RU2323226C2 - Method for preparing halophilic bacterium biomass - Google Patents
Method for preparing halophilic bacterium biomass Download PDFInfo
- Publication number
- RU2323226C2 RU2323226C2 RU2006118729/13A RU2006118729A RU2323226C2 RU 2323226 C2 RU2323226 C2 RU 2323226C2 RU 2006118729/13 A RU2006118729/13 A RU 2006118729/13A RU 2006118729 A RU2006118729 A RU 2006118729A RU 2323226 C2 RU2323226 C2 RU 2323226C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- biomass
- bioreactor
- bacteriorhodopsin
- cultivation
- preparing
- Prior art date
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к способам культивирования галобактерий и получения синтезируемого ими белка - бактериородопсина.The invention relates to methods for culturing halobacteria and obtaining the protein synthesized by them - bacteriorhodopsin.
Известен способ культивирования галобактерий и получения бактериородопсина из биомассы галобактерий. Способ осуществляется в периодическом режиме на питательных средах, включающих гидролизаты белковых веществ (пептон, триптон), источник ростовых факторов - дрожжевой экстракт, глицерин (дополнительный источник углерода), минеральные соли [1]. Недостатками способа являются низкий уровень накопления биомассы галобактерий, невысокий выход бактериородопсина, наличие большого количества каротиноидов, содержащихся в биомассе и затрудняющих последующее выделение бактериородопсина в чистом виде или в составе пурпурных мембран.A known method of cultivating halobacteria and producing bacteriorhodopsin from the biomass of halobacteria. The method is carried out in batch mode on nutrient media, including protein hydrolysates (peptone, tryptone), the source of growth factors is yeast extract, glycerin (an additional carbon source), mineral salts [1]. The disadvantages of the method are the low level of biomass accumulation of halobacteria, the low yield of bacteriorhodopsin, the presence of a large number of carotenoids contained in the biomass and hindering the subsequent isolation of bacteriorhodopsin in pure form or as part of purple membranes.
Известен также способ получения бактериородопсина и каротиноидов, включающий подготовку посевного материала, глубинное культивирование биомассы галобактерий с электростатической обработкой биомассы, последующее выделение бактериородопсина [2]. Недостатками способа являются невысокий выход бактериородопсина и наличие большого количества каротиноидов в биомассе.There is also known a method for producing bacteriorhodopsin and carotenoids, including the preparation of seed, deep cultivation of biomass of halobacteria with electrostatic treatment of biomass, subsequent isolation of bacteriorhodopsin [2]. The disadvantages of the method are the low yield of bacteriorhodopsin and the presence of a large number of carotenoids in the biomass.
Наиболее близким к предлагаемому по технической сущности является способ культивирования галобактерий и получения бактериородопсина, включающий подготовку посевного материала, глубинное культивирование биомассы галобактерий в мембранном биореакторе с контролем содержания кислорода в культуральной жидкости и подпиткой субстратом, удаление ингибиторов роста галобактерий через мембрану и последующее выделение бактериородопсина [3]. Недостатками способа являются невысокий уровень удельного накопления бактериородопсина в биомассе галобактерий, наличие большого количества каротиноидов в биомассе, большой расход питательной среды.Closest to the proposed technical essence is a method of cultivating halobacteria and producing bacteriorhodopsin, including the preparation of seed, deep cultivation of the biomass of halobacteria in the membrane bioreactor with oxygen control in the culture fluid and feeding the substrate, the removal of halobacterial growth inhibitors through the membrane and subsequent isolation of bacteriorhodopsin [3 ]. The disadvantages of the method are the low level of specific accumulation of bacteriorhodopsin in the biomass of halobacteria, the presence of a large number of carotenoids in the biomass, a large consumption of nutrient medium.
