RU2244554C1 - Agent for treatment of viral hepatitis c - Google Patents
Agent for treatment of viral hepatitis c Download PDFInfo
- Publication number
- RU2244554C1 RU2244554C1 RU2003126207/15A RU2003126207A RU2244554C1 RU 2244554 C1 RU2244554 C1 RU 2244554C1 RU 2003126207/15 A RU2003126207/15 A RU 2003126207/15A RU 2003126207 A RU2003126207 A RU 2003126207A RU 2244554 C1 RU2244554 C1 RU 2244554C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- betulin
- hcv
- treatment
- viral hepatitis
- hepatitis
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
Description
Область техникиTechnical field
Настоящее изобретение относится к области медицины, а более конкретно относится к изысканию новых, эффективных средств лечения гепатита С.The present invention relates to medicine, and more specifically relates to the search for new, effective treatments for hepatitis C.
Уровень техникиState of the art
Вирусные гепатиты относятся к категории наиболее опасных и распространенных инфекционных заболеваний. Ежегодно в мире от патологий, связанных с этой болезнью, умирают около 2 миллионов человек.Viral hepatitis is one of the most dangerous and common infectious diseases. About 2 million people die every year from pathologies associated with this disease in the world.
Причиной возникновения вирусных гепатитов являются, по крайней мере, 5 различных вирусов - энтеральные вирусы А и Е и парентеральные (В, С, Д).At least 5 different viruses are the cause of viral hepatitis - enteric viruses A and E and parenteral viruses (B, C, D).
Вирус гепатита С является самым "молодым", он был открыт лишь в 1989 году. С его открытием началось интенсивное изучение этой разновидности гепатита, являющейся основной причиной развития хронических диффузных заболеваний печени и гепатоклеточной карциномы.Hepatitis C virus is the youngest, it was discovered only in 1989. With its discovery, an intensive study of this type of hepatitis began, which is the main cause of the development of chronic diffuse diseases of the liver and hepatocytic carcinoma.
Отличительной особенностью вируса гепатита С является способность к длительному персистированию в организме, что обуславливает высокий уровень хронизации инфекции (50-80% случаев). Устойчивость вируса обусловлена его способностью реплицироваться с высоким уровнем "мутации", в результате чего возникает несколько иммунологически различающихся вариантов, благодаря которым вирус избегает иммунного надзора. Образующиеся вируснейтрализирующие антитела являются высокоспецифичными и не способны нейтрализовать вновь появляющиеся варианты вируса.A distinctive feature of the hepatitis C virus is the ability to prolong persistence in the body, which leads to a high level of chronic infection (50-80% of cases). The stability of the virus is due to its ability to replicate with a high level of "mutation", as a result of which several immunologically different variants arise, due to which the virus avoids immune surveillance. The resulting neutralizing antibodies are highly specific and are not able to neutralize newly emerging variants of the virus.
Крайне высокий уровень заболеваемости вирусным гепатитом и, в частности, гепатитом С обуславливает актуальную задачу изыскания и создания эффективных средств терапии этой инфекции.The extremely high incidence of viral hepatitis and, in particular, hepatitis C causes the urgent task of finding and creating effective therapies for this infection.
В настоящее время в практической медицине официально известно два препарата, используемых для лечения вирусного гепатита С (интерферон и рибавирин или виразол), однако это не делает задачу изыскания новых средств лечения этого заболевания неактуальной, в частности, из-за побочных эффектов, которые сопровождают применение известных препаратов, таких как развитие анемии, нейтропении, лейкопении, диспептические явления.Currently, two drugs officially used in the treatment of viral hepatitis C (interferon and ribavirin or virazole) are officially known in practical medicine, but this does not make the task of finding new treatments for this disease irrelevant, in particular, due to the side effects that accompany the use of known drugs, such as the development of anemia, neutropenia, leukopenia, dyspeptic symptoms.
Сущность изобретенияSUMMARY OF THE INVENTION
Задачей настоящего изобретения является изыскание нового, высокоэффективного средства для лечения гепатита С.The objective of the present invention is to find a new, highly effective agent for the treatment of hepatitis C.
Другой задачей настоящего изобретения является изыскание высокоэффективного средства для лечения гепатита С природного происхождения, поскольку при этом отпадает целый ряд проблем, сопутствующих применению химиопрепаратов.Another objective of the present invention is to find a highly effective agent for the treatment of hepatitis C of natural origin, since this eliminates a number of problems associated with the use of chemotherapy.
