RU2299740C2 - Method for preparing glycyrrhizic acid monoammonium salt (glycyram) - Google Patents
Method for preparing glycyrrhizic acid monoammonium salt (glycyram) Download PDFInfo
- Publication number
- RU2299740C2 RU2299740C2 RU2005113361/15A RU2005113361A RU2299740C2 RU 2299740 C2 RU2299740 C2 RU 2299740C2 RU 2005113361/15 A RU2005113361/15 A RU 2005113361/15A RU 2005113361 A RU2005113361 A RU 2005113361A RU 2299740 C2 RU2299740 C2 RU 2299740C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- glycyram
- licorice
- acetone
- solution
- roots
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 20
- MPDGHEJMBKOTSU-YKLVYJNSSA-N 18beta-glycyrrhetic acid Chemical compound C([C@H]1C2=CC(=O)[C@H]34)[C@@](C)(C(O)=O)CC[C@]1(C)CC[C@@]2(C)[C@]4(C)CC[C@@H]1[C@]3(C)CC[C@H](O)C1(C)C MPDGHEJMBKOTSU-YKLVYJNSSA-N 0.000 title claims description 29
- ILRKKHJEINIICQ-OOFFSTKBSA-N Monoammonium glycyrrhizinate Chemical compound N.O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O[C@@H]1O[C@H]1CC[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C=C4[C@@H]5C[C@](C)(CC[C@@]5(CC[C@@]4(C)[C@]3(C)CC[C@H]2C1(C)C)C)C(O)=O)C(O)=O)[C@@H]1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O ILRKKHJEINIICQ-OOFFSTKBSA-N 0.000 title 1
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 32
- 235000006200 Glycyrrhiza glabra Nutrition 0.000 claims abstract description 26
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 22
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 20
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims abstract description 11
- -1 triterpene acids Chemical class 0.000 claims abstract description 10
- VTAJIXDZFCRWBR-UHFFFAOYSA-N Licoricesaponin B2 Natural products C1C(C2C(C3(CCC4(C)CCC(C)(CC4C3=CC2)C(O)=O)C)(C)CC2)(C)C2C(C)(C)CC1OC1OC(C(O)=O)C(O)C(O)C1OC1OC(C(O)=O)C(O)C(O)C1O VTAJIXDZFCRWBR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- LPLVUJXQOOQHMX-UHFFFAOYSA-N glycyrrhetinic acid glycoside Natural products C1CC(C2C(C3(CCC4(C)CCC(C)(CC4C3=CC2=O)C(O)=O)C)(C)CC2)(C)C2C(C)(C)C1OC1OC(C(O)=O)C(O)C(O)C1OC1OC(C(O)=O)C(O)C(O)C1O LPLVUJXQOOQHMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 239000001685 glycyrrhizic acid Substances 0.000 claims abstract description 8
- 229960004949 glycyrrhizic acid Drugs 0.000 claims abstract description 8
- UYRUBYNTXSDKQT-UHFFFAOYSA-N glycyrrhizic acid Natural products CC1(C)C(CCC2(C)C1CCC3(C)C2C(=O)C=C4C5CC(C)(CCC5(C)CCC34C)C(=O)O)OC6OC(C(O)C(O)C6OC7OC(O)C(O)C(O)C7C(=O)O)C(=O)O UYRUBYNTXSDKQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 235000019410 glycyrrhizin Nutrition 0.000 claims abstract description 8
- LPLVUJXQOOQHMX-QWBHMCJMSA-N glycyrrhizinic acid Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O[C@@H]1O[C@@H]1C([C@H]2[C@]([C@@H]3[C@@]([C@@]4(CC[C@@]5(C)CC[C@@](C)(C[C@H]5C4=CC3=O)C(O)=O)C)(C)CC2)(C)CC1)(C)C)C(O)=O)[C@@H]1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O LPLVUJXQOOQHMX-QWBHMCJMSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 claims abstract description 8
- 240000008917 Glycyrrhiza uralensis Species 0.000 claims abstract description 7
- 235000000554 Glycyrrhiza uralensis Nutrition 0.000 claims abstract description 7
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract 5
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract 4
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract 4
- 244000303040 Glycyrrhiza glabra Species 0.000 claims description 25
- 235000017443 Hedysarum boreale Nutrition 0.000 claims description 11
- 235000007858 Hedysarum occidentale Nutrition 0.000 claims description 11
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 claims description 5
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N ammonia Natural products N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonium chloride Substances [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 claims 2
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 claims 2
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 claims 1
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 claims 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 abstract description 14
- 235000001453 Glycyrrhiza echinata Nutrition 0.000 abstract description 12
- 235000017382 Glycyrrhiza lepidota Nutrition 0.000 abstract description 12
- 239000000284 extract Substances 0.000 abstract description 12
- 229940010454 licorice Drugs 0.000 abstract description 12
- 238000000605 extraction Methods 0.000 abstract description 8
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 abstract description 6
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 abstract description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 5
- 238000000746 purification Methods 0.000 abstract description 4
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 abstract description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 241000202807 Glycyrrhiza Species 0.000 abstract 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 abstract 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 abstract 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 6