Задачей изобретения является повышение уровня накопления биомассы, увеличение удельного содержания бактериородопсина в биомассе галобактерий и совокупного выхода бактериородопсина при минимальном содержании каротиноидов в биомассе, а также снижение расхода питательной среды.The objective of the invention is to increase the level of biomass accumulation, increase the specific content of bacteriorhodopsin in the biomass of halobacteria and the total yield of bacteriorhodopsin with a minimum content of carotenoids in the biomass, as well as reduce the consumption of nutrient medium.
Поставленная задача решается тем, что для подготовки посевного материала и глубинного культивирования используют инкапсулированный адсорбент и/или антиоксидант, при этом посевной материал с адсорбентом и/или антиоксидантом вносят в емкость с культуральной жидкостью и проводят культивирование до стационарной фазы роста, причем глубинное культивирование проводят путем одновременного засевания биореактора посевным материалом и приведения содержимого биореактора в контакт с инкапсулированным адсорбентом и/или антиоксидантом, при этом содержание кислорода в биореакторе поддерживают на уровне 5-10% от равновесного, а подпитку осуществляют сухим или концентрированным субстратом.The problem is solved in that for the preparation of seed and deep cultivation using an encapsulated adsorbent and / or antioxidant, while seed with adsorbent and / or antioxidant is introduced into a container with culture fluid and cultivation is carried out to a stationary growth phase, and deep cultivation is carried out by simultaneous inoculation of the bioreactor with seed and bringing the contents of the bioreactor into contact with the encapsulated adsorbent and / or antioxidant, at m oxygen in the bioreactor is maintained at a level of 5-10% of the equilibrium, and feeding is performed by dry or concentrated substrate.
Изобретение иллюстрируется следующими примерами.The invention is illustrated by the following examples.
Пример 1.Example 1
Подготовка посевного материала.Sowing preparation.
Для выращивания галобактерий используется свежеприготовленная среда следующего состава, г/л: NaCl - 250, MgSO4×7H2O - 20, KCl - 2, цитрат Na - 3, триптон фирмы Serva - 5, дрожжевой экстракт Organotechnie - 2, глицерин - 4.For growing halobacteria, a freshly prepared medium of the following composition is used, g / l: NaCl - 250, MgSO 4 × 7H 2 O - 20, KCl - 2, citrate Na - 3, tryptone from Serva - 5, yeast extract Organotechnie - 2, glycerin - 4 .
Подготовительные операции перед культивированием.Preparatory operations before cultivation.
В колбу 1 объемом 250 мл вносится активированный уголь марки АГ-3 в количестве 3 г (30 г активированного угля на 1 л среды культивирования). Гранулы активированного угля заливаются 30 мл среды культивирования, содержащей 2,5-5% агара, колба закрывается ватной пробкой и стерилизуется 30 мин при 0,5 ати. Параллельно в колбе 2 с ватной пробкой в таких же условиях стерилизуется 100 мл среды культивирования.Activated carbon of the AG-3 grade in the amount of 3 g (30 g of activated carbon per 1 liter of culture medium) is introduced into flask 1 with a volume of 250 ml. Activated carbon granules are poured into 30 ml of cultivation medium containing 2.5-5% agar, the flask is closed with a cotton plug and sterilized for 30 min at 0.5 ati. In parallel, in a flask 2 with a cotton plug under the same conditions, 100 ml of culture medium is sterilized.
После стерилизации и охлаждения уголь инкапсулирован в слое агара и хорошо фиксируется на дне колбы 1, в которую вливают стерильную и охлажденную среду культивирования из колбы 2.After sterilization and cooling, the coal is encapsulated in an agar layer and is well fixed on the bottom of flask 1, into which sterile and cooled culture medium from flask 2 is poured.
