RU2290219C2 - In vitro method for treating cells - Google Patents
In vitro method for treating cells Download PDFInfo
- Publication number
- RU2290219C2 RU2290219C2 RU2005105499/14A RU2005105499A RU2290219C2 RU 2290219 C2 RU2290219 C2 RU 2290219C2 RU 2005105499/14 A RU2005105499/14 A RU 2005105499/14A RU 2005105499 A RU2005105499 A RU 2005105499A RU 2290219 C2 RU2290219 C2 RU 2290219C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cells
- capsule
- electrodes
- vitro
- suspension
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к патофизиологии, биотехнологии и лабораторному делу, касается негативной регуляции жизнедеятельности клеток in vitro и может быть использовано для регуляции жизнедеятельности клеток in vivo при онкологических, онкогематологических и других заболеваниях.The invention relates to pathophysiology, biotechnology and laboratory science, relates to the negative regulation of the vitality of cells in vitro and can be used to regulate the vital activity of cells in vivo in oncological, oncohematological and other diseases.
Известен широкий спектр веществ природного и синтетического происхождения, способных оказывать негативное влияние на жизнедеятельность клеток in vivo и in vitro. Существующий арсенал фармакологических средств предполагает использование их стимулирующего либо ингибирующего эффекта на те или иные клетки. В настоящее время преимущественное негативное влияние на рост клеток большинства тканей оказывают фактор некроза опухоли, интерфероны, трансформирующий фактор роста - бета [1,2].A wide range of substances of natural and synthetic origin is known that can have a negative effect on the vital activity of cells in vivo and in vitro. The existing arsenal of pharmacological agents involves the use of their stimulating or inhibitory effect on certain cells. At present, the tumor necrosis factor, interferons, and the transforming growth factor beta are the predominant negative effect on the growth of cells in most tissues [1,2].
Физические и химические факторы, в частности радиационное [3,4] и ультрафиолетовое [5] излучения, термическое воздействие [6], цитостатические препараты [7], ионы металлов [8], обладают в основном негативным эффектом на жизнедеятельность клеток.Physical and chemical factors, in particular radiation [3,4] and ultraviolet [5] radiation, thermal effects [6], cytostatic drugs [7], metal ions [8], have a mainly negative effect on the vital activity of cells.
Известно влияние на рост клеток in vitro электрического поля, создаваемого во взвеси клеток при помощи источника внешнего магнитного поля [9], при помещении взвеси клеток между электродами генератора импульсов [10]. Однако данные воздействия имеют следующие недостатки:The effect on the in vitro cell growth of the electric field created in the suspension of cells using an external magnetic field source [9] is known when the suspension of cells is placed between the electrodes of the pulse generator [10]. However, these effects have the following disadvantages:
1) отсутствует универсальность, т.е. в каждом конкретном случае в зависимости от прибора, способа воздействия и вида клеток требуется точная калибровка параметров ингибиции клеток, часто не соответствующих физиологическому диапазону;1) there is no universality, i.e. in each case, depending on the device, method of exposure and type of cells, an accurate calibration of the parameters of inhibition of cells, often not corresponding to the physiological range, is required;
2) громоздкость аппаратуры, неэкономичность воздействия и обслуживания вследствие увеличения времени подготовки и выполнения требуемой процедуры, необходимости наличия дорогостоящего оборудования;2) the bulkiness of the equipment, the inefficiency of exposure and maintenance due to an increase in the time of preparation and execution of the required procedure, the need for expensive equipment;
3) трудность сохранения стерильности взвеси клеток вследствие введения электродов и необходимости их соединения с внешним источником напряжения.3) the difficulty of maintaining the sterility of the suspension of cells due to the introduction of electrodes and the need for their connection with an external voltage source.
Наиболее близким (прототипом) к способу обработки клеток in vitro является способ регуляции роста клеток in vitro [11] с помощью устройства, представляющего из себя электростимулятор желудочно-кишечного тракта (ЭС ЖКТ), выполненного в виде лекарственной капсулы, в которой электроды представляют собой изолированные части лекарственной капсулы, а генератор импульсов и источник питания размещены внутри капсулы. Способ регуляции роста клеток in vitro, согласно [11], заключается в электрическом воздействии, осуществляемом ЭС ЖКТ импульсным током с длительностью импульсов 5-7 мс, силой тока 9-16 мА и амплитудой напряжения между электродами не более 4,5 В, причем для ингибиции клеток in vitro воздействуют в течение не менее 180 минут.The closest (prototype) to the method of processing cells in vitro is a method of regulating cell growth in vitro [11] using a device that is an electrostimulator of the gastrointestinal tract (ES GIT), made in the form of a drug capsule, in which the electrodes are isolated parts of the drug capsule, and the pulse generator and power source are located inside the capsule. The method of regulating cell growth in vitro, according to [11], consists in the electrical action carried out by an ES GIT using a pulsed current with a pulse duration of 5-7 ms, a current strength of 9-16 mA and a voltage amplitude between the electrodes of not more than 4.5 V, and for in vitro cell inhibition is effective for at least 180 minutes.
