RU2378365C2 - Method of culturing brewing yeast - Google Patents

Method of culturing brewing yeast Download PDF

Info

Publication number
RU2378365C2
RU2378365C2 RU2007123373/13A RU2007123373A RU2378365C2 RU 2378365 C2 RU2378365 C2 RU 2378365C2 RU 2007123373/13 A RU2007123373/13 A RU 2007123373/13A RU 2007123373 A RU2007123373 A RU 2007123373A RU 2378365 C2 RU2378365 C2 RU 2378365C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
yeast
concentration
culturing
cultivation
cells
Prior art date
Application number
RU2007123373/13A
Other languages
Russian (ru)
Other versions
RU2007123373A (en
Inventor
Виктор Михайлович Емельянов (RU)
Виктор Михайлович Емельянов
Ирина Сильвестровна Владимирова (RU)
Ирина Сильвестровна Владимирова
Original Assignee
Общество с ограниченной ответственностью "Биотехконсалтинг"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Общество с ограниченной ответственностью "Биотехконсалтинг" filed Critical Общество с ограниченной ответственностью "Биотехконсалтинг"
Priority to RU2007123373/13A priority Critical patent/RU2378365C2/en
Publication of RU2007123373A publication Critical patent/RU2007123373A/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2378365C2 publication Critical patent/RU2378365C2/en

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

FIELD: chemistry.
SUBSTANCE: method involves culturing yeast in aerobic conditions on a sterile culture medium with sugar content of 4-6%. The culture medium used is a product of decantation of distillery stillage and wort. Culturing is carried out with injection of sterile wort until content of sugar in the culture medium of 4-6%. When concentration of yeast cells in the culture liquid reaches 700 million cells per milliliter, a nonionic surfactant - proxanol is added in amount of 0.005-0.1 g/l. Aeration and mixture is controlled through with the respiratory coefficient of the yeast. The respiratory coefficient is kept in the phase lag period in the 3.5-10 [gCO2/gO2] range, in the exponential phase period - in the 1.5-2.5 [gCO2/gO2] range, at the last culturing stage - in the 20-35 [gCO2/gO2] range, while holding the culturing liquid for 2-3 hours. Culturing is carried out until concentration of yeast cells on each culturing stage reaches 1500-2000 million cells per milliliter.
EFFECT: yeast with high concentration of cells and with high fermentative activity.
1 tbl, 4 ex

Description

Изобретение относится к спиртовой промышленности, в частности к способу культивирования дрожжей для спиртового производства.The invention relates to the alcohol industry, in particular to a method for cultivating yeast for alcohol production.

Известен способ культивирования микроорганизмов в присутствии проксанола в количестве 0,001-1,000 г/л, предварительно смешанного с дополнительным источником углерода в количестве, пропорциональном увеличению скорости массопередачи кислорода, внесенных в питательную среду в момент начала лимитирования биосинтеза кислородом (патент РФ №1559696, 1993 г. Способ культивирования микроорганизмов.).A known method of cultivating microorganisms in the presence of proxanol in an amount of 0.001-1,000 g / l, pre-mixed with an additional carbon source in an amount proportional to the increase in the rate of mass transfer of oxygen introduced into the nutrient medium at the time of the start of limiting oxygen biosynthesis (RF patent No. 1559696, 1993 A method of cultivating microorganisms.).

Недостатком данного способа является невысокая концентрация дрожжевых клеток.The disadvantage of this method is the low concentration of yeast cells.

Наиболее близким по технической сущности является способ культивирования дрожжей для спиртового производства на питательной среде, в которой культивирование ведут в аэробных условиях на стерильной питательной среде с содержанием сахара 4-6%, в качестве питательной среды используют продукт декантации послеспиртовой барды и сусло или сахарозу до достижения концентрации дрожжевых клеток в культуральной жидкости на каждой ступени культивирования 500-1000 млн/мл, после чего культуральную жидкость последней ступени выдерживают в анаэробных условиях в течение 2-3 часов, в процессе культивирования ведут подпитку стерильным суслом или раствором сахарозы в продукте декантации послеспиртовой барды до содержания сахара в питательной среде 4-6% (патент РФ №2136746, Бюл. №25, 1999 г. Способ культивирования дрожжей для спиртового производства).The closest in technical essence is a method of cultivating yeast for alcohol production on a nutrient medium, in which cultivation is carried out under aerobic conditions on a sterile nutrient medium with a sugar content of 4-6%, the product of decantation of post-alcohol stillage and wort or sucrose is used as a nutrient medium the concentration of yeast cells in the culture fluid at each stage of cultivation is 500-1000 million / ml, after which the culture fluid of the last stage is kept in anaerobic Slovenia for 2-3 hours, in the process of cultivation, they are fed with sterile wort or sucrose solution in the product of decantation of post-alcohol stillage to sugar content in a nutrient medium of 4-6% (RF patent No. 2136746, Bull. No. 25, 1999. Method for culturing yeast for alcohol production).

