RU2320355C1 - Method for production of biomass from liquid lactobacterium autostrain - Google Patents
Method for production of biomass from liquid lactobacterium autostrain Download PDFInfo
- Publication number
- RU2320355C1 RU2320355C1 RU2006122146/13A RU2006122146A RU2320355C1 RU 2320355 C1 RU2320355 C1 RU 2320355C1 RU 2006122146/13 A RU2006122146/13 A RU 2006122146/13A RU 2006122146 A RU2006122146 A RU 2006122146A RU 2320355 C1 RU2320355 C1 RU 2320355C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- lactobacilli
- biomass
- medium
- liquid
- lactobacterium
- Prior art date
Links
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области микробиологии и медицины и касается изготовления биомассы аутоштамма лактобактерий жидкой, применяемой для коррекции и поддержания микробиоценоза кишечника и генитального тракта как с целью профилактики, так и для восстановления микрофлоры при дисбактериозе.The invention relates to the field of microbiology and medicine, and for the manufacture of biomass of an auto-strain of lactobacilli liquid, used to correct and maintain the microbiocenosis of the intestine and genital tract both for the purpose of prevention and for the restoration of microflora in case of dysbacteriosis.
Лактобактерии, входящие в состав нормофлоры, выполняют такие важные функции, как участие в переваривании и усвоении пищи путем активизации пристеночного пищеварения и утилизации пищевых субстратов. Вырабатывая в процессе жизнедеятельности молочную кислоту, перекись водорода, лизоцим, лактолин, выполняют антагонистическую функцию по отношению к патогенным и условно-патогенным микроорганизмам.Lactobacilli, which are part of normoflora, perform such important functions as participation in the digestion and assimilation of food by activating parietal digestion and utilizing food substrates. Producing lactic acid, hydrogen peroxide, lysozyme, lactoline in the process of life, they perform an antagonistic function with respect to pathogenic and conditionally pathogenic microorganisms.
Лактобактерии относятся к единственным представителям нормофлоры, подавляющим рост и развитие в кишечнике гнилостных бактерий, а также возбудителей кишечных инфекций, в том числе возбудителей дизентерии и сальмонеллеза.Lactobacilli are the only representatives of normoflora that suppress the growth and development of putrefactive bacteria in the intestines, as well as pathogens of intestinal infections, including pathogens of dysentery and salmonellosis.
Лактобактерии являются основным микробиологическим звеном, формирующим колонизационную резистентность (защиту) в желудке и тонком кишечнике.Lactobacilli are the main microbiological link that forms colonization resistance (defense) in the stomach and small intestine.
Известен способ получения препарата для лечения желудочно-кишечных заболеваний, который заключается в культивировании штамма Lactobaccilus Bulgaricus в питательной среде, приготовленной из сои в анаэробных условиях при 35-42°С с последующим высушиванием культуры, добавлением сахара, грануляцией полученной смеси и таблетированием (а.с. СССР №619187, опубл. 15.08.78 г.).A known method of obtaining a drug for the treatment of gastrointestinal diseases, which consists in cultivating a strain of Lactobaccilus Bulgaricus in a nutrient medium prepared from soybean under anaerobic conditions at 35-42 ° C, followed by drying the culture, adding sugar, granulating the resulting mixture and tabletting (a. S. USSR No. 619187, publ. 08/15/78).
Однако описанный способ предлагает применять для лечения желудочно-кишечных заболеваний только один вид лактобактерий, который не относится к одноименному виду лактобактерий кишечника потребителя препарата (в настоящее время выделено и изучено 67 видов лактобактерий) и не является его аутохтонной микрофлорой. Отсутствие на поверхности лактобактерий адгезинов, родственных клеткам слизистой желудочно-кишечного тракта, не способствует приживлению, размножению и колонизации Lactobaccilus Bulgaricus.However, the described method proposes to use for the treatment of gastrointestinal diseases only one type of lactobacilli, which does not belong to the same type of lactobacilli of the intestines of the consumer of the drug (currently 67 species of lactobacilli have been isolated and studied) and are not its autochthonous microflora. The absence of adhesins on the surface of lactobacilli related to the cells of the gastrointestinal mucosa does not contribute to the engraftment, reproduction and colonization of Lactobaccilus Bulgaricus.
