RU2314309C2 - Pyrrolo[2.1-c][1.4]benzodiazepines, method for their preparing and pharmaceutical composition based on thereof - Google Patents
Pyrrolo[2.1-c][1.4]benzodiazepines, method for their preparing and pharmaceutical composition based on thereof Download PDFInfo
- Publication number
- RU2314309C2 RU2314309C2 RU2005133443/04A RU2005133443A RU2314309C2 RU 2314309 C2 RU2314309 C2 RU 2314309C2 RU 2005133443/04 A RU2005133443/04 A RU 2005133443/04A RU 2005133443 A RU2005133443 A RU 2005133443A RU 2314309 C2 RU2314309 C2 RU 2314309C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- formula
- methoxy
- pyrrolo
- solution
- benzodiazepin
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 17
- 229940049706 benzodiazepine Drugs 0.000 title claims abstract description 16
- 150000001557 benzodiazepines Chemical class 0.000 title claims abstract description 14
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 42
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 11
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims abstract description 9
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 7
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 198
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 66
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 50
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 39
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 39
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 26
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 claims description 21
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 claims description 20
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 claims description 15
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 15
- YUOCYTRGANSSRY-UHFFFAOYSA-N pyrrolo[2,3-i][1,2]benzodiazepine Chemical compound C1=CN=NC2=C3C=CN=C3C=CC2=C1 YUOCYTRGANSSRY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 12
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 11
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 238000010992 reflux Methods 0.000 claims description 7
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 7
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 claims description 6
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 claims description 6
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 claims description 6
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 claims description 6
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 6
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 claims description 6
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims description 6
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 claims description 5
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 claims description 5
- 230000003993 interaction Effects 0.000 claims description 5
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 claims description 5
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 claims description 5
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- AYJRCSIUFZENHW-UHFFFAOYSA-L barium carbonate Chemical compound [Ba+2].[O-]C([O-])=O AYJRCSIUFZENHW-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- 238000009835 boiling Methods 0.000 claims description 4
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 4
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- VZGDMQKNWNREIO-UHFFFAOYSA-N tetrachloromethane Chemical compound ClC(Cl)(Cl)Cl VZGDMQKNWNREIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 3
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims description 3
- 230000005907 cancer growth Effects 0.000 claims description 3
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- 150000002828 nitro derivatives Chemical class 0.000 claims description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 3
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical compound OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 claims description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M Sodium bicarbonate-14C Chemical compound [Na+].O[14C]([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M 0.000 claims description 2
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 claims description 2
- FJDQFPXHSGXQBY-UHFFFAOYSA-L caesium carbonate Chemical compound [Cs+].[Cs+].[O-]C([O-])=O FJDQFPXHSGXQBY-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- 229910000024 caesium carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims description 2
- 239000002024 ethyl acetate extract Substances 0.000 claims description 2
- XGZVUEUWXADBQD-UHFFFAOYSA-L lithium carbonate Chemical compound [Li+].[Li+].[O-]C([O-])=O XGZVUEUWXADBQD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- 229910052808 lithium carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- HQRPHMAXFVUBJX-UHFFFAOYSA-M lithium;hydrogen carbonate Chemical compound [Li+].OC([O-])=O HQRPHMAXFVUBJX-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- LWJROJCJINYWOX-UHFFFAOYSA-L mercury dichloride Chemical compound Cl[Hg]Cl LWJROJCJINYWOX-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- 229910000028 potassium bicarbonate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 235000015497 potassium bicarbonate Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000011736 potassium bicarbonate Substances 0.000 claims description 2
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 235000011181 potassium carbonates Nutrition 0.000 claims description 2
- TYJJADVDDVDEDZ-UHFFFAOYSA-M potassium hydrogencarbonate Chemical compound [K+].OC([O-])=O TYJJADVDDVDEDZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 claims description 2
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 2
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- GZNAASVAJNXPPW-UHFFFAOYSA-M tin(4+) chloride dihydrate Chemical compound O.O.[Cl-].[Sn+4] GZNAASVAJNXPPW-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- FWPIDFUJEMBDLS-UHFFFAOYSA-L tin(II) chloride dihydrate Substances O.O.Cl[Sn]Cl FWPIDFUJEMBDLS-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 claims 1
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 claims 1
- 201000008275 breast carcinoma Diseases 0.000 claims 1
- 239000010410 layer Substances 0.000 claims 1
- 201000001514 prostate carcinoma Diseases 0.000 claims 1
- 239000012047 saturated solution Substances 0.000 claims 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 claims 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 claims 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 abstract description 4
- 230000012010 growth Effects 0.000 abstract description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 abstract description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 3
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 abstract 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 abstract 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 abstract 1
- 230000007721 medicinal effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 77
- -1 imine amide PBD dimers Chemical class 0.000 description 50
- HCDXLUKTYFLIEM-UHFFFAOYSA-N 1,2-benzodiazepin-5-one Chemical compound O=C1C=CN=NC2=CC=CC=C12 HCDXLUKTYFLIEM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- 125000004106 butoxy group Chemical group [*]OC([H])([H])C([H])([H])C(C([H])([H])[H])([H])[H] 0.000 description 18
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 18
- 125000002572 propoxy group Chemical group [*]OC([H])([H])C(C([H])([H])[H])([H])[H] 0.000 description 17
- 125000004115 pentoxy group Chemical group [*]OC([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C(C([H])([H])[H])([H])[H] 0.000 description 16
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 14
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 9
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 9
- RCTYPNKXASFOBE-UHFFFAOYSA-M chloromercury Chemical compound [Hg]Cl RCTYPNKXASFOBE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 9
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 9
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 9
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 8
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 7
- 231100000111 LD50 Toxicity 0.000 description 6
- 238000004992 fast atom bombardment mass spectroscopy Methods 0.000 description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 6
- SVUOLADPCWQTTE-UHFFFAOYSA-N 1h-1,2-benzodiazepine Chemical compound N1N=CC=CC2=CC=CC=C12 SVUOLADPCWQTTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 5
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 5
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 4
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 4
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 4
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 4
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 4
- 0 COc(c(OC)c1)cc2c1NC[C@@](CC(*)C1)N1C2=O Chemical compound COc(c(OC)c1)cc2c1NC[C@@](CC(*)C1)N1C2=O 0.000 description 3
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 description 3
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 150000003335 secondary amines Chemical class 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 230000017095 negative regulation of cell growth Effects 0.000 description 2
- JIDDDPVQQUHACU-UHFFFAOYSA-N pyrrolidine-2-carbaldehyde Chemical compound O=CC1CCCN1 JIDDDPVQQUHACU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LJHYSXALHZINGT-VIFPVBQESA-N COc(c(OC)c1)cc2c1NC[C@H](CCC1)N1C2=O Chemical compound COc(c(OC)c1)cc2c1NC[C@H](CCC1)N1C2=O LJHYSXALHZINGT-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- HEUPDLFBMXQPDC-IENPIDJESA-N COc(cc(c(N=C[C@H](C1)N2CC1O)c1)C2=O)c1OC Chemical compound COc(cc(c(N=C[C@H](C1)N2CC1O)c1)C2=O)c1OC HEUPDLFBMXQPDC-IENPIDJESA-N 0.000 description 1
- 206010048610 Cardiotoxicity Diseases 0.000 description 1
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 1
- 230000004568 DNA-binding Effects 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 description 1
- VGQOVCHZGQWAOI-UHFFFAOYSA-N UNPD55612 Natural products N1C(O)C2CC(C=CC(N)=O)=CN2C(=O)C2=CC=C(C)C(O)=C12 VGQOVCHZGQWAOI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- 239000002168 alkylating agent Substances 0.000 description 1
- 229940100198 alkylating agent Drugs 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- VGQOVCHZGQWAOI-HYUHUPJXSA-N anthramycin Chemical compound N1[C@@H](O)[C@@H]2CC(\C=C\C(N)=O)=CN2C(=O)C2=CC=C(C)C(O)=C12 VGQOVCHZGQWAOI-HYUHUPJXSA-N 0.000 description 1
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 231100000259 cardiotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 150000002466 imines Chemical group 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- RAGFPHFDFVNLCG-INYQBOQCSA-N sibiromycin Chemical compound O[C@@H]1[C@@](O)(C)[C@@H](NC)[C@H](C)O[C@H]1OC(C(=C1O)C)=CC(C2=O)=C1N[C@H](O)[C@H]1N2C=C(\C=C\C)C1 RAGFPHFDFVNLCG-INYQBOQCSA-N 0.000 description 1
- RAGFPHFDFVNLCG-UHFFFAOYSA-N sibiromycin Natural products OC1C(O)(C)C(NC)C(C)OC1OC(C(=C1O)C)=CC(C2=O)=C1NC(O)C1N2C=C(C=CC)C1 RAGFPHFDFVNLCG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
Abstract
Description
Настоящее изобретение относится к новым пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепинам, которые применимы как потенциальные противоопухолевые средства. Данное изобретение относится к способу получения новых пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепиновых соединений, применимых в качестве противоопухолевых средств. Более конкретно, изобретение относится к способу получения 7-метокси-8-{n-[7-метокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11a-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси]алкилокси}-(11aS)-1,2,3,11a-тетрагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-она с различной длиной алифатической цепи и его 2-гидроксипроизводных, обладающих противораковой (противоопухолевой) активностью. Структурная формула новых пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепинов представляет собой формулу, указанную ниже:The present invention relates to new pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepines, which are applicable as potential antitumor agents. This invention relates to a method for producing new pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepine compounds useful as antitumor agents. More specifically, the invention relates to a method for producing 7-methoxy-8- {n- [7-methoxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4 ] benzodiazepin-5-one-8-yloxy] alkyloxy} - (11aS) -1,2,3,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one with different aliphatic chains and its 2-hydroxy derivatives having anticancer (antitumor) activity. The structural formula of the new pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepines is the formula shown below:
где R и R1 представляют собой Н и/или ОН; n принимает значения от 3 до 5.where R and R 1 represent H and / or OH; n takes values from 3 to 5.
В последние несколько лет появился растущий интерес к разработке новых пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепинов (PBDs). Данные антибиотики взаимодействуют ковалентно с ДНК c образованием N2-гуанинового аддукта, который находится внутри малой бороздки дуплексной ДНК за счет кислотно-лабильной аминальной связи с электрофильным имином в положении N10-C11 (Ссылки: Kunimoto, S.; Masuda, T.; Kanbayashi, N.; Hamada, M.; Naganawa, H.; Miyamoto, M.; Takeuchi, T. and Unezawa, H. J. Antibiot. 1980, 33, 665; Kohn, K.W. and Speous, C.L. J. Mol. Biol. 1970, 51, 551; Hurley, L.H., Gairpla, C. and Zmijewski, M. Biochem. Biophys. Act. 1977, 475, 521; Kaplan, D.J. and Hurley L.H. Biochemistry 1981, 20, 7572). Данные молекулы обладают правосторонним вращением, которое позволяет им следовать по кривизне малой бороздки В-формы двухцепочечной ДНК, включающей три пары оснований. Недавняя разработка посвящена связыванию двух PBD-единиц через их С8-положения с получением бифункциональных алкилирующих средств, способных сшивать ДНК (Ссылки: Thurston, D.E.; Bose, D.S.; Thomson, A.S.; Howard, P.W.; Leoni, A.; Croker, S.J.; Jenkins, T.C.; Neidle, S. and Hurley, L.H. J. Org. Chem. 1996, 61, 8141-8147). Недавно были синтезированы не сшитые смешанные имин-амидные PBD-димеры, которые обладают значительной ДНК-связывающей способностью и потенциальной противоопухолевой активностью (Kamal, A.; Laxman, N.; Ramesh, G.; Ramulu, P. and Srinivas, O. US Pat. No. 636233. dt 26-03-2002; Kamal, A.; Ramesh, G.; Laxman, N.; Ramulu, P.; Srinivas, O.; Neelima, K.; Kondapi, A.K.; Srinu, V.B.; Nagarajaram, H.M. J. Med. Chem. 2002, 45, 4679).In the past few years, there has been growing interest in the development of new pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepines (PBDs). These antibiotics interact covalently with DNA to form an N2-guanine adduct, which is located inside the minor groove of duplex DNA due to an acid-labile aminal bond with an electrophilic imine at position N10-C11 (Ref: Kunimoto, S .; Masuda, T .; Kanbayashi, N .; Hamada, M .; Naganawa, H .; Miyamoto, M .; Takeuchi, T. and Unezawa, HJ Antibiot. 1980 , 33, 665; Kohn, KW and Speous, CLJ Mol. Biol. 1970 , 51, 551 ; Hurley, LH, Gairpla, C. and Zmijewski, M. Biochem. Biophys. Act. 1977 , 475, 521; Kaplan, DJ and Hurley LH Biochemistry 1981 , 20, 7572). These molecules have a right-handed rotation, which allows them to follow the curvature of the minor groove of the B-form double-stranded DNA, which includes three base pairs. A recent development focuses on linking two PBD units through their C8 position to produce bifunctional alkylating agents capable of cross-linking DNA (Links: Thurston, DE; Bose, DS; Thomson, AS; Howard, PW; Leoni, A .; Croker, SJ; Jenkins, TC; Neidle, S. and Hurley, LHJ Org. Chem. 1996 , 61, 8141-8147). Recently, uncrosslinked mixed imine amide PBD dimers have been synthesized that have significant DNA binding ability and potential antitumor activity (Kamal, A .; Laxman, N .; Ramesh, G .; Ramulu, P. and Srinivas, O. US Pat. No. 636233. dt 26-03-2002; Kamal, A .; Ramesh, G .; Laxman, N .; Ramulu, P .; Srinivas, O .; Neelima, K .; Kondapi, AK; Srinu, VB ; Nagarajaram, HMJ Med. Chem. 2002 , 45, 4679).
