RU2305838C1 - Method for predicting repeated respiratory diseases occurrence in early age children subjected to frequent and prolonged acute respiratory diseases - Google Patents
Method for predicting repeated respiratory diseases occurrence in early age children subjected to frequent and prolonged acute respiratory diseases Download PDFInfo
- Publication number
- RU2305838C1 RU2305838C1 RU2006112153/15A RU2006112153A RU2305838C1 RU 2305838 C1 RU2305838 C1 RU 2305838C1 RU 2006112153/15 A RU2006112153/15 A RU 2006112153/15A RU 2006112153 A RU2006112153 A RU 2006112153A RU 2305838 C1 RU2305838 C1 RU 2305838C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- respiratory diseases
- oropharynx
- adeno
- determined
- antigens
- Prior art date
Links
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области здравоохранения и найдет применение в педиатрии при прогнозировании возникновения повторных респираторных заболеваний у детей раннего возраста, часто и длительно болеющих ОРЗ.The invention relates to the field of health and will find application in pediatrics in predicting the occurrence of repeated respiratory diseases in young children, often and for a long time suffering from acute respiratory infections.
Частые респираторные заболевания приводят к нарушениям функционального состояния организма ребенка, могут обуславливать срыв адаптации основных функциональных систем детского организма и приводить к развитию хронической патологии (А.В.Кирюхин с соавт. «Оптимизация лечения часто и длительно болеющих детей: иммунокоррекция ликопидом» // Российский педиатрический журнал. - 2001. - №5. - С.27). При этом в настоящее время проблема частой респираторной заболеваемости у детей приобрела особую актуальность в связи с высокой частотой трансформации острых респираторных заболеваний в хронические и рецидивирующие формы (В.Н.Касаткин, Н.В.Михайлова, А.Г.Румянцев «Результаты трехлетнего катамнеза у часто болеющих детей» // Педиатрия. - 1998 - №2. - С.43-46).Frequent respiratory diseases lead to impaired functional state of the child’s body, can cause failure to adapt the basic functional systems of the child’s body and lead to the development of chronic pathology (A.V. Kiryukhin et al. “Optimization of the treatment of often and long-term ill children: immunocorrection with lycopid” // Russian pediatric journal. - 2001. - No. 5. - P.27). At the same time, the problem of frequent respiratory morbidity in children has become particularly urgent due to the high frequency of transformation of acute respiratory diseases into chronic and recurrent forms (V.N.Kasatkin, N.V. Mikhaylova, A.G. Rumyantsev “Results of a three-year follow-up in frequently ill children ”// Pediatrics. - 1998 - No. 2. - P.43-46).
Важным патогенетическим механизмом снижения антиинфекционной резистентности детского организма и увеличения частоты возникновения у детей респираторных заболеваний являются дисбиотические изменения в составе микрофлоры толстого кишечника и верхних дыхательных путей, так как нормальная микрофлора этих двух биотопов играет важную роль в морфологическом и функциональном созревании иммунной системы ребенка (Шендеров Б.А. Медицинская микробная экология и функциональное питание. - М.: Грантъ, 1998. Т.1. - 288 с. (с.142-180); А.И.Хавкин «Микробиоценоз кишечника и иммунитет» // Русский медицинский журнал. - 2003. - Т.11. - №3. - С.3-7; Ю.В.Марушко с соавт. «Состояние колонизационной резистентности и микроморфология небных миндалин у часто и длительно болеющих детей» // Архив клинической и экспериментальной медицины. - 1999. - Т.8. - №2. - С.139-141). При этом взаимосвязь и взаимообусловленность иммунной и микроэкологической систем организма особенно велика у детей раннего возраста, так как данный возраст является критическим как для развивающейся иммунной системы, так и для находящейся в стадии становления микрофлоры.An important pathogenetic mechanism for reducing the anti-infectious resistance of the child’s body and increasing the incidence of respiratory diseases in children is dysbiotic changes in the microflora of the large intestine and upper respiratory tract, since the normal microflora of these two biotopes plays an important role in the morphological and functional maturation of the child’s immune system (Shenderov B .A. Medical Microbial Ecology and Functional Nutrition. - M .: Grant, 1998. Vol. 1. - 288 pp. (P.142-180); A.I. Khavkin "Microbioceno intestines and immunity "// Russian Medical Journal. - 2003. - T.11. - No. 3. - P.3-7; Yu.V. Marushko et al." The state of colonization resistance and micromorphology of the tonsils in often and long-term ill children ”// Archive of clinical and experimental medicine. - 1999. - T. 8. - No. 2. - S.139-141). At the same time, the interconnection and interdependence of the immune and microecological systems of the body is especially great in young children, since this age is critical both for the developing immune system and for the microflora that is in the stage of formation.