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 4
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000003957 anion exchange resin Substances 0.000 description 3
- 244000309464 bull Species 0.000 description 3
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 3
- 239000003729 cation exchange resin Substances 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 239000001947 glycyrrhiza glabra rhizome/root Substances 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 229920000768 polyamine Polymers 0.000 description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 3
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 3
- 239000004593 Epoxy Substances 0.000 description 2
- 238000011374 additional therapy Methods 0.000 description 2
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 2
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 2
- 238000010908 decantation Methods 0.000 description 2
- 238000003795 desorption Methods 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AGBXYHCHUYARJY-UHFFFAOYSA-N 2-phenylethenesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C=CC1=CC=CC=C1 AGBXYHCHUYARJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 206010012434 Dermatitis allergic Diseases 0.000 description 1
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 208000005176 Hepatitis C Diseases 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- 201000009053 Neurodermatitis Diseases 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 239000000043 antiallergic agent Substances 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 230000003293 cardioprotective effect Effects 0.000 description 1
- 230000007882 cirrhosis Effects 0.000 description 1
- 208000019425 cirrhosis of liver Diseases 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 1
- 208000010710 hepatitis C virus infection Diseases 0.000 description 1
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 208000030603 inherited susceptibility to asthma Diseases 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 229940069445 licorice extract Drugs 0.000 description 1
- 201000005296 lung carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 235000021096 natural sweeteners Nutrition 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 230000020477 pH reduction Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 1
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к новому способу получения биологически активных веществ из растительного сырья, а именно моноаммонийной соли глицирризиновой кислоты (глицирама) формулы C42H61O16NH4 +·4H2O из корней солодки уральской (Glycyrrhiza uralensis Fisher). Глицирам является солью глицирризиновой кислоты - основного сапонина корней солодки, и применяется в медицинской практике в качестве противовоспалительного и противоаллергического средства [1, 2]. Препарат пригоден также для лечения бронхиальной астмы средней тяжести у детей, в тяжелых случаях эффективен при назначении в комплексе со стероидными препаратами [1]. Кроме того, глицирам используется при лечении кожных воспалительных заболеваний (экзем, аллергических дерматитов и нейродермита) [1]. Глицирам может служить также средством дополнительной терапии в онкологии, так как повышает противоопухолевый эффект и антиметастазное действие циклофосфана при карциноме легких, обладает миелотропным и кардиопротективным действием [3, 4]. Моноаммонийная соль ГК в виде внутривенных вливаний (препарат SNMC) более 20 лет успешно применяется в Японии для лечения вирусных гепатитов В и С и цирроза печени [5, 6]. В пищевой промышленности моноаммонийная соль ГК используется в качестве подсластителя и вкусовой добавки (в 300 раз слаще сахара) [7].The invention relates to a new method for producing biologically active substances from plant materials, namely the monoammonium salt of glycyrrhizic acid (glyciram) of the formula C 42 H 61 O 16 NH 4 + · 4H 2 O from the roots of Ural licorice (Glycyrrhiza uralensis Fisher). Glycyram is a salt of glycyrrhizic acid - the main saponin of licorice roots, and is used in medical practice as an anti-inflammatory and anti-allergic agent [1, 2]. The drug is also suitable for the treatment of moderate bronchial asthma in children; in severe cases, it is effective when prescribed in combination with steroid drugs [1]. In addition, glycyram is used in the treatment of skin inflammatory diseases (eczema, allergic dermatitis and neurodermatitis) [1]. Glyciram can also serve as a means of additional therapy in oncology, as it increases the antitumor effect and antimetastase effect of cyclophosphamide in lung carcinoma, has a myelotropic and cardioprotective effect [3, 4]. Monoammonium salt of HA in the form of intravenous infusions (SNMC preparation) has been successfully used in Japan for the treatment of viral hepatitis B and C and cirrhosis for more than 20 years [5, 6]. In the food industry, monoammonium salt of HA is used as a sweetener and flavoring agent (300 times sweeter than sugar) [7].