Природные пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепины принадлежат к группе противоопухолевых антибиотиков, производимых видами Streptomyces. В последнее время существует большой прогресс в области PBD-систем, так как они могут распознавать и связывать специфические последовательности в ДНК. Примеры природных PBS включают антрамицин, DC-81, томаймицин, сибиромицин и неотрамицин.Natural pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepines belong to the group of antitumor antibiotics produced by Streptomyces species. Recently, there has been great progress in the field of PBD systems, since they can recognize and bind specific sequences in DNA. Examples of natural PBS include anthramycin, DC-81, tomaimycin, sibiromycin and neotramycin.
Однако клиническая эффективность данных антибиотиков снижена рядом ограничений, таких как слабая растворимость в воде, кардиотоксичность и метаболическая инактивация.However, the clinical efficacy of these antibiotics has been reduced by a number of limitations, such as poor water solubility, cardiotoxicity, and metabolic inactivation.
Соединения данного изобретения отличаются от представителей того же типа, С-8 связанных вторичных аминов, замещением фенольного водорода (11аS)-8-гидрокси-7-метокси-1,2,3,11а-тетрагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-она (DC-81).The compounds of this invention differ from representatives of the same type, C-8 linked secondary amines, by the substitution of phenolic hydrogen (11aS) -8-hydroxy-7-methoxy-1,2,3,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one (DC-81).
Пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-оны представляют собой класс соединений, которые связываются с ДНК нековалентными взаимодействиями, такими как гидрофобные, Ван-дер-ваальсовы взаимодействия и водородная связь между заместителями кольца и ДНК, и также являются ответственными за влияние на селективность последовательного связывания.Pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-ones are a class of compounds that bind to DNA with non-covalent interactions, such as hydrophobic, Van der Waals interactions and the hydrogen bond between ring substituents and DNA, and are also responsible for effect on the selectivity of sequential binding.
Задачей настоящего изобретения является создание соединения и его производных, обладающих противоопухолевой активностью, т.е., противораковыми активностями.An object of the present invention is to provide a compound and its derivatives having antitumor activity, i.e., anti-cancer activities.
Другой задачей настоящего изобретения являются новые пирроло[2.1-с][1.4]бензодиазепины, применимые в качестве противоопухолевых средств.Another object of the present invention are novel pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepines useful as antitumor agents.
Задачей настоящего изобретения также является способ получения новых пирроло[2.1-с][1.4]бензодиазепинов, применимых в качестве противоопухолевых средств.An object of the present invention is also a method for producing novel pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepines useful as antitumor agents.
Также задачей данного изобретения является фармацевтическая композиция для лечения злокачественных и других опухолей.Another objective of the invention is a pharmaceutical composition for the treatment of malignant and other tumors.
Еще одной задачей данного изобретения является способ лечения пациентов, страдающих от рака или родственных заболеваний.Another objective of the present invention is a method of treating patients suffering from cancer or related diseases.
В соответствии с изложенным данное изобретение относится к новому пирроло[2.1-с][1.4]бензодиазепину формулы V, где R=H, ОН, R1=H, ОН и n принимает значения от 3 до 5, и способу его получения.In accordance with the foregoing, this invention relates to a new pyrrolo [2.1-s] [1.4] benzodiazepine of the formula V, where R = H, OH, R 1 = H, OH and n takes values from 3 to 5, and the method for its preparation.
Один из вариантов осуществления данного изобретения относится к пирролобензодиазепину структурной формулы, представленной ниже, где R=R1=H и n=3.One of the embodiments of the present invention relates to pyrrolobenzodiazepine of the structural formula below, where R = R 1 = H and n = 3.
Один из вариантов осуществления данного изобретения относится к пирролобензодиазепину структурной формулы, представленной ниже, где R=R1=H и n=4.One of the embodiments of the present invention relates to pyrrolobenzodiazepine of the structural formula below, where R = R 1 = H and n = 4.
Еще один из вариантов осуществления данного изобретения относится к пирролобензодиазепину структурной формулы, представленной ниже, где R=R1=H и n=5.Another of the embodiments of the present invention relates to pyrrolobenzodiazepine of the structural formula below, where R = R 1 = H and n = 5.
Еще другой из вариантов осуществления данного изобретения относится к пирролобензодиазепину структурной формулы, представленной ниже, где R=OH, R1=H и n=3.Another of the embodiments of the present invention relates to pyrrolobenzodiazepine of the structural formula below, where R = OH, R 1 = H and n = 3.
Другой из вариантов осуществления данного изобретения относится к пирролобензодиазепину структурной формулы, представленной ниже, где R=OH, R1=H и n=4.Another of the embodiments of the present invention relates to pyrrolobenzodiazepine of the structural formula below, where R = OH, R 1 = H and n = 4.
Еще другой из вариантов осуществления данного изобретения относится к пирролобензодиазепину структурной формулы, представленной ниже, где R=OH, R1=H и n=5.Another of the embodiments of the present invention relates to pyrrolobenzodiazepine of the structural formula below, where R = OH, R 1 = H and n = 5.
В другом варианте осуществления данное изобретение относится к пирролобензодиазепиновому соединению структурной формулы, представленной ниже, где R=H, R1=H и n=3.In another embodiment, the invention relates to a pyrrolobenzodiazepine compound of the structural formula below, where R = H, R 1 = H and n = 3.
В другом варианте осуществления данное изобретение относится к пирролобензодиазепиновому соединению структурной формулы, представленной ниже, где R=H, R1=OH и n=4.In another embodiment, this invention relates to a pyrrolobenzodiazepine compound of the structural formula below, where R = H, R 1 = OH and n = 4.
В другом варианте осуществления данное изобретение относится к пирролобензодиазепиновому соединению структурной формулы, представленной ниже, где R=H, R1=OH и n=5.In another embodiment, this invention relates to a pyrrolobenzodiazepine compound of the structural formula below, where R = H, R 1 = OH and n = 5.
Другой вариант осуществления данного изобретения относится к активности пирроло[2.1-с][1.4]бензодиазепина формулы V против клеточных линий опухолей человека.Another embodiment of the invention relates to the activity of pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepine of formula V against human tumor cell lines.
Еще другой вариант осуществления данного изобретения относится к ростингибирующей активности данных соединений в отношении различных типов клеток рака, такого как лейкемия, меланома, рак толстой кишки, яичника, простаты, CNS, молочной железы, немелкоклеточной карциномы легкого.Another embodiment of the invention relates to the growth-inhibiting activity of these compounds against various types of cancer cells, such as leukemia, melanoma, colon, ovary, prostate, CNS, breast, non-small cell lung carcinoma.
Еще один вариант осуществления данного изобретения относится к способу получения соединений, причем указанный способ включает стадии: а) взаимодействие соединения формулы (I)Another embodiment of the present invention relates to a method for producing compounds, wherein said method comprises the steps of: a) reacting a compound of formula (I)
с соединением формулы (II)with the compound of formula (II)
в присутствии слабого основания в апротонном органическом растворителе, смешивающемся с водой, при кипячении с обратным холодильником в течение периода от 16 до 48 ч,in the presence of a weak base in an aprotic organic solvent miscible with water, while boiling under reflux for a period of 16 to 48 hours,
с получением соединения формулы (III)to obtain the compounds of formula (III)
в) восстановление нитросоединения формулы (III) с помощью дигидрата хлорида олова(II) в галогенированном растворителе при кипячении с обратным холодильником в течение периода 0,5 ч-2 ч, с) установление рН реакционной смеси со стадии (в) до 8 с помощью щелочного бикарбонатного раствора,c) reduction of the nitro compound of formula (III) using tin (II) chloride dihydrate in a halogenated solvent under reflux for a period of 0.5 h-2 h, c) setting the pH of the reaction mixture from step (c) to 8 using alkaline bicarbonate solution,
d) экстрагирование раствора со стадии (с) этилацетатом, упаривание этилацетатного экстракта при пониженном давлении с получением неочищенного соединения формулы (IV)d) extracting the solution from step (c) with ethyl acetate, evaporating the ethyl acetate extract under reduced pressure to obtain a crude compound of formula (IV)
e) растворение соединения формулы (IV) в смеси ацетонитрил/Н2О при соотношении 4:1,15 мл, добавление хлорида ртути(II), карбоната кальция, перемешивание при комнатной температуре от 6 ч до 12 ч,e) dissolving the compound of formula (IV) in a mixture of acetonitrile / H 2 O at a ratio of 4: 1.15 ml, adding mercury (II) chloride, calcium carbonate, stirring at room temperature from 6 hours to 12 hours,
f) фильтрование и упаривание органического слоя при пониженном давлении с последующим разбавлением остатка в этилацетате,f) filtering and evaporating the organic layer under reduced pressure, followed by dilution of the residue in ethyl acetate,
g) добавление насыщенного раствора бикарбоната натрия к этилацетатному раствору со стадии (f) при комнатной температуре,g) adding a saturated sodium bicarbonate solution to the ethyl acetate solution from step (f) at room temperature,
h) фильтрование полученного раствора со стадии (g) через слой броунмиллерита, упаривание фильтрата с получением соединения формулы Vh) filtering the resulting solution from step (g) through a bed of brownmillerite, evaporating the filtrate to obtain a compound of formula V
k) с последующей очисткой сырого соединения со стадии (h) на силикагеле в качестве адсорбента, используя в качестве элюента смесь метанол/этилацет при соотношении 2:8, с получением очищенного соединения формулы (V), в которой R и R1 принимают значения, определенные выше.k) followed by purification of the crude compound from step (h) on silica gel as an adsorbent, using a 2: 8 methanol / ethyl acetate mixture as eluent to obtain a purified compound of formula (V) in which R and R 1 are as defined above.
В еще другом варианте осуществления апротонный органический растворитель, применяемый на стадии (а), выбран из группы, включающей тетрагидрофуран, ацетон или диметилформамид.In yet another embodiment, the aprotic organic solvent used in step (a) is selected from the group consisting of tetrahydrofuran, acetone or dimethylformamide.
В еще другом варианте осуществления слабое основание, используемое на стадии (а), выбрано из группы карбоната натрия, карбоната калия, карбоната лития, карбоната бария и карбоната цезия.In yet another embodiment, the weak base used in step (a) is selected from the group of sodium carbonate, potassium carbonate, lithium carbonate, barium carbonate and cesium carbonate.
В еще другом варианте осуществления галогенированный растворитель, используемый на стадии (в), выбран из группы, включающей четыреххлористый углерод, хлороформ и дихлорметан, предпочтительно дихлорметан.In yet another embodiment, the halogenated solvent used in step (c) is selected from the group consisting of carbon tetrachloride, chloroform and dichloromethane, preferably dichloromethane.
Еще другой вариант осуществления относится к процессу, где щелочной карбонатный раствор, используемый на стадии (с), выбран из растворов бикарбоната натрия, бикарбоната калия или бикарбоната лития.Another embodiment relates to a process where the alkaline carbonate solution used in step (c) is selected from solutions of sodium bicarbonate, potassium bicarbonate or lithium bicarbonate.
Таким образом, данный способ относится к способу получения пирроло[2.1-с][1.4]бензодиазепинов формулы V, где R представляет собой Н, ОН, R1 представляет собой Н, ОН и n принимает значения от 3 до 5, который включает: взаимодействие диэтилтиоацеталя (25)-N-[4-(n-бромалкокси)-5-метокси-2-нитробензоил]пирролидин-2-карбоксальдегида, где R1 представляет собой Н, ОН и n принимает значения 3-5, соединений формулы I, со вторичным амином формулы II, где R представляет собой Н и ОН, в присутствии неорганических слабых оснований, подобных К2СО3, CsCO3 и ВаСО3, в присутствии апротонных смешивающихся с водой органических растворителей, подобных ацетону, ТГФ и ДМФА, кипячение с обратным холодильником в течение вплоть до 12-48 часов, выделение диэтилтиоацеталя (2S)-N-{4-[n-(7-метокси-(11aS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5H-пирроло[2.1-с][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси)алкилокси]-5-метокси-2-нитробензоил}пирролидин-2-карбоксальдегида, формулы III, где R представляет собой Н, ОН, R1 представляет собой Н, ОН и n принимает значения от 3 до 5, обычными способами, восстановление вышеуказанных нитросоединений формулы III с помощью SnCl2·2H2O в присутствии органического растворителя при температуре вплоть до кипячения с обратным холодильником, выделение диэтилтиоацеталя (25)-N-{4-[n-(7-метокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5H-пирроло[2.1-с][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси)алкокси]-5-метокси-2-амино-бензоил}пирролидин-2-карбоксальдегида формулы IV, где R представляет собой Н, ОН, R1 представляет собой Н, ОН и n принимает значения от 3 до 5, известными способами, взаимодействие вышеуказанного аминосоединения формулы IV с последующим снятием защитных групп традиционным способом с получением новых пирроло[2.1-с][1.4]бензодиазепинов формулы V, где R представляет собой Н, ОН, R1 представляет собой Н, ОН и n принимает значения от 3 до 5.Thus, this method relates to a method for producing pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepines of formula V, where R represents H, OH, R 1 represents H, OH and n takes values from 3 to 5, which includes: interaction diethylthioacetal (25) -N- [4- (n-bromoalkoxy) -5-methoxy-2-nitrobenzoyl] pyrrolidine-2-carboxaldehyde, where R 1 is H, OH and n is 3-5, compounds of formula I, with a secondary amine of formula II, where R is H and OH, in the presence of inorganic weak bases such as K 2 CO 3 , CsCO 3 and BaCO 3 , in the presence of aprotic water-miscible organic solvents like acetone, THF and DMF, refluxing for up to 12-48 hours, isolation of diethylthioacetal (2S) -N- {4- [n- (7-methoxy- (11aS) - 1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one-8-yloxy) alkyloxy] -5-methoxy-2-nitrobenzoyl} pyrrolidin-2- carboxaldehyde of formula III, wherein R represents H, OH, R 1 represents H, OH, and n assumes values from 3 to 5, by conventional methods, recovery of nitro compounds of formula III above using SnCl 2 · 2H 2 O in the presence of organic solvent at a temperature up to boiling under reflux, isolation of diethylthioacetal (25) -N- {4- [n- (7-methoxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H- pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one-8-yloxy) alkoxy] -5-methoxy-2-amino-benzoyl} pyrrolidin-2-carboxaldehyde of formula IV, where R is H, OH, R 1 represents H, OH and n takes values from 3 to 5, by known methods, the interaction of the above amino compounds of formula IV followed by deprotection in the traditional way to obtain new pyrrolo [2.1-c] [1.4] benz diazepines of formula V, wherein R is H, OH, R 1 represents H, OH, and n assumes values from 3 to 5.
