RU2312514C1 - Method for obtaining protein enzymatic hydrolyzates - Google Patents

Method for obtaining protein enzymatic hydrolyzates Download PDF

Info

Publication number
RU2312514C1
RU2312514C1 RU2006109309/13A RU2006109309A RU2312514C1 RU 2312514 C1 RU2312514 C1 RU 2312514C1 RU 2006109309/13 A RU2006109309/13 A RU 2006109309/13A RU 2006109309 A RU2006109309 A RU 2006109309A RU 2312514 C1 RU2312514 C1 RU 2312514C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
solution
current source
hydrolysis
electrolyzer
enzyme
Prior art date
Application number
RU2006109309/13A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Юли Анатольевна Кучина (RU)
Юлия Анатольевна Кучина
Павел Борисович Василевский (RU)
Павел Борисович Василевский
Original Assignee
Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Мурманский государственный технический университет"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Мурманский государственный технический университет" filed Critical Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Мурманский государственный технический университет"
Priority to RU2006109309/13A priority Critical patent/RU2312514C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2312514C1 publication Critical patent/RU2312514C1/en

Links

Landscapes

  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

FIELD: food industry, fodder production industry, microbiological industry.
SUBSTANCE: the present innovation deals with hydrolysis at adding proteolytic enzyme at the quantity of about 1.0-2.0% against the mass of raw material at optimal pH and temperature values that correspond to the maximum of enzyme's activity, during 5-6 h. Optimal conditions of hydrolysis are available due to carrying out electrolysis in an electrolyzer with additionally connected source of alternating current. One should connect the above-mentioned electrolyzer to the source of alternating current to achieve and maintain the desired temperature of the solution and to the source of direct current for achieving and maintaining the desired pH value of the solution. As enzyme it is necessary to apply pancreatin. The innovation enables to simplify and cheapen the production of enzymatic hydrolyzates.
EFFECT: higher efficiency.
1 cl, 1 ex

Description

Изобретение относится к пищевой, кормовой и микробиологической отраслям промышленности, а именно к электрохимическим способам получения ферментативных гидролизатов из рыбного сырья.The invention relates to food, feed and microbiological industries, in particular to electrochemical methods for producing enzymatic hydrolysates from fish raw materials.

Известен способ получения белкового гидролизата из гидробионтов, включающий измельчение сырья, промывку его водой, гидролиз раствором NaCl в соотношении 1:6 в катодной камере диафрагменного электролизера, отделение нерастворившегося осадка, нейтрализацию раствора в анодной камере, упаривание и сушку (а.с. СССР №1687213, опубл. 30.10.91). Этот способ наиболее близок к предлагаемому способу, и он принят за прототип. Однако ему присущ следующий недостаток:A known method of producing a protein hydrolyzate from hydrobionts, including grinding the raw material, washing it with water, hydrolysis with NaCl solution in a ratio of 1: 6 in the cathode chamber of the diaphragm electrolyzer, separating insoluble sediment, neutralizing the solution in the anode chamber, evaporating and drying (A.S. USSR No. 1687213, publ. 30.10.91). This method is closest to the proposed method, and it is taken as a prototype. However, it has the following disadvantage:

для нагревания раствора используют внешние источники энергии, например водяной пар. Это делает способ недостаточно экономичным.external sources of energy, such as water vapor, are used to heat the solution. This makes the method not economical enough.