Сопряженная оценка состояния микрофлоры толстого кишечника и верхних дыхательных путей у детей раннего возраста с учетом не только бактериального, но и вирусного компонентов микробиоценозов позволила уточнить представления о патогенезе предрасположенности к повторным инфекционным заболеваниям дыхательной системы, конкретизировать терапию и определить прогностическую роль дисбиотических изменений в микроэкологических системах толстого кишечника и верхних дыхательных путей в формировании контингента часто и длительно болеющих респираторными заболеваниями детей раннего возраста.A combined assessment of the microflora of the large intestine and upper respiratory tract in young children, taking into account not only the bacterial, but also the viral components of microbiocenoses, made it possible to clarify the understanding of the pathogenesis of predisposition to repeated infectious diseases of the respiratory system, specify the therapy and determine the prognostic role of dysbiotic changes in microecological systems of the large intestines and upper respiratory tract in the formation of the contingent of often and long-term sick p respiratory diseases of young children.
Проведенными исследованиями по научно-медицинской и патентной литературе выявлены различные способы прогнозирования течения острых бронхолегочных заболеваний и высокой частоты их повторного возникновения у детей с учетом состояния микрофлоры детского организма.Conducted research on the medical-scientific and patent literature revealed various methods for predicting the course of acute bronchopulmonary diseases and the high frequency of their recurrence in children, taking into account the state of microflora of the child’s body.
Так в работе Огошковой И.А. «Нарушение иммунитета, микробиоценоза кишечника, их коррекция бифидумбактерином и карболеном у детей первых трех месяцев жизни с тяжелыми формами острой пневмонии» (Автореф. дис. к.м.н. - Челябинск, 1996. - 23 с.) доказана прямая взаимосвязь между степенью дисбиотических изменений в микроэкологической системе толстого кишечника, с одной стороны, и тяжестью клинического течения воспалительного процесса в легких и выраженностью нарушений иммунной системы, с другой.So in the work of Ogoshkova I.A. “Immunity violation, intestinal microbiocenosis, their correction with bifidumbacterin and carbolene in children of the first three months of life with severe forms of acute pneumonia” (Abstract of thesis, Candidate of Medical Sciences - Chelyabinsk, 1996. - 23 p.), A direct relationship between the degree dysbiotic changes in the microecological system of the large intestine, on the one hand, and the severity of the clinical course of the inflammatory process in the lungs and the severity of disorders of the immune system, on the other.
В работе Сиротиной М.Д. «Формирование микробиоценоза основных биотопов в норме и при патологии у детей дошкольного возраста» (Автореф. дис. к.м.н. - Архангельск, 1998. - 18 с.) исследовано состояние микробиоценозов толстого кишечника и верхних дыхательных путей у эпизодически и часто болеющих респираторными заболеваниями детей 4-7 лет и показан более выраженный характер сочетанного дисбиоза изучаемых биотопов в группе часто болеющих детей, что, по мнению автора, позволяет отнести указанную категорию детей к группе риска по развитию оппортунистической инфекции любой локализации. В работе Голищевой О.В. «Микробиологическая характеристика острых бронхолегочных заболеваний у детей раннего возраста в современных условиях» (Автореф. дис. к.м.н. - Ленинград, 1989. - 21 с.) предложена методика прогнозирования осложненного течения острого бронхолегочного процесса и выделения детей в группу «риска» по затяжному (рецидивирующему) течению острой пневмонии или бронхита на основе наиболее информативных признаков (анамнестических - ранее перенесенные заболевания (частота); микробиологических - наличие вирусо-бактериальных ассоциаций в качестве этиологического фактора данного респираторного заболевания; иммунологических - наличие повышенного уровня ЦИК и антииммуноглобулинов в период реконвалесценции; и лабораторных), представленных в виде прогностической таблицы и прогностического индекса. Недостатком предложенного способа является возможность прогнозирования течения только одного эпизода бронхолегочного заболевания, в этиологии которого доказано участие вирусо-бактериальных ассоциаций, с использованием инвазивных методик (серологическое исследование парных сывороток с определением титра антител к вирусам - возбудителям респираторных инфекций) и бактериологического исследования мокроты, получение которой затруднено у детей раннего возраста. При этом о возможности возникновения повторных эпизодов бронхолегочных заболеваний можно судить только косвенно, низкая точность прогноза.In the work of Sirotina M.D. “The formation of the microbiocenosis of the main biotopes in normal and pathological conditions in preschool children” (Author's abstract. Dis. C.m.s. - Arkhangelsk, 1998. - 18 p.) Studied the condition of microbiocenoses of the large intestine and upper respiratory tract in episodically and often ill respiratory diseases of children 4-7 years old and the more pronounced nature of the combined dysbiosis of the studied biotopes in the group of frequently ill children is shown, which, according to the author, allows us to classify this category of children as a risk group for the development of opportunistic infection of any localization. In the work of Golischeva O.V. “Microbiological characteristics of acute bronchopulmonary diseases in young children in modern conditions” (Abstract of thesis, Candidate of Medical Sciences - Leningrad, 1989. - 21 pp.) A methodology for predicting the complicated course of acute bronchopulmonary process and the allocation of children to the “risk” group is proposed. "On the protracted (recurring) course of acute pneumonia or bronchitis based on the most informative signs (history - previous diseases (frequency); microbiological - the presence of virus-bacterial associations as etiolo the genetic factor of this respiratory disease; immunological - the presence of an increased level of CEC and anti-immunoglobulins during the period of convalescence; and laboratory), presented in the form of a prognostic table and prognostic index. The disadvantage of the proposed method is the ability to predict the course of only one episode of bronchopulmonary disease, in the etiology of which the participation of virus-bacterial associations is proved, using invasive techniques (serological testing of paired sera with the definition of the titer of antibodies to viruses - pathogens of respiratory infections) and bacteriological examination of sputum, which difficult in young children. At the same time, the possibility of the occurrence of repeated episodes of bronchopulmonary diseases can be judged only indirectly, the low accuracy of the prognosis.