Указанные задачи решены настоящим изобретением благодаря установлению авторами высокой противовирусной активности по отношению к вирусу гепатита С у экстракта березовой коры (бересты) с содержанием бетулина в экстракте свыше 70%.These problems are solved by the present invention due to the establishment by the authors of high antiviral activity against hepatitis C virus in an extract of birch bark (birch bark) with a betulin content of more than 70% in the extract.
Бетулин является одним из первых природных веществ, которое впервые было выделено из растительного сырья еще в 1778 году. В 1876 году У.Хаусманн опубликовал результаты элементарных анализов бетулина (Hausmann U., Annalen der chemie, 182, р.365).Betulin is one of the first natural substances that was first isolated from plant materials in 1778. In 1876, W. Hausmann published the results of elementary analyzes of betulin (Hausmann U., Annalen der chemie, 182, p. 365).
Основным источником природного бетулина является береза. Белая часть березовой коры у отдельных видов березы (Betula verrucosa, Betula papyfera) содержит до 30% и более бетулина (Hayek, E.W. et al.(1989) A Bicentenmal of Betulin, Phytochemistry, 28(9) р.2229-2242).The main source of natural betulin is birch. The white part of the birch bark in individual species of birch (Betula verrucosa, Betula papyfera) contains up to 30% or more betulin (Hayek, E.W. et al. (1989) A Bicentenmal of Betulin, Phytochemistry, 28 (9) p. 229-2242).
Бетулин является пентациклическим тритерпеном с углеродным скелетом ряда лупана, который также называют бетулинолом, трохотоном, березовой камфарой и (корили-) резинолом. Характерной особенностью ряда лупана является кольцо с пятью атомами углерода в составе пентациклической системы, которое в положении С-19 имеет α-изопентениловую группу. Бетулин отличается высокой термостабильностью, его температура плавления находится между 250 и 261°С, причем после сублимации рекристаллизованного продукта достигаются еще более высокие значения. Его молекулярный вес составляет 442,7, он растворим в пиридине и тетрагидрофуране, но мало растворим в дихлорметане, хлороформе и холодных органических растворителях, причем с повышением температуры его растворимость значительно возрастает. В воде и холодном петролейном эфире бетулин практически не растворим. Кроме того, кинетические исследования показали очень низкую реакционную способность гидроксильных групп бетулина.Betulin is a pentacyclic triterpen with a carbon skeleton of a series of lupan, which is also called betulinol, trochotone, birch camphor and (cili-) rubber. A characteristic feature of the lupane series is a ring with five carbon atoms in the pentacyclic system, which at position C-19 has an α-isopentenyl group. Betulin is characterized by high thermal stability, its melting point is between 250 and 261 ° C, and even higher values are achieved after sublimation of the recrystallized product. Its molecular weight is 442.7, it is soluble in pyridine and tetrahydrofuran, but slightly soluble in dichloromethane, chloroform and cold organic solvents, and its solubility increases significantly with increasing temperature. Betulin is practically insoluble in water and cold petroleum ether. In addition, kinetic studies have shown a very low reactivity of betulin hydroxyl groups.
Еще в 1899 году Дж.Уилер показал антисептические свойства бетулина, и поэтому он использовался для стерилизации перевязочных бинтов и пластырей (Wheeler J., (1899), Pharm. J., Die Darstellung des Betulin durch Sublimation, 494, Ref. Chem. Centr. 1900 I, стр. 353). В натуропатии и народной медицине получали и получают до сих пор отвары березовой коры, которые применяют для лечения малярии, водянки, подагры и при кожных заболеваниях, а также в виде настойки для компрессов при лечении абсцессов.As early as 1899, J. Wheeler showed the antiseptic properties of betulin and was therefore used to sterilize dressings and plasters (Wheeler J., (1899), Pharm. J., Die Darstellung des Betulin durch Sublimation, 494, Ref. Chem. Centr 1900 I, p. 353). In naturopathy and traditional medicine, birch bark decoctions have been received and are still being used, which are used to treat malaria, dropsy, gout and skin diseases, as well as tinctures for compresses in the treatment of abscesses.