Технический результат, на достижение которого направлено заявляемое изобретение, состоит в удешевлении и упрощении способа. Для достижения указанного технического результата в способе получения белковых ферментативных гидролизатов, включающем измельчение рыбного сырья, промывку его водой, гидролиз раствором NaCl в камере диафрагменного электролизера с электродом, подключенным к отрицательному полюсу источника постоянного тока, отделение нерастворившегося осадка, нейтрализацию раствора, сушку, упаковку, гидролиз осуществляют с введением протеолитического фермента в количестве 1,0-2,0% от массы сырья при оптимальных значениях рН и температуры, соответствующих максимуму активности фермента, в течение 5-6 часов, при этом оптимальные условия гидролиза получают путем проведения электролиза в электролизере, к которому дополнительно подключен источник переменного тока, причем электролизер подключают к источнику переменного тока для достижения и поддержания необходимой температуры раствора, а к источнику постоянного тока для достижения и поддержания необходимого значения рН раствора, после гидролиза проводят осаждение нерастворившегося осадка в той же камере, что и гидролиз, понижением значения рН раствора до 4,0-5,0, для этого отключают электрод от отрицательного полюса источника постоянного тока и подключают его к положительному полюсу источника постоянного тока, после достижения рН осаждения проводят нагрев раствора до 98-100°С, отключив электролизер от источника постоянного тока и подключив его к источнику переменного тока, и оставляют раствор на 5-6 часов, при этом одновременно с осаждением проводят термоинактивацию фермента, затем отделяют нерастворившийся осадок, нейтрализацию раствора осуществляют повышением значения рН раствора до 7,5-8,0. В качестве протеолитического фермента используют панкреатин. Отличительными признаками предлагаемого способа от указанного выше известного, наиболее близкого к нему, являются проведение гидролиза с введением протеолитического фермента панкреатина в количестве 1,0-2,0% от массы сырья при оптимальных значениях рН и температуры, соответствующих максимуму активности фермента, в течение 5-6 часов, оптимальные же условия получают путем проведения электролиза в электролизере, к которому дополнительно подключен источник переменного тока, причем электролизер подключают к источнику переменного тока для достижения и поддержания необходимой температуры раствора, а к источнику постоянного тока для достижения и поддержания необходимого значения рН раствора, после гидролиза проводят осаждение нерастворившегося осадка в той же камере, что и гидролиз, понижением значения рН раствора до 4,0-5,0, для этого отключают электрод от отрицательного полюса источника постоянного тока и подключают его к положительному полюсу источника постоянного тока, после достижения рН осаждения проводят нагрев раствора до 98-100°С, отключив электролизер от источника постоянного тока и подключив его к источнику переменного тока, и оставляют раствор на 5-6 часов, при этом одновременно с осаждением нерастворившегося осадка проводят термоинактивацию фермента, после чего отделяют нерастворившийся осадок, нейтрализацию раствора осуществляют повышением значения рН раствора до 7,5-8,0.The technical result, to which the claimed invention is directed, consists in reducing the cost and simplifying the method. To achieve the specified technical result in a method for producing protein enzymatic hydrolysates, including grinding fish stock, washing it with water, hydrolysis with a NaCl solution in a chamber of a diaphragm electrolyzer with an electrode connected to the negative pole of a direct current source, separation of insoluble precipitate, solution neutralization, drying, packaging, hydrolysis is carried out with the introduction of a proteolytic enzyme in an amount of 1.0-2.0% by weight of raw materials at optimal pH and temperature, corresponding to maximum enzyme activity, within 5-6 hours, while the optimal hydrolysis conditions are obtained by conducting electrolysis in an electrolyzer, to which an alternating current source is additionally connected, and the electrolyzer is connected to an alternating current source to achieve and maintain the required solution temperature, and to a constant source current to achieve and maintain the required pH value of the solution, after hydrolysis, insoluble precipitate is precipitated in the same chamber as hydrolysis by lowering the value the pH of the solution is up to 4.0-5.0, for this, disconnect the electrode from the negative pole of the direct current source and connect it to the positive pole of the direct current source, after reaching the pH of the deposition, the solution is heated to 98-100 ° C, disconnecting the electrolyzer from the constant source current and connecting it to an alternating current source, and leave the solution for 5-6 hours, while simultaneously with the deposition the enzyme is thermally inactivated, then the insoluble precipitate is separated, the solution is neutralized by increasing the pH r solution up to 7.5-8.0. As a proteolytic enzyme, pancreatin is used. Distinctive features of the proposed method from the above known, closest to it, are hydrolysis with the introduction of the proteolytic enzyme pancreatin in an amount of 1.0-2.0% by weight of raw materials at optimal pH and temperature values corresponding to the maximum activity of the enzyme for 5 -6 hours, the optimal conditions are obtained by conducting electrolysis in an electrolyzer, to which an alternating current source is additionally connected, and the electrolyzer is connected to an alternating current source for up to to reduce and maintain the required temperature of the solution, and to achieve a constant current source of the required pH of the solution, after hydrolysis, insoluble precipitate is precipitated in the same chamber as hydrolysis by lowering the pH of the solution to 4.0-5.0, for This disconnects the electrode from the negative pole of the DC source and connects it to the positive pole of the DC source, after reaching the pH of the deposition, the solution is heated to 98-100 ° C, disconnecting the electrolyzer from the source the current and connecting it to an alternating current source, and leave the solution for 5-6 hours, while simultaneously with the precipitation of the insoluble precipitate, the enzyme is thermally inactivated, then the insoluble precipitate is separated, the solution is neutralized by increasing the pH of the solution to 7.5-8, 0.