В работе Сагитовой Г.Р. «Клинико-диагностическое значение комплексной оценки показателей естественной защиты организма при бронхолегочных заболеваниях у детей» (Автореф. дис. к.м.н. - Астрахань, 1998. - 19 с.) предложен способ улучшения диагностики и прогнозирования бронхолегочных заболеваний путем исследования показателей естественной резистентности организма: количества нулевых и фагоцитирующих эпителиальных клеток и полиморфноядерных лейкоцитов в цитограммах слизистых оболочек верхних дыхательных путей, микробиоценоза и бактерицидной активности кожи по гемолитическому индексу, активности лизоцима слюны. Увеличение гемолитического индекса кожи выше средневозрастной нормы выявляет нарушение адаптации организма ребенка и позволяет прогнозировать высокий риск развития респираторной инфекции. Недостатком способа является низкая точность прогноза, учет состояния микрофлоры и бактерицидной активности только кожи, лишь косвенно отражающей снижение барьерных функций слизистых оболочек дыхательных путей.In the work of Sagitova G.R. "Clinical and diagnostic value of a comprehensive assessment of the indicators of the body's natural defense in children with bronchopulmonary diseases" (Abstract of thesis, Candidate of Medical Sciences - Astrakhan, 1998. - 19 pp.), A method for improving the diagnosis and prognosis of bronchopulmonary diseases by studying the indicators of natural body resistance: the number of zero and phagocytic epithelial cells and polymorphonuclear leukocytes in the cytograms of the mucous membranes of the upper respiratory tract, microbiocenosis and bactericidal activity of the skin per g moliticheskomu index, activity of lysozyme saliva. An increase in the hemolytic index of the skin above the average age norm reveals a violation of the adaptation of the child's body and allows us to predict a high risk of respiratory infection. The disadvantage of this method is the low accuracy of the forecast, taking into account the state of microflora and bactericidal activity of only the skin, only indirectly reflecting a decrease in the barrier functions of the mucous membranes of the respiratory tract.
Из патентных источников известен «Способ прогнозирования частоты рецидивов инфекционных заболеваний дыхательных путей и стойкости эффекта оздоровления у дошкольников» (Патент РФ №2169923, G01 №33/53, 33/48, БИ №18, 2001 г.) путем определения наличия условно-патогенной микрофлоры в кале, лейкоцитарной формулы крови, уровня Ig A, M, G, оценки состояния бактерицидной функции нейтрофилов периферической крови с помощью НСТ-теста и фагоцитарной активности нейтрофилов. При выявлении 10 и более связей с силой корреляции менее 0.5 определяют напряжение иммунной системы, прогнозируют нестойкий клинический эффект оздоровления и предрасположенность к частым рецидивам заболеваний дыхательной системы. Этот способ наиболее близок к заявляемому и взят в качестве прототипа.From patent sources there is known “A method for predicting the recurrence rate of infectious diseases of the respiratory tract and the persistence of the healing effect in preschool children” (RF Patent No. 2169923, G01 No. 33/53, 33/48, BI No. 18, 2001) by determining the presence of opportunistic microflora in feces, leukocyte blood count, Ig A, M, G levels, assessment of the bactericidal function of peripheral blood neutrophils using the HCT test and phagocytic activity of neutrophils. If 10 or more relationships with a correlation strength of less than 0.5 are detected, the voltage of the immune system is determined, and the unstable clinical effect of recovery and predisposition to frequent relapses of respiratory system diseases are predicted. This method is closest to the claimed one and is taken as a prototype.
Недостатком способа является недостаточная точность прогнозирования, так как не учитывается состояние микрофлоры верхних дыхательных путей, кроме того, не исследована вирусная составляющая микробиоценоза толстого кишечника, что не отражает всей сложности происходящих в микроэкологической системе детского организма изменений при формировании у ребенка склонности к частым повторным заболеваниям дыхательной системы и не позволяет осуществить комплексный подход к терапии.The disadvantage of this method is the insufficient accuracy of prediction, since the state of the microflora of the upper respiratory tract is not taken into account, in addition, the viral component of the microbiocenosis of the large intestine has not been studied, which does not reflect the complexity of the changes that occur in the microecological system of the child’s body when the child develops a tendency to frequent repeated respiratory diseases system and does not allow for an integrated approach to therapy.
Целью настоящего изобретения является повышение точности прогнозирования возникновения повторных респираторных заболеваний у детей раннего возраста, часто и длительно болеющих ОРЗ, что позволяет увеличить эффективность их реабилитации после перенесенного острого бронхолегочного заболевания и снизить риск развития хронических и рецидивирующих форм заболеваний дыхательной системы.The aim of the present invention is to improve the accuracy of predicting the occurrence of repeated respiratory diseases in young children, often and for a long time suffering from acute respiratory infections, which allows to increase the effectiveness of their rehabilitation after acute bronchopulmonary disease and reduce the risk of developing chronic and recurrent forms of diseases of the respiratory system.