Большое число исследований посвящено гепатопротекторной активности бетулина. Было обнаружено, что бетулин снижает активность аланинаминотрансферазы, щелочной фосфатазы, содержание малеинового диальдегида, предупреждает воспалительный процесс в печени (Ю.К.Василенко и др. "Фармакологические свойства тритерпеноидов коры березы" Экспериментальная и клиническая фармакология, 1993, т.54 №4 стр. 53-55).A large number of studies are devoted to the hepatoprotective activity of betulin. It was found that betulin reduces the activity of alanine aminotransferase, alkaline phosphatase, the content of maleic dialdehyde, prevents the inflammatory process in the liver (Yu.K. Vasilenko et al. "Pharmacological properties of birch bark triterpenoids" Experimental and Clinical Pharmacology, 1993, v. 54 No. 4 pp. . 53-55).
Однако не имеется достоверных сведений о противовирусной активности бетулина, в отличие от его различных синтетических производных. Так, сообщалось, что 3-замещенные глютариловые производные бетулина in vitro обладают цитотоксичностью в отношении лимфоцитов, трансформированных HIV ("Synthesis and anti - HIV activity of betulin derivaties", Bioorg Med Chem Lett. 1998 May 19, 8(10) p.1267-1272).However, there is no reliable information about the antiviral activity of betulin, in contrast to its various synthetic derivatives. Thus, in vitro 3-substituted glutaryl derivatives of betulin have been shown to have cytotoxicity against HIV transformed lymphocytes (Synthesis and anti-HIV activity of betulin derivaties, Bioorg Med Chem Lett. 1998 May 19, 8 (10) p. 1267 -1272).
Большое число публикации посвящено получению целого ряда производных бетулиновой кислоты как потенциальных средств борьбы со СПИДом (см. например, "Synthesis and anti - HIV activity of betulinic acid and dihidrobetulinic acid derivaties", Bioorg Med Chem lett, 1997, Dec 5(12) p.2133-2143).A large number of publications are devoted to the preparation of a number of betulinic acid derivatives as potential AIDS control agents (see, for example, “Synthesis and anti-HIV activity of betulinic acid and dihidrobetulinic acid derivaties”, Bioorg Med Chem lett, 1997, Dec 5 (12) p .2133-2143).
Возможность применения производных бетулина исследовалась и в отношении гепатита на моделях гепатита не вирусного происхождения, вызванного Cll4, тетрациклином и ацетоном. (О.Б.Флехтер "Синтез эфиров тритерпеноидов группы лупана и их гепатопротекторная активность", Биоорганическая химия, 2000, том 26, №3, стр. 215-223).The feasibility of using betulin derivatives has also been investigated in relation to hepatitis in non-viral models of hepatitis caused by Cll 4 , tetracycline and acetone. (O.B. Flekhter "Synthesis of lupane group triterpenoids and their hepatoprotective activity", Bioorganic Chemistry, 2000, Volume 26, No. 3, pp. 215-223).
Раскрытие изобретенияDisclosure of invention
Авторами настоящего изобретения неожиданно было обнаружено, что экстракт коры березы обладает антивирусными свойствами. Этот эффект был обнаружен на модели экспериментальной инфекции, вызванной вирусом гепатита С человека в организме мышей.The authors of the present invention, it was unexpectedly discovered that the birch bark extract has antiviral properties. This effect was found in a model of an experimental infection caused by human hepatitis C virus in mice.
Несмотря на то, что антивирусная активность производных бетулина была показана рядом авторов на модели ВИЧ инфекции in vitro, неожиданность этого результата обусловлена не только тем обстоятельством, что предыдущие исследования бетулина не обнаруживали у него и у его производных противовирусной активности в отношении вирусного гепатита С, но и тем, что сами авторы изобретения при исследовании экстракта березовой коры в культурах клеток (in vitro) не обнаружили у него этой активности. Она проявилась лишь в условиях in vivo.Despite the fact that the antiviral activity of betulin derivatives was shown by several authors on an in vitro model of HIV infection, the surprise of this result is not only due to the fact that previous studies of betulin did not reveal antiviral activity against hepatitis C in its derivatives, but and the fact that the authors of the invention themselves in the study of birch bark extract in cell cultures (in vitro) did not find this activity in him. It appeared only in vivo.
Осуществление изобретенияThe implementation of the invention
Далее описаны результаты исследований влияния экстракта березовой коры на репродукцию вируса гепатита С (далее сокращенно ВГС) в организме лабораторных животных.The following describes the results of studies of the effect of birch bark extract on the reproduction of hepatitis C virus (hereinafter abbreviated as HCV) in laboratory animals.
