RU2323970C1 - Биопрепарат-нефтедеструктор, используемый для очистки почв и грунтов от нефти и нефтепродуктов - Google Patents
Биопрепарат-нефтедеструктор, используемый для очистки почв и грунтов от нефти и нефтепродуктов Download PDFInfo
- Publication number
- RU2323970C1 RU2323970C1 RU2007100433/13A RU2007100433A RU2323970C1 RU 2323970 C1 RU2323970 C1 RU 2323970C1 RU 2007100433/13 A RU2007100433/13 A RU 2007100433/13A RU 2007100433 A RU2007100433 A RU 2007100433A RU 2323970 C1 RU2323970 C1 RU 2323970C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- oil
- biomass
- microorganisms
- lenoil
- biological
- Prior art date
Links
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 title description 2
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 claims abstract description 31
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims abstract description 31
- 241000186063 Arthrobacter Species 0.000 claims abstract description 9
- 241000193764 Brevibacillus brevis Species 0.000 claims abstract description 9
- 239000002689 soil Substances 0.000 claims description 24
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 claims description 5
- 241000589151 Azotobacter Species 0.000 claims 1
- 241000589149 Azotobacter vinelandii Species 0.000 abstract description 11
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 11
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 4
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 abstract description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 30
- ZVJHJDDKYZXRJI-UHFFFAOYSA-N 1-Pyrroline Chemical compound C1CC=NC1 ZVJHJDDKYZXRJI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 23
- 238000006065 biodegradation reaction Methods 0.000 description 19
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 16
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 16
- 238000004061 bleaching Methods 0.000 description 14
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 9
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 7
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 6
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 5
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 4
- 241000736262 Microbiota Species 0.000 description 4
- 244000309464 bull Species 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 4
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 4
- 239000003337 fertilizer Substances 0.000 description 4
- 241000194110 Bacillus sp. (in: Bacteria) Species 0.000 description 3
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 3
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 3
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 3
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 239000003209 petroleum derivative Substances 0.000 description 3
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 3
- 241001453369 Achromobacter denitrificans Species 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 2
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 244000053095 fungal pathogen Species 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 2
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 230000002087 whitening effect Effects 0.000 description 2
- 241000607534 Aeromonas Species 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 241000252867 Cupriavidus metallidurans Species 0.000 description 1
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 241000589776 Pseudomonas putida Species 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000036983 biotransformation Effects 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 238000011260 co-administration Methods 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 229940097362 cyclodextrins Drugs 0.000 description 1
- 239000004062 cytokinin Substances 0.000 description 1
- UQHKFADEQIVWID-UHFFFAOYSA-N cytokinin Natural products C1=NC=2C(NCC=C(CO)C)=NC=NC=2N1C1CC(O)C(CO)O1 UQHKFADEQIVWID-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 239000001064 degrader Substances 0.000 description 1
- 239000002283 diesel fuel Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 239000003344 environmental pollutant Substances 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 238000009533 lab test Methods 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 125000001477 organic nitrogen group Chemical group 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 230000037039 plant physiology Effects 0.000 description 1
- 231100000719 pollutant Toxicity 0.000 description 1
- 238000005067 remediation Methods 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии защиты окружающей среды. Биопрепарат-нефтедеструктор включает биомассу консорциума нефтеокисляющих микроорганизмов Bacillus brevis и Arthrobacter species ИБ ДТ-5, биомассу аэробных азотфиксирующих микроорганизмов Azotobacter vinelandii ИБ 4 и биомассу аэробных спорообразующих микроорганизмов Bacillus species 739 в массовом соотношении, равном 1:1:0,5÷1. Изобретение позволяет повысить эффективность процесса биоразложения нефтепродуктов в грунте, активизировать микробиологическую активность почвы. 5 табл.
Description
Изобретение относится к биотехнологии защиты окружающей среды.
Способы биологической очистки нефтезагрязненных почв и грунтов, основанные на использовании ферментативной активности углеводородокисляющих микроорганизмов, характеризуются как наиболее эффективные и экологически безопасные. Известно [1] два принципиальных подхода к биодеградации нефтяных углеводородов: (1) - интродукция в загрязненную экосистему специально подобранных ассоциаций микроорганизмов-деструкторов различных классов углеводородных поллютантов; (2) - активизация аборигенной нефтеокисляющей микрофлоры путем создания оптимальных условий для ее развития. Наиболее перспективны биотехнологии, предусматривающие сочетание этих двух подходов, в частности внесение в почву биопрепаратов, включающих бактериальные ассоциации и минеральные удобрения.