Благодаря наличию этих признаков при необходимости увеличения или уменьшения рН раствора нет необходимости перекачивать раствор в другие емкости или добавлять химические реагенты, например карбонат или бикарбонат натрия, достаточно электрод подключить к другому полюсу источника постоянного тока, т.е. сделать переполюсовку. Кроме того, создание и поддержание необходимой температуры в реакционной среде осуществляют нагреванием не от внешнего источника энергии, например водяного пара, а используют тепло, получаемое при прохождении переменного электрического тока через реакционную среду. Когда необходимо только поднять температуру раствора, не меняя ее рН, для этого всего лишь переключают электропитание электролизера с постоянного на переменный ток. При этом рН раствора не меняется. Для уменьшения температуры достаточно отключить электролизер от электропитания. Кроме того, использование протеолитического фермента панкреатина позволяет увеличить глубину переработки сырья, т.е. увеличить степень гидролиза.Due to the presence of these signs, if it is necessary to increase or decrease the pH of the solution, there is no need to pump the solution into other containers or add chemicals, for example sodium carbonate or sodium bicarbonate, it is enough to connect the electrode to the other pole of the direct current source, i.e. make a polarity reversal. In addition, the creation and maintenance of the required temperature in the reaction medium is carried out by heating not from an external energy source, such as water vapor, but using the heat obtained by passing an alternating electric current through the reaction medium. When it is only necessary to raise the temperature of the solution without changing its pH, for this they just switch the power supply of the electrolyzer from direct to alternating current. In this case, the pH of the solution does not change. To reduce the temperature, it is enough to disconnect the electrolyzer from the power supply. In addition, the use of the proteolytic enzyme pancreatin allows you to increase the depth of processing of raw materials, i.e. increase the degree of hydrolysis.

ПримерExample

В качестве сырья используют путассу или любое другое рыбное сырье. 1000 г измельченного до размера 1-5 мм сырья промывают пресной водой при температуре 6-10°С, затем осадок отделяют на центрифуге и помещают в камеру с электродом, подключенным к отрицательному полюсу источника постоянного тока (катодная камера), заливают 1%-ным раствором NaCl в соотношении 1:1. Осуществляют нагрев смеси путем включения электролизера в режим переменного тока в течение 15 минут и доводят температуру смеси до 50°С, затем устанавливают рН реакционной смеси до значений 7,8-8,2 путем переключения электролизера в режим постоянного тока и вносят в камеру фермент панкреатин в количестве 1,25% от массы сырья и проводят гидролиз при рН от 7,8 до 8,2 при температуре 50°С в течение 6 часов.As raw materials use blue whiting or any other fish raw materials. 1000 g of raw material crushed to a size of 1-5 mm are washed with fresh water at a temperature of 6-10 ° C, then the precipitate is separated in a centrifuge and placed in a chamber with an electrode connected to the negative pole of a direct current source (cathode chamber), filled with 1% NaCl solution in a ratio of 1: 1. The mixture is heated by turning on the electrolyzer in alternating current mode for 15 minutes and adjusting the temperature of the mixture to 50 ° С, then setting the pH of the reaction mixture to 7.8-8.2 by switching the electrolyzer to direct mode and introducing pancreatin enzyme into the chamber in the amount of 1.25% by weight of the raw material and hydrolysis is carried out at a pH of from 7.8 to 8.2 at a temperature of 50 ° C for 6 hours.