Материал и методы:Material and methods:
Вирус: В работе использовали цитопатогенный вариант ВГС, выделенный из сыворотки крови хронически инфицированной ВГС больной. По данным генотипирования изолированный вариант ВГС относится к наиболее распространенному в России генотипу 1b ВГС. В исследованиях использовали инфекционные дозы ВГС, равные 10,0 ТЦД 50.Virus: A cytopathogenic variant of HCV was isolated from a serum of a chronically infected HCV patient. According to genotyping data, an isolated HCV variant belongs to the most common HCV genotype 1b in Russia. In the studies, infectious doses of HCV equal to 10.0 TCD 50 were used.
Противовирусный препарат. В работе использовали экстракт с содержанием бетулина, определенным методом ВЭЖХ - 72%. В опыте использовали различные разведения от 50 до 150 мг на 1 кг веса, которые вводили животным пероральным способом ежедневно в течение 4 дней.Antiviral drug. An extract with a betulin content determined by HPLC — 72% was used in the work. In the experiment, various dilutions from 50 to 150 mg per 1 kg of weight were used, which were administered to the animals by the oral method daily for 4 days.
Животные. Для изучения противовирусной активности бетулина использовали белых беспородных половозрелых мышей массой 18-20 г.Animals. To study the antiviral activity of betulin, white mongrel sexually mature mice weighing 18-20 g were used.
Методы. Материал, содержащий ВГС, вводили животным внутрибрюшинным способом. Часть животных оставляли контрольными. На 9-й день после заражения мышей “кормили” (вводили пероральным способом) раствором бетулина (физиологический раствор, с 10% Твина-80) (здесь и далее под бетулином понимается описанный выше препарат) в объеме 50 мкл, содержащих 50, 100 и 150 мг бетулина. Бетулин давали мышам 1 раз в день в течение 4-х дней. В опыте использовали по 10 животных на каждый вариант опыта. Через 2 дня, а также через 10 дней после последнего введения препарата, по 50% животных вскрывали, извлекали печень, головной мозг, забирали кровь. Пробы сывороток крови, надосадочную жидкость, полученную после центрифугирования при 3000 об/мин в течение 15 мин гомогенатов ткани печени и головного мозга использовали для определения антигенов ВГС и инфекционной активности вируса гепатита С. С этой целью вируссодержащие пробы титровали в культурах перевиваемых клеток почек эмбриона свиньи СПЭВ. Антиген ВГС в данных пробах изучали в реакции гемагтлютинации, используя классический метод, описанный Clarke и Casals (1968).Methods HCV-containing material was administered to animals intraperitoneally. Some animals were left as controls. On the 9th day after infection, the mice were “fed” (administered orally) with a solution of betulin (physiological solution, with 10% Tween-80) (hereinafter referred to as betulin, the drug described above) in a volume of 50 μl containing 50, 100 and 150 mg betulin. Betulin was given to mice once a day for 4 days. In the experiment, 10 animals were used for each experiment variant. After 2 days, as well as 10 days after the last injection, 50% of the animals were opened, the liver and brain were removed, and blood was taken. Blood serum samples, supernatant obtained after centrifugation at 3000 rpm for 15 min of homogenates of liver and brain tissue were used to determine HCV antigens and infectious activity of hepatitis C virus. To this end, virus-containing samples were titrated in cultures of transplanted kidney cells of a pig embryo SPEV. The HCV antigen in these samples was studied in a hemagglutination reaction using the classical method described by Clarke and Casals (1968).
Культуры клеток. Были использованы высоко чувствительные к цитопатогенному действию ВГС культуры перевиваемых клеток почек эмбриона свиньи (СПЭВ), полученные из фирмы “Нарвак”, Москва. Их использовали в виде однодневного монослоя клеток, выращенного в 24-луночных пластиковых панелях. Культуры клеток СПЭВ выращивали на среде 199 с 10% сыворотки эмбриона телят, с добавлением глютамина и антибиотиков (100 ЕД/мл). Для титрования остаточной инфекционной активности вируса использовали ту же линию клеток почки эмбриона свиньи (СПЭВ).Cell culture. The cultures of transplantable pig embryonic kidney cells (SPEV) highly sensitive to the cytopathogenic effect of HCV obtained from the company Narvak, Moscow. They were used as a one-day monolayer of cells grown in 24-well plastic panels. SPEV cell cultures were grown on medium 199 with 10% serum of calf embryo, supplemented with glutamine and antibiotics (100 U / ml). To titrate the residual infectious activity of the virus, the same pig embryonic kidney cell line (SPEV) was used.
