RU2203678C1 - Regulator of acetaldehyde metabolism in body in oxidation of ethyl alcohol, agent and liquor containing thereof - Google Patents
Regulator of acetaldehyde metabolism in body in oxidation of ethyl alcohol, agent and liquor containing thereof Download PDFInfo
- Publication number
- RU2203678C1 RU2203678C1 RU2002106966/14A RU2002106966A RU2203678C1 RU 2203678 C1 RU2203678 C1 RU 2203678C1 RU 2002106966/14 A RU2002106966/14 A RU 2002106966/14A RU 2002106966 A RU2002106966 A RU 2002106966A RU 2203678 C1 RU2203678 C1 RU 2203678C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- acetaldehyde
- ethyl alcohol
- oxidation
- ethanol
- proanthocyanidins
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к средствам на основе природных компонентов, обладающим антитоксическим действием при алкогольном отравлении, и может быть использовано как в медицинской так и в пищевой промышленности. The invention relates to means based on natural components with antitoxic effects in alcohol poisoning, and can be used both in the medical and in the food industry.
В настоящее время олигомерные проантоцианидины - ОПЦ, представляющие собой суммарный экстракт, состоящий из проантоцианидинов, проантоцианидиновых фракций, очищенных от гидролизуемых танинов, алкалоидов, липидов, углеводов, простых сахаров, белков, аминокислот и органических кислот, индивидуальные проантоцианидины и их смеси нашли широкое применение. Проантоцианидины, известные как проантоцианины, процианодолы, антоцианогены или процианидины принадлежат к семейству флавоноидов и представляют собой олигомеры флаван-3-олов и/или флаван-3,4-олов. В порядке возрастания степени полимеризации проантоцианидины представляют собой мономеры (катехин, эпикатехин), а также их галлоильные эфиры по положению 3), олигомеры (проантоцианидины со степенью полимеризации от двух до пяти) и полимеры со степенью полимеризации более шести. Проантоцианидины включают, но не ограничиваются процианидинами, продельфинидинами, пропеларгонидинами и профисетинидинами. Проантоцианидины могут состоять в среднем от двух до 30 флаваноидных мономеров, так называемых полигидроксифлаван-3-олов, которые включают, но не органичиваются катехином, эпикатехином, галлокатехином, эпигаллокатехином и им подобными, предплчтительнее от двух до шести, связанных интерфлаваноидными связями В-типа между С4 и С6 или между С4 и С8. Полимеры включают димеры, тримеры, тетрамеры, пентамеры, олигомеры и длинные полимеры из флавоноидных момерных единиц до тех пор, пока эти полимеры проявляют указанную активность. Currently, oligomeric proanthocyanidins - OPCs, which are the total extract consisting of proanthocyanidins, proanthocyanidin fractions, purified from hydrolyzable tannins, alkaloids, lipids, carbohydrates, simple sugars, proteins, amino acids and organic acids, individual proanthocyanidins and their mixtures are widely used. Proanthocyanidins, known as proanthocyanins, procyanodoles, anthocyanogens or procyanidins, belong to the flavonoid family and are oligomers of flavan-3-ol and / or flavan-3,4-ol. In order of increasing degree of polymerization, proanthocyanidins are monomers (catechin, epicatechin), as well as their galloyl esters at position 3), oligomers (proanthocyanidins with a degree of polymerization from two to five) and polymers with a polymerization degree of more than six. Proanthocyanidins include, but are not limited to, procyanidins, prodelphinidins, propelargonidines, and profisetinidins. Proanthocyanidins can consist on average from two to 30 flavanoid monomers, the so-called polyhydroxyflavan-3-ol, which include, but are not limited to, catechin, epicatechin, gallocatechin, epigallocatechin and the like, preferably from two to six, interflavoid-type interconnected bonds between C4 and C6 or between C4 and C8. Polymers include dimers, trimers, tetramers, pentamers, oligomers and long polymers of flavonoid meter units, as long as these polymers exhibit the indicated activity.
Известно большое количество растений, содержащих проантоцианидины, и любое из этих растений может быть использовано для их получения. Проантоцианидин-содержащие растения входят в класс Coniferiae, включая растения из разряда Coniferales из семейства Pinacea (включая сосны); члены семейства Filices (включая пальмы); однодольные растения, образующие класс Arecales, включая членов семейств Pandanales, Arales, Najadales, Restonales, Poales (включая зерновые, такие как сорго, ячмень и др.), Juncalaes, Cyperales (включая кипарис), Typhales, Zingiverales, Liliales (включая лилии); двудольные растения из отрядов Laurales (включая лавровый лист, корицу), Fagales (включая дуб), Casual-males, Dilleniales, Malviales (включая хлопок), Salicales, Ericales (включая клюкву, голубику, рододендрон), Ebenales, Resales (включая розы, боярышник, шиповник, черемуху, ежевику и другие аналогичные ягоды, яблоки, персики, сливы), Fabales (включая бобовые), Myrtales, Proteales, Rhamnales (включая виноград), Sapindales, Caprifoliaceae (включая калину, жимолость и другие аналогичные ягоды). В настоящее время в качестве растительного источника для получения ОПЦ используют как правило Caprifoliaceae, включающие виды Viburnum, Rosaceae и Vitaceae, которые включают виды Vitis и хвойные семейства Pinaceae, как содержащие наибольшее количество олигомерных проантоцианидинов. A large number of plants containing proanthocyanidins are known, and any of these plants can be used to produce them. Proanthocyanidin-containing plants are in the class Coniferiae, including plants from the category of Coniferales from the Pinacea family (including pine trees); members of the Filices family (including palm trees); monocotyledonous plants forming the class Arecales, including members of the families Pandanales, Arales, Najadales, Restonales, Poales (including cereals such as sorghum, barley, etc.), Juncalaes, Cyperales (including cypress), Typhales, Zingiverales, Liliales (including lilies) ; dicotyledonous plants from the orders Laurales (including bay leaf, cinnamon), Fagales (including oak), Casual-males, Dilleniales, Malviales (including cotton), Salicales, Ericales (including cranberries, blueberries, rhododendron), Ebenales, Resales (including roses, hawthorn, rose hip, bird cherry, blackberry and other similar berries, apples, peaches, plums), Fabales (including legumes), Myrtales, Proteales, Rhamnales (including grapes), Sapindales, Caprifoliaceae (including viburnum, honeysuckle and other similar berries). Currently, as a plant source for the production of OPCs, as a rule, Caprifoliaceae are used, including the species Viburnum, Rosaceae and Vitaceae, which include the Vitis species and the coniferous family Pinaceae, as containing the highest number of oligomeric proanthocyanidins.