Поддержание параметров гидролиза (температуры и рН смеси) осуществляют путем периодического переключения электролизера то к источнику переменного тока для поддержания температуры, то к источнику постоянного тока для поддержания рН от 7,8 до 8,2. После окончания процесса гидролиза осуществляют осаждение негидролизованных включений и высокомолекулярных пептидов, для этого рН раствора доводят до значения 4,5 путем переключения катода к положительному полюсу источника постоянного тока (переполюсовка) и нагревают реакционную смесь до температуры 100°С путем подключения электролизера к источнику переменного тока (в режим переменного тока) и оставляют смесь на 5-6 часов, при этом происходит осаждение осадка и одновременно термоинактивация фермента. Затем раствор фильтруют, гидролизат помещают в катодную камеру и проводят нейтрализацию раствора, для этого включают электролизер в режим постоянного тока и доводят таким образом значение рН раствора до 7,5 -8,0. После этого гидролизат сушат под вакуумом при температуре 60-70°С и упаковывают.The hydrolysis parameters (temperature and pH of the mixture) are maintained by periodically switching the electrolyzer to an alternating current source to maintain the temperature, or to a constant current source to maintain a pH from 7.8 to 8.2. After the hydrolysis process is completed, non-hydrolyzed inclusions and high molecular weight peptides are precipitated; for this, the pH of the solution is adjusted to 4.5 by switching the cathode to the positive pole of the direct current source (polarity reversal) and the reaction mixture is heated to a temperature of 100 ° C by connecting the electrolyzer to an alternating current source (in alternating current mode) and leave the mixture for 5-6 hours, while sedimentation occurs and at the same time thermal inactivation of the enzyme. Then the solution is filtered, the hydrolyzate is placed in the cathode chamber and the solution is neutralized. To do this, turn on the electrolyzer in constant current mode and thus adjust the pH of the solution to 7.5-8.0. After that, the hydrolyzate is dried under vacuum at a temperature of 60-70 ° C and packaged.

В процессе получения гидролизата анодная камера заполняется равным объемом раствора NaCl 5%-ной концентрации. Сухой белковый ферментативный гидролизат представляет собой порошок золотистого цвета и содержит NaCl в количестве менее 20%.In the process of obtaining the hydrolyzate, the anode chamber is filled with an equal volume of NaCl solution of 5% concentration. Dry protein enzymatic hydrolyzate is a golden powder and contains NaCl in an amount of less than 20%.

Claims (2)

1. Способ получения белковых ферментативных гидролизатов, включающий измельчение рыбного сырья, промывку его водой, гидролиз раствором NaCl в камере диафрагменного электролизера с электродом, подключенным к отрицательному полюсу источника постоянного тока, отделение нерастворившегося осадка, нейтрализацию раствора, сушку, упаковку, отличающийся тем, что гидролиз осуществляют с введением протеолитического фермента в количестве 1,0-2,0% от массы сырья при оптимальных значениях рН и температуры, соответствующих максимуму активности фермента, в течение 5-6 ч, при этом оптимальные условия гидролиза получают путем проведения электролиза в электролизере, к которому дополнительно подключен источник переменного тока, причем электролизер подключают к источнику переменного тока для достижения и поддержания необходимой температуры раствора, а к источнику постоянного тока для достижения и поддержания необходимого значения рН раствора, после гидролиза проводят осаждение нерастворившегося осадка в той же камере, что и гидролиз, понижением значения рН раствора до 4,0-5,0, для этого отключают электрод от отрицательного полюса источника постоянного тока и подключают его к положительному полюсу источника постоянного тока, после достижения рН осаждения проводят нагрев раствора до 98-100°С, отключив электролизер от источника постоянного тока и подключив его к источнику переменного тока, и оставляют раствор на 5-6 ч, при этом одновременно с осаждением проводят термоинактивацию фермента, после этого отделяют нерастворившийся осадок, нейтрализацию раствора осуществляют повышением значения рН раствора до 7,5-8,0.1. A method of obtaining protein enzymatic hydrolysates, including grinding fish stock, washing it with water, hydrolysis with a NaCl solution in a diaphragm electrolyzer chamber with an electrode connected to the negative pole of a direct current source, separation of insoluble precipitate, solution neutralization, drying, packaging, characterized in that hydrolysis is carried out with the introduction of a proteolytic enzyme in an amount of 1.0-2.0% by weight of raw materials at optimal pH and temperature values corresponding to the maximum activity of the enzyme , for 5-6 hours, while the optimal hydrolysis conditions are obtained by conducting electrolysis in an electrolyzer, to which an alternating current source is additionally connected, the electrolyzer being connected to an alternating current source to achieve and maintain the required solution temperature, and to a direct current source to achieve and maintaining the required pH of the solution, after hydrolysis, insoluble precipitate is precipitated in the same chamber as the hydrolysis, lowering the pH of the solution to 4.0-5.0, for this off they pick up the electrode from the negative pole of the direct current source and connect it to the positive pole of the direct current source, after reaching the precipitation pH, the solution is heated to 98-100 ° C, disconnecting the electrolyzer from the direct current source and connecting it to the alternating current source, and leave the solution on 5-6 hours, at the same time as the precipitation, the enzyme is thermally inactivated, then the insoluble precipitate is separated, the solution is neutralized by increasing the pH of the solution to 7.5-8.0. 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве протеолитического фермента используют панкреатин.2. The method according to claim 1, characterized in that pancreatin is used as a proteolytic enzyme.
RU2006109309/13A 2006-03-23 2006-03-23 Method for obtaining protein enzymatic hydrolyzates RU2312514C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2006109309/13A RU2312514C1 (en) 2006-03-23 2006-03-23 Method for obtaining protein enzymatic hydrolyzates

