RU2224235C2 - Method for visualization of poultry form blood elements upon single smear - Google Patents
Method for visualization of poultry form blood elements upon single smear Download PDFInfo
- Publication number
- RU2224235C2 RU2224235C2 RU2002112129/13A RU2002112129A RU2224235C2 RU 2224235 C2 RU2224235 C2 RU 2224235C2 RU 2002112129/13 A RU2002112129/13 A RU 2002112129/13A RU 2002112129 A RU2002112129 A RU 2002112129A RU 2224235 C2 RU2224235 C2 RU 2224235C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- blue
- nucleus
- dye
- cells
- blood
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Description
Способ визуализации форменных элементов крови птиц относится к ветеринарии и может быть использован при массовых исследованиях в лабораторной диагностике. The method of visualization of blood cells of birds relates to veterinary medicine and can be used in mass studies in laboratory diagnostics.
Известны различные способы определения количества форменных элементов крови по окрашенным образцам свежей крови, включающим фиксацию мазков, их окраску и микроскопирование. There are various methods for determining the number of blood cells by stained samples of fresh blood, including the fixation of smears, their color and microscopy.
Например, окраска по Романовскому-Гимзе позволяет при микроскопировании увидеть эритроциты, лейкоциты, тромбоциты. Однако время окрашивания образцов на выявление эритроцитов и лейкоцитов значительно варьирует от 20 мин до 1 часа (1), (за счет того, что при каждом приготовлении получается краситель с разным титром), а для выявления тромбоцитов длительность окрашивания увеличивается до 1,5-3 ч. Кроме того, этот способ не позволяет обнаружить ретикулоциты. For example, Romanovsky-Giemsa staining allows microscopy to see red blood cells, white blood cells, platelets. However, the staining time of samples for the detection of red blood cells and leukocytes varies significantly from 20 minutes to 1 hour (1), (due to the fact that each preparation produces a dye with a different titer), and for detecting platelets, the staining time increases to 1.5-3 h. In addition, this method does not detect reticulocytes.
Окраска по Май-Грюнвальду проводится без предварительной фиксации (краска растворена в метиловом спирте), однако на фоне хорошо окрашенной цитоплазмы эритроцитов ядра прокрашиваются в бледно-голубой цвет, что затрудняет проведение кариометрии. May-Grunwald staining is carried out without prior fixation (the paint is dissolved in methyl alcohol), however, against the background of a well-stained cytoplasm of red blood cells, the nuclei are stained with a pale blue color, which makes karyometry difficult.
Окраска по Папенгейму сочетает окраску по Май-Грюнвальду и докрашивание по Романовскому, что увеличивает время проведения исследования, а в результате хорошо окрашивается базофильная структура ядер и специфическая зернистость лейкоцитов, что позволяет применять данный способ для окраски пунктатов костного мозга, при этом невозможно достаточно четко дифференцировать клеточные популяции в периферической крови. Papenheim staining combines May-Grunwald staining and Romanovsky staining, which increases the time of the study, and as a result, the basophilic structure of the nuclei and the specific granularity of the leukocytes are well stained, which makes it possible to use this method for staining bone marrow punctures, while it is not possible to clearly differentiate cell populations in peripheral blood.
Окраска азур-эозином основана на крашении красителем Романовского, приготовленном на метиловом спирте, при этом фиксация и окрашивание идут одновременно. Недостаток способа: для определения тромбоцитов следует использовать подщелоченный азур-эозин, а для определения эозинофилов - подкисленный азур-эозин, т.е. фактически проводить два исследования. Azure-eosin staining is based on dyeing with Romanovsky dye prepared on methyl alcohol, while fixing and staining are simultaneous. The disadvantage of this method: for the determination of platelets, alkaline azure-eosin should be used, and for the determination of eosinophils, acidified azure-eosin, i.e. actually carry out two studies.
Окрашивание красителем по Лейшману предполагает использование нефиксированных мазков, так как краска готовится на фиксаторе - метиловом спирте. Этот способ экономичен - окраска мазка занимает 13 мин (первые 3 мин мазок помещают в неразбавленный краситель-фиксатор, в последующие 10 мин докраску производят в разбавленном красителе) (2). Недостаток способа - использование дистиллированной воды для приготовления разбавленного красителя и промывки мазков: несоблюдение рН среды приводит к получению некачественных мазков, что снижает достоверность результатов. Leishman staining involves the use of unfixed strokes, as the paint is prepared on a fixative - methyl alcohol. This method is economical - the smear takes 13 minutes to paint (the first 3 minutes the smear is placed in undiluted fixative dye, in the next 10 minutes the painting is done in diluted dye) (2). The disadvantage of this method is the use of distilled water for the preparation of diluted dye and washing smears: non-compliance with the pH of the medium leads to poor-quality smears, which reduces the reliability of the results.