Предложены способы получения глицирама из густого экстракта солодкового корня [8] и из корней солодки голой (Glycyrrhiza glabra L.) [9, 10].Methods have been proposed for producing glycyram from a thick extract of licorice root [8] and from the roots of licorice (Glycyrrhiza glabra L.) [9, 10].
В способе [8] выделение целевого продукта из густого экстракта солодки проводят на высокоосновном эпоксиполиаминном анионите, продукт десорбируют 1-2% раствором NaOH в вводно-спиртовой смеси и очищают сначала на сульфостироловом катионите в водородной форме, а затем на слабоосновном полиэтиленполиаминовом анионите в гидроксильной форме, после чего полученную триаммонийную соль ГК растворяют в воде при 60-80°С и обрабатывают карбоксильным катионитом в водородной форме. Обработанный карбоксильным катионитом раствор упаривают до сухого остатка. Выделение целевого продукта проводят кристаллизацией из 96% этанола. Выход продукта от содержания ГК в исходном густом экстракте составляет 77,5%.In the method [8], the target product is extracted from the thick licorice extract on a highly basic epoxy polyamine anion exchange resin, the product is stripped with a 1-2% NaOH solution in an alcohol-alcohol mixture, and first it is purified on a sulfostyrene cation exchange resin in hydrogen form and then on a weakly basic polyethylene polyamine anion exchange resin in hydroxyl form after which the resulting triammonium salt of HA is dissolved in water at 60-80 ° C and treated with carboxyl cation exchanger in hydrogen form. The solution treated with carboxyl cation exchange resin is evaporated to a dry residue. The selection of the target product is carried out by crystallization from 96% ethanol. The product yield from the content of HA in the initial thick extract is 77.5%.
Способ [10] предусматривает получение глицирама путем экстракции корней солодки 1% водным раствором NH4OH, осаждение ГК из экстракта 95% этанолом до конечной концентрации 54-56%, растворение осадка в воде и очистку сорбцией на эпоксиполиаминовом анионите АВ-16 Г в гидроксильной форме, десорбцию проводят 4-6% водным раствором NH4OH, полученный элюат упаривают, сухой остаток растворяют в 20% этаноле и обрабатывают карбоксильным катионитом в Н+-форме. Выход глицирама составляет 64-69%.The method [10] provides for the preparation of glycyram by extraction of licorice roots with a 1% aqueous solution of NH 4 OH, precipitation of HA from the extract with 95% ethanol to a final concentration of 54-56%, dissolution of the precipitate in water and purification by sorption on epoxy polyamine anion exchange resin AB-16 G in hydroxyl form, desorption is carried out with a 4-6% aqueous solution of NH 4 OH, the resulting eluate is evaporated, the dry residue is dissolved in 20% ethanol and treated with carboxyl cation exchange resin in the H + form. The output of glycyram is 64-69%.
Оба способа предполагают использование в схеме выделения и очистки глицирама ионообменных смол, что технологически осложняет процесс выделения целевого продукта и требует применения колонок с большим объемом смолы и большого объема растворителей для абсорбции и десорбции глицирама с колонок. Кроме того, для контроля чистоты целевого продукта - глицирама - авторы [8, 10] использовали только спектрофотометрические методы.Both methods involve the use of ion-exchange resins in the scheme for the isolation and purification of glycyram, which technologically complicates the process of isolating the target product and requires the use of columns with a large volume of resin and a large volume of solvents for the absorption and desorption of glycyram from the columns. In addition, the authors of [8, 10] used only spectrophotometric methods to control the purity of the target product — glycyram.
