RU2270446C1 - Method for investigation of histological specimen surface relief - Google Patents
Method for investigation of histological specimen surface relief Download PDFInfo
- Publication number
- RU2270446C1 RU2270446C1 RU2004129535/15A RU2004129535A RU2270446C1 RU 2270446 C1 RU2270446 C1 RU 2270446C1 RU 2004129535/15 A RU2004129535/15 A RU 2004129535/15A RU 2004129535 A RU2004129535 A RU 2004129535A RU 2270446 C1 RU2270446 C1 RU 2270446C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- silver
- light
- investigation
- specimen
- impregnation
- Prior art date
Links
Images
Abstract
Description
Способ относится к биологии и медицине, а именно к методам гистологических исследований оболочек с естественной поверхностью, таких как брюшина, плевра, синовиальная мембрана с помощью светооптических микроскопов.The method relates to biology and medicine, and in particular to methods of histological examination of shells with a natural surface, such as peritoneum, pleura, synovial membrane using light-optical microscopes.
Известен способ изучения поверхности биологических объектов светооптическими бинарными стереомикроскопами с объективами 0,6-4 кратного увеличения. Они дают небольшие увеличения на макромикроскопическом дотканевом уровне исследований.There is a method of studying the surface of biological objects by light-optical binary stereomicroscopes with lenses of 0.6-4 times magnification. They give small increases at the macromicroscopic pre-tissue level of research.
Традиционная микроскопия гистологических препаратов на тканевом уровне исследований осуществляется микроскопами плоского поля (современная классификация традиционных биолого-медицинских микроскопов - Егоров О.В. С микроскопом на "ты". СПб., 2000, с.42) при освещении на просвет. При этом изучаются контуры и внутреннее строение селективно окрашенных деталей в толще просвечиваемого препарата. Однако, микроскопия на просвет не дает картину поверхности препарата. Имеет место очевидное методологическое противоречие в самой идеологии микроскопии поверхности различных структур на просвет. То есть невозможно изучать на просвет форму поверхности препарата, представляющую собой некую границу раздела сред.Traditional microscopy of histological preparations at the tissue level of research is carried out by flat-field microscopes (the modern classification of traditional biological and medical microscopes is O. Egorov with a “you” microscope. St. Petersburg, 2000, p. 42) when illuminated. At the same time, the contours and internal structure of selectively painted parts in the thickness of the translucent preparation are studied. However, luminal microscopy does not give a picture of the surface of the drug. There is an obvious methodological contradiction in the ideology of microscopy of the surface of various structures on the lumen. That is, it is impossible to study the shape of the surface of the drug, which is a certain interface between media, in the light.
Для изучения рельефа поверхности объекта необходимо визуализировать структурные формы этой поверхности в объемном изображении. Для получения объемного изображения рельефа поверхности гистологических препаратов на тканевом уровне исследований с помощью светооптических микроскопов необходимо создание двух условий:To study the surface relief of an object, it is necessary to visualize the structural forms of this surface in a three-dimensional image. To obtain a three-dimensional image of the surface relief of histological preparations at the tissue level of studies using light-optical microscopes, two conditions must be created:
1. Освещение поверхности гистологического препарата со стороны наблюдателя - объектива.1. Illumination of the surface of the histological preparation from the side of the observer - the lens.
2. Придание поверхности гистологического препарата светоотражательной способности.2. Giving the surface of the histological preparation reflective ability.
Задачей изобретения является повышение качества исследования рельефа поверхности естественных оболочек за счет визуализации объемного изображения их поверхности на тканевом уровне.The objective of the invention is to improve the quality of the study of the surface relief of natural shells by visualizing a three-dimensional image of their surface at the tissue level.
Поставленная задача достигается способом исследования рельефа поверхности гистологических препаратов микроскопами плоского поля, в котором в отличие от прототипа поверхности препарата придают светоотражательную способность путем импрегнации серебра, а микроскопию проводят в отраженном свете при одностороннем падающем тенеобразующем освещении. При этом импрегнацию серебра осуществляют выдерживанием препарата в 10% растворе азотнокислого серебра в течение 10 минут и последующим восстановлением его в металлическое состояние 1% раствором аскорбиновой кислоты в течение 1 минуты.The task is achieved by a method for studying the surface topography of histological specimens with flat field microscopes, in which, in contrast to the prototype, the surface of the specimen is imparted reflectivity by impregnating silver, and the microscopy is performed in reflected light under unilateral incident shading lighting. In this case, the impregnation of silver is carried out by keeping the preparation in a 10% silver nitrate solution for 10 minutes and then restoring it to a metallic state with a 1% ascorbic acid solution for 1 minute.