Кроме того, при приеме бактерий, находящихся в состоянии покоя, которое достигается при длительном замораживании и лиофильной сушке, применяемых при производстве препарата, необходимо время (2-3 суток) для восстановления активности бактериальной клетки, что снижает эффект лечения.In addition, when taking bacteria at rest, which is achieved by prolonged freezing and freeze drying, used in the manufacture of the drug, it takes time (2-3 days) to restore the activity of the bacterial cell, which reduces the effect of treatment.
Известен способ изготовления аутоштаммов бифидо- и лактобактерий, включающий в себя этапы забора испражнений, выращивания бактерий и приготовления биомассы из них (а.с. СССР №1286212, опубл. 30.01.87 г.).There is a method of manufacturing auto-strains of bifidobacteria and lactobacilli, which includes the steps of taking stool, growing bacteria and preparing biomass from them (AS USSR No. 1286212, published on 01.30.87).
Однако суспензия бифидо- и лактобактерий, приготовленная указанным способом, требует немедленного применения и не хранится более 2-3 суток, так как производится без применения стабилизатора, который способствует сохранению бактерий аутоштамма в активном состоянии более длительное время. Не проводится контроль приготовленной суспензии на активность бактерий и отсутствие посторонней микрофлоры, что противоречит требованиям законодательной документации и не ограждает потребителя от заноса при приеме суспензии посторонней микрофлоры.However, a suspension of bifidobacteria and lactobacilli prepared in this way requires immediate use and is not stored for more than 2-3 days, since it is made without the use of a stabilizer, which helps maintain the auto-strain bacteria in an active state for a longer time. The prepared suspension is not monitored for bacterial activity and the absence of extraneous microflora, which contradicts the requirements of legislative documentation and does not protect consumers from skidding when receiving an extraneous microflora suspension.
Посев испражнений производится после титрования исследуемого материала стерильным физиологическим раствором, делая последовательно десятикратные разведения до 10-8. Однако не производится посев из нативного материала, что не представляет возможным получить культуру бифидо- и лактобактерий при снижении их содержания в кишечнике менее чем 100 КОЕ в 1 г химуса.Sowing feces is performed after titration of the test material with sterile saline, making ten-fold dilutions in succession up to 10 -8 . However, no inoculation is made from native material, which does not make it possible to obtain a culture of bifidobacteria and lactobacilli with a decrease in their content in the intestine of less than 100 CFU per 1 g of chyme.
Наиболее близким, принятым за прототип, является способ получения банка аутохтонных штаммов микроорганизмов для восстановления кишечного микробиоценоза человека (патент РФ №2126043, опубл. 10.02.99 г.).The closest adopted for the prototype is a method of obtaining a bank of autochthonous strains of microorganisms for the restoration of human intestinal microbiocenosis (RF patent No. 2126043, publ. 02.10.99).
Данный способ включает в себя отбор проб фекалий, выделение аутоштаммов бифидобактерий, лактобактерий, энтерококков, кишечной палочки, наработку биомассы, консервирование и хранение в течение жизни человека. Периодически банк аутохтонных штаммов пополняется биомассой поздних лет жизни. Ранее приготовленные образцы аутоштаммов периодически (не реже 1 раза в год) подвергаются контролю на активность и повторному процессу производства, если активность снижена более нормативной.This method includes sampling feces, the isolation of auto-strains of bifidobacteria, lactobacilli, enterococci, Escherichia coli, the production of biomass, conservation and storage during human life. Periodically, the bank of autochthonous strains is replenished with biomass of the late years of life. Previously prepared samples of auto-strains are periodically (at least 1 time per year) subjected to control for activity and the repeated production process, if activity is reduced more than normative.
