RU2243723C1 - Method for detecting nutritive value of animal meat - Google Patents
Method for detecting nutritive value of animal meat Download PDFInfo
- Publication number
- RU2243723C1 RU2243723C1 RU2003112545/13A RU2003112545A RU2243723C1 RU 2243723 C1 RU2243723 C1 RU 2243723C1 RU 2003112545/13 A RU2003112545/13 A RU 2003112545/13A RU 2003112545 A RU2003112545 A RU 2003112545A RU 2243723 C1 RU2243723 C1 RU 2243723C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cooling
- solution
- glycogen
- animal
- test
- Prior art date
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области ветеринарной медицины, в частности биохимии животных.The invention relates to the field of veterinary medicine, in particular animal biochemistry.
Определение содержания гликогена является одним из важных тестов в выявлении энергетического ресурса организма животных.Determination of glycogen content is one of the important tests in identifying the energy resource of the animal organism.
Гликоген - полисахарид, или животный крахмал, синтезируется организмом и депонируется во всех его органах и тканях. Гликоген является легко мобилизируемой резервной формой глюкозы и представляет собой разветвленный полимер из остатков глюкозы крови.Glycogen - a polysaccharide, or animal starch, is synthesized by the body and is deposited in all its organs and tissues. Glycogen is an easily mobilizable reserve form of glucose and is a branched polymer of blood glucose residues.
Известно определение гликогена в крови цитохимически ШИК-реакцией, методом Шабадаша [см. Клиническая лабораторная аналитика под ред. В.В.Меньшикова Том 2 - Частные аналитические технологии в клинической лаборатории. М.: “Лабинформ” - РАМЛД, 1999. С. 59-61], где осуществляют подготовку мазков крови, фиксацию в абсолютном спирте и обработку инкубацию в растворе периодита и окрашивают реактивом Шиффа с последующим окрашиванием гемотоксилином и высушиванием. Где гликоген окрашивается в вишнево-фиолетовый цвет на зеленом фоне препарата и микроскопированием.The determination of glycogen in the blood is known cytochemically by the ShIK reaction, by the Shabadash method [see Clinical Laboratory Analytics, ed. VV Menshikova Volume 2 - Private analytical technologies in a clinical laboratory. M .: “Labinform” - RAMLD, 1999. S. 59-61], where blood smears are prepared, fixed in absolute alcohol and incubated in a periodite solution and stained with Schiff's reagent, followed by staining with hemotoxylin and drying. Where glycogen stains in a cherry-violet color on a green background of the drug and microscopy.
Также известно определение гликогена в крови [Horeysi J. Et al. Zaklady chemickeho vysetrovani v lekarstvi. Pppraha, 1957. Справочник Биохимические методы исследования в клинике. Под редакцией академика АМН СССР проф. А.А.Покровского Изд. “Медицина” М. - 1969. Определение гликогена в крови колориметрическим методом с орцином (по Хорейши), стр. 230-231], где гликоген осаждают спиртом, гидролизуют в кислой среде до глюкозы и нагревают в серной кислоте, которая превращается в оксиметилфурфурол и конденсируется орцином, образуя окрашенное соединение. Все вышеуказанное осуществлялось путем кипячения исследуемого биологического субстрата в концентрированном растворе гидроксида натрия в центрифужной пробирке с последующим добавлением спирта, охлаждением, центрифугированием, отбором надосадочной жидкости, растворением осадка в полунасыщенном растворе сернокислого натрия с последующим дополнительным охлаждением, центрифугированием и растворением осадка, одновременное добавление в центрифужную пробирку с исследуемым биологическим субстратом, в контрольную пробирку с водой и в пробирку со стандартным раствором глюкозы 13 мл серной кислоты и 1 мл 1% раствора орцина с последующим нагреванием, охлаждением, фотометрирование против контроля и определение гликогена по формуле:The definition of blood glycogen is also known [Horeysi J. Et al. Zaklady chemickeho vysetrovani v lekarstvi. Pppraha, 1957. Reference Biochemical methods of research in the clinic. Edited by Academician of the Academy of Medical Sciences of the USSR prof. A.A. Pokrovsky Ed. “Medicine” M. - 1969. Determination of glycogen in the blood by the colorimetric method with orcine (according to Khoreishi), pp. 230-231], where glycogen is precipitated with alcohol, hydrolyzed in an acidic medium to glucose and heated in sulfuric acid, which turns into hydroxymethyl furfural and condenses with orcin, forming a colored compound. All of the above was carried out by boiling the test biological substrate in a concentrated sodium hydroxide solution in a centrifuge tube, followed by the addition of alcohol, cooling, centrifuging, selecting a supernatant, dissolving the precipitate in a semi-saturated sodium sulfate solution, followed by additional cooling, centrifuging and dissolving the sediment, while simultaneously adding test tube with test biological substrate in a control test tube with water and in p obirku with standard glucose solution 13 ml of sulfuric acid and 1 ml of 1% ortsina solution followed by heating, cooling, monitoring and photometry against determination of glycogen by the formula:
где Х - количество гликогена, в мг%; Ео - экстинция опытной пробы; Ест - экстинция стандартного раствора.where X is the amount of glycogen, in mg%; E about - the extinction of an experimental sample; E article - extinction of a standard solution.
