма изменений показателей перекисного окисления липидов и данных иммунологического обследования у больных осложненной катарактой. Нет и точных количественных значений показателей крови и слезы в данной группе пациентов, которые могут быть маркерами осложненной катаракты.An analogue of the proposed method is the study of immunological reactivity and the state of lipid peroxidation in cases of preoperative preparation and subsequent rehabilitation of patients with complicated cataracts. In the known method, in patients with complicated cataracts, indicators of the body's immune status (determination of the content of T-lymphocytes and their substances, B-lymphocytes, immunoglobulins A, M, G) were determined, lipid peroxidation (LPO) - malondialdehyde blood count and tears were studied. We studied the content of sulfhydryl blood groups in patients with complicated cataracts (S. Ya. Scherbakov, M. A. Shchepetneva, L. A. Filina. Analysis of the effectiveness of the use of preoperative preparation for the extraction of complicated cataract. A collection of scientific papers dedicated to the 110th anniversary of the Voronezh Regional Clinical Ophthalmic hospitals, Voronezh: publishing house named after E.A. Bolkhovitinov. - 2008. - P.187-190). Using this method involves the analysis of the state of the immune status and lipid peroxidation at the same time. Those. with complicated cataracts, it is necessary to diagnose T-lymphopenia, a decrease in T-suppressors and B-lymphocytes, an increase in immunoglobulins A and G and a decrease in IgM, and in parallel to determine the increased content of sulfhydryl groups of the tear and blood compared to the physiological norm. Therefore, a patient with complicated cataract should perform a laborious, expensive examination and obtain the limits of fluctuation of physiological values when comparing not with the indicators of this patient before the development of complicated cataract, but with the values of the physiological norm. Moreover, it is known that the data of immunological status and lipid peroxidation cannot have a physiological norm, the norm for these indicators is the range of fluctuations of physiological values (Zemskov AM, Zemskov V.M. Directory of operational information on clinical immunology and allergology. - Voronezh, 1993. - C .35-45; Zemskov AM, Sokolov MI, Zemskov VM Fundamentals of General Microbiology, Virology and Immunology. - M., 1972. - 18 p.). In addition, there is no parallelism of changes in lipid peroxidation indices and immunological examination data in patients with complicated cataracts. There are no exact quantitative values of blood and tears in this group of patients, which may be markers of complicated cataracts.
Достигаемый в предлагаемом способе технический результат заключается в следующем:Achieved in the proposed method, the technical result is as follows:
- верификация диагноза больного осложненной катарактой.- verification of the diagnosis of a patient with complicated cataract.
Традиционно при дифференциальной диагностике катаракты, обусловленной возрастными изменениями хрусталика (возрастная катаракта), и катаракты, обусловленной изменениями хрусталика в ответ на фоновые расстройства метаболизма (осложненная катаракта), врач-офтальмолог ориентируется на морфологические признаки при проведении биомикроскопии: и при катаракте, обусловленной возрастными метаболическими нарушениями, и при катаракте, обусловленной изменениями хрусталика в ответ на фоновые расстройства метаболизма, определяются неинтенсивные сероватые помутнения в области отдельных структур хрусталика при сохраненном тусклом рефлексе с глазного дна. Наоборот, при наличии зрелой возрастной и полной осложненной катаракты дифференциальная диагностика еще более затруднена из-за выраженности помутнения хрусталика и невозможности исследовать его с помощью техники «скользящего» луча при биомикроскопии.Traditionally, in the differential diagnosis of cataracts due to age-related changes in the lens (age-related cataract) and cataracts due to changes in the lens in response to background metabolic disorders (complicated cataracts), an ophthalmologist focuses on morphological signs during biomicroscopy: and in cataracts caused by age-related metabolic disturbances, and with cataracts due to changes in the lens in response to background metabolic disorders, non-intensive grayish opacities in the area of individual structures of the crystalline lens with a preserved dim reflex from the fundus. On the contrary, in the presence of mature age-related and complete complicated cataracts, differential diagnosis is even more difficult due to the severity of the clouding of the lens and the inability to examine it using the “sliding” beam technique in biomicroscopy.