Однако данный способ обработки клеток in vitro имеет недостатки:However, this method of processing cells in vitro has the disadvantages:
1) для ингибиции клеток требуется длительная экспозиция прибора в реактивной среде, каковой является взвесь клеток, что вызывает выраженную коррозию электродов, выполненных из нержавеющей хромоникелевой стали [12], и неконтролируемое загрязнение клеточной среды нежелательными продуктами (хром, никель, железо), изменяющими ее биологические свойства и затрудняющими ее применение в биомедицинской практике;1) inhibition of cells requires a long exposure of the device in a reactive medium, which is a suspension of cells, which causes severe corrosion of electrodes made of stainless chromium-nickel steel [12], and uncontrolled contamination of the cell medium with undesirable products (chromium, nickel, iron) that change it biological properties and complicating its use in biomedical practice;
2) низкая экономическая эффективность вследствие значительного времени подготовки и выполнения требуемой процедуры ингибиции жизнедеятельности клеток;2) low economic efficiency due to the significant preparation time and the required procedure for the inhibition of cell activity;
3) не применяется комбинированное воздействие электрического поля контролируемого электрофореза ионов, усиливающего ингибицию клеток. В то же время известно, что ионы микроэлементов в минимальных концентрациях способны ингибировать функцию всего организма и составляющих его клеток [13];3) the combined effect of the electric field of controlled ion electrophoresis, which enhances cell inhibition, is not applied. At the same time, it is known that trace elements ions in minimum concentrations are able to inhibit the function of the whole organism and its constituent cells [13];
4) Проведенный нами эксперимент показал, что известный способ регуляции роста клеток in vitro [11] дает нестабильные результаты ингибиции опухолевых клеток при приближении культуральной среды к составу биологических жидкостей.4) Our experiment showed that the known method of regulating cell growth in vitro [11] gives unstable results of inhibition of tumor cells when the culture medium approaches the composition of biological fluids.
Так обработка in vitro в течение 180 мин клеток асцитной опухоли Эрлиха, культивируемых в изотоничном растворе хлорида натрия, при помощи ЭС ЖКТ без эндогенного ионофореза согласно прототипу показывает, что через 24 часа после обработки погибает 100% клеток согласно тесту с трипановым синим. Однако при добавлении в среду эмбриональной телячьей сыворотки в концентрации 5% и последующей обработке ЭС ЖКТ без эндогенного ионофореза в течение 180 мин выживает практически 84% опухолевых клеток (процент окрашенных (погибших) клеток составляет всего 16,57±0,53%).Thus, in vitro treatment for 180 min of Ehrlich ascites tumor cells cultured in an isotonic solution of sodium chloride using ES gastrointestinal tract without endogenous iontophoresis according to the prototype shows that 24 hours after treatment, 100% of the cells die according to the trypan blue test. However, when 5% concentration of embryonic calf serum was added to the medium and subsequent treatment of gastrointestinal tract ES without endogenous iontophoresis, almost 84% of tumor cells survive for 180 min (the percentage of stained (dead) cells is only 16.57 ± 0.53%).
Новая техническая задача - создание условий для повышения воспроизводимости результатов ингибиции клеток in vitro, предупреждения загрязнения материала нежелательными примесями, достижение универсальности, экономичности и удобства пользования.A new technical task is to create conditions to increase the reproducibility of in vitro cell inhibition results, prevent contamination of the material with undesirable impurities, and achieve universality, economy and ease of use.
Для решения поставленной задачи в способе обработки клеток in vitro проводят воздействие импульсным током помещенного в клеточную взвесь электростимулятора, выполненного в виде капсулы, части которой представляют собой электроды с размещенными внутри капсулы генератором импульсов и источником питания, причем проводят комбинированное электрическое и ионное воздействие в течение не менее, чем 30 минут, при этом электроды содержат микроэлемент или микроэлементы.To solve the problem, in an in vitro method for processing cells, an electric stimulator placed in a cell suspension is made in the form of a capsule, the parts of which are electrodes with a pulse generator and a power source placed inside the capsule, and a combined electric and ionic effect is performed for not less than 30 minutes, while the electrodes contain a trace element or trace elements.