Общим недостатком вышеперечисленных способов является невозможность выявления ретикулоцитов. A common disadvantage of the above methods is the inability to detect reticulocytes.
В гематологии для подсчета ретикулоцитов в качестве красителей используют: бриллианткрезилблау, метиленовый синий, азур I, азур II. In hematology, for counting reticulocytes, the following dyes are used: diamondcresilblow, methylene blue, azure I, azure II.
Окраска мазков крови птиц метиленовым синим, азуром I не позволяет дифференцировать эритроциты и тромбоциты (вследствие одинакового прокрашивания ядер и слабого прокрашивания внутриклеточных структур цитоплазмы). Staining of blood smears of birds with methylene blue, azure I does not allow to differentiate erythrocytes and platelets (due to the same staining of the nuclei and weak staining of the intracellular structures of the cytoplasm).
Окраска красителем бриллианткрезилблау на стекле во влажной камере не позволяет идентифицировать ретикулоциты вследствие слабого прокрашивания клеточных элементов. Staining with diamondcresilblau dye on glass in a humid chamber does not allow identification of reticulocytes due to weak staining of cellular elements.
За прототип визуализации форменных элементов крови нами выбран способ суправитальной окраски азуром II (способ Алексеева), рекомендованный для одновременного выявления ретикулоцитов и тромбоцитов: первые приобретают синеватый цвет с характерной для них сетчатостью, вторые - фиолетово-розовый (3). Однако окрашивание в меланжере снижает достоверность результатов вследствие механического повреждения клеток крови птицы при перемешивании. Этот способ не позволяет визуализировать клетки лимфоцитарного ряда, что требует для подсчета каждой клеточной популяции крови проведения самостоятельных исследований. For the prototype visualization of blood cells, we chose a method of supravital staining with azure II (Alekseev’s method), recommended for the simultaneous detection of reticulocytes and platelets: the former acquire a bluish color with a characteristic retina, the latter become purple-pink (3). However, staining in the melanger reduces the reliability of the results due to mechanical damage to the blood cells of the bird with stirring. This method does not allow visualization of lymphocytic cells, which requires independent studies to count each cell population of blood.
Задачей предлагаемого изобретения является создание способа визуализации форменных элементов крови, позволяющего на одном мазке произвести подсчет лейкоформулы, ретикулоцитов, тромбоцитов, а также эритроцитометрию и кариометрию, что повысит достоверность полученных результатов и сократит сроки исследования. The objective of the invention is to create a method of visualization of blood cells, allowing on one smear to count leukoformula, reticulocytes, platelets, as well as erythrocytometry and karyometry, which will increase the reliability of the results and shorten the study time.
Для достижения названного технического результата предлагается в способ Алексеева, включающий
- перемешивание крови с красителем азур II (путем трехразового перемещения смеси из меланжера на часовое стекло и обратно в меланжер),
- проведение окрашивания в меланжере в течение 0,5 - 2 ч,
- взбалтывание смеси в меланжере в течение 2 минут,
- сушку сделанных на предметных стеклах мазков,
- фиксацию их метиловым спиртом или раствором краски Май-Грюнвальда в течение 3 минут,
- промывку дистиллированной водой,
- докрашивание по Романовскому-Гимзе в течение 30-45 минут, внести следующие изменения:
- производить окрашивание нестабилизированной крови,
- вместо азур II использовать 1% раствор красителя бриллианткрезилблау,
- перемешивать кровь с красителем (осторожно) в течение 30 с в замкнутом объеме, например в пробирке, при комнатной температуре (18-20oС),
- окрашивать в течение 20-40 минут,
- мазки, приготовленные и подсушенные на воздухе, фиксировать в течение 3 минут в растворе-фиксаторе по Лейшману;
- докрашивать в течение 10 минут разбавленным раствором красителя по Лейшману, приготовленном на буферном растворе в соотношении 1:1, причем буфер готовится из 0,95% натрия фосфорнокислого двузамещенного и 0,907% калия фосфорнокислого однозамещенного (рН 6,8-7,2);
- вместо дистиллированной воды промывать мазок в том же буфере (для получения качественных мазков важно сохранение одного и того же значения рН среды при окраске и промывке мазка).To achieve the named technical result, it is proposed in the Alekseev method, including
