Claims (12)
1. Способ получения шикимовой кислоты, включающий в себя стадии выращивания бактерии Bacillus subtilis, в которой снижена активность шикиматкиназы и которая обладает способностью к продукции шикимовой кислоты, в питательной среде и выделения шикимовой кислоты из культуральной жидкости. 1. A method of producing shikimic acid, comprising the steps of growing the bacterium Bacillus subtilis, in which the activity of shikimatin kinase is reduced and which is capable of producing shikimic acid in a nutrient medium and isolating shikimic acid from the culture fluid.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в клетке указанной бактерии увеличена активность шикиматдегидрогеназы. 2. The method according to p. 1, characterized in that in the cell of the specified bacteria increased activity of shikimat dehydrogenase.
3. Способ по п.2, отличающийся тем, что активность шикиматдегидрогеназы увеличена за счет увеличения числа копий гена, кодирующего шикиматдегидрогеназу, усовершенствования регулирующей экспрессию последовательности указанного гена или включения указанного гена в состав хромосомной ДНК бактерии. 3. The method according to claim 2, characterized in that the activity of shikimat dehydrogenase is increased by increasing the number of copies of the gene encoding shikimat dehydrogenase, improving regulating the expression of the sequence of the specified gene or the inclusion of the specified gene in the chromosomal DNA of the bacterium.
4. Способ по п.3, отличающийся тем, что в состав хромосомной ДНК включен ген шикиматдегидрогеназы, в котором его нативный промотор замещен сильным промотором или к которому добавлен сильный промотор. 4. The method according to claim 3, characterized in that the composition of the chromosomal DNA includes a gene of shikimat dehydrogenase, in which its native promoter is replaced by a strong promoter or to which a strong promoter is added.
5. Способ по п.4, отличающийся тем, что в клетке указанного штамма бактерии также увеличена активность ((3-дезокси-D-арабино-гептулозоновая кислота)-7 фосфат)-синтазы. 5. The method according to claim 4, characterized in that the activity of ((3-deoxy-D-arabino-heptulosonic acid) -7 phosphate) synthase is also increased in the cell of the indicated bacterial strain.
6. Способ по п.5, отличающийся тем, что активность ((3-дезокси-D-арабино-гептулозоновая кислота)-7-фосфат)-синтазы увеличена за счет увеличения числа копий гена, кодирующего ((3-дезокси-D-арабино-гептулозоновая кислота)-7-фосфат)-синтазу, усовершенствования регулирующей экспрессию последовательности в составе указанного гена или включения указанного гена в состав хромосомной ДНК указанной бактерии. 6. The method according to claim 5, characterized in that the activity of ((3-deoxy-D-arabino-heptulosonic acid) -7-phosphate) synthase is increased by increasing the number of copies of the gene encoding ((3-deoxy-D- arabino-heptulosonic acid) -7-phosphate) synthase, improvements regulating the expression of the sequence of the specified gene or the inclusion of the specified gene in the chromosomal DNA of the specified bacteria.
7. Штамм бактерии Bacillus subtilis 1DЗ (ВКПМ В-7755) - продуцент шикимовой кислоты. 7. The bacterial strain Bacillus subtilis 1D3 (VKPM B-7755) is a producer of shikimic acid.
8. Штамм бактерии Bacillus subtilis ID3/pAAP6, трансформированный плазмидой, содержащей ген, кодирующий ((3-дезокси-D-арабино-гептулозоновая кислота)-7-фосфат)-синтазу, - продуцент шикимовой кислоты. 8. The strain of the bacterium Bacillus subtilis ID3 / pAAP6, transformed with a plasmid containing the gene encoding the ((3-deoxy-D-arabino-heptulosonic acid) -7-phosphate) synthase, a producer of shikimic acid.
9. Способ получения шикимовой кислоты, включающий в себя стадии выращивания бактерии Bacillus subtilis, в которой снижена активность 5-енолпирувоилшикимат-3-фосфатсинтазы и который обладает способностью к продукции шикимовой кислоты, в питательной среде и выделения шикимовой кислоты из культуральной жидкости. 9. A method for producing shikimic acid, which includes the steps of growing the bacterium Bacillus subtilis, in which the activity of 5-enolpyruvoyl shikimate-3-phosphate synthase is reduced and which is capable of producing shikimic acid in a nutrient medium and isolating shikimic acid from the culture fluid.
10. Способ по п. 9, отличающийся тем, что в клетке указанного штамма увеличена активность шикиматдегидрогеназы. 10. The method according to p. 9, characterized in that in the cell of the specified strain increased activity of shikimat dehydrogenase.
11. Способ по п.10, отличающийся тем, что активность шикиматдегидрогеназы увеличена за счет увеличения числа копий гена, кодирующего шикиматдегидрогеназу, усовершенствования регулирующей экспрессию последовательности указанного гена или включения указанного гена в состав хромосомной ДНК указанной бактерии. 11. The method according to claim 10, characterized in that the activity of shikimat dehydrogenase is increased by increasing the number of copies of the gene encoding shikimat dehydrogenase, improving regulating the expression of the sequence of the specified gene or the inclusion of the specified gene in the chromosomal DNA of the specified bacteria.
12. Штамм бактерии, Bacillus subtilis DE 1, в котором активность 5-енолпирувоилшикимат-3-фосфатсинтазы снижена за счет мутации в гене aroE, - продуцент шикимовой кислоты. 12. The bacterial strain, Bacillus subtilis DE 1, in which the activity of 5-enolpyruvoyl chymate-3-phosphate synthase is reduced due to mutations in the aroE gene, is a producer of shikimic acid.
