RU2295725C2 - Способ оценки восприимчивости организма животного к туберкулезу - Google Patents
Способ оценки восприимчивости организма животного к туберкулезу Download PDFInfo
- Publication number
- RU2295725C2 RU2295725C2 RU2005110046/15A RU2005110046A RU2295725C2 RU 2295725 C2 RU2295725 C2 RU 2295725C2 RU 2005110046/15 A RU2005110046/15 A RU 2005110046/15A RU 2005110046 A RU2005110046 A RU 2005110046A RU 2295725 C2 RU2295725 C2 RU 2295725C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- tuberculosis
- mycobacteria
- lymphocytes
- neutrophils
- blood
- Prior art date
Links
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к ветеринарии. Для осуществления способа к нитратной крови животного добавляют живую культуру микобактерий в соотношении 1×109 микробных клеток в 1 мл нитратной крови, инкубируют смесь в течение 30 минут при 37°С. Затем готовят мазки и окрашивают их, определяют поглотительную способность нейтрофилов и выявляют наличие микобактерий на лимфоцитах. При наличии микобактерий на 9-35% лимфоцитах и значении поглотительной способности нейтрофилов более 6,0 судят о восприимчивости животных к туберкулезу. Использование способа позволяет в короткие сроки с помощью простых приемов оценить устойчивость и восприимчивость к туберкулезу лабораторных и сельскохозяйственных животных. 1 табл.
Description
Изобретение относится к ветеринарии и может быть использовано при оценке устойчивых и восприимчивых к туберкулезу лабораторных и сельскохозяйственных животных.
Известен способ определения неспецифической резистентности организма свиней (патент РФ №2038820, кл. МПК А 61 В 10/00, опуб. 09.07.95 г.), основанный на исследовании соотношений показателей фагоцитарной активности нейтрофилов в двух мазках крови. Первый отражает уровень фагоцитоза, определяемый после помещения крови на предметное стекло, второй - после помещения крови и взвеси объектов фагоцитоза в пробирку. Уменьшение соотношения показателей свидетельствует о снижении неспецифической резистентности организма.
Однако данный способ используется для выявления неспецифической резистентности больных животных с иммунодефицитными состояниями.
Известен также способ прогнозирования развития туберкулезного процесса по иммунологическим показателям (см. патент РФ №2173457, кл. МКИ G 01 N 33/48, опуб. 10.09.2001), заключающийся в исследовании нейтрофилов периферической крови, определении фагоцитарного индекса завершенности фагоцитоза, поглотительной способности, исследовании моноцитов-макрофагов периферической крови и определении Fcy-рецепторов и количества лизосом.
Однако способ предназначен только для человека и используется для прогнозирования течения инфекционного процесса у больных туберкулезом людей.
Наиболее близким к заявляемому является способ отбора крупного рогатого скота на устойчивость к туберкулезу здоровых животных (см. патент РФ №2080061, кл. МКИ А 01 К 67/02, опуб. 27.05.97). Способ основан на отборе животных по комплексу аллелей групп крови и антигенов BoLA-системы, маркирующих устойчивость. Данный метод направлен на решение задачи определения генетической устойчивости животных и позволяет отбирать для воспроизводства животных конкретной породы - крупный рогатый скот.
Однако способ длителен и сложен в исполнении, требует большого количества ингредиентов. Кроме этого, способ не позволяет определять устойчивость к туберкулезу других видов животных (свиней, овец), включая и лабораторных (морских свинок, мышей, крыс, кроликов).
Изобретение направлено на решение задачи создания способа оценки восприимчивости организма здорового животного к туберкулезу на основе изучения его иммунологических показателей крови.
Техническим результатом изобретения является быстрота и простота исполнения способа при снижении затрат и расширении области применения за счет возможности использования как для сельскохозяйственных, так и лабораторных животных.
Для решения поставленной задачи в способе оценки восприимчивости организма животного к туберкулезу, заключающемся в исследовании крови, согласно изобретению к цитратной крови животного добавляют живую культуру микобактерий в соотношении 1×109 микробных клеток в 1 мл цитратной крови, готовят мазки и окрашивают их, затем определяют поглотительную способность нейтрофилов и выявляют наличие микобактерий на лимфоцитах, при наличии микобактерий на 9%-35% лимфоцитах и значении поглотительной способности нейтрофилов более 6,0 судят о восприимчивости животных к туберкулезу.
В известных авторам источниках патентной и научно-технической информации не описано способа оценки восприимчивости организма животного к туберкулезу, позволяющего проводить дифференциацию здоровых животных на восприимчивых и устойчивых к заболеванию туберкулезом по показателю поглотительной способности нейтрофилов и процента наличия микобактерий на лимфоцитах.
Все известные методы связаны с исследованиями уже инфицированного организма. Авторами выявлен лишь один источник информации, являющийся прототипом данного изобретения (см. патент РФ №2080061), в котором была решена задача выявления устойчивых к заражению туберкулезом здоровых животных (крупного рогатого скота). Однако он основан на определении генетической устойчивости организма.