Целесообразно устанавливать угол падения светового луча на поверхность препарата 75-85° относительно оси объектива, и в процессе исследования менять азимут светового луча поворотом предметного столика микроскопа на ±180° относительно южного нулевого азимута.It is advisable to set the angle of incidence of the light beam on the surface of the drug 75-85 ° relative to the axis of the lens, and during the study, change the azimuth of the light beam by rotating the microscope stage by ± 180 ° relative to the south zero azimuth.
Для микроскопии гистологических препаратов в отраженном свете исследуемая поверхность препарата должна обладать светоотражательной способностью. Хорошей светоотражательной способностью обладают металлы, а наилучшей среди них - серебро, коэффициент светоотражения которого достигает 95% (Оленин С.С., Фадеев Г.Н. Неорганическая химия. М., 1979).For microscopy of histological specimens in reflected light, the studied surface of the specimen should have a reflective ability. Metals possess good light reflectivity, and silver is the best among them, with a light reflectance of 95% (Olenin S.S., Fadeev G.N. Inorganic chemistry. M., 1979).
Общеизвестны способы напыления металлов на поверхность биологических тканей. Эти способы неоправданно высокозатратны и трудоемки для исследования больших площадей на световом уровне микроскопии.Well-known methods of deposition of metals on the surface of biological tissues. These methods are unreasonably costly and time consuming to study large areas at the light level of microscopy.
Известна "реакции серебряного зеркала" - добавление к аммиачному раствору азотнокислого серебра нескольких капель формальдегида или раствора глюкозы приводит к восстановлению ионов серебра в растворе в металлическое серебро (Глинка Н.Л. Общая химия. Л., 1977. - С.579). В морфологии общеприняты способы импрегнации - внедрения серебра в ткани в виде растворов аммиачных солей с последующим восстановлением его на отдельных структурах растворами формалина или глюкозы (Ромейс Б. Микроскопическая техника. М., 1954)The known "reaction of the silver mirror" is the addition of a few drops of formaldehyde or a glucose solution to the ammonia silver nitrate solution, which leads to the reduction of silver ions in the solution into metallic silver (Glinka NL General chemistry. L., 1977. - P.579). In morphology, generally accepted methods of impregnation are the incorporation of silver into tissues in the form of solutions of ammonium salts, followed by its reduction on separate structures with formalin or glucose solutions (Romeis B. Microscopic technique. M., 1954)
Однако все известные способы импрегнации гистологических препаратов серебром, разработанные для светооптической микроскопии на просвет, использующие высокую светопоглощающую способность восстановленного серебра и промежуточных продуктов его восстановления, непригодны для микроскопии в отраженном свете рельефа поверхности препарата.However, all known methods for the impregnation of histological preparations with silver, developed for light transmission optical microscopy, using the high light-absorbing ability of reduced silver and its intermediate recovery products, are unsuitable for microscopy in reflected light of the surface relief of the preparation.
Во-первых, восстановление серебра проводится только на отдельных структурах, а фоновый остаток его из матрикса отмывается, то есть промежуточное вещество, участвующее в формировании поверхности препарата не визуализируется.Firstly, silver recovery is carried out only on separate structures, and its background residue is washed from the matrix, that is, the intermediate substance involved in the formation of the surface of the preparation is not visualized.
Во-вторых, восстановление серебра не доводится до металлического состояния, останавливаясь на промежуточных этапах реакции его восстановления до желто-коричневого цвета препарата - цвета не отражающих свет окислов серебра.Secondly, the reduction of silver is not brought to a metallic state, stopping at the intermediate stages of the reaction of its reduction to a yellow-brown color of the preparation - the color of silver oxides not reflecting light.