Наиболее близок к предлагаемому способу получения глицирама способ [9], предложенный ранее для получения глицирама из корней солодки голой (Glycyrrhiza glabra L.), включающий стадии ферментации размельченных корней солодки с водой при 35-40°С в течение 22-26 ч с последующей экстракцией корней 0,25% раствором NH4OH, подкисление концентрированной Н2S04 до рН 1-3, сушку суммы кислот (осадок) при 50-60°С в вакуум-сушильном шкафу в течение 20-25 ч, экстракцию безводным ацетоном в три приема при 60-70°С в течение 3-5 мин и высаживание триаммонийной соли ГК путем добавления в ацетоновый раствор концентрированного 25%-ного водного раствора NH4OH (рН 7-8). Обработкой осадка триаммонийной соли ГК трехкратным количеством ледяной СН3СООН получают технический глицирам с выходом 3,08 г на 25 г корней солодки голой или 12,32 г на 100 г корней. Выход технического глицирама в способе-прототипе составляет ~50% (по нашим расчетам), если считать, что в качестве сырья использована солодка голая с содержанием ГК ~24%. Как показали наши исследования [12], содержание основного вещества (моноаммонийной соли) в техническом глицираме не превышает 75±2% по данным ВЭЖХ, который для анализа глицирама в нашей стране ранее не использовался.Closest to the proposed method for the preparation of glycyram is the method [9], previously proposed for the preparation of glycyram from the roots of licorice (Glycyrrhiza glabra L.), comprising the steps of fermenting the crushed licorice roots with water at 35-40 ° C for 22-26 hours, followed by root extraction with 0.25% NH 4 OH solution, acidification with concentrated H 2 S0 4 to pH 1-3, drying the amount of acids (precipitate) at 50-60 ° C in a vacuum oven for 20-25 hours, extraction with anhydrous acetone in three doses at 60-70 ° C for 3-5 minutes and planting the triammonium salt of HA by adding tsetonovy concentrated solution of 25% aqueous NH 4 OH (pH 7-8). Processing the precipitate of the triammonium salt of HA with three times the amount of ice-cold CH 3 COOH gives technical glycyrams with a yield of 3.08 g per 25 g of licorice root or 12.32 g per 100 g of root. The yield of technical glyciram in the prototype method is ~ 50% (according to our calculations), if we assume that bare licorice with a GK content of ~ 24% was used as raw material. As our studies showed [12], the content of the main substance (mono-ammonium salt) in technical glycyram does not exceed 75 ± 2% according to HPLC, which was not previously used for the analysis of glycyram in our country.
Известный способ [9] позволяет получать технический глицирам из корней солодки голой (Glycyrrhiza glabra L.), содержание ГК в которой может достигать 24% [11]. Запасы солодки голой с высоким содержанием ГК остались в настоящее время за пределами Российской Федерации (Афганистан, Казахстан, Туркмения, Узбекистан, Северный Кавказ и др.). На территории России (Сибирский и Уральский регионы) распространена солодка уральская (Glycyrrhiza uralensis Fisher), отличающаяся меньшим содержанием ГК (5,5-12,5%) [13], которая также может быть использована в качестве сырья для получения глицирама в химико-фармацевтической промышленности.The known method [9] allows you to get technical glyciram from the roots of licorice (Glycyrrhiza glabra L.), the content of HA in which can reach 24% [11]. Stocks of licorice with a high content of HA have remained outside the Russian Federation (Afghanistan, Kazakhstan, Turkmenistan, Uzbekistan, the North Caucasus, etc.). Ural licorice (Glycyrrhiza uralensis Fisher) is widespread in Russia (Siberian and Ural regions), which is characterized by a lower content of HA (5.5-12.5%) [13], which can also be used as a raw material for the production of glycyram in chemical pharmaceutical industry.
Задача, на решение которой направлено заявленное техническое решение, состоит в разработке технологичного способа получения моноаммонийной соли ГК (глицирама) из корней солодки уральской. Схема получения глицирама приведена ниже.The problem to which the claimed technical solution is directed is to develop a technologically advanced method for producing monoammonium salt of HA (glycyram) from the roots of Ural licorice. The scheme for producing glycyram is given below.
Схема получения моноаммонийной соли глицирризиновой кислоты (глицирама)Scheme for producing monoammonium salt of glycyrrhizic acid (glycyram)
Измельченные корни солодки уральской (Glycyrrhiza uralensis Fisher) с содержанием ГК 5-7% экстрагировали 0,5% водным раствором NH4OH в два приема при комнатной температуре (20-22°С), осаждали сумму тритерпеновых кислот добавлением концентрированной Н2SO4 (рН 1-2), осадок отфильровывали, промывали водой до нейтральной рН, сушили и экстрагировали 1% раствором H2SO4 в ацетоне при комнатной температуре, затем ацетоном при кипячении 30 мин. Ацетоновые вытяжки объединяли и высаживали триаммонийную соль ГК 25% раствором NH4OH (рН 7-8). Соль отфильтровали, сушили и перекристаллизовали из ледяной СН3СООН, получая технический глицирам, который очищали путем перекристаллизации из 85% этанола. Выход целевого продукта (глицирама) составляет 60-63% в пересчете на исходное сырье - корень солодки с содержанием ГК 5-7%, чистота 88±2% по данным ВЭЖХ (колонка μ-Bondapak C18, 3,9×30 см, подвижная фаза (ПФ): МеОН-СН3СООН-Н2O, 60:35:5 (v %), скорость потока ПФ 1,0 мл/мин; детектор - УФ (λ 254 нм). Препарат соответствует требованиям ВФС 42-419-75.The crushed roots of Ural licorice (Glycyrrhiza uralensis Fisher) with a HA content of 5-7% were extracted with a 0.5% aqueous solution of NH 4 OH in two doses at room temperature (20-22 ° C), the amount of triterpenic acids was precipitated by the addition of concentrated Н 2 SO 4 (pH 1-2), the precipitate was filtered off, washed with water to a neutral pH, dried and extracted with 1% solution of H 2 SO 4 in acetone at room temperature, then with acetone at reflux for 30 minutes. Acetone extracts were combined and the triammonium salt of HA was planted with a 25% solution of NH 4 OH (pH 7-8). The salt was filtered off, dried, and recrystallized from ice-cold CH 3 COOH to obtain technical glycyram, which was purified by recrystallization from 85% ethanol. The yield of the target product (glycyram) is 60-63% in terms of the feedstock - licorice root with a HA content of 5-7%, purity 88 ± 2% according to HPLC (μ-Bondapak C18 column, 3.9 × 30 cm, movable phase (PF): MeON-CH 3 COOH-H 2 O, 60: 35: 5 (v%), PF flow rate 1.0 ml / min; detector - UV (λ 254 nm). The preparation meets the requirements of VFS 42- 419-75.