- mixing blood with dye azur II (by moving the mixture three times from the melanger to the watch glass and back to the melanger),
- staining in melanger for 0.5 to 2 hours,
- shaking the mixture in melanger for 2 minutes,
- drying smears made on glass slides,
- fixing them with methyl alcohol or a solution of May-Grunwald paint for 3 minutes,
- rinsing with distilled water,
- repainting according to Romanovsky-Giemsa within 30-45 minutes, make the following changes:
- staining unstabilized blood,
- instead of azure II use 1% brilliantcresylblow dye solution,
- mix blood with a dye (carefully) for 30 s in a closed volume, for example in a test tube, at room temperature (18-20 o C),
- stain for 20-40 minutes,
- smears prepared and dried in air, fixed for 3 minutes in a fixative solution according to Leishman;
- stain for 10 minutes with a diluted dye solution according to Leishman prepared on a buffer solution in a ratio of 1: 1, and the buffer is prepared from 0.95% sodium phosphate disubstituted and 0.907% potassium phosphate monosubstituted (pH 6.8-7.2);
- Instead of distilled water, wash the smear in the same buffer (to obtain high-quality smears, it is important to maintain the same pH value when staining and washing the smear).
Микроскопирование проводить под иммерсией. Microscopy is carried out under immersion.
Предлагаемый метод исключает артефакты и травмируемость клеток. Значительно лучшее прокрашивание большинства клеточных структур сокращает длительность исследований за счет того, что на одном мазке одномоментно визуализируют все форменные элементы крови, что позволяет провести подсчет лейкоформулы, количества ретикулоцитов, тромбоцитов, а также эритроцитометрию и кариометрию. The proposed method eliminates artifacts and injuries of cells. Significantly better staining of most cellular structures reduces the duration of studies due to the fact that all blood cells are immediately visualized on one smear, which allows counting leukoformula, the number of reticulocytes, platelets, as well as erythrocytometry and karyometry.
Отличительными признаками заявленного способа является то, что окрашивание нестабилизированной крови производят 1% раствором бриллианткрезилблау в течение 20-40 мин при температуре 18-20oС, причем для обеспечения сохранности клеток крови объединение и ламинарное перемешивание крови с красителем проводят в замкнутом объеме, например в пробирке, в течение 30 с при той же температуре; приготовленный и высушенный мазок фиксируют в концентрированном растворе по Лейшману в течение 3 мин; докрашивают его в разбавленном растворе по Лейшману, приготовленном на буферном растворе, в течение 10 мин, и промывают в том же буферном растворе.Distinctive features of the claimed method is that the unstabilized blood is stained with 1% brilliantcresyl blau solution for 20-40 minutes at a temperature of 18-20 o C, and to ensure the preservation of blood cells, the combination and laminar mixing of blood with a dye is carried out in a closed volume, for example, in vitro, for 30 s at the same temperature; the prepared and dried smear is fixed in a concentrated solution according to Leishman for 3 minutes; stain it in a diluted Leishman solution prepared in a buffer solution for 10 min, and wash in the same buffer solution.
Ламинарное перемешивание красителя и крови позволяет максимально сохранить клетки в недеформированном состоянии и обеспечивает прокрашивание клеточных структур не только эритроидного, но и лимфоцитарного ряда. Laminar mixing of the dye and blood allows you to maximize the preservation of cells in an undeformed state and provides staining of cell structures not only of the erythroid, but also of the lymphocytic series.
Суправитальная окраска позволяет сохранить и выявить внутриклеточные элементы, содержащие рибонуклеопротеиды, в то время как фиксация мазка до окрашивания приводит к их гибели. Supravital staining allows you to save and identify intracellular elements containing ribonucleoproteins, while the fixation of the smear before staining leads to their death.
Последующая фиксация суправитально окрашенных мазков в растворе-красителе по Лейшману обеспечивает сохранность мазка длительное время и позволяет проводить многократное его микроскопирование. Subsequent fixation of supravitally stained smears in a Leishman dye solution ensures the preservation of the smear for a long time and allows for its multiple microscopy.
