RU2308183C1 - СРЕДА ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ РЯСКИ МАЛОЙ, Lemna minor L. - Google Patents
СРЕДА ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ РЯСКИ МАЛОЙ, Lemna minor L. Download PDFInfo
- Publication number
- RU2308183C1 RU2308183C1 RU2006102755/12A RU2006102755A RU2308183C1 RU 2308183 C1 RU2308183 C1 RU 2308183C1 RU 2006102755/12 A RU2006102755/12 A RU 2006102755/12A RU 2006102755 A RU2006102755 A RU 2006102755A RU 2308183 C1 RU2308183 C1 RU 2308183C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- molasses
- medium
- boric acid
- potassium phosphate
- potassium
- Prior art date
Links
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 claims abstract description 33
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 32
- KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N boric acid Chemical compound OB(O)O KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 26
- 239000004327 boric acid Substances 0.000 claims abstract description 25
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K potassium phosphate Substances [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims abstract description 19
- FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N potassium nitrate Chemical compound [K+].[O-][N+]([O-])=O FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 18
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims abstract description 15
- ZCCIPPOKBCJFDN-UHFFFAOYSA-N calcium nitrate Chemical compound [Ca+2].[O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O ZCCIPPOKBCJFDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 13
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 claims abstract description 10
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 claims abstract description 9
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract description 8
- 239000004323 potassium nitrate Substances 0.000 claims abstract description 8
- 235000010333 potassium nitrate Nutrition 0.000 claims abstract description 8
- -1 potassium phosphate monosubstituted, potassium phosphate disubstituted, magnesium sulfate Chemical class 0.000 claims abstract description 8
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 claims abstract description 4
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 claims abstract description 3
- 244000207740 Lemna minor Species 0.000 claims description 15
- 235000006439 Lemna minor Nutrition 0.000 claims description 13
- 241000339987 Lemna valdiviana Species 0.000 claims description 13
- 239000011575 calcium Substances 0.000 claims description 4
- ICSSIKVYVJQJND-UHFFFAOYSA-N calcium nitrate tetrahydrate Chemical compound O.O.O.O.[Ca+2].[O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O ICSSIKVYVJQJND-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 37
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 15
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 15
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 10
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 7
- 235000001855 Portulaca oleracea Nutrition 0.000 description 7
- ZPLCXHWYPWVJDL-UHFFFAOYSA-N 4-[(4-hydroxyphenyl)methyl]-1,3-oxazolidin-2-one Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1CC1NC(=O)OC1 ZPLCXHWYPWVJDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229910001385 heavy metal Inorganic materials 0.000 description 6
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 6
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 5
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 5
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 5
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 5
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 208000006278 hypochromic anemia Diseases 0.000 description 4
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 4
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- WRUGWIBCXHJTDG-UHFFFAOYSA-L magnesium sulfate heptahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.[Mg+2].[O-]S([O-])(=O)=O WRUGWIBCXHJTDG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 3
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 3
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 3
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 3
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 2
- 235000010338 boric acid Nutrition 0.000 description 2
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 2
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 2
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 2
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 2
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 2