Еще один вариант осуществления данного изобретения относится к фармацевтической композиции, эффективной против клеточных линий опухолей человека, причем указанная композиция содержит эффективное количество производного пирроло[2.1-с][1.4]бензодиазепина формулы V, где R и R1 представляют собой Н и/или ОН; и n принимает значения от 3 до 5, вместе с фармацевтически приемлемыми добавками.Another embodiment of the invention relates to a pharmaceutical composition effective against human tumor cell lines, said composition comprising an effective amount of a pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepine derivative of formula V, where R and R 1 are H and / or OH ; and n ranges from 3 to 5, together with pharmaceutically acceptable additives.
Композиция вводится млекопитающим, включая людей. Композиция вводится перорально, системно или любыми другими обычными способами. Фармацевтически приемлемые добавки выбраны из группы, включающей наполнители, разбавители, растворители, носители, лубриканты, связывающие средства и стабилизаторы.The composition is administered to mammals, including humans. The composition is administered orally, systemically, or by any other conventional means. Pharmaceutically acceptable additives are selected from the group of excipients, diluents, solvents, carriers, lubricants, binders and stabilizers.
В другом варианте осуществления данного изобретения указанная композиция ингибирует рост раковых клеток.In another embodiment of the invention, said composition inhibits the growth of cancer cells.
В другом варианте осуществления указанная композиция ингибирует рост клеток рака, такого как лейкемия, меланома, рак толстой кишки, яичника, простаты, CNS, молочной железы, немелкоклеточной карциномы легкого.In another embodiment, said composition inhibits the growth of cancer cells such as leukemia, melanoma, colon, ovarian, prostate, CNS, breast, non-small cell lung carcinoma.
Предшественники, диэтилтиоацеталь (2S)-N-[4-(n-бромалкокси)-5-метокси-2-нитробензоил]пирролидин-2-карбоксальдегида формулы I получен способами, описанными в литературе (ссылка: Kamal, А.; Laxman, N; Ramesh, G.; Nileema, К.; Kondapi, А.К. Chem. Соттип.2001, 437), и 8-гидрокси-7-метокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11a-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-с][1.4]бензодиазепин-5-он формулы II получен по литературному способу (ссылка: Kamal, A.; Howard, P.W.; Reddy, B.S.N.; Reddy, B.S.P.; Thurston, D.E. Tetrahedron 1997, 53, 3223-3230).Precursors, diethylthioacetal (2S) -N- [4- (n-bromoalkoxy) -5-methoxy-2-nitrobenzoyl] pyrrolidine-2-carboxaldehyde of formula I was prepared by the methods described in the literature (reference: Kamal, A .; Laxman, N ; Ramesh, G .; Nileema, K .; Kondapi, A.K. Chem. Sottip. 2001, 437), and 8-hydroxy-7-methoxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a -hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one of formula II was prepared according to the literature method (ref: Kamal, A .; Howard, PW; Reddy, BSN; Reddy, BSP; Thurston, DE Tetrahedron 1997 , 53, 3223-3230).
Некоторые типичные соединения формулы V данного изобретения представлены ниже: 7-метокси-8-{3-[7-метокси-(11aS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-с][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси]пропокси}-(11аS)-1,2,3,11а-тетрагидро-5Н-пирроло[2.1-с][1.4]бензодиазепин-5-он;Some typical compounds of formula V of the present invention are presented below: 7-methoxy-8- {3- [7-methoxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one-8-yloxy] propoxy} - (11aS) -1,2,3,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one;
7-метокси-8-{4-[7-метокси-(2R)-гидрокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11a-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси]бутокси}-(11aS)-1,2,3,11a-тетрагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он;7-methoxy-8- {4- [7-methoxy- (2R) -hydroxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepine -5-one-8-yloxy] butoxy} - (11aS) -1,2,3,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one;
7-метокси-8-{5-[7-метокси-(2R)-гидрокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11a-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси]пентилокси}-(11aS)-1,2,3,11a-тетрагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он;7-methoxy-8- {5- [7-methoxy- (2R) -hydroxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepine -5-one-8-yloxy] pentyloxy} - (11aS) -1,2,3,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one;
7-метокси-8-{3-[7-метокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11a-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси]пропокси}-(2R)-гидрокси-(11aS)-1,2,3,11a-тетрагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он;7-methoxy-8- {3- [7-methoxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one-8 -yloxy] propoxy} - (2R) -hydroxy- (11aS) -1,2,3,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one;
7-метокси-8-{4-[7-метокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11a-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси]бутокси}-(2R)-гидрокси-(11aS)-1,2,3,11a-тетрагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он;7-methoxy-8- {4- [7-methoxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one-8 -yloxy] butoxy} - (2R) -hydroxy- (11aS) -1,2,3,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one;
7-метокси-8-{5-[7-метокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11a-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси]пентилокси}-(2R)-гидрокси-(11aS)-1,2,3,11a-тетрагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он.7-methoxy-8- {5- [7-methoxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one-8 -yloxy] pentyloxy} - (2R) -hydroxy- (11aS) -1,2,3,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one.
Способ получения новых пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепинов раскрыт и заявлен заявителями в параллельной заявке, находящейся на рассмотрении.A method for producing new pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepines is disclosed and claimed by the applicants in a parallel application pending.
Данные новые аналоги пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепинов, соединенные в положении С-8, проявили обещающую противораковую активность на различных клеточных линиях. Синтезированные молекулы со свойством к потенциальному последовательному селективному связыванию с ДНК имеют огромное биологическое значение. Данное свойство привело к конструированию и синтезу новых представителей, которые представлены на схеме 1, включающей:These new analogues of pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepines, connected at position C-8, showed promising anticancer activity in various cell lines. The synthesized molecules with the property of potential sequential selective binding to DNA are of great biological importance. This property led to the design and synthesis of new representatives, which are presented in scheme 1, including:
1. Эфирное связывание в положении С-8 промежуточных продуктов DC-81 с вторичным амином.1. Ether linkage at the C-8 position of DC-81 intermediates with a secondary amine.
2. Кипячение реакционной смеси с обратным холодильником в течение 24-48 ч.2. Boiling the reaction mixture under reflux for 24-48 hours
3. Синтез противоопухолевых PBD-иминов со свойствами антибиотиков, соединенных в положении С-8.3. Synthesis of antitumor PBD-imines with the properties of antibiotics connected at position C-8.
4. Очистка продукта колоночной хроматографией с помощью различных растворителей подобных этилацетату, гексану и метанолу.4. Purification of the product by column chromatography using various solvents like ethyl acetate, hexane and methanol.
Следующие примеры приведены в качестве иллюстраций и не должны быть восприняты как средства ограничения объема изобретения.The following examples are provided as illustrations and should not be taken as a means of limiting the scope of the invention.
Краткое описание сопровождающего чертежаBrief description of the accompanying drawing
Чертеж представляет собой схематическую диаграмму получения соединения общей формулы V.The drawing is a schematic diagram of a compound of General formula V.
Пример 1Example 1
Раствор диэтилтиоацеталя (2S)-N-[4-(3-бромпропокси)-5-метокси-2-нитробензоил]пирролидин-2-карбоксальдегида формулы I (521 мг, 1 ммоль), 8-гидрокси-7-метокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-она (248 мг, 1 ммоль) формулы II и К2СО3 (414 мг, 3 ммоль) в сухом ацетоне (20 мл) кипятили с обратным холодильником в течение 48 ч. После завершения реакции, контролируемой ТСХ (TLC), EtOAc, реакционную смесь выливали в воду и затем экстрагировали этилацетатом. Упаривание органического слоя приводило к неочищенному продукту, который затем очищали колоночной хроматографией на силикагеле при элюировании EtOAc:гексан (8:2), получая чистый диэтилтиоацеталь (2S)-N-{4-[3-(7-метокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси)пропокси]-5-метокси-2-нитробензоил}пирролидин-2-карбоксальдегида III.A solution of diethylthioacetal (2S) -N- [4- (3-bromopropoxy) -5-methoxy-2-nitrobenzoyl] pyrrolidine-2-carboxaldehyde of the formula I (521 mg, 1 mmol), 8-hydroxy-7-methoxy- (11aS ) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one (248 mg, 1 mmol) of formula II and K 2 CO 3 (414 mg, 3 mmol) in dry acetone (20 ml) was refluxed for 48 hours. After completion of the TLC-controlled reaction (TLC), EtOAc, the reaction mixture was poured into water and then extracted with ethyl acetate. Evaporation of the organic layer led to a crude product, which was then purified by silica gel column chromatography, eluting with EtOAc: hexane (8: 2), to obtain pure diethylthioacetal (2S) -N- {4- [3- (7-methoxy- (11aS) - 1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one-8-yloxy) propoxy] -5-methoxy-2-nitrobenzoyl} pyrrolidin-2- carboxaldehyde III.
1ЯМР (CDCl3) δ 1,35-1,45 (м, 6H), 1,70-2,45 (м,10Н), 2,72-2,90 (м, 4H), 3,20-3,28 (м, 3Н), 3,50-3,58 (м, 1H), 3,62-3,75 (м, 1H) 3,80-3,90 (м, 4H), 4,20 (т, 2H), 4,35 (т, 2H), 4,65-4,75 (м, 1H), 4,85 (д, 1H, J=4,28 Гц), 6,25 (с, 1H), 6,82 (с, 1H), 7,48 (с, 1H), 7,72 (с, 1H); МС (FAB), 689 [М+Н]+. 1 NMR (CDCl 3 ) δ 1.35-1.45 (m, 6H), 1.70-2.45 (m, 10H), 2.72-2.90 (m, 4H), 3.20- 3.28 (m, 3H), 3.50-3.58 (m, 1H), 3.62-3.75 (m, 1H) 3.80-3.90 (m, 4H), 4.20 (t, 2H), 4.35 (t, 2H), 4.65-4.75 (m, 1H), 4.85 (d, 1H, J = 4.28 Hz), 6.25 (s, 1H), 6.82 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.72 (s, 1H); MS (FAB), 689 [M + H] + .
Диэтилтиоацеталь (2S)-N-{4-[3-(7-метокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси)пропокси]-5-метокси-2-нитробензоил}пирролидин-2-карбоксальдегида III (688 мг, 1,0 ммоль) растворяли в дихлорметане (5 мл), метаноле (10 мл) и добавляли SnCl2.2H2O (1,124 г, 5,0 ммоль), смесь кипятили с обратным холодильником в течение 1,5 ч. Затем рН реакционной смеси осторожно доводили до 8 с помощью насыщенного раствора NaHCO3 и смесь экстрагировали этилацетатом (3х20 мл). Объединенную органическую фазу сушили над Na2SO4 и упаривали в вакууме, получая неочищенный диэтилтиоацеталь (2S)-N-{4-[3-(7-метокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси)пропокси]-5-метокси-2-аминобензоил}пирролидин-2-карбоксальдегида IV.Diethylthioacetal (2S) -N- {4- [3- (7-methoxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepine-5 -one-8-yloxy) propoxy] -5-methoxy-2-nitrobenzoyl} pyrrolidine-2-carboxaldehyde III (688 mg, 1.0 mmol) was dissolved in dichloromethane (5 ml), methanol (10 ml) and SnCl 2 was added .2H 2 O (1.124 g, 5.0 mmol), the mixture was refluxed for 1.5 hours. Then the pH of the reaction mixture was carefully adjusted to 8 with saturated NaHCO 3 solution and the mixture was extracted with ethyl acetate (3 × 20 ml). The combined organic phase was dried over Na 2 SO 4 and evaporated in vacuo to give the crude diethylthioacetal (2S) -N- {4- [3- (7-methoxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one-8-yloxy) propoxy] -5-methoxy-2-aminobenzoyl} pyrrolidin-2-carboxaldehyde IV.
