RU2277711C1 - Способ оценки стабильного состояния мембран эритроцитов - Google Patents
Способ оценки стабильного состояния мембран эритроцитов Download PDFInfo
- Publication number
- RU2277711C1 RU2277711C1 RU2004131338/15A RU2004131338A RU2277711C1 RU 2277711 C1 RU2277711 C1 RU 2277711C1 RU 2004131338/15 A RU2004131338/15 A RU 2004131338/15A RU 2004131338 A RU2004131338 A RU 2004131338A RU 2277711 C1 RU2277711 C1 RU 2277711C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- stable state
- red blood
- blood cells
- membranes
- erythrocytic
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторным методам исследований. Сущность способа оценки стабильного состояния мембран эритроцитов заключается в выделении эритроцитов из крови, добавлении хлористого лантана до конечных концентраций 60-160 мкМ и инкубации эритроцитов после агрегации в течение 60 мин при 37°С. О нарушении стабильного состояния мембран эритроцитов судят по появлению слившихся клеток. Слияние клеток регистрируют визуально с помощью светового микроскопа. Способ обеспечивает высокую точность при простоте его выполнения. 3 ил.
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторным методам исследований.
Известны способы оценки стабильного состояния мембран эритроцитов, включающие определение осмотической хрупкости, кислотной устойчивости (Стусь Л.К. и др. Гематология и трансфузиология - 1988. Т.33. №4. С.41-48).
Известен способ оценки изменения состояния мембран эритроцитов, взятый за прототип (Шереметьев Ю.А., Суслов Ф.Ю., патент РФ №2082968, 1997), включающий выделение эритроцитов из крови, определение степени их агрегации, вызванной добавлением к эритроцитам 5 дискретных концентраций хлористого лантана (20, 40, 80, 160 и 320 мкМ). По степени агрегации эритроцитов в сравнении с контрольными судят о состоянии мембран. Однако способ трудоемок и требует специального оборудования (для регистрации агрегации эритроцитов).
Задача создания нового, несложного, высокочувствительного, не требующего специального оборудования способа определения стабильного состояния мембран эритроцитов является актуальной.
Задача достигается способом, который заключается в том что эритроциты выделяют из крови и добавляют к ним хлористый лантан до конечной концентрации 60-160 мкМ, после агрегации эритроциты инкубируют при 37°С в течение 60 мин. О состоянии мембран эритроцитов судят по появлению слившихся клеток с помощью светового микроскопа. Способ позволяет упростить определение состояния мембран эритроцитов, по сравнению с прототипом.
Способ осуществляется следующим образом. Эритроциты трижды отмывают от плазмы и белых клеток крови центрифугированием в 10-кратном объеме физиологического раствора. Отмытые эритроциты ресуспензируют в соотношении 1:200 в забуференном физиологическом растворе (10 мМ трис-HCl, 146 мМ NaCl, pH 7,4). Суспензию клеток помещают в пробирку и добавляют хлористый лантан до конечной концентрации 60-160 мкМ. После добавления лантана суспензию клеток интенсивно перемешивают и после агрегации эритроциты инкубируют при 37°С в течение 60 мин. Слияние клеток регистрируют с помощью светового микроскопа.
В концентрации лантана, равной 60-160 мкМ, наблюдается массовое слияние эритроцитов, мембраны которых находятся не в стабильном состоянии. Интактные эритроциты не сливаются под влиянием лантана (нет объединения содержимого клеток). При концентрациях лантана ниже 60 и выше 160 мкМ частота слияния снижена.
Пример 1. Оценка стабильного состояния мембран интактных эритроцитов (80 мкМ La3+). На фиг.1 видно отсутствие слияния клеток (объединения содержимого клеток), наблюдается лишь агрегация эритроцитов.
Пример 2. Оценка стабильного состояния мембран эритроцитов, имеющих пониженный уровень АТФ (80 мкМ La3+). Снижение уровня АТФ в эритроцитах получали инкубацией клеток в забуференном физиологическом растворе в течение 20 ч. Уровень внутриклеточного АТФ контролировали ферментативным методом, и он составлял 30% от уровня нормальных клеток. На фиг.2 видно массовое слияние эритроцитов.
Пример 3. Оценка стабильного состояния мембран эритроцитов консервированной крови, хранящейся при 4°С (80 мкМ La3+). На фиг.3а видно, что уже через 1 сут хранения крови начинается слияние эритроцитов. Через 4 сут хранения крови происходит массовое слияние клеток (3б).
Проведенные исследования показывают возможность применения способа оценки стабильного состояния мембран эритроцитов. Способ оценки стабильного состояния мембран эритроцитов прост в использовании и не требует специального оборудования.