- ZHJGWYRLJUCMRT-UHFFFAOYSA-N 5-[6-[(4-methylpiperazin-1-yl)methyl]benzimidazol-1-yl]-3-[1-[2-(trifluoromethyl)phenyl]ethoxy]thiophene-2-carboxamide Chemical compound C=1C=CC=C(C(F)(F)F)C=1C(C)OC(=C(S1)C(N)=O)C=C1N(C1=C2)C=NC1=CC=C2CN1CCN(C)CC1 ZHJGWYRLJUCMRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- ZOKXTWBITQBERF-UHFFFAOYSA-N Molybdenum Chemical compound [Mo] ZOKXTWBITQBERF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QMXBEONRRWKBHZ-UHFFFAOYSA-N [Na][Mo] Chemical compound [Na][Mo] QMXBEONRRWKBHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MMDJDBSEMBIJBB-UHFFFAOYSA-N [O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O.[NH6+3] Chemical compound [O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O.[NH6+3] MMDJDBSEMBIJBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000036531 allelopathy Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- JZCCFEFSEZPSOG-UHFFFAOYSA-L copper(II) sulfate pentahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.[Cu+2].[O-]S([O-])(=O)=O JZCCFEFSEZPSOG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 1
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K iron trichloride Chemical compound Cl[Fe](Cl)Cl RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229910052748 manganese Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011572 manganese Substances 0.000 description 1
- WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L manganese(2+);methyl n-[[2-(methoxycarbonylcarbamothioylamino)phenyl]carbamothioyl]carbamate;n-[2-(sulfidocarbothioylamino)ethyl]carbamodithioate Chemical class [Mn+2].[S-]C(=S)NCCNC([S-])=S.COC(=O)NC(=S)NC1=CC=CC=C1NC(=S)NC(=O)OC WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 229910052750 molybdenum Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011733 molybdenum Substances 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000575 pesticide Substances 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 1
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- UEUXEKPTXMALOB-UHFFFAOYSA-J tetrasodium;2-[2-[bis(carboxylatomethyl)amino]ethyl-(carboxylatomethyl)amino]acetate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CN(CC([O-])=O)CCN(CC([O-])=O)CC([O-])=O UEUXEKPTXMALOB-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 239000002351 wastewater Substances 0.000 description 1
- 238000004383 yellowing Methods 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
- RZLVQBNCHSJZPX-UHFFFAOYSA-L zinc sulfate heptahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.[Zn+2].[O-]S([O-])(=O)=O RZLVQBNCHSJZPX-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
Landscapes
- Fertilizers (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Hydroponics (AREA)
Abstract
Изобретение относится к методу эффективного выращивания ряски малой, Lemna minor L. в стационарных условиях для биотестирования воды. Среда для культивирования Lemna minor L. содержит калий азотнокислый, кальций азотнокислый, калий фосфорнокислый однозамещенный, калий фосфорнокислый двузамещенный, магний сернокислый, борную кислоту, при этом в нее дополнительно вводят мелассу при следующем соотношении компонентов, мас.%: калий азотнокислый, KNO3 - 0,0175-0,014; калий фосфорнокислый однозамещенный, KH2PO4 - 0,0045-0,0036; калий фосфорнокислый двузамещенный трехводный, К2HPO4·3Н2O - 0,0045-0,0036; кальций азотнокислый четырехводный, Са(NO3)2·4Н2O - 0,0148-0,0118; магний сернокислый семиводный, MgSO4·7H2O - 0,005-0,004; кислота борная, Н3ВО3 - 12,0-9,6·10-6; меласса - 0,002-0,004; дистиллированная вода - остальное. Указанная среда позволяет повысить эффективность культивирования необходимого тест-объекта - ряски малой, которая в дальнейшем используется для тестирования водных проб на присутствие токсичных веществ, в первую очередь ионов тяжелых металлов. 3 табл.
Description
Изобретение относится к методу биотестирования воды на степень ее загрязнения тяжелыми металлами, пестицидами и другими токсичными веществами с использованием растений ряски малой, Lemna minor L. как чувствительного тест-объекта.
Для культивирования тест-организма ряски малой известны следующие среды (таблица 1).
Среда Е, стандартно рекомендуемая для выращивания различных видов рясок (в том числе Lemna minor) и содержащая нитраты калия и кальция, дигидрофосфат калия, сульфат магния, борную кислоту и соли марганца, железа, меди, цинка и молибдена. Общая концентрация солей - 0.416 мас.%; количественное соотношение азота, фосфора и калия составляет 4.00:1.32:9.56 соответственно (McLaughlin J., Rogers L. The use of biological assays to evaluate botanicals // Drug Inf. J. 1998. V.32. P.513-524).