Новым в способе обработки клеток in vitro является то, что проводят комбинированное электрическое и ионное воздействие в течение не менее, чем 30 минут, при этом электроды содержат микроэлемент или микроэлементы.New in the method of processing cells in vitro is that they carry out a combined electric and ionic exposure for at least 30 minutes, while the electrodes contain a trace element or trace elements.
Экспериментально установлено, что присутствие электростимулятора с эндогенным электрофорезом ионов, выполненного в виде капсулы, электроды которой представляют собой части лекарственной капсулы с нанесенным микроэлементом (микроэлементами), в клеточной взвеси оказывает ингибирующее влияние на клетки различных гистогенетических линий в течение не мене 30 минут.It was experimentally established that the presence of an electrostimulator with endogenous ion electrophoresis, made in the form of a capsule, the electrodes of which are parts of a drug capsule coated with microelements (microelements), in the cell suspension has an inhibitory effect on cells of various histogenetic lines for at least 30 minutes.
Существует избирательность различных клеток и тканей, как здоровых, так и опухолевых, к определенным микроэлементам [16,17]. При этом микроэлементы и ионы металлов способны ингибировать функции целостного организма и его частей [8].There is a selectivity of various cells and tissues, both healthy and tumor, to certain microelements [16, 17]. At the same time, trace elements and metal ions are able to inhibit the functions of the whole organism and its parts [8].
Степень усвоения организмом минеральных веществ составляет всего 10-40% вследствие существования барьерных функций мембран клеток и значительно усиливается при использовании ЭС ЖКТ с эндогенным электрофорезом [18].The degree of assimilation of mineral substances by the body is only 10-40% due to the existence of barrier functions of cell membranes and is significantly enhanced when using gastrointestinal tract ES with endogenous electrophoresis [18].
Исследования показали, что интервала времени менее 30 минут недостаточно, чтобы осуществить достоверную ингибицию различных типов клеток in vitro.Studies have shown that a time interval of less than 30 minutes is not enough to effect reliable inhibition of various types of cells in vitro.
Для проведения экспериментов были использованы различные виды электростимуляторов (АЭС ЖКТ-02 с электрофорезом ионов хрома; АЭС-ЖКТ-01, АЭС ЖКТ-01 с электрофорезом ионов золота, цинка, меди, хрома, кремния; АЭС ЖКТ-01 с эндогенным электрофорезом ионов цинка или хрома), генерирующих импульсный ток в широком диапазона параметров (длительность импульсов 5-7 мс, амплитуда импульсов 5-25 мА, длительность пакета 16 импульсов 320 мс - 58 с) [19], выполненных в виде капсулы, электроды которой представляют собой части капсулы с нанесенным микроэлементом (золото, цинк, медь, хром, кремний).For the experiments, various types of electrical stimulants were used (ZhKT-02 NPP with electrophoresis of chromium ions; AES-ZhKT-01, ZhKT-01 NPP with electrophoresis of gold, zinc, copper, chromium, silicon ions; ZhKT-01 NPP with endogenous zinc ion electrophoresis or chromium), generating a pulsed current in a wide range of parameters (pulse duration 5-7 ms, pulse amplitude 5-25 mA, pulse duration 16 pulses 320 ms - 58 s) [19], made in the form of a capsule, the electrodes of which are parts trace element capsules (gold, c nc, copper, chromium, silicon).
Эффективность способа обработки клеток in vitro раскрывается следующими примерами.The effectiveness of the in vitro method of processing cells is disclosed by the following examples.