Таким образом, опасность таких изменений хрусталика заключается в том, что пропускается не только общесоматическая патология, но и не прогнозируется возможность развития интраоперационных и послеоперационный осложнений. Имеются несоответствие морфологического вида катаракты и ее клинической формы (при чашеобразной форме заднекапсулярной катаракты возможен вариант возрастных изменений хрусталика, и, наоборот, при явных признаках возрастной катаракты уже интраоперационно выявляется фиброз задней капсулы и меняется тактика операционного ведения пациента).Thus, the danger of such changes in the lens lies in the fact that not only somatic pathology is missed, but the possibility of developing intraoperative and postoperative complications is not predicted. There is a mismatch between the morphological type of cataract and its clinical form (with a cup-shaped form of posterior capsular cataract, a variant of age-related changes in the lens is possible, and, conversely, with obvious signs of age-related cataract, fibrosis of the posterior capsule is already intraoperatively detected and the tactics of surgical management of the patient are changing).
Учитывая вышеизложенное, представляется целесообразным поиск маркеров возрастной катаракты. Определение увеличения активности пероксиредоксина VI и/или фрагментов его распада в послеоперационном периоде (по сравнению с дооперационным периодом) именно при возрастной катаракте можно считать таким маркером геронтологических изменений хрусталика. При осложненных катарактах весь спектр местных метаболических нарушений является следствием фоновых расстройств и изменяет локальные эндогенные механизмы регуляции, при этом отмечается отсутствие или снижение активности пероксиредоксина VI и/или фрагментов его распада (в послеоперационном периоде по сравнению с дооперационным периодом).Given the foregoing, it seems appropriate to search for markers of age-related cataracts. The determination of an increase in the activity of peroxyredoxin VI and / or fragments of its decay in the postoperative period (compared with the preoperative period) precisely with age-related cataract can be considered such a marker of gerontological changes in the lens. In complicated cataracts, the entire spectrum of local metabolic disorders is a consequence of background disorders and changes local endogenous regulation mechanisms, while there is a lack or decrease in the activity of peroxyredoxin VI and / or fragments of its decay (in the postoperative period compared with the preoperative period).
- прогнозирование остроты зрения в послеоперационный период.- prediction of visual acuity in the postoperative period.
Были исследованы 2 группы больных: 1 группа пациентов - больные с возрастными изменениями хрусталика (выполнялось оперативное вмешательство - экстракапсулярной экстракции катаракты (ЭЭК)) - в этой группе отмечалось наличие в дооперационном периоде в слезной жидкости активного пероксиредоксина VI и/или фрагментов его распада (14 кДа) - после операции отмечалось повышение его активности. Этой группе в момент операции не требуется проведение заднего капсулорексиса, а после удаления хрусталика в 98% случаев прогнозируемая острота зрения 0,9. Так как возрастная катаракта - это возрастные изменения хрусталика без общих расстройств метаболизма, послеоперационное лечение не требуется (имеется в виду, что этой группе не следует назначать лекарственные препараты, направленные на улучшение метаболических процессов сетчатки и зрительного нерва).We studied 2 groups of patients: 1 group of patients - patients with age-related changes of the lens (surgery was performed - extracapsular cataract extraction (ECE)) - in this group, the presence of active peroxyredoxin VI and / or fragments of its decay in the preoperative period (14 kDa) - after the operation, an increase in its activity was noted. This group does not require posterior capsulorhexis at the time of surgery, and after removal of the lens in 98% of cases, the predicted visual acuity is 0.9. Since age-related cataracts are age-related changes in the lens without common metabolic disorders, postoperative treatment is not required (meaning that this group should not prescribe medications aimed at improving the metabolic processes of the retina and optic nerve).
2 группа - больные осложненной катарактой (операция факоэмульсификации катаракты (ФЭК)) - отсутствие активного пероксиредоксина VI и/или фрагментов его распада в слезной жидкости в дооперационном периоде. Больные этой группы подвергались интраоперационной коррекции - выполнение заднего капсулорексиса в процессе операции. Прогнозируемая острота зрения 0,6-0,7. В послеоперационном периоде у этой группы применяли патогенетическую терапию фоновых расстройств метаболизма.Group 2 - patients with complicated cataracts (cataract phacoemulsification operation (FEC)) - the absence of active peroxyredoxin VI and / or fragments of its decay in the lacrimal fluid in the preoperative period. Patients of this group underwent intraoperative correction - performing posterior capsulorexis during the operation. The predicted visual acuity is 0.6-0.7. In the postoperative period, pathogenetic therapy of background metabolic disorders was used in this group.