Модифицированная среда Штейнберга, содержащая нитратный азот, фосфаты калия, кальций, магний, а также комплекс микроэлементов - неорганических солей тяжелых металлов и борную кислоту. Общая концентрация солей - 0.085 мас.%; количественное соотношение азота, фосфора и калия составляет 4.00:1.05:9.90 соответственно (протокол DIN AK "Bioteste", Vorlage für einen ISO/CEN Entwurf zum Lemnatest, ISO/WD 20079 (Stand: 04.05.2001): Water quality - Duckweed growth inhibition; Determination of the toxic effect of water constituents and waste water to duckweed, Lemna minor) - прототип.
Недостатком этих сред для культивирования ряски малой в целях биотестирования является следующее.
1. В числе микроэлементов содержатся соли тех тяжелых металлов, на которые тестируются водные пробы. Для предотвращения их токсичного действия на растения ряски малой в указанные среды вводится комплексон III - этилендиаминтетраацетат натрия, ЭДТА, который связывает не только ионы тяжелых металлов, но также кальция и магния. Это негативно влияет на рост и развитие ряски малой и может искажать результаты тестов при использовании подобной среды для разбавления образцов согласно стандартной методике (Einhelling F., Leather G., Hobbs L. Use of Lemna minor L. as bioassay on allelopathy // J. Chem. Ecol. 1985. V.11. P.65-92). При культивировании ряски малой в упомянутых средах наблюдали низкий уровень размножения растений (средний суточный коэффициент роста =1.08) и пожелтение (хлороз) листецов.
2. Относительно высокая концентрация фосфата в среде Е, 0.068 мас.%, также может способствовать связыванию ионов тяжелых металлов при их концентрации в тестируемых пробах порядка 0.01-0.001%, на что в принципе рассчитан тест с ряской малой. Таким образом, чувствительность, ожидаемая для данного метода биотестирования, может значительно снижаться при использовании такой среды.
Таблица 1 | ||
Компоненты | Концентрация, мас.% | |
Модифицированная среда Штейнберга | Среда Е | |
Калий азотнокислый | 0.0350 | 0.1515 |
Калий фосфорнокислый однозамещенный | 0.0090 | 0.0680 |
Калий фосфорнокислый двузамещенный трехводный | 0.0013 | - |
Кальций азотнокислый четырехводный | 0.0295 | 0.1180 |
Магний сернокислый семиводный | 0.0100 | 0.0492 |
Кислота борная | 12·10-6 | 0.0286 |
Цинк сернокислый семиводный | 18·10-6 | 0.00022 |
Железо треххлористое шестиводное | 76·10-6 | 0.0054 |
Марганец двухлористый четырехводный | 18·10-6 | 0.00362 |
Продолжение таблицы 1 | ||
Компоненты | Концентрация, мас.% | |
Модифицированная среда Штейнберга | Среда Е | |
Натрий молибденовокислый двухводный | 4.4·10-6 | 0.00012 |
Медь сернокислая пятиводная | - | 0.00022 |
ЭДТА | 0.00015 | 0.00112 |
Техническим решением задачи является повышение эффективности культивирования ряски малой в стационарных условиях для последующего использования ее культуры в биотестировании.
Поставленная задача достигается тем, что в среду для культивирования растений ряски малой, Lemna minor L., содержащую калий азотнокислый, кальций азотнокислый, калий фосфорнокислый однозамещенный, калий фосфорнокислый двузамещенный, магний сернокислый и борную кислоту, дополнительно вводят мелассу при следующем соотношении компонентов, мас.%:
калий азотнокислый, KNO3 - 0.0175-0.0140;
калий фосфорнокислый однозамещенный, КН2РО4 - 0.0045-0.0036;
калий фосфорнокислый двузамещенный трехводный, К2НРО4·3Н2О - 0.0045-0.0036;
кальций азотнокислый четырехводный, Са(NO3)2·4Н2О - 0.0148-0.0118;
магний сернокислый семиводный, MgSO4·7Н2О - 0.005-0.004;
кислота борная, H3BO3 - 12.0-9.6·10-6;
меласса - 0.002-0.004;
дистиллированная вода - остальное.