Пример 1. Электростимуляторы с эндогенным электрофорезом, выполненные в виде капсулы, в которой генератор импульсов и источник питания размещены внутри капсулы, а электроды представляют собой части капсулы, содержащие микроэлемент, культивировали в течение 30 мин в изотоничном растворе хлорида натрия, содержащем клетки перевиваемой асцитной опухоли Эрлиха в концентрации 2×106/мл. Электростимуляторы генерировали импульсный ток с длительностью импульсов 5-7 мс, амплитуда импульсов 9-15 мА, длительностью пакета 16 импульсов 320-450 мс. В каждую из 4-х пробирок добавляли один из электростимуляторов, покрытых одним из микроэлементов из следующего ряда: золото, цинк, медь, хром, кремний. После удаления электростимуляторов из пробирок обработанную клеточную взвесь отмывали путем добавления свежего раствора хлорида натрия и центрифугировали при 1500 об/мин в течение 10 мин, супернатант удаляли. Затем взвесь клеток раскапывали в лунки иммунологических планшетов в концентрации 5×105/мл и культивировали при 37°С, 100% влажности и 5% СО2 в течение 24 часов. Результаты показали (табл.1), что электростимуляторы с эндогенным электрофорезом различных микроэлементов вызывают 100%-ную гибель опухолевых клеток по данным теста на окрашиваемость 0,4% трипановым синим согласно рекомендациям международного стандарта ISO 10993-5.Example 1. Electrical stimulators with endogenous electrophoresis, made in the form of a capsule, in which a pulse generator and a power source are placed inside the capsule, and the electrodes are parts of the capsule containing a trace element, cultured for 30 min in an isotonic solution of sodium chloride containing cells of an ascites tumor being transplanted Ehrlich at a concentration of 2 × 10 6 / ml. Electrical stimulators generated a pulsed current with a pulse duration of 5-7 ms, the pulse amplitude of 9-15 mA, a pulse duration of 16 pulses of 320-450 ms. In each of the 4 test tubes, one of the electrical stimulators coated with one of the microelements from the following series was added: gold, zinc, copper, chromium, silicon. After removal of electrostimulators from the tubes, the treated cell suspension was washed by adding fresh sodium chloride solution and centrifuged at 1500 rpm for 10 minutes, the supernatant was removed. Then a suspension of cells was dug into the wells of immunological plates at a concentration of 5 × 10 5 / ml and cultured at 37 ° C, 100% humidity and 5% CO 2 for 24 hours. The results showed (Table 1) that electrostimulators with endogenous electrophoresis of various trace elements cause 100% death of tumor cells according to the stain test 0.4% trypan blue according to the recommendations of the international standard ISO 10993-5.
Пример 2. Применяли электростимуляторы с эндогенным электрофорезом, выполненные в виде капсулы, в которой генератор импульсов и источник питания размещены внутри капсулы, а электроды представляют собой части капсулы, содержащие микроэлемент. Клетки перевиваемой асцитной опухоли Эрлиха культивировали в концентрации 2×106/мл в среде RPMI-1640, содержащей 5% эмбриональной телячьей сыворотки для имитации состава биологической жидкости. В каждую из 4-х пробирок на 60 либо 120 мин добавляли электростимулятор, покрытый цинком. Контролем служили электростимуляторы без эндогенного электрофореза. Электростимуляторы генерировали импульсный ток с длительностью импульсов 5-7 мс, амплитуда импульсов 9-15 мА, длительностью пакета 16 импульсов 320-450 мс.После удаления электростимуляторов из пробирок обработанную клеточную взвесь отмывали путем добавления свежего раствора хлорида натрия и центрифугировали при 1500 об/мин в течение 10 мин, супернатант удаляли. Клетки раскапывали в лунки иммунологических планшетов в концентрации 5×105/мл и культивировали в среде RPMI-1640, содержащей 5% эмбриональной телячьей сыворотки, при 37°С, 100% влажности и 5% CO2 в течение 24 часов. По окончании культивирования погибшие клетки определяли в тесте на окрашиваемость 0,4% трипановым синим.Example 2. Used electrical stimulators with endogenous electrophoresis, made in the form of a capsule, in which a pulse generator and a power source are placed inside the capsule, and the electrodes are parts of the capsule containing a trace element. Erlich transplantable ascitic tumor cells were cultured at a concentration of 2 × 10 6 / ml in RPMI-1640 medium containing 5% fetal calf serum to simulate the composition of the biological fluid. Zinc coated electrostimulator was added to each of the 4 tubes for 60 or 120 min. The control was electrical stimulators without endogenous electrophoresis. The pacemakers generated a pulsed current with a pulse duration of 5-7 ms, the pulse amplitude of 9-15 mA, a packet duration of 16 pulses of 320-450 ms. After removal of the pacemakers from the tubes, the treated cell suspension was washed by adding fresh sodium chloride solution and centrifuged at 1500 rpm within 10 min, the supernatant was removed. Cells were dug into the wells of immunological plates at a concentration of 5 × 10 5 / ml and cultured in RPMI-1640 medium containing 5% fetal calf serum at 37 ° C, 100% humidity and 5% CO 2 for 24 hours. At the end of the cultivation, dead cells were determined in a stain test of 0.4% trypan blue.
Результаты показали (табл.2), что число погибших опухолевых клеток, обработанных электростимуляторами с ионофорезом цинка, приближается к 100% уже после 60 мин воздействия. При этом содержание белков и биологически активных веществ в среде не влияет на результаты обработки. В то же время электростимуляторы без эндогенного электрофореза малоэффективны независимо от времени обработки.The results showed (Table 2) that the number of dead tumor cells treated with electrostimulators with zinc iontophoresis approaches 100% after 60 minutes of exposure. Moreover, the content of proteins and biologically active substances in the medium does not affect the processing results. At the same time, electrical stimulators without endogenous electrophoresis are ineffective regardless of the processing time.