Недостатком известных методов является отсутствие возможности определения содержания гликогена в мышечных тканях животных для определения питательной ценности мяса животного.A disadvantage of the known methods is the inability to determine the glycogen content in the muscle tissues of animals to determine the nutritional value of animal meat.
Техническим решением задачи является расширение технологических возможностей.The technical solution to the problem is the expansion of technological capabilities.
Поставленная задача достигается тем, что в способе определения питательной ценности мяса животного, включающем кипячение исследуемого биологического субстрата в центрифужной пробирке с последующим добавлением спирта, охлаждением, центрифугированием, отбором надосадочной жидкости, растворением осадка с последующим дополнительным охлаждением, центрифугированием и растворением осадка, одновременное добавление в центрифужную пробирку с исследуемым биологическим субстратом, в контрольную пробирку с водой и в пробирку со стандартным раствором глюкозы 13 мл серной кислоты и 1 мл 1% раствора конденсата с последующим нагреванием, охлаждением, фотометрирование против контроля и определение гликогена по формуле:This object is achieved in that in a method for determining the nutritional value of animal meat, including boiling the test biological substrate in a centrifuge tube followed by the addition of alcohol, cooling, centrifuging, selecting a supernatant, dissolving the precipitate, followed by additional cooling, centrifuging and dissolving the sediment, simultaneously adding centrifuge tube with the test biological substrate, into a control tube with water and into a test tube with a standard astvorom glucose 13 ml of sulfuric acid and 1 ml of 1% condensate solution followed by heating, cooling, monitoring and photometry against determination of glycogen by the formula:
где Г - количество гликогена, в мг%; Ео - экстинция опытной пробы; Ест - экстинция стандартного раствора, что в качестве биологического субстрата используют экстракт из мышечной ткани животного, который кипятят в 5% растворе трихлоруксусной кислоты, при этом после первого охлаждения и перед вторым охлаждением в исследуемый образец добавляют по 1 мл диэтилового эфира, насыщенного водой 1:1, причем охлаждение осуществляют в течение 15 минут, центрифугируют при 3 тыс. об/мин в течение 15 минут, добавляют в пробирки 2 мл 1% конденсата, в качестве которого используют резорцин, и фотометрируют при длине волны λ=315 нм.where G is the amount of glycogen, in mg%; E about - the extinction of an experimental sample; E st is the extinction of a standard solution, which is an extract from the muscle tissue of an animal that is boiled in a 5% trichloroacetic acid solution as a biological substrate, and after the first cooling and before the second cooling, 1 ml of diethyl ether saturated with water is added to the test sample 1 : 1, and cooling is carried out for 15 minutes, centrifuged at 3 thousand rpm for 15 minutes, add 2 ml of 1% condensate, which resorcinol is used in the test tubes, and photometer at a wavelength of λ = 315 nm.
Новизна заявляемого способа обусловлена тем, что предложенный метод позволяет определить содержание гликогена в экстракте из мышц, по которому определяется ценность мяса. Кроме того, заявляемое предложение является более экономичным, т.к. не требует применения особо дорогостоящих химических реактивов.The novelty of the proposed method is due to the fact that the proposed method allows to determine the glycogen content in the extract from the muscles, which determines the value of the meat. In addition, the proposed proposal is more economical, because does not require the use of particularly expensive chemicals.
Пример конкретного осуществления способа определения питательной ценности мяса животногоAn example of a specific implementation of the method for determining the nutritional value of animal meat
Подготовка экстракта из мышц животныхAnimal muscle extract preparation
Для этого готовили экстракт из мышц - бедренной и голени, полученных от животных крупного рогатого скота, свиней, овец, кроликов, нутрий, лягушек. Мышцы измельчали ножницами и прокручивали через мясорубку, а затем получали гомогенат. Гомогенат готовили с помощью ручного гомогенизатора с тефлоновым пестиком с добавлением физиологического раствора в разведении 1:2 (1 часть измельченных мышц и 2 части физиологического раствора). Затем содержимое перемещали в конические колбы, оставляли на 2 часа в холодильнике, периодически перемешивая для получения насыщенного экстракта из мышц, и фильтровали через бумажный фильтр.For this, an extract was prepared from the muscles of the femur and lower leg obtained from animals of cattle, pigs, sheep, rabbits, nutria, and frogs. The muscles were crushed with scissors and scrolled through a meat grinder, and then a homogenate was obtained. The homogenate was prepared using a manual homogenizer with a teflon pestle with the addition of physiological saline in a dilution of 1: 2 (1 part of the crushed muscles and 2 parts of physiological solution). Then the contents were transferred to conical flasks, left for 2 hours in the refrigerator, periodically mixing to obtain a saturated extract from the muscles, and filtered through a paper filter.