Поставленная цель достигается исследованием у детей микрофлоры толстого кишечника и слизистой оболочки ротоглотки, а также определением антигенов адено- и реовирусов в мазках из ротоглотки и адено-, рео- и ротавирусов в фекальном материале через 3 и более недель после перенесенного острого инфекционного заболевания дыхательной системы, и при обнаружении антигенов адено-, рео- или ротавирусов в фекальном материале и антигенов адено- или реовирусов в мазке со слизистой оболочки ротоглотки в титрах ≥108 в сочетании с дисбиозом кишечника III степени и дисбиотическими изменениями в составе микрофлоры ротоглотки прогнозируют неблагоприятный исход - предрасположенность к высокой частоте респираторных заболеваний.This goal is achieved by studying in children the microflora of the large intestine and the mucous membrane of the oropharynx, as well as the determination of antigens of adeno- and reoviruses in smears from the oropharynx and adeno-, reo-, and rotaviruses in fecal material 3 or more weeks after the acute infection of the respiratory system, and upon detection of antigens of adeno-, reo- or rotaviruses in fecal material and antigens of adeno- or reoviruses in a smear from the mucous membrane of the oropharynx in titers ≥10 8 in combination with intestinal dysbiosis III heat and dysbiotic changes in the composition of the oropharyngeal microflora predict an unfavorable outcome - a predisposition to a high frequency of respiratory diseases.
Предлагаемый способ осуществляется следующим образом. Производят забор фекалий в количестве 1 г стерильной стеклянной палочкой в стерильную пробирку с 9 мл тиогликолевого буфера для сохранения анаэробов. Время транспортировки проб не превышает 1 часа с момента взятия материала. Качественный и количественный состав фекальной микрофлоры изучают в соответствии с методическими рекомендациями «Бактериологическая диагностика дисбактериоза кишечника» (Москва, 1991 г.). Для этого содержимое пробирки тщательно перемешивают стерильной стеклянной палочкой и оставляют на 10-15 минут при комнатной температуре для осаждения грубых частиц. Далее готовят десятикратные разведения надосадочной жидкости от 10-1 до 10-10 в тиогликолевом буфере в объеме 4.5 мл, используя при приготовлении каждого разведения отдельную пипетку. Затем из разведений производят высевы на пластинчатые питательные среды: МРС-2 для лактобактерий, кровяной агар для бактероидов (КАБ), Эндо, кровяной агар, желточно-солевой агар, среду Сабуро (с распределением материала по поверхности среды стерильным стеклянным шпателем), в высокий столбик среды Блаурокка, Вильсона-Блера, а также на скошенный мясопептонный агар - посев по Шукевичу, объем посевной дозы 0,1 мл. После посева среду КАБ и МРС-2 помещают в микроанаэростат МИ-752, откачивают воздух вакуумным насосом и заполняют его газовой смесью: 80% азота, 10% углекислого газа, 10% водорода. Посевы аэробных бактерий термостатируют 1-2 суток, а анаэробных - 3-7 суток при температуре 37°С. Выделенные чистые культуры идентифицируют по морфологическим, тинкториальным, культуральным, а также биохимическим свойствам с помощью Lachema тест-систем, согласно определителю Берджи (1997 г.). Подсчет микроорганизмов в 1 г фекалий производят следующим образом. Учитывают количество выросших колоний, степень разведения исследуемого материала и величину посевной дозы. Количественную оценку осуществляют по формуле:The proposed method is as follows. Feces are taken in the amount of 1 g with a sterile glass rod in a sterile tube with 9 ml of thioglycol buffer to preserve anaerobes. Sample transportation time does not exceed 1 hour from the moment of taking the material. The qualitative and quantitative composition of fecal microflora is studied in accordance with the methodological recommendations "Bacteriological diagnosis of intestinal dysbiosis" (Moscow, 1991). To do this, the contents of the tube are thoroughly mixed with a sterile glass rod and left for 10-15 minutes at room temperature to precipitate coarse particles. Next, prepare ten-fold dilutions of the supernatant from 10 -1 to 10 -10 in thioglycol buffer in a volume of 4.5 ml, using a separate pipette in the preparation of each dilution. Then, platelet culture media are sown from dilutions: MRS-2 for lactobacilli, blood agar for bacteroids (KAB), Endo, blood agar, yolk-salt agar, Saburo medium (with the material distributed over the surface of the medium with a sterile glass spatula), in high a column of Blaurock, Wilson-Blair medium, as well as on beveled meat and peptone agar - inoculation according to Shukevich, inoculum volume 0.1 ml. After seeding, the KAB and MPC-2 medium is placed in a MI-752 microaerostat, the air is pumped out with a vacuum pump and filled with a gas mixture: 80% nitrogen, 10% carbon dioxide, 10% hydrogen. Crops of aerobic bacteria thermostat 1-2 days, and anaerobic bacteria 3-7 days at a temperature of 37 ° C. Isolated pure cultures are identified by morphological, tinctorial, cultural, as well as biochemical properties using Lachema test systems, according to the determinant of Bergey (1997). The count of microorganisms in 1 g of feces is as follows. Take into account the number of grown colonies, the degree of dilution of the test material and the size of the seed dose. Quantitative assessment is carried out according to the formula:
где n - количество выросших колоний. Показатели концентрации представляют в lg числа КОЕ микробов на 1 г фекалий. Степень микробиологических нарушений при дисбиозе кишечника устанавливают в соответствии с отраслевым стандартом «Протокол ведения больных. Дисбактериоз кишечника» (Москва, 2004 г.).where n is the number of colonies grown. Concentration indicators represent in lg the number of CFU of microbes per 1 g of feces. The degree of microbiological disturbances in intestinal dysbiosis is established in accordance with the industry standard “Protocol for the management of patients. Intestinal dysbiosis ”(Moscow, 2004).