Недостатком данного способа является невысокая концентрация 500-1000 млн/мл дрожжевых клеток.The disadvantage of this method is the low concentration of 500-1000 million / ml of yeast cells.

Задачей изобретения является создание способа культивирования дрожжей для спиртового производства, позволяющего получить чистую дрожжевую культуру с высокой концентрацией клеток 1500-2000 млн/мл и хорошим качеством.The objective of the invention is to provide a method of culturing yeast for alcohol production, which allows to obtain a pure yeast culture with a high cell concentration of 1500-2000 million / ml and good quality.

Техническая задача в способе культивирования дрожжей для спиртового производства в аэробных условиях на стерильной питательной среде с содержанием сахара 4-6%, в качестве питательной среды используют продукт декантации послеспиртовой барды и сусло, в процессе культивирования дрожжей Saccharomyces cerevisiae p.XII, р. М, смесь р. XII и р. М, Y 717, р. 1976 ведут подпитку стерильным суслом до содержания сахара в питательной среде 4-6%, культивирование дрожжей ведут до достижения заданной концентрации дрожжевых клеток на каждой ступени культивирования, достигается тем, что при культивировании указанных дрожжей в культуральную жидкость при достижении в ней концентрации дрожжевых клеток 700 млн/мл вносят неионогенный ПАВ - проксанол в количестве 0,005-0,01 г/л, осуществляют управление аэрацией и перемешиванием по дыхательному коэффициенту дрожжей, поддерживая его в период лаг-фазы в пределах 3,5-10 [гСO2/гO2], в период экспоненциальной фазы роста - в пределах 1,5 - 2,5 [гСO2/гO2], и на последней ступени культивирования культуральную жидкость выдерживают в течение 2-3 часов, поддерживая значение дыхательного коэффициента в пределах 20-35 [гСO2/гO2], до достижения концентрации дрожжевых клеток в культуральной жидкости на каждой ступени культивирования 1500-2000 млн/мл.The technical problem in the method of cultivating yeast for alcohol production under aerobic conditions on a sterile nutrient medium with a sugar content of 4-6%, the product of decantation of distillery stillage and wort is used as the nutrient medium in the process of cultivating the yeast Saccharomyces cerevisiae p.XII, p. M, a mixture of p. XII and p. M, Y 717, p. 1976 they are fed with sterile wort to a sugar content in the nutrient medium of 4-6%, yeast is cultured until a predetermined concentration of yeast cells is reached at each stage of cultivation, this is achieved by culturing said yeast in a culture fluid when the concentration of yeast cells in it reaches 700 million / ml add nonionic surfactant - proxanol in an amount of 0.005-0.01 g / l, control the aeration and mixing by the respiratory coefficient of the yeast, maintaining it during the lag phase within 3.5-1 0 [gCO 2 / gO 2 ], during the period of the exponential growth phase, within 1.5 - 2.5 [gCO 2 / gO 2 ], and at the last stage of cultivation, the culture fluid is maintained for 2-3 hours, maintaining the respiratory value coefficient in the range of 20-35 [gCO 2 / gO 2 ], until the concentration of yeast cells in the culture fluid at each stage of cultivation is 1500-2000 million / ml.

Предлагаемый способ позволяет увеличить концентрацию дрожжевых клеток до 4 раз по сравнению с прототипом и получить дрожжи с хорошим качеством и высокой бродильной активностью.The proposed method allows to increase the concentration of yeast cells up to 4 times in comparison with the prototype and to obtain yeast with good quality and high fermentation activity.

В заявленном способе используют продукт декантации послеспиртовой барды, полученной после ректификации бражки на сырцовой ректификационной установке. Послеспиртовая барда является отходом производства (см. журнал «Биотехнология», №6, 1997, с.43-46). Сусло готовят в соответствии с Регламентом производства спирта из крахмалистого сырья, часть 1 - М.: ЦНИИТЭИпищепром, 1979. Проведена серия экспериментов на культурах дрожжей широко используемых в спиртовом производстве - Saccharomyces cerevisiae p.XII, р. М, смесь р. XII и р. М (в соотношении 1:1), Y 717, р. 1976. Установлено, что активный рост и накопление биомассы дрожжей при выбранных условиях культивирования характерны для всех заявленных культур.The claimed method uses the product of decantation of post-alcohol stillage obtained after distillation of mash on a raw distillation plant. Post-alcohol bard is a waste product (see the journal "Biotechnology", No. 6, 1997, p. 43-46). The wort is prepared in accordance with the Rules for the production of alcohol from starchy raw materials, part 1 - M .: TSNIITEpischeprom, 1979. A series of experiments on yeast cultures widely used in alcohol production - Saccharomyces cerevisiae p.XII, p. M, a mixture of p. XII and p. M (in a ratio of 1: 1), Y 717, p. 1976. It was established that the active growth and accumulation of yeast biomass under the selected cultivation conditions are characteristic of all declared cultures.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами конкретного выполнения.The invention is illustrated by the following examples of specific performance.