Обычно получение ОПЦ основано на процессе их экстракции из растительного сырья, хотя возможно получение ОПЦ и путем синтеза входящих в их состав органических соединений. Экстракция проантоцианидинов из растительного материала проводится различными известными методами. Например, исходный растительный материал измельчается и экстрагируется растворителем, одним или несколькими. Гидрофильные или липофильные растворители могут быть использованы отдельно, последовательно или в комбинации. Предпочтительными из таких растворителей являются вода, спирты (этанол, метанол, изопропанол), кетоны (ацетон, метилэтилкетон) и эфиры (метилацетат и этилацетат). Температура экстракции в общем от 0 до 100oС, предпочтительнее от 10 до 55oС (п. Канады 2302743; Chemical & Pharmaceutical Bulletin, 38, 321 (1990) и 40, 889-898 (1992); Acta Derm. Venereol. (Stockh), 78, 428-432 (1998).Usually, the preparation of OPC is based on the process of their extraction from plant materials, although it is possible to obtain the OPC by synthesizing their organic compounds. Extraction of proanthocyanidins from plant material is carried out by various known methods. For example, the source plant material is ground and extracted with a solvent, one or more. Hydrophilic or lipophilic solvents may be used individually, sequentially, or in combination. Preferred of such solvents are water, alcohols (ethanol, methanol, isopropanol), ketones (acetone, methyl ethyl ketone) and ethers (methyl acetate and ethyl acetate). The extraction temperature is generally from 0 to 100 o C, more preferably from 10 to 55 o C (n. Canada 2302743; Chemical & Pharmaceutical Bulletin, 38, 321 (1990) and 40, 889-898 (1992); Acta Derm. Venereol. (Stockh), 78, 428-432 (1998).
В основном олигомерные проантоцианидины (ОПЦ) применяют как природные антиоксиданты, обладающие широким спектром биологической активности. Они являются не только мощными антиоксидантами и ловушками свободных радикалов (п. США 4797421), но еще и обладают антибактериальной (п. США 6210681), антивирусной, противоопухолевой, антивоспалительной, антиаллергенной и сосудорасслабляющей активностью. Проантоцианидины ингибируют процессы перекисного окисления липидов, агрегацию тромбоцитов, снижают хрупкость и проницаемость капилляров (п. США 6294190), а также влияют на активность ряда ферментных систем, включая каскад арахидоновой кислоты (п. США 6291517). Показано, что такими свойствами обладают как индивидуальные проантоцианидины, так и их смеси, а также экстракты их содержащие, при этом использование проантоцианидинов осуществляют в различной форме в виде фармацевтической композиции, пищевых добавок и пищевых продуктов, а также напитков. Basically, oligomeric proanthocyanidins (OPCs) are used as natural antioxidants with a wide spectrum of biological activity. They are not only powerful antioxidants and traps of free radicals (p. US 4797421), but also have antibacterial (p. US 6210681), antiviral, antitumor, anti-inflammatory, anti-allergenic and vasodilator activity. Proanthocyanidins inhibit lipid peroxidation processes, platelet aggregation, reduce the fragility and permeability of capillaries (U.S. Pat. No. 6294190), and also affect the activity of a number of enzyme systems, including the arachidonic acid cascade (U.S. Pat. No. 6291517). It is shown that both individual proanthocyanidins and their mixtures, as well as extracts containing them, possess such properties, while the use of proanthocyanidins is carried out in various forms in the form of pharmaceutical compositions, food additives and food products, as well as drinks.
Авторами после длительных исследований впервые обнаружено новое свойство ОПЦ, а именно их способность воздействовать на ферменты этанолокисляющей системы организма, регулируя обмен ацетальдегида при окислении этилового спирта, смягчая его поражающее действие на организм. After long-term studies, the authors first discovered a new property of OPC, namely their ability to act on the enzymes of the ethanol-oxidizing system of the body, regulating the exchange of acetaldehyde during the oxidation of ethyl alcohol, softening its damaging effect on the body.
Хорошо известно, что в последние годы наблюдается значительное увеличение потребления алкоголя. По некоторым оценкам социальная стоимость употребления алкоголя для общества оценивается в различных государствах на уровне 2 - 3% от валового национального продукта (Европейский план действий по борьбе с потреблением алкоголя. ЕРБ ВОЗ, 1992;5). It is well known that in recent years there has been a significant increase in alcohol consumption. According to some estimates, the social cost of drinking alcohol for society is estimated in different countries at the level of 2–3% of the gross national product (European action plan to combat alcohol consumption. WHO / Europe, 1992; 5).
Известны препараты антитоксического действия при воздействии алкоголя на организм, в которых основным действующим инградиентом является янтарная кислота, представляющая собой природный метаболит, обеспечивающий накопление энергии в митохондриях, что способствует восстановлению энергетического потенциала и уменьшает алкогольное опьянение (п.п. РФ 2039556, 2160589, 2012350). Known antitoxic drugs when exposed to alcohol on the body, in which the main active ingredient is succinic acid, which is a natural metabolite that provides energy storage in the mitochondria, which helps restore energy potential and reduces alcohol intoxication (pp. RF 2039556, 2160589, 2012350 )
Известно применение в качестве антитоксического средства при алкогольном отравлении препарата "Алко-Зельтцер", содержащего лимонную, ацетилсалициловую кислоты и другие компоненты (инструкция-вкладыш к лекарственному препарату Alka-Seltzer, фирма Miles, Великобритания). Однако присутствие в препарате аспирина приводит к диспептическим явлениям, изменениям в слизистой желудка, нарушениям функции нервной системы и процессов гемокоагуляции. It is known that the drug Alco-Seltzer containing citric, acetylsalicylic acid and other components is used as an antitoxic agent for alcohol poisoning (Alka-Seltzer, Miles, UK). However, the presence of aspirin in the preparation leads to dyspeptic phenomena, changes in the gastric mucosa, impaired function of the nervous system and hemocoagulation processes.