Новизна заявляемого предложения обусловлена тем, что использование мелассы обеспечивает хороший рост растений ряски, отсутствие их хлороза при длительном культивировании; в то же время такая среда вполне пригодна для проведения корректного и высокочувствительного биотестирования воды на наличие тяжелых металлов. Кроме того, при содержании 1:1 однозамещенного / двузамещенного фосфорнокислого калия значение рН среды имеет значение, близкое к 6, что соответствует норме для ряски малой и в то же время не способствует переходу токсичных металлов в нерастворимые соединения.
По данным патентной и научной литературы не обнаружено аналогичного решения, которое бы обеспечило достижение поставленной задачи, что позволяет говорить об изобретательском уровне предложения.
Среду готовят следующим образом.
1. Исходно приготовляют концентрированные растворы питательных солей, борной кислоты и мелассы в дистиллированной воде; концентрации указаны в таблице 2.
2. Раствор борной кислоты титруют 4%-м (мас.) раствором гидроксида калия до рН 7 с индикаторным красителем бромтимоловым синим.
3. Аликвоты концентрированных растворов, указанные в таблице 2, разводят дистиллированной водой до общего объема 2 л.
Общая концентрация солей - 0.0475 мас.%; количественное соотношение азота, фосфора и калия составляет 3:1:8 соответственно.
Таблица 2 | |||
Компоненты | Конечная концентрация компонентов. мас.% | Концентрация в исходных растворах, мас.% | Объемы аликвот, разводимых до 2 л готовой среды, мл |
Калий азотнокислый | 0.0175 | 3.5 | 10 |
Калий фосфорнокислый однозамещенный | 0.0045 | 0.9 | 10 |
Калий фосфорнокислый двузамещенный трехводный | 0.0045 | 0.9 | 10 |
Кальций азотнокислый четырехводный | 0.0148 | 2.95 | 10 |
Продолжение таблицы 2 | |||
Компоненты | Конечная концентрация компонентов, мас.% | Концентрация в исходных растворах, мас.% | Объемы аликвот, разводимых до 2 л готовой среды, мл |
Магний сернокислый семиводный | 0.0050 | 1 | 10 |
Кислота борная | 12·10-6 | 0.12 | 0.2 |
Меласса | 0.002 | 1 | 4 |
При таком способе приготовления среды представляется целесообразным приводить примеры на совокупность граничных значений концентраций солей и борной кислоты, при различном разбавлении аликвот их концентрированных растворов. В таблице 3 даются эти значения для пяти примеров, рассмотренных ниже.
Таблица 3 | ||||||
Концентрации ингредиентов в готовой среде, мас.% | ||||||
Калий азотнокислый | Калий фосфорнокислый однозамещенный | Калий фосфорнокислый двузамещенный трехводный | Кальций азотнокислый четырехводный | Магний сернокислый семиводный | Кислота борная | |
Пример 1 | 0.0175 | 0.0045 | 0.0045 | 0.0148 | 0.0050 | 12·10-6 |
Пример 2 | 0.0140 | 0.0036 | 0.0036 | 0.0118 | 0.0040 | 9.6·10-6 |
Пример 3 | 0.0175 | 0.0045 | 0.0045 | 0.0148 | 0.0050 | 12·10-6 |
Пример 4 | 0.0233 | 0.0060 | 0.0060 | 0.0197 | 0.0066 | 16·10-6 |
Пример 5 | 0.0175 | 0.0045 | 0.0045 | 0.0148 | 0.0050 | 12·10-6 |
Граничные значения концентрации мелассы (мас.%): 0.001; 0.002; 0.004; 0.01. Все приводимые значения были определены опытным путем через оценку интенсивности роста ряски малой в средах с варьирующим составом. Эффективность заявляемой среды проверяли выращиванием в ней растений ряски малой при постоянной температуре 24-26°С и освещенности порядка 3000 люкс в течение 4-7 суток. После того часть размножившихся растений пересаживали в свежие порции среды; такой перенос повторяли трижды.