Задачу выявления способного к заражению туберкулезом здорового организма животного на основе изучения его иммунологических показателей крови никто не ставил.
Сказанное позволяет нам сделать вывод о наличии в заявляемом способе критерия «изобретательский уровень».
Способ осуществляется следующим образом.
Осуществляют забор крови у здорового животного. В пробирку с цитратной кровью добавляют микобактерий, в частности вакцину БЦЖ в соотношении 1·109 м.к. в 1 мл цитратной крови. Спустя 30 минут осуществляют приготовление мазков общепринятыми методами, в частности методом окраски по Циль-Нильсону, после чего проводят микроскопические исследования мазков. Выявляют наличие микобактерий на лимфоцитах и определяют поглотительную способность нейтрофилов. При наличии микобактерий на 9%-35% лимфоцитах и при значении поглотительной способности нейтрофилов не менее 6,0 судят о восприимчивости животных к туберкулезу.
Пример 1.
В опыте было использовано 20 белых крыс, у которых брали кровь и стабилизировали ее гепарином.
В пробирки вносили вакцину БЦЖ в количестве 0,5 мг на 1 мл цитратной крови, что соответствовало 1·109 микробных клеток. Смесь выдерживали при 37°С в течение 30 минут. Готовили мазки методом окраски по Циль-Нильсону и осуществляли микроскопические исследования. Определяли значение поглотительной способности и наличие микобактерий на лимфоцитах. У одной группы животных в количестве 10 крыс значение поглотительной способности (фагоцитарный индекс) было равно 4,8±0,3, при этом микобактерий на лимфоцитах отсутствовали. У второй группы в количестве 10 крыс фагоцитарный индекс составлял 6,8±0,6 при наличии микобактерий на 11,8±2,1% лимфоцитов.
Аналогичные исследования были проведены на кроликах и морских свинках.
Результаты исследований представлены в таблице.
| Таблица | ||||
| Вид животного | Кол-во животных | Фагоцитарный индекс | Количество лимфоцитов, на которых имеются микобактерий, % | Иммунное состояние |
| Крысы | 10 | 4,8±0,3 | 2,1±0,1 | Устойчивы |
| 10 | 6,8±0,6 | 11,8±2,1 | Восприимчивы | |
| Кролики | 10 | 5,7±0,2 | 3,4±0,5 | Устойчивы |
| 10 | 7,9±0,9 | 17,5±1,6 | Восприимчивы | |
| Морские свинки | 10 | 7,0±0,6 | 28,9±4,1 | Восприимчивы |
| Телята | 10 | 3,4±0,5 | 4,8±0,5 | Устойчивы |
| 10 | 9,1±0,8 | 18,6±1,6 | Восприимчивы | |
Для доказательства обоснования полученного результата было проведено контрольное заражение животных путем подкожного введения им вирулентной культуры M. bovis.
Заболевание диагностировали по клиническим признакам, а также путем проведения патологоанатомических и бактериологических исследований.
По результатам патологоанатомических исследований признаков заболевания туберкулезом у крыс с поглотительной способностью нейтрофилов 4,8±0,3 не выявлено. У крыс с поглотительной способностью нейтрофилов >6,0 (фагоцитарный индекс был равен 6,8±0,6) и наличием микобактерий на поверхности более, чем на 10% лимфоцитов (11,8±2,1) регистрировались характерные изменения во внутренних органах и была выделена культура M. bovis.
У кроликов с высоким значением поглотительной способности (фагоцитарный индекс 7,9±0,9) и наличием микобактерий на 17,5±1,6% лимфоцитах отмечались клинические признаки туберкулеза. Результаты патологоанатомических изменений подтвердили наличие характерных изменений во внутренних органах, а при проведении бактериологических исследований была выделена культура M. bovis.
Аналогичные результаты были получены и у морских свинок, значение фагоцитарного индекса которых составляло 7,0±0,6, а количество лимфоцитов с микобактериями - 28,9±4,1%.
Таким образом, заявляемый способ позволяет по показателю поглотительной способности нейтрофилов и количеству микобактерий на лимфоцитах осуществлять дифференциацию здоровых животных на устойчивых и восприимчивых к заражению туберкулезом.