Известны консорциумы нефтеокисляющих микроорганизмов, предназначенные для очистки почв от нефтяного загрязнения [2-4]. Однако следует отметить, что степень биодеградации нефтяных углеводородов определяется при этом только потенциалом интродуцированных в систему микроорганизмов-деструкторов. То есть потенциал аборигенной микробиоты, присутствующей в загрязненной нефтью или нефтепродуктами экосистеме, по биодеградации углеводородов остается неиспользованным, что снижает эффективность процесса биологической рекультивации.
Ближайшим аналогом (прототипом) предлагаемого изобретения является консорциум микроорганизмов Bacillus brevis и Arthrobacter species ИБ ДТ-5, используемый для очистки воды и почвы от нефти и нефтепродуктов [5]. Известно его использование для биологической рекультивации отработанной отбеливающей земли, содержащей нефтепродукты [6] (биопрепарат «Ленойл»).
Недостатком известного консорциума штаммов микроорганизмов-нефтедеструкторов является сравнительно низкая степень биодеструкции нефти и нефтепродуктов.
Технической задачей предлагаемого биопрепарата является повышение эффективности биодеградации нефти и нефтепродуктов в загрязненных почвах и грунтах.
Поставленная задача решается путем создания биопрепарата, содержащего биомассу консорциума нефтеокисляющих микроорганизмов Bacillus brevis и Arthrobacter species ИБ ДТ-5, биомассу аэробных азотфиксирующих микроорганизмов Azotobacter vinelandii ИБ 4 и биомассу аэробных спорообразующих бактерий Bacillus species 739, вносимых в массовом соотношении 1:1:0,5÷1.
Указанный штамм микроорганизмов Azotobacter vinelandii известен в качестве основы биопрепарата для борьбы с корневыми гнилями пшеницы и повышения количества и качества урожая [7]. В процессе своей жизнедеятельности бактерии Azotobacter vinelandii ИБ 4 секретируют в окружающую среду различные биологически активные вещества, в том числе цитокинины; таким образом, биомасса этих микроорганизмов может играть роль эффективного биологического удобрения, стимулирующего развитие всей микробиоты в нефтезагрязненном объекте.
Штамм бактерий Bacillus sp.739 - основа биопрепарата «Бациспецин БМ», используемого против грибковых возбудителей болезней злаковых культур [8]. Указанный штамм микроорганизмов в процессе своей жизнедеятельности продуцирует различные биологически активные вещества, в том числе циклодекстрины и обладает фитогормональной активностью [9].
Примеры конкретного выполнения.
В лабораторных испытаниях эффективности предлагаемого биопрепарата-нефтедеструктора использовали биомассу консорциума микроорганизмов Bacillus brevis и Arthrobacter species ИБ ДТ-5, полученную при их совместной ферментации, биомассу микроорганизмов Azotobacter vinelandii ИБ 4 и биомассу микроорганизмов Bacillus species 739.
Консорциум микроорганизмов Bacillus brevis и Arthrobacter species ИБ ДТ-5 (биопрепарат «Ленойл») выращивают в аэробных условиях на питательной среде следующего состава, г/л: Na2CO3 - 0,1; CaCl2 - 0,01; MnSO4·7H2O - 0,02; FeSO4·7H2O - 0,02; NaH2PO4 - 1,5; К2HPO4 - 1,0; MgSO4·7H2O - 0,2; NH4NO3 - 2,0; вода дистиллированная до 1000 мл. В качестве единственного источника углерода используется дизельное топливо, процесс ферментации проводят при комнатной температуре до достижения титра микроорганизмов в культуральной жидкости, равного 109 КОЕ/мл.