Пример 1. Готовят концентрированные растворы указанных выше питательных веществ в дистиллированной воде, в концентрациях, приведенных в таблице 2. Раствор борной кислоты титруют 4%-м (мас.) раствором гидроксида натрия до рН 7 с бромтимоловым синим. Раствор мелассы 1%-й прогревают 15 минут на водяной бане при 100°С для гибели грибных спор и бактериальных клеток, затем охлаждают. Отмеривают аликвоты концентрированных растворов солей и борной кислоты (объемы приведены в таблице 2) и 2 мл 1%-го раствора мелассы, разводят их дистиллированной водой до конечного объема 2.0 литра и перемешивают. Конечная концентрация мелассы в среде составляет 0.001 мас.%, концентрации остальных ингредиентов приведены в таблице 3. На полученной среде средний суточный коэффициент роста (СКР) имел значение 1.30, тогда как в контрольных посевах на водопроводной воде с добавлением 0.001% мелассы среднее значение СКР было 1.12. Однако у некоторого числа растений в среде был отмечен хлороз, таким образом, при данных концентрациях ингредиентов среда неоптимальна для выращивания ряски малой.
Пример 2. Готовят концентрированные растворы указанных выше питательных солей, борной кислоты и мелассы в дистиллированной воде, в концентрациях, приведенных в таблице 2. Раствор борной кислоты титруют 4%-м (мас.) раствором гидроксида натрия до рН 7 с бромтимоловым синим. Раствор мелассы 1%-й прогревают 15 минут на водяной бане при 100°С для гибели грибных спор и бактериальных клеток, затем охлаждают. Отмеривают аликвоты концентрированных растворов солей и борной кислоты (объемы приведены в таблице 2) и 5 мл 1%-го раствора мелассы, разводят их дистиллированной водой до объема 2.5 литра и перемешивают. Конечная концентрация мелассы в среде составляет 0.002 мас.%, концентрации остальных ингредиентов приведены в таблице 3. На полученной среде средний суточный коэффициент роста (СКР) имел значение 1.32, тогда как в контрольных посевах на водопроводной воде с добавлением 0.002% мелассы среднее значение СКР было 1.04. Все растения, как в опыте, так и в контроле, оставались зелеными. Таким образом, при данных концентрациях ингредиентов среда является оптимальной для стационарного культивирования ряски малой.
Пример 3. Готовят концентрированные растворы указанных выше питательных веществ в дистиллированной воде, в концентрациях, приведенных в таблице 2. Раствор борной кислоты титруют 4%-м (мас.) раствором гидроксида натрия до рН 7 с бромтимоловым синим. Раствор мелассы 1%-й прогревают 15 минут на водяной бане при 100°С для гибели грибных спор и бактериальных клеток, затем охлаждают. Отмеривают аликвоты концентрированных растворов солей и борной кислоты (объемы приведены в таблице 2) и 6 мл 1%-го раствора мелассы, разводят их дистиллированной водой до объема 2.0 литра и перемешивают. Конечная концентрация мелассы в среде составляет 0.003 мас.%, концентрации остальных ингредиентов приведены в таблице 3. На полученной среде средний суточный коэффициент роста (СКР) имел значение 1.37, тогда как в контрольных посевах на водопроводной воде с добавлением 0.003% мелассы среднее значение СКР было 1.04. Растения в среде оставались зелеными. Таким образом, при данных концентрациях ингредиентов среда является оптимальной для стационарного культивирования ряски малой в течение по крайней мере 7 суток.
Пример 4. Готовят концентрированные растворы указанных выше питательных солей, борной кислоты и мелассы в дистиллированной воде, в концентрациях, приведенных в таблице 2. Раствор борной кислоты титруют 4%-м (мас.) раствором гидроксида натрия до рН 7 с бромтимоловым синим. Раствор мелассы 1%-й прогревают 15 минут на водяной бане при 100°С для гибели грибных спор и бактериальных клеток, затем охлаждают. Отмеривают аликвоты концентрированных растворов солей и борной кислоты (объемы приведены в таблице 2) и 6 мл 1%-го раствора мелассы, разводят их дистиллированной водой до объема 1.5 литра и перемешивают. Конечная концентрация мелассы в среде составляет 0.004 мас.%, концентрации остальных ингредиентов приведены в таблице 3. На полученной среде средний суточный коэффициент роста (СКР) имел значение 1.14, тогда как в контрольных посевах на водопроводной воде с добавлением 0.004% мелассы среднее значение СКР было 1.08. Наблюдали также слабый хлороз растений в среде. Таким образом, при данных концентрациях ингредиентов среда неоптимальна для выращивания ряски малой.