Однако при изготовлении банка образцов делают посев испражнений с десятикратным разведением после титрования стерильным физиологическим раствором, минуя этап посева нативных испражнений. При такой методике исключается возможность получения культур при снижении их числа в кишечнике менее чем 100 КОЕ в 1 г.However, in the manufacture of the sample bank, the stool is sown with tenfold dilution after titration with sterile saline, bypassing the stage of sowing of the native stool. With this technique, the possibility of obtaining cultures is excluded with a decrease in their number in the intestine of less than 100 CFU in 1 g.
Выращивают и отбирают ограниченное число видов бифидобактерий, лактобактерий, энтерококков, кишечной палочки, хотя в настоящее время известно, например, одних только лактобактерий около 67 видов. Таким образом, виды лактобактерий, не относящихся к выше перечисленным, в образцы не попадают.A limited number of species of bifidobacteria, lactobacilli, enterococci, Escherichia coli are grown and selected, although currently, for example, about 67 species are known, for example, of lactobacilli alone. Thus, species of lactobacilli that are not related to the above, do not fall into the samples.
Не проводится контроль полученных аутоштаммов на активность и отсутствие посторонней микрофлоры, что является неотъемлемой частью производства. Многократное повторение процесса лиофильной сушки одного и того же ранее полученного образца аутоштамма приводит к снижению биохимической активности и утрате способности адгезировать и колонизировать слизистые оболочки желудочно-кишечного и генитального тракта.There is no monitoring of received auto-strains for activity and the absence of extraneous microflora, which is an integral part of production. Repeatedly repeating the freeze-drying process of the same previously obtained autostrain sample leads to a decrease in biochemical activity and loss of ability to adhere and colonize the mucous membranes of the gastrointestinal and genital tract.
Ректальное введение микробной массы через зонд затрудняет процесс приема биомассы, не представляется возможным производить эту процедуру в домашних условиях. Кроме того, введенные бактерии осядут в толстом кишечнике, в то время как желудок и тонкий кишечник, которые содержат в норме от 103 до 104 КОЕ лактобактерий в 1 мл химуса, заселению не подвергаются. А вместе с тем лактобактерии являются единственными микроорганизмами, создающими защиту слизистой желудка и 12-перстной кишки от таких условно-патогенных микроорганизмов, как хеликобактер, которые являются причиной возникновения гастритов и язвенной болезни желудка.Rectal introduction of microbial mass through a probe complicates the process of receiving biomass; it is not possible to carry out this procedure at home. In addition, the introduced bacteria will settle in the large intestine, while the stomach and small intestine, which normally contain 10 3 to 10 4 CFU of lactobacilli in 1 ml of chyme, are not exposed to settlement. At the same time, lactobacilli are the only microorganisms that protect the mucous membrane of the stomach and duodenum from such opportunistic microorganisms as Helicobacter, which cause gastritis and gastric ulcer.
Предложенный способ получения банка аутохтонных штаммов микроорганизмов является очень трудоемким, дорогостоящим и доступным очень ограниченному кругу потребителей. Он также не может быть использован в промышленном объеме, т.к. требует наличия большого количества морозильных установок для хранения ранее приготовленных образцов, а также постоянной работы (не реже 1 раза в год) с каждым образцом биомассы аутоштамма.The proposed method of obtaining a bank of autochthonous strains of microorganisms is very time-consuming, expensive and affordable for a very limited circle of consumers. It also cannot be used on an industrial scale, as It requires a large number of freezers for storing previously prepared samples, as well as continuous work (at least 1 time per year) with each sample of autostrain biomass.
Задачей, на решение которой направлено предлагаемое изобретение, является получение жидкой биомассы из клеток лактобактерий с родственной антигенной структурой клеткам кишечника потребителя, повышение качества полученной биомассы и увеличение срока сохранения активности клеток.The problem to which the invention is directed, is to obtain liquid biomass from lactobacillus cells with a related antigenic structure to the cells of the intestines of the consumer, to improve the quality of the resulting biomass and increase the shelf life of cell activity.
Техническим результатом является получение жидкой биомассы из клеток лактобактерий с родственной антигенной структурой клеткам кишечника потребителя, повышение качества полученной биомассы.EFFECT: obtaining liquid biomass from lactobacillus cells with a related antigenic structure to consumer intestinal cells, improving the quality of the obtained biomass.