Докрашивание по Лейшману в разбавленном растворе, приготовленном на буферном растворе, и промывка тем же буферным раствором позволяют сохранять постоянным рН среды и при микроскопировании под иммерсией получить достоверную картину форменных элементов крови благодаря дифференциальному окрашиванию каждого вида клеток и внутриклеточных структур. Предлагаемый способ позволяет визуализировать одномоментно на одном мазке все форменные элементы крови, причем
- эритроциты представляют собой вытянутые эллипсоиды с резко оксифильной цитоплазмой, насыщенной гемоглобином, ядром интенсивного сине-фиолетового цвета с плотной структурой хроматина;
- ретикулоциты - вытянутые эллипсоиды с четко выделяющейся зернисто-ниточной субстанцией в виде синей сеточки на розовом (оксифильном) фоне и ядром от светло-синего до фиолетового цвета;
- базофилы - темно-фиолетовые клетки округлой формы с плохо просматривающимися ядрами из-за зернистости, которая накладывается на ядерные и цитоплазматические структуры;
- эозинофилы - клетки округлой формы с эксцентрично расположенным светло-фиолетовым ядром и светло-голубой цитоплазмой с круглой зернистостью от темно-красного до светло-розового цвета;
- псевдоэозинофилы - с бесцветной цитоплазмой и сегментированным ядром, хроматином светло-фиолетового цвета, светло-розовой зернистостью в виде веретена с острым концом;
- лимфоциты - округлой формы, с цитоплазмой голубого или серо-голубого цвета, ярко выраженной перинуклеарной зоной, ядро округлое, фиолетово-розового цвета;
- моноциты - очень крупные клетки угловато-округлой формы с протоплазмой от голубоватого до серовато-синего цвета, иногда с вакуолями, ядро различной формы, иногда эксцентрично расположенное;
- тромбоциты - мелкие клетки овальной формы с округлым ядром сине-фиолетового цвета, вокруг которого выделяется более светлая перинуклеарная зона, и цитоплазмой, окрашенной в цвета от нежно-розового до серовато-голубого.Leyshman staining in a diluted solution prepared on a buffer solution and washing with the same buffer solution allow the medium to remain constant and microscopic immersion to obtain a reliable picture of blood cells due to the differential staining of each type of cell and intracellular structures. The proposed method allows you to visualize simultaneously on one smear all blood cells, and
- erythrocytes are elongated ellipsoids with sharply oxyphilic cytoplasm saturated with hemoglobin, a nucleus of intense blue-violet color with a dense chromatin structure;
- reticulocytes - elongated ellipsoids with a clearly distinguished granular-filamentous substance in the form of a blue net on a pink (oxyphilic) background and a nucleus from light blue to violet;
- basophils - dark-violet cells of a round shape with poorly visible nuclei due to the granularity, which is superimposed on nuclear and cytoplasmic structures;
- eosinophils - cells of a rounded shape with an eccentrically arranged light purple nucleus and a light blue cytoplasm with round grain from dark red to light pink in color;
- pseudo-eosinophils - with a colorless cytoplasm and a segmented nucleus, chromatin of light purple color, light pink granularity in the form of a spindle with a sharp end;
- lymphocytes - round in shape, with cytoplasm of blue or gray-blue color, pronounced perinuclear zone, the nucleus is round, violet-pink;
- monocytes - very large cells of an angular-round shape with protoplasm from bluish to grayish-blue, sometimes with vacuoles, a nucleus of various shapes, sometimes eccentrically located;
- platelets are small oval-shaped cells with a rounded nucleus of blue-violet color, around which a lighter perinuclear zone is distinguished, and cytoplasm, which is colored from pale pink to grayish-blue.
Пример способа окрашивания пробы крови для визуализации форменных элементов. An example of a method for staining a blood sample to visualize shaped elements.
В пробирку вносят 0,1 мл краски 1% бриллианткрезилблау, приготовленного на физиологическом растворе (рН 2,95-3), добавляют 0,1 мл крови и перемешивают в течение 30 с при температуре 18-20oС, путем осторожного прокручивая пробирки, не допуская при этом резких движений.0.1 ml of 1% brilliantcresylblow paint prepared in physiological saline solution (pH 2.95-3) is added to the test tube, 0.1 ml of blood is added and stirred for 30 s at a temperature of 18-20 ° C, by carefully scrolling the tubes, while avoiding sudden movements.