Биомассу микроорганизмов Azotobacter vinelandii ИБ 4 (биопрепарат «Азолен») выращивают в аэробных условиях на питательной среде следующего состава, г/л: КН2PO4 - 0,2; К2HPO4 - 0,8; CaSO4·2H2O - 0,1; MgSO4·7H2O - 0,2; FeCl3 - 0,01; Na2MoO4 - 0,01; дрожжевой экстракт - 0,5; сахароза - 20 г; вода дистиллированная до 1000 мл. Процесс ферментации проводят при комнатной температуре до достижения титра микроорганизмов в культуральной жидкости, равного 109 КОЕ/мл.
Биомассу микроорганизмов Bacillus species 739 (биопрепарат «Бациспецин БМ») выращивают в аэробных условиях на питательной среде следующего состава, мас.%: крахмал - 1,0-2,0; К2HPO4 - 0,2; (NH4)2HPO4 - 0,2; (NH4)2SO4 - 0,3; СаСО3 - 1,0; вода до 100%. Процесс ферментации проводят при температуре 40-43°С в течение 48 часов, затем культуру высушивают на распылительной сушилке. Титр клеток препарата «Бациспецин БМ» составляет 2,0·106 КОЕ/г.
Для оценки интенсивности разложения нефти или нефтепродуктов использовали показатель остаточного содержания нефтепродуктов в загрязненном субстрате.
Определение остаточного содержания нефтепродуктов проводили спектрофотометрическим и весовым методами [10]. По первому из них пробу весом 10 г помещали в патрон из фильтровальной бумаги и переносили в аппарат Сокслета. Экстракцию проводили 120-150 мл гексана в течение 2-3 часов при температуре кипения гексана (69°С). Концентрацию углеводородов в пробе определяли по оптической плотности экстракта на спектрофотометре СФ-46 при длине волны, на которой данная смесь углеводородов имела максимальный пик поглощения. Максимальный пик поглощения определяли на спектрофотометре SPECORD UF-VIS. По весовому методу пробу весом 10 г помещали в патрон из фильтровальной бумаги и взвешивали на электронных весах. Проэкстрагированные пробы вместе с патронами высушивали в жарочном шкафу при температуре 100-120°С и снова взвешивали на электронных весах. По разнице в весе проб до и после экстракции определяли содержание остаточных нефтепродуктов.
Численность основных групп микроорганизмов, участвующих в биотрансформации нефтепродуктов, определяли посевом почвенной суспензии методом разведений на плотные питательные среды [11]: бактерий, усваивающих органический азот - на мясопептонном агаре (МПА), олигонитрофилов - на питательной среде Эшби, микроскопических грибов (микромицетов) - на среде Чапека и углеводородокисляющих микроорганизмов на среде Цукамуры, где в качестве источника углерода была использована стерильная смесь углеводородов, полученная после экстракции гексаном загрязненной отбеливающей земли.
Схема лабораторного (модельного) опыта по рекультивации отбеливающей земли: в отбеливающую землю, содержащую 181 г/кг остаточных углеводородов, вносили минеральные удобрения (нитрофоска из расчета 0,25 г/кг субстрата), биопрепарат «Ленойл» из расчета 1 мл к 1 кг отбеливающей земли и биопрепарат «Азолен» в массовом соотношении к биопрепарату «Ленойл», составляющем 1:1, 1,25:1 и 0,75:1. Повторность опытов - трехкратная, длительность экспериментов - 150 сут. Влажность в сосудах в течение всего срока инкубации поддерживали на уровне 60%, температуру - 20-25°С. Отбор проб отбеливающей земли осуществляли через 30 суток.
Результаты испытания предлагаемого биопрепарата-нефтедеструктора показали, что внесение консорциума нефтеокисляющих микроорганизмов Bacillus brevis и Arthrobacter species с дополнительной добавкой биомассы бактерий Azotobacter vinelandii ИБ 4 значительно повышает эффективность процесса биодеградации нефтепродуктов в отбеливающей земле (табл.1). Через 150 суток инкубации степень снижения содержания нефтепродуктов в этом случае составила 81,3 мас.%. Применение биопрепарата «Ленойл» без внесения биопрепарата «Азолен» в условиях опыта оказалось менее эффективным, а степень биодеградации нефтепродуктов составила всего 69,3 мас.%. При массовом соотношении биомассы бактерий Azotobacter vinelandii ИБ 4 к биомассе консорциума нефтеокисляющих микроорганизмов, составляющем 0,75:1, эффективность процесса биодеградации нефтепродуктов снижалась, а при соотношении 1,25:1 величина степени биодеградации практически не отличалась от соответствующего показателя, достигнутого при массовом соотношении, равном 1:1.