Отличительные признаки предлагаемого способа:Distinctive features of the proposed method:
1. В качестве сырья используются корни солодки уральской (Glycyrrhiza uralensis Fisher) с меньшим содержанием ГК (5-7%).1. The raw materials used are Ural licorice roots (Glycyrrhiza uralensis Fisher) with a lower HA content (5-7%).
2. Экстракцию корней проводят 0,5% водным раствором NH4OH вместо 0,25% раствора по способу-прототипу [9], что позволяет проводить более полное извлечение тритерпеновых кислот.2. Root extraction is carried out with a 0.5% aqueous solution of NH 4 OH instead of a 0.25% solution according to the prototype method [9], which allows for more complete extraction of triterpene acids.
3. Экстракцию суммы тритерпеновых кислот, полученных путем осаждения концентрированной Н2SO4, проводят 1% раствором H2SO4 в ацетоне при комнатной температуре (20-22°С), при этом используется ацетон марки "хч", а не безводный ацетон, как в способе-прототипе.3. The extraction of the sum of triterpenic acids obtained by precipitation of concentrated H 2 SO 4 is carried out with a 1% solution of H 2 SO 4 in acetone at room temperature (20-22 ° C), using “hch” grade acetone rather than anhydrous acetone as in the prototype method.
4. Исключена стадия предварительной ферментации корней солодки водой при 36-38°С в течение 22-26 ч и операция сушки суммы тритерпеновых кислот в вакуум-сушильном шкафу (20-25 ч), что ускоряет процесс извлечения целевого продукта из растительного сырья при меньших затратах тепловой энергии.4. The stage of preliminary fermentation of licorice roots with water at 36-38 ° С for 22-26 h and the operation of drying the amount of triterpenic acids in a vacuum oven (20-25 h) are excluded, which speeds up the process of extracting the target product from plant materials with smaller thermal energy costs.
5. Введена стадия очистки технического глицирама путем перекристаллизации из 85% этанола, что повышает чистоту целевого продукта до 88±2% по данным ВЭЖХ.5. The stage of purification of technical glycyram by recrystallization from 85% ethanol is introduced, which increases the purity of the target product to 88 ± 2% according to HPLC.
Сущность изобретения демонстрируется следующим примером.The invention is illustrated by the following example.