Известно применение этиловых эфиров аскорбиновой кислоты для снижения тяжести абстинентного синдрома, коррекции состояния алкогольного опьянения (п. РФ 2112510). It is known to use ethyl esters of ascorbic acid to reduce the severity of withdrawal symptoms, and to correct the state of intoxication (Section RF 2112510).
Одним из основополагающих факторов токсикологической характеристики при потреблении этанола является образование ацетальдегида, который в силу своей высокой реакционной способности не может находиться в организме в свободном виде и участвует в химических реакциях со многими биологически активными соединениями, вызывая широкий спектр негативных последствий в организме. Высокая концентрация ацетальдегида оказывает отрицательное воздействие как на печень, основной орган детоксикации в организме, так и на мозг в виде продуктов конденсации с катехоламинами и индоламинами, что способствует ускоренному формированию физиологической зависимости от алкоголя по наркотическому типу. One of the fundamental toxicological factors in the consumption of ethanol is the formation of acetaldehyde, which, due to its high reactivity, cannot be in the body in its free form and is involved in chemical reactions with many biologically active compounds, causing a wide range of negative effects in the body. A high concentration of acetaldehyde has a negative effect on the liver, the main organ of detoxification in the body, and on the brain in the form of condensation products with catecholamines and indolamines, which contributes to the accelerated formation of a physiological dependence on alcohol by narcotic type.
Наиболее близкими к заявляемому изобретению являются препараты, ингибирующие активность фермента альдегиддегидрогеназы, метаболизирующей токсичный продукт окисления этилового спирта ацетальдегид в менее токсичную уксусную кислоту. К таким препаратам можно отнести дисульфирам (антабус®), коприн, темпосил®, нитрефазол и др. Однако они оказывают весьма существенное негативное влияние на организм. (Eriksson C.J. The role of acetaldehyde in the action of alcohol (update 2000), Alcohol Clin Exp Res, 2001, 25, p.15S-32S), так как образующийся ацетальдегид накапливается в организме в значительных количествах, что приводит к сильному отравлению, сопровождаемому всеми симптомами химической интоксикации - тошнота, рвота, головная боль, упадок сил, то есть к состоянию тяжелого похмелья, усиленного в несколько раз.Closest to the claimed invention are drugs that inhibit the activity of the enzyme aldehyde dehydrogenase, which metabolizes the toxic product of the oxidation of ethyl alcohol to acetaldehyde into less toxic acetic acid. These drugs include disulfiram (antabus ® ), cooprin, temposil ® , nitrephasol, etc. However, they have a very significant negative effect on the body. (Eriksson CJ The role of acetaldehyde in the action of alcohol (update 2000), Alcohol Clin Exp Res, 2001, 25, p.15S-32S), since the resulting acetaldehyde accumulates in the body in significant quantities, which leads to severe poisoning, accompanied by all the symptoms of chemical intoxication - nausea, vomiting, headache, loss of strength, that is, to a severe hangover, intensified several times.
Ацетальдегид провоцирует выброс катехоламинов и индоламинов, вызывает лавинообразную активацию перекисного окисления липидов биологических мембран, нарушает множество рецепторных процессов. Избыток ацетальдегида образует аддукты с гемоглобином, белками плазмы мозга и других органов, приводит к торможению переноса восстановительных эквивалентов по дыхательной цепи митохондрий, провоцируя множественные гипоксические и ишемические явления, нарастающие и приобретающие устойчивый характер по мере увеличения концентрации ацетальдегида. Acetaldehyde provokes the release of catecholamines and indolamines, causes an avalanche-like activation of lipid peroxidation of biological membranes, disrupts many receptor processes. An excess of acetaldehyde forms adducts with hemoglobin, plasma proteins of the brain and other organs, inhibits the transfer of reducing equivalents along the mitochondrial respiratory chain, provoking multiple hypoxic and ischemic phenomena that increase and become stable as acetaldehyde concentration increases.
Отсюда вытекает насущная необходимость получения средств, способных активно включаться в метаболизм этилового спирта и регулировать обмен ацетальдегида, смягчая его поражающее действие на организм. This implies the urgent need to obtain funds that can actively engage in the metabolism of ethyl alcohol and regulate the metabolism of acetaldehyde, mitigating its damaging effect on the body.
Технической задачей заявляемого изобретения является регуляция обмена ацетальдегида в организме млекопитающих при окислении этилового спирта путем воздействия на ферменты этанолокисляющей системы организма. The technical task of the invention is the regulation of acetaldehyde metabolism in the body of a mammal during the oxidation of ethyl alcohol by acting on the enzymes of the ethanol-oxidizing system of the body.
Поставленная задача решается применением в качестве регулятора обмена ацетальдегида в организме млекопитающих при окислении этилового спирта олигомерных проантоцианидинов (ОПЦ). The problem is solved by the use of oligomeric proanthocyanidins (OPCs) as the regulator of the exchange of acetaldehyde in mammals during the oxidation of ethyl alcohol.
Поставленная задача решается также средством, регулирующим обмен ацетальдегида в организме млекопитающих при окислении этилового спирта, содержащим в качестве действующего начала олигомерные проантоцианидины. The problem is also solved by a means of regulating the exchange of acetaldehyde in the body of a mammal during the oxidation of ethyl alcohol, containing oligomeric proanthocyanidins as an active principle.
Поставленная задача решается также напитком, содержащим этиловый спирт и олигомерные проантоцианидины в эффективном количестве. The problem is also solved by a drink containing ethyl alcohol and oligomeric proanthocyanidins in an effective amount.
Техническим результатом заявленного изобретения является снижение концентрации ацетальдегида в организме при массированном окислении этанола при использовании ОПЦ. The technical result of the claimed invention is to reduce the concentration of acetaldehyde in the body during the massive oxidation of ethanol when using OPC.