Раствор диэтилтиоацеталя (2S)-N-{4-[3-(7-метокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси)пропокси]-5-метокси-2-аминобензоил}пирролидин-2-карбоксальдегида IV (658 мг, 1 ммоль), HgCl2 (794 мг, 2,93 ммоль) и СаСО3 (300 мг, 3 ммоль) в СН3CN/H2O (4:1, 15 мл) перемешивали при комнатной температуре 12 ч с хроматографическим контролем (ТСХ, EtOAc) до полного исчезновения исходного продукта. Органический слой упаривали в вакууме и остаток разбавляли EtOAc. К содержимому при комнатной температуре медленно добавляли насыщенный раствор NaHCO3, смесь фильтровали через броунмиллерит и промывали этилацетатом. Фильтрат упаривали в вакууме, получая неочищенный 7-метокси-8-{3-[7-метокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11a-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси]пропокси}-(11aS)-1,2,3,11a-тетрагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он формулы V, который затем очищали колоночной хроматографией на силикагеле при элюировании метанол:EtOAc (2:8).Diethylthioacetal solution (2S) -N- {4- [3- (7-methoxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepine- 5-one-8-yloxy) propoxy] -5-methoxy-2-aminobenzoyl} pyrrolidin-2-carboxaldehyde IV (658 mg, 1 mmol), HgCl 2 (794 mg, 2.93 mmol) and CaCO 3 (300 mg , 3 mmol) in CH 3 CN / H 2 O (4: 1, 15 ml) was stirred at room temperature for 12 h with chromatographic control (TLC, EtOAc) until the starting product completely disappeared. The organic layer was evaporated in vacuo and the residue was diluted with EtOAc. Saturated NaHCO 3 solution was slowly added to the contents at room temperature, the mixture was filtered through celite and washed with ethyl acetate. The filtrate was evaporated in vacuo to give crude 7-methoxy-8- {3- [7-methoxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one-8-yloxy] propoxy} - (11aS) -1,2,3,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one of formula V, which was then purified by column chromatography on silica gel with elution with methanol: EtOAc (2: 8).
1H ЯМР (CDCl3) δ 1,65-2,45 (м, 10Н), 3,15-3,25 (м, 2H), 3,48-3,75 (м, 4H), 3,78-3,88 (м, 4H), 3,90 (с, 3H), 4,25-4,35 (м, 5H), 6,18 (с, 1H), 6,82 (с, 1H), 7,48 (с, 1H), 7,52 (с, 1Н), 7,65 (d, 1H, J=4,8 Гц); МС (FAB) 535 [М+H]+. 1 H NMR (CDCl 3 ) δ 1.65-2.45 (m, 10H), 3.15-3.25 (m, 2H), 3.48-3.75 (m, 4H), 3.78 -3.88 (m, 4H), 3.90 (s, 3H), 4.25-4.35 (m, 5H), 6.18 (s, 1H), 6.82 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.65 (d, 1H, J = 4.8 Hz); MS (FAB) 535 [M + H] + .
Пример 2Example 2
Раствор диэтилтиоацеталя (2S)-N-[4-(4-бромбутокси)-5-метокси-2-нитробензоил]пирролидин-2-карбоксальдегида формулы I (535 мг, 1 ммоль), 8-гидрокси-7-метокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-она (248 мг, 1 ммоль) формулы II и К2СО3 (414 мг, 3 ммоль) в сухом ацетоне (20 мл) кипятили с обратным холодильником 48 ч. После завершения реакции, контролируемой ТСХ, EtOAc, реакционную смесь выливали в воду и затем экстрагировали этилацетатом. Упаривание органического слоя приводило к неочищенному продукту, который затем очищали колоночной хроматографией на силикагеле при элюировании EtOAc:гексан (8:2), получая чистый диэтилтиоацеталь (2S)-N-{4-[4-(7-метокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси)бутокси]-5-метокси-2-нитробензоил}пирролидин-2-карбоксальдегида III.A solution of diethylthioacetal (2S) -N- [4- (4-bromobutoxy) -5-methoxy-2-nitrobenzoyl] pyrrolidine-2-carboxaldehyde of the formula I (535 mg, 1 mmol), 8-hydroxy-7-methoxy- (11aS ) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one (248 mg, 1 mmol) of formula II and K 2 CO 3 (414 mg, 3 mmol) in dry acetone (20 ml) was refluxed for 48 hours. After completion of the reaction, controlled by TLC, EtOAc, the reaction mixture was poured into water and then extracted with ethyl acetate. Evaporation of the organic layer led to a crude product, which was then purified by silica gel column chromatography, eluting with EtOAc: hexane (8: 2), to obtain pure diethylthioacetal (2S) -N- {4- [4- (7-methoxy- (11aS) - 1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one-8-yloxy) butoxy] -5-methoxy-2-nitrobenzoyl} pyrrolidin-2- carboxaldehyde III.
1H ЯМР (CDCl3) δ 1,35-1,45 (м, 6Н), 1,70-2,45 (м, 12H), 2,72-2,90 (м, 4H), 3,20-3,28 (м, 3Н), 3,50-3,58 (м, 1H), 3,62-3,75 (м, 1H) 3,80-3,90 (м, 4H), 4,20 (т, 2H), 4,35 (т, 2Н), 4,65-4,75 (м, 1H), 4,85 (d, 1H, J=4,28 Гц), 6,25 (с, 1H), 6,82 (с, 1H), 7,48 (с, 1H), 7,72 (с, 1H); МС (FAB) 703 [М+Н]+. 1 H NMR (CDCl 3 ) δ 1.35-1.45 (m, 6H), 1.70-2.45 (m, 12H), 2.72-2.90 (m, 4H), 3.20 -3.28 (m, 3H), 3.50-3.58 (m, 1H), 3.62-3.75 (m, 1H) 3.80-3.90 (m, 4H), 4, 20 (t, 2H), 4.35 (t, 2H), 4.65-4.75 (m, 1H), 4.85 (d, 1H, J = 4.28 Hz), 6.25 (s , 1H); 6.82 (s, 1H); 7.48 (s, 1H); 7.72 (s, 1H); MS (FAB) 703 [M + H] + .
Диэтилтиоацеталь (2S)-N-{4-[4-(7-метокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси)бутокси]-5-метокси-2-нитробензоил}пирролидин-2-карбоксальдегида (702 мг, 1,0 ммоль) формулы III растворяли в дихлорметане (5 мл), метаноле (10 мл) и добавляли SnCl2·2H2O (1,124 г, 5,0 ммоль), смесь кипятили с обратным холодильником 1,5 ч. Затем рН реакционной смеси осторожно доводили до 8 с помощью насыщенного раствора NaHCO3 и смесь экстрагировали этилацетатом (3х20 мл). Объединенную органическую фазу сушили над Na2SO4 и упаривали в вакууме, получая неочищенный диэтилтиоацеталь (2S)-N-{4-[4-(7-метокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси)бутокси]-5-метокси-2-аминобензоил}пирролидин-2-карбоксальдегида IV.Diethylthioacetal (2S) -N- {4- [4- (7-methoxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepine-5 -one-8-yloxy) butoxy] -5-methoxy-2-nitrobenzoyl} pyrrolidine-2-carboxaldehyde (702 mg, 1.0 mmol) of formula III was dissolved in dichloromethane (5 ml), methanol (10 ml) and SnCl was added 2 · 2H 2 O (1.124 g, 5.0 mmol), the mixture was refluxed for 1.5 hours. Then, the pH of the reaction mixture was carefully adjusted to 8 with saturated NaHCO 3 solution and the mixture was extracted with ethyl acetate (3 × 20 ml). The combined organic phase was dried over Na 2 SO 4 and evaporated in vacuo to give the crude diethylthioacetal (2S) -N- {4- [4- (7-methoxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one-8-yloxy) butoxy] -5-methoxy-2-aminobenzoyl} pyrrolidine-2-carboxaldehyde IV.
Раствор диэтилтиоацеталя (2S)-N-{4-[4-(7-метокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси)бутокси]-5-метокси-2-аминобензоил}пирролидин-2-карбоксальдегида формулы IV (672 мг, 1 ммоль), HgCl2 (794 мг, 2,93 ммоль) и СаСО3 (300 мг, 3 ммоль) в СН3CN/H2O (4:1, 15 мл) перемешивали при комнатной температуре 12 ч с хроматографическим контролем (ТСХ, EtOAc) до полного исчезновения исходного продукта. Органический слой упаривали в вакууме и остаток разбавляли EtOAc. К содержимому при комнатной температуре медленно добавляли насыщенный раствор NaHCO3, смесь фильтровали через броунмиллерит и промывали этилацетатом. Фильтрат упаривали в вакууме, получая неочищенный 7-метокси-8-{4-[7-метокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11a-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси]бутокси}-(11aS)-1,2,3,11a-тетрагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он формулы V, который затем очищали колоночной хроматографией на силикагеле при элюировании метанол:EtOAc (2:8).Diethylthioacetal solution (2S) -N- {4- [4- (7-methoxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepine- 5-one-8-yloxy) butoxy] -5-methoxy-2-aminobenzoyl} pyrrolidin-2-carboxaldehyde of the formula IV (672 mg, 1 mmol), HgCl 2 (794 mg, 2.93 mmol) and CaCO 3 (300 mg, 3 mmol) in CH 3 CN / H 2 O (4: 1, 15 ml) was stirred at room temperature for 12 h with chromatographic control (TLC, EtOAc) until the starting product completely disappeared. The organic layer was evaporated in vacuo and the residue was diluted with EtOAc. Saturated NaHCO 3 solution was slowly added to the contents at room temperature, the mixture was filtered through celite and washed with ethyl acetate. The filtrate was evaporated in vacuo to give crude 7-methoxy-8- {4- [7-methoxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one-8-yloxy] butoxy} - (11aS) -1,2,3,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one of formula V, which was then purified by column chromatography on silica gel with elution with methanol: EtOAc (2: 8).
1ЯМР (CDCl3) δ 1,65-2,45 (м, 10H), 3,15-3,25 (м, 2H), 3,48-3,75 (м, 4H), 3,78-3,88 (м, 4H), 3,90 (с, 3H), 4,25-4,35 (м, 5H), 6,18 (с, 1H), 6,82 (с, 1H), 7,48 (с, 1H), 7,52 (с, 1H), 7,65 (d, 1H, J=4,8 Гц); МС (FAB) 549 [М+H]+. 1 NMR (CDCl 3 ) δ 1.65-2.45 (m, 10H), 3.15-3.25 (m, 2H), 3.48-3.75 (m, 4H), 3.78- 3.88 (m, 4H), 3.90 (s, 3H), 4.25-4.35 (m, 5H), 6.18 (s, 1H), 6.82 (s, 1H), 7 48 (s, 1H); 7.52 (s, 1H); 7.65 (d, 1H, J = 4.8 Hz); MS (FAB) 549 [M + H] + .
Пример 3Example 3
Раствор диэтилтиоацеталя (2S)-N-[4-(5-бромпентилокси)-5-метокси-2-нитробензоил]пирролидин-2-карбоксальдегида формулы I (549 мг, 1 ммоль), 8-гидрокси-7-метокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-она (248 мг, 1 ммоль) формулы II и К2СО3 (414 мг, 3 ммоль) в сухом ацетоне (20 мл) кипятили с обратным холодильником 48 ч. После завершения реакции, контролируемой ТСХ, EtOAc, реакционную смесь выливали в воду и затем экстрагировали этилацетатом. Упаривание органического слоя приводило к неочищенному продукту, который затем очищали колоночной хроматографией на силикагеле при элюировании EtOAc:гексан (8:2), получая чистый диэтилтиоацеталь (2S)-N-{4-[5-(7-метокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси)пентилокси]-5-метокси-2-нитробензоил}пирролидин-2-карбоксальдегида III.A solution of diethylthioacetal (2S) -N- [4- (5-bromopentyloxy) -5-methoxy-2-nitrobenzoyl] pyrrolidine-2-carboxaldehyde of the formula I (549 mg, 1 mmol), 8-hydroxy-7-methoxy- (11aS ) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one (248 mg, 1 mmol) of formula II and K 2 CO 3 (414 mg, 3 mmol) in dry acetone (20 ml) was refluxed for 48 hours. After completion of the reaction, controlled by TLC, EtOAc, the reaction mixture was poured into water and then extracted with ethyl acetate. Evaporation of the organic layer led to a crude product, which was then purified by silica gel column chromatography, eluting with EtOAc: hexane (8: 2), to obtain pure diethylthioacetal (2S) -N- {4- [5- (7-methoxy- (11aS) - 1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one-8-yloxy) pentyloxy] -5-methoxy-2-nitrobenzoyl} pyrrolidin-2- carboxaldehyde III.
1H ЯМР (CDCl3) δ 1,30-1,40 (м, 6Н), 1,65-2,35 (м, 14H), 2,65-2,75 (м, 4H), 3,18-3,32 (м, 3Н), 3,45-3,75 (м, 2Н), 3,80-3,85 (с 4H), 3,85-4,0 (м, 5H), 4,65-4,72 (м, 1H), 4,85 (d, 1H, J=4,38 Гц), 6,0 (с, 1H), 6,78 (с, 1H), 7,52 (с, 1H), 7,65 (с, 1H); МС (FAB) 717 [M+H]+. 1 H NMR (CDCl 3 ) δ 1.30-1.40 (m, 6H), 1.65-2.35 (m, 14H), 2.65-2.75 (m, 4H), 3.18 -3.32 (m, 3H), 3.45-3.75 (m, 2H), 3.80-3.85 (s 4H), 3.85-4.0 (m, 5H), 4, 65-4.72 (m, 1H), 4.85 (d, 1H, J = 4.38 Hz), 6.0 (s, 1H), 6.78 (s, 1H), 7.52 (s , 1H); 7.65 (s, 1H); MS (FAB) 717 [M + H] + .