Claims (1)
- Способ оценки стабильного состояния мембран эритроцитов, включающий выделение эритроцитов из крови, добавление хлористого лантана до конечных концентраций 60-160 мкМ, отличающийся тем, что после агрегации эритроциты инкубируют при 37°С в течение 60 мин и по появлению слившихся клеток судят о нарушении стабильного состояния мембран эритроцитов, при этом слияние клеток регистрируют визуально с помощью светового микроскопа.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2004131338/15A RU2277711C1 (ru) | 2004-10-26 | 2004-10-26 | Способ оценки стабильного состояния мембран эритроцитов |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2004131338/15A RU2277711C1 (ru) | 2004-10-26 | 2004-10-26 | Способ оценки стабильного состояния мембран эритроцитов |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2004131338A RU2004131338A (ru) | 2006-04-10 |
RU2277711C1 true RU2277711C1 (ru) | 2006-06-10 |
Family
ID=36458621
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2004131338/15A RU2277711C1 (ru) | 2004-10-26 | 2004-10-26 | Способ оценки стабильного состояния мембран эритроцитов |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2277711C1 (ru) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2547573C2 (ru) * | 2013-04-15 | 2015-04-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия" (ФГБОУ ВПО НГСХА) | Способ оценки присутствия фосфатидилсерина на поверхности мембран эритроцитов |
RU2665171C2 (ru) * | 2016-08-15 | 2018-08-28 | Федеральное Государственное Бюджетное Образовательное Учреждение Высшего Образования "Нижегородская Государственная Сельскохозяйственная Академия" (ФГБОУ ВО НГСХА) | Способ оценки присутствия фосфатидилсерина на поверхности мембран эритроцитов |
-
2004
- 2004-10-26 RU RU2004131338/15A patent/RU2277711C1/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Hessel E. et al. Cell surface aiterations during blood-storage characterized by artificial aggregation of washed red blood cells. Vox Sang. 1985, 49(2), p.86-91. * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2547573C2 (ru) * | 2013-04-15 | 2015-04-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия" (ФГБОУ ВПО НГСХА) | Способ оценки присутствия фосфатидилсерина на поверхности мембран эритроцитов |
RU2665171C2 (ru) * | 2016-08-15 | 2018-08-28 | Федеральное Государственное Бюджетное Образовательное Учреждение Высшего Образования "Нижегородская Государственная Сельскохозяйственная Академия" (ФГБОУ ВО НГСХА) | Способ оценки присутствия фосфатидилсерина на поверхности мембран эритроцитов |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
RU2004131338A (ru) | 2006-04-10 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Krogstad et al. | Antimalarials increase vesicle pH in Plasmodium falciparum. | |
Antoniades et al. | Altered plasma versus vascular biopterins in human atherosclerosis reveal relationships between endothelial nitric oxide synthase coupling, endothelial function, and inflammation | |
Ehrenberg et al. | Membrane potential can be determined in individual cells from the nernstian distribution of cationic dyes | |
CA1132890A (en) | Cytological assay procedure | |
Thompson et al. | Fluorescence microscopy of stimulated Zn (II) release from organotypic cultures of mammalian hippocampus using a carbonic anhydrase-based biosensor system | |
Zhong et al. | Genetically encoded calcium indicators: a new tool in renal hypertension research | |
Freyer | Decreased mitochondrial function in quiescent cells isolated from multicellular tumor spheroids | |
CN105929173A (zh) | 一种血清淀粉样蛋白a的检测试剂盒及检测方法 | |
CN101027557A (zh) | 用于细胞信号途径的细胞计数分析的全血制备 | |
EP0266194A2 (en) | Viable cell labelling | |
EP1869977A1 (en) | Suspension medium for red blood cells | |
Hoss et al. | Detection of ASC speck formation by flow cytometry and chemical cross-linking | |
Borle et al. | A simple method for incorporating aequorin into mammalian cells | |
Smith et al. | Platelet parameters from an automated hematology analyzer in dogs with inflammatory clinical diseases | |
WO2021036105A1 (zh) | 一种用于分析CD1c+树突状细胞亚群表型和功能的组合配方试剂盒及其应用 | |
Wall et al. | H (+)-K (+)-ATPase mediates net acid secretion in rat terminal inner medullary collecting duct | |
Sitrin et al. | Migrating human neutrophils exhibit dynamic spatiotemporal variation in membrane lipid organization | |
RU2277711C1 (ru) | Способ оценки стабильного состояния мембран эритроцитов | |
WO2006113095A2 (en) | Methods for diagnosing a bipolar disorder and attention-deficit/hyperactivity disorder | |
JPWO2005111228A1 (ja) | ミトコンドリアの膜電位を変化させる物質の評価方法 | |
Smith et al. | Cytometric analysis of BAL T cells labeled with a standardized antibody cocktail correlates with immunohistochemical staining | |
Comeau et al. | Determination of Interleukin-17A and Interferon-γ Production in γδ, CD4+, and CD8+ T Cells Isolated from Murine Lymphoid Organs, Perivascular Adipose Tissue, Kidney, and Lung | |
US20040171088A1 (en) | Method for counting leukocytes and leukocyte counter | |
Nikolakopoulos et al. | 7Li nuclear magnetic resonance study for the determination of Li+ properties in neuroblastoma SH‐SY5Y cells | |
Shahal‐Zimra et al. | Comparison of a modified flow cytometry osmotic fragility test with the classical method for the diagnosis of hereditary spherocytosis |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20061027 |