Дополнительное внесение в нефтезагрязненную отбеливающую землю биомассы микроорганизмов биопрепарата «Бациспецин БМ» совместно с внесением биопрепаратов «Ленойл» и «Азолен» при их массовом соотношении, равном 1:1:0,5÷1, показало увеличение эффективности процесса биологической ремедиации субстрата. Это выразилось в повышении степени биодеградации углеводородов, содержащихся в отработанной отбеливающей земле. Так, если степень биодеградации углеводородов при использовании смеси биопрепаратов «Ленойл» и «Азолен» при их массовом соотношении, равном 1:1, за 150 сут эксперимента составляла 81,3 мас.%, то степень биодеградации углеводородов в аналогичных условиях эксперимента при совместном внесении биомассы микроорганизмов биопрепаратов «Ленойл», «Азолен» и «Бациспецин БМ» при их массовом соотношении 1:1:0,5÷1 составляла 87,3-87,6 мас.% (табл.1). Внесение в нефтезагрязненный субстрат смеси биомасс биопрепаратов «Ленойл», «Азолен» и «Бациспецин БМ» в массовом соотношении 1:1:0,3 снижало эффективность процесса биодеградации углеводородов и степень их биодеструкции в условиях эксперимента составила величину, равную 81,6 мас.%. При внесении в нефтезагрязненный субстрат смеси биомасс биопрепаратов «Ленойл», «Азолен» и «Бациспецин БМ» в массовом соотношении, равном 1:1:1,5, степень биодеструкции углеводородов составила 87,6 мас.%; таким образом повышение массовой доли биомассы микроорганизмов биопрепарата «Бациспецин БМ» не привело к дополнительному увеличению эффективности процесса биодеградации углеводородов.
Внесение в нефтезагрязненный субстрат биомассы бактерий Azotobacter vinelandii ИБ 4 и биомассы бактерий Bacillus species 739 совместно с биомассой бактерий биопрепарата «Ленойл» способствует значительному увеличению численности почвенных микроорганизмов, принимающих участие в трансформации нефтепродуктов, загрязняющих отбеливающую землю - гетеротрофных бактерий, растущих на МПА, олигонитрофилов, углеводородокисляющих бактерий и микромицетов (табл.2-5). По-видимому, биомасса этих микроорганизмов, содержащая в своем составе различные биологически активные вещества, играет роль эффективного биологического удобрения, стимулирующего развитие всей микробиоты в нефтезагрязненном объекте.
Таким образом, предлагаемый биопрепарат-нефтедеструктор, содержащий биомассу консорциума нефтеокисляющих микроорганизмов Bacillus brevis и Arthrobacter species ИБ ДТ-5, биомассу аэробных азотфиксирующих бактерий Azotobacter vinelandii ИБ 4 и биомассу бактерий Bacillus species 739 в массовом соотношении, равном 1:1:0,5÷1, позволяет повысить эффективность процесса биоразложения нефтепродуктов в грунте, активизировать микробиологическую активность почвы. Вместе с тем использование предлагаемого биопрепарата-нефтедеструктора не нарушает жизнедеятельность полезной микробиоты нефтезагрязненного субстрата.