Пример 3. В качестве объектов исследования использовали лейкоциты периферической крови, клетки костного мозга больного хроническим миелолейкозом в стадии обострения и солидных опухолей различной локализации (почка, поджелудочная железа, легкие) человека. Взвесь тех или иных клеток обрабатывали in vitro в среде RPMI-1640 в течение 120 мин следующими электростимуляторами с эндогенным электрофорезом ионов, выполненными в виде капсулы, в которой генератор импульсов и источник питания размещены внутри капсулы, а электроды представляют собой части капсулы, содержащие микроэлемент:Example 3. As the objects of study used peripheral blood leukocytes, bone marrow cells of a patient with chronic myelogenous leukemia in the acute stage and solid tumors of various localization (kidney, pancreas, lungs) of a person. A suspension of cells was treated in vitro in RPMI-1640 medium for 120 min with the following electrostimulators with endogenous ion electrophoresis, made in the form of a capsule, in which a pulse generator and a power source are placed inside the capsule, and the electrodes are parts of the capsule containing a trace element:
- клетки периферической крови обрабатывали электростимуляторами с эндогенным электрофорезом ионов цинка или хрома, выполненными в виде капсулы, в которой генератор импульсов и источник питания размещены внутри капсулы, а электроды представляют собой части капсулы, генерирующие импульсный ток с длительностью импульсов 5-7 мс, амплитудой импульсов 6 мА, длительностью пакета 16 импульсов 320-450 мс;- peripheral blood cells were treated with electrostimulators with endogenous electrophoresis of zinc or chromium ions, made in the form of a capsule, in which a pulse generator and a power source are placed inside the capsule, and the electrodes are parts of the capsule that generate a pulse current with a pulse duration of 5-7 ms, pulse amplitude 6 mA, packet duration 16 pulses 320-450 ms;
- клетки костного мозга больного хроническим миелолейкозом в стадии обострения обрабатывали электростимулятором с эндогенным электрофорезом ионов хрома, выполненным в виде капсулы, в которой генератор импульсов и источник питания размещены внутри капсулы, а электроды представляют собой части капсулы, генерирующие импульсный ток с длительностью импульсов 5-7 мс, амплитудой импульсов 9-15 мА, длительностью пакета 16 импульсов 320-450 мс;- the bone marrow cells of a patient with chronic myelogenous leukemia in the acute stage were treated with an electric stimulator with endogenous electrophoresis of chromium ions, made in the form of a capsule, in which a pulse generator and a power source are placed inside the capsule, and the electrodes are parts of the capsule that generate a pulsed current with a pulse duration of 5-7 ms, pulse amplitude 9-15 mA, packet duration 16 pulses 320-450 ms;
- клетки солидных опухолей обрабатывали электростимуляторами с эндогенным электрофорезом ионов цинка или хрома, выполненными в виде капсулы, в которой генератор импульсов и источник питания размещены внутри капсулы, а электроды представляют собой части капсулы, генерирующие импульсный ток с длительностью импульсов 5-7 мс, амплитудой импульсов 20-25 мА, длительностью пакета 16 импульсов 40-58 с.- cells of solid tumors were treated with electrostimulators with endogenous electrophoresis of zinc or chromium ions, made in the form of a capsule, in which a pulse generator and a power source are placed inside the capsule, and the electrodes are parts of the capsule that generate a pulsed current with a pulse duration of 5-7 ms, pulse amplitude 20-25 mA, a burst duration of 16 pulses 40-58 s.
После удаления электростимуляторов из пробирок обработанную клеточную взвесь взвесь отмывали путем добавления свежего раствора хлорида натрия и центрифугировали при 1500 об/мин в течение 10 мин, супернатант удаляли. Клетки раскапывали в лунки иммунологических планшетов в концентрации 5×105/мл и культивировали при 37°С, 100% влажности и 5% CO2 в течение 24 часов. По окончании культивирования погибшие клетки определяли в тесте на окрашиваемость 0,4% трипановым синим.After removal of electrostimulators from the tubes, the treated cell suspension was washed by adding fresh sodium chloride solution and centrifuged at 1500 rpm for 10 minutes, the supernatant was removed. Cells were dug into the wells of immunological plates at a concentration of 5 × 10 5 / ml and cultured at 37 ° C, 100% humidity and 5% CO 2 for 24 hours. At the end of the cultivation, dead cells were determined in a stain test of 0.4% trypan blue.