Микробиологическое исследование микрофлоры ротоглотки осуществляют следующим образом. Забирают мазок со слизистой оболочки ротоглотки стерильным ватным тампоном утром натощак. Затем тампон помещают в стерильную Port-a-cul пробирку, содержащую редуцированную в атмосфере углекислого газа агаризованную транспортную среду «Becton Dickinson», обеспечивающую оптимальные условия для сохранения жизнеспособности аэробных, факультативно- и облигатно-анаэробных микроорганизмов. Ватный тампон с исследуемым материалом тщательно отжимают о стенки пробирки вращательными движениями. Содержимое ресуспендируют пипеткой до получения гомогенной массы. Из исходного материала готовят 10-кратные разведения в тиогликолевом буфере от 10-1 до 10-7. Из разведений производят высевы пипеткой по 0,1 мл на соответствующие пластинчатые питательные среды (кровяной агар, МРС-2 для лактобактерий, среду КАБ для неклостридиальных анаэробов, желточно-солевой агар, среды Эндо и Сабуро), скошенный мясопептонный агар (по Шукевичу) и высокий столбик среды Блаурокка. Культивирование аэробных и анаэробных бактерий, подсчет и идентификацию выделенных микроорганизмов проводят аналогично изложенному при описании микробиологического метода исследования фекалий. Для определения адено-, рео- и ротавирусов в фекальном материале, а также адено- и реовирусов в мазках со слизистой оболочки ротоглотки используют РНГА с коммерческими тест-системами «Аденотест», «Реотест» и «Ротатест» отечественного производства, которые включают эритроцитарные иммуноглобулиновые диагностикумы и иммунную асцитную жидость к соответствующим вирусам (Колпаков С.А., 2001 г.).Microbiological examination of the microflora of the oropharynx is as follows. A swab is taken from the mucous membrane of the oropharynx with a sterile cotton swab in the morning on an empty stomach. Then the tampon is placed in a sterile Port-a-cul tube containing a Becton Dickinson agarized transport medium reduced in a carbon dioxide atmosphere, providing optimal conditions for maintaining the viability of aerobic, facultative and obligate-anaerobic microorganisms. A cotton swab with the test material is carefully squeezed against the walls of the tube by rotational movements. The contents are resuspended with a pipette until a homogeneous mass is obtained. 10-fold dilutions in thioglycol buffer from 10 -1 to 10 -7 are prepared from the starting material. From dilutions, 0.1 ml pipetting is carried out on the corresponding plate medium (blood agar, MPC-2 for lactobacilli, KAB medium for non-clostridial anaerobes, yolk-salt agar, Endo and Saburo medium), beveled meat and peptone agar (according to Shukevich) and high column of Blaurock medium. Cultivation of aerobic and anaerobic bacteria, counting and identification of isolated microorganisms is carried out similarly to the description of the microbiological method for the study of feces. To determine adeno-, rheo- and rotaviruses in fecal material, as well as adeno- and reoviruses in smears from the mucous membrane of the oropharynx, RNGA with commercial test systems Adenotest, Reotest, and Rotatest are used, which include domestic production of erythrocyte immunoglobulin diagnosticums and immune ascites fluid to the corresponding viruses (Kolpakov S.A., 2001).
Для этого десятикратно разведенный в физиологическом растворе исследуемый материал (фекалии, отделяемое ротоглотки) центрифугируют 20 минут при 2000 оборотах в минуту. Надосадочную жидкость используют для постановки РНГА. РНГА проводят микрометодом в объеме 75 мкл в планшете для иммунологических реакций с U-образными лунками. В начале готовят 2 ряда 10-кратных разведений исследуемой надосадочной жидкости в физиологическом растворе от 10-1 до 10-14 в объеме 25 мкл. Затем во все лунки первого ряда вносят такой же объем 0.9% раствора хлорида натрия, а во второй ряд - иммунную асцитную жидкость в объеме 25 мкл для контроля специфичности реакции. Планшет встряхивают и оставляют для контакта на 20 минут при комнатной температуре. Потом во все лунки добавляют по 25 мкл соответствующего антительного эритроцитарного диагностикума. Планшет встряхивают и оставляют на 1-1,5 часа при комнатной температуре для оседания эритроцитов, после чего учитывают реакцию. Наличие антигенов вируса в надосадочной жидкости и его титр определяют по результатам реакции гемагглютинации в первом ряду.For this, the test material (feces, oropharyngeal discharge) ten times diluted in physiological saline is centrifuged for 20 minutes at 2000 rpm. The supernatant is used for staging RNGA. RNGA is carried out by a micromethod in a volume of 75 μl in a plate for immunological reactions with U-shaped wells. At the beginning, 2 rows of 10-fold dilutions of the studied supernatant in physiological saline are prepared from 10 -1 to 10 -14 in a volume of 25 μl. Then, in all wells of the first row, the same volume of 0.9% sodium chloride solution is added, and in the second row, immune ascites fluid in a volume of 25 μl is added to control the specificity of the reaction. The tablet is shaken and left to contact for 20 minutes at room temperature. Then, 25 μl of the corresponding antibody erythrocyte diagnosticum is added to all wells. The tablet is shaken and left for 1-1.5 hours at room temperature to sediment red blood cells, after which the reaction is taken into account. The presence of virus antigens in the supernatant and its titer is determined by the results of the hemagglutination reaction in the first row.