Пример 1.Чистую культуру дрожжей Saccharomyces cerevisiae, выращенную на сусле-агаре, пересевают в качалочные колбы объемом 750 мл на стерильную питательную среду объемом 50 мл с начальным содержанием сахара 4%, в качестве питательной среды используют продукт декантации послеспиртовой барды и сусло.Example 1. A pure culture of the yeast Saccharomyces cerevisiae grown on wort agar is transferred to 750 ml rocking flasks on a 50 ml sterile culture medium with an initial sugar content of 4%, the product of post-alcohol stillage decantation and wort is used as the culture medium.

Частота встряхивания качалочных колб 220 об/мин.Rocking flask shaking frequency 220 rpm.

В процессе культивирования дрожжей в качалочных колбах ведут подпитку стерильным суслом до содержания сахара в питательной среде 4%. При достижении концентрации дрожжевых клеток в культуральной жидкости 700 млн/мл полученную дрожжевую культуру переносят в ферментер объемом 10 литров, куда добавляют стерильный 10% водный раствор неионогенного ПАВ - проксанола из расчета 0,005 г на литр культуральной жидкости. Культивирование дрожжей ведут в ферментере на стерильной питательной среде с содержанием сахара 4%, в качестве которой используют продукт декантации послеспиртовой барды и сусло.During the cultivation of yeast in rocking flasks, sterile wort is fed to a sugar content of 4% in the nutrient medium. When the concentration of yeast cells in the culture fluid reaches 700 million / ml, the resulting yeast culture is transferred to a 10 liter fermenter, to which a sterile 10% aqueous solution of nonionic surfactant - proxanol is added at the rate of 0.005 g per liter of culture fluid. Yeast is cultivated in a fermenter on a sterile nutrient medium with a sugar content of 4%, which is used as a product of decantation of post-alcohol stillage and wort.

Аппарат-ферментер для культивирования дрожжей оснащен самовсасывающей мешалкой, вращающейся со скоростью от 200 до 1400 об/мин.The fermenter apparatus for cultivating yeast is equipped with a self-priming mixer, rotating at a speed of 200 to 1400 rpm.

В процессе культивирования дрожжей осуществляют управление аэрацией и перемешиванием культуральной жидкости по дыхательному коэффициенту дрожжей (RQ), который рассчитывается на основании газового баланса по следующей формуле (разницей между мольными объемами углекислого газа и кислорода при нормальных условиях пренебрегаем) (см. Мухачев С.Г. Определение параметров аэробного роста микроорганизмов на основе газового анализа. - Сб. XVIII международной конференции «Математические методы в технике и технологиях», 2005, т.6, с.160-163):During the cultivation of yeast, aeration and mixing of the culture fluid are controlled by the respiratory coefficient of yeast (RQ), which is calculated on the basis of the gas balance according to the following formula (we neglect the difference between the molar volumes of carbon dioxide and oxygen under normal conditions) (see Mukhachev S.G. Determination of the aerobic growth parameters of microorganisms based on gas analysis. - Sat. XVIII international conference "Mathematical methods in engineering and technology", 2005, v.6, s.160-163):

Figure 00000001
Figure 00000001

где: 0,00033 и 0,2095 - объемные доли соответственно углекислого газа и кислорода в сухом атмосферном воздухе;where: 0.00033 and 0.2095 - volume fractions of carbon dioxide and oxygen, respectively, in dry atmospheric air;

0,7905 - объемная доля инертных газов в сухом воздухе, подаваемом на аэрацию;0.7905 - volume fraction of inert gases in dry air supplied to aeration;

O2 и СO2- объемные доли кислорода и углекислого газа в отработанном воздухе, выходящем из ферментера.O 2 and CO 2 are the volume fractions of oxygen and carbon dioxide in the exhaust air leaving the fermenter.

Для расчета величины дыхательного коэффициента (RQ) измеряют остаточную концентрацию кислорода и концентрацию углекислого газа в отработанном воздухе, выходящем из ферментера.To calculate the value of the respiratory coefficient (RQ), the residual oxygen concentration and the concentration of carbon dioxide in the exhaust air leaving the fermenter are measured.