В колбу 1 производится засев клеток галобактерий (4 об.% посевного материала). Культивирование проводится на качалке до стационарной фазы роста при освещенности 500-1000 лк, температуре 37-38°С 6 суток. При разных условиях аэрации, что определяется частотой оборотов качалки, накапливается от 3,4 (150 об/мин) до 5,4 (180 об/мин) г/л биомассы галобактерий (по сухим веществам биомассы) с содержанием бактериородопсина от 120 до 140 мг/л среды культивирования. Подготовленный таким образом материал используют в качестве посевного.In flask 1, halobacterium cells are inoculated (4 vol.% Inoculum). Cultivation is carried out on a rocking chair to a stationary growth phase with illumination of 500-1000 lux, a temperature of 37-38 ° C for 6 days. Under different conditions of aeration, which is determined by the frequency of rotation of the rocking chair, it accumulates from 3.4 (150 rpm) to 5.4 (180 rpm) g / l of halobacteria biomass (dry matter biomass) with a content of bacteriorhodopsin from 120 to 140 mg / l of culture medium. Thus prepared material is used as a seed.
Пример 2.Example 2
Подготовка посевного материала.Sowing preparation.
То же, что в примере 1, но вместо активированного угля используют ионообменную смолу АВ-16 ГС (промежуточно-основный анионит) в количестве 3,5 г (35 г на 1 л среды культивирования). При разных условиях аэрации, что определяется частотой оборотов качалки, получается от 3,4 (150 об/мин) до 5,4 (180 об/мин) г/л биомассы галобактерий с содержанием бактериородопсина от 110 до 120 мг/л среды культивирования.The same as in example 1, but instead of activated carbon, the ion-exchange resin AB-16 GS (intermediate-basic anion exchange resin) is used in an amount of 3.5 g (35 g per 1 liter of cultivation medium). Under different conditions of aeration, which is determined by the frequency of rotation of the rocking chair, it turns out from 3.4 (150 rpm) to 5.4 (180 rpm) g / l of halobacteria biomass with bacteriorhodopsin content from 110 to 120 mg / l of cultivation medium.
Пример 3.Example 3
Подготовка посевного материала.Sowing preparation.
То же, что в примере 1, но вместо активированного угля и агара в стерильную колбу 1 вносят 50-200 мг антиоксиданта (цистеина, токоферола, сульфита натрия). Выход биомассы 3,4-4 г/л с содержанием бактериородопсина 85-95 мг/л.The same as in example 1, but instead of activated carbon and agar, 50-200 mg of an antioxidant (cysteine, tocopherol, sodium sulfite) is introduced into a sterile flask 1. The biomass yield of 3.4-4 g / l with a bacteriorhodopsin content of 85-95 mg / l.
Пример 4.Example 4
Подготовка посевного материала.Sowing preparation.
То же, что в примере 1, но после стерилизации и охлаждения инкапсулированного адсорбента в колбу 1 вносят 50-200 мг антиоксиданта (цистеина, токоферола, сульфита натрия). Выход биомассы 3,4-5,4 г/л с содержанием бактериородопсина 120-140 мг/л.The same as in example 1, but after sterilization and cooling of the encapsulated adsorbent, 50-200 mg of an antioxidant (cysteine, tocopherol, sodium sulfite) is added to flask 1. The biomass yield of 3.4-5.4 g / l with a bacteriorhodopsin content of 120-140 mg / l.
Пример 5.Example 5
Подготовка посевного материала.Sowing preparation.
То же, что в примере 2, но после стерилизации и охлаждения инкапсулированного адсорбента в колбу 1 вносят 50-200 мг антиоксиданта (цистеина, токоферола, сульфита натрия). Выход биомассы 3,4-5,4 г/л с содержанием бактериородопсина 110-120 мг/л.The same as in example 2, but after sterilization and cooling of the encapsulated adsorbent, 50-200 mg of an antioxidant (cysteine, tocopherol, sodium sulfite) is added to flask 1. The biomass yield of 3.4-5.4 g / l with a bacteriorhodopsin content of 110-120 mg / l.
Посевной материал любого из этих пяти примеров можно использовать в качестве посевного для глубинного культивирования в биореакторе.The seed of any of these five examples can be used as seed for deep cultivation in a bioreactor.