| Таблица 1 | |||||
| Динамика изменения степени биодеградации углеводородов в отбеливающей земле | |||||
| Варианты опыта | Степень биодеградации углеводородов, мас.% | ||||
| 30 сут | 60 сут | 90 сут | 120 сут | 150 сут | |
| Контроль - отбеливающая земля без внесения биопрепаратов | 5,3 | 6,1 | 13,1 | 13,1 | 15,3 |
| Биопрепарат «Ленойл» | 32,1 | 39,3 | 43,1 | 55,4 | 69,3 |
| Совместное внесение биопрепаратов «Ленойл» и «Азолен» в массовом соотношении 1:1 | 42,3 | 61,2 | 68,1 | 79,2 | 81,3 |
| Совместное внесение биопрепаратов «Ленойл» и «Азолен» в массовом соотношении 1,25:1 | 41,4 | 60,0 | 66,8 | 77,2 | 78,6 |
| Совместное внесение биопрепаратов «Ленойл» и «Азолен» в массовом соотношении 0,75:1 | 42,3 | 61,5 | 69,0 | 79,3 | 81,3 |
| Совместное внесение биопрепаратов | 44,3 | 67,2 | 70,1 | 81,7 | 87,3 |
| «Ленойл», «Азолен» и «Бациспецин БМ» в массовом соотношении 1:1:0,5 | |||||
| Совместное внесение биопрепаратов «Ленойл», «Азолен» и «Бациспецин БМ» в массовом соотношении 1:1:1 | 44,6 | 68,2 | 70,7 | 81,3 | 87,6 |
| Совместное внесение биопрепаратов «Ленойл», «Азолен» и «Бациспецин БМ» в массовом соотношении 1:1:0,3 | 42,4 | 61,5 | 68,2 | 79,4 | 81,6 |
| Совместное внесение биопрепаратов «Ленойл», «Азолен» и «Бациспецин БМ» в массовом соотношении 1:1:1,5 | 44,6 | 68,2 | 70,7 | 81,3 | 87,6 |
| Таблица 2 | |||||
| Динамика изменения численности бактерий на МПА | |||||
| Варианты опыта | Количество клеток, тыс. в 1 г абсолютно сухой почвы | ||||
| 30 сут | 60 сут | 90 сут | 120 сут | 150 сут | |
| Контроль - отбеливающая земля без внесения биопрепаратов | 20±1 | 80±11 | 80±6 | 90±5 | 130±8 |
| Биопрепарат «Ленойл» | 670±43 | 320±13 | 590±46 | 990±104 | 1120±82 |
| Совместное внесение биопрепаратов «Ленойл» и «Азолен» | 980±68 | 2800±63 | 1750±122 | 1390±111 | 1180±101 |
| Совместное внесение биопрепаратов «Ленойл», «Азолен», «Бациспецин БМ» | 1120±46 | 3200±70 | 2420±85 | 2200±60 | 2320±80 |
| Таблица 3 | |||||
| Динамика изменения численности олигонитрофилов на среде Эшби | |||||
| Варианты опыта | Количество клеток, тыс. в 1 г абсолютно сухой почвы | ||||
| 30 сут | 60 сут | 90 сут | 120 сут | 150 сут | |
| Контроль - отбеливающая земля без внесения биопрепаратов | 10±1 | 180±8 | 280±50 | 360±22 | 410±31 |
| Биопрепарат «Ленойл» | 40±6 | 750±92 | 790±103 | 850±68 | 900±68 |
| Совместное внесение биопрепаратов «Ленойл» и «Азолен» | 560±49 | 490±57 | 580±97 | 640±38 | 680±50 |
| Совместное внесение биопрепаратов «Ленойл», «Азолен», «Бациспецин БМ» | 750±61 | 710±56 | 780±83 | 830±45 | 860±43 |
| Таблица 4 | |||||
| Динамика изменения численности углеводородокисляющих бактерий на среде Цукамуры | |||||
| Варианты опыта | Количество клеток, тыс. в 1 г абсолютно сухой почвы | ||||
| 30 сут | 60 сут | 90 сут | 120 сут | 150 сут | |
| Контроль - отбеливающая земля без внесения биопрепаратов | 15±2 | 50±3 | 50±7 | 50±6 | 30±1 |
| Биопрепарат «Ленойл» | 270±48 | 130±19 | 148±22 | 176±14 | 180±20 |
| Совместное внесение биопрепаратов «Ленойл» и «Азолен» | 310±28 | 200±20 | 267±17 | 281±32 | 310±30 |
| Совместное внесение биопрепаратов «Ленойл», «Азолен», «Бациспецин БМ» | 407±25 | 348±17 | 386±19 | 390±30 | 425±28 |
| Таблица 5 | |||||
| Динамика изменения численности микромицетов на среде Чапека | |||||
| Варианты опыта | Количество клеток, тыс. в 1 г абсолютно сухой почвы | ||||
| 30 сут | 60 сут | 90 сут | 120 сут | 150 сут | |
| Контроль - отбеливающая земля без внесения биопрепаратов | 15±2 | 18±2 | 13±5 | 20±4 | 13±2 |
| Биопрепарат «Ленойл» | 53±3 | 25±6 | 13±1 | 33±2 | 13±4 |
| Совместное внесение биопрепаратов «Ленойл» и «Азолен» | 60±9 | 65±6 | 60±8 | 70±8 | 70±20 |
| Совместное внесение биопрепаратов «Ленойл», «Азолен», «Бациспецин БМ» | 75±6 | 78±8 | 81±9 | 85±6 | 87±7 |
Список литературы
1. Вельков В.В. Биоремедиация: принципы, проблемы, подходы // Биотехнология. - 1995. - №3-4. - С.20-27.