Кроме того, осуществление диагностики по предлагаемой методике позволяет исключить необходимость проведения дополнительных тестов на фоновые заболевания: катаракта в этих случаях - геронтологическая проблема.In addition, the diagnosis by the proposed method eliminates the need for additional tests for background diseases: cataract in these cases is a gerontological problem.
Исследуемый пероксиредоксин определялся в слезной жидкости у больных катарактой, обусловленной возрастными изменениями хрусталика, и катарактой, обусловленной изменениями хрусталика в ответ на фоновые расстройства метаболизма.The studied peroxyredoxin was determined in the tear fluid in patients with cataracts due to age-related changes in the lens and cataracts due to changes in the lens in response to background metabolic disorders.
В слезе больных катарактой, обусловленной изменениями хрусталика на фоне общих метаболических расстройств (сахарный диабет, сосудистые нарушения, эндокринные болезни), активный пероксиредоксин VI и/или фрагменты его распада отсутствовали. При наличии катаракты, обусловленной изменениями хрусталика в ответ на фоновые расстройства метаболизма, у пациентов в возрасте от 30 до 50 лет или незрелых возрастных катаракт у пациентов в возрасте до 60 лет с помутнением, не распространяющимся на другие слои хрусталика, но локализованном по всей задней поверхности хрусталика, или локализацией нежных точечных сероватых помутнений под задней капсулой хрусталика, чередующихся с субкапсулярными мелкими вакуолями, не наблюдается присутствие маркера - активного пероксиредоксина VI и/или фрагментов его распада. Вклад пероксиредоксина VI в нейтрализацию активных форм кислорода составляет 70-80%. Следовательно, следует в послеоперационный период у этой группы пациентов продолжать применять лекарственные средства для воздействия на локальный метаболизм в тканях глаза. Если нет сопутствующего катаракте, обусловленной изменениями хрусталика в ответ на фоновые расстройства метаболизма (осложненной катаракте), диагноза - проводить дополнительное обследование (исключать сахарный диабет, сосудистые нарушения, эндокринные болезни), при этом показано продолжение применения препаратов, содержащих неорганические соли, необходимые для нормализации электролитного обмена, коррекции метаболических нарушений в тканях глаза.In the tear of cataract patients due to changes in the lens on the background of general metabolic disorders (diabetes mellitus, vascular disorders, endocrine diseases), active peroxyredoxin VI and / or fragments of its decay were absent. In the presence of cataract due to changes in the lens in response to background metabolic disorders, in patients aged 30 to 50 years or immature age-related cataracts in patients under 60 years of age with clouding not spreading to other layers of the lens, but localized along the entire back surface crystalline lens, or localization of gentle point grayish opacities under the posterior lens capsule, alternating with subcapsular small vacuoles, the presence of a marker, active peroxyredoxin VI and / or fragment, is not observed cops of his collapse. The contribution of peroxyredoxin VI to the neutralization of reactive oxygen species is 70-80%. Therefore, in the postoperative period, this group of patients should continue to use drugs to affect local metabolism in the tissues of the eye. If there is no concomitant cataract due to changes in the lens in response to background metabolic disorders (complicated cataracts), the diagnosis should be additionally examined (exclude diabetes mellitus, vascular disorders, endocrine diseases), while continued use of preparations containing inorganic salts necessary for normalization is indicated electrolyte metabolism, correction of metabolic disorders in the tissues of the eye.
При наличии катаракты, обусловленной возрастными изменениями хрусталика, и интенсивных серых помутнений во всех слоях хрусталика у пациентов в возрасте старше 60 лет при низком уровне локальных метаболических нарушений - определение активности пероксиредоксина VI и/или фрагментов его распада является определяющим для благоприятного прогнозирования зрительного исхода операции. Возможность развития и усугубления метаболических расстройств в послеоперационный период можно прогнозировать до операции по отсутствию пероксиредоксина VI и/или фрагментов его распада в слезной жидкости при катаракте, обусловленной изменениями хрусталика в ответ на фоновые расстройства метаболизма.In the presence of cataract due to age-related changes in the lens and intense gray opacities in all layers of the lens in patients over 60 years of age with a low level of local metabolic disorders, the determination of peroxyredoxin VI activity and / or fragments of its decay is crucial for a favorable prediction of the visual outcome of the operation. The possibility of the development and aggravation of metabolic disorders in the postoperative period can be predicted before surgery for the absence of peroxyredoxin VI and / or fragments of its breakdown in the lacrimal fluid during cataracts due to changes in the lens in response to background metabolic disorders.
