RU2373531C1 - Method of detection of antihypoxic activity of pharmacological preparations - Google Patents
Method of detection of antihypoxic activity of pharmacological preparations Download PDFInfo
- Publication number
- RU2373531C1 RU2373531C1 RU2008115834/15A RU2008115834A RU2373531C1 RU 2373531 C1 RU2373531 C1 RU 2373531C1 RU 2008115834/15 A RU2008115834/15 A RU 2008115834/15A RU 2008115834 A RU2008115834 A RU 2008115834A RU 2373531 C1 RU2373531 C1 RU 2373531C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- antihypoxic
- antihypoxic activity
- chemoluminescent
- cuvette
- blood
- Prior art date
Links
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине, в частности к фармакологии, и может быть использовано для выявления антигипоксической активности фармакологических препаратов.The invention relates to medicine, in particular to pharmacology, and can be used to detect antihypoxic activity of pharmacological preparations.
Известен способ выявления антигипоксической активности фармакологических препаратов, при котором животных поодиночке сажают в стеклянные банки одинакового объема, которые герметично закрывают. По мере потребления кислорода животными его концентрация в сосуде снижается, что приводит к их гибели.A known method of detecting antihypoxic activity of pharmacological preparations, in which animals are individually planted in glass jars of the same volume, which are hermetically closed. As oxygen is consumed by animals, its concentration in the vessel decreases, which leads to their death.
Контрольным животным вводят физиологический раствор, а опытным - исследуемый препарат. В гермокамеры параллельно сажают опытных и контрольных животных, регистрируют продолжительность жизни и по ней судят об эффективности исследуемых веществ (Лукьянова Л.Д. Методические рекомендации по изучению препаратов, предлагаемых для изучения в качестве антигипоксических средств. Москва, 1990 г., стр.10).The control animals are injected with saline, and the test drug is administered to experimental animals. Experimental and control animals are simultaneously placed in pressure chambers, life expectancy is recorded, and the effectiveness of the test substances is judged by it (Lukyanova L.D. Methodological recommendations for studying drugs proposed for study as antihypoxic drugs. Moscow, 1990, p. 10) .
Для осуществления данного способа оценки антигипоксической активности фармакологических препаратов необходимо большое количество лабораторных животных. Способ является трудоемким и дорогостоящим.To implement this method of assessing the antihypoxic activity of pharmacological preparations, a large number of laboratory animals are required. The method is time consuming and expensive.
Задачей изобретения является разработка способа, позволяющего определять антигипоксическую активность фармакологических препаратов in vitro.The objective of the invention is to develop a method that allows you to determine the antihypoxic activity of pharmacological preparations in vitro.
Предлагаемый способ расширяет арсенал методов выявления антигипоксической активности фармакологических препаратов, причем проводится in vitro.The proposed method expands the arsenal of methods for detecting antihypoxic activity of pharmacological drugs, and is carried out in vitro.
Сущность предложенного способа состоит в том, что в кювету для хемилюминесцентного анализа, содержащую питательную среду, кровь, люминесцентный зонд, добавляют исследуемый препарат и проводят хемилюминесцентный анализ, сравнивая показатели с контрольной кюветой, содержащей питательную среду, кровь, люминесцентный зонд, физиологический раствор, и если время достижения максимума кинетической кривой в опытной кювете будет больше, чем в кювете сравнения, на 10 минут, то исследуемый препарат обладает антигипоксическими свойствами.The essence of the proposed method consists in the fact that in the cuvette for chemiluminescent analysis containing a nutrient medium, blood, a luminescent probe, add the studied drug and conduct chemiluminescent analysis, comparing the indicators with a control cell containing a nutrient medium, blood, luminescent probe, saline solution, and if the time to reach the maximum kinetic curve in the experimental cuvette is 10 minutes longer than in the comparison cuvette, then the studied drug has antihypoxic properties.
Для проверки эффективности предлагаемого способа в качестве изучаемого препарата использовали бемитил, обладающий анигипоксическими свойствами.To verify the effectiveness of the proposed method as a study drug used bemitil with antihypoxic properties.
Пример. Провели оценку антигипоксической активности бемитила, антигипоксическая активность которого экспериментально и клинически доказана.Example. We evaluated the antihypoxic activity of bemitil, the antihypoxic activity of which has been experimentally and clinically proven.
Для оценки антигипоксической активности бемитила указанный препарат в объеме 50 мкл, 1 мМ раствора вносили в кювету для хемилюминесценции, содержащую хемилюминесцентную систему: 400 мкл полного раствора Хенкса без красителя, 60 мкл крови здорового донора и 100 мкл люминола. В контрольную кювету с хемилюминесцентной системой добавляли 50 мкл физиологического раствора.To evaluate the antihypoxic activity of bemitil, the indicated drug in a volume of 50 μl, 1 mm solution was added to a chemiluminescence cuvette containing a chemiluminescent system: 400 μl of a complete Hanks solution without dye, 60 μl of healthy donor blood and 100 μl of luminol. 50 μl of physiological saline was added to a control cell with a chemiluminescent system.
Анализ кинетики хемилюминесценции обеих кювет проводили на хемилюминометре БЛМ 3606М-01 в течение 360 минут при температуре 37°С. Оценивали время достижения максимума кинетической кривой. Через 158 мин инкубации в контрольной кювете наблюдался максимум хемилюминесценции. В опытной кювете с бемитилом максимум наблюдали на 182 мин, что на 26 мин позже, чем в контроле, следовательно, антигипоксическая активность бемитила подтверждается предлагаемым способом.The analysis of the chemiluminescence kinetics of both cuvettes was carried out on a BLM 3606M-01 chemiluminometer for 360 minutes at a temperature of 37 ° C. Estimated time to reach the maximum kinetic curve. After 158 min of incubation, a maximum of chemiluminescence was observed in the control cell. In the experimental cuvette with boehmil, the maximum was observed at 182 min, which is 26 min later than in the control; therefore, the antihypoxic activity of bemithil is confirmed by the proposed method.