Пример 1.Example 1
100 г измельченных на электрической мельнице (порошок+мелкие стружки) корней солодки уральской (Glycyrrhiza uralensis Fisher) заливали 1000 мл 0,5% водного раствора NH4OH, встряхивали несколько минут и оставляли на 10-12 ч при комнатной температуре (20-22°С). Аммиачную вытяжку сливали декантацией, корни заливали еще 500 мл 0,5% раствора NH4OH и оставляли на ночь. Аммиачные вытяжки объединяли, фильтровали и к фильтрату прибавляли концентрированную H2SO4 до рН 1-2. Образовавшемуся осадку давали отстояться, отфильтровывали на воронке Бюхнера, промывали дистиллированной водой (рН~7) и высушивали на воздухе, затем при температуре 110-120°С в течение 6-7 ч. Получали 9,8-10,4 г суммы тритерпеновых кислот (сухой экстракт), который экстрагировали 50 мл 1% раствора H2SO4 в ацетоне (марки "хч") при перемешивании в течение 1 ч при комнатной температуре. Ацетоновую вытяжку сливали декантацией, к остатку прибавляли 25 мл ацетона и кипятили на водяной бане 30 мин. Оба экстракта объединяли и фильтровали. К полученной ацетоновой вытяжке прибавляли 25% раствор NH4OH при перемешивании (рН 7-8). Триаммонийную соль ГК отфильтровывали, промывали ацетоном, спиртом и высушивали. Получали 5,8-6,0 г триаммонийной соли ГК, которую перевели в моноаммонийную соль путем перекристаллизации из ледяной СН3СООН. Образовавшиеся кристаллы отфильтровывали, промывали спиртом и высушивали. Получали 3,60-3,80 г технического глицирама из 100 г корней, что составляет 60-63% в пересчете на исходное сырье с содержанием ГК~6%. Перекристаллизацией моноаммонийной соли ГК из 85% этанола получали глицирам с содержанием основного вещества 88,0±2% по данным ВЭЖХ (чертеж), соответствующий требованиям ВФС 42-419-75. Т.пл. 224-228°С; [α]D 20+65±2°(с 0,04; 25% EtOH). Лит.[14]: Т.пл. 220-222°С с разл.; [α]D 20+46,9°(с 1,5; 50% EtOH). Найдено, %: N 1,69. C42H61O16NH4 +·4H2O. Вычислено, %: N 1,54. М.в. 912,0. Содержание воды 6,72-7,24%.100 g of Ural licorice (Glycyrrhiza uralensis Fisher) crushed in an electric mill (powder + fine shavings) were poured into 1000 ml of a 0.5% aqueous solution of NH 4 OH, shaken for several minutes and left for 10-12 hours at room temperature (20-22 ° C). The ammonia extract was drained by decantation, the roots were poured another 500 ml of a 0.5% solution of NH 4 OH and left overnight. Ammonia extracts were combined, filtered and concentrated H 2 SO 4 was added to the filtrate to pH 1-2. The precipitate formed was allowed to settle, filtered on a Buchner funnel, washed with distilled water (pH ~ 7) and dried in air, then at a temperature of 110-120 ° C for 6-7 hours. 9.8-10.4 g of triterpene acids were obtained (dry extract), which was extracted with 50 ml of a 1% solution of H 2 SO 4 in acetone (grade "hch") with stirring for 1 h at room temperature. The acetone extract was drained by decantation, 25 ml of acetone was added to the residue and boiled in a water bath for 30 minutes. Both extracts were combined and filtered. To the obtained acetone extract was added a 25% solution of NH 4 OH with stirring (pH 7-8). The triammonium salt of HA was filtered off, washed with acetone, alcohol and dried. Received 5.8-6.0 g of the triammonium salt of HA, which was converted into a monoammonium salt by recrystallization from ice CH 3 COOH. The resulting crystals were filtered off, washed with alcohol and dried. Received 3.60-3.80 g of technical glycyram from 100 g of roots, which is 60-63% in terms of the feedstock with a HA content of ~ 6%. By recrystallization of the monoammonium salt of HA from 85% ethanol, glycyrs were obtained with a basic substance content of 88.0 ± 2% according to HPLC (drawing), corresponding to the requirements of VFS 42-419-75. Mp 224-228 ° C; [α] D 20 + 65 ± 2 ° (c 0.04; 25% EtOH). Lit. [14]: So pl. 220-222 ° C with decomp .; [α] D 20 + 46.9 ° (c 1.5; 50% EtOH). Found,%: N 1.69. C 42 H 61 O 16 NH 4 + · 4H 2 O. Calculated,%: N 1.54. M.V. 912.0. The water content of 6.72-7.24%.
Источники информацииInformation sources
1. Соколов С.Я., Замотаев И.П. Справочник по лекарственным растениям. Москва: Медицина, 1988. 272 с.1. Sokolov S.Ya., Zamotaev I.P. Handbook of medicinal plants. Moscow: Medicine, 1988.272 s.
2. Антов Г., Халкова Ж., Михайлова А., Зайков Хр., Буркова Т. Токсикологическая характеристика глицирразата аммония (глицирама). Исследование острой и подострой токсичности. // Экспер. клин. фармакол., 60 (2), 65-67 (1997).2. Antov G., Khalkova Zh., Mikhailova A., Zaykov Khr., Burkova T. Toxicological characteristics of ammonium glycyrrhizate (glycyram). Study of acute and subacute toxicity. // Expert. wedge. pharmacol., 60 (2), 65-67 (1997).
3. Разина Т.Г., Зуева Е.П., Амосова Е.Н., Крылова С.Г. Препараты из лекарственных растений как средства дополнительной терапии в экспериментальной онкологии. // Экспер. клин. фармакол., 63(5), 59-61 (2000).3. Razina TG, Zueva EP, Amosova EN, Krylova SG Preparations from medicinal plants as a means of additional therapy in experimental oncology. // Expert. wedge. pharmacol., 63 (5), 59-61 (2000).