В дальнейшем проводят оценку полученных результатов и при обнаружении антигенов адено-, рео- или ротавирусов в фекальном материале и антигенов адено- или реовирусов в мазках со слизистой оболочки ротоглотки в титрах ≥108 в сочетании с дисбиозом кишечника III степени и дисбиотическими изменениями в составе микрофлоры ротоглотки прогнозируют неблагоприятный исход - предрасположенность к высокой частоте респираторных заболеваний.Subsequently, the results are evaluated and, upon detection of antigens of adeno-, reo- or rotaviruses in fecal material, and antigens of adeno- or reoviruses in smears from the mucous membrane of the oropharynx in titers ≥10 8 in combination with intestinal dysbiosis of the III degree and dysbiotic changes in the composition of microflora oropharynx predicts an adverse outcome - a predisposition to a high frequency of respiratory diseases.
Клинические примеры.Clinical examples.
Пример №1.Example No. 1.
Ребенок, Роменская Наталья, 2 года 10 месяцев, наблюдается в группе часто болеющих детей. Из анамнеза известно, что девочка переносит острые респираторные заболевания 8-10 раз в год. Через 3 недели после перенесенной респираторной инфекции ребенку наряду с общеклиническими методами исследования проведено исследование состава микрофлоры толстого кишечника и слизистой оболочки ротоглотки стандартным микробиологическим методом с выделением аэробных и анаэробных микроорганизмов и определение титра вирусных антигенов в фекальном материале и в мазке со слизистой оболочки ротоглотки. Выявлено: в фекальном материале - антигены аденовирусов - 108, реовирусов - 108; в мазке со слизистой оболочки ротоглотки - антигены аденовирусов - 108, реовирусов - 108; при микробиологическом исследовании фекалий - дисбиоз кишечника III степени: бифидобактерии - 106, лактобактерии - 103, лактозоположительные эшерихии - 108, эшерихии лактозоотрицательные с гемолитической активностью - 108, энтерококки - 107, лецитиназоотрицательные стафилококки - 107, дрожжеподобные грибы рода Candida - 105, клебсиеллы - 108; при микробиологическом исследовании отделяемого слизистой оболочки ротоглотки - пиогенный стрептококк - 105, фекальный энтерококк - 103, коринебактерии - 106, пептострептококки - 106, эубактерии - 104, дрожжеподобные грибы рода Candida - 103, что свидетельствует о неблагоприятном прогнозе - сохранении высокой частоты острых респираторных заболеваний; и обуславливает назначение комплексной патогенетической терапии. Дальнейшее клиническое наблюдение и проведенная на основании результатов исследования комплексная патогенетическая терапия позволили предотвратить возникновение повторных респираторных заболеваний.The child, Natalia Romenskaya, 2 years 10 months old, is observed in the group of frequently ill children. From the anamnesis it is known that the girl suffers from acute respiratory infections 8-10 times a year. 3 weeks after the respiratory infection, the child, along with general clinical research methods, studied the composition of the microflora of the large intestine and the mucous membrane of the oropharynx using the standard microbiological method with the release of aerobic and anaerobic microorganisms and determined the titer of viral antigens in fecal material and in a smear from the mucous membrane of the oropharynx. Revealed: in fecal material - antigens of adenoviruses - 10 8 , reoviruses - 10 8 ; in a smear from the mucous membrane of the oropharynx - antigens of adenoviruses - 10 8 , reoviruses - 10 8 ; microbiological examination of feces - intestinal dysbiosis of the III degree: bifidobacteria - 10 6 , lactobacilli - 10 3 , lactose-positive escherichia - 10 8 , lactose-negative escherichia with hemolytic activity - 10 8 , enterococci - 10 7 , lecithin-negative staphylococcus yeast - 7 Candida - 10 5 , Klebsiella - 10 8 ; microbiological examination of the mucous membrane of the oropharynx - pyogenic streptococcus - 10 5 , fecal enterococcus - 10 3 , corynebacteria - 10 6 , peptostreptococci - 10 6 , eubacteria - 10 4 , yeast-like fungi of the genus Candida - 10 3 , which indicates an unfavorable prognosis - conservation high incidence of acute respiratory infections; and causes the appointment of complex pathogenetic therapy. Further clinical observation and comprehensive pathogenetic therapy based on the results of the study prevented the occurrence of repeated respiratory diseases.