Пример 5. Готовят концентрированные растворы указанных выше питательных веществ в дистиллированной воде, в концентрациях, приведенных в таблице 2. Раствор борной кислоты титруют 4%-м (мас.) раствором гидроксида натрия до рН 7 с бромтимоловым синим. Раствор мелассы 1%-й прогревают 15 минут на водяной бане при 100°С для гибели грибных спор и бактериальных клеток, затем охлаждают. Отмеривают аликвоты концентрированных растворов солей и борной кислоты (объемы приведены в таблице 2) и 20 мл 1%-го раствора мелассы, разводят их дистиллированной водой до объема 2.0 литра и перемешивают. Конечная концентрация мелассы в среде составляет 0.01 мас.%, концентрации остальных ингредиентов приведены в таблице 3. На полученной среде средний суточный коэффициент роста (СКР) имел значение 1.36, тогда как в контрольных посевах на водопроводной воде с добавлением 0.01% мелассы среднее значение СКР было 1.16. Все растения как в опыте, так и в контроле, оставались зелеными. Таким образом, полученная среда пригодна для стационарного культивирования ряски малой в течение по крайней мере 7 суток. Однако при относительно высоких концентрациях мелассы в нестерильных условиях существует угроза интенсивного размножения бактерий и грибов в среде с культурой ряски.
Claims (1)
- Среда для культивирования растений ряски малой, Lemna minor L., содержащая калий азотнокислый, кальций азотнокислый, калий фосфорнокислый однозамещенный, калий фосфорнокислый двузамещенный, магний сернокислый, борную кислоту, при этом в нее дополнительно вводят мелассу при следующем соотношении компонентов, мас.%:
калий азотнокислый, KNO3 0,0175-0,014 калий фосфорнокислый однозамещенный, КН2PO4 0,0045-0,0036 калий фосфорнокислый двузамещенный трехводный, К2HPO4·3H2O 0,0045-0,0036 кальций азотнокислый четырехводный, Са(NO3)2·4Н2O 0,0148-0,0118 магний сернокислый семиводный, MgSO4·7H2O 0,005-0,004 кислота борная, Н3ВО3 12,0-9,6·10-6 меласса 0,002-0,004 дистиллированная вода остальное
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2006102755/12A RU2308183C1 (ru) | 2006-01-31 | 2006-01-31 | СРЕДА ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ РЯСКИ МАЛОЙ, Lemna minor L. |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2006102755/12A RU2308183C1 (ru) | 2006-01-31 | 2006-01-31 | СРЕДА ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ РЯСКИ МАЛОЙ, Lemna minor L. |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2308183C1 true RU2308183C1 (ru) | 2007-10-20 |
Family
ID=38925146
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2006102755/12A RU2308183C1 (ru) | 2006-01-31 | 2006-01-31 | СРЕДА ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ РЯСКИ МАЛОЙ, Lemna minor L. |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2308183C1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2578394C1 (ru) * | 2014-12-05 | 2016-03-27 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова Российской академии наук (ИБХ РАН) | СОСТАВ СРЕДЫ ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ РАСТЕНИЯ СЕМЕЙСТВА РЯСКОВЫЕ (Lemna minor) В УСЛОВИЯХ in vitro |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2171840C1 (ru) * | 2000-05-29 | 2001-08-10 | Институт физиологии Коми научного центра Уральского отделения РАН | Питательная среда для получения каллусной ткани lemna minor l. |
-
2006
- 2006-01-31 RU RU2006102755/12A patent/RU2308183C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2171840C1 (ru) * | 2000-05-29 | 2001-08-10 | Институт физиологии Коми научного центра Уральского отделения РАН | Питательная среда для получения каллусной ткани lemna minor l. |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