В настоящем изобретении для получения ОПЦ может быть использован любой известный способ экстракции подходящего растительного сырья, известный среднему специалисту, а также искусственно синтезированная смесь ОПЦ, содержащая полимеры полигидроксифлаван-3-олов, имеющие от двух до 30 флавоноидных единиц, предпочтительнее от двух до шести, связанных интерфлаваноидными связями В-типа между С4 и С6 или между С4 и С8. Полимеры включают димеры, тримеры, тетрамеры, пентамеры, олигомеры и длинные полимеры из флавоноидных момерных единиц, до тех пор, пока эти полимеры проявляют указанную активность. In the present invention, any known method of extracting a suitable plant material known to the average person skilled in the art, as well as an artificially synthesized mixture of OPC containing polyhydroxyflavan-3-ol polymers having from two to 30 flavonoid units, preferably from two to six, can be used to produce OPCs. connected by B-type interflavanoid bonds between C4 and C6 or between C4 and C8. Polymers include dimers, trimers, tetramers, pentamers, oligomers and long polymers of flavonoid measuring units, as long as these polymers exhibit the indicated activity.
В частности, для получения проантоцианидинового экстракта, не содержащего токсичных растворителей, мы применили экстракцию 40% (об/об) водным этанолом. Для этого растительное сырье, содержащее ОПЦ (нами использовался отжим калины Viburnum), высушивают при температуре, не превышающей 50oС, и измельчают для ускорения и улучшения процесса экстракции. Измельченное сырье экстрагируют 40% этанолом, обычно, при соотношении сырья к экстрагенту 1:1. Полученный экстракт упаривают на роторном испарителе при температуре не выше 30oС для удаления этанола. Выпавший осадок удаляют центрифугированием, надосадочную жидкость фильтруют через мембранный фильтр (0,45 мкМ). Полученный раствор суммарной фракции фенольных соединений экстрагируют неполярным растворителем (гексаном, петролейным эфиром или подобным растворителем) для удаления неполярных примесей. Неполярную фазу отбрасывают, а водную фазу лиофилизируют перед дальнейшей очисткой или оставляют, так как есть.In particular, to obtain a proanthocyanidin extract that does not contain toxic solvents, we used extraction with 40% (v / v) aqueous ethanol. For this, vegetable raw materials containing OPC (we used Viburnum viburnum squeeze) are dried at a temperature not exceeding 50 o C and crushed to speed up and improve the extraction process. The crushed raw materials are extracted with 40% ethanol, usually with a ratio of raw materials to extractant 1: 1. The resulting extract is evaporated on a rotary evaporator at a temperature not exceeding 30 o C to remove ethanol. The precipitate formed is removed by centrifugation, and the supernatant is filtered through a membrane filter (0.45 μM). The resulting solution of the total fraction of phenolic compounds is extracted with a non-polar solvent (hexane, petroleum ether or a similar solvent) to remove non-polar impurities. The non-polar phase is discarded, and the aqueous phase is lyophilized before further purification or left as it is.
На следующем этапе очистки полученную водную фракцию наносят на хроматографическую колонку с Сефадексом LH-20 или LH-60, уравновешенную дистиллированной водой. Данная процедура позволяет отделить полифенольные соединения, которые адсорбируются на колонке от органических кислот и углеводов, не задерживающихся на сорбенте. Фракцию фенольных кислот отделяли, элюируя колонку 20% раствором этилового спирта. Фракцию олигомерных проантоцианидинов элюировали 70% ацетоном, который удаляли на роторном испарителе при температуре <30oС. Содержание проантоцианидинов в полученном экстракте определяют колориметрической реакцией с ванилином (Sun, В. S., J. М. Ricardo-da-Silva, et al. "Critical factors of vanillin assay for catechins and proanthocyanidins. " Journal of Agricultural and Food Chemistry, 1998, 46(10): 4267-4274). Полученную фракцию проантоцианидинов лиофилизируют и хранят при температуре 4oС в темном месте для уменьшения эффекта воздействия кислорода. Суммарное содержание полифенолов (Singleton, V. L., R. Orthofer, et al. Analysis of total phenols and other oxidation substrates and antioxidants by means of Folin - Ciocalteu reagent. Oxidants and Antioxidants, Pt A. L. Packer. San Diego, Academic Press Inc. 1999, 299: 152-178) в полученном препарате составило от 30 до 90%. В качестве стандарта использовали (+)-катехин. Полученный раствор олигомерных проантоцианидинов лиофилизировали и использовали в дальнейших опытах.In the next purification step, the resulting aqueous fraction was applied to a Sephadex LH-20 or LH-60 chromatographic column, equilibrated with distilled water. This procedure allows you to separate polyphenolic compounds that are adsorbed on the column from organic acids and carbohydrates that do not linger on the sorbent. The phenolic acid fraction was separated, eluting the column with a 20% ethyl alcohol solution. The oligomeric proanthocyanidin fraction was eluted with 70% acetone, which was removed on a rotary evaporator at a temperature of <30 ° C. The content of proanthocyanidins in the obtained extract was determined by colorimetric reaction with vanillin (Sun, B. S., J. M. Ricardo-da-Silva, et al. . "Critical factors of vanillin assay for catechins and proanthocyanidins." Journal of Agricultural and Food Chemistry, 1998, 46 (10): 4267-4274). The obtained fraction of proanthocyanidins is lyophilized and stored at 4 ° C in a dark place to reduce the effect of oxygen exposure. Total Polyphenol Content (Singleton, VL, R. Orthofer, et al. Analysis of total phenols and other oxidation substrates and antioxidants by means of Folin - Ciocalteu reagent. Oxidants and Antioxidants, Pt. AL Packer. San Diego, Academic Press Inc. 1999, 299: 152-178) in the resulting preparation ranged from 30 to 90%. As the standard used (+) - catechin. The resulting solution of oligomeric proanthocyanidins was lyophilized and used in further experiments.
Ранее установлено, что выделенные из растительного сырья или синтезированные ОПЦ вводят в организм, как правило, сами по себе, но возможно их использование и в смеси с носителем, или включая в носитель, или разбавляя носителем. При этом в качестве носителя могут быть использованы лактоза, декстроза, сахароза, сорбит, маннит, крахмал, альгинаты, желатин, целлюлоза, микрокристаллическая целлюлоза, вода, спирт и другие подходящие для этой цели носители. It was previously established that isolated from plant materials or synthesized OPCs are introduced into the body, as a rule, by themselves, but it is possible to use them in a mixture with a carrier, or including it in a carrier, or diluting with a carrier. Moreover, lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, starch, alginates, gelatin, cellulose, microcrystalline cellulose, water, alcohol and other carriers suitable for this purpose can be used as a carrier.