Пример 6.Example 6
Глубинное культивирование.Deep cultivation.
В биореактор рабочим объемом 3 л вносят 2,7 л среды состава примера 1 и стерилизуют 40 мин при 0,5 ати. После охлаждения производят засев посевным материалом примеров 1-5 (300 мл - 10 об.% посевного материала). Культивирование проводится при освещенности 500-1000 лк, температуре 37-38°С. Содержание кислорода поддерживается на уровне 5% от равновесного. Через трое суток выход биомассы составляет 3,8 г/л с содержанием бактериородопсина 80-85 мг/л. На четвертые сутки включается прокачка содержимого реактора через емкость с инкапсулированным активированным углем АГ-3 (в расчете 30 г активированного угля на 1 л культуральной жидкости). Предварительно подготавливают патроны с инкапсулированным активированным углем: гранулы активированного угля помещаются в цилиндрическую форму диаметром 15 мм и высотой 50 мм, заливаются 30 мл среды культивирования, содержащей 2,5-5% агара, и стерилизуется 30 мин при 0,5 ати. После охлаждения патроны вынимаются из формы и переносятся в емкость для прокачки культуральной жидкости, которая осуществляется перистальтическим насосом. Прокачка насосом культуральной жидкости осуществляется через сосуд с угольными патронами в условиях хорошего перемешивания. На момент начала прокачки вносят подпитку (в сухом виде триптон с дрожжевым экстрактом и глицерин либо свежеприготовленный стерильный высококонцентрированный раствор этих ингредиентов) состава 15 г триптона, 6 г дрожжевого экстракта, 6 мл глицерина (1 доза подпитки на 3 л культуральной жидкости).2.7 l of the medium of the composition of Example 1 are introduced into the bioreactor with a working volume of 3 l and sterilized for 40 min at 0.5 ati. After cooling, sowing with inoculum of examples 1-5 is carried out (300 ml — 10 vol.% Of inoculum). Cultivation is carried out at illumination of 500-1000 lux, a temperature of 37-38 ° C. The oxygen content is maintained at 5% of equilibrium. After three days, the biomass yield is 3.8 g / l with a bacteriorhodopsin content of 80-85 mg / l. On the fourth day, the contents of the reactor are pumped through the AG-3 encapsulated activated carbon container (calculated as 30 g of activated carbon per 1 liter of culture liquid). Cartridges with encapsulated activated carbon are preliminarily prepared: granules of activated carbon are placed in a cylindrical shape with a diameter of 15 mm and a height of 50 mm, 30 ml of culture medium containing 2.5-5% agar are poured, and sterilized for 30 min at 0.5 ati. After cooling, the cartridges are removed from the mold and transferred to a tank for pumping the culture fluid, which is carried out by a peristaltic pump. Pumping the culture fluid through a vessel with coal cartridges under conditions of good mixing. At the beginning of pumping, make-up (dry tryptone with yeast extract and glycerin or a freshly prepared sterile highly concentrated solution of these ingredients) is made up of 15 g of tryptone, 6 g of yeast extract, 6 ml of glycerin (1 dose of feed per 3 l of culture liquid).
Режим внесения подпиток следующий: на момент начала прокачки (после 3-х суток культивирования) вносят 2 дозы подпитки, через сутки - 3 дозы подпитки, через сутки - 4 дозы подпитки и еще через сутки - 5 доз подпитки. После 8 суток культивирования уровень биомассы 42 г/л с содержанием бактериородопсина 1,55-1,6 г/л.The recharge regimen is as follows: at the time of the start of pumping (after 3 days of cultivation), 2 doses of recharge are introduced, after a day - 3 doses of recharge, after a day - 4 doses of recharge, and another day - 5 doses of recharge. After 8 days of cultivation, the biomass level is 42 g / l with a bacteriorhodopsin content of 1.55-1.6 g / l.
Пример 7.Example 7
Глубинное культивирование.Deep cultivation.