Технический результат достигается тем, что способ получения биомассы аутоштамма лактобактерий жидкой, предусматривающий отбор пробы нативного материала, посев на селективную питательную среду, выращивание лактобактерий, выделение лактобактерий, их контроль, проведение повторного пассажа, выращивание полученной культуры лактобактерий в селективной питательной среде с последующим добавлением консерванта и контролем полученной биомассы лактобактерий, согласно изобретению, первоначальный посев в селективную питательную среду производят без разведения нативного материала, не позднее двух часов с момента взятия пробы, к биомассе лактобактерий добавляют консервант, в качестве которого используют сахарозо-желатиновую среду, в соотношении 1:1 соответственно.The technical result is achieved by the fact that the method of producing biomass of autostrain of lactobacilli is liquid, which involves sampling native material, seeding on a selective nutrient medium, growing lactobacilli, isolating lactobacilli, controlling them, re-passage, growing the obtained culture of lactobacilli in a selective nutrient medium followed by the addition of a preservative and control of the obtained biomass of lactobacilli, according to the invention, the initial sowing in a selective nutrient medium produced odyat undiluted native material, no later than two hours after sampling, are added to the lactic acid bacteria biomass preservative, which is used as a gelatin-sucrose medium in a ratio of 1: 1, respectively.
Между отличительными признаками и достигаемым техническим результатом существует следующая причинно-следственная связь.Between the distinguishing features and the achieved technical result, there is the following causal relationship.
Посев нативного материала (испражнений), без его разведения непосредственно на селективную питательную среду, в течение 2-х часов с момента взятия пробы, позволяет выделить лактобактерии даже при незначительном количестве их в содержимом кишечника.Sowing native material (feces), without diluting it directly on a selective nutrient medium, within 2 hours from the moment of sampling, allows you to isolate lactobacilli even with a small amount of them in the intestine.
Повторный пассаж и выращивание полученной чистой культуры лактобактерии в селективной жидкой среде, с последующим добавлением консерванта из расчета 1:1 способствует сохранению активности клеток на протяжении одного и более месяцев.Repeated passage and cultivation of the obtained pure culture of lactobacilli in a selective liquid medium, followed by the addition of a preservative at a ratio of 1: 1, helps to maintain cell activity for one or more months.
Проведение контроля полученной жидкой биомассы гарантирует ее качество.Monitoring the resulting liquid biomass guarantees its quality.
Предлагаемый способ осуществляют следующим образом.The proposed method is as follows.
Для получения биомассы аутоштамма лактобактерии отбирают пробу нативного материала (испражнений) у конкретного человека. Не позднее двух часов с момента взятия пробы осуществляют ее посев, без разведения, на селективную питательную среду, в качестве которой используют стандартную молочно-растительную среду (МРС-4), что позволяет выделить лактобактерии даже при незначительном количестве их в содержимом кишечника, то есть менее 100 КОЕ в 1 г. При использовании наименьшего разведения 10-1 и посеве по методике 0,1 мл возможно выделение лактобактерии при наличии их в содержимом кишечника в количестве более 100 КОЕ на 1 г. После выделения изучают морфологические, тинкториальные свойства выделенной культуры, подтверждающие принадлежность полученных клеток к семейству Lactobaccilacea...роду Lactobaccilus, т.к. на молочно-растительной среде возможен рост других бактерий, таких как стафилококки, грибы рода Candida, дрожжевые клетки, сходных по характеру роста с клетками лактобактерий.To obtain the lactobacillus autostrain biomass, a sample of native material (feces) is taken from a particular person. Not later than two hours after the sampling, it is sown, without dilution, on a selective nutrient medium, which is used as a standard milk-vegetable medium (MPC-4), which allows lactobacilli to be isolated even with a small amount of them in the intestinal contents, i.e. less than 100 CFU per 1 g. When using the smallest dilution of 10 -1 and sowing according to the 0.1 ml technique, lactobacilli can be isolated if they are present in the intestinal contents in an amount of more than 100 CFU per 1 g. After isolation, morphological, tinctor is studied the other properties of the isolated culture, confirming that the obtained cells belong to the Lactobaccilacea family ... genus Lactobaccilus, because other bacteria, such as staphylococci, fungi of the genus Candida, yeast cells similar in nature to the growth of lactobacillus cells, can grow on a dairy plant medium.