2. Пат. 2023686 Российская Федерация. Консорциум микроорганизмов, используемых для очистки почвенных и солоновато-водных экосистем от загрязнения нефтепродуктами / И.А.Борзенков, Е.И.Милехина, С.С.Беляев, М.В.Иванов. - 1994, - Бюл. 22.
3. Пат. 2083667 Российская Федерация, С12N 1/20. Консорциум микроорганизмов-деструкторов: Alcaligenes denitrificans, Pseudomonas maltopfilia, Pseudomonas putida, Pseudomonas species, Bacillus species для очистки почв, почвогрунтов, вод от нефти, нефтепродуктов и остаточной замазученности / Г.П.Голодяев. Заявлено 15.08.95; опубл. 10.07.97.
4. Пат. 2182529 Российская Федерация, С12N 1/26. Консорциум штаммов микроорганизмов-деструкторов: Bacillus species, Aeromonas species, Alcaligenes eutrophus, Alcaligenes denitrificans, используемый для очистки почв, почвогрунтов и вод от нефтяных загрязнений / Г.П.Голодяев. Заявлено 15.08.2000; опубл. 20.05.2002.
5. Пат. 2232806 Российская Федерация, 7 С12N 1/20. Консорциум штаммов микроорганизмов Bacillus brevis и Arthrobacter species, используемый для очистки воды и почвы от нефти и нефтепродуктов / О.Н.Логинов, Н.Н.Силищев, Р.Н.Чураев, Т.Ф.Бойко, Н.Ф.Галимзянова, Е.А.Данилова, А.К.Подцепихин, И.М.Султанов, С.П.Четвериков. Заявлено 12.08.2002; опубл. 20.07.2004. Бюл. 20.
6. Пат. 2237711 Российская Федерация, 7 С12N 1/20. Способ рекультивации отбеливающей земли, загрязненной нефтепродуктами / О.Н.Логинов, В.В.Пилюгин, В.П.Костюченко, С.И.Комаров, Н.Н.Силищев. Заявлено 30.12.2002; опубл. 10.10.2004. Бюл. 28.
7. Пат. 2245918 Российская Федерация, 7 С12N 1/20. Штамм бактерий Azotobacter vinelandii для получения биопрепарата для борьбы с корневыми гнилями пшеницы и повышения количества и качества урожая / О.Н.Логинов, Е.Г.Пугачева, Н.Н.Силищев, Т.Ф.Бойко, Н.Ф.Галимзянова. Заявлено 07.07.2003; опубл. 10.02.2005. Бюл. 4.
8. Пат. 1743019 Российская Федерация, 5 С12N 1/20. Штамм бактерий Bacillus sp. для получения препарата против грибковых возбудителей болезней злаковых культур / А.И.Мелентьев, Н.Г.Усанов, О.Н.Логинов. Заявлено 03.10.1989; опубл. 30.05.1994.
9. Морозов Ю.М., Мелентьев А.И., Кузьмина Л.Ю. Ультраструктура клеток пшеницы при развитии бактерий Bacillus sp. - активного начала бактериального инокулята Бациспецин БМ // Физиология растений. - 1994. - Т.41, №1. - С.36-43.
10. Груздякова Р.А. Спектрофотометрическое определение нефтепродуктов в пробах почвы // Гигиена и санитария. - 1993. - №3. - С.73-74.
11. Звягинцев Д.Г. Методы почвенной микробиологии и биохимии. - М.: МГУ. - 1980. - 223 с.