Диэтилтиоацеталь (2S)-N-{4-[5-(7-метокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси)пентилокси]-5-метокси-2-нитробензоил}пирролидин-2-карбоксальдегида III (716 мг, 1,0 ммоль) растворяли в дихлорметане (5 мл), метаноле (10 мл) и добавляли SnCl2·2H2O (1,124 г, 5,0 ммоль), смесь кипятили с обратным холодильником 1,5 ч. Затем рН реакционной смеси осторожно доводили до 8 с помощью насыщенного раствора NaHCO3 и смесь экстрагировали этилацетатом (3х20 мл). Объединенную органическую фазу сушили над Na2SO4 и упаривали в вакууме, получая неочищенный диэтилтиоацеталь (2S)-N-{4-[5-(7-метокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси)пентилокси]-5-метокси-2-аминобензоил}пирролидин-2-карбоксальдегида формулы IV.Diethylthioacetal (2S) -N- {4- [5- (7-methoxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepine-5 -one-8-yloxy) pentyloxy] -5-methoxy-2-nitrobenzoyl} pyrrolidine-2-carboxaldehyde III (716 mg, 1.0 mmol) was dissolved in dichloromethane (5 ml), methanol (10 ml) and SnCl 2 was added · 2H 2 O (1.124 g, 5.0 mmol), the mixture was refluxed for 1.5 hours. Then the pH of the reaction mixture was carefully adjusted to 8 with saturated NaHCO 3 solution and the mixture was extracted with ethyl acetate (3 × 20 ml). The combined organic phase was dried over Na 2 SO 4 and evaporated in vacuo to give the crude diethylthioacetal (2S) -N- {4- [5- (7-methoxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one-8-yloxy) pentyloxy] -5-methoxy-2-aminobenzoyl} pyrrolidine-2-carboxaldehyde of the formula IV.
Раствор диэтилтиоацеталя (2S)-N-{4-[5-(7-метокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси)пентилокси]-5-метокси-2-аминобензоил}пирролидин-2-карбоксальдегида IV (686 мг, 1 ммоль), HgCl2 (794 мг, 2,93 ммоль) и СаСО3 (300 мг, 3 ммоль) в СН3CN/H2O (4:1, 15 мл) перемешивали при комнатной температуре 12 ч с хроматографическим контролем (ТСХ, EtOAc) до полного исчезновения исходного продукта. Затем органический слой упаривали в вакууме и остаток растворяли в EtOAc. К содержимому при комнатной температуре медленно добавляли насыщенный раствор NaHCO3, смесь фильтровали через броунмиллерит и промывали этилацетатом. Фильтрат упаривали в вакууме, получая неочищенный 7-метокси-8-{5-[7-метокси-(11aS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-с][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси]бутокси}-(11аS)-1,2,3,11а-тетрагидро-5H-пирроло[2.1-с][1.4]бензодиазепин-5-он формулы V, который затем очищали колоночной хроматографией на силикагеле при элюировании метанол:EtOAc (2:8).Diethylthioacetal solution (2S) -N- {4- [5- (7-methoxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepine- 5-one-8-yloxy) pentyloxy] -5-methoxy-2-aminobenzoyl} pyrrolidin-2-carboxaldehyde IV (686 mg, 1 mmol), HgCl 2 (794 mg, 2.93 mmol) and CaCO 3 (300 mg , 3 mmol) in CH 3 CN / H 2 O (4: 1, 15 ml) was stirred at room temperature for 12 h with chromatographic control (TLC, EtOAc) until the starting product completely disappeared. Then the organic layer was evaporated in vacuo and the residue was dissolved in EtOAc. Saturated NaHCO 3 solution was slowly added to the contents at room temperature, the mixture was filtered through celite and washed with ethyl acetate. The filtrate was evaporated in vacuo to give crude 7-methoxy-8- {5- [7-methoxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-s] [1.4] benzodiazepin-5-one-8-yloxy] butoxy} - (11aS) -1,2,3,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one of formula V, which was then purified by column chromatography on silica gel with elution with methanol: EtOAc (2: 8).
1H ЯМР (CDCl3) δ 1,20-2,45 (м, 14Н), 3,10-3,20 (м, 2Н), 3,20-3,28 (м, 1Н), 3,40-3,78 (м, 5Н), 3,80 (с, 3Н), 3,98 (с, 3Н), 4,10-4,22 (м, 4Н), 6,0 (с, 1Н), 7,02 (с, 1Н); 7,50 (с, 1Н), 7,55 (с, 1Н), 7,65 (g, 1Н, J=5,1 Гц); МС (FAB) 563 [М+Н]+. 1 H NMR (CDCl 3 ) δ 1.20-2.45 (m, 14H), 3.10-3.20 (m, 2H), 3.20-3.28 (m, 1H), 3.40 -3.78 (m, 5H), 3.80 (s, 3H), 3.98 (s, 3H), 4.10-4.22 (m, 4H), 6.0 (s, 1H), 7.02 (s, 1H); 7.50 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.65 (g, 1H, J = 5.1 Hz); MS (FAB) 563 [M + H] + .
Пример 4Example 4
Раствор диэтилтиоацеталя (2S)-N-[4-(3-бромпропокси)-5-метокси-2-нитробензоил]пирролидин-2-карбоксальдегида формулы I (521 мг, 1 ммоль), 8-гидрокси-7-метокси-(2R}-гидрокси-(11aS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-с][1.4]бензодиазепин-5-она (264 мг, 1 ммоль) формулы II и К2СО3 (414 мг, 3 ммоль) в сухом ацетоне (20 мл) кипятили с обратным холодильником 24-48 ч. После завершения реакции, контролируемой ТСХ, EtOAc, реакционную смесь выливали в воду и затем экстрагировали этилацетатом. Упаривание органического слоя приводило к неочищенному продукту, который затем очищали колоночной хроматографией на силикагеле при элюировании EtOAc, получая чистый диэтилтиоацеталь (2S)-N-{4-[3-(7-метокси-(2R)-гидрокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси)пропокси]-5-метокси-2-нитробензоил}пирролидин-2-карбоксальдегида III.A solution of diethylthioacetal (2S) -N- [4- (3-bromopropoxy) -5-methoxy-2-nitrobenzoyl] pyrrolidine-2-carboxaldehyde of the formula I (521 mg, 1 mmol), 8-hydroxy-7-methoxy- (2R } -hydroxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one (264 mg, 1 mmol) of formula II and K 2 CO 3 (414 mg, 3 mmol) in dry acetone (20 ml) was refluxed for 24-48 h. After completion of the reaction, controlled by TLC, EtOAc, the reaction mixture was poured into water and then extracted with ethyl acetate. Evaporation of the organic layer led to crude the product, which was then purified column chromatography on silica gel with elution with EtOAc to give pure diethylthioacetal (2S) -N- {4- [3- (7-methoxy- (2R) -hydroxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11- hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one-8-yloxy) propoxy] -5-methoxy-2-nitrobenzoyl} pyrrolidine-2-carboxaldehyde III.
Диэтилтиоацеталь (2S)-N-{4-[3-(7-метокси-(2R)-гидрокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси)пропокси]-5-метокси-2-нитробензоил}пирролидин-2-карбоксальдегида III (704 мг, 1,0 ммоль) растворяли в дихлорметане (5 мл), метаноле (10 мл) и добавляли SnCl2·2H2O (1,124 г, 5,0 ммоль), смесь кипятили с обратным холодильником 1,5 ч. Затем рН реакционной смеси осторожно доводили до 8 с помощью насыщенного раствора NaHCO3 и смесь экстрагировали этилацетатом (3х20 мл). Объединенную органическую фазу сушили над Na2SO4 и упаривали в вакууме, получая неочищенный диэтилтиоацеталь (2S)-N-{4-[3-(7-метокси-(2R)-гидрокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси)пропокси]-5-метокси-2-аминобензоил}пирролидин-2-карбоксальдегида IV.Diethylthioacetal (2S) -N- {4- [3- (7-methoxy- (2R) -hydroxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] Benzodiazepin-5-one-8-yloxy) propoxy] -5-methoxy-2-nitrobenzoyl} pyrrolidin-2-carboxaldehyde III (704 mg, 1.0 mmol) was dissolved in dichloromethane (5 ml), methanol (10 ml) and SnCl 2 · 2H 2 O (1.124 g, 5.0 mmol) was added, the mixture was refluxed for 1.5 h. Then the pH of the reaction mixture was carefully adjusted to 8 with saturated NaHCO 3 solution and the mixture was extracted with ethyl acetate (3 × 20 ml). The combined organic phase was dried over Na 2 SO 4 and evaporated in vacuo to give crude diethylthioacetal (2S) -N- {4- [3- (7-methoxy- (2R) -hydroxy- (11aS) -1,2,3, 10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one-8-yloxy) propoxy] -5-methoxy-2-aminobenzoyl} pyrrolidin-2-carboxaldehyde IV.
Раствор диэтилтиоацеталя (2S)-N-{4-[3-(7-метокси-(2R)-гидрокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси)пропокси]-5-метокси-2-аминобензоил}пирролидин-2-карбоксальдегида IV (674 мг, 1 ммоль), HgCl2 (794 мг, 2,93 ммоль) и СаСО3 (300 мг, 3 ммоль) в СН3CN/H2O (4:1, 15 мл) перемешивали при комнатной температуре 12 ч с хроматографическим контролем (ТСХ, EtOAc) до полного исчезновения исходного продукта. Затем органический слой упаривали в вакууме и остаток разбавляли EtOAc. К содержимому при комнатной температуре медленно добавляли насыщенный раствор NaHCO3, смесь фильтровали через броунмиллерит и промывали этилацетатом. Фильтрат упаривали в вакууме, получая неочищенный 7-метокси-8-{3-[7-метокси-(2R)-гидрокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11a-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси]пропокси}-(11aS)-1,2,3,11a-тетрагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он формулы V, который затем очищали колоночной хроматографией на силикагеле при элюировании метанол:EtOAc (3:7).Solution of diethylthioacetal (2S) -N- {4- [3- (7-methoxy- (2R) -hydroxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c ] [1.4] benzodiazepin-5-one-8-yloxy) propoxy] -5-methoxy-2-aminobenzoyl} pyrrolidin-2-carboxaldehyde IV (674 mg, 1 mmol), HgCl 2 (794 mg, 2.93 mmol) and CaCO 3 (300 mg, 3 mmol) in CH 3 CN / H 2 O (4: 1, 15 ml) was stirred at room temperature for 12 h with chromatographic control (TLC, EtOAc) until the starting product completely disappeared. Then the organic layer was evaporated in vacuo and the residue was diluted with EtOAc. Saturated NaHCO 3 solution was slowly added to the contents at room temperature, the mixture was filtered through celite and washed with ethyl acetate. The filtrate was evaporated in vacuo to give crude 7-methoxy-8- {3- [7-methoxy- (2R) -hydroxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1 -c] [1.4] benzodiazepin-5-one-8-yloxy] propoxy} - (11aS) -1,2,3,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one of the formula V, which was then purified by silica gel column chromatography, eluting with methanol: EtOAc (3: 7).
Пример 5Example 5
Раствор диэтилтиоацеталя (2S)-N-[4-(4-бромбутокси)-5-метокси-2-нитробензоил]пирролидин-2-карбоксальдегида формулы I (535 мг, 1 ммоль), 8-гидрокси-7-метокси-(2R)-гидрокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-она (264 мг, 1 ммоль) формулы II и К2СО3 (414 мг, 3 ммоль) в сухом ацетоне (20 мл) кипятили с обратным холодильником 48 ч. После завершения реакции, контролируемой ТСХ, EtOAc, реакционную смесь выливали в воду и затем экстрагировали этилацетатом. Упаривание органического слоя приводило к неочищенному продукту, который затем очищали колоночной хроматографией на силикагеле при элюировании EtOAc, получая чистый диэтилтиоацеталь (2S)-N-{4-[4-(7-метокси-(2R)-гидрокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси)бутокси]-5-метокси-2-нитробензоил}пирролидин-2-карбоксальдегида III.A solution of diethylthioacetal (2S) -N- [4- (4-bromobutoxy) -5-methoxy-2-nitrobenzoyl] pyrrolidine-2-carboxaldehyde of the formula I (535 mg, 1 mmol), 8-hydroxy-7-methoxy- (2R ) -hydroxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one (264 mg, 1 mmol) of formula II and K 2 CO 3 (414 mg, 3 mmol) in dry acetone (20 ml) was refluxed for 48 hours. After completion of the reaction controlled by TLC, EtOAc, the reaction mixture was poured into water and then extracted with ethyl acetate. Evaporation of the organic layer led to a crude product, which was then purified by silica gel column chromatography eluting with EtOAc to give pure diethylthioacetal (2S) -N- {4- [4- (7-methoxy- (2R) -hydroxy- (11aS) -1 , 2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one-8-yloxy) butoxy] -5-methoxy-2-nitrobenzoyl} pyrrolidine-2-carboxaldehyde III.