Claims (1)
- Способ оценки восприимчивости организма животного к туберкулезу путем исследования крови, отличающийся тем, что к цитратной крови животного добавляют живую культуру микобактерий в соотношении 1·109 микробных клеток в 1 мл цитратной крови, инкубируют смесь в течение 30 мин при 37°С, готовят мазки и окрашивают их, затем определяют поглотительную способность нейтрофилов и выявляют наличие микобактерий на лимфоцитах, при наличии микобактерий на 9-35% лимфоцитах и значении поглотительной способности нейтрофилов более 6,0 судят о восприимчивости животных к туберкулезу.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2005110046/15A RU2295725C2 (ru) | 2005-04-06 | 2005-04-06 | Способ оценки восприимчивости организма животного к туберкулезу |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2005110046/15A RU2295725C2 (ru) | 2005-04-06 | 2005-04-06 | Способ оценки восприимчивости организма животного к туберкулезу |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2005110046A RU2005110046A (ru) | 2006-10-20 |
| RU2295725C2 true RU2295725C2 (ru) | 2007-03-20 |
Family
ID=37437419
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2005110046/15A RU2295725C2 (ru) | 2005-04-06 | 2005-04-06 | Способ оценки восприимчивости организма животного к туберкулезу |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2295725C2 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2452952C1 (ru) * | 2011-06-01 | 2012-06-10 | Государственное научное учреждение Саратовский научно-исследовательский ветеринарный институт Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ Саратовский НИВИ Россельхозакадемии) | Способ оценки восприимчивости крупного рогатого скота к туберкулезу |
-
2005
- 2005-04-06 RU RU2005110046/15A patent/RU2295725C2/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Seller P. et al. Early granuloma formation after aerosol Mycobacterium tuberculosis infection is regulated by neutrophils via CXCR3-signaling chemokines. Eur. J. Immunol. 2003 Oct; 33 (10):2676-86, (реферат), [он-лайн] [10.11.2005], найдено из БД PubMed. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2452952C1 (ru) * | 2011-06-01 | 2012-06-10 | Государственное научное учреждение Саратовский научно-исследовательский ветеринарный институт Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ Саратовский НИВИ Россельхозакадемии) | Способ оценки восприимчивости крупного рогатого скота к туберкулезу |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2005110046A (ru) | 2006-10-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Fulcher et al. | Carboxyfluorescein succinimidyl ester‐based proliferative assays for assessment of T cell function in the diagnostic laboratory | |
| Bolz et al. | MyD88 plays a unique role in host defense but not arthritis development in Lyme disease | |
| JP4686611B2 (ja) | 医療品中の非エンドトキシン性発熱物質夾雑物を検出することがより優れて可能となる改良された単球活性化試験 | |
| Ritzmann et al. | Prevalence of Mycoplasma suis in slaughter pigs, with correlation of PCR results to hematological findings | |
| Altheimer et al. | Leptospira infection and shedding in dogs in Thailand | |
| Breitschwerdt et al. | PCR amplification of Bartonella koehlerae from human blood and enrichment blood cultures | |
| JP2009521690A5 (ru) | ||
| CN1122614A (zh) | 检查或测量细胞相关性分子总量的方法和装置 | |
| Boadella et al. | Performance of immunochromatographic and ELISA tests for detecting fallow deer infected with Mycobacterium bovis | |
| Shuralev et al. | Application of the Enfer chemiluminescent multiplex ELISA system for the detection of Mycobacterium bovis infection in goats | |
| Chen et al. | Leishmaniasis diagnosis via metagenomic next-generation sequencing | |
| Brüns et al. | Diagnosis and implications of Mycobacterium bovis infection in banded mongooses (Mungos mungo) in the Kruger National Park, South Africa | |
| Smith et al. | Cell-mediated immunological biomarkers and their diagnostic application in livestock and wildlife infected with Mycobacterium bovis | |
| Miller et al. | Mycobacterium bovis in free-ranging lions (panthera leo)—Evaluation of serological and tuberculin skin tests for detection of infection and disease | |
| Goosen et al. | The VetMAX™ M. tuberculosis complex PCR kit detects MTBC DNA in antemortem and postmortem samples from white rhinoceros (Ceratotherium simum), African elephants (Loxodonta africana) and African buffaloes (Syncerus caffer) | |
| Talukder et al. | Comparative evaluation of commercial serodiagnostic tests for the seroprevalence study of brucellosis in stray dogs in Bangladesh. | |
| US20210239678A1 (en) | Leukocyte recruitment in infectious disease | |
| RU2295725C2 (ru) | Способ оценки восприимчивости организма животного к туберкулезу | |
| DeKuiper et al. | Mycobacterium avium sp. paratuberculosis (MAP) induces IL-17a production in bovine peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) and enhances IL-23R expression in-vivo and in-vitro | |
| O’Brien et al. | Application of the TruCulture® whole blood stimulation system for immune response profiling in cattle | |
| Poryvaeva et al. | Immunological reactivity of calves with associated respiratory infections | |
| Denholm et al. | Immune-associated traits measured in milk of Holstein-Friesian cows as proxies for blood serum measurements | |
| Kumar et al. | Disease diagnostic tools for health management in Aquaculture | |
| Sabry et al. | A polymerase chain reaction and enzyme linked immunosorbent assay based approach for diagnosis and differentiation between vaccinated and infected cattle with Mycobacterium bovis | |
| Harrenstien et al. | Mycobacterium avium in pygmy rabbits (Brachylagus idahoensis): 28 cases |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD4A | Correction of name of patent owner | ||
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20120407 |