Измерения проводят с помощью газоанализаторов на углекислый газ (СO2) и кислород (O2): прибор ГИАМ-5 производства «Аналитприбор», г.Смоленск, кл.2 и ММГ-7, производства «Медтехника», г.Казань, кл.2. соответственно.The measurements are carried out using gas analyzers for carbon dioxide (CO 2 ) and oxygen (O 2 ): GIAM-5 device manufactured by Analitpribor, Smolensk, cell 2 and MMG-7, manufactured by Medtekhnika, Kazan, cell .2. respectively.

Первые 2-3 часа роста дрожжей Saccharomyces cerevisiae, в период лаг-фазы, процесс культивирования дрожжей ведут, управляя режимными параметрами аэрации и перемешивания, поддерживая значение дыхательного коэффициента равным 3,5 [гСO2/гO2], в последующий экспоненциальный период роста дрожжевой культуры осуществляют управление аэрацией и перемешиванием культуральной жидкости, поддерживая дыхательный коэффициент на уровне 1,5 [г СO2/гO2].The first 2-3 hours of growth of Saccharomyces cerevisiae yeast, during the lag phase, the yeast cultivation process is carried out by controlling the operating parameters of aeration and mixing, maintaining the respiratory coefficient equal to 3.5 [gCO 2 / gO 2 ], in the subsequent exponential period of yeast growth the cultures control the aeration and mixing of the culture fluid, maintaining a respiratory coefficient of 1.5 [g CO 2 / g 2 ].

В процессе подготовки питательной среды и подпиток, а также при культивировании дрожжей концентрацию сахара в культуральной жидкости определяют методом Бертрана, количество дрожжевых клеток - подсчетом клеток в камере Горяева (см. книгу «Микробиологический контроль гидролизно-дрожжевого производства». - М.: Экология, 1991 г., с.44-50; «Практикум по микробиологии» - М.: Издательство Моск. Ун-та, 1976, с.174-176).In the process of preparing the nutrient medium and feeding, as well as during the cultivation of yeast, the sugar concentration in the culture fluid is determined by the Bertrand method, the number of yeast cells is determined by counting cells in the Goryaev chamber (see the book “Microbiological control of hydrolysis and yeast production.” - M .: Ecology, 1991, p. 44-50; "Workshop on Microbiology" - M.: Publishing House of Moscow University, 1976, p. 174-176).

По мере роста дрожжевой популяции при снижении содержания сахара в культуральной жидкости до рВ 2,5% проводят подпитку стерильным суслом с содержанием рВ 12-15% с внесенным в него стерильным 10% водным раствором неионогенного ПАВ - проксанола в концентрации 0,005 г на 1 литр подпитки. Подпитка возвращает содержание сахара в питательной среде к начальному значению.As the yeast population grows with a decrease in the sugar content in the culture fluid to rV 2.5%, sterile wort is fed with a rV content of 12-15% with a sterile 10% aqueous solution of nonionic surfactant - proxanol in a concentration of 0.005 g per 1 liter of feed . The make-up returns the sugar content in the medium to its initial value.

При достижении концентрации дрожжевых клеток, равной 1500 млн/мл, дрожжевую культуру направляют на следующую ступень в ферментер объемом 500 литров и ведут процесс культивирования в аэробных условиях на стерильной питательной среде с содержанием сахара 4%, управляя аэрацией и перемешиванием по соответствующему каждой стадии роста дрожжевой культуры дыхательному коэффициенту аналогично предыдущей ступени.When the concentration of yeast cells is equal to 1,500 million / ml, the yeast culture is sent to the next stage in a fermenter with a volume of 500 liters and the process of cultivation under aerobic conditions on a sterile nutrient medium with a sugar content of 4% is carried out, controlling the aeration and mixing according to each stage of growth of yeast culture respiratory coefficient similar to the previous stage.

На последней ступени культивирования при достижении концентрации дрожжевых клеток 1500 млн/мл дрожжи Saccharomyces cerevisiae выдерживают в питательной среде с содержанием сахара 4% в течение 2-х часов, поддерживая значение дыхательного коэффициента дрожжей равным 20 [гСО2/гО2], для переключения дрожжевых клеток с дыхательного на анаэробный тип жизнедеятельности, перестройки ферментативного комплекса дрожжевой клетки для катализа брожения.At the last stage of cultivation, when the concentration of yeast cells reaches 1,500 mln / ml, Saccharomyces cerevisiae yeast is kept in a nutrient medium with a sugar content of 4% for 2 hours, maintaining the respiratory coefficient of yeast equal to 20 [gCO 2 / gO 2 ], for switching yeast cells from the respiratory to the anaerobic type of vital activity, reconstruction of the enzymatic complex of the yeast cell for catalysis of fermentation.