Диэтилтиоацеталь (2S)-N-{4-[4-(7-метокси-(2R)-гидрокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси)бутокси]-5-метокси-2-нитробензоил}пирролидин-2-карбоксальдегида (718 мг, 1,0 ммоль) формулы III растворяли в дихлорметане (5 мл), метаноле (10 мл) и добавляли SnCl2·2H2O (1,124 г, 5,0 ммоль), смесь кипятили с обратным холодильником 1,5 ч. Затем рН реакционной смеси осторожно доводили до 8 с помощью насыщенного раствора NaHCO3 и смесь экстрагировали этилацетатом (3х20 мл). Объединенную органическую фазу сушили над Na2SO4 и упаривали в вакууме, получая неочищенный диэтилтиоацеталь (2S)-N-{4-[4-(7-метокси-(2R)-гидрокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси)бутокси]-5-метокси-2-аминобензоил}пирролидин-2-карбоксальдегида IV.Diethylthioacetal (2S) -N- {4- [4- (7-methoxy- (2R) -hydroxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one-8-yloxy) butoxy] -5-methoxy-2-nitrobenzoyl} pyrrolidin-2-carboxaldehyde (718 mg, 1.0 mmol) of formula III was dissolved in dichloromethane (5 ml), methanol ( 10 ml) and SnCl 2 · 2H 2 O (1.124 g, 5.0 mmol) was added, the mixture was refluxed for 1.5 h. Then, the pH of the reaction mixture was carefully adjusted to 8 with saturated NaHCO 3 solution and the mixture was extracted with ethyl acetate ( 3x20 ml). The combined organic phase was dried over Na 2 SO 4 and evaporated in vacuo to give the crude diethylthioacetal (2S) -N- {4- [4- (7-methoxy- (2R) -hydroxy- (11aS) -1,2,3, 10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one-8-yloxy) butoxy] -5-methoxy-2-aminobenzoyl} pyrrolidin-2-carboxaldehyde IV.
Раствор диэтилтиоацеталя (2S)-N-{4-[4-(7-метокси-(2R)-гидрокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси)бутокси]-5-метокси-2-аминобензоил}пирролидин-2-карбоксальдегида формулы IV (688 мг, 1 ммоль), HgCl2 (794 мг, 2,93 ммоль) и СаСО3 (300 мг, 3 ммоль) в СН3CN/H2O (4:1, 15 мл) перемешивали при комнатной температуре 12 ч с хроматографическим контролем (ТСХ, EtOAc) до полного исчезновения исходного продукта. Затем органический слой упаривали в вакууме и остаток разбавляли EtOAc. К содержимому при комнатной температуре медленно добавляли насыщенный раствор NaHCO3, смесь фильтровали через броунмиллерит и промывали этилацетатом. Фильтрат упаривали в вакууме, получая неочищенный 7-метокси-8-{4-[7-метокси-(2R)-гидрокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11a-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси]бутокси}-(11aS)-1,2,3,11a-тетрагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он формулы V, который затем очищали колоночной хроматографией на силикагеле при элюировании метанол:EtOAc (3:7).Solution of diethylthioacetal (2S) -N- {4- [4- (7-methoxy- (2R) -hydroxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c ] [1.4] benzodiazepin-5-one-8-yloxy) butoxy] -5-methoxy-2-aminobenzoyl} pyrrolidin-2-carboxaldehyde of the formula IV (688 mg, 1 mmol), HgCl 2 (794 mg, 2.93 mmol ) and CaCO 3 (300 mg, 3 mmol) in CH 3 CN / H 2 O (4: 1, 15 ml) were stirred at room temperature for 12 h with chromatographic control (TLC, EtOAc) until the starting product completely disappeared. Then the organic layer was evaporated in vacuo and the residue was diluted with EtOAc. Saturated NaHCO 3 solution was slowly added to the contents at room temperature, the mixture was filtered through celite and washed with ethyl acetate. The filtrate was evaporated in vacuo to give crude 7-methoxy-8- {4- [7-methoxy- (2R) -hydroxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1 -c] [1.4] benzodiazepin-5-one-8-yloxy] butoxy} - (11aS) -1,2,3,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one of the formula V, which was then purified by silica gel column chromatography, eluting with methanol: EtOAc (3: 7).
Пример 6Example 6
Раствор диэтилтиоацеталя (2S)-N-[4-(5-бромпентилокси)-5-метокси-2-нитробензоил]пирролидин-2-карбоксальдегида формулы I (549 мг, 1 ммоль), 8-гидрокси-7-метокси-(2R)-гидрокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-она (264 мг, 1 ммоль) II и К2СО3 (414 мг, 3 ммоль) в сухом ацетоне (20 мл) кипятили с обратным холодильником 48 ч. После завершения реакции, контролируемой ТСХ, EtOAc, реакционную смесь выливали в воду и затем экстрагировали этилацетатом. Упаривание органического слоя приводило к неочищенному продукту, который затем очищали колоночной хроматографией на силикагеле при элюировании EtOAc, получая чистый диэтилтиоацеталь (2S)-N-{4-[5-(7-метокси-(2R)-гидрокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси)пентилокси]-5-метокси-2-нитробензоил}пирролидин-2-карбоксальдегида III.A solution of diethylthioacetal (2S) -N- [4- (5-bromopentyloxy) -5-methoxy-2-nitrobenzoyl] pyrrolidine-2-carboxaldehyde of the formula I (549 mg, 1 mmol), 8-hydroxy-7-methoxy- (2R ) -hydroxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one (264 mg, 1 mmol) II and K 2 CO 3 (414 mg, 3 mmol) in dry acetone (20 ml) was refluxed for 48 hours. After completion of the reaction controlled by TLC, EtOAc, the reaction mixture was poured into water and then extracted with ethyl acetate. Evaporation of the organic layer led to a crude product, which was then purified by silica gel column chromatography eluting with EtOAc to give pure diethylthioacetal (2S) -N- {4- [5- (7-methoxy- (2R) -hydroxy- (11aS) -1 , 2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one-8-yloxy) pentyloxy] -5-methoxy-2-nitrobenzoyl} pyrrolidine-2-carboxaldehyde III.
Диэтилтиоацеталь (2S)-N-{4-[5-(7-метокси-(2R)-гидрокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси)пентилокси]-5-метокси-2-нитробензоил}пирролидин-2-карбоксальдегида III (732 мг, 1,0 ммоль) растворяли в дихлорметане (5 мл), метаноле (10 мл) и добавляли SnCl2·2H2O (1,124 г, 5,0 ммоль), смесь кипятили с обратным холодильником 1,5 ч. Затем рН реакционной смеси осторожно доводили до 8 с помощью насыщенного раствора NaHCO3 и смесь экстрагировали этилацетатом (3х20 мл). Объединенную органическую фазу сушили над Na2SO4 и упаривали в вакууме, получая неочищенный диэтилтиоацеталь (2S)-N-{4-[5-(7-метокси-(2R)-гидрокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси)пентилокси]-5-метокси-2-аминобензоил}пирролидин-2-карбоксальдегида формулы IV.Diethylthioacetal (2S) -N- {4- [5- (7-methoxy- (2R) -hydroxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] Benzodiazepin-5-one-8-yloxy) pentyloxy] -5-methoxy-2-nitrobenzoyl} pyrrolidin-2-carboxaldehyde III (732 mg, 1.0 mmol) was dissolved in dichloromethane (5 ml), methanol (10 ml) and SnCl 2 · 2H 2 O (1.124 g, 5.0 mmol) was added, the mixture was refluxed for 1.5 h. Then the pH of the reaction mixture was carefully adjusted to 8 with saturated NaHCO 3 solution and the mixture was extracted with ethyl acetate (3 × 20 ml). The combined organic phase was dried over Na 2 SO 4 and evaporated in vacuo to give the crude diethylthioacetal (2S) -N- {4- [5- (7-methoxy- (2R) -hydroxy- (11aS) -1,2,3, 10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one-8-yloxy) pentyloxy] -5-methoxy-2-aminobenzoyl} pyrrolidine-2-carboxaldehyde of the formula IV.
Раствор диэтилтиоацеталя (2S)-N-{4-[5-(7-метокси-(2R)-гидрокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси)пентилокси]-5-метокси-2-аминобензоил}пирролидин-2-карбоксальдегида IV (702мг, 1 ммоль), HgCl2 (794 мг, 2,93 ммоль) и СаСО3 (300 мг, 3 ммоль) в СН3CN/H2O (4:1, 15 мл) перемешивали при комнатной температуре 12 ч с хроматографическим контролем (ТСХ, EtOAc:метанол) до полного исчезновения исходного продукта. Затем органический слой упаривали в вакууме и остаток разбавляли EtOAc. К содержимому при комнатной температуре медленно добавляли насыщенный раствор NaHCO3, смесь фильтровали через броунмиллерит и промывали этилацетатом. Фильтрат упаривали в вакууме, получая неочищенный 7-метокси-8-{5-[7-метокси-(2R)-гидрокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11a-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси]пентилокси}-(11aS)-1,2,3,11a-тетрагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он формулы V, который затем очищали колоночной хроматографией на силикагеле при элюировании метанол:EtOAc (3:7).Solution of diethylthioacetal (2S) -N- {4- [5- (7-methoxy- (2R) -hydroxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c ] [1.4] benzodiazepin-5-one-8-yloxy) pentyloxy] -5-methoxy-2-aminobenzoyl} pyrrolidin-2-carboxaldehyde IV (702 mg, 1 mmol), HgCl 2 (794 mg, 2.93 mmol) and CaCO 3 (300 mg, 3 mmol) in CH 3 CN / H 2 O (4: 1, 15 ml) was stirred at room temperature for 12 h with chromatographic control (TLC, EtOAc: methanol) until the starting product completely disappeared. Then the organic layer was evaporated in vacuo and the residue was diluted with EtOAc. Saturated NaHCO 3 solution was slowly added to the contents at room temperature, the mixture was filtered through celite and washed with ethyl acetate. The filtrate was evaporated in vacuo to give crude 7-methoxy-8- {5- [7-methoxy- (2R) -hydroxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1 -c] [1.4] benzodiazepin-5-one-8-yloxy] pentyloxy} - (11aS) -1,2,3,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one of the formula V, which was then purified by silica gel column chromatography, eluting with methanol: EtOAc (3: 7).
Пример 7Example 7
Раствор диэтилтиоацеталя (4R)-гидрокси-(2S)-N-[4-(3-бромпропокси)-5-метокси-2-нитробензоил]пирролидин-2-карбоксальдегида формулы I (537 мг, 1 ммоль), 8-гидрокси-7-метокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-она (248 мг, 1 ммоль) формулы II и К2СО3 (414 мг, 3 ммоль) в сухом ацетоне (20 мл) кипятили с обратным холодильником 48 ч. После завершения реакции, контролируемой ТСХ, EtOAc, реакционную смесь выливали в воду и затем экстрагировали этилацетатом. Упаривание органического слоя приводило к неочищенному продукту, который затем очищали колоночной хроматографией на силикагеле при элюировании EtOAc, получая чистый диэтилтиоацеталь (4R)-гидрокси-(2S)-N-{4-[3-(7-метокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси)пропокси]-5-метокси-2-нитробензоил}пирролидин-2-карбоксальдегида III.A solution of diethylthioacetal (4R) -hydroxy- (2S) -N- [4- (3-bromopropoxy) -5-methoxy-2-nitrobenzoyl] pyrrolidine-2-carboxaldehyde of the formula I (537 mg, 1 mmol), 8-hydroxy- 7-methoxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one (248 mg, 1 mmol) of formula II and K 2 CO 3 (414 mg, 3 mmol) in dry acetone (20 ml) was refluxed for 48 hours. After completion of the reaction controlled by TLC, EtOAc, the reaction mixture was poured into water and then extracted with ethyl acetate. Evaporation of the organic layer led to a crude product, which was then purified by silica gel column chromatography eluting with EtOAc to give pure diethylthioacetal (4R) -hydroxy- (2S) -N- {4- [3- (7-methoxy- (11aS) -1 , 2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one-8-yloxy) propoxy] -5-methoxy-2-nitrobenzoyl} pyrrolidine-2-carboxaldehyde III.
Диэтилтиоацеталь (4R)-гидрокси-(2S)-N-{4-[3-(7-метокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси)пропокси]-5-метокси-2-нитробензоил}пирролидин-2-карбоксальдегида III (704 мг, 1,0 ммоль) растворяли в дихлорметане (5 мл), метаноле (10 мл) и добавляли SnCl2.2H2O (1,124 г, 5,0 ммоль), смесь кипятили с обратным холодильником 1,5 ч. Затем рН реакционной смеси осторожно доводили до 8 с помощью насыщенного раствора NaHCO3 и смесь экстрагировали этилацетатом (3х20 мл). Объединенную органическую фазу сушили над Na2SO4 и упаривали в вакууме, получая неочищенный диэтилтиоацеталь (4R)-гидрокси-(2S)-N-{4-[3-(7-метокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси)пропокси]-5-метокси-2-аминобензоил}пирролидин-2-карбоксальдегида IV.(4R) -hydroxy- (2S) -N- {4- [3- (7-methoxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] diethylthioacetal [1.4] Benzodiazepin-5-one-8-yloxy) propoxy] -5-methoxy-2-nitrobenzoyl} pyrrolidin-2-carboxaldehyde III (704 mg, 1.0 mmol) was dissolved in dichloromethane (5 ml), methanol (10 ml) and SnCl 2 .2H 2 O (1.124 g, 5.0 mmol) was added, the mixture was refluxed for 1.5 hours. Then the pH of the reaction mixture was carefully adjusted to 8 with saturated NaHCO 3 solution and the mixture was extracted with ethyl acetate (3 × 20 ml). The combined organic phase was dried over Na 2 SO 4 and evaporated in vacuo to give the crude diethylthioacetal (4R) -hydroxy- (2S) -N- {4- [3- (7-methoxy- (11aS) -1,2,3, 10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one-8-yloxy) propoxy] -5-methoxy-2-aminobenzoyl} pyrrolidin-2-carboxaldehyde IV.