Пример №2.Example No. 2.
Ребенок, Бубнов Дмитрий, 2 года 3 месяца, наблюдается в группе часто болеющих. Из анамнеза известно, что мальчик болеет острыми респираторными заболеваниями ежемесячно, при этом 4 раза отмечался обструктивный бронхит, угрожаем по развитию бронхиальной астмы. Ребенку проведено обследование по предлагаемой методике. Обнаружено: в фекальном материале - антигены реовирусов - 1012, ротавирусов - 108, в мазке со слизистой оболочки ротоглотки - антигены аденовирусов - 1012, при микробиологическом исследовании фекалий - дисбиоз кишечника III степени: бифидобактерии - 106, лактобактерии - 109, энтеропатогенные эшерихии - 109, энтерококки - 106, клостридии - 106, дрожжеподобные грибы рода Candida - 106, клебсиеллы - 108; при микробиологическом исследовании отделяемого слизистой оболочки ротоглотки - эпидермальный стафилококк - 105, золотистый стафилококк - 105, пиогенный стрептококк - 105, кишечная палочка - 103, фузобактерии - 105, пептострептококки - 104, дрожжеподобные грибы рода Candida - 104, что свидетельствует о выраженных нарушениях в составе микрофлоры обоих биотопов и неблагоприятном прогнозе - сохранении предрасположенности к высокой частоте респираторных заболеваний и осложненному их течению, что диктует необходимость проведения комплексной патогенетической терапии. Дальнейшее клиническое наблюдение и проведенная на основании результатов исследования комплексная патогенетическая терапия позволили предотвратить возникновение повторных респираторных заболеваний.The child, Dmitry Bubnov, 2 years 3 months, is observed in the group of often sick. From the anamnesis it is known that the boy suffers from acute respiratory infections every month, while obstructive bronchitis was noted 4 times, we threaten the development of bronchial asthma. The child was examined according to the proposed methodology. Found: in fecal material - antigens of reoviruses - 10 12 , rotaviruses - 10 8 , in a smear from the mucous membrane of the oropharynx - antigens of adenoviruses - 10 12 , in microbiological examination of feces - intestinal dysbiosis of the III degree: bifidobacteria - 10 6 , lactobacilli - 10 9 , enteropathogenic Escherichia - 10 9 , enterococci - 10 6 , clostridia - 10 6 , yeast-like fungi of the genus Candida - 10 6 , Klebsiella - 10 8 ; microbiological examination of the mucous membrane of the oropharynx - epidermal staphylococcus - 10 5 , Staphylococcus aureus - 10 5 , pyrogenic streptococcus - 10 5 , E. coli - 10 3 , fusobacteria - 10 5 , peptostreptococcus - 10 4 , yeast-like fungi of the genus Candida - 10 4 , which indicates marked violations in the microflora of both biotopes and an unfavorable prognosis - maintaining a predisposition to a high frequency of respiratory diseases and their complicated course, which dictates the need for a comprehensive pathogen eticheskoy therapy. Further clinical observation and comprehensive pathogenetic therapy based on the results of the study prevented the occurrence of repeated respiratory diseases.
Предлагаемым способом обследовано 124 ребенка. Предлагаемый способ прогнозирования возникновения повторных острых бронхолегочных заболеваний у детей раннего возраста, часто и длительно болеющих ОРЗ, позволяет повысить точность прогноза путем сопряженной оценки состояния микрофлоры толстого кишечника и верхних дыхательных путей с учетом и бактериального, и вирусного компонентов микробиоценозов, что позволит своевременно выявить группы риска, нуждающиеся в комплексной патогенетической терапии по коррекции микроэкологических нарушений, направленной на предупреждение частого возникновения острых бронхолегочных заболеваний.The proposed method examined 124 children. The proposed method for predicting the occurrence of repeated acute bronchopulmonary diseases in young children, who often have long-term acute respiratory infections, allows to increase the accuracy of the prognosis by a conjugate assessment of the microflora of the large intestine and upper respiratory tract, taking into account both the bacterial and viral components of microbiocenoses, which will allow timely identification of risk groups in need of complex pathogenetic therapy for the correction of microecological disorders aimed at preventing frequent zniknoveniya acute bronchopulmonary diseases.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2006112153/15A RU2305838C1 (en) | 2006-04-12 | 2006-04-12 | Method for predicting repeated respiratory diseases occurrence in early age children subjected to frequent and prolonged acute respiratory diseases |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2006112153/15A RU2305838C1 (en) | 2006-04-12 | 2006-04-12 | Method for predicting repeated respiratory diseases occurrence in early age children subjected to frequent and prolonged acute respiratory diseases |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2305838C1 true RU2305838C1 (en) | 2007-09-10 |
Family
ID=38598263
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2006112153/15A RU2305838C1 (en) | 2006-04-12 | 2006-04-12 | Method for predicting repeated respiratory diseases occurrence in early age children subjected to frequent and prolonged acute respiratory diseases |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2305838C1 (en) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2480753C1 (en) * | 2012-04-02 | 2013-04-27 | Александр Владимирович Почивалов | Method for prediction of severity of bronchopulmonary pathology with underlying gastroesophageal reflux in children assisted by artificial pulmonary ventilation |