Claims (1)
- Биопрепарат-нефтедеструктор, используемый для очистки грунтов и почвы от нефти и нефтепродуктов, содержащий биомассу консорциума нефтеокисляющих микроорганизмов Bacillus brevis и Arthrobacter species ИБ ДТ-5, отличающийся тем, что он дополнительно содержит биомассу аэробных азотфиксирующих микроорганизмов Azotobacter vinelandii ИБ 4 и биомассу аэробных спорообразующих микроорганизмов Bacillus species 739 в массовом соотношении, равном 1:1:0,5÷1.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2007100433/13A RU2323970C1 (ru) | 2007-01-09 | 2007-01-09 | Биопрепарат-нефтедеструктор, используемый для очистки почв и грунтов от нефти и нефтепродуктов |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2007100433/13A RU2323970C1 (ru) | 2007-01-09 | 2007-01-09 | Биопрепарат-нефтедеструктор, используемый для очистки почв и грунтов от нефти и нефтепродуктов |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2323970C1 true RU2323970C1 (ru) | 2008-05-10 |
Family
ID=39799952
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2007100433/13A RU2323970C1 (ru) | 2007-01-09 | 2007-01-09 | Биопрепарат-нефтедеструктор, используемый для очистки почв и грунтов от нефти и нефтепродуктов |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2323970C1 (ru) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2013007398A1 (en) | 2011-07-13 | 2013-01-17 | BIOLAND, Ltd | Biological product for clearing of water, industrial wastewater and soil from chemicals, which are resistant to degradation and method for using the same |
| RU2482179C1 (ru) * | 2012-04-16 | 2013-05-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт проблем нефти и газа Сибирского отделения Российской академии наук | ШТАММ БАКТЕРИЙ Bacillus atropheus - ДЕСТРУКТОР НЕФТИ И НЕФТЕПРОДУКТОВ |
| RU2509150C2 (ru) * | 2012-04-24 | 2014-03-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Новосибирский национальный исследовательский государственный университет" (Новосибирский государственный университет, НГУ) | Ассоциация штаммов бактерий-нефтедеструкторов и способ ремедиации нефтезагрязненных объектов |
| RU2580042C2 (ru) * | 2014-03-24 | 2016-04-10 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Уфимский Институт биологии Российской академии наук | Способ повышения содержания алкалоида лаппаконитина в заготовленных корневищах aconitum septentrionale koelle |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE19652580A1 (de) * | 1996-12-17 | 1998-07-23 | Baburin Leonid Arkadevitch | Bakterielles Gemisch zur Regenerierung von durch Erdölprodukte verunreinigten Gewässern und Erdstoffen und Verfahren zur Herstellung des Gemisches |
| RU2232806C2 (ru) * | 2002-08-12 | 2004-07-20 | Институт биологии Уфимского научного центра РАН | Консорциум штаммов микроорганизмов bacillus brevis и arthrobacter species, используемый для очистки воды и почвы от нефти и нефтепродуктов |
| RU2237711C1 (ru) * | 2002-12-30 | 2004-10-10 | Открытое акционерное общество "Орскнефтеоргсинтез" | Способ рекультивации отбеливающей земли, загрязненной нефтепродуктами |
| RU2263080C2 (ru) * | 2004-01-05 | 2005-10-27 | Закрытое акционерное общество Научно-производственное предприятие "Биомедхим" | Способ биохимической очистки сточных вод |
-
2007
- 2007-01-09 RU RU2007100433/13A patent/RU2323970C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE19652580A1 (de) * | 1996-12-17 | 1998-07-23 | Baburin Leonid Arkadevitch | Bakterielles Gemisch zur Regenerierung von durch Erdölprodukte verunreinigten Gewässern und Erdstoffen und Verfahren zur Herstellung des Gemisches |
| RU2232806C2 (ru) * | 2002-08-12 | 2004-07-20 | Институт биологии Уфимского научного центра РАН | Консорциум штаммов микроорганизмов bacillus brevis и arthrobacter species, используемый для очистки воды и почвы от нефти и нефтепродуктов |
| RU2237711C1 (ru) * | 2002-12-30 | 2004-10-10 | Открытое акционерное общество "Орскнефтеоргсинтез" | Способ рекультивации отбеливающей земли, загрязненной нефтепродуктами |