Инфекционную активность ВГС, содержащегося в пробах органов и тканей инфицированных мышей, учитывали по результатам титрования, как правило, на 6-7 день после инфекции, когда развивалось максимальное цитопатогенное действие вируса, используя формулу Рида и Менча для подсчета титра вируса гепатита С.Infectious activity of HCV contained in samples of organs and tissues of infected mice was taken into account by titration, usually 6-7 days after infection, when the maximum cytopathogenic effect of the virus developed, using the Reed and Mench formula to calculate hepatitis C virus titer.
Результаты.Results.
Данные исследований приведены в таблицах 1 и 2. Как видно из данных табл. 1а, все пробы сывороток крови, полученных от ВГС инфицированных мышей, относящихся к различным группам, содержат как антигенную, так и инфекционную активности ВГС. Причем максимальные проявления этих показателей обнаружены в контрольной группе ВГС инфицированных животных, не получавших бетулин. У животных, получавших препарат в дозе 50 мг на 1 кг веса в 50 мкл, была отмечена заметная тенденция к снижению титров гемагглютинина ВГС, а инфекционные титры ВГС в сыворотке крови падали на 2,6 lg (средние данные). Значительное снижение антигенной и инфекционной активностей ВГС в сыворотке крови отмечали в группе животных, получавших ежедневно препарат “бетулин” в дозе 100 мг/кг. В этом случае титры инфекционной активности ВГС падали на 3,4 lg и более чем в 2 раза снижалась антигенная активность ВГС в пробах сыворотки крови мышей. В меньшей степени препарат проявлял активность в случае использования его в дозе 150 мг/кг. Снижалась антигенная активность вируса, титры инфекционной активности незначительно снижались под влиянием препарата (на 1,8 lg). Близкие результаты, свидетельствующие об эффективности препарата “бетулин”, были получены при изучении тканей печени от всех групп животных (табл.1б). В частности показано, что максимальное снижение антигенов ВГС и его инфекционной активности наблюдали в случае использования препарата в разовой дозе 50 и 100 мг на 1 кг веса при 4-кратном введении препарата. Из данных таблицы 1б видно, что антигенная активность ВГС при этом снижалась в 2 и более раз и до 2 lg отмечали снижение инфекционной активности ВГС в тканях печени. Сокращались и размеры печени ВГС инфицированных мышей под влиянием лечебного эффекта препарата Наибольшие титры ВГС (до 7,0 lg ТЦД50/20 мкл) наблюдали в тканях головного мозга ВГС инфицированных мышей (таблица 1 в). Однако и в этом случае у мышей, получавших препарат “бетулин” в дозах 50 и 100 мг на 1 кг наблюдали снижение титров инфекционной активности ВГС на 2,0-2,5 lg соответственно. При этом снижение антигена ВГС отмечали во всех группах животных, получавших препарат. В группе мышей, получавших бетулин в дозе 150 мг на 1 кг, отмечена тенденция к увеличению титров инфекционной активности ВГС в головном мозге.The research data are shown in tables 1 and 2. As can be seen from the data in table. 1a, all blood serum samples obtained from HCV infected mice belonging to different groups contain both antigenic and infectious activities of HCV. Moreover, the maximum manifestations of these indicators were found in the control group of HCV infected animals that did not receive betulin. In animals treated with the drug at a dose of 50 mg per 1 kg of weight in 50 μl, there was a noticeable tendency to lower HCV hemagglutinin titers, and infectious serum HCV titers decreased by 2.6 lg (average data). A significant decrease in antigenic and infectious activities of HCV in the blood serum was noted in the group of animals treated with Betulin daily at a dose of 100 mg / kg. In this case, the titers of HCV infection activity fell by 3.4 lg and the antigenic activity of HCV in mouse serum samples decreased by more than 2 times. To a lesser extent, the drug was active when used at a dose of 150 mg / kg. The antigenic activity of the virus decreased, the titers of infectious activity decreased slightly under the influence of the drug (1.8 lg). Close results indicating the effectiveness of the drug “betulin” were obtained in the study of liver tissue from all groups of animals (table 1b). In particular, it was shown that the maximum decrease in HCV antigens and its infectious activity was observed in the case of using the drug in a single dose of 50 and 100 mg per 1 kg of weight with 4-fold administration of the drug. From the data of table 1b it can be seen that the antigenic activity of HCV in this case decreased by 2 or more times and up to 2 lg a decrease in the infection activity of HCV in the liver tissues was noted. Decreased and liver dimensions HCV infected mice under the influence of the therapeutic effect of the drug highest titers of HCV (7,0 lg to TCD 50/20 ul) was observed in brain tissue of HCV infected mice (Table 1). However, in this case, mice treated with betulin in doses of 50 and 100 mg per 1 kg showed a decrease in titers of HCV infection activity by 2.0-2.5 lg, respectively. Moreover, a decrease in HCV antigen was noted in all groups of animals treated with the drug. In the group of mice treated with betulin at a dose of 150 mg per 1 kg, there was a tendency to an increase in titers of HCV infection activity in the brain.