Предлагаемый способ осуществляется следующим образом.The proposed method is as follows.
Забор слезной жидкости осуществляется с помощью канюли, которая помещается в нижний свод конъюнктивального мешка. Слезная жидкость замораживается сразу после взятия при 20°С и хранится без повторного размораживания не более 14 дней. Исследование белкового состава слезы: был проведен PAAG электрофорез в присутствии SDS образцов слезы до и после лечения, среднюю концентрацию белка в пробах определяют спектрофотометрически с использованием спектрофотометра Nano-Drop 1000, Western - блот, для дальнейшего иммуноферментного анализа присутствия пептидов, белков и фрагментов белков в биологических жидкостях глаза. Мажорные белки слезы анализируют методом MALDI-TOF - триптический гидролиз белка в полиакриламидном геле, надгелевый раствор используют для получения MALDI-масс-спектров. Подготовку образцов для масс-спектрометрии проводят смешиванием на мишени раствора образца и раствора 2,5-дигидроксибензойной кислоты, масс-спектры получают на MALDI-времяпролетном масс-спектрометре Ultraflex II BRUKER (Германия), оснащенном УФ-лазером (Nd) в режиме положительных ионов с использованием рефлектрона. Идентификацию белков осуществляют при помощи программы Mascot (www.matrixscience.com). Поиск проводится в базе данных NCBI среди белков всех организмов с указанной точностью с учетом возможного окисления метионинов кислородом воздуха и возможной модификации цистеинов акриламидом.The tear fluid is taken using a cannula, which is placed in the lower arch of the conjunctival sac. The tear fluid is frozen immediately after taking at 20 ° C and stored without repeated thawing for no more than 14 days. Study of the protein composition of the tear: PAAG electrophoresis was performed in the presence of SDS tear samples before and after treatment, the average protein concentration in the samples was determined spectrophotometrically using a Nano-Drop 1000 spectrophotometer, Western blot, for further enzyme-linked immunosorbent analysis of the presence of peptides, proteins and protein fragments in body fluids of the eye. Major tear proteins are analyzed by the MALDI-TOF method - tryptic hydrolysis of a protein in a polyacrylamide gel, a supra gel solution is used to obtain MALDI mass spectra. Sample preparation for mass spectrometry is carried out by mixing on the target a sample solution and a solution of 2,5-dihydroxybenzoic acid, mass spectra are obtained on a MALDI time-of-flight mass spectrometer Ultraflex II BRUKER (Germany) equipped with a UV laser (Nd) in the mode of positive ions using a reflectron. Protein identification is performed using the Mascot program (www.matrixscience.com). The search is carried out in the NCBI database among the proteins of all organisms with the indicated accuracy, taking into account the possible oxidation of methionines with atmospheric oxygen and the possible modification of cysteines with acrylamide.
Диагностику комплекса этиологических факторов, приводящих к развитию метаболических нарушений, осуществляют на основании выявления изменения белкового состава слезы, до и после оперативного лечения - факоэмульсификации катаракты, экстракапсулярной экстракции катаракты, витреоретинальных операций.Diagnosis of a complex of etiological factors leading to the development of metabolic disorders is carried out on the basis of detecting changes in the protein composition of the tear, before and after surgical treatment - phacoemulsification of cataracts, extracapsular cataract extraction, vitreoretinal operations.