Проводят повторный пассаж выделенных лактобактерий на селективную питательную среду МРС-4 с целью выращивания чистых популяций клеток, пассаж и выращивание полученнной чистой культуры лактобактерий в селективной жидкой среде МРС-1, после чего добавляют консервант из расчета 1:1 с целью сохранения активности клеток на протяжении одного и более месяцев.Repeated passage of the selected lactobacilli to the selective nutrient medium MPC-4 is carried out in order to grow pure populations of cells, the passage and the cultivation of the obtained pure culture of lactobacilli in the selective liquid medium MPC-1, after which a preservative is added at a ratio of 1: 1 in order to maintain cell activity for one or more months.
Проводят контроль полученной жидкой биомассы на количество жизнеспособных лактобактерий и отсутствие посторонней микрофлоры, что оченнь важно при работе с культурами, выделенными из испражнений.The obtained liquid biomass is monitored for the number of viable lactobacilli and the absence of extraneous microflora, which is very important when working with cultures isolated from feces.
Пример. Нативный материал для посева забирают из порции испражнений конкретного человека в стерильную баночку или пробирку. Не позднее 2 часов с момента отбора пробы, после подготовки образца путем тщательного растирания в небольшом количестве стерильного физиологического раствора, производят посев на плотную селективную среду МРС-4.Example. Native material for inoculation is taken from a portion of the stool of a particular person in a sterile jar or test tube. Not later than 2 hours from the moment of sampling, after preparation of the sample by thoroughly rubbing in a small amount of sterile physiological saline, inoculation on a dense selective medium MPC-4 is performed.
Образцы с посевом нативного материала помещают в термостат, где выдерживают при температуре 36±1°С в течение 2-3 суток в атмосфере углекислого газа.Samples with inoculation of native material are placed in a thermostat, where they are kept at a temperature of 36 ± 1 ° C for 2-3 days in an atmosphere of carbon dioxide.
Изучают морфологические и тинкториальные свойства выделенной культуры, для чего ее образцы окрашивают по Граму.The morphological and tinctorial properties of the selected culture are studied, for which its samples are stained according to Gram.
Отношение микробов к окраске по Граму является важным дифференциальным признаком.The ratio of microbes to Gram stain is an important differential sign.
Изолируют колонию лактобактерий с помощью бактериологической петли, производят повторный пассаж и выращивание биомассы лактобактерий в течение 1-3 суток в условиях углекислого газа при температура 36±1°С, пассаж и выращивание полученной чистой культуры лактобактерий в селективной жидкой среде МРС-1, после чего вносят консервант в соотношении 1:1 из расчета одна часть селитивной жидкой питательной среды МРС-1 с выросшей чистой культурой и одна часть консерванта. Тщательно перемешивают. В качестве консерванта используют сахарозо-желатиновую среду.A colony of lactobacilli is isolated using a bacteriological loop, repeated passage and cultivation of lactobacillus biomass is carried out for 1-3 days under carbon dioxide conditions at a temperature of 36 ± 1 ° С, passage and cultivation of the obtained pure culture of lactobacilli in selective liquid medium МРС-1, after which make a preservative in the ratio 1: 1 at the rate of one part of the selective liquid nutrient medium MPC-1 with a grown pure culture and one part of the preservative. Mix thoroughly. As a preservative, a sucrose-gelatin medium is used.
Производят контроль каждого образца выращенной биомассы на отсутствие посторонней микрофлоры и количество жизнеспособных лактобактерий.Each sample of the grown biomass is checked for the absence of extraneous microflora and the number of viable lactobacilli.