4. Закиров Н.У., Айзиков М.И., Курмуков А.Г. Кардиопротективное действие глицирама при изадриновом повреждении миокарда. // Экспер. клин. фармакол., 63(5), 24-26 (2000).4. Zakirov N.U., Aizikov M.I., Kurmukov A.G. Cardioprotective effect of glycyram with isadrine myocardial damage. // Expert. wedge. pharmacol., 63 (5), 24-26 (2000).
5. Sato H., Goto W., Yamamura J.-I., Kurokawa M., Kageyama S., Takahara Т., Watanabe A., Shiraki K.. Therapeutic Basis of Glycyrrhizin on Chronic Hepatitis В. // Antiviral Res., 30, 171-177 (1996).5. Sato H., Goto W., Yamamura J.-I., Kurokawa M., Kageyama S., Takahara T., Watanabe A., Shiraki K. .. Therapeutic Basis of Glycyrrhizin on Chronic Hepatitis B. // Antiviral Res ., 30, 171-177 (1996).
6. Kumada H. Long-term treatment of chronic hepatitis С with glycyrrhizin (Stronger Neo-minophagen, SNMC) for preventing liver cirrosis and hepatocellular carcinoma. // Oncology, 62, 94-100 (2002).6. Kumada H. Long-term treatment of chronic hepatitis C with glycyrrhizin (Stronger Neo-minophagen, SNMC) for preventing liver cirrosis and hepatocellular carcinoma. // Oncology, 62, 94-100 (2002).
7. Kitagawa I. Licorice root. A natural sweetener and an important ingredient in Chinece medicine. // Pure Appl. Chem., 74, 1189-1198 (2002).7. Kitagawa I. Licorice root. A natural sweetener and an important ingredient in Chinece medicine. // Pure Appl. Chem., 74, 1189-1198 (2002).
8. Маняк В.А., Муравьев И.А. Способ получения глицирама из густого экстракта солодки.// А.С.№1189453 от 11.03.1984. Опубл. 07.11.1985. Бюл. №41.8. Manyak V.A., Muravyov I.A. A method of obtaining glycyram from a thick extract of licorice.// A.S. No. 1189453 from 03/11/1984. Publ. 11/07/1985. Bull. No. 41.
9. Степанова Э.Ф. Способ получения глицирама. // А.С.№827065 от 07.03.1978. Опубл. 07.05.1981. Бюл. №17.9. Stepanova E.F. The method of producing glycyram. // A.S. No. 827065 of 03/07/1978. Publ. 05/07/1981. Bull. Number 17.
10. Маняк В.А., Муравьев И.А. Способ получения глицирама. // А.С. №1223911 от 28.01.1982. Опубл. 15.04.1986. Бюл. №14.10. Manyak V.A., Muravyov I.A. The method of producing glycyram. // A.S. No. 1223911 dated 01/28/1982. Publ. 04/15/1986. Bull. No. 14.
11. Толстиков Г.А., Шульц Э.Э., Балтина Л.А., Толстикова Т.Г. Солодка. Неиспользуемые возможности здравоохранения России. // Химия в интересах устойчивого развития, 5 (1), 57-73 (1997).11. Tolstikov G.A., Schulz E.E., Baltina L.A., Tolstikova T.G. Licorice. Unused opportunities for healthcare in Russia. // Chemistry for Sustainable Development, 5 (1), 57-73 (1997).
12. Балтина Л.А., Кондратенко P.M., Мустафина С.Р., Флехтер О.Б., Муринов Ю.И., Давыдова В.А., Зарудий Ф.С., Исмагилова А.Ф., Толстиков Г.А. Способ получения глицирризиновой кислоты из глицирама. Фармакологические свойства. // Хим.-фарм. жур, 35 (1), 38-41 (2001).12. Baltina L.A., Kondratenko PM, Mustafina S.R., Flekhter O.B., Murinov Yu.I., Davydova V.A., Zarudy F.S., Ismagilova A.F., Tolstikov G. BUT. A method of producing glycyrrhizic acid from glycyram. Pharmacological properties. // Chem.-farm. Journal, 35 (1), 38-41 (2001).
13. Гранкина В.П., Надежина Т.П. Солодка уральская. Новосибирск: Наука, Сибирское отделение. 1991. 152 с.13. Grankina V.P., Nadezhina T.P. Ural licorice. Novosibirsk: Science, Siberian Branch. 1991.152 s.