В дооперационный период в слезной жидкости определяют присутствие маркера расстройств метаболизма - активного пероксиредоксина VI и/или фрагментов его распада. В случае наличия в слезной жидкости активного пероксиредоксина VI и/или фрагментов его распада диагностируют наличие возрастной катаракты, в послеоперационном периоде не применяют лекарственные препараты, направленные на улучшение метаболических процессов сетчатки и зрительного нерва. При отсутствии в слезной жидкости активного пероксиредоксина VI и/или фрагментов его распада диагностируют наличие катаракты, обусловленной изменениями хрусталика в ответ на фоновые расстройства метаболизма, и во время оперативного вмешательства выполняют задний капсулорексис, а в послеоперационном периоде применяют патогенетическую терапию фоновых расстройств метаболизма.In the preoperative period, the presence of a marker of metabolic disorders, the active peroxyredoxin VI and / or fragments of its breakdown, is determined in the tear fluid. If there is active peroxyredoxin VI and / or fragments of its decay in the tear fluid, the presence of age-related cataract is diagnosed, in the postoperative period, medications aimed at improving the metabolic processes of the retina and optic nerve are not used. If there is no active peroxyredoxin VI and / or fragments of its decay in the tear fluid, the presence of cataract due to changes in the lens in response to background metabolic disorders is diagnosed, and posterior capsulorexis is performed during surgery and pathogenetic therapy of background metabolic disorders is used in the postoperative period.
Клинические примеры.Clinical examples.
Пациент, 78 лет, история болезни ВОКОБ №8746. Клинические данные: острота зрения левого глаза - правильная проекция света, при исследовании щелевой лампой определяется интенсивное серое помутнение во всех слоях хрусталика. Офтальмоскопия в условиях мидриаза - рефлекса с глазного дна нет. Сопутствующие заболевания - ИБС. Исследование слезной жидкости до операции ЭЭК. Определен белковый спектр слезы: активный пероксиредоксин VI, 14 килодальтон (++). Диагноз - зрелая возрастная катаракта левого глаза. Проведена операция - экстракапсулярная экстракция катаракты (ЭЭК) с имплантацией интраокулярной линзы.Patient, 78 years old, case history of VOKOB No. 8746. Clinical data: visual acuity of the left eye - the correct projection of light, when examining a slit lamp, intense gray opacification in all layers of the lens is determined. Ophthalmoscopy in conditions of mydriasis - there is no reflex from the fundus. Concomitant diseases - IHD. Examination of the lacrimal fluid before surgery The protein spectrum of the tears was determined: active peroxyredoxin VI, 14 kilodaltons (++). The diagnosis is mature age-related cataract of the left eye. An operation was performed - extracapsular cataract extraction (EEC) with implantation of an intraocular lens.
Больная после операции ЭЭК (экстракапсулярная экстракция катаракты с имплантацией интраокулярной линзы): острота зрения левого глаза - 0,9 (в течение 2 лет наблюдения после операции острота зрения сохранялась, не требовалось коррекции и терапии). Определен белковый спектр слезы после оперативного вмешательства: пероксиредоксин VI, 14 килодальтон (+++), т.е. отмечается увеличение активности пероксиредоксина VI по сравнению с дооперационным периодом, а значит, подтвердился диагноз возрастной, а не осложненной катаракты, значит, больной нет необходимости рекомендовать в дальнейшем дополнительных обследований у специалистов.The patient after surgery EEC (extracapsular cataract extraction with implantation of an intraocular lens): visual acuity of the left eye - 0.9 (within 2 years of observation after surgery, visual acuity remained, correction and therapy were not required). The protein spectrum of tears after surgery was determined: peroxyredoxin VI, 14 kilodaltons (+++), i.e. there is an increase in the activity of peroxyredoxin VI compared with the preoperative period, which means that the diagnosis of age-related rather than complicated cataracts was confirmed, which means that the patient does not need to recommend further examinations by specialists in the future.
Пациент М., 58 лет, история болезни ВОКОБ №8407. Клинические данные, острота зрения правого глаза - 0,01. Исследование щелевой лампой: помутнение средней интенсивности у заднего полюса хрусталика в его наружных слоях задней коры, помутнение довольно стабильное, помутнение не распространяется на другие слои хрусталика, но локализовано по всей задней поверхности хрусталика и носит характер так называемой туфообразной порозности. Клинические признаки документируют достаточно выраженные метаболические нарушения и в результате развитие интенсивного помутнения всей задней поверхности хрусталика. Сопутствующие заболевания - сахарный диабет, тип 1.Patient M., 58 years old, case history of VOKOB No. 8407. Clinical data, visual acuity of the right eye - 0.01. Slit lamp examination: medium intensity opacification at the posterior pole of the lens in its outer layers of the posterior cortex, opacification is quite stable, opacification does not extend to other layers of the crystalline lens, but is localized along the entire posterior surface of the crystalline lens and is characterized by the so-called tuff-like porosity. Clinical signs document quite pronounced metabolic disorders and, as a result, the development of intense opacification of the entire posterior surface of the lens. Concomitant diseases - diabetes mellitus type 1.