Для человека доза ОПЦ, достаточная для регуляции обмена ацетальдегида при употреблении алкоголя в количестве, эквивалентном 100 мл абсолютного спирта, составляет 50 - 400 мг и более в любом количестве, оказывающем необходимый эффект, так как проведенные ранее многочисленные исследования не обнаруживают вредного влияния на организм ОПЦ. Конкретно вводимое достаточное количество ОПЦ определяют с учетом различных факторов, включая состояние организма, возраст, пол, массу тела конкретного индивидуума и т.д. For humans, a dose of OPC sufficient to regulate the metabolism of acetaldehyde when drinking alcohol in an amount equivalent to 100 ml of absolute alcohol is 50 to 400 mg or more in any amount that has the desired effect, since numerous studies previously conducted do not reveal harmful effects on the body of OPC . A specific amount of OPC that is specifically administered is determined taking into account various factors, including the state of the body, age, gender, body weight of a particular individual, etc.
Кроме того, ОПЦ могут быть непосредственно введены в напиток, содержащий алкоголь, для регуляции обмена ацетальдегида в организме при окислении этилового спирта в пределах от 0.1 до 50 мас.% таким образом, чтобы содержание ОПЦ в напитке соответствовало обозначенной выше пропорции. In addition, OPC can be directly introduced into a drink containing alcohol to regulate the exchange of acetaldehyde in the body during the oxidation of ethyl alcohol in the range from 0.1 to 50 wt.% So that the content of OPC in the drink corresponds to the above ratio.
Изучение влияния комплекса олигомерных проантоцианидинов на активность ферментов этанолокисляющей системы и динамику содержания этанола и ацетальдегида осуществляли на примере комплекса, полученного из отжима калины Viburnum, в условиях как однократного приема этанола добровольцами-мужчинами, так и при длительной алкоголизации животных. Для доказательства приведенного результата использовали напиток на основе 40% этанола, содержащего олиномерные проантоцианиды, полученные из отжима калины Viburnum. The effect of the complex of oligomeric proanthocyanidins on the activity of the enzymes of the ethanol oxidizing system and the dynamics of the content of ethanol and acetaldehyde was studied using the example of a complex obtained from Viburnum squeezed squeeze under conditions of both single use of ethanol by male volunteers and long-term alcoholization of animals. To prove this result, we used a drink based on 40% ethanol containing olinomeric proanthocyanides obtained from Viburnum viburnum squeezed.
1. Изучение влияния ОПЦ из отжима калины на ферменты этанолокисляющей системы при однократном употреблении алкоголя добровольцами- мужчинами. 1. The study of the effect of OPC from the squeezing of viburnum on the enzymes of the ethanol-oxidizing system with a single use of alcohol by male volunteers.
В исследовании участвовали добровольцы-мужчины в возрасте 25-30 лет не употреблявшие алкоголь в течение последних трех недель. Добровольцы дали свое осознанное согласие на участие в эксперименте. Исследование проводилось на базе наркологического стационара г. Владивостока (наркологическая клиника профессора В. В. Шорина) при участии квалифицированного медицинского персонала. В эксперименте принимали участие 20 человек, разделенных на две группы по 10 испытуемых в каждой. Участники 1-й группы (контроль) получали однократно 40% этанол в дозе 3 мл/кг. Испытуемые 2-й группы (опыт) - 40%-й этанол в той же дозе с добавкой ОПЦ из отжима калины в количестве 300 мг/л. Для определения биохимических показателей использовали образцы капиллярной крови (0.6 мл), полученной пункцией из кончика пальца. Образцы у испытуемых были взяты до приема алкоголя (фон) и через 1, 2, 3 и 4 часа после его приема. The study involved male volunteers aged 25-30 who did not drink alcohol in the last three weeks. Volunteers gave their informed consent to participate in the experiment. The study was conducted on the basis of the drug treatment hospital in Vladivostok (drug treatment clinic of Professor V.V. Shorin) with the participation of qualified medical personnel. The experiment involved 20 people, divided into two groups of 10 subjects in each. Participants of the 1st group (control) received once 40% ethanol at a dose of 3 ml / kg. Subjects of the 2nd group (experiment) - 40% ethanol in the same dose with the addition of OPC from squeezed squeeze in the amount of 300 mg / l. To determine the biochemical parameters, capillary blood samples (0.6 ml) obtained by puncture from the fingertip were used. Samples from subjects were taken before drinking alcohol (background) and 1, 2, 3, and 4 hours after it was taken.
После приема алкоголя испытуемыми наблюдалось быстрое увеличение его концентрации в крови, которая к концу первого часа достигла максимума и составила 16,3 mM как в 1-й, так и во 2-й группах. Следовательно, проантоцианидины не оказывали влияния на скорость всасывания этилового спирта в желудочно-кишечном тракте. Начиная со второго часа эксперимента, в крови испытуемых контрольной группы наблюдали плавное снижение концентрации этилового спирта, которая к концу четвертого часа достигла 5,4 mM. Во 2-й группе содержание этанола в течение второго часа эксперимента в крови испытуемых не изменялось и находилась на уровне 16,3 mM. Снижение концентрации этанола зафиксировано только через 3 часа после его приема. То есть, в период между 1-м и 2-м часами образовалось "плато" на уровне 16,3 mM, которое отсутствовало в контрольной группе. Также следует обратить внимание на тот факт, что в опытной группе к концу 4-го часа концентрация этанола составила 7,8 mM, что на 50% превышало уровень этанола в контрольной группе. Динамика изменения дегидрогеназной активности АДГ в обеих группах была одинаковой во все сроки эксперимента, что свидетельствует об отсутствии ингибирующего влияния проантоцианидинов на данный фермент в условиях in vivo и равной скорости наработки ацетальдегида. After alcohol intake by the subjects, a rapid increase in its concentration in the blood was observed, which reached a maximum by the end of the first hour and amounted to 16.3 mM in both the 1st and 2nd groups. Consequently, proanthocyanidins did not affect the rate of absorption of ethyl alcohol in the gastrointestinal tract. Starting from the second hour of the experiment, a smooth decrease in the concentration of ethyl alcohol was observed in the blood of the subjects of the control group, which reached 5.4 mM by the end of the fourth hour. In the 2nd group, the ethanol content during the second hour of the experiment in the blood of the subjects did not change and was at the level of 16.3 mM. A decrease in ethanol concentration was recorded only 3 hours after its intake. That is, in the period between the 1st and 2nd hours a “plateau” formed at the level of 16.3 mM, which was absent in the control group. You should also pay attention to the fact that in the experimental group at the end of the 4th hour the ethanol concentration was 7.8 mM, which was 50% higher than the level of ethanol in the control group. The dynamics of changes in the dehydrogenase activity of ADH in both groups was the same throughout the experiment, which indicates the absence of the inhibitory effect of proanthocyanidins on this enzyme in vivo and at the same rate of acetaldehyde production.