Бродильную активность и качество дрожжей определяют газометрическим методом (см. журнал «Пищевая промышленность», №11, 1989, с.37-38; книга «Контроль производства хлебопекарных дрожжей» автора О.А.Бакушинской, - М.: Пищевая пром-ть, 1978 г.)The fermentation activity and quality of the yeast is determined by the gasometric method (see the journal "Food Industry", No. 11, 1989, pp. 37-38; the book "Control of the production of baking yeast" by O.A. Bakushinsky, - M .: Food industry 1978)

Качество выращенных дрожжей - хорошее.The quality of the grown yeast is good.

Пример 2. Чистую культуру дрожжей Saccharomyces cerevisiae, выращенную на сусле-агаре, пересевают в качалочные колбы объемом 750 мл на стерильную питательную среду объемом 50 мл с начальным содержанием сахара 6%, в качестве питательной среды используют продукт декантации послеспиртовой барды и сусло.Example 2. A pure culture of yeast Saccharomyces cerevisiae, grown on wort agar, is transferred to rocking flasks with a volume of 750 ml on a sterile nutrient medium with a volume of 50 ml with an initial sugar content of 6%, the product of decanter distillation and wort is used as a nutrient medium.

Частота встряхивания качалочных колб 220 об/мин.Rocking flask shaking frequency 220 rpm.

В процессе культивирования дрожжей в качалочных колбах при снижении сахара в культуральной жидкости до рВ 2,5% ведут подпитку стерильным суслом (рВ 12-15%) до содержания сахара в питательной среде 6%. При достижении концентрации дрожжевых клеток в культуральной жидкости 700 млн/мл полученную дрожжевую культуру переносят в ферментер объемом 10 литров, куда добавляют стерильный 10% водный раствор неионогенного ПАВ - проксанола из расчета 0,01 г ПАВ на литр культуральной жидкости. Культивирование дрожжей ведут в ферментере на стерильной питательной среде с содержанием сахара 6%, в качестве питательной среды используют продукт декантации послеспиртовой барды и сусло.During the cultivation of yeast in rocking flasks with a decrease in sugar in the culture fluid to rV 2.5% are fed with sterile wort (rV 12-15%) to a sugar content in the nutrient medium of 6%. When the concentration of yeast cells in the culture fluid reaches 700 million / ml, the resulting yeast culture is transferred to a 10 liter fermenter, to which a sterile 10% aqueous solution of nonionic surfactant - proxanol is added at the rate of 0.01 g of surfactant per liter of culture fluid. Yeast is cultured in a fermenter on a sterile nutrient medium with a sugar content of 6%, and the product of decantation of post-alcohol stillage and wort is used as a nutrient medium.

Процесс культивирования дрожжей Saccharomyces cerevisiae осуществляют, управляя аэрацией и перемешиванием, которые определяются часом роста дрожжевой культуры и соответствующим ему дыхательным коэффициентом. В период лаг-фазы (первые 2-3 часа роста) режимные параметры аэрации и перемешивания устанавливают такими, чтобы дыхательный коэффициент был равным 10 [гСO2/гO2], в период интенсивного роста (последующие 10-12 часов), в экспоненциальной фазе, дыхательный коэффициент поддерживают на уровне 2,5 [гСO2/гО2].The cultivation process of Saccharomyces cerevisiae yeast is carried out by controlling aeration and mixing, which are determined by the growth hour of the yeast culture and the corresponding respiratory coefficient. During the lag phase (first 2-3 hours of growth), the aeration and mixing parameters are set so that the respiratory coefficient is 10 [gCO 2 / gO 2 ], during the period of intensive growth (the next 10-12 hours), in the exponential phase , the respiratory coefficient is maintained at 2.5 [gCO 2 / gO 2 ].

В процессе культивирования дрожжей проводят подпитку стерильным суслом (рВ 12-15%) с добавлением в него стерильного 10% водного раствора проксанола в концентрации 0,01 г/л, возвращая содержание сахара в питательной среде к начальному значению.During the cultivation of yeast, sterile wort is fed (pB 12-15%) with the addition of a sterile 10% aqueous solution of proxanol at a concentration of 0.01 g / l, returning the sugar content in the nutrient medium to the initial value.

При достижении концентрации дрожжевых клеток, равной 1700 млн/мл, дрожжевую культуру направляют на следующую ступень в ферментер объемом 500 литров и ведут процесс в аэробных условиях на стерильной питательной среде с содержанием сахара 6%, аналогично предыдущей степени.When the concentration of yeast cells is equal to 1700 million / ml, the yeast culture is sent to the next step in a 500 liter fermenter and the process is carried out under aerobic conditions on a sterile nutrient medium with a sugar content of 6%, similar to the previous degree.