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2006109309/13A RU2312514C1 (en) 2006-03-23 2006-03-23 Method for obtaining protein enzymatic hydrolyzates

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2312514C1 true RU2312514C1 (en) 2007-12-20

Family

ID=38916966

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2006109309/13A RU2312514C1 (en) 2006-03-23 2006-03-23 Method for obtaining protein enzymatic hydrolyzates

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2312514C1 (en)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2712747C1 (en) * 2018-10-22 2020-01-30 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Мурманский морской биологический институт Кольского научного центра Российской академии наук (ММБИ КНЦ РАН) Method for producing enzymatic hydrolyzate from sea hydrobiont processing wastes
CN116508998A (en) * 2023-05-15 2023-08-01 海南鳄珍鳄鱼产业科技有限公司 Crocodile bone peptide beverage capable of improving immunity of human body and preparation method thereof

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ТЕЛИШЕВСКАЯ Л.Я. Белковые гидролизаты. Получение, состав, применение. - М.: Аграрная наука, 2000, с.111-124. *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2712747C1 (en) * 2018-10-22 2020-01-30 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Мурманский морской биологический институт Кольского научного центра Российской академии наук (ММБИ КНЦ РАН) Method for producing enzymatic hydrolyzate from sea hydrobiont processing wastes
CN116508998A (en) * 2023-05-15 2023-08-01 海南鳄珍鳄鱼产业科技有限公司 Crocodile bone peptide beverage capable of improving immunity of human body and preparation method thereof

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Vaithanomsat et al. Sericin separation from silk degumming wastewater
CN102533913B (en) Method for preparing antioxidant active peptide by hydrolyzing fish scale collagen with co-immobilized double enzymes
CN102329846A (en) Pollution-free production method for producing soybean and silkworm chrysalis composite oligopeptides by adopting composite enzyme hydrolysis method
JPS6217520B2 (en)
WO2022095590A1 (en) Mutant enzyme, use thereof and process for preparing tripeptide by using enzymatic method
CN111019962A (en) SOD-ELP fusion protein and preparation method thereof
RU2312514C1 (en) Method for obtaining protein enzymatic hydrolyzates
CN103518944A (en) Preparation method of soybean peptides
CN110669814B (en) Wheat protein peptide with blood pressure lowering activity and preparation method thereof
CN101731629A (en) Preparation method of peptide-calcium composite
ES2612252T3 (en) E. coli strain BL21 lacking a functional gene complex of group II capsular genes
JPH05227983A (en) Production of peptide from rice bran protein
CN106957803A (en) One plant of clostridiopetidase A production bacterial strain and its collagenase gene sequence and application
CN114634961B (en) Preparation method of oyster oligopeptide powder with multiple bioactivity functions
CN113979524B (en) Preparation method of titanium polychloride
CN105671069B (en) A kind of bee peptide expression vector and its construction method and application
CN1712516A (en) Protein peptone and production thereof
RU2170763C2 (en) Method of microbiological nutrient medium base preparing
RU2663132C1 (en) Method for producing low-molecular dna with high degree of purity
CN105603031A (en) Aquatic protein active peptide preparing method without adopting high-temperature treatment
SU1138073A1 (en) Method of breaking chlorella cell wall
RU2110926C1 (en) Protein solving method
SU1487817A3 (en) Method of extracting carboxypeptidase b from adrenal gland of mammals
JPH01175994A (en) Production of partial hydrolyzed product of protein
CN115851787B (en) Leucine aminopeptidase producing gene, bacillus subtilis, construction method and application

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20080324