Приготовление растворовSolution preparation
Для приготовления 52% серной кислоты объемом 325 мл необходимо взять 225 мл концентрированной серной кислоты и осторожно прилить 100 мл дистиллированной воды.To prepare 52% sulfuric acid with a volume of 325 ml, you need to take 225 ml of concentrated sulfuric acid and carefully pour 100 ml of distilled water.
Для приготовления 1% раствора резорцина необходимо взять 1 г резорцина и 99 мл 52% раствора серной кислоты.To prepare a 1% resorcinol solution, you need to take 1 g of resorcinol and 99 ml of a 52% sulfuric acid solution.
Для приготовления 5% раствора трихлоруксусной кислоты необходимо взять 5 г трихлоруксусной кислоты и 99 мл дистиллированной воды.To prepare a 5% solution of trichloroacetic acid, it is necessary to take 5 g of trichloroacetic acid and 99 ml of distilled water.
Для приготовления стандартного раствора глюкозы берут 10 мг глюкозы и растворяют его 300 мл дистиллированной воды.To prepare a standard glucose solution, take 10 mg of glucose and dissolve it with 300 ml of distilled water.
Осаждение и гидролиз гликогена из экстракта мышц животныхPrecipitation and hydrolysis of glycogen from animal muscle extract
Полученный экстракт из мышц помещали в пластмассовую центрифужную пробирку в количестве 3 мл и 3 мл 5% раствора трихлоруксусной кислоты. Затем пробирку помещали в водяную баню на 1,5-2 часа, после охлаждения в пробирку вносили 1 мл диэтилового эфира, насыщенного водой (1:1), суспендировали и охлаждали на льду в течение 15 минут, затем раствор центрифугировали при 3 тыс. об/мин в течение 15 минут. Надосадочную жидкость осторожно убирали пастеровской пипеткой, а в осадок добавляли 1 мл диэтилового эфира, насыщенного водой (1:1), и охлаждали на льду в течение 15 минут, затем вновь центрифугировали при 3 тыс. об/мин в течение 15 минут. После центрифугирования надосадочную жидкость осторожно убирали пастеровской пипеткой, а осадок перемешали с 3 мл дистиллированной воды, 13 мл 52% раствора серной кислоты перемешивали и 2 мл 1% резорцина.The resulting muscle extract was placed in a plastic centrifuge tube in an amount of 3 ml and 3 ml of a 5% trichloroacetic acid solution. Then the test tube was placed in a water bath for 1.5-2 hours, after cooling, 1 ml of diethyl ether saturated with water (1: 1) was added to the test tube, suspended and cooled on ice for 15 minutes, then the solution was centrifuged at 3 thous. / min for 15 minutes. The supernatant was carefully removed with a Pasteur pipette, and 1 ml of diethyl ether saturated with water (1: 1) was added to the precipitate and cooled on ice for 15 minutes, then centrifuged again at 3 thousand rpm for 15 minutes. After centrifugation, the supernatant was carefully removed with a Pasteur pipette, and the precipitate was mixed with 3 ml of distilled water, 13 ml of a 52% sulfuric acid solution was mixed, and 2 ml of 1% resorcinol.
В контрольную (чистую пробирку) пробирку и со стандартным раствором глюкозы наливали по 3 мл дистиллированной воды, по 13 мл 52% раствора серной кислоты перемешивали и по 2 мл 1% резорцина.In a control (clean tube) tube and with a standard glucose solution, 3 ml of distilled water was poured, 13 ml of a 52% sulfuric acid solution was mixed, and 2 ml of 1% resorcinol was mixed.
Все пробирки помещали в водяную баню при 80°С в течение 20 минут, затем охлаждали на льду в течение 15 минут. Пробирки с наличием глюкозы имели коричнево-желтое окрашивание.All tubes were placed in a water bath at 80 ° C for 20 minutes, then cooled on ice for 15 minutes. Test tubes with glucose had a brownish-yellow stain.
Фотокаллориметрирование проводили против контроля на КФК-3 при подборе длины волны (λ=315 нм). Расчет содержания гликогена в экстракте из мышц проводят по формуле:Photocallorimetry was performed against the control at KFK-3 when selecting a wavelength (λ = 315 nm). The calculation of glycogen content in the extract from the muscles is carried out according to the formula:
где Г - количество гликогена, в мг%;where G is the amount of glycogen, in mg%;
Еo - экстинция опытной пробы;E o - the extinction of the experimental sample;
Ест - экстинция стандартного раствора.E article - extinction of a standard solution.