На последней ступени культивирования при достижении концентрации дрожжевых клеток 1700 млн/мл дрожжи выдерживают в питательной среде с содержанием сахара 6% в течение 3-х часов, поддерживая значение дыхательного коэффициента равным 35 [гСО2/гO2], что необходимо для переключения дрожжевых клеток с дыхательного на анаэробный тип жизнедеятельности.At the last stage of cultivation, when the concentration of yeast cells reaches 1700 million / ml, the yeast is kept in a nutrient medium with a sugar content of 6% for 3 hours, maintaining the respiratory coefficient equal to 35 [gCO 2 / gO 2 ], which is necessary for switching yeast cells from respiratory to anaerobic type of life.

Качество выращенных дрожжей - хорошее.The quality of the grown yeast is good.

Пример 3. Чистую культуру дрожжей Saccharomyces cerevisiae, выращенную на сусле-агаре, пересевают в качалочные колбы объемом 750 мл на стерильную питательную среду объемом 50 мл с начальным содержанием сахара 5%, в качестве питательной среды используют продукт декантации послеспиртовой барды и сусло.Example 3. A pure culture of Saccharomyces cerevisiae yeast grown on wort agar is transferred to 750 ml rocking flasks on a 50 ml sterile culture medium with an initial sugar content of 5%, the product of decanter distillation and wort is used as the culture medium.

Частота встряхивания качалочных колб 220 об/мин.Rocking flask shaking frequency 220 rpm.

В процессе культивирования при снижении сахара в культуральной жидкости до 2,5% ведут подпитку стерильным суслом (рВ 12-15%) до содержания сахара в питательной среде 5%. При достижении концентрации дрожжевых клеток в культуральной жидкости качалочных колб 700 млн/мл полученную дрожжевую культуру переносят в ферментер объемом 10 литров, куда добавляют стерильный 10% водный раствор неионогенного ПАВ - проксанола из расчета 0,0075 г ПАВ на литр культуральной жидкости. Культивирование дрожжей ведут в ферментере на стерильной питательной среде с содержанием сахара 5%, в качестве питательной среды используют продукт декантации послеспиртовой барды и сусло.In the process of cultivation with a decrease in sugar in the culture fluid to 2.5% are fed with sterile wort (pV 12-15%) to a sugar content in the nutrient medium of 5%. When the concentration of yeast cells in the culture fluid of the rocking flasks reaches 700 million / ml, the resulting yeast culture is transferred to a 10 liter fermenter, to which a sterile 10% aqueous solution of nonionic surfactant - proxanol is added at the rate of 0.0075 g of surfactant per liter of culture fluid. Yeast is cultured in a fermenter on a sterile nutrient medium with a sugar content of 5%, and the product of decantation of post-alcohol stillage and wort is used as a nutrient medium.

В процессе культивирования дрожжей осуществляют управление аэрацией и перемешиванием по дыхательныму коэффициенту дрожжей. В период лаг-фазы (первые 2-3 часа роста дрожжевой культуры) режимные параметры устанавливают такими, чтобы дыхательный коэффициент был равен 7 [гCO2/гO2], в период интенсивного роста (последующие 10-12 часов), в экспоненциальной фазе, дыхательный коэффициент поддерживают на уровне 2 [гCO2/гO2].During the cultivation of yeast, aeration and mixing are controlled by the respiratory coefficient of yeast. During the lag phase (first 2-3 hours of yeast culture growth), the operating parameters are set so that the respiratory coefficient is 7 [gCO 2 / gO 2 ], during the period of intensive growth (the next 10-12 hours), in the exponential phase, the respiratory coefficient is maintained at 2 [gCO 2 / gO 2 ].

В процессе культивирования дрожжей Saccharomyces cerevisiae проводят подпитку стерильным суслом (рВ 12-15%) с добавлением в него стерильного 10% водного раствора проксанола в концентрации 0,0075 г/л, возвращая содержание сахара в питательной среде к начальному значению.During the cultivation of the yeast, Saccharomyces cerevisiae is fed with sterile wort (pB 12-15%) with the addition of a sterile 10% aqueous solution of proxanol at a concentration of 0.0075 g / l, returning the sugar content in the nutrient medium to the initial value.

При достижении концентрации дрожжевых клеток, равной 2000 млн/мл, дрожжевую культуру направляют на следующую ступень в ферментер объемом 500 литров и ведут процесс в аэробных условиях на стерильной питательной среде с содержанием сахара 5%, аналогично предыдущей степени.When the concentration of yeast cells is equal to 2000 million / ml, the yeast culture is sent to the next step in a 500 liter fermenter and the process is carried out under aerobic conditions on a sterile nutrient medium with a sugar content of 5%, similar to the previous degree.