Таким образом, данные, полученные при изучении органов и тканей мышей на 17 день после инфекции ВГС и 3-й день после 4-кратного применения препарата “бетулин”, свидетельствуют о высокой противовирусной активности препарата в отношении инфекции, вызванной ВГС у животных.Thus, the data obtained in the study of the organs and tissues of mice on the 17th day after HCV infection and on the 3rd day after 4-fold use of the betulin preparation indicate a high antiviral activity of the drug against infection caused by HCV in animals.
В этой связи выявлялась продолжительность положительных изменений в организме ВГС инфицированных мышей после отмены препарата. Поэтому 2-я группа ВГС инфицированных животных была обследована на 28 день после инфекции и на 11 день после отмены лечения препаратом “бетулин”.In this regard, the duration of positive changes in the body of HCV infected mice after drug withdrawal was revealed. Therefore, the 2nd group of HCV infected animals was examined on day 28 after infection and on day 11 after cancellation of treatment with Betulin.
Полученные результаты приведены в таблицах 2а, б, в. Исследование антигенной активности ВГС в органах и тканях мышей в этот период времени позволило установить, что лечение препаратом “бетулин” в дозах 50 мг и 100 мг на 1 кг, как правило, приводило к значительному снижению содержания гемагглютинина ВГС в пробах сыворотки крови, печени и головного мозга ВГС инфицированных животных (в дозе 100 мг на 1 кг до 4 раз - в печени мышей, в 2 и более раз - в сыворотке крови и головном мозге животных). Доза препарата, равная 150 мг на 1 кг, как правило, приводила к незначительному снижению содержания антигена ВГС в органах и тканях животных, инфицированных ВГС.The results are shown in tables 2a, b, c. A study of the antigenic activity of HCV in the organs and tissues of mice during this period of time revealed that treatment with betulin in doses of 50 mg and 100 mg per 1 kg, as a rule, led to a significant decrease in the content of HCV hemagglutinin in serum, liver and the brain of HCV infected animals (at a dose of 100 mg per 1 kg up to 4 times in the liver of mice, 2 or more times in the blood serum and brain of animals). A dose of 150 mg per 1 kg, as a rule, led to a slight decrease in the content of HCV antigen in the organs and tissues of animals infected with HCV.
Изучение инфекционной активности ВГС в органах и тканях ВГС инфицированных мышей показало, что в отдаленные сроки после завершения лечения антивирусный эффект введенного препарата сохранялся в течение более чем 10 дней. Однако анализ полученных данных позволил обнаружить иные закономерности в параметрах инфекции ВГС в эти сроки. В частности, показано, что титры ВГС, содержащиеся в сыворотке крови и в печени контрольной группы животных в значительной степени превышали эти значения, выявленные в ранние сроки после заражения мышей (на 1,5 lg - в сыворотке крови, на 2,4 lg - в печени). В то же время, на 28-й день после инфекции в тканях головного мозга титры вируса стали заметно снижаться.A study of the infection activity of HCV in the organs and tissues of HCV infected mice showed that in the long term after the treatment was completed, the antiviral effect of the administered drug persisted for more than 10 days. However, an analysis of the data obtained revealed other patterns in the parameters of HCV infection at these times. In particular, it was shown that the HCV titers contained in the blood serum and in the liver of the control group of animals significantly exceeded these values detected early after infection of mice (1.5 lg - in blood serum, 2.4 lg - in the liver). At the same time, on the 28th day after infection in the brain tissue, titers of the virus began to decrease markedly.