Содержание ацетальдегида в крови испытуемых 2-й группы во все сроки эксперимента было достоверно ниже, чем в контрольной (таблица 1). Повышение его содержания происходило более плавно и в интервале между 1-м и 3-м часами не было такого резкого увеличения концентрации ацетальдегида, которое отмечалось в 1-й группе (рост до 4,5 mM/л). К концу четвертого часа эксперимента уровень ацетальдегида в крови испытуемых 2-й группы приблизился к исходному, тогда, как в контрольной группе оставался на 65% (Р<0,001) выше фонового показателя. The content of acetaldehyde in the blood of subjects of the 2nd group at all periods of the experiment was significantly lower than in the control (table 1). The increase in its content occurred more smoothly and in the interval between the 1st and 3rd hours there was no such a sharp increase in the concentration of acetaldehyde, which was noted in the 1st group (increase to 4.5 mM / L). By the end of the fourth hour of the experiment, the level of acetaldehyde in the blood of subjects of the 2nd group approached the initial one, while in the control group it remained 65% (P <0.001) higher than the background value.
Аналогичная картина наблюдалась и в динамике изменения активности АлДГ. У испытуемых опытной группы, начиная со второго часа эксперимента, активность АлДГ была достоверно ниже таковой в контроле. Известно, что увеличение активности АлДГ происходит за счет адаптивной индукции так называемой АлДГ2, митохондриального фермента с низкой Км к ацетальдегиду, которая является основным ферментом, осуществляющим окисление ацетальдегида (Goedde, H. W. and D. P. Agarwal. "Pharmacogenetics of aldehyde dehydrogenase (ALDH)." Pharmacol Ther 1990, 45(3): 345-371). Индукция АлДГ1 - фермента с высокой Км к ацетальдегиду, лежащей в области милимолярных концентраций, происходит только при достижении очень высоких концентраций ацетальдегида, что практически не встречается у людей не имеющих дефицита АлДГ2 (европеоидов)(там же).A similar picture was observed in the dynamics of changes in ALDH activity. In the subjects of the experimental group, starting from the second hour of the experiment, the activity of AlDH was significantly lower than that in the control. It is known that an increase in the activity of AlDH occurs due to adaptive induction of the so-called AlDH2, a mitochondrial enzyme with low K m to acetaldehyde, which is the main enzyme that oxidizes acetaldehyde (Goedde, HW and DP Agarwal. "Pharmacogenetics of aldehyde dehydrogenase (ALDH)." Pharmacol Ther 1990, 45 (3): 345-371). The induction of AlDH1, an enzyme with a high K m to acetaldehyde lying in the region of millimolar concentrations, occurs only when very high concentrations of acetaldehyde are reached, which is practically not found in people who do not have a deficiency of AlDH2 (Caucasians) (ibid.).
Принимая во внимание индуцируемый характер АлДГ, адаптивный биосинтез которой обусловлен увеличением концентрации субстрата, можно заключить, что сниженная активность АлДГ в крови испытуемых опытной группы обусловлена более низким содержанием субстрата, нежели ингибированием фермента проантоцианидинами. Иначе ингибирующующее воздействие на АлДГ (Kitson, Т. М., К. Е. Kitson, et al. "Interaction of sheep liver cytosolic aldehyde dehydrogenase with quercetin, resveratrol and diethylstilbestrol." Chemico-Biological Interactions 2001, 130(1-3): 57-69) должно было бы сопровождаться увеличением концентрации субстрата, тогда как мы наблюдаем противоположную картину. Taking into account the inducible nature of ALDH, the adaptive biosynthesis of which is due to an increase in substrate concentration, it can be concluded that the decreased ALDH activity in the blood of test subjects is due to a lower substrate content than proanthocyanidins inhibition of the enzyme. Otherwise, the inhibitory effect on ADH (Kitson, T. M., K. E. Kitson, et al. "Interaction of sheep liver cytosolic aldehyde dehydrogenase with quercetin, resveratrol and diethylstilbestrol." Chemico-Biological Interactions 2001, 130 (1-3) : 57-69) would have to be accompanied by an increase in substrate concentration, while we are seeing the opposite picture.
Так как активность АДГ в крови испытуемых обеих групп достоверно не отличается, то скорость наработки ацетальдегида также должна быть равной. Однако более низкий уровень содержания ацетальдегида и активности АлДГ, при повышенном содержании этанола в крови испытуемых опытной группы, указывает на протекающий процесс наработки этанола из ацетальдегида. Данный процесс может протекать как за счет активизации редуктазной активности АДГ (Gershman, H. "Acetaldehyde-ethanol exchange in vivo during ethanol oxidation. " Arch Biochem Biophys 1975, 168(1): 327-330), так и за счет реакции дисмутации ацетальдегида с участием того же фермента (Henehan, G. Т., G. L. Kenyon, et al. "The oxidation of aldehydes by horse liver alcohol dehydrogenase. " Adv Exp Med Biol 1993, 328: 481-491; Henehan, G. Т. and N. J. Oppenheimer "Horse liver alcohol dehydrogenase-catalyzed oxidation of aldehydes: dismutation precedes net production of reduced nicotinamide adenine dinucleotide. " Biochemistry 1993, 32(3): p 735-738.). Этот биохимический механизм может лежать в основе образования "плато" концентрации этанола между 1-м и 2-м часами эксперимента. Since the activity of ADH in the blood of the test subjects of both groups is not significantly different, the rate of production of acetaldehyde should also be equal. However, a lower level of acetaldehyde and ALDH activity, with an increased ethanol content in the blood of subjects of the experimental group, indicates the ongoing process of ethanol production from acetaldehyde. This process can occur both due to the activation of the reductase activity of ADH (Gershman, H. "Acetaldehyde-ethanol exchange in vivo during ethanol oxidation." Arch Biochem Biophys 1975, 168 (1): 327-330), as well as due to the acetaldehyde dismutation reaction involving the same enzyme (Henehan, G. T., GL Kenyon, et al. "The oxidation of aldehydes by horse liver alcohol dehydrogenase." Adv Exp Med Biol 1993, 328: 481-491; Henehan, G. T. and NJ Oppenheimer "Horse liver alcohol dehydrogenase-catalyzed oxidation of aldehydes: dismutation precedes net production of reduced nicotinamide adenine dinucleotide." Biochemistry 1993, 32 (3): p 735-738.). This biochemical mechanism may underlie the formation of a "plateau" of ethanol concentration between the 1st and 2nd hours of the experiment.