Пример: у крупного рогатого скотаExample: in cattle
Еo - экстинция опытной пробы составила 0,845;E o - the extinction of the experimental sample was 0.845;
Ест - экстинция стандартного раствора составила 0,253.E st - the extinction of the standard solution was 0.253.
Таким образом, подставляя в формулу, получим следующий результат: гликогенаThus, substituting in the formula, we obtain the following result: glycogen
По данным таблицы 1 можно сделать вывод, что высокой питательной ценностью обладает мясо кроликов, затем мясо крупного рогатого скота и т.д.According to table 1, we can conclude that rabbit meat has high nutritional value, then cattle meat, etc.
Claims (1)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2003112545/13A RU2243723C1 (en) | 2003-04-28 | 2003-04-28 | Method for detecting nutritive value of animal meat |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2003112545/13A RU2243723C1 (en) | 2003-04-28 | 2003-04-28 | Method for detecting nutritive value of animal meat |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2003112545A RU2003112545A (en) | 2004-11-27 |
RU2243723C1 true RU2243723C1 (en) | 2005-01-10 |
Family
ID=34881103
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2003112545/13A RU2243723C1 (en) | 2003-04-28 | 2003-04-28 | Method for detecting nutritive value of animal meat |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2243723C1 (en) |
-
2003
- 2003-04-28 RU RU2003112545/13A patent/RU2243723C1/en not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
ПОКРОВСКИЙ А.А. (ред.) Биохимические методы исследования в клинике. Справочник. М., "Медицина", 1969, с.230-231. HOREYSI J. et al. Zaklady chemickeho vysetrovani v lekarstvi, Praha, 1957. МЕНЬШИКОВ В.В. Клиническая лабораторная аналитика. Том 2. М., Лабинформ-РАМЛД, 1999, с.59-61. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Greistorfer et al. | Snail mucus− glandular origin and composition in Helix pomatia | |
US11035763B2 (en) | Kit for producing cleared biological specimens and method for producing cleared biological specimens | |
Sidari et al. | Diatom test with Soluene-350 to diagnose drowning in sea water | |
CN108344613A (en) | A kind of fluorescent dyeing reagent marking leukorrhea and cervical exfoliated cell pathogen | |
Kaingu et al. | Efficacy of Aloe secundiflora crude extracts on Ascaridia galli in vitro | |
Bayne | Observations on the composition of the layers of the egg of Agriolimax reticulatus, the grey field slug (Pulmonata, Stylomatophora) | |
CN108287097A (en) | A kind of thionine eosin stains liquid and preparation method and application | |
CN107271246B (en) | A kind of immune p16INK4a antigens for Thinprep pap test preserve liquid and preparation method thereof | |
RU2243723C1 (en) | Method for detecting nutritive value of animal meat | |
CN109557198A (en) | A kind of protein biomarkers and its application for diagnosis of osteoporosis | |
CN103656091B (en) | A kind of water-soluble base Chinese medicine ointment formulation for the treatment of diabetic foot and its production and use | |
RU2256320C2 (en) | Method for detecting glycogen in extract out of organs and tissues in bees | |
Malik et al. | Phenotyping of Amphistomes, and Pathological, Hematological and Bile Biochemical Response to Gigantocotyle explanatum Infection in Buffaloes. | |
Hsiao et al. | Early ontogenic changes in the concentration of alkaline phosphatase in Hawaiian sea urchins | |
RU2325645C1 (en) | Method of bacterial endotoxins detection with application of tal-test implying coagulogene polymer registered by structure of generated protein fractals | |
RU2429462C2 (en) | Optical clarification of biological tissue specimens | |
RU2367607C1 (en) | Method for determining immune complexes in white mice under stress | |
CN107926860A (en) | A kind of method for building up of the lipopolysaccharide-induced procedural Necrosis Model of piglet liver cell | |
RU2708990C1 (en) | Method of life-time differential diagnostics of metacercariae of opisthorchid flukes | |
RU2763673C1 (en) | Method for cultivating toxocara larvae for diagnosing toxocariasis in cats | |
CN103789254A (en) | Insect, insect hemolymph and assembly active substance thereof and application | |
Kumar | Necropsy procedure and basic laboratory methods in dogs and cats | |
RU2180104C1 (en) | Method of simultaneous determination of lysosomal cationic proteins in granulocytes and dna, rna in lymphocytes in single tissue preparation | |
RU2032374C1 (en) | Method for diagnosing balantidiosis in swine | |
Weichselbaum | The Elements of pathological histology with special reference to practical methods |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20050429 |