То же, что в примере 6, но вместо активированного угля используют ионообменную смолу АВ-16 ГС (промежуточно-основный анионит) в количестве 3,5 г (35 г на 1 л среды культивирования). Содержание кислорода поддерживается на уровне 10% от равновесного. После 8 суток культивирования уровень биомассы 40 г/л с содержанием бактериородопсина 1,35-1,4 г/л.The same as in example 6, but instead of activated carbon, the ion-exchange resin AB-16 GS (intermediate-basic anion exchange resin) is used in an amount of 3.5 g (35 g per 1 liter of cultivation medium). The oxygen content is maintained at 10% of the equilibrium. After 8 days of cultivation, the biomass level is 40 g / l with a bacteriorhodopsin content of 1.35-1.4 g / l.
Пример 8.Example 8
Глубинное культивирование.Deep cultivation.
То же, что в примере 6, но вместо прокачки через емкость с инкапсулированным активированным углем на четвертые сутки в биореактор вносят антиоксидант (цистеин, токоферол, сульфит натрия) в расчете 50-200 мг антиоксиданта на 100 мл культуральной жидкости. После чего продолжают культивирование. Содержание кислорода поддерживается на уровне 8% от равновесного. Выход биомассы 36 г/л с содержанием бактериородопсина 950 мг/л.The same as in example 6, but instead of pumping through an encapsulated activated carbon container on the fourth day, an antioxidant (cysteine, tocopherol, sodium sulfite) is added to the bioreactor in the calculation of 50-200 mg of antioxidant per 100 ml of culture liquid. Then continue cultivation. The oxygen content is maintained at 8% of equilibrium. The biomass yield of 36 g / l with a bacteriorhodopsin content of 950 mg / l.
Пример 9.Example 9
Глубинное культивирование.Deep cultivation.
То же, что в примере 6, но на четвертые сутки в биореактор вносят антиоксидант (цистеин, токоферол, сульфит натрия) в расчете 50-200 мг антиоксиданта на 100 мл культуральной жидкости. После чего продолжают культивирование. Содержание кислорода поддерживается на уровне 6% от равновесного. Выход биомассы 42 г/л с содержанием бактериородопсина 1,55-1,6 г/л.The same as in example 6, but on the fourth day an antioxidant (cysteine, tocopherol, sodium sulfite) is added to the bioreactor in the calculation of 50-200 mg of antioxidant per 100 ml of culture fluid. Then continue cultivation. The oxygen content is maintained at 6% of equilibrium. The biomass yield of 42 g / l with a bacteriorhodopsin content of 1.55-1.6 g / l.
Пример 10.Example 10
Глубинное культивирование.Deep cultivation.
То же, что в примере 7, но на четвертые сутки в биореактор вносят антиоксидант (цистеин, токоферол, сульфит натрия) в расчете 50-200 мг антиоксиданта на 100 мл культуральной жидкости. После чего продолжают культивирование. Содержание кислорода поддерживается на уровне 9% от равновесного. Выход биомассы 40 г/л с содержанием бактериородопсина 1,35-1,4 г/л.The same as in example 7, but on the fourth day an antioxidant (cysteine, tocopherol, sodium sulfite) is added to the bioreactor in the calculation of 50-200 mg of antioxidant per 100 ml of culture fluid. Then continue cultivation. The oxygen content is maintained at 9% of equilibrium. The biomass yield of 40 g / l with a bacteriorhodopsin content of 1.35-1.4 g / l.
Прототип.Prototype.