Противовирусный эффект препарата “бетулин” в эти сроки после отмены препарата был несколько снижен, однако наибольший эффект наблюдался в период, когда для лечения использовали дозу, равную 50 мг на 1 кг веса. В этом случае в сыворотке крови животных титры вируса снижались в среднем на 1,9 lg, в печени - на 2,9 lg, в головном мозге - на 2,4 lg. 4-кратное введение препарата “бетулин” в дозе 100 мг на 1 кг приводило к менее существенным изменениям титра ВГС в сторону уменьшения (см. таблицы.2а, б, в).The antiviral effect of the “betulin” drug was somewhat reduced during these periods after drug withdrawal, however, the greatest effect was observed during the period when a dose of 50 mg per 1 kg of weight was used for treatment. In this case, in the blood serum of animals, virus titers decreased on average by 1.9 lg, in the liver - by 2.9 lg, in the brain - by 2.4 lg. A 4-fold administration of the “betulin” preparation in a dose of 100 mg per 1 kg led to less significant changes in the HCV titer in the direction of reduction (see tables 2a, b, c).
Таким образом, установлено положительное действие препарата “бетулин” на снижение показателей инфекции, вызванной ВГС у мышей, и через 10 дней после его отмены.Thus, the positive effect of the drug “betulin” on the decrease in the rates of infection caused by HCV in mice was established, and 10 days after its cancellation.
Полученные авторами изобретения результаты позволяют утверждать, что экстракт березовой коры обладает высокой антивирусной активностью в отношении инфекции, вызванной вирусом гепатита С, что позволяет предлагать его в качестве средства для лечения этого вида гепатита.The results obtained by the inventors suggest that the birch bark extract has high antiviral activity against infection caused by hepatitis C virus, which allows us to offer it as a means for treating this type of hepatitis.
При этом нет оснований утверждать, что содержание бетулина в экстракте не менее 70% является критическим и ограничивать им объем изобретения. Практически значимые результаты могут быть получены и при меньших значениях содержания бетулина. Установление этих граничных значений может быть осуществлено специалистами при проведении обычной рутинной работы, в частности, основываясь на изложенном выше в описании настоящего изобретения.However, there is no reason to argue that the content of betulin in the extract of at least 70% is critical and limit the scope of the invention to it. Practically significant results can be obtained with lower values of betulin content. The establishment of these boundary values can be carried out by specialists in carrying out routine routine work, in particular, based on the above in the description of the present invention.
Предпочтительной формой применения экстракта бересты являются твердые лекарственные формы: таблетки, пилюли, капсулы, порошки. При этом могут использоваться обычные для этого вида фармацевтически приемлемые носители. Препарат может включать один или несколько наполнителей, таких как микрокристаллическая целлюлоза, лактоза, сахара, крахмалы, маннит, сорбит и другие полиолы, карбонат кальция, фосфат кальция, сульфат кальция, полиэтиленгликоли и др.The preferred form of application of birch bark extract are solid dosage forms: tablets, pills, capsules, powders. In this case, pharmaceutically acceptable carriers customary for the species may be used. A preparation may include one or more excipients, such as microcrystalline cellulose, lactose, sugars, starches, mannitol, sorbitol and other polyols, calcium carbonate, calcium phosphate, calcium sulfate, polyethylene glycols, etc.
Препарат также может включать поверхностно-активные вещества и другие обычные компоненты для твердых фармацевтических препаратов, такие как красители, ароматизаторы, адсорбенты.The preparation may also include surfactants and other conventional components for solid pharmaceutical preparations, such as colorants, flavors, adsorbents.
При изготовлении препарата в виде таблетки с покрытием последнее может быть получено из таких пленкообразующих веществ как гидроксипропилцеллюлоза, пластификатора, такого как полиэтиленгликоли, и других вспомогательных добавок таких как, например, пигменты.In the manufacture of a coated tablet preparation, the latter can be obtained from film-forming substances such as hydroxypropyl cellulose, a plasticizer, such as polyethylene glycols, and other auxiliary additives such as, for example, pigments.