Испытание способа выявления антигипоксической активности фармакологических препаратов провели по вышеприведенной методике, используя образцы крови 6 разных доноров (таблица). Получили, что при добавлении в хемилюминесцентную систему бемитила время появления максимума хемилюминесценции во всех случаях увеличивалось более чем на 10 мин по сравнению с контролем.A test of the method for detecting antihypoxic activity of pharmacological preparations was carried out according to the above method using blood samples of 6 different donors (table). It was found that when bemitil was added to the chemiluminescent system, the time of appearance of the chemiluminescence maximum in all cases increased by more than 10 min compared to the control.
При оценке среднегрупповых значений получили, что в контроле время достижения максимума хемилюминесценции составило 151,3±5,1 мин, а добавление в хемилюминесцентную систему бемитила увеличивало время достижения максимума до 175,7±5,5 мин (различия между группами достоверны, р<0,05).When assessing the mean group values, it was found that in the control, the time to reach the chemiluminescence maximum was 151.3 ± 5.1 min, and the addition of bemitil to the chemiluminescent system increased the time to maximum to 175.7 ± 5.5 min (the differences between the groups were significant, p < 0.05).
Таким образом, предложенный способ выявления антигипоксической активности фармакологических препаратов позволяет проводить оценку in vitro, что упрощает процедуру исследования и не требует лабораторных животных. Способ может быть использован в экспериментальной фармакологии и клинической медицине для индивидуального подбора препаратов данной группы.Thus, the proposed method for detecting the antihypoxic activity of pharmacological preparations allows in vitro assessment, which simplifies the study procedure and does not require laboratory animals. The method can be used in experimental pharmacology and clinical medicine for the individual selection of drugs of this group.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2008115834/15A RU2373531C1 (en) | 2008-04-21 | 2008-04-21 | Method of detection of antihypoxic activity of pharmacological preparations |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2008115834/15A RU2373531C1 (en) | 2008-04-21 | 2008-04-21 | Method of detection of antihypoxic activity of pharmacological preparations |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2373531C1 true RU2373531C1 (en) | 2009-11-20 |
Family
ID=41477974
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2008115834/15A RU2373531C1 (en) | 2008-04-21 | 2008-04-21 | Method of detection of antihypoxic activity of pharmacological preparations |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2373531C1 (en) |
-
2008
- 2008-04-21 RU RU2008115834/15A patent/RU2373531C1/en not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ЛУКЬЯНОВА Л.Д. Методические рекомендации по изучению препаратов, предлагаемых для изучения в качестве антигипоксических средств.- М., 1990. ГОРЯБИН Л.П. Нужен ли люминол? (О методах обнаружения невидимых, подвергшихся уничтожению следов крови). Вопросы борьбы с убийствами. Материалы научно-практической конференции. Сборник статей. - М., 1969, с.216-221. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US8642285B2 (en) | Assessment of consumption or release of a gaseous analyte from biological or chemical samples | |
| US8173438B1 (en) | Microbiological assessment method and device utilizing oxygen gradient sensing | |
| FI97547B (en) | Instrument and methods for the detection of micro-organisms | |
| US9217170B2 (en) | Fluorescent detector systems for the detection of chemical perturbations in sterile storage devices | |
| EP2158310B1 (en) | Optical method and device for detection and enumeration of microorganisms | |
| US20080145834A1 (en) | Freeze-dried platelets as a diagnostic agent | |
| US8183052B2 (en) | Methods and apparatus for sterility testing | |
| Rivera et al. | Integrated phosphorescence-based photonic biosensor (iPOB) for monitoring oxygen levels in 3D cell culture systems | |
| JP2009523447A (en) | Rapid detection and evaluation of cultured cell proliferation | |
| Kim et al. | Integration of sensors in gastrointestinal organoid culture for biological analysis | |
| Miskolci et al. | In vivo fluorescence lifetime imaging of macrophage intracellular metabolism during wound responses in zebrafish | |
| KR20160003761A (en) | Method for a cell-based drug screening assay and the use thereof | |
| Hettie et al. | A NIR fluorescent smart probe for imaging tumor hypoxia | |
| RU2373531C1 (en) | Method of detection of antihypoxic activity of pharmacological preparations | |
| CN112119153B (en) | Cell detection device and cell detection method | |
| US9811635B2 (en) | Immune and oxygen system measuring and drug screening method and apparatus | |
| ES2882050T3 (en) | Procedure for the isolation and analysis of microorganisms contained in a sample | |
| WO2014007676A2 (en) | Method for determining the functional status of biological tissue | |
| RU2763845C1 (en) | Method for assessing the functional state of peripheral blood lymphocytes | |
| JP2020076753A (en) | Stress resistance evaluation method and device therefore | |
| US20200407673A1 (en) | Device, kit and method for three-dimensional cell culture | |
| Grosh et al. | Understanding the impact of controlled oxygen delivery to 3D cancer cell culture | |
| Dieter et al. | Author Spotlight: Preservation of Bioenergetic Parameters in Peripheral Blood Mononuclear Cells After Cryopreservation | |
| Dieter et al. | Cryopreservation and Bioenergetic Evaluation of Human Peripheral Blood Mononuclear Cells | |
| Babatunde et al. | Naive primary neutrophils play a dual role in the tumor microenvironment |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20100422 |