Подготовка посевного материала Halobacterium halobium штамма R1 осуществлялась в периодическом режиме. Культивирование проводилось в ферментере объемом 2,5 литра с объемом среды 1,3 литра при температуре 37°С и освещении галогеновыми лампами. Доля посевного материала - 2% объема культуральной жидкости. После 60 часов прирост биомассы прекратился. После 85 часов культивирования уровень биомассы составил 1,87 г/л с содержанием бактериородопсина 12 мг/л.The preparation of seed Halobacterium halobium strain R1 was carried out in periodic mode. The cultivation was carried out in a fermenter with a volume of 2.5 liters and a medium volume of 1.3 liters at a temperature of 37 ° C and illumination with halogen lamps. The share of inoculum is 2% of the volume of culture fluid. After 60 hours, biomass growth stopped. After 85 hours of cultivation, the biomass level was 1.87 g / l with a bacteriorhodopsin content of 12 mg / l.
Последующее культивирование проводили сначала в периодическом режиме в биореакторе рабочим объемом 1,4 л при доле посевного материала - 2% объема культуральной жидкости, температуре 37°С, освещении биореактора галогеновыми лампами. При достижении концентрации биомассы 1,78 г/л начинали циркуляцию его содержимого с помощью перистальтического насоса через внешний контур с мембранным модулем с полыми волокнами объемом 0,1 л для удерживания клеток галобактерий в биореакторе и вывода свободного от клеток пермеата из фильтрующего модуля. Свежая среда подавалась с той же скоростью, что удалялся фильтрат при скорости разбавления 0,1 час-1. В ходе культивирования концентрация растворенного кислорода поддерживалась выше 20% от насыщения путем регулирования скорости перемешивания или добавлением чистого кислорода. Через 10 суток культивирования концентрации клеток и бактериородопсина за 10 дней составили 30,3 г клеток по сухому весу на литр и 282 мг/л соответственно.Subsequent cultivation was first carried out periodically in a bioreactor with a working volume of 1.4 l with a seed fraction of 2% of the volume of the culture fluid, a temperature of 37 ° C, and lighting of the bioreactor with halogen lamps. When a biomass concentration of 1.78 g / l was reached, its contents were circulated using a peristaltic pump through an external circuit with a 0.1 L hollow fiber membrane module to hold halobacteria cells in the bioreactor and remove cell-free permeate from the filter module. Fresh medium was supplied at the same rate that the filtrate was removed at a dilution rate of 0.1 h -1 . During cultivation, the concentration of dissolved oxygen was maintained above 20% of saturation by adjusting the stirring speed or by adding pure oxygen. After 10 days of cultivation, the concentration of cells and bacteriorhodopsin in 10 days amounted to 30.3 g of cells by dry weight per liter and 282 mg / l, respectively.
Сравнение различных вариантов глубинного культивирования с прототипом приведено в таблице 1.Comparison of various options for deep cultivation with the prototype are shown in table 1.
Предлагаемый способ позволяет резко увеличить выход биомассы галобактерий и бактериородопсина, сократить время получения единицы массы целевого продукта и уменьшить затраты на производство бактериородопсина.The proposed method can dramatically increase the biomass yield of halobacteria and bacteriorhodopsin, reduce the time to obtain a unit mass of the target product and reduce the cost of production of bacteriorhodopsin.
ЛитератураLiterature
1. Sehgal S.N., Gibbons N.E. Effect of some metal ions on the growth of Halobacterium cutirubrum. Can. J. Microbiol, 1960, 6, 165-169.1. Sehgal S.N., Gibbons N.E. Effect of some metal ions on the growth of Halobacterium cutirubrum. Can. J. Microbiol, 1960, 6, 165-169.
2. Патент США N 5888791, приоритет 15.01.1997.2. US patent N 5888791, priority 01/15/1997.