Claims (3)
Priority Applications (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2003126207/15A RU2244554C1 (en) | 2003-08-28 | 2003-08-28 | Agent for treatment of viral hepatitis c |
PCT/RU2004/000042 WO2005021007A1 (en) | 2003-08-28 | 2004-02-09 | Prevention and treatment of viral hepatitis c |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2003126207/15A RU2244554C1 (en) | 2003-08-28 | 2003-08-28 | Agent for treatment of viral hepatitis c |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2244554C1 true RU2244554C1 (en) | 2005-01-20 |
RU2003126207A RU2003126207A (en) | 2005-02-27 |
Family
ID=34978026
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2003126207/15A RU2244554C1 (en) | 2003-08-28 | 2003-08-28 | Agent for treatment of viral hepatitis c |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2244554C1 (en) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2526179C1 (en) * | 2013-03-24 | 2014-08-20 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Гамаветфарм" | Medication for reduction of hepatitis c virus reproduction |
-
2003
- 2003-08-28 RU RU2003126207/15A patent/RU2244554C1/en active IP Right Revival
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
DELF JONATHAN E., KARIM M.R. J.Minn. Acad. Sci. 1999; s.3, p.10. * |
FULDA SIMONE, JEREMIAS IRMELA. Med. And Pediat. Oncol., 1999, s.4. КАРАЧУРИНА Л.Т., ПОРОЙКОВ В.В. и др. Синтез эфиров тритерпеноидов группы лупана и их гепатопротекторная активность. Биоорган. химия. 2000, вып.3, с.215-223. * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2526179C1 (en) * | 2013-03-24 | 2014-08-20 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Гамаветфарм" | Medication for reduction of hepatitis c virus reproduction |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
RU2003126207A (en) | 2005-02-27 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Bailly et al. | Glycyrrhizin: An alternative drug for the treatment of COVID-19 infection and the associated respiratory syndrome? | |
RU2387665C2 (en) | Pharmaceutical salts of 3-o-(3',3-dimethylsuccinyl) betulinic acid | |
ES2312884T3 (en) | ANTIVIRAL COMPOSITIONS THAT INCLUDE DERIVATIVES OF PHENYLACETIC ACID. | |
KR101891505B1 (en) | Use of anhydroicaritin in preparing medicine for preventing or treating decrease in blood cells | |
CN103694375B (en) | A kind of triterpene-cyclodextcovalent covalent compound and its production and use | |
CA2434670C (en) | Dihydro-triterpenes in the treatment of viral infections, cardiovascular disease, inflammation, hypersensitivity or pain | |
UA82528C2 (en) | Agent for inhibition of membrane-enveloped viruses propagation based on fullerene water-soluble compound and process for the preparation thereof | |
RU2244554C1 (en) | Agent for treatment of viral hepatitis c | |
KR19990015612A (en) | Hepatitis C Therapeutic Composition Containing Mixed Extracts of Hwangbaekpi and Matari Plants | |
EP3017816B1 (en) | Diindolylmethane-based medicinal agent and use thereof to treat influenza and viral respiratory infections | |
CN106344549B (en) | Application of the Rhein in preparation prevention and/or treatment hand-foot-and-mouth disease drug | |
CN102670684B (en) | Application of cynanchum atratum total saponin | |
RU2401121C1 (en) | Pharmaceutical composition based on herbal extracts for treatment and prevention of viral infections and syphilis and method of treatment and prevention of viral infections and syphilis | |
CN106377537B (en) | Application of acetyl astragaloside | |
CN101829103B (en) | Application of flavonoid quercetin dimmer as medicament for treating viral hepatitis B | |
ES2761429T3 (en) | Antiviral pharmaceutical composition, containing an extract of Juncus acutus | |
JPH11209282A (en) | Hepatic function-improving agent containing bergenin and its derivative as active ingredient | |
CN111617076B (en) | Compound pharmaceutical composition containing arbidol hydrochloride and application thereof | |
CN107648249B (en) | Application of the desgalactotigonin in the drug for preparing prevention influenza infection | |
JPH06298651A (en) | Therapeutic agent for aids | |
CN101190936A (en) | Compound with antiviral activity | |
RU2184556C1 (en) | Agent showing antiviral activity | |
JPH0551565B2 (en) | ||
KR20010108040A (en) | Anti-hiv infection agents and method for treating hiv infection | |
RU1805967C (en) | Biologically active substance used against aids virus |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
TK4A | Correction to the publication in the bulletin (patent) |
Free format text: AMENDMENT TO CHAPTER -FG4A- IN JOURNAL: 2-2005 FOR TAG: (73) |
|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20130829 |
|
NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20141027 |