2. Изучение влияния КОПЦ из отжима калины на ферменты этанолокисляющей системы в условиях длительного потребления этилового спирта. 2. The study of the effect of COPC from the squeeze of the viburnum on the enzymes of the ethanol oxidizing system under conditions of long-term consumption of ethyl alcohol.
В работе использовали крыс самцов линии Вистар (питомник Столбовая, Московская обл. ) массой 180-200 г. Все крысы находились в индивидуальных клетках и получали стандартный рацион питания. Предварительно было проведено 10-дневное тестирование животных на предпочтение 15% этанола или воды при одновременном доступе к обеим жидкостям (Буров, В., В. Н. Жуков, et al. Методические рекомендации по экспериментальному (фармакологическому) изучению препаратов, предлагаемых для клинической апробации в качестве средств для лечения и профилактики алкоголизма. М., 1980, Фармакол. ком. МЗ СССР). We used rats of males of the Wistar strain (Stolbovaya nursery, Moscow region) weighing 180-200 g. All rats were in individual cages and received a standard diet. Previously, a 10-day animal test was carried out for the preference of 15% ethanol or water with simultaneous access to both fluids (Burov, V., V.N. Zhukov, et al. Guidelines for the experimental (pharmacological) study of drugs proposed for clinical testing as means for the treatment and prevention of alcoholism. M., 1980, Farmakol. com. MH USSR).
Животных с равным потреблением 15% этанола разделили на 3 группы по 10 крыс в каждой; 1-я группа контрольная (интактные) - получала водопроводную воду (СанПиН - 2.1.4. 559-96.); 2-я группа - в качестве единственного источника жидкости из градуированных поилок получала 15% раствор этанола; 3-я группа - 15% этанол с добавкой олигомерных проантоцианидинов (50 мг/л) из отжима калины. Длительность эксперимента составляла 30 дней, после чего животных умерщвляли декапитацией, быстро извлекали печень и замораживали в жидком азоте. В печени определяли дегидрогеназную и редуктазную активность алкогольдегидрогеназы, а также активность альдегиддегидрогеназы с низкой и высокой Км (константой Михаэлиса) к ацетальдегиду. Результаты эксперимента приведены в таблице 2.Animals with equal consumption of 15% ethanol were divided into 3 groups of 10 rats each; Group 1 control (intact) - received tap water (SanPiN - 2.1.4. 559-96.); 2nd group - as the only source of liquid from graduated drinkers received a 15% solution of ethanol; 3rd group - 15% ethanol with the addition of oligomeric proanthocyanidins (50 mg / l) from squeezed squeeze. The duration of the experiment was 30 days, after which the animals were sacrificed by decapitation, the liver was quickly removed and frozen in liquid nitrogen. In the liver, the dehydrogenase and reductase activity of alcohol dehydrogenase, as well as the activity of aldehyde dehydrogenase with low and high K m (Michaelis constant) to acetaldehyde were determined. The experimental results are shown in table 2.
Как видно из таблицы 2 потребление крысами 15% этилового спирта (2-я группа) в течение 30 дней приводит к увеличению активности АлДГ печени с низкой Км к ацетальдегиду. По нашему мнению данный феномен обусловлен активной наработкой ацетальдегида при окислении этанола и, соответственно, индукцией АлДГ. Одновременно снижается и редуктазная активность АДГ, которая является важной физиологической функцией данного фермента (Gershman, H. "Acetaldehydeethanol exchange in vivo during ethanol oxidation." Arch Biochem Biophys 168(1): 327-330). В группе животных, получавших композицию из этанола с олигомерными проантоцианидинами, уровень активности АлДГ с низкой Км к ацетальдегиду достоверно не отличается от контрольного. При этом редуктазная активность АДГ возрастает до уровня интактных животных. Полученные результаты показывают, что олигомерные проантоцианидины активизируют процесс восстановления ацетальдегида, сохраняя редуктазную активность АДГ, обычно подавляемую этиловым спиртом. Это свойство проантоцианидинов позволяет снизить концентрацию высокотоксичного ацетальдегида в организме, что было замечено выше в эксперименте на добровольцах. В пользу данного вывода указывает и отсутствие достоверно выраженного роста активности АлДГ с низкой Км ввиду поддержания концентрации ацетальдегида на уровне, не вызываемом дополнительную индукцию фермента.As can be seen from table 2, rat consumption of 15% ethyl alcohol (group 2) over 30 days leads to an increase in liver ALDH activity with low K m to acetaldehyde. In our opinion, this phenomenon is due to the active production of acetaldehyde during the oxidation of ethanol and, accordingly, the induction of AlDH. At the same time, the reductase activity of ADH decreases, which is an important physiological function of this enzyme (Gershman, H. "Acetaldehydeethanol exchange in vivo during ethanol oxidation." Arch Biochem Biophys 168 (1): 327-330). In the group of animals treated with the composition of ethanol with oligomeric proanthocyanidins, the level of activity of AlDH with low K m to acetaldehyde does not significantly differ from the control. In this case, the reductase activity of ADH increases to the level of intact animals. The results show that oligomeric proanthocyanidins activate the process of acetaldehyde reduction while maintaining the reductase activity of ADH, which is usually suppressed by ethanol. This property of proanthocyanidins reduces the concentration of highly toxic acetaldehyde in the body, as was noted above in an experiment on volunteers. This conclusion is also supported by the absence of a significantly pronounced increase in the activity of AlDH with low K m due to the maintenance of acetaldehyde concentration at a level not caused by additional induction of the enzyme.