Раствор диэтилтиоацеталя (4R)-гидрокси-(2S)-N-{4-[3-(7-метокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси)пропокси]-5-метокси-2-аминобензоил}пирролидин-2-карбоксальдегида IV (674 мг, 1 ммоль), HgCl2 (794 мг, 2,93 ммоль) и СаСО3 (300 мг, 3 ммоль) в СН3CN/H2O (4:1, 15 мл) перемешивали при комнатной температуре 12 ч с хроматографическим контролем (ТСХ, EtOAc) до полного исчезновения исходного продукта. Затем органический слой упаривали в вакууме и остаток разбавляли EtOAc. К содержимому при комнатной температуре медленно добавляли насыщенный раствор NaHCO3, смесь фильтровали через броунмиллерит и промывали этилацетатом. Фильтрат упаривали в вакууме, получая неочищенный 7-метокси-8-{3-[7-метокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11a-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси]пропокси}-(4R)-гидрокси-(11aS)-1,2,3,11a-тетрагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он формулы V, который затем очищали колоночной хроматографией на силикагеле при элюировании метанол:EtOAc (2:8).Solution of diethylthioacetal (4R) -hydroxy- (2S) -N- {4- [3- (7-methoxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c ] [1.4] benzodiazepin-5-one-8-yloxy) propoxy] -5-methoxy-2-aminobenzoyl} pyrrolidin-2-carboxaldehyde IV (674 mg, 1 mmol), HgCl 2 (794 mg, 2.93 mmol) and CaCO 3 (300 mg, 3 mmol) in CH 3 CN / H 2 O (4: 1, 15 ml) was stirred at room temperature for 12 h with chromatographic control (TLC, EtOAc) until the starting product completely disappeared. Then the organic layer was evaporated in vacuo and the residue was diluted with EtOAc. Saturated NaHCO 3 solution was slowly added to the contents at room temperature, the mixture was filtered through celite and washed with ethyl acetate. The filtrate was evaporated in vacuo to give crude 7-methoxy-8- {3- [7-methoxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one-8-yloxy] propoxy} - (4R) -hydroxy- (11aS) -1,2,3,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one of the formula V, which was then purified by silica gel column chromatography, eluting with methanol: EtOAc (2: 8).
Пример 8Example 8
Раствор диэтилтиоацеталя (4R)-гидрокси-(2S)-N-[4-(4-бромбутокси)-5-метокси-2-нитробензоил]пирролидин-2-карбоксальдегида формулы I (551 мг, 1 ммоль), 8-гидрокси-7-метокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-она (248 мг, 1 ммоль) формулы II и К2СО3 (414 мг, 3 ммоль) в сухом ацетоне (20 мл) кипятили с обратным холодильником 48 ч. После завершения реакции, контролируемой ТСХ, EtOAc, реакционную смесь выливали в воду и затем экстрагировали этилацетатом. Упаривание органического слоя приводило к неочищенному продукту, который затем очищали колоночной хроматографией на силикагеле при элюировании EtOAc, получая чистый диэтилтиоацеталь (4R)-гидрокси-(2S)-N-{4-[4-(7-метокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси)бутокси]-5-метокси-2-нитробензоил}пирролидин-2-карбоксальдегида III.A solution of diethylthioacetal (4R) -hydroxy- (2S) -N- [4- (4-bromobutoxy) -5-methoxy-2-nitrobenzoyl] pyrrolidine-2-carboxaldehyde of the formula I (551 mg, 1 mmol), 8-hydroxy- 7-methoxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one (248 mg, 1 mmol) of formula II and K 2 CO 3 (414 mg, 3 mmol) in dry acetone (20 ml) was refluxed for 48 hours. After completion of the reaction controlled by TLC, EtOAc, the reaction mixture was poured into water and then extracted with ethyl acetate. Evaporation of the organic layer led to a crude product, which was then purified by silica gel column chromatography eluting with EtOAc to obtain pure diethylthioacetal (4R) -hydroxy- (2S) -N- {4- [4- (7-methoxy- (11aS) -1 , 2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one-8-yloxy) butoxy] -5-methoxy-2-nitrobenzoyl} pyrrolidine-2-carboxaldehyde III.
Диэтилтиоацеталь (4R)-гидрокси-(2S)-N-{4-[4-(7-метокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси)бутокси]-5-метокси-2-нитробензоил}пирролидин-2-карбоксальдегида (718 мг, 1,0 ммоль) формулы III растворяли в дихлорметане (5 мл), метаноле (10 мл) и добавляли SnCl2.2H2O (1,124 г, 5,0 ммоль), смесь кипятили с обратным холодильником 1,5 ч. Затем рН реакционной смеси осторожно доводили до 8 с помощью насыщенного раствора NaHCO3 и смесь экстрагировали этилацетатом (3х20 мл). Объединенную органическую фазу сушили над Na2SO4 и упаривали в вакууме, получая неочищенный диэтилтиоацеталь (4R)-гидрокси-(2S)-N-{4-[4-(7-метокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси)бутокси]-5-метокси-2-аминобензоил}пирролидин-2-карбоксальдегида IV.Diethylthioacetal (4R) -hydroxy- (2S) -N- {4- [4- (7-methoxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one-8-yloxy) butoxy] -5-methoxy-2-nitrobenzoyl} pyrrolidin-2-carboxaldehyde (718 mg, 1.0 mmol) of formula III was dissolved in dichloromethane (5 ml), methanol ( 10 ml) and SnCl 2 .2H 2 O (1.124 g, 5.0 mmol) was added, the mixture was refluxed for 1.5 hours. Then the pH of the reaction mixture was carefully adjusted to 8 with saturated NaHCO 3 solution and the mixture was extracted with ethyl acetate ( 3x20 ml). The combined organic phase was dried over Na 2 SO 4 and evaporated in vacuo to give the crude diethylthioacetal (4R) -hydroxy- (2S) -N- {4- [4- (7-methoxy- (11aS) -1,2,3, 10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one-8-yloxy) butoxy] -5-methoxy-2-aminobenzoyl} pyrrolidin-2-carboxaldehyde IV.
Раствор диэтилтиоацеталя (4R)-гидрокси-(2S)-N-{4-[4-(7-метокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси)бутокси]-5-метокси-2-аминобензоил}пирролидин-2-карбоксальдегида формулы IV (688 мг, 1 ммоль), HgCl2 (794 мг, 2,93 ммоль) и СаСО3 (300 мг, 3 ммоль) в СН3CN/H2O (4:1, 15 мл) перемешивали при комнатной температуре 12 ч с хроматографическим контролем (ТСХ, EtOAc) до полного исчезновения исходного продукта. Затем органический слой упаривали в вакууме и остаток разбавляли EtOAc. К содержимому при комнатной температуре медленно добавляли насыщенный раствор NaHCO3, смесь фильтровали через броунмиллерит и промывали этилацетатом. Фильтрат упаривали в вакууме, получая неочищенный 7-метокси-8-{4-[7-метокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11a-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси]бутокси}-(4R)-гидрокси-(11aS)-1,2,3,11a-тетрагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он формулы V, который затем очищали колоночной хроматографией на силикагеле при элюировании метанол:EtOAc (2:8).Solution of diethylthioacetal (4R) -hydroxy- (2S) -N- {4- [4- (7-methoxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c ] [1.4] benzodiazepin-5-one-8-yloxy) butoxy] -5-methoxy-2-aminobenzoyl} pyrrolidin-2-carboxaldehyde of the formula IV (688 mg, 1 mmol), HgCl 2 (794 mg, 2.93 mmol ) and CaCO 3 (300 mg, 3 mmol) in CH 3 CN / H 2 O (4: 1, 15 ml) were stirred at room temperature for 12 h with chromatographic control (TLC, EtOAc) until the starting product completely disappeared. Then the organic layer was evaporated in vacuo and the residue was diluted with EtOAc. Saturated NaHCO 3 solution was slowly added to the contents at room temperature, the mixture was filtered through celite and washed with ethyl acetate. The filtrate was evaporated in vacuo to give crude 7-methoxy-8- {4- [7-methoxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one-8-yloxy] butoxy} - (4R) -hydroxy- (11aS) -1,2,3,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one of the formula V, which was then purified by silica gel column chromatography, eluting with methanol: EtOAc (2: 8).
Пример 9Example 9
Раствор диэтилтиоацеталя (4R)-гидрокси-(2S)-N-[4-(5-бромпентилокси)-5-метокси-2-нитробензоил]пирролидин-2-карбоксальдегида формулы I (565 мг, 1 ммоль), 8-гидрокси-7-метокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-она (248 мг, 1 ммоль) II и К2СО3 (414 мг, 3 ммоль) в сухом ацетоне (20 мл) кипятили с обратным холодильником 48 ч. После завершения реакции, контролируемой ТСХ, EtOAc, реакционную смесь выливали в воду и затем экстрагировали этилацетатом. Упаривание органического слоя приводило к неочищенному продукту, который затем очищали колоночной хроматографией на силикагеле при элюировании EtOAc, получая чистый диэтилтиоацеталь (4R)-гидрокси-(2S)-N-{4-[5-(7-метокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси)пентилокси]-5-метокси-2-нитробензоил}пирролидин-2-карбоксальдегида III.A solution of diethylthioacetal (4R) -hydroxy- (2S) -N- [4- (5-bromopentyloxy) -5-methoxy-2-nitrobenzoyl] pyrrolidine-2-carboxaldehyde of the formula I (565 mg, 1 mmol), 8-hydroxy- 7-methoxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one (248 mg, 1 mmol) II and K 2 CO 3 (414 mg, 3 mmol) in dry acetone (20 ml) was refluxed for 48 hours. After completion of the reaction controlled by TLC, EtOAc, the reaction mixture was poured into water and then extracted with ethyl acetate. Evaporation of the organic layer led to a crude product, which was then purified by silica gel column chromatography eluting with EtOAc to give pure diethylthioacetal (4R) -hydroxy- (2S) -N- {4- [5- (7-methoxy- (11aS) -1 , 2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one-8-yloxy) pentyloxy] -5-methoxy-2-nitrobenzoyl} pyrrolidine-2-carboxaldehyde III.
Диэтилтиоацеталь (4R)-гидрокси-(2S)-N-{4-[5-(7-метокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси)пентилокси]-5-метокси-2-нитробензоил}пирролидин-2-карбоксальдегида III (732 мг, 1,0 ммоль) растворяли в дихлорметане (5 мл), метаноле (10 мл) и добавляли SnCl2·2H2O (1,124 г, 5,0 ммоль), смесь кипятили с обратным холодильником 1,5 ч. Затем рН реакционной смеси осторожно доводили до 8 с помощью насыщенного раствора NaHCO3 и смесь экстрагировали этилацетатом (3х20 мл). Объединенную органическую фазу сушили над Na2SO4 и упаривали в вакууме, получая неочищенный диэтилтиоацеталь (4R)-гидрокси-(2S)-N-{4-[5-(7-метокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси)пентилокси]-5-метокси-2-аминобензоил}пирролидин-2-карбоксальдегида формулы IV.(4R) -hydroxy- (2S) -N- {4- [5- (7-methoxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] diethylthioacetal [1.4] Benzodiazepin-5-one-8-yloxy) pentyloxy] -5-methoxy-2-nitrobenzoyl} pyrrolidin-2-carboxaldehyde III (732 mg, 1.0 mmol) was dissolved in dichloromethane (5 ml), methanol (10 ml) and SnCl 2 · 2H 2 O (1.124 g, 5.0 mmol) was added, the mixture was refluxed for 1.5 h. Then the pH of the reaction mixture was carefully adjusted to 8 with saturated NaHCO 3 solution and the mixture was extracted with ethyl acetate (3 × 20 ml). The combined organic phase was dried over Na 2 SO 4 and evaporated in vacuo to give the crude diethylthioacetal (4R) -hydroxy- (2S) -N- {4- [5- (7-methoxy- (11aS) -1,2,3, 10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one-8-yloxy) pentyloxy] -5-methoxy-2-aminobenzoyl} pyrrolidine-2-carboxaldehyde of the formula IV.
Раствор диэтилтиоацеталя (4R)-гидрокси-(2S)-N-{4-[5-(7-метокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11а-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси)пентилокси]-5-метокси-2-аминобензоил}пирролидин-2-карбоксальдегида IV (702 мг, 1 ммоль), HgCl2 (794 мг, 2,93 ммоль) и СаСО3 (300 мг, 3 ммоль) в СН3CN/H2O (4:1, 15 мл) перемешивали при комнатной температуре 12 ч с хроматографическим контролем (ТСХ, EtOAc) до полного исчезновения исходного продукта. Затем органический слой упаривали в вакууме и остаток разбавляли EtOAc. К содержимому при комнатной температуре медленно добавляли насыщенный раствор NaHCO3, смесь фильтровали через броунмиллерит и промывали этилацетатом. Фильтрат упаривали в вакууме, получая неочищенный 7-метокси-8-{5-[7-метокси-(11аS)-1,2,3,10,11,11a-гексагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он-8-илокси]пентилокси}-(4R)-гидрокси-(11aS)-1,2,3,11a-тетрагидро-5Н-пирроло[2.1-c][1.4]бензодиазепин-5-он формулы V, который затем очищали колоночной хроматографией на силикагеле при элюировании метанол:EtOAc (2:8).Solution of diethylthioacetal (4R) -hydroxy- (2S) -N- {4- [5- (7-methoxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c ] [1.4] benzodiazepin-5-one-8-yloxy) pentyloxy] -5-methoxy-2-aminobenzoyl} pyrrolidin-2-carboxaldehyde IV (702 mg, 1 mmol), HgCl 2 (794 mg, 2.93 mmol) and CaCO 3 (300 mg, 3 mmol) in CH 3 CN / H 2 O (4: 1, 15 ml) was stirred at room temperature for 12 h with chromatographic control (TLC, EtOAc) until the starting product completely disappeared. Then the organic layer was evaporated in vacuo and the residue was diluted with EtOAc. Saturated NaHCO 3 solution was slowly added to the contents at room temperature, the mixture was filtered through celite and washed with ethyl acetate. The filtrate was evaporated in vacuo to give crude 7-methoxy-8- {5- [7-methoxy- (11aS) -1,2,3,10,11,11a-hexahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one-8-yloxy] pentyloxy} - (4R) -hydroxy- (11aS) -1,2,3,11a-tetrahydro-5H-pyrrolo [2.1-c] [1.4] benzodiazepin-5-one of the formula V, which was then purified by silica gel column chromatography, eluting with methanol: EtOAc (2: 8).