Проведен анализ слезной жидкости больной до операции - ФЭК (факоэмульсификация катаракты): активный пероксиредоксин - VI, 14 килодальтон, отсутствует.The analysis of the patient’s lacrimal fluid before the operation - FEK (cataract phacoemulsification): active peroxyredoxin VI, 14 kilodaltons, absent.
Диагноз - катаракта, обусловленная изменениями хрусталика в ответ на фоновые расстройства метаболизма, диабетическая ретинопатия.The diagnosis is cataract due to changes in the lens in response to background metabolic disorders, diabetic retinopathy.
Метод оперативного вмешательства - факоэмульсификация катаракты с имплантацией интраокулярной линзы.The method of surgical intervention is phacoemulsification of cataracts with implantation of an intraocular lens.
После операции ФЭК: острота зрения правого глаза - 0,6. Получен белковый спектр слезы: пероксиредоксин - VI, 14 килодальтон не определяется.After surgery, FEK: visual acuity of the right eye - 0.6. The protein spectrum of the tear was obtained: peroxyredoxin VI, 14 kilodaltons not detected.
Послеоперационная терапия направлена на улучшение метаболических процессов сетчатки и зрительного нерва: Доксиум 0,1, в капсулах, принимается внутрь 2 раза в день, продолжительность приема 12 дней (общая терапия); Тауфон 4% и Эмоксипин 1% в каплях (местная терапия).Postoperative therapy is aimed at improving the metabolic processes of the retina and optic nerve: Doxyum 0.1, in capsules, taken orally 2 times a day, duration of administration 12 days (general therapy); Taufon 4% and Emoxipine 1% in drops (local therapy).
Таким образом, впервые выделен и идентифицирован представитель подсемейства пероксиредоксинов типа VI - секреторный 14 кДа 1-Cys пероксиредоксин VI в слезной жидкости больных, а не в эксперименте. Впервые определена его значимость при дифференциальной диагностике катаракты, обусловленной возрастными метаболическими нарушениями, и катаракты, обусловленной изменениями хрусталика в ответ на фоновые расстройства метаболизма.Thus, for the first time, a representative of the subfamily of type VI peroxyredoxins, a secretory 14 kDa 1-Cys peroxyredoxin VI in the lacrimal fluid of patients, was isolated and identified, not in the experiment. For the first time, its significance has been determined in the differential diagnosis of cataracts due to age-related metabolic disorders and cataracts due to changes in the lens in response to background metabolic disorders.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2008148855/15A RU2380706C2 (en) | 2008-12-11 | 2008-12-11 | Differential diagnostic technique for cataract caused by age-associated metabolic disorders, and for cataract caused by crystalline lens changes induced by metabolic interference, and choice of modality |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2008148855/15A RU2380706C2 (en) | 2008-12-11 | 2008-12-11 | Differential diagnostic technique for cataract caused by age-associated metabolic disorders, and for cataract caused by crystalline lens changes induced by metabolic interference, and choice of modality |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2008148855A RU2008148855A (en) | 2009-04-10 |
| RU2380706C2 true RU2380706C2 (en) | 2010-01-27 |
Family
ID=41014625
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2008148855/15A RU2380706C2 (en) | 2008-12-11 | 2008-12-11 | Differential diagnostic technique for cataract caused by age-associated metabolic disorders, and for cataract caused by crystalline lens changes induced by metabolic interference, and choice of modality |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2380706C2 (en) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2645971C1 (en) * | 2017-08-04 | 2018-02-28 | Марианна Геннадиевна Комарова | Method of selecting tactics of treatment of age changes in the lens |
| RU2690152C2 (en) * | 2017-09-22 | 2019-05-31 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Воронежский государственный медицинский университет им. Н.Н. Бурденко" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for differential diagnosis of age and complicated cataract |
-
2008