Окраску производят при комнатной температуре (18-20oС) в течение 20-40 минут. Делают мазок на предметном стекле и подсушивают его. Фиксируют в концентрированном растворе красителя-фиксатора по Лейшману в течение 3 минут. Не промывая, помещают мазок для докрашивания на 10 минут в разбавленный раствор красителя по Лейшману, приготовленный на буферном растворе (рН 6,8-7,2). После докраски промывают мазок тем же буферным раствором. Мазок подсушивают и проводят микроскопирование под иммерсией. Для буфера готовится 2 раствора:
1. 9,5 г натрия фосфорнокислого двузамещенного безводного, или 22,7 г натрия фосфорнокислого двузамещенного 12-водного, доводится до 1000 мл дистиллированной водой;
2. 9,07 г калия фосфорнокислого однозамещенного доводится до 1000 мл дистиллированной водой.Coloring is carried out at room temperature (18-20 o C) for 20-40 minutes. Make a smear on a glass slide and dry it. Fix in a concentrated solution of dye-fixer according to Leishman for 3 minutes. Without washing, put a smear for staining for 10 minutes in a diluted dye solution according to Leishman prepared in a buffer solution (pH 6.8-7.2). After painting, the smear is washed with the same buffer solution. The smear is dried and microscopy is carried out under immersion. 2 solutions are prepared for the buffer:
1. 9.5 g of sodium phosphate disubstituted anhydrous, or 22.7 g of sodium phosphate disubstituted 12-water, adjusted to 1000 ml with distilled water;
2. 9.07 g of potassium phosphate monosubstituted is adjusted to 1000 ml with distilled water.
В колбу на 1000 мл вносится 63 мл первого раствора и 37 мл второго и доводится до 1000 мл дистиллированной водой (рН полученного раствора должно находиться в пределах 6,8-7,2). 63 ml of the first solution and 37 ml of the second are added to a 1000 ml flask and adjusted to 1000 ml with distilled water (the pH of the resulting solution should be in the range of 6.8-7.2).
Данные по микроскопированию представлены в таблицах 1-4. Microscopic data are presented in tables 1-4.
Таким образом, на одном мазке крови, приготовленном по предлагаемому способу, можно провести целый ряд исследований, что позволит уменьшить не только время на проведение исследований, но и сократить расход красителей и реактивов. Одновременно повышается достоверность результатов за счет исключения травмирования и повреждения клеток крови. Фиксация суправитально окрашенных мазков позволяет длительно хранить и многократно исследовать их. Thus, on one blood smear prepared by the proposed method, a number of studies can be carried out, which will reduce not only the time spent on research, but also reduce the consumption of dyes and reagents. At the same time, the reliability of the results is increased by eliminating trauma and damage to blood cells. Fixation of supravitally stained smears allows for a long time to be stored and repeatedly examined.
Список литературы
1. Антонов Б.И. и др. Лабораторные исследования в ветеринарии, Справочник, М., Агропромиздат, 1986, 199 с.List of references
1. Antonov B.I. and other Laboratory studies in veterinary medicine, Reference, M., Agropromizdat, 1986, 199 S.
2. Болотников И.А. Гематология птиц, Л., Наука, 1980, 116 с. 2. Bolotnikov I.A. Hematology of birds, L., Science, 1980, 116 p.