| RU2263080C2 (ru) * | 2004-01-05 | 2005-10-27 | Закрытое акционерное общество Научно-производственное предприятие "Биомедхим" | Способ биохимической очистки сточных вод |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2013007398A1 (en) | 2011-07-13 | 2013-01-17 | BIOLAND, Ltd | Biological product for clearing of water, industrial wastewater and soil from chemicals, which are resistant to degradation and method for using the same |
| RU2482179C1 (ru) * | 2012-04-16 | 2013-05-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт проблем нефти и газа Сибирского отделения Российской академии наук | ШТАММ БАКТЕРИЙ Bacillus atropheus - ДЕСТРУКТОР НЕФТИ И НЕФТЕПРОДУКТОВ |
| RU2509150C2 (ru) * | 2012-04-24 | 2014-03-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Новосибирский национальный исследовательский государственный университет" (Новосибирский государственный университет, НГУ) | Ассоциация штаммов бактерий-нефтедеструкторов и способ ремедиации нефтезагрязненных объектов |
| RU2580042C2 (ru) * | 2014-03-24 | 2016-04-10 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Уфимский Институт биологии Российской академии наук | Способ повышения содержания алкалоида лаппаконитина в заготовленных корневищах aconitum septentrionale koelle |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Vecchioli et al. | Use of selected autochthonous soil bacteria to enhanced degradation of hydrocarbons in soil | |
| Muratova et al. | Oil-oxidizing potential of associative rhizobacteria of the genus Azospirillum | |
| Semenyuk et al. | Effect of activated charcoal on bioremediation of diesel fuel-contaminated soil | |
| WO2020009097A1 (ja) | 石油関連物質により汚染された環境の除染方法および使用する資材 | |
| RU2323970C1 (ru) | Биопрепарат-нефтедеструктор, используемый для очистки почв и грунтов от нефти и нефтепродуктов | |
| RU2509150C2 (ru) | Ассоциация штаммов бактерий-нефтедеструкторов и способ ремедиации нефтезагрязненных объектов | |
| Abioye et al. | Biodegradation of crude oil in soil amended with melon shell | |
| Wemedo et al. | Biodegradation potential of bacteria isolated from crude oil polluted site in South South, Nigeria | |
| Nrior et al. | Bioremediation of crude oil contaminated marshland muddy soil by bioaugmentation approach using Candida tropicalis and Penicillium chrysogenum | |
| RU2705290C1 (ru) | Микробный препарат для биоремедиации почвы, загрязненной нефтью и нефтепродуктами | |
| RU2414313C2 (ru) | Способ очистки земель от нефти и нефтепродуктов и рекультивации почв сельскохозяйственного назначения | |
| Ikuesan et al. | Comparative bioremediation of crude oil-contaminated soil samples using activated soil and activated cow dung | |
| MARINESCU et al. | Bioremediation potential of native hydrocarbons degrading bacteria in crude oil polluted soil | |
| RU2297290C1 (ru) | Способ рекультивации отбеливающей земли, загрязненной нефтепродуктами | |
| RU2502569C1 (ru) | Способ очистки почвы от углеводородных загрязнений | |
| Archegova et al. | Optimization of the purification of soil and water objects from oil using biosorbents | |
| RU2307869C2 (ru) | Способ биологической рекультивации нефтезагрязненной почвы | |
| RU2237711C1 (ru) | Способ рекультивации отбеливающей земли, загрязненной нефтепродуктами | |
| RU2735870C1 (ru) | Способ выделения микроорганизмов для очистки и восстановления нефтезагрязненных почв и грунтов методом фитобиоремедиации | |
| Ikuesan et al. | Cow dung as inoculum carrier for the degradation of crude oil | |
| Er et al. | Natural attenuation, biostimulation and bioaugmentation of landfill leachate management | |
| RU2041172C1 (ru) | Способ очистки почвы от нефти и нефтепродуктов | |
| Wemedo et al. | Biodegradation potential of Aspergillus Niger and Rhizopus arrhizus isolated from crude oil spilled site in Rivers State | |
| CN101074423A (zh) | 一株球形芽孢杆菌及其应用 | |
| Mehrzad et al. | The investigation of nutrient addition impact on bioremediation capability of gasoil by Alcaligenes faecalis |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20150110 |