Для определения чистоты культуры (осутствие посторонней микрофлоры) отбирают 1 мл биомассы и производят посев на плотные питательные среды: питательный агар с 9% натрия хлорида, среду Сабуро, среду Эндо. Посевы помещают в термостат и выращивают 24-72 часа, после инкубации посевы просматривают. Посторонней микрофлоры не должно быть.To determine the purity of the culture (absence of extraneous microflora), 1 ml of biomass is taken and inoculated on solid nutrient media: nutrient agar with 9% sodium chloride, Saburo medium, Endo medium. Crops are placed in a thermostat and grown 24-72 hours, after incubation, the crops are viewed. There should be no extraneous microflora.
Для определения количества жизнеспособных лактобактерий в 1 мл биомассы готовят ряд десятикратных разведений.To determine the number of viable lactobacilli in 1 ml of biomass, a series of ten-fold dilutions are prepared.
Из пробирки с разведеннием 10-5 отбирают 1 мл содержимого, производят посев на плотную среду МРС-4 и помещают в термостат при температуре 36±1°С на 44-48 часов в атмосферу углекислого газа.1 ml of the content is taken from a 10 -5 dilution tube, inoculated onto a tight MPC-4 medium and placed in a thermostat at a temperature of 36 ± 1 ° С for 44-48 hours in a carbon dioxide atmosphere.
По истечении времени инкубации проводят подсчет выросших колоний. Количество жизнеспособных лактобактерий в 1 мл биомассы определяют по формулеAfter the incubation time, the grown colonies are counted. The number of viable lactobacilli in 1 ml of biomass is determined by the formula
А=В×10n,A = B × 10 n ,
где А - количество жизнеспособных лактобактерий в 1 мл биомассы;where A is the number of viable lactobacilli in 1 ml of biomass;
В - число колоний, выросших на плотной среде МРС-4;In - the number of colonies grown on a dense medium MPC-4;
n - номер последней пробирки десятикратных разведений.n is the number of the last tube of ten-fold dilutions.
Биомасса должна содержать количество жизнеспособных лактобактерий не менее 106 КОЕ в 1 мл биомассы.The biomass should contain a number of viable lactobacilli of at least 10 6 CFU in 1 ml of biomass.
В связи с тем, что по предлагаемому способу получают жидкую биомассу из клеток лактобактерий с родственной антигенной структурой клеткам кишечника потребителя, она может успешно применяться для восстановления нарушений микробиоценоза кишечника и поддержания его в здоровом состоянии как при дисбактериозах, так и с профилактической целью.Due to the fact that according to the proposed method, liquid biomass is obtained from lactobacillus cells with a related antigenic structure to consumer intestinal cells, it can be successfully used to restore disorders of the intestinal microbiocenosis and maintain it in a healthy state both with dysbacteriosis and with a preventive purpose.
Особенно важно использование предлагаемого способа для нормализации микробиоценоза у беременных женщин с целью профилактики дисбактериоза у новорожденных и детей 1-го года жизни.It is especially important to use the proposed method to normalize microbiocenosis in pregnant women in order to prevent dysbiosis in newborns and children of the 1st year of life.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2006122146/13A RU2320355C1 (en) | 2006-06-20 | 2006-06-20 | Method for production of biomass from liquid lactobacterium autostrain |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2006122146/13A RU2320355C1 (en) | 2006-06-20 | 2006-06-20 | Method for production of biomass from liquid lactobacterium autostrain |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2320355C1 true RU2320355C1 (en) | 2008-03-27 |
Family
ID=39366127
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2006122146/13A RU2320355C1 (en) | 2006-06-20 | 2006-06-20 | Method for production of biomass from liquid lactobacterium autostrain |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2320355C1 (en) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2460778C1 (en) * | 2010-12-30 | 2012-09-10 | Александр Николаевич Суворов | Method for producing autoprobiotic of enterocuccus faecium being representative of indigenic host intestinal microflora |
| RU2546253C2 (en) * | 2013-04-25 | 2015-04-10 | Владимир Ильич Симаненков | Method of obtaining personified autoprobiotic product and method of treating syndrome of irritable bowl with thereof application |