Результаты показали (табл.3), что независимо от типа обрабатываемых клеток и параметров импульсного тока, предлагаемый способ обработки клеток in vitro позволяет достичь 100%-ной ингибиции клеток in vitro по данным теста на окрашиваемость трипановым синим.The results showed (Table 3) that, regardless of the type of cells being treated and the parameters of the pulsed current, the proposed in vitro method for processing cells allows achieving 100% inhibition of cells in vitro according to the trypan blue stain test.
Известно, что тест с трипановым синим занижает действительные результаты гибели клеток [20], что наряду с полученными данными свидетельствует в пользу полной ингибиции нормальных и опухолевых клеток in vitro.It is known that the trypan blue test underestimates the actual results of cell death [20], which, along with the data obtained, supports the complete inhibition of normal and tumor cells in vitro.
Таким образом, предлагаемый способ обработки клеток in vitro в широком диапазоне состава среды, вида нанесенного микроэлемента, параметров и времени обработки независимо от типа клеток позволяет достичь 100%-ной ингибиции клеток in vitro. При этом повышается воспроизводимость результатов ингибиции клеток in vitro, предупреждается загрязнение материала нежелательными примесями, достигаются универсальность, экономичность и удобство пользования.Thus, the proposed method of processing cells in vitro in a wide range of medium composition, type of trace element applied, parameters and processing time, regardless of the type of cells, allows to achieve 100% inhibition of cells in vitro. At the same time, the reproducibility of the results of inhibition of cells in vitro is increased, contamination of the material with undesirable impurities is prevented, versatility, efficiency and ease of use are achieved.
Источники информацииInformation sources
1. Иващенко Ю.Д., Быкорез А.И. Полипептидные факторы роста и канцерогенез. - Киев, 1990. - С.65.1. Ivashchenko Yu.D., Bykorez A.I. Polypeptide growth factors and carcinogenesis. - Kiev, 1990. - P.65.
2. Гольдберг Е.Д., Дыгай A.M. Удут В.В. и др. Закономерности структурной организации систем жизнеобеспечения в норме и при развитии патологического процесса. - Томск, 1996, С.34-36.2. Goldberg E.D., Digay A.M. Udut V.V. and other patterns of the structural organization of life support systems in the norm and in the development of the pathological process. - Tomsk, 1996, p. 34-36.
3. Коноплянников А.Г. Радиобиология стволовых клеток. - М., 1984. - С.39-55.3. Konoplyannikov A.G. Stem cell radiobiology. - M., 1984. - S. 39-55.
4. Переверзев А.Е. Кроветворные колониеобразующие клетки и физические стресс-факторы. - Л., 1986. - С.95-102.4. Pereverzev A.E. Hematopoietic colony-forming cells and physical stress factors. - L., 1986. - S.95-102.
5. Cotter T.G., Lennon S.V., Glynn J.M., Green D.R. Microfilament-disrupting agents prevent the formation of apoptotic bodies in tumor cells undergoing apoptosis. // Cancer Research. - 1992. - Vol.52. - P.997-1005.5. Cotter T.G., Lennon S.V., Glynn J.M., Green D.R. Microfilament-disrupting agents prevent the formation of apoptotic bodies in tumor cells undergoing apoptosis. // Cancer Research. - 1992. - Vol. 52. - P.997-1005.
6. Переверзев А.Е. Кроветворные колониеобразующие клетки и физические стресс-факторы. - Л., 1986. - С.61-64.6. Pereverzev A.E. Hematopoietic colony-forming cells and physical stress factors. - L., 1986. - S. 61-64.
7. Гершанович М.Л. Осложнения при химио- и гормонотерапии злокачественных опухолей. - М., 1982. - 224 с.7. Gershanovich M.L. Complications of chemotherapy and hormone therapy of malignant tumors. - M., 1982. - 224 p.
8. Злобинский Б.М., Иоффе В.Г., Злобинский В.Б. Воспламеняемость и токсичность металлов и сплавов. - М., 1972. - С.226-259.8. Zlobinsky B.M., Ioffe V.G., Zlobinsky V.B. Flammability and toxicity of metals and alloys. - M., 1972. - S.226-259.
9. Kaune W.T., Frazier M.E., King A.J. e.a. System for the exposure of cell suspensions to power-frequency electric fields//Bioelectromagnetics. - 1984. - Vol.5. - N2. - P.117-129.9. Kaune W.T., Frazier M.E., King A.J. e.a. System for the exposure of cell suspensions to power-frequency electric fields // Bioelectromagnetics. - 1984. - Vol. 5. - N2. - P.117-129.