3. Sang Yup Lee, Но Nam Chang, Young Soon Um, and Soon Ho Hong. Bacteriorhodopsin production by cell recycle culture of Halobacterium halobium. Biotechnology Letters, Vol 20, No8, August 1998, pp.763-765.3. Sang Yup Lee, But Nam Chang, Young Soon Um, and Soon Ho Hong. Bacteriorhodopsin production by cell recycle culture of Halobacterium halobium. Biotechnology Letters, Vol 20, No 8, August 1998, pp. 763-765.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2006118729/13A RU2323226C2 (en) | 2006-05-30 | 2006-05-30 | Method for preparing halophilic bacterium biomass |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2006118729/13A RU2323226C2 (en) | 2006-05-30 | 2006-05-30 | Method for preparing halophilic bacterium biomass |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2006118729A RU2006118729A (en) | 2007-12-10 |
| RU2323226C2 true RU2323226C2 (en) | 2008-04-27 |
Family
ID=38903580
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2006118729/13A RU2323226C2 (en) | 2006-05-30 | 2006-05-30 | Method for preparing halophilic bacterium biomass |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2323226C2 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2563349C1 (en) * | 2014-10-10 | 2015-09-20 | Сергей Ананьевич Тюрин | Bacteriorhodopsin obtaining method |
-
2006
- 2006-05-30 RU RU2006118729/13A patent/RU2323226C2/en not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| LEE SANG YUP et al. Bacteriorhodopsin prodaction by cell recycle culture of Halobacterium halobium. Biotechn. Lett, 1988, v.20, №8, p.763-765. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2563349C1 (en) * | 2014-10-10 | 2015-09-20 | Сергей Ананьевич Тюрин | Bacteriorhodopsin obtaining method |
| RU2563349C9 (en) * | 2014-10-10 | 2015-11-20 | Сергей Ананьевич Тюрин | Bacteriorhodopsin obtaining method |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2006118729A (en) | 2007-12-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN102168115A (en) | Industrialized production method of coenzyme Q10 | |
| CN101570771A (en) | Method for producing S-adenosylmethionine through fermentation of recombinant pichia pastoris | |
| RU2323226C2 (en) | Method for preparing halophilic bacterium biomass | |
| CN114214386A (en) | Method for producing astaxanthin by heterotrophic culture of chlorella | |
| RU2323251C2 (en) | Method for preparing halophilic bacterium biomass | |
| CN113151105A (en) | Pure culture method of anaerobic microorganisms | |
| CN104450849A (en) | Method for forcing dunaliella tertiolecta to accumulate beta-carotene | |
| CN108977402B (en) | Culture method for obtaining high-content glycerol glucoside algae cells | |
| CN101586133B (en) | Abamectin batch fermentation optimizing process | |
| JP6517158B2 (en) | Method for producing bacteriochlorophyll a | |
| CN107841465B (en) | Efficient marine culture method for haematococcus pluvialis | |
| KR20020057882A (en) | The method and apparatus for cultivation of minuteness algoid | |
| CN102358885B (en) | Production method of cylindrotheca clostetium | |
| CN108641961A (en) | A kind of method of High Density Cultivation Guava Leaf endophyte | |
| KR20080026387A (en) | Method for producing bifidobactrium sp. strains in a high yield using submerged membrane bioreactor | |
| Rodriguez-Valera et al. | Light as an energy source in continuous cultures of bacteriorhodopsin-containing halobacteria | |
| CN109355221B (en) | Culture medium and method for preparing vibrio cholerae ghost through high-density fermentation | |
| RU2199582C2 (en) | Method of preparing selenium-enriched spirulina biomass (spirulina platensis) | |
| RU2085212C1 (en) | Method of preparing the common brucellosis antigen for pa, pck and pdck | |
| CN117126898B (en) | Process for preparing valine by biotechnology | |
| CN110016489B (en) | Natamycin fermentation process based on cell immobilization technology | |
| KR20120108198A (en) | Method for high cell density culturing of lactic acid bacteria and producing their metabolites by using bioreactor equipped with internal filter system | |
| KR101058246B1 (en) | Mass production method of coenzyme Ｑ10 using Rhodobacter spheroids with coenzyme Ｑ10 ability | |
| KR100222389B1 (en) | Process for producing bacteriorhodopsin with halobacteria | |
| CN116875465A (en) | Method for rapidly culturing microalgae by directly utilizing air |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20150531 |