Таким образом:
- олигомерные проантоцианидины активно вовлекается в процесс окисления этанола в организме, воздействуя на ферменты этанолокисляющей системы;
- под действием олигомерных проантоцианидинов наблюдается сохранение редуктазной активности АДГ печени при длительной алкоголизации млекопитающих, в результате чего ацетальдегид восстанавливается до этанола;
- олигомерные проантоцианидины косвенно препятствуют резкому нарастанию ацетальдегида в организме, активируя его восстановление в менее токсичный этанол, что обусловливает образование "плато" этанола между 1-м и 2-м часами эксперимента на добровольцах.Thus:
- oligomeric proanthocyanidins are actively involved in the process of ethanol oxidation in the body, affecting the enzymes of the ethanol oxidizing system;
- under the influence of oligomeric proanthocyanidins, the reductase activity of liver ADH is maintained during prolonged alcoholization of mammals, as a result of which acetaldehyde is reduced to ethanol;
- oligomeric proanthocyanidins indirectly prevent a sharp increase in acetaldehyde in the body, activating its recovery into less toxic ethanol, which causes the formation of a "plateau" of ethanol between the 1st and 2nd hours of the experiment on volunteers.
Полученные данные указывают на участие проантоцианидинов в регуляции метаболизма ацетальдегида, образующегося при окислении этилового спирта в организме, что определяет их антитоксическое действие, выражаемое в предотвращении резкого накопления ацетальдегида в организме, что позволяет их использовать в медицинской и пищевой промышленности с достижением заявляемого результата. The obtained data indicate the participation of proanthocyanidins in the regulation of the metabolism of acetaldehyde formed during the oxidation of ethyl alcohol in the body, which determines their antitoxic effect, expressed in preventing a sharp accumulation of acetaldehyde in the body, which allows them to be used in the medical and food industries to achieve the claimed result.
Claims (3)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2002106966/14A RU2203678C1 (en) | 2002-03-18 | 2002-03-18 | Regulator of acetaldehyde metabolism in body in oxidation of ethyl alcohol, agent and liquor containing thereof |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2002106966/14A RU2203678C1 (en) | 2002-03-18 | 2002-03-18 | Regulator of acetaldehyde metabolism in body in oxidation of ethyl alcohol, agent and liquor containing thereof |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2203678C1 true RU2203678C1 (en) | 2003-05-10 |
| RU2002106966A RU2002106966A (en) | 2003-11-20 |
Family
ID=20255439
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2002106966/14A RU2203678C1 (en) | 2002-03-18 | 2002-03-18 | Regulator of acetaldehyde metabolism in body in oxidation of ethyl alcohol, agent and liquor containing thereof |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2203678C1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EA017501B1 (en) * | 2007-08-01 | 2013-01-30 | Ферлюкс С.А. | Process of preparation of cranberry extract rich in proanthocyanidins |
-
2002
- 2002-03-18 RU RU2002106966/14A patent/RU2203678C1/en not_active IP Right Cessation
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EA017501B1 (en) * | 2007-08-01 | 2013-01-30 | Ферлюкс С.А. | Process of preparation of cranberry extract rich in proanthocyanidins |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Grassi et al. | Flavonoids, vascular function and cardiovascular protection | |
| Prabhu et al. | Role of mangiferin on biochemical alterations and antioxidant status in isoproterenol-induced myocardial infarction in rats | |
| Nizioł-Łukaszewska et al. | Antioxidant activity and cytotoxicity of Jerusalem artichoke tubers and leaves extract on HaCaT and BJ fibroblast cells | |
| Strehl et al. | Biochemical activities of propolis-extracts III. Inhibition of dihydrofolate reductase | |
| US8575368B2 (en) | Proanthocyanidin of cashew apple, composition containing proanthocyanidin, and application thereof | |
| US20090047368A1 (en) | Polymeric polyphenol extracted from fermented tea, therapeutic agent for mitochondrial disease, preventive/therapeutic agent for diabetes mellitus, and food or beverage | |
| Jelenković et al. | Influence of the green tea leaf extract on neurotoxicity of aluminium chloride in rats | |
| US11116747B2 (en) | Compositions comprising proanthocyanidins and oenothein B | |
| Tugcu et al. | Protective effect of a potent antioxidant, pomegranate juice, in the kidney of rats with nephrolithiasis induced by ethylene glycol | |
| KR20180103836A (en) | Special nutritional or therapeutic formulations containing a mixture of grapes and blueberries | |
| TW200940081A (en) | A plant composition | |
| Ćujić et al. | Characterization of dried chokeberry fruit extract and its chronic effects on blood pressure and oxidative stress in spontaneously hypertensive rats | |
| Kobuchi et al. | [51] Assay of inducible form of nitric oxide synthase activity: Effect of flavonoids and plant extracts | |
| Schuldt et al. | Comparative study of radical scavenger activities of crude extract and fractions from Cuphea carthagenensis leaves | |
| Manik et al. | Investigation of in vitro antioxidant, antimicrobial and thrombolytic activity of the exocarp of Spondias pinnata (Anacardiaceae) | |
| CN111892566A (en) | Ampelopsis grossedentata water extract, preparation method thereof and application of water extract as acetylcholinesterase inhibitor | |
| Bentahar et al. | Phenolic content and antioxidant activity of ethanolic extracts from Citrus sinensis L. and Citrus reticulata L. fruits | |
| Ribeiro et al. | Cardiovascular effects induced by northeastern Brazilian red wine: role of nitric oxide and redox sensitive pathways | |
| RU2203678C1 (en) | Regulator of acetaldehyde metabolism in body in oxidation of ethyl alcohol, agent and liquor containing thereof | |
| MXPA04012598A (en) | Sulfur-containing proanthocyanidin oligomer composition and process for producing the same. | |
| Wulansari et al. | Arginase inhibitory and antioxidant activities of Caesalpinia coriaria (Jacq.) Willd. bark extract | |
| US10799550B2 (en) | Oral compositions comprising beta-escin for reducing acetaldehyde toxicity | |
| Damsud et al. | Anti Diabetic Potential of Cashew Nut (Anacardium occidentale) Shoots and Leaves Extracts under Simulated In Vitro Digestion | |
| Lee et al. | Aldose reductase inhibitory activity of quercetin from the stems of Rhododendron mucronulatum for. albiflorum | |
| KR100404719B1 (en) | Composition of dibenzylbutyrolactone lignan derivatives for treatment of neurodegenerative disease |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20080319 |