В третьих, эти способы импрегнации включают межэтапное отмывание серебра с поверхности препарата (проводка препаратов через несколько порций дистиллированной воды как после этапа сенсибилизации азотнокислым серебром, так и после этапа экспозиции в аммиачном растворе серебра). Тем самым исключается осаждение серебра на поверхности препарата и снижается импрегнация поверхностно лежащих его структур. В противном случае препарат становится непрозрачным и непригодным для микроскопии на просвет из-за осаждения серебра на поверхности препарата с обеих его сторон и переимпрегнации поверхностных его структур за время диффундирования растворов в глубину препарата. Особенно сказанное относится к импрегнации сравнительно большой толщины пленочных препаратов биологических оболочек, когда межэтапное отмывание серебра проводится более длительно и проявление его производится в восстанавливающих растворах (формалина) очень низкой концентрации, обладающих также отмывающим эффектом.Thirdly, these methods of impregnation include inter-stage washing of silver from the surface of the preparation (passing the preparations through several portions of distilled water both after the sensitization stage with silver nitrate and after the exposure stage in silver ammonia solution). This eliminates the deposition of silver on the surface of the drug and decreases the impregnation of its surface structures. Otherwise, the preparation becomes opaque and unsuitable for microscopy in the light due to the deposition of silver on the surface of the preparation from both its sides and the re-impregnation of its surface structures during the diffusion of solutions into the depth of the preparation. This is especially true for the impregnation of the relatively large thickness of the film preparations of biological shells, when the inter-stage washing of silver is carried out for a longer time and its manifestation is carried out in reducing solutions (formalin) of very low concentration, which also have a washing effect.
Таким образом, известные способы импрегнации серебра обеспечивают селективное выявление отдельных элементов тканей (сосуды, нервы, коллагеновые волокна), которые обычно не участвуют в формировании люминальной поверхности оболочек. При этом восстановление серебра не доводится до придания им светоотражательной способности, не импрегнируются поверхностные структуры, что, в совокупности, не позволяет получить достоверную картину рельефа поверхности препаратов в отраженном свете.Thus, the known methods for the impregnation of silver provide for the selective identification of individual tissue elements (vessels, nerves, collagen fibers), which usually do not participate in the formation of the luminal surface of the membranes. At the same time, silver recovery is not brought to give them retro-reflective ability, surface structures are not impregnated, which, in aggregate, does not allow to obtain a reliable picture of the surface relief of the preparations in reflected light.
Предложенный способ обеспечивает серебрение поверхности препарата на основе тотальной (неселективной) импрегнации всех структур, участвующих в формировании этой поверхности. Для этого импрегнация серебра в препарат проводится в виде 10% раствора азотнокислой его соли, не обладающей избирательным осаждением на отдельных структурах. Обычно применяемые аммиачные растворы азотнокислого серебра осаждаются избирательно на аргентофильных структурах, кроме того, они неустойчивы и легко диссоциируют на стойкие окислы, образующие в последующем не отражающие свет темно-коричневые артефакты на поверхности препарата. Восстановление серебра проводится 1% водным раствором аскорбиновой кислоты (исключая межэтапную промывку). Обычно применяемые формалин и глюкоза не восстанавливают серебро из азотнокислой его соли в металлическое состояние. Известно, что сильными восстанавливающими свойствами обладает аскорбиновая кислота (Э.Пирс. Гистохимия. М., 1962, с.210). Изготовленные предложенным способом препараты приобретают матово-зеркальный вид с серо-голубым цветовым оттенком, свидетельствующим о качественном и полноценном восстановлении импрегнированного серебра, и обладают хорошей светоотражательной способностью.The proposed method provides silvering of the surface of the drug based on the total (non-selective) impregnation of all structures involved in the formation of this surface. To do this, the impregnation of silver in the preparation is carried out in the form of a 10% solution of its nitrate salt, which does not have selective deposition on individual structures. The commonly used ammonia solutions of silver nitrate are selectively deposited on argentophilic structures, in addition, they are unstable and easily dissociate into stable oxides, which subsequently form dark brown artifacts that do not reflect light on the surface of the preparation. Silver recovery is carried out with a 1% aqueous solution of ascorbic acid (excluding inter-stage washing). Commonly used formalin and glucose do not restore silver from its nitrate salt to a metallic state. It is known that ascorbic acid possesses strong reducing properties (E. Piers. Histochemistry. M., 1962, p. 210). The preparations made by the proposed method acquire a matte-mirror appearance with a gray-blue color shade, indicating a high-quality and full-fledged restoration of impregnated silver, and have good light reflectivity.