На последней ступени культивирования при достижении концентрации дрожжевых клеток 2000 млн/мл дрожжи выдерживают в питательной среде с содержанием сахара 5% в течение 2,5 часов, поддерживая значение дыхательного коэффициента равным 27 [гСO2/гO2], для переключения дрожжевых клеток с дыхательного на анаэробный тип жизнедеятельности.At the last stage of cultivation, when the concentration of yeast cells reaches 2000 million / ml, the yeast is kept in a nutrient medium with a sugar content of 5% for 2.5 hours, maintaining the value of the respiratory coefficient equal to 27 [gCO 2 / gO 2 ] to switch the yeast cells from the respiratory on the anaerobic type of life.

Качество выращенных дрожжей - хорошее.The quality of the grown yeast is good.

Пример 4. Культивирование дрожжей ведут так же, как и в примере 3, но без добавления неионогенного ПАВ - проксанола. Концентрация дрожжевых клеток составляет 1700 млн/мл. Качество дрожжей - хорошее.Example 4. Cultivation of yeast is the same as in example 3, but without the addition of a nonionic surfactant - proxanol. The concentration of yeast cells is 1700 million / ml. Yeast quality is good.

Дрожжи, полученные по примерам 1-4, обладают высокой бродильной активностью и хорошим качеством. При выборе запредельных границ концентраций ПАВ, значений дыхательного коэффициента, процентного содержания сахара в питательной среде, значений времени выдержки на последней ступени культивирования поставленная задача (уровень концентрации дрожжевых клеток на каждой ступени культивирования 1500-2000 млн/мл) не обеспечивается, чем и обусловлен выбор предельных значений данных параметров.The yeast obtained in examples 1-4 have high fermentation activity and good quality. When choosing the transcendental boundaries of surfactant concentrations, respiratory coefficient values, the percentage of sugar in the nutrient medium, the exposure time values at the last stage of cultivation, the task (the level of yeast cells concentration at each stage of cultivation is 1500-2000 million / ml) is not ensured, which determines the choice limit values of these parameters.

Концентрация и качество дрожжей по примерам 1-4 представлены в табл.1.The concentration and quality of the yeast in examples 1-4 are presented in table 1.

Таблица 1Table 1 ПоказателиIndicators ПримерыExamples 1one 22 33 4four По прототипуAccording to the prototype Концентрация клеток дрожжевой культуры на каждой ступени культивирования, млн/млThe concentration of yeast culture cells at each stage of cultivation, million / ml 15001500 17001700 20002000 17001700 500-1000500-1000 Качество выращенных дрожжей на последней ступениThe quality of the grown yeast in the last step хорошееgood хорошееgood хорошееgood хорошееgood хорошееgood

Таким образом, предлагаемый способ культивирования дрожжей позволяет вырастить чистую дрожжевую культуру в любых объемах путем последовательного пересева с предыдущей ступени на последующую, к тому же с высокой концентрацией дрожжевых клеток 1500-2000 млн/мл и хорошим качеством дрожжей. Заявленный способ прост в технологическом исполнении, питательная среда, используемая в способе, содержит основной компонент - продукт декантации послеспиртовой барды, являющейся отходом спиртового производства.Thus, the proposed method for culturing yeast allows you to grow a pure yeast culture in any volume by successively reseeding from the previous stage to the next, moreover, with a high concentration of yeast cells 1500-2000 million / ml and good quality yeast. The claimed method is simple in technological execution, the nutrient medium used in the method contains the main component - the product of decantation of post-alcohol stillage, which is a waste of alcohol production.

Предлагаемое изобретение «Способ культивирования дрожжей для спиртового производства» по сравнению с прототипом обеспечивает увеличение концентрации спиртовых дрожжей до 2000 млн/мл с хорошим качеством.The present invention "Method of culturing yeast for alcohol production" in comparison with the prototype provides an increase in the concentration of alcohol yeast up to 2000 million / ml with good quality.

Claims (1)