Биологическая активность. Исследования биологической активности in vitro были проведены в Национальном институте рака США. Biological activity. In vitro biological activity studies have been conducted at the US National Cancer Institute.
Цитотоксичность . Соединения Va и Vc оценивали in vitro на шестидесяти клетках опухолей человека, продуцируемых девятью типами рака (лейкемия, немелкоклеточная карцинома легкого, меланома, рак толстой кишки, CNS, яичника, простаты, почки и молочной железы). Для каждого соединения определяли кривые доза-ответ для каждой клеточной линии минимум при пяти концентрациях при 10-кратных разбавлениях. Использовали учет/запись непрерывного воздействия лекарственного средства в течение 48 ч и использовали сульфородамин В (SRB) белковый анализ для оценки жизнеспособности и роста клеток. Вычисляли концентрацию, вызывающую 50% ингибирования роста клеток (GI50), тотальное ингибирование роста клеток (TGI 0% роста) и 50% гибели клеток (LC50, -50% роста) по сравнению с контролем. Средние графические серединные значения log10TGI и log10LC50, а также log10GI50 для Va и Vc перечислены в таблице 1. Как видно из средней графической характеристики, соединение Vc проявляет интересный профиль активности и селективности на различных клеточных линиях. Средние графические серединные значения log10TGI и log10LC50 оказались подобными картине средних графических серединных значений log10GI50. Cytotoxicity . Compounds Va and Vc were evaluated in vitro on sixty human tumor cells produced by nine types of cancer (leukemia, non-small cell lung carcinoma, melanoma, colon cancer, CNS, ovary, prostate, kidney, and breast). For each compound, dose-response curves were determined for each cell line at least five concentrations at 10-fold dilutions. Metering / recording of continuous drug exposure for 48 hours was used and sulforodamine B (SRB) protein analysis was used to assess cell viability and growth. The concentration causing 50% inhibition of cell growth (GI50), total inhibition of cell growth (TGI 0% growth) and 50% cell death (LC50, -50% growth) were calculated in comparison with the control. The average graphical mean values of log 10 TGI and log 10 LC50, as well as log 10 GI50 for Va and Vc are listed in Table 1. As can be seen from the average graphical characteristic, compound Vc exhibits an interesting profile of activity and selectivity on different cell lines. The average graphical mean values of log 10 TGI and log 10 LC50 turned out to be similar to the picture of the average graphical mean values of log 10 GI50.
Средние графические серединные значения (MG-MID) Log10GI50 log10TGI и log10LC50 по цитотоксическим данным in vitro для соединений Va и Vc против клеточных линий опухолей человека.Table 1
Graphical mean means (MG-MID) of Log 10 GI50 log 10 TGI and log 10 LC50 according to in vitro cytotoxic data for compounds Va and Vc against human tumor cell lines.
Значения Log10LC50 (концентрация в моль/л, вызывающая 50% летальности) для соединений Va и Vc.table 2
Log 10 LC50 values (mol / L concentration causing 50% mortality) for compounds Va and Vc.
Каждый тип рака представляет собой в среднем от шести до восьми различных раковых клеточных линий. Противораковая активность для двух представленных соединений дана в таблице 2. Сравнение данных таблицы 2 показывает важность алканового мостика. При увеличении алканового мостика до 3-5 цитотоксическая активность умеренно уменьшалась. Мостик из 3 атомов углерода в соединении Va обеспечивает подходящую подгонку к структуре малой бороздки двойной спирали ДНК и приводит к слабому повышению активности в данных рядах соединений Va и Vc.Each type of cancer represents an average of six to eight different cancer cell lines. The anticancer activity for the two compounds presented is given in table 2. Comparison of the data in table 2 shows the importance of the alkane bridge. With an increase in the alkane bridge to 3-5, the cytotoxic activity moderately decreased. The bridge of 3 carbon atoms in compound Va provides a suitable fit to the structure of the minor groove of the DNA double helix and leads to a slight increase in activity in these series of compounds Va and Vc.
Claims (21)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2005133443/04A RU2314309C2 (en) | 2003-03-31 | 2003-03-31 | Pyrrolo[2.1-c][1.4]benzodiazepines, method for their preparing and pharmaceutical composition based on thereof |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2005133443/04A RU2314309C2 (en) | 2003-03-31 | 2003-03-31 | Pyrrolo[2.1-c][1.4]benzodiazepines, method for their preparing and pharmaceutical composition based on thereof |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2005133443A RU2005133443A (en) | 2006-04-27 |
| RU2314309C2 true RU2314309C2 (en) | 2008-01-10 |
Family
ID=36655491
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2005133443/04A RU2314309C2 (en) | 2003-03-31 | 2003-03-31 | Pyrrolo[2.1-c][1.4]benzodiazepines, method for their preparing and pharmaceutical composition based on thereof |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2314309C2 (en) |
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2436787C2 (en) * | 2005-07-29 | 2011-12-20 | Тиботек Фармасьютикалз Лтд. | Macrocyclic hepatitis c inhibitors |
| RU2455289C1 (en) * | 2011-05-05 | 2012-07-10 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Кубанский государственный технологический университет" (ГОУ ВПО "КубГТУ") | METHOD OF PRODUCING 5,6-DIHYDRO-7H-PYRROLO[1,2-d][1,4]BENZODIAZEPIN-6-ONE DERIVATIVES |
| RU2621035C2 (en) * | 2011-02-15 | 2017-05-31 | Иммуноджен, Инк. | Methods of producing conjugates |
| RU2683325C2 (en) * | 2009-02-05 | 2019-03-28 | Иммьюноджен, Инк. | New benzodiazepine derivatives |
| RU2736725C1 (en) * | 2015-10-02 | 2020-11-19 | Дженентек, Инк. | Antibody-drug conjugates and methods of using said conjugates of pyrrolobenzodiazepine |
| RU2772513C2 (en) * | 2017-04-20 | 2022-05-23 | Иммуноджен, Инк. | Methods for producing indolinobenzodiazepine derivatives |
| US11583590B2 (en) | 2017-09-29 | 2023-02-21 | Daiichi Sankyo Company, Limited | Antibody-pyrrolobenzodiazepine derivative conjugate and method of use thereof for treating a tumor |
| US11760759B2 (en) | 2017-04-20 | 2023-09-19 | Immunogen, Inc. | Process for preparing substituted indolines |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR102660070B1 (en) | 2015-07-21 | 2024-04-24 | 이뮤노젠 아이엔씨 | Method for preparing cytotoxic benzodiazepine derivatives |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2126006C1 (en) * | 1993-07-29 | 1999-02-10 | Американ Цианамид Компани | Tricyclic diazepine vasopressin and oxytocin antagonists, method of their synthesis, pharmaceutical composition, method of treatment |
-
2003
- 2003-03-31 RU RU2005133443/04A patent/RU2314309C2/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2126006C1 (en) * | 1993-07-29 | 1999-02-10 | Американ Цианамид Компани | Tricyclic diazepine vasopressin and oxytocin antagonists, method of their synthesis, pharmaceutical composition, method of treatment |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| KAMAL A. et al. J. Med. Chem. V.45, 2002, р.4679-4688 (см. табл.3). ЕР 1193270 * |
Cited By (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2436787C2 (en) * | 2005-07-29 | 2011-12-20 | Тиботек Фармасьютикалз Лтд. | Macrocyclic hepatitis c inhibitors |
| RU2683325C2 (en) * | 2009-02-05 | 2019-03-28 | Иммьюноджен, Инк. | New benzodiazepine derivatives |
| RU2799340C2 (en) * | 2009-02-05 | 2023-07-04 | Иммьюноджен, Инк. | New benzodiazepine derivatives |
| RU2748733C2 (en) * | 2011-02-15 | 2021-05-31 | Иммуноджен, Инк. | Cytotoxic benzodiazepine derivatives |
| RU2631498C2 (en) * | 2011-02-15 | 2017-09-25 | Иммуноджен, Инк. | Cytotoxic benzodiasepine derivatives |
| RU2621035C2 (en) * | 2011-02-15 | 2017-05-31 | Иммуноджен, Инк. | Methods of producing conjugates |
| RU2455289C1 (en) * | 2011-05-05 | 2012-07-10 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Кубанский государственный технологический университет" (ГОУ ВПО "КубГТУ") | METHOD OF PRODUCING 5,6-DIHYDRO-7H-PYRROLO[1,2-d][1,4]BENZODIAZEPIN-6-ONE DERIVATIVES |
| RU2736725C1 (en) * | 2015-10-02 | 2020-11-19 | Дженентек, Инк. | Antibody-drug conjugates and methods of using said conjugates of pyrrolobenzodiazepine |
| RU2772513C2 (en) * | 2017-04-20 | 2022-05-23 | Иммуноджен, Инк. | Methods for producing indolinobenzodiazepine derivatives |
| US11760759B2 (en) | 2017-04-20 | 2023-09-19 | Immunogen, Inc. | Process for preparing substituted indolines |
| US11583590B2 (en) | 2017-09-29 | 2023-02-21 | Daiichi Sankyo Company, Limited | Antibody-pyrrolobenzodiazepine derivative conjugate and method of use thereof for treating a tumor |
| US11628223B2 (en) | 2017-09-29 | 2023-04-18 | Daiichi Sankyo Company, Limited | Antibody-drug conjugates comprising substituted benzo[e]pyrrolo[1,2-α][1,4]diazepines |
| RU2820928C2 (en) * | 2017-09-29 | 2024-06-13 | Даити Санкио Компани, Лимитед | Conjugate antibody-derivative of pyrrolobenzodiazepine |
| US12246196B2 (en) | 2017-09-29 | 2025-03-11 | Daiichi Sankyo Company, Limited | Antibody-drug conjugates comprising substituted benzo[e]pyrrolo[1,2-a][1,4]diazepines |
| US12350344B2 (en) | 2017-09-29 | 2025-07-08 | Daiichi Sankyo Company, Limited | Methods of treating a tumor by administering a claudin-6 (CLDN6) or CLDN9 antibody-pyrrolobenzodiazepine derivative conjugate |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2005133443A (en) | 2006-04-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP1608664B1 (en) | Non-cross-linking pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepines as potential antitumour agents and process thereof | |
| CN109071521B (en) | Heterocyclic compounds as FGFR inhibitors | |
| EP2918588B1 (en) | Macrocyclic compounds as TRK kinase inhibitors | |
| CN119923401A (en) | New tetracyclic compounds | |
| CN118878533A (en) | Inhibition of αvβ6 integrin | |
| RU2314309C2 (en) | Pyrrolo[2.1-c][1.4]benzodiazepines, method for their preparing and pharmaceutical composition based on thereof | |
| EP2836493B1 (en) | Functionalized thieno-indole derivatives for the treatment of cancer | |
| JP5657395B2 (en) | Quinazoline-binding pyrrolo [2,1-c] [1,4] benzodiazepine hybrid as an effective anticancer agent and method for producing the same | |
| CN119591581A (en) | A kind of amide heterocyclic derivative and its application in medicine | |
| US7465724B2 (en) | Bis-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepine-anthraquinone conjugates and a process for the preparation thereof | |
| TW202110848A (en) | A substituted fused bicyclic derivative, a preparation method thereof, and medical applications thereof | |
| AU2003215810B2 (en) | Pyrrolo((2,1-c)(1,4) benzodiazepines dimers as antitumour agents and process thereof | |
| CN117229263A (en) | Compound for inhibiting or degrading Bcl6 and application of compound in medicine | |
| CN114286813A (en) | Substituted urea dihydroorotate dehydrogenase inhibitors | |
| CN113493453B (en) | Condensed aromatic ring derivative, preparation method and medical application thereof | |
| US6800622B1 (en) | Pyrene-linked pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepine hybrids useful as anti-cancer agents | |
| JP4520411B2 (en) | Method for preparing pyrrolo [2,1-c] [1,4] benzodiazepine hybrid | |
| EP1608650B1 (en) | Pyrene-linked pyrrolo(2,1-c)(1,4)benzodiazepine derivatives useful as anticancer agents | |
| CN118255780A (en) | A compound for inhibiting and degrading c-MYC and its medical application | |
| JP4833663B2 (en) | C2-fluoropyrrolo [2,1-c] [1,4] benzodiazepine dimer | |
| US6683073B1 (en) | Pyrimidine linked pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepines as potential antitumour agents | |
| CN117659049A (en) | Substituted bridged ring inhibitors and their preparation methods and applications | |
| JP4718328B2 (en) | C8-linked pyrrolo [2,1-c] [1,4] benzodiazepine-acridone / acridine hybrid | |
| WO2004087712A1 (en) | NEW PYRIMIDINE LINKED PYRROLO[2,1-c][1,4]BENZODIAZEPINES AS POTENTIAL ANTITUMOUR AGENTS | |
| JP2026504054A (en) | Pyrazole derivatives, pharmaceutically acceptable salts, stereoisomers, pharmaceutical compositions and uses thereof |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20210401 |