Рельеф поверхности такого препарата исследуется с помощью микроскопов плоского поля в отраженном свете при одностороннем падающем освещении. При таком освещении поверхности препарата со стороны наблюдателя (объектива) рельеф поверхности визуализируется в объемном изображении. Микроскопы плоского поля способны формировать объемное изображение в пределах глубины резкого изображения объективов порядка 100-200 мкм (Егорова О.В. С микроскопом на "ты". СПб., 2000, с.40). Источник света устанавливается сбоку и выше уровня столика микроскопа. Оптимальным тенеобразующим является угол падения светового луча на препарат в пределах 75-85° относительно оси объектива. Величина угла падения луча зависит от нескольких факторов: от длины фокусного расстояния и диаметра применяемого объектива, от величины деталей и от характера пересеченности рельефа поверхности препарата, от необходимости освещения дна глубоких и узких ям, мощности источника, светоотражательной способности поверхности препарата и др. Такое одностороннее падающее освещение создает градиент освещенности отдельных элементов рельефа поверхности препарата в зависимости от угла падения на них световых лучей, то есть склоны возвышений и углублений, обращенные к источнику света, освещены больше чем противоположные склоны. При больших углах падения света противоположные к источнику света склоны отдельных возвышений и углублений с углом наклона, большим угла падения света, становятся не освещенными прямыми лучами света. Такое повышение светотеневого эффекта освещения (тенеобразование) как контраста освещенности элементов рельефа поверхности позволяет выявить контуры структур с пологими склонами, отдельные волокна и клетки. Изменение азимута освещения поворотом столика микроскопа позволяет уточнить особенности строения деталей поверхности, имеющих сложные асимметричные формы. К примеру, освещение борозд и валиков перпендикулярно или вдоль к их направлению выявляет различные детали их строения. Изменение азимута освещения позволяет избежать последствий "азимутального эффекта" (Скворцов Г.Е. с соавт. Микроскопы. Л. 1969, с.72). Азимутальный угол освещения измеряется с южного нулевого азимута как положительный по направлению движения часовой стрелки и как отрицательный против движения часовой стрелки.The surface relief of such a preparation is examined using flat field microscopes in reflected light under one-sided incident illumination. With such illumination of the surface of the drug from the side of the observer (lens), the surface topography is visualized in a three-dimensional image. Microscopes of a flat field are capable of forming a three-dimensional image within the depth of a sharp image of lenses of the order of 100-200 μm (Egorova OV With a microscope on “you”. St. Petersburg, 2000, p.40). The light source is installed on the side and above the microscope stage. The optimal shade-forming is the angle of incidence of the light beam on the drug within 75-85 ° relative to the axis of the lens. The magnitude of the angle of incidence of the beam depends on several factors: the length of the focal length and diameter of the lens used, the size of the details and the nature of the intersection of the relief of the surface of the preparation, the need to illuminate the bottom of deep and narrow holes, the power of the source, the light reflectivity of the surface of the preparation, etc. incident light creates a gradient of illumination of individual relief elements of the surface of the drug depending on the angle of incidence of light rays on them, that is, the slopes of elevations and lubleny facing the light source, covered more than the opposite slopes. At large angles of incidence of light, the slopes of individual elevations and depressions opposite to the light source with an inclination angle greater than the angle of incidence of light become unlit by direct rays of light. Such an increase in the black-and-white illumination effect (shadowing) as the contrast in the illumination of surface relief elements makes it possible to reveal the contours of structures with gentle slopes, individual fibers and cells. Changing the azimuth of lighting by turning the stage of the microscope allows you to clarify the structural features of surface parts having complex asymmetric shapes. For example, illumination of furrows and ridges perpendicularly or along their direction reveals various details of their structure. Changing the azimuth of lighting avoids the consequences of the "azimuthal effect" (Skvortsov G.E. et al. Microscopes. L. 1969, p. 72). The azimuthal angle of illumination is measured from south zero azimuth as positive in the clockwise direction and as negative counterclockwise.
Способ осуществляется следующим образом.The method is as follows.
Перед микроскопией поверхность препарата подвергают серебрению для придания ей светоотражательной способности.Before microscopy, the surface of the preparation is silver-plated to give it retro-reflective ability.
Для этого фиксированные в формалине пленочные препараты оболочек с естественной поверхностью (брюшина, плевра, слизистые, синовиальная мембрана и др.), расправленные кусочки диафрагмы, кишечной стенки, капсулы суставов, участок суставного хряща и др. промываются в водопроводной воде в течение суток и споласкиваются в дистиллированной воде. Толщина препарата для микроскопии в отраженном свете не имеет принципиального значения.To do this, formalin-fixed film preparations of membranes with a natural surface (peritoneum, pleura, mucous membranes, synovial membrane, etc.), straightened pieces of the diaphragm, intestinal wall, joint capsules, an area of articular cartilage, etc. are washed in tap water for 24 hours and rinsed in distilled water. The thickness of the preparation for microscopy in reflected light does not matter.