Способ культивирования дрожжей для спиртового производства в аэробных условиях на стерильной питательной среде с содержанием сахара 4-6% с использованием в качестве питательной среды продукта декантации послеспиртовой барды и сусла, с подпиткой в процессе культивирования дрожжей стерильным суслом до содержания сахара в питательной среде 4-6% и ведением культивирования до достижения заданной концентрации дрожжевых клеток на каждой ступени, культивирования, отличающийся тем, что при культивировании дрожжей в культуральную жидкость при достижении в ней концентрации дрожжевых клеток 700 млн кл./мл вносят неионогенный ПАВ - проксанол в количестве 0,005-0,01 г/л, осуществляют управление адрацией и перемешиванием по дыхательному коэффициенту дрожжей, поддерживая его в период лаг-фазы в пределах 3,5-10 [гСО2/гО2], в период экспоненциальной фазы роста - в пределах 1,5-2,5 [гСО2/гО2] и на последней ступени культивирования культуральную жидкость выдерживают в течение 2-3 ч, поддерживая значение дыхательного коэффициента в пределах 20-35 [гСО2/гО2], до достижения концентрации дрожжевых клеток в культуральной жидкости на каждой ступени культивирования 1500-2000 млн кл./мл. A method of cultivating yeast for alcohol production under aerobic conditions on a sterile nutrient medium with a sugar content of 4-6% using decantation of post-alcohol stillage and wort as a nutrient medium, with the sterilized wort fed to the sugar content in the nutrient medium 4-6 in the process of cultivating the yeast % and conducting cultivation to achieve a given concentration of yeast cells at each stage of cultivation, characterized in that when cultivating the yeast in a culture fluid at when the concentration of yeast cells in it reaches 700 million cells / ml, a nonionic surfactant, proxanol, in the amount of 0.005-0.01 g / l is added, adration and mixing are controlled by the respiratory coefficient of the yeast, maintaining it during the lag phase within 3.5 -10 [gSO 2 / gO 2 ], during the period of the exponential growth phase - within 1.5-2.5 [gSO 2 / gO 2 ] and at the last stage of cultivation, the culture fluid is maintained for 2-3 hours, maintaining the value of the respiratory coefficient in the range of 20-35 [gCO 2 / gO 2 ], until the concentration of yeast cells in culture fluid at each stage of cultivation 1500-2000 million cells / ml
RU2007123373/13A 2007-06-15 2007-06-15 Method of culturing brewing yeast RU2378365C2 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2007123373/13A RU2378365C2 (en) 2007-06-15 2007-06-15 Method of culturing brewing yeast

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2007123373/13A RU2378365C2 (en) 2007-06-15 2007-06-15 Method of culturing brewing yeast

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2007123373A RU2007123373A (en) 2008-12-20
RU2378365C2 true RU2378365C2 (en) 2010-01-10

Family

ID=41644361

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2007123373/13A RU2378365C2 (en) 2007-06-15 2007-06-15 Method of culturing brewing yeast

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2378365C2 (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2528872C2 (en) * 2012-09-10 2014-09-20 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования Самарский государственный технический университет Bakery yeast cultivation method

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2528872C2 (en) * 2012-09-10 2014-09-20 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования Самарский государственный технический университет Bakery yeast cultivation method

Also Published As

Publication number Publication date
RU2007123373A (en) 2008-12-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN108220175B (en) High-density culture method and pH regulation and control method for saccharomyces cerevisiae
CN112251379B (en) Acid-resistant acetoin-producing Bacillus belgii DQA21 and application
RU2749884C2 (en) Method of improved fermentation with the help of microorganisms
CN110564580B (en) Method for producing vinegar containing pyrroloquinoline quinone through microbial co-culture fermentation
CN110317734B (en) Monascus with high yields of saccharifying enzyme, esterifying enzyme and protease and separation culture method and application thereof
CN113957016B (en) Bacillus subtilis and method for preparing milk-flavored cordyceps sinensis fermentation liquor by using same
RU2381270C1 (en) STRAIN OF BACTERIA Clostridium acetobutylicum-PRODUCER OF BUTANOL, ACETONE AND ETHANOL
CN112391418B (en) Industrialized fermentation production method of raspberry ketone
US20240043881A1 (en) Systems and methods for co-culture of oxygen sensitive bacteria and yeast
EP2831254B1 (en) A method of initiating acetic fermentation under industrial conditions
RU2378365C2 (en) Method of culturing brewing yeast
CN102925495A (en) Method for producing butanol through continuous fermentation of saccharine material
CN116396882A (en) NRK producing strain, method for producing NRK and application
US3988204A (en) Production of glucoamylase for conversion of grain mashes in the production of grain spirits
CN111019995B (en) Method for producing vanillin by fermentation with eugenol as substrate
Phunsri et al. The liquid/air interface area and depth of liquid medium suitable for cellulose production from Acetobacter TISTR 975
JP3004509B2 (en) Method and apparatus for producing ethanol from microalgae
Blanco et al. Improving industrial full-scale production of baker's yeast by optimizing aeration control
CN110452945B (en) Method for producing erythromycin by fermenting saccharopolyspora erythraea
RU2136746C1 (en) Method of cultivating yeast for alcohol production
CN117143744B (en) Bremia mycorrhizae and application thereof in preparation of yellow water esterified liquid
CN114790437B (en) Hydroxyl bacteria colony with specific function and screening method and application thereof
CN110982710B (en) Wine cellar verruca umbilicalis leveling and application thereof in aging of new wine
RU2528872C2 (en) Bakery yeast cultivation method
CN117866770A (en) Method for separating yeast for fermenting tartary buckwheat yellow rice wine

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20160616