14. Г.Г.Запесочная, Е.Н.Звонкова, В.А.Куркин, Е.В.Казакова, Л.Н.Первых, В.И.Шейченко, В.А.Быков. // Химия прир. соед., №6, 772-780 (1994).14. G. G. Zapesochnaya, E. N. Zvonkova, V. A. Kurkin, E. V. Kazakova, L. N. First, V. I. Sheychenko, V. A. Bykov. // Chem. Comp., No. 6, 772-780 (1994).
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2005113361/15A RU2299740C2 (en) | 2005-05-03 | 2005-05-03 | Method for preparing glycyrrhizic acid monoammonium salt (glycyram) |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2005113361/15A RU2299740C2 (en) | 2005-05-03 | 2005-05-03 | Method for preparing glycyrrhizic acid monoammonium salt (glycyram) |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2005113361A RU2005113361A (en) | 2006-11-10 |
| RU2299740C2 true RU2299740C2 (en) | 2007-05-27 |
Family
ID=37500551
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2005113361/15A RU2299740C2 (en) | 2005-05-03 | 2005-05-03 | Method for preparing glycyrrhizic acid monoammonium salt (glycyram) |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2299740C2 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111072731A (en) * | 2019-12-31 | 2020-04-28 | 中国医药健康产业股份有限公司 | Method for purifying and obtaining glycyrrhetate from liquorice |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2111006C1 (en) * | 1995-09-20 | 1998-05-20 | Фармацевтическая фирма "Здоровье" | Method of glycyrram preparing |
-
2005
- 2005-05-03 RU RU2005113361/15A patent/RU2299740C2/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2111006C1 (en) * | 1995-09-20 | 1998-05-20 | Фармацевтическая фирма "Здоровье" | Method of glycyrram preparing |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111072731A (en) * | 2019-12-31 | 2020-04-28 | 中国医药健康产业股份有限公司 | Method for purifying and obtaining glycyrrhetate from liquorice |
| CN111072731B (en) * | 2019-12-31 | 2021-11-16 | 中国医药健康产业股份有限公司 | Method for purifying and obtaining glycyrrhetate from liquorice |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2005113361A (en) | 2006-11-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN100420665C (en) | Method for extracting 'Danfen' phenolic acid-A | |
| CN113004354B (en) | Dammarane type tetracyclic triterpene compound and anti-gout application thereof | |
| CN103127192A (en) | Preparation method for fresh ginseng extractive and application thereof in II-type diabetics | |
| CN100500196C (en) | A kind of preparation method of total saponins of papaya | |
| CN100584856C (en) | A kind of hedera saponin, its preparation method and its application in the preparation of antitumor drug | |
| CN102112142A (en) | Extraction method for increasing liquiritigenin content in glycyrrhizae radix et rhizoma or glycyrrhizae radix extract | |
| CN107929337A (en) | A kind of preparation method and application of Panax stipuleanatus Tsai et Feng anti-inflammatory active component | |
| RU2299740C2 (en) | Method for preparing glycyrrhizic acid monoammonium salt (glycyram) | |
| CN101229212A (en) | Parts of total secondary saponins of Lonicera tomentosa, its preparation method and anti-tumor application | |
| CN107880084B (en) | Method for extracting high-purity verbascoside from campsis plant flowers | |
| CN104688798B (en) | A kind of preparation method and application of rosy clouds grass extract | |
| CN103110618A (en) | Medical application of wogonin | |
| CN115010618A (en) | A kind of uric acid-lowering golden amide alcohol ester separation and purification method and application thereof | |
| CN104771456B (en) | Application of Fistula ginseng extract in inhibiting tyrosinase activity | |
| CN113713046A (en) | Extract of Dendrobium candidum and application of two chemical components thereof as anti-inflammatory preparation | |
| CN109438548B (en) | A kind of preparation method of Dianzhong Lou Pianuoside Pb | |
| CN102372755A (en) | Preparation method of tiliroside | |
| CN104926634B (en) | A kind of method extracting isobavachalcone from fresh angelica keiskei | |
| CN105601700A (en) | Method for preparing tripdiolide from tripterygium wilfordii | |
| CN107213176B (en) | A kind of hydrangea leaf extract and its pharmaceutical composition, preparation method and application | |
| CN103087138A (en) | Ginsenoside C-K monohydrate crystal and preparation method thereof | |
| CN104906214B (en) | The combined preparation process of flavonoids and triterpene acid in a kind of loguat leaf | |
| CN102504000B (en) | Method for comprehensively extracting S-adenosyl-L-methionine and superoxide dismutase from Saccharomyces cerevisiae | |
| CN103301181A (en) | Preparation method and application of oxytropis glabra daidzrin | |
| CN102133277B (en) | Red paeony root active constituent as well as preparation method and application thereof |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20090504 |