Затем осуществляют экспозицию кусочков в 10% растворе азотнокислого серебра в течение 10 минут, восстановление серебра 1% раствором аскорбиновой кислоты в течение 1 минуты.Then the pieces are exposed in a 10% silver nitrate solution for 10 minutes, silver is restored with a 1% ascorbic acid solution for 1 minute.
Далее как обычно: остановка проявления в аммиачной воде, промывание в дистиллированной воде, заключение в бальзам.Further, as usual: stopping the manifestation in ammonia water, washing in distilled water, imprisonment in a balm.
Подготовленные таким образом препараты исследуют посредством микроскопа плоского поля с объективами до 50-кратного увеличения (общее увеличение до 350-500 раз), позволяющего визуализировать объемную картину рельефа поверхности на тканевом уровне исследований. Микроскопию препарата проводят в отраженном свете при одностороннем падающем тенеобразующем освещении. Источник света устанавливается сбоку и выше уровня столика микроскопа. Оптимальным тенеобразующим является угол падения светового луча на препарат в пределах 75-85°. Для выявления особенностей строения отдельных структур рельефа изменяется угол падения и азимут светового луча.Preparations prepared in this way are examined by means of a flat-field microscope with lenses up to a 50-fold increase (total increase up to 350-500 times), which allows visualizing a three-dimensional picture of the surface relief at the tissue level of research. Microscopy of the drug is carried out in reflected light with unilateral incident shade-forming illumination. The light source is installed on the side and above the microscope stage. The optimal shade-forming is the angle of incidence of the light beam on the drug in the range of 75-85 °. To reveal the structural features of individual relief structures, the angle of incidence and the azimuth of the light beam are changed.
На фотографиях показаны примеры полученных с помощью предложенного способа изображений, где четко визуализирован рисунок и рельеф поверхности препарата.The photographs show examples of images obtained using the proposed method, where the pattern and surface topography of the preparation are clearly visualized.
Фиг.1 - поверхность плевры человека с рельефом складок и контурами клеток мезотелия. Объектив 50, окуляр 6,3; освещение справа - угол падения светового луча 80°, азимутальный угол составляет - 90°.Figure 1 - the surface of the pleura of a person with a relief of folds and contours of mesothelial cells. Lens 50, eyepiece 6.3; illumination on the right - the angle of incidence of the light beam is 80 °, the azimuthal angle is - 90 °.
Фиг.2 - поверхность базальной мембраны брюшины человека с подлежащими жировыми дольками, формирующими округлые возвышения с крутыми склонами 1. Объектив 12, окуляр 12,5; освещение справа - угол падения светового луча 80°, азимутальный угол освещения - 90°.Figure 2 - the surface of the basement membrane of the peritoneum of a person with the underlying fat segments forming rounded elevations with steep slopes 1. Lens 12, eyepiece 12.5; illumination on the right - angle of incidence of the light beam 80 °, azimuthal angle of illumination - 90 °.
Фиг.3 - поверхность базальной мембраны диафрагмальной брюшины человека с параллельными и относительно регулярными (длиной волны 15-20 мкм) узкими складками Объектив 25, окуляр 12,5; освещение слева - угол падения светового луча 75°, азимутальный угол освещения +70°.Figure 3 - the surface of the basement membrane of the diaphragmatic peritoneum of a person with parallel and relatively regular (wavelength 15-20 μm) narrow folds Objective 25, eyepiece 12.5; illumination on the left - angle of incidence of the light beam 75 °, azimuthal angle of illumination + 70 °.
Фиг.4 - поверхность синовиальной мембраны наднадколенниковой синовиальной сумки человека (образована наряду с синовиоцитами и межклеточным веществом). Через отверстия визуализируется наличие дополнительной полости. Длина тени от краев больших отверстий на дно полости детерменирована глубиной полости и углом падения светового потока. Объектив 6,3; окуляр 12,5; освещение слева - угол падения светового луча 75°, азимутальный угол освещения +120°.Figure 4 - the surface of the synovial membrane of the suprapatellar synovial bag of a person (formed along with synoviocytes and intercellular substance). Through the holes, the presence of an additional cavity is visualized. The length of the shadow from the edges of large holes at the bottom of the cavity is determined by the depth of the cavity and the angle of incidence of the light flux. 6.3 lens; eyepiece 12.5; illumination on the left - angle of incidence of the light beam 75 °, azimuthal angle of illumination + 120 °.