10. De Mattei М., Caruso A., Traina G.C. e.a. Correlation between pulsed electromagnetic fields exposure time and cell proliferation increase in human osteosarcoma cell lines and human normal osteoblast cells in vitro//Bioelectromagnetics. - 1999. - Vol.20. - N3. - P.177-182.10. De Mattei M., Caruso A., Traina G.C. e.a. Correlation between pulsed electromagnetic fields exposure time and cell proliferation increase in human osteosarcoma cell lines and human normal osteoblast cells in vitro // Bioelectromagnetics. - 1999 .-- Vol.20. - N3. - P.177-182.
11. Дамбаев Г.Ц., Агафонников В.Ф., Хлусов И.А., Загребин Л.В. Регулятор роста клеток in vitro и способ регуляции роста клеток in vitro: Патент РФ №2179578 от 20.02.2002 г (заявка №2000109887 от 17.04.2000).11. Dambaev G.Ts., Agafonnikov V.F., Khlusov I.A., Zagrebin L.V. In vitro cell growth regulator and a method for regulating in vitro cell growth: RF Patent No. 2179578 from 02.20.2002 g (Application No.2000109887 from 04.17.2000).
12. Агафонников В.Ф., Дамбаев Г.Ц., Романовский М.Н. Автономные электростимуляторы желудочно-кишечного тракта: Монография. - Томск, 1999. - С.52-58.12. Agafonnikov V.F., Dambaev G.Ts., Romanovsky M.N. Autonomic electrical stimulators of the gastrointestinal tract: Monograph. - Tomsk, 1999 .-- P.52-58.
13. Георгиевский В.И., Анненков Б.Н., Самохин В.Т. Минеральное питание животных. - М., 1979. - C.11-46.13. Georgievsky V.I., Annenkov B.N., Samokhin V.T. Mineral nutrition of animals. - M., 1979. - C.11-46.
14. Агафонников В.Ф., Дамбаев Г.Ц., Романовский М.Н. Автономные электростимуляторы желудочно-кишечного тракта: Монография. - Томск, 1999. - С.26-27.14. Agafonnikov V.F., Dambaev G.Ts., Romanovsky M.N. Autonomic electrical stimulators of the gastrointestinal tract: Monograph. - Tomsk, 1999 .-- P.26-27.
15. Агафонников В.Ф., Дамбаев Г.Ц., Романовский М.Н. Автономные электростимуляторы желудочно-кишечного тракта: Монография. - Томск, 1999. - c.144.15. Agafonnikov V.F., Dambaev G.Ts., Romanovsky M.N. Autonomic electrical stimulators of the gastrointestinal tract: Monograph. - Tomsk, 1999 .-- p. 144.
16. Тимакин Н.П., Иванова Е.В. Некоторые показатели нарушения обмена никеля, цинка, марганца, молибдена, меди и коррекция его при курсовом введении 5-фторурацила. // Вопросы радиобиологии и биологического действия цитостатических препаратов. - 1974. - Т.6. - С.38-43.16. Timakin N.P., Ivanova E.V. Some indicators of metabolic disorders of nickel, zinc, manganese, molybdenum, copper and its correction with the course of the introduction of 5-fluorouracil. // Questions of radiobiology and biological action of cytostatic drugs. - 1974. - T.6. - S. 38-43.
17. Тимакин Н.П., Шеметова И.И., Иванова Е.В. Влияние комбинированного воздействия 5-фторурацила с различными видами ионизирующего излучения на содержание и распределение микроэлементов между аденокарциномой НК и целым организмом. // Вопросы радиобиологии и биологического действия цитостатических препаратов. - 1974. - Т.6. - С.44-54.17. Timakin N.P., Shemetova I.I., Ivanova E.V. The effect of the combined effect of 5-fluorouracil with various types of ionizing radiation on the content and distribution of trace elements between adenocarcinoma NK and the whole organism. // Questions of radiobiology and biological action of cytostatic drugs. - 1974. - T.6. - S. 44-54.
18. Агафонников В.Ф., Дамбаев Г.Ц., Романовский М.Н. Автономные электростимуляторы желудочно-кишечного тракта: Монография. - Томск, 1999. - c.155-180.18. Agafonnikov V.F., Dambaev G.Ts., Romanovsky M.N. Autonomic electrical stimulators of the gastrointestinal tract: Monograph. - Tomsk, 1999 .-- p. 155-180.
19. Агафонников В.Ф., Дамбаев Г.Ц., Романовский М.Н. Автономные электростимуляторы желудочно-кишечного тракта: Монография. - Томск, 1999. - c.136-180.19. Agafonnikov V.F., Dambaev G.Ts., Romanovsky M.N. Autonomic electrical stimulators of the gastrointestinal tract: Monograph. - Tomsk, 1999 .-- p.136-180.