| RU2602696C1 (en) * | 2015-05-19 | 2016-11-20 | Дмитрий Евгеньевич Денисов | Method of treating intestinal dysbacteriosis |
| RU2675315C1 (en) * | 2018-04-17 | 2018-12-18 | Общество с ограниченной ответственностью Торговый дом "ЭкоФарм сервис" | Method of selective allocation of auto strains of lactobacillus speciales from clinical material |
-
2006
- 2006-06-20 RU RU2006122146/13A patent/RU2320355C1/en not_active IP Right Cessation
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2460778C1 (en) * | 2010-12-30 | 2012-09-10 | Александр Николаевич Суворов | Method for producing autoprobiotic of enterocuccus faecium being representative of indigenic host intestinal microflora |
| RU2546253C2 (en) * | 2013-04-25 | 2015-04-10 | Владимир Ильич Симаненков | Method of obtaining personified autoprobiotic product and method of treating syndrome of irritable bowl with thereof application |
| RU2602696C1 (en) * | 2015-05-19 | 2016-11-20 | Дмитрий Евгеньевич Денисов | Method of treating intestinal dysbacteriosis |
| RU2675315C1 (en) * | 2018-04-17 | 2018-12-18 | Общество с ограниченной ответственностью Торговый дом "ЭкоФарм сервис" | Method of selective allocation of auto strains of lactobacillus speciales from clinical material |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP4772131B2 (en) | Method for producing fermented milk using novel lactic acid bacteria | |
| CN101338283B (en) | Lactobacillus casei and applications thereof in solid-state fermentation | |
| JP4862053B2 (en) | New lactic acid bacteria | |
| CN110577912B (en) | Lactobacillus gasseri and application thereof in preparing fermented milk | |
| CN106754470A (en) | The Lactobacillus rhamnosus in one plant of lacto source and its application | |
| Canganella et al. | Survival of undesirable micro-organisms in fruit yoghurts during storage at different temperatures | |
| Guetouache et al. | Characterization and identification of lactic acid bacteria isolated from traditional cheese (Klila) prepared from cows milk | |
| US20150201662A1 (en) | Health supplement food containing pediococcus acidilactici j9, and method for manufacturing same | |
| CN110819548A (en) | Lactobacillus paracasei strain LBP-YE01, culture thereof, bacterial solution thereof, method for selecting and preserving subculture strain and application thereof | |
| Hidayat et al. | Characteristics isolate bacteria lactic acid of origin digestive tract of broiler as probiotic candidate for poultry | |
| RU2320355C1 (en) | Method for production of biomass from liquid lactobacterium autostrain | |
| CN108004177A (en) | A kind of lactobacillus paracasei and its characteristic research of degradable nitrite | |
| RU2290435C1 (en) | Enzyme for production of fermented milk product | |
| JP4457364B2 (en) | New lactic acid bacteria and various products processed using the lactic acid bacteria | |
| CN109234181B (en) | Lactobacillus plantarum ZJUF HN9 and application thereof | |
| Krishnamoorthy et al. | Probiotic and antimicrobial activity of bacteria from fermented toddy of Cocus nucifera | |
| RU2210592C1 (en) | Strain of bacterium bifidobacterium longum 58b for preparing biologically active supplements regulating intestine microflora in children of early age | |
| JP4794593B2 (en) | Method for producing fermented milk using novel lactic acid bacteria | |
| KR20100005552A (en) | Fermented milk using lactobacillus plantarum m23 and preparation method thereof | |
| Maheshwari et al. | Characterization of probiotic bacteria from fermented fruit mix | |
| RU2731718C1 (en) | Bacterial strain lactobacillus acidophilus k 1902, used as starter of direct application for preparation of fermented milk products | |
| RU2731731C1 (en) | Bacterial strain lactobacillus acidophilus k 1901 used as starter of direct application for preparation of fermented milk products | |
| RU2253672C2 (en) | Bacterial probiotic preparation | |
| Gudisa et al. | Isolation, Identification, and Biochemical Characterization of Lactic Acid Bacteria from Okara | |
| KR100989638B1 (en) | Fermented milk Using Lactobacillus zeae RMK354 and Preparation method thereof |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20100621 |