Полученные изображения обладают высоким качеством визуализации объемного рельефа поверхности вплоть до детализации клеточных структур.The resulting images have a high quality visualization of the volumetric surface topography up to the granularity of cellular structures.
Таким образом, предложенный способ позволяет повысить качество исследования рельефа поверхности гистологических препаратов, наблюдая их в объемном изображении на тканевом уровне, что обеспечивает получение дополнительной достоверной информации о состоянии биологического объекта.Thus, the proposed method allows to improve the quality of the study of the surface topography of histological preparations by observing them in a volumetric image at the tissue level, which provides additional reliable information about the state of the biological object.
Claims (3)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2004129535/15A RU2270446C1 (en) | 2004-10-07 | 2004-10-07 | Method for investigation of histological specimen surface relief |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2004129535/15A RU2270446C1 (en) | 2004-10-07 | 2004-10-07 | Method for investigation of histological specimen surface relief |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2270446C1 true RU2270446C1 (en) | 2006-02-20 |
Family
ID=36051102
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2004129535/15A RU2270446C1 (en) | 2004-10-07 | 2004-10-07 | Method for investigation of histological specimen surface relief |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2270446C1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2455690C2 (en) * | 2006-08-18 | 2012-07-10 | Де Ля Рю Интернэшнл Лимитед | Method and apparatus for identifying raised material |
-
2004
- 2004-10-07 RU RU2004129535/15A patent/RU2270446C1/en not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| ГИНАЛИ Н. В. и др. Морфометрическое исследование рельефа поверхности стенки альвеолы. Российский стоматологический журнал. №1, 2000, с. 6-7. * |
| МИНИГАЗИМОВ Р. С. Микроциркуляторное русло, рельеф и строение синовиальной мембраны тазобедренного сустава. Дисс. к.м.н. Ярославль, 1988, с. 37-42. ЕГОРОВА О. В. С микроскопом на "ты". - СПб., 2000, с. 40-42. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2455690C2 (en) * | 2006-08-18 | 2012-07-10 | Де Ля Рю Интернэшнл Лимитед | Method and apparatus for identifying raised material |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Pawlina et al. | Histology: a text and atlas: with correlated cell and molecular biology | |
| CN102656442B (en) | System and method for dense-stochastic-sampling imaging | |
| Burch et al. | Phase-contrast microscopy | |
| Hugonnet et al. | Multiscale label-free volumetric holographic histopathology of thick-tissue slides with subcellular resolution | |
| CN104458683B (en) | Method, system and the prismatic light chip device of deep layer cells super-resolution imaging | |
| WO2018039361A1 (en) | Systems and methods for instant total internal reflection fluorescence/structured illumination microscopy | |
| CN108665411A (en) | A kind of method and system of image reconstruction | |
| Crawford et al. | The action of formaldehyde on living cells as studied by phase-contrast microscopy | |
| US10132609B2 (en) | Gradient light interference microscopy for 3D imaging of unlabeled specimens | |
| Elliott et al. | A model for the coarse structure of paramyosin filaments | |
| Prakash et al. | Measurements of motoneuron somal volumes using laser confocal microscopy: comparisons with shape-based stereological estimations | |
| Ströhl et al. | Total internal reflection fluorescence anisotropy imaging microscopy: setup, calibration, and data processing for protein polymerization measurements in living cells | |
| RU2270446C1 (en) | Method for investigation of histological specimen surface relief | |
| Lee et al. | Three-dimensional label-free imaging and quantification of migrating cells during wound healing | |
| RU2413943C1 (en) | Method of studying relief-forming structures of biological membranes | |
| Brewster | XVI. On the anatomical and optical structure of the crystalline lenses of animals, particularly that of the cod | |
| CN115655834A (en) | Transparent reagent for transparentizing artificial micro-organs and application thereof | |
| Takeda et al. | Subunit arrangement in the extended sheath of pyocin R | |
| Middleton | Structural colour in fruits | |
| MacDonald et al. | Three-dimensional confocal microscopy of the mammalian inner ear | |
| US6636299B1 (en) | Intraocular lens inspection method | |
| Seijriz | The Spierer lens and what it reveals in cellulose and protoplasm | |
| CN205691849U (en) | A kind of based on light modulation techniques fall radioglold phase microscope | |
| Castano et al. | Central and peripheral nervous structures as seen at the confocal scanning laser microscope | |
| CN113670870A (en) | Large-view-field light sheet microscopic imaging system and method based on multi-slit interference illumination |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20061008 |