| RU2742756C1 (en) * | 2020-06-19 | 2021-02-10 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека | Method for prediction of repeated respiratory infections in children |
| RU2817268C1 (en) * | 2023-08-17 | 2024-04-12 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Воронежский государственный медицинский университет им. Н.Н. Бурденко" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for prediction of acute viral respiratory infections frequency in children in age group of 1-6 years old |
-
2006
- 2006-04-12 RU RU2006112153/15A patent/RU2305838C1/en not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| SHAMSIEV F.M. Microbial intestinal disturbances in children with frequent acute complicated pneumonia. Lik. Sprava. 2001, Mar-Apr., (2), p.84-86, реф. Найдено из БД PubMed PMID: 11519440. [Найдено 30.06.2006]. [он-лайн]. * |
| СИРОТИНА М.Д. Формирование микробиоценоза основных биотопов в норме и при патологии у детей дошкольного возраста: Автореф. к.м.н. - Архангельск, 1998, с.6-16. Лабораторные и инструментальные исследования в диагностике. Справочник. /Под. ред. проф. В.Н.Титова. - М: Изд. дом. "ГЭОТАР-МЕД", 2004, с.514-515. ШУВАЛОВА Е.П. Инфекционные болезни. - М: Медицина, 1982, с.181-185, с.190. * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2480753C1 (en) * | 2012-04-02 | 2013-04-27 | Александр Владимирович Почивалов | Method for prediction of severity of bronchopulmonary pathology with underlying gastroesophageal reflux in children assisted by artificial pulmonary ventilation |
| RU2742756C1 (en) * | 2020-06-19 | 2021-02-10 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека | Method for prediction of repeated respiratory infections in children |
| RU2817268C1 (en) * | 2023-08-17 | 2024-04-12 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Воронежский государственный медицинский университет им. Н.Н. Бурденко" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for prediction of acute viral respiratory infections frequency in children in age group of 1-6 years old |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Welliver et al. | Predictive value of respiratory syncytial virus-specific IgE responses for recurrent wheezing following bronchiolitis | |
| BACHUR et al. | Bacteremia and meningitis among infants with urinary tract infections | |
| de Man et al. | Bacterial attachment as a predictor of renal abnormalities in boys with urinary tract infection | |
| Lagerström et al. | Microbiological etiology in clinically diagnosed community-acquired pneumonia in primary care in Örebro, Sweden | |
| Ojuawo et al. | Clinical and microbiological profile of adult inpatients with community acquired pneumonia in Ilorin, North Central, Nigeria | |
| JP2007521471A (en) | Methods and kits for predicting infectious disease states | |
| Reed et al. | Mycoplasma species in cats with lower airway disease: improved detection and species identification using a polymerase chain reaction assay | |
| RU2305838C1 (en) | Method for predicting repeated respiratory diseases occurrence in early age children subjected to frequent and prolonged acute respiratory diseases | |
| Spink et al. | Diagnostic criteria for human brucellosis: Report No. 2 of the national research council, committee on public health aspects of brucellosis | |
| Kadanali et al. | Bacteremic and nonbacteremic brucellosis: clinical and laboratory observations | |
| Saksouk et al. | Acute suppurative thyroiditis caused by Escherichia coli. | |
| Colodner et al. | Epidemiology and clinical characteristics of patients with Staphylococcus saprophyticus bacteriuria in Israel | |
| Yayan | No direct association between asthma and the microbiome based on currently available techniques | |
| Meqdam et al. | Rapid detection and clinical features of infants and young children with acute lower respiratory tract infection due to respiratory syncytial virus | |
| Weiss-Salz et al. | Kingella kingae infections in children: an update | |
| Smith et al. | Diagnostic methods for typhoid fever in Nigeria | |
| Mihara et al. | Bordetella pertussis is a common pathogen in infants hospitalized for acute lower respiratory tract infection during the winter season | |
| Motse et al. | Predictors of urinary tract infection and their diagnostic performances among Cameroonian under-five | |
| Hoffmann et al. | Detection of group A streptococcal antigen from throat swabs by use of a latex agglutination test kit in general practice | |
| Karppinen et al. | Effects of rhinovirus infection on nasopharyngeal bacterial colonization in infants with wild or variant types of mannose-binding lectin and toll-like receptors 3 and 4 | |
| Zaman et al. | Role of Respiratory Syncytial Virus and Some Bacteria Causes Tonsillitis among Children Under 5 Years Old in Duhok City. | |
| Frolova et al. | Role of pro-and anti-inflammatory cytokines in activation of inflammation at community-acquired pneumonia of children with different level of physical development | |
| Rashkova et al. | Secretory Immunoglobulin A (S-IgA) and the Oral Risk Markers: Quality of Saliva, Dental Biofilm, Oral Candida and Lactobacillus spp | |
| RU2705384C1 (en) | Diagnostic technique for gram-negative abdominal surgical infection | |
| Allen et al. | Accuracy of the confirmatory diagnosis of tuberculosis |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20080413 |