- 2008-12-11 RU RU2008148855/15A patent/RU2380706C2/en not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| KUBO E. et al. Development- and age-associated expression pattern of peroxiredoxin 6 and its regulation in murine ocular lens // Mech Ageing Dev., 2006 Mar; 127(3):249-56 [найдено в БД Pub Med] PMID: 16321424. PAK J.N., et al., Redused expression of 1-cys peroxiredoxin in oxidative stress-induced cataracts // Exp. Eye. Res., 2006 May; 82(5):899-906. Epub 2005 Des 20 [[найдено в БД Pub Med] PMID: 16360653. KUBO E. et al. TAT-mediated PRDX6 protein transduction protects against eye lens epithelial cell death and delays lens opacity // Am. J. Physiol. Cell. Physiol. - 2008, 294: с.842-855 (first published January 9). * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2645971C1 (en) * | 2017-08-04 | 2018-02-28 | Марианна Геннадиевна Комарова | Method of selecting tactics of treatment of age changes in the lens |
| RU2690152C2 (en) * | 2017-09-22 | 2019-05-31 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Воронежский государственный медицинский университет им. Н.Н. Бурденко" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for differential diagnosis of age and complicated cataract |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2008148855A (en) | 2009-04-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Ho et al. | Experience with a subretinal cell-based therapy in patients with geographic atrophy secondary to age-related macular degeneration | |
| Dikopf et al. | Cataract extraction outcomes and the prevalence of zonular insufficiency in retinitis pigmentosa | |
| Jauhari et al. | Comparison of surgically induced astigmatism in various incisions in manual small incision cataract surgery | |
| Trousdale et al. | Vision-related quality of life before and after keratoplasty for Fuchs' endothelial dystrophy | |
| Shaw et al. | Complicated cataract | |
| Norton et al. | Patient characteristics and outcomes of retained lens fragments in the anterior chamber after uneventful phacoemulsification | |
| RU2380706C2 (en) | Differential diagnostic technique for cataract caused by age-associated metabolic disorders, and for cataract caused by crystalline lens changes induced by metabolic interference, and choice of modality | |
| Hayashi et al. | Posterior vitreous detachment after cataract surgery in eyes with high myopia: an optical coherence tomography study | |
| Dube et al. | Correlation between serum lipids and primary open angle glaucoma: A clinical study | |
| Sen et al. | Comparing acromegalic patients to healthy controls with respect to intraocular pressure, central corneal thickness, and optic disc topography findings | |
| Sarhan et al. | Macular thickness analysis following complicated versus uncomplicated cataract surgery using optical coherence tomography | |
| Jusufovic et al. | Simultaneous penetrating keratoplasty, cataract removal and intraocular lens implantation in Tuzla, Bosnia and Herzegovina | |
| İçöz | Evaluation of structural and vascular changes in the choroid after uneventful phacoemulsification surgery | |
| RU2675690C1 (en) | Method for prediction of the risk of development of postoperative inflammation following cataract phacoemulsification | |
| Farouk et al. | Surgical outcomes of complicated cataract with pediatric trematode granulomatous uveitis | |
| Quaranta et al. | Elevated intraocular pressure in patients with acromegaly | |
| RU2617066C1 (en) | Method for determination of indications for intravitreal injection of ciliary neurotrophic factor during treatment of eye visual-nerve apparatus diseases | |
| Eraslan et al. | Comparison of total/active ghrelin levels in primary open angle glaucoma, pseudoexfoliation glaucoma and pseudoexfoliation syndrome | |
| Wiacek et al. | Lipi nski, A.; Machali nska, A. Safety and efficacy of isolated endoscopic cyclophotocoagulation in pseudophakic patients with primary open-angle glaucoma-12-month follow-up | |
| Wahab et al. | Early phacoemulsification in diabetic cataract for early recognition and management of diabetic macular oedema | |
| Alzuhairy | A case report on cataract surgery in eyes with bilateral inferior iridoschisis | |
| RU2681935C1 (en) | Estimation method of the efficacy of neuroretino protection of primary open-angle glaucoma on the basis of determination of neuron-specific enolase | |
| RU2690152C2 (en) | Method for differential diagnosis of age and complicated cataract | |
| RU2681934C1 (en) | Method of estimating the efficiency of neuroretin protection of primary open-angle glaucoma based on determination of the neurotrophic factor of the brain | |
| AlHilali et al. | Ophthalmic Features of Spinocerebellar Ataxia Type 7: A Case Report |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20111212 |