3. Клинико-лабораторные методы в гематологии, под редакцией В.Г.Михайлова и Г.А.Алексеева, Ташкент, Медицина, 1986 г. 3. Clinical and laboratory methods in hematology, edited by V. G. Mikhailov and G. A. Alekseev, Tashkent, Medicine, 1986
Claims (4)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2002112129/13A RU2224235C2 (en) | 2002-05-06 | 2002-05-06 | Method for visualization of poultry form blood elements upon single smear |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2002112129/13A RU2224235C2 (en) | 2002-05-06 | 2002-05-06 | Method for visualization of poultry form blood elements upon single smear |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2002112129A RU2002112129A (en) | 2004-01-27 |
| RU2224235C2 true RU2224235C2 (en) | 2004-02-20 |
Family
ID=32172653
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2002112129/13A RU2224235C2 (en) | 2002-05-06 | 2002-05-06 | Method for visualization of poultry form blood elements upon single smear |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2224235C2 (en) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2445628C1 (en) * | 2008-02-18 | 2012-03-20 | Сисмекс Корпорейшн | Reagent for thrombocyte measurement, reagents kit for thrombocyte measurement and method for thrombocyte measurement |
| RU2589679C1 (en) * | 2015-05-26 | 2016-07-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии - МВА имени К. И. Скрябина" (ФГБОУ ВО МГАВМиБ - МВА имени К. И. Скрябина) | Method for thrombocyte staining after exposure to modulated ultrasound |
| RU2612018C1 (en) * | 2015-12-17 | 2017-03-01 | Общество с ограниченной ответственностью "Медика Продакт" | Method for blood smears preparation for reticulocytes counting |
-
2002
- 2002-05-06 RU RU2002112129/13A patent/RU2224235C2/en not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Клинико-лабораторные методы в гематологии./Под ред. МИХАЙЛОВА В.Г. и АЛЕКСЕЕВА Г.А. - Ташкент, Медицина, 1986, с.43-53. АНТОНОВ Б.И. и др. Лабораторные исследования в ветеринарии./Справочник. - М.: Агропромиздат, 1986, с.50-161. БОЛОТНИКОВ И.А. Гематология птиц. - Л.: Наука, 1980, с.10-110. * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2445628C1 (en) * | 2008-02-18 | 2012-03-20 | Сисмекс Корпорейшн | Reagent for thrombocyte measurement, reagents kit for thrombocyte measurement and method for thrombocyte measurement |
| RU2589679C1 (en) * | 2015-05-26 | 2016-07-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии - МВА имени К. И. Скрябина" (ФГБОУ ВО МГАВМиБ - МВА имени К. И. Скрябина) | Method for thrombocyte staining after exposure to modulated ultrasound |
| RU2612018C1 (en) * | 2015-12-17 | 2017-03-01 | Общество с ограниченной ответственностью "Медика Продакт" | Method for blood smears preparation for reticulocytes counting |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2002112129A (en) | 2004-01-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Novo et al. | Accurate flow cytometric membrane potential measurement in bacteria using diethyloxacarbocyanine and a ratiometric technique | |
| CA2068471C (en) | Reagent and method for analyzing cells in urine | |
| EP0179107B1 (en) | Metachromatic dye sorption means for differential determination of sub-populations of lymphocytes | |
| JP4212827B2 (en) | Bone marrow nucleated cell automatic analysis method | |
| US5928949A (en) | Reagent and method for classifying leukocytes by flow cytometry | |
| Shapiro | Multistation multiparameter flow cytometry: a critical review and rationale | |
| EP0656540B1 (en) | Färbungsreagenz für biologische Proben mit extrazellulären Bestandteilen | |
| ES2902648T3 (en) | Nucleated Red Blood Cell Analysis Method and Automated Hematology Analyzer | |
| CA1191079A (en) | Metachromatic dye sorption means for differential determination of developmental stages of neutrophilic granulocytic cells and other leukocytes | |
| US5434081A (en) | Method of classifying leukocytes by flow cytometry | |
| US4500509A (en) | Metachromatic dye sorption and fluorescent light emmisive means for differential determination of developmental stages of neutrophilic granulocytic cells and other leukocytes | |
| EP1840571A2 (en) | Method and apparatus for measuring hematological sample | |
| Shapiro | Cell membrane potential analysis | |
| Jahanmehr et al. | Simple technique for fluorescence staining of blood cells with acridine orange. | |
| JPS59853B2 (en) | Hatsuketsukiyuuno Keikobunsekihou | |
| JPS61280565A (en) | Reagent for measuring reticulocyte for flow sightmetry | |
| EP0259834A2 (en) | Method of classifying leucocytes by flow cytometry | |
| CH648125A5 (en) | COMPOSITION SUITABLE FOR THE CONTROL OF FABRICS AND / OR BIOLOGICAL LIQUIDS AND USE OF THE SAME. | |
| CN108398361A (en) | The method and its application lapsed to using red blood cell DNA damage signal estimation blood disease | |
| RU2224235C2 (en) | Method for visualization of poultry form blood elements upon single smear | |
| Corash et al. | Enumeration of reticulocytes using fluorescence-activated flow cytometry | |
| CA1309327C (en) | Reagent and method for classifying leukocytes by flow cytometry | |
| Du et al. | A low-cost, accurate method for detecting reticulocytes at different maturation stages based on changes in the mitochondrial membrane potential | |
| US20080182290A1 (en) | Apparatus and methods for determining viability of cell-based products | |
| CN117233067B (en) | Leucocyte detection kit and application thereof |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20070507 |