DIN A.K. "Biotest", Voriage fur einen ISO/CEN Entwurf zum Lemnatest (ISO/WD 20079), stand: 04.05.2001. * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2578394C1 (ru) * | 2014-12-05 | 2016-03-27 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова Российской академии наук (ИБХ РАН) | СОСТАВ СРЕДЫ ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ РАСТЕНИЯ СЕМЕЙСТВА РЯСКОВЫЕ (Lemna minor) В УСЛОВИЯХ in vitro |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Whitelaw et al. | Plant growth promotion of wheat inoculated with Penicillium radicumsp. nov. | |
Prakash et al. | Influence of humic substances on the growth of marine phytoplankton: dinoflagellates 1 | |
Hutner et al. | Culture media for Euglena gracilispter | |
Hall et al. | Stress modification of allelopathy of Helianthus annuus L. debris on seedling biomass production of Amaranthus retroflexus L. | |
Rezakhani et al. | Effect of silicon and phosphate-solubilizing bacteria on improved phosphorus (P) uptake is not specific to insoluble P-fertilized sorghum (Sorghum bicolor L.) plants | |
Sarkar et al. | In vitro characterization of manganese toxicity in relation to phosphorus nutrition in potato (Solanum tuberosum L.) | |
Hota et al. | Effect of inorganic and organic amendments on yield of cocoyam (Colocasia esculenta), and on soil properties | |
De Santiago et al. | Effect of Trichoderma asperellum strain T34 on iron nutrition in white lupin | |
Rabah et al. | Microbiological And Physico-chemical Assessment Of Soil Contaminated With Abattoir Effluents In Sokoto Metropolis, Nigeria. | |
Pasković et al. | Manganese soil and foliar fertilization of olive plantlets: The effect on leaf mineral and phenolic content and root mycorrhizal colonization | |
Kolesnikov et al. | Effect of bismuth contamination on soil biological properties | |
Kruskopf et al. | Induction of both acid and alkaline phosphatase activity in two green-algae (chlorophyceae) in low N and P concentrations | |
Musa et al. | Screening of bacterial isolates for phosphate solubilizing capability in a ferruginous ultisol in Benin City, Edo State, Nigeria | |
You et al. | Hydrolysis of fluorescein diacetate in an avocado plantation mulch suppressive to Phytophthora cinnamomi and its relationship with certain biotic and abiotic factors | |
Volk et al. | Mineral requirements for the growth of Anabaena spiroides in vitro | |
Salomon et al. | Evaluation of commercial composts and potting mixes and their ability to support arbuscular mycorrhizal fungi with maize (Zea mays) as host plant | |
RU2308183C1 (ru) | СРЕДА ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ РЯСКИ МАЛОЙ, Lemna minor L. | |
Siwik-Ziomek et al. | The content of carbon, nitrogen, phosphorus and sulphur in soil against the activity of selected hydrolases as affected by crop rotation and fertilisation | |
Chowdhury et al. | Correlation among microbial biomass S, soil properties, and other biomass nutrients | |
Gadallah | Interactive effect of heavy metals and temperature on the growth, and chlorophyll, saccharides and soluble nitrogen contents in Phaseolus plants | |
Darwesh | Effect of soil and foliar application of iron chelate on nutrient balance in lentil (Lens esculenta L.) by using modified DRIS equation | |
Allison et al. | Gaseous losses of nitrogen from green plants. II. Studies with excised leaves in nutrient media | |
CN114014709A (zh) | 一种腐殖酸-复合微生物菌剂液体肥调理剂及其制备方法 | |
Mendes et al. | Toxicological effects of metal-EDTA/NTA complex formation in a synthetic medium on the macroalga Gracilaria domingensis | |
Tabari et al. | Evaluation of biochar and salicylic acid application on soil biochemical properties and some growth parameters of Borago officinalis L. under different irrigation regimes |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20080201 |