20. Франкфурт О.С.Клеточные механизмы химиотерапии опухолей. - М., 1976. - С.9.20. Frankfurt O.S. Cellular mechanisms of chemotherapy of tumors. - M., 1976. - P.9.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2005105499/14A RU2290219C2 (en) | 2005-02-28 | 2005-02-28 | In vitro method for treating cells |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2005105499/14A RU2290219C2 (en) | 2005-02-28 | 2005-02-28 | In vitro method for treating cells |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2005105499A RU2005105499A (en) | 2006-08-10 |
| RU2290219C2 true RU2290219C2 (en) | 2006-12-27 |
Family
ID=37059218
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2005105499/14A RU2290219C2 (en) | 2005-02-28 | 2005-02-28 | In vitro method for treating cells |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2290219C2 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU184518U1 (en) * | 2017-01-27 | 2018-10-30 | Виктор Филиппович Агафонников | Gastrointestinal electrostimulator with endogenous vanadium iontophoresis |
-
2005
- 2005-02-28 RU RU2005105499/14A patent/RU2290219C2/en not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| LYTE M. et al. Effects of in vitro electrical stimulation on enhancement and suppression of malignant lymphoma cell proliferation, J.Natl. Cancer. Inst., 1991, v.83, №2, р.116-119. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU184518U1 (en) * | 2017-01-27 | 2018-10-30 | Виктор Филиппович Агафонников | Gastrointestinal electrostimulator with endogenous vanadium iontophoresis |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2005105499A (en) | 2006-08-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US10544388B2 (en) | Methods for modulating osteochondral development using bioelectrical stimulation | |
| US4528265A (en) | Processes and products involving cell modification | |
| Pehlivanova et al. | Multiple effects of electroporation on the adhesive behaviour of breast cancer cells and fibroblasts | |
| Traitcheva et al. | Electroporation and alternating current cause membrane permeation of photodynamic cytotoxins yielding necrosis and apoptosis of cancer cells | |
| Lis et al. | Circadian timing in cancer treatment: the biological foundation for an integrative approach | |
| Kambouris et al. | From therapeutic electrotherapy to electroceuticals: formats, applications and prospects of electrostimulation | |
| EP1888162B1 (en) | System for modulating osteochondral development using pulsed electromagnetic field therapy | |
| Tenforde | Cellular and molecular pathways of extremely-low-frequency electromagnetic field interactions with living systems | |
| Pakhomov et al. | A comprehensive review of the research on biological effects of pulsed radiofrequency radiation in Russia and the former Soviet Union | |
| Peracchia et al. | Increase in osmiophilia of axonal membranes of crayfish as a result of electrical stimulation, asphyxia, or treatment with reducing agents | |
| RU2290219C2 (en) | In vitro method for treating cells | |
| Rahbek et al. | Interactions of low frequency, pulsed electromagnetic fields with living tissue: biochemical responses and clinical results | |
| RU2392668C1 (en) | Method of antiproliferative and cytotoxic effect induction in tumor cell lines and freshly isolated tumour cell cultures | |
| Tzoneva | Influence of electric field on cell behavior. Electrotreatment of cells for biomedical applications | |
| Markov et al. | Interactions between electromagnetic fields and immune system: possible mechanism for pain control | |
| Calabrese et al. | A case of discoid lupus erythematosus because of palbociclib. | |
| Grys et al. | Decreasing the thresholds for electroporation by sensitizing cells with local cationic anesthetics and substances that decrease the surface negative electric charge | |
| RU2179578C2 (en) | Regulator of cellular growth in vitro and method for cellular growth regulation in vitro | |
| Rageh et al. | Magnetic field improves the efficiency of low dose cis-platin by alteration the oxidative stress in ehrlich carcinoma-bearing mice | |
| RU2713167C1 (en) | Method of treating hepatitis and composition for implementation thereof | |
| Tekam et al. | Emerging role of electromagnetic field therapy in stroke | |
| Tekam et al. | Therapy in Stroke | |
| RU2405599C1 (en) | Method of stem cell production | |
| Huang et al. | Dissociated effect and Chemosensitive enhancement of tumor spheroids influenced by an electric field in a microdevice | |
| Huang et al. | In vitro cell culture study of the conditions of inhibition effect of tumors under alternating electric field |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| QZ46 | Withdrawal of statement about obligation of concluding the contract of assignment of patents acc. point 3 par 1366 civil code of russia | ||
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20140301 |
